專利名稱：欖香烯乳注射液及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種抗癌新藥，特別是一種適用于靜脈注射的脂質(zhì)體劑型的欖香烯乳注射液及其制備方法。
欖香烯化學(xué)名1-甲基-1-乙烯基-2，4-二異丙烯基環(huán)己烷，拉丁名ELEMENUM，是從中藥溫莪術(shù)(Curcuma Wenyujin)揮發(fā)油(莪術(shù)油)中分離的抗癌有效部位。欖香烯主要有效成分為β-欖香烯，并含有δ-、γ-欖香烯及少量其它萜類化合物。由于莪術(shù)油制劑治療子宮頸癌的療效，已在臨床中得到驗(yàn)證，所以莪術(shù)油作為抗癌藥已經(jīng)載入一九七七年版的《中華人民共和國藥典》。但是因莪術(shù)油注射劑只能用于局部瘤體給藥方法治療子宮頸癌，療程較長，操作不便，應(yīng)用范圍較窄，無法有效治療各種瘤和進(jìn)行區(qū)域性給藥，同時(shí)也因莪術(shù)油注射劑的穩(wěn)定性較差，故其不利于臨床應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是提供一種欖香烯乳注射液及其制備方法，它抗癌效果確切，毒副作用小，除可局部瘤體給藥，區(qū)域性給藥，還可靜脈注射，故可明顯擴(kuò)大臨床應(yīng)用范圍，其制備工藝簡便，原料來源充足、易得，制成品性能穩(wěn)定，有利于臨床應(yīng)用。
本發(fā)明的目的是這樣實(shí)現(xiàn)的該制劑各組分百分比(g/ml)含量分別為欖香烯0.4-1.5%、精制大豆磷脂1-4.5%、膽固醇0.5-2.25%、余量為磷酸鹽緩沖液。
該制劑的制備方法是先將按量稱取的欖香烯、膽固醇、精制大豆磷脂裝入容器內(nèi)，在75-85℃恒溫水浴上加熱，使其完全混溶成澄明溶液，然后加入占磷酸鹽緩沖液總量3-4%的同溫度的磷酸鹽緩沖液，投入組織搗碎機(jī)內(nèi)進(jìn)行高速攪拌制成初乳后，加入余下的磷酸鹽緩沖液，再轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)或膠體磨內(nèi)反復(fù)乳化2-3次，直至置顯微鏡下檢查粒度合格后，通過垂熔玻璃濾器過濾，灌封于5ml安瓶內(nèi)，于100℃40分鐘滅菌，即得欖香烯乳注射液。
由于本發(fā)明中的欖香烯是從中藥抗癌藥溫莪術(shù)揮發(fā)油(莪術(shù)油)中，采用真空精密分餾法或柱層析法制得的有效抗癌活性成分，其中β-欖香烯約占55%，γ-欖香烯和δ-欖香烯約占30%，還有少量其它萜類化合物，莪術(shù)油中的這些有效成分經(jīng)臨床驗(yàn)證確有明顯的抗癌效果，且毒副作用小，所以欖香烯乳注射液的抗癌效果更佳，它克服了莪術(shù)油劑只能局部瘤體給藥的限制，可供靜脈注射用，全身用藥可增強(qiáng)機(jī)體的免疫功能?？紤]到臨床靜脈用藥的特點(diǎn)，選擇了天然輔料大豆磷脂、膽固醇為復(fù)合乳化劑，使高度疏水性物質(zhì)欖香烯分散于水相中，制成脂質(zhì)體劑型的抗癌新藥-欖香烯乳注射液。
本發(fā)明的制備方法簡便，原輔料易得，制成品由于其在乳化過程中形成特殊的類細(xì)胞膜-脂質(zhì)膜，與癌細(xì)胞有較強(qiáng)的親和力，且能增加藥物對(duì)細(xì)胞的通透性，有利于藥物與癌細(xì)胞的接觸，所以顯著提高藥物在癌細(xì)胞部位的濃度和殺傷癌細(xì)胞的作用。藥物制成脂質(zhì)體后，增加了穩(wěn)定性，降低了毒性和刺激性，減少劑量和減輕變態(tài)反應(yīng)。所用的原料欖香烯是采用常規(guī)的真空精密分餾法或柱層析法，從市售莪術(shù)油中分離出的抗癌有效成分。所用輔料大豆磷脂常用作靜脈乳乳化劑，可使乳劑油滴分散為約1μm，在體內(nèi)能較好地被代謝，并從腎臟排出。加入膽固醇能增強(qiáng)乳劑的穩(wěn)定性，提高藥物的貯存期。大量試驗(yàn)證明，欖香烯選用大豆磷脂與膽固醇作為復(fù)合乳化劑比單純大豆磷脂作乳化劑更優(yōu)越，使形成的乳劑粒度均勻，刺激性小，有利于機(jī)體用藥。磷酸鹽緩沖液的配制更容易。因此，本發(fā)明的制備方法極易推廣應(yīng)用。采用本發(fā)明的藥物可治療子宮頸癌、腦瘤、消化道惡性腫瘤、惡性胸腔積液、惡性腹腔積液和白血病及其它腫瘤。其最大特點(diǎn)是在有效抗腫瘤劑量時(shí)，對(duì)人體正常細(xì)胞無任何損傷，尤其對(duì)造血系統(tǒng)、免疫功能具有保護(hù)作用，在放療、化療或腫瘤本身造成機(jī)體造血及免疫機(jī)能低下時(shí)，該藥物還能起到保護(hù)作用和提高造血及免疫功能之效果，與現(xiàn)有抗癌藥相比，療效確切，毒副作用甚低，治療量長期服用對(duì)血相、心、肝、脾、腎等功能無任何影響，有利于臨床應(yīng)用。
