一種堇菜總黃酮的制備新工藝的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明公開一種堇菜總黃酮的制備新工藝，該方法為：將原料清洗后從投料斗投入，提取罐組主機(jī)旋轉(zhuǎn)，將物料從機(jī)組前端向后緩慢推進(jìn)，同時(shí)提取溶劑從機(jī)組末端的進(jìn)液管進(jìn)入提取罐內(nèi)，由罐后端穿過移動(dòng)的物料向前端流動(dòng)，固液兩相物質(zhì)在這種逆向運(yùn)動(dòng)中充分接觸，從而將藥材中有效成分提取出來。藥渣經(jīng)出料傳送器強(qiáng)制推動(dòng)至出渣口而排出，專門的擠汁機(jī)對(duì)藥渣進(jìn)行擠壓，將藥渣中殘留藥液擠出藥材組織，減少藥渣中殘留藥液含量。提取效率更高、提取更完全。本發(fā)明同時(shí)選用連續(xù)萃取罐組萃取并結(jié)合硅膠柱層析法純化，分離效果更佳。可得最高收率為4％，含量為95％以上的總黃酮成品。
【專利說明】一種堇菜總黃酮的制備新工藝
【技術(shù)領(lǐng)域】:
[0001]本發(fā)明屬于天然有機(jī)化學(xué)領(lǐng)域，涉及一種堇菜總黃酮的分離純化工藝，特別是涉及一種利用大孔吸附樹脂耦合硅膠柱層析分離純化堇菜總黃酮的工藝。
【背景技術(shù)】:
[0002]堇菜(學(xué)名:Viola verecunda A.Gray)為堇菜科堇菜屬的植物。生長(zhǎng)于海拔100米至2，200米的地區(qū)，常生于灌叢、田野、山坡草叢、雜木林林緣、濕草地及宅旁。全草供藥用，清熱解毒，涼血消腫。用于疔瘡腫毒，癰疽發(fā)背，丹毒，毒蛇咬傷.堇菜性寒味微苦，有清熱解毒的功效。主治黃疸、痢疾、乳腺炎、目赤腫痛、咽炎；外敷治跌打損傷、癰腫、毒蛇咬傷。
[0003]堇菜所含黃酮甙類及有機(jī)酸對(duì)金色葡萄球菌、豬巴氏桿菌、大腸桿菌、鏈球菌和沙門氏菌都有較強(qiáng)的抑菌作用。所富集微量元素，對(duì)人體內(nèi)多種酶的活性有作用，對(duì)核酸蛋白的合成、免疫過程、細(xì)胞繁殖都有直接或間接的作用，可促進(jìn)上皮細(xì)胞修復(fù)，使細(xì)胞分裂增加，T細(xì)胞增高，活性增加，從而對(duì)生物體的免疫功能起調(diào)節(jié)作用，通過酶系統(tǒng)發(fā)揮對(duì)機(jī)體代謝的調(diào)節(jié)和控制。所含鋅可抗病毒，并能刺激抗毒素的合成，提高對(duì)傳染病的抵抗力，是其:“清熱解毒”、“治疽療毒”的基礎(chǔ)。近年來，人們發(fā)現(xiàn)堇菜中含有大量的黃酮，由于其原料堇菜來源較廣，從中提取總黃酮已取得了可喜進(jìn)展，名稱為“一種天山堇菜總黃酮提取純化工藝”的專利申請(qǐng)中便公開了將堇菜用熱水提取法分離純化總黃酮的制備方法。上述專利文獻(xiàn)中的總黃酮提取工藝主要是熱水提取、硅膠柱層析等步驟制備而成，工藝路線簡(jiǎn)單，但最后的總黃酮純度不高，實(shí)際應(yīng)用效果遠(yuǎn)遠(yuǎn)不如大孔吸附樹脂耦合硅膠柱層析分離純化的效果O

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明目的在于提`供一種堇菜總黃酮的制備新工藝；本發(fā)明目的還在于提供一種方便快捷、原料來源豐富、提取效率高、分離純化效果明顯、提取純度高的利用連續(xù)逆流提取聯(lián)合溶劑萃取富集純化堇菜總黃酮的生產(chǎn)工藝。
[0005]本發(fā)明目的是通過如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0006]一種堇菜總黃酮的制備新工藝，其步驟如下:
[0007]I)將堇菜清洗后加入連續(xù)逆流提取罐用丙酮水溶液回流提?。?br> [0008]2)將經(jīng)I)處理的提取液過濾，得黃酮粗提液:
[0009]3)將所得黃酮粗提液濃縮，得黃酮粗濃縮液；
[0010]4)將所得黃酮粗濃縮液泵入連續(xù)萃取灌組物料罐，萃取溶劑為乙酸乙酯，經(jīng)由萃取塔得黃酮乙酸乙酯萃取液；
[0011]5)將黃酮乙酸乙酯萃取液濃縮，得總黃酮濃縮膏；
[0012]6)將總黃酮濃縮膏拌硅膠，并將拌好的混合物至于硅膠柱上方，經(jīng)乙酸乙酯和石油醚混合液洗脫，得洗脫液；
[0013]7)將洗脫液回收溶劑后濃縮干燥得堇菜總黃酮半成品；[0014]8)將堇菜總黃酮半成品用丙酮水溶液溶解，過濾，回收丙酮，濃縮，放置析出晶體，抽濾得堇菜總黃酮成品。
[0015]所述步驟I)中，堇菜清洗后進(jìn)行丙酮水溶液回流提取。提取溶劑為50%~85%的丙酮水溶液。
[0016]所述步驟I)中，提取的設(shè)備為逆流提取生產(chǎn)線，包括提升機(jī)、進(jìn)料傳送、逆流提取罐組主機(jī)1、掏料器1、擠汁機(jī)1、逆流提取罐組主機(jī)2、掏料器2、擠汁機(jī)2、出料傳送、中間泵、出液泵、暫存罐、換熱器、進(jìn)液閥門等。粉碎過篩后原料由提升機(jī)加料口處勻速加入，提取液自流至?xí)簝?chǔ)罐經(jīng)由出液泵連續(xù)泵出。
[0017]所述步驟I)中，逆流生產(chǎn)線參數(shù)為，提升機(jī)頻率15~30Hz，主機(jī)I頻率18~20Hz，擠汁機(jī)I頻率45~50Hz，主機(jī)2頻率20~22Hz，擠汁機(jī)2頻率40~45Hz，出液泵流量 0.5 ~2T/h，進(jìn)料 100 ~400kg/h。
[0018]所述步驟4)中，萃取步驟由連續(xù)萃取罐組完成，包括溶劑罐、物料罐、重液罐、輕液罐、殘液罐、萃取塔、流量計(jì)、物料泵等。
[0019]所述步驟4)中，連續(xù)萃取罐組參數(shù)為,溶劑泵流量I~3L/min,物料泵流量0.4~lL/min。[0020]所述步驟6)中，硅膠層析步驟采用濕法裝柱，保留液面，將濃縮膏按重量1:1拌活化后硅膠，并將拌好的混合物置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為50~85:15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，洗脫體積為5BV。硅膠活化條件為，110 °C 30min。
[0021]所述步驟8)中，堇菜總黃酮的半成品用9~16倍量50%丙酮水溶液40°C熱溶。濃縮密度為d = 1.03~1.05。
[0022]本發(fā)明選用連續(xù)逆流提取生產(chǎn)線提取，原料經(jīng)粗粉碎后從投料斗投入，提取罐組主機(jī)旋轉(zhuǎn)，將物料從機(jī)組前端向后緩慢推進(jìn)，同時(shí)提取溶劑從機(jī)組末端的進(jìn)液管進(jìn)入提取te內(nèi)，由te后端芽過移動(dòng)的物料向如端流動(dòng)，固液兩相物質(zhì)在這種逆向運(yùn)動(dòng)中充分接觸，從而將藥材中有效成分提取出來。藥渣經(jīng)出料傳送器強(qiáng)制推動(dòng)至出渣口而排出，專門的擠汁機(jī)對(duì)藥渣進(jìn)行擠壓，將藥渣中殘留藥液擠出藥材組織，減少藥渣中殘留藥液含量。提取效率更高、提取更完全。
[0023]本發(fā)明同時(shí)選用連續(xù)萃取罐組萃取并結(jié)合硅膠柱層析法純化，分離效果更佳。
【具體實(shí)施方式】:
[0024]實(shí)施例1:
[0025]稱取堇菜500kg，洗凈后，由提升機(jī)加料口以50kg/h的速度勻速加入，75%丙酮水溶液用管道泵以200kg/h的流量由進(jìn)液管加入，提升機(jī)頻率設(shè)定為20Hz，主機(jī)I頻率設(shè)定為16Hz，擠汁機(jī)I頻率設(shè)定為50Hz，主機(jī)2頻率設(shè)定為22Hz，擠汁機(jī)2頻率設(shè)定為45Hz，得堇菜總黃酮粗提液2T ;堇菜總黃酮粗提液自流至?xí)簝?chǔ)罐經(jīng)由出液泵連續(xù)泵至濃縮罐濃縮，得堇菜總黃酮粗濃縮液200L ;調(diào)節(jié)物料泵閥門，使堇菜總黃酮粗濃縮液以lL/min進(jìn)入萃取塔，調(diào)劑溶劑泵閥門，使乙酸乙酯以3L/min進(jìn)入萃取塔，得堇菜總黃酮乙酸乙酯萃取液600L ;濃縮得堇菜總黃酮濃縮膏18kg ;堇菜總黃酮濃縮膏拌18kg活化硅膠，置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為85:15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，得洗脫液90kg ;洗脫液回收溶劑后濃縮干燥得堇菜總黃酮半成品45kg ；堇菜總黃酮半成品用450L50%丙酮水溶液40°C熱溶，過濾，回收乙醇，濃縮至d= 1.05，放置析出晶體，抽濾得堇菜總黃酮成品20kg，含量98.5%。
[0026]實(shí)施例2:
[0027]稱取堇菜1.4T，洗凈后，由提升機(jī)加料口以200kg/h的速度勻速加入，75%丙酮水溶液用管道泵以600kg/h的流量由進(jìn)液管加入，提升機(jī)頻率設(shè)定為25Hz，主機(jī)I頻率設(shè)定為18Hz，擠汁機(jī