以下結(jié)合實(shí)施方法對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實(shí)施方法一首先采用常規(guī)分離方法，從市售莪術(shù)油中分離欖香烯1、真空精密分餾法取莪術(shù)油1000-1500克，置加熱釜中進(jìn)行真空精密分餾，分餾塔高1.2-1.5米，不銹鋼網(wǎng)卷制的填料，理論塔板數(shù)不少于40，真空度1-3mmHg，控制回流比4∶1，收集90-93℃的餾出物，經(jīng)氣相色譜檢測(cè)達(dá)到藥用標(biāo)準(zhǔn)即可。
2、硅膠柱層析法取莪術(shù)油80-100克，置裝有5000克硅膠制備柱中進(jìn)行柱層析，石油醚洗脫或用醋酸乙酯∶石油醚＝1-5∶95-99來洗脫，流速30-50ml/分，分步收集，氣相色譜檢測(cè)，合并含欖香烯的收集液，回收乙醚得欖香烯。
然后選用精制大豆磷脂(本例選上海油脂一廠產(chǎn)品)，應(yīng)符合藥用磷脂質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn);膽固醇(市售)應(yīng)符合美國藥典(USP21版)標(biāo)準(zhǔn);磷酸鹽緩沖液的制備過程如下取無水磷酸二氫鈉0.6-1份、無水磷酸氫二鈉0.5-0.8份、蒸餾水998-999份，混勻備用。應(yīng)符合《中華人民共和國藥典》九0年版的質(zhì)量標(biāo)準(zhǔn)規(guī)定。磷酸鹽緩沖液優(yōu)先選用以下的配制方法取無水磷酸二氫鈉0.8克、無水磷酸氫二鈉0.628克，蒸餾水加至1000ml即成。最后按量稱取上述原輔料欖香烯5克、精制大豆磷脂15克、膽固醇7.5克，裝入容器內(nèi)，在80℃恒溫水浴上加熱，使其完全混溶成澄明的溶液，加入34ml同溫度的磷酸鹽緩沖液，投入組織搗碎機(jī)內(nèi)進(jìn)行高速攪拌制成初乳后，再加入磷酸鹽緩沖液至1000ml，轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)或膠體磨內(nèi)反復(fù)乳化2-3次，直至置顯微鏡下檢查粒度合格(在20個(gè)視野內(nèi)，最大顆粒不超過15μm)后，通過垂熔玻璃濾器過濾，灌封于5ml安瓶內(nèi)，于100℃40分鐘滅菌，即得欖香烯乳注射液。
實(shí)施方法二所用原輔料的制備同實(shí)施方法一，最后按量稱取欖香烯6克、精制大豆磷脂18克、膽固醇6克，裝入容器內(nèi)，在80℃恒溫水浴上加熱，使其完全混溶成澄明的溶液，加入40ml同溫度的磷酸鹽緩沖液，投入組織搗碎機(jī)內(nèi)進(jìn)行高速攪拌制成初乳后，再加入磷酸鹽緩沖液至1000ml，轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)或膠體磨內(nèi)反復(fù)乳化2-3次，直至置顯微鏡下檢查粒度合格(在20個(gè)視野內(nèi)，最大顆粒不超過15μm)后，通過垂熔玻璃濾器過濾，灌封于5ml安瓶內(nèi)，于100℃40分鐘滅菌，即得欖香烯乳注射液。
實(shí)施方法三所用原輔料的制備同實(shí)施方法一，最后按量稱取欖香烯10克、精制大豆磷脂30克、膽固醇15克，裝入容器內(nèi)，在80℃恒溫水浴上加熱，使其完全混溶成澄明的溶液，加入67ml同溫度的磷酸鹽緩沖液，投入組織搗碎機(jī)內(nèi)進(jìn)行高速攪拌制成初乳后，再加入磷酸鹽緩沖液至1000ml，轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)或膠體磨內(nèi)反復(fù)乳化2-3次，直至置顯微鏡下檢查粒度合格(在20個(gè)視野內(nèi)，最大顆粒不超過15μm)后，通過垂熔玻璃濾器過濾，灌封于5ml安瓶內(nèi)，于100℃40分鐘滅菌，即得欖香烯乳注射液。
欖香烯乳注射液為乳白色均勻乳狀液體，PH4.0-6.5，室溫下一年內(nèi)粒度變化不大，粒度不超過2μm的占90%以上，保存期不低于1年半。每安瓶5ml。靜脈滴注，以5mg/kg劑量溶于250ml-500ml的5%葡萄糖內(nèi)緩慢滴注，也可瘤體局部用藥或與其它抗癌藥物聯(lián)合應(yīng)用。未經(jīng)稀釋不可直接血管內(nèi)注射，不能用生理鹽水或其它含電解質(zhì)鹽類的溶劑稀釋。
毒性試驗(yàn)小鼠由尾部靜脈緩慢注射1.5%欖香烯乳注射液，測(cè)得半數(shù)致死量LD50＝270.07±18.93mg/kg。未中毒現(xiàn)象出現(xiàn)的小鼠，觀察七天飲食正常，尿便無異常，第八天處死活鼠，解剖后肉眼未見心、肝、腎等臟器有明顯改變。
臨床觀察試用臨床29例，其中子宮頸癌27例，陰道癌2例。發(fā)病年令29-71歲，其中以56-65歲居多，為14例，占56.1%。綜合的療效統(tǒng)計(jì)數(shù)字是臨床近期治愈18例(子宮頸癌16例，陰道癌2例)，為62%;顯效3例為10%;有效4例為14%，總有效率為86%。
權(quán)利要求
1.一種欖香烯乳注射液，其特征是各組分百分比(g/ml)含量分別為欖香烯0.4-1.5%、精制大豆磷脂1-4.5%、膽固醇0.5-2.25%、余量為磷酸鹽緩沖液。
2.一種欖香烯乳注射液的制備方法，其特征是將如下百分比(g/ml)含量的組分欖香烯0.4-1.5%、精制大豆磷脂1-4.5%、膽固醇0.5-2.25%、余量為磷酸鹽緩沖液，先將按量稱取的欖香烯、膽固醇、精制大豆磷脂裝入容器內(nèi)，在75-88℃恒溫水浴上加熱，使其完全混溶成澄明的溶液，然后加入占磷酸鹽緩沖液總量3-4%同溫度的磷酸鹽緩沖液，投入組織搗碎機(jī)內(nèi)進(jìn)行高速攪拌制成初乳后，加入余下的磷酸鹽緩沖液，再轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)或膠體磨內(nèi)反復(fù)乳化2-3次，直至置顯微鏡下檢查粒度合格后，通過垂熔玻璃濾器過濾，灌封于5ml安瓶內(nèi)，于100℃40分鐘滅菌，即得欖香烯乳注射液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述欖香烯的制備過程如下取莪術(shù)油1000-1500克，置加熱釜中進(jìn)行真空精密分餾，分餾塔高1.2-1.5米，不銹鋼網(wǎng)卷制的填料，理論塔板數(shù)不少于40，真空度1-3mmHg，控制回流比4∶1，收集90-93℃的餾出物，經(jīng)氣相色譜檢測(cè)達(dá)到藥用標(biāo)準(zhǔn)即可。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述欖香烯的制備過程如下取莪術(shù)油80-100克，置裝有5000克硅膠制備柱中進(jìn)行柱層析，石油醚洗脫或用醋酸乙酯∶石油醚＝1-5∶95-99來洗脫，流速30-50ml/分，分步收集，氣相色譜檢測(cè)，合并含欖香烯的收集液，回收乙醚得欖香烯。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的制備方法，其特征是所述磷酸鹽緩沖液的制備過程如下取無水磷酸二氫鈉0.6-1份、無水磷酸氫二鈉0.5-0.8份、蒸餾水998-999份，混勻備用。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種抗癌新藥欖香烯乳注射液及其制備方法。該藥物含有抗癌藥溫莪術(shù)揮發(fā)油中分離出的欖香烯以及精制大豆磷脂、膽固醇和磷酸鹽緩沖液。將上述原輔料恒溫水浴加熱，投入組織搗碎機(jī)高速攪拌制成初乳，再轉(zhuǎn)入高壓乳勻機(jī)或膠體磨內(nèi)反復(fù)乳化合格后，通過垂熔玻璃濾器過濾，灌裝于安瓿內(nèi)，經(jīng)滅菌消毒即可。它抗癌效果確切，毒副作用小，應(yīng)用范圍廣，其制備工藝簡便，原料來源充足、易得，制成品性能穩(wěn)定，有利于臨床應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61P35/00GK1076613SQ9311009
公開日1993年9月29日 申請(qǐng)日期1993年2月15日 優(yōu)先權(quán)日1993年2月15日
發(fā)明者陳玉仁, 吳秀英, 郭永田, 王春嵐 申請(qǐng)人:大連金港制藥有限公司, 大連市醫(yī)藥科學(xué)研究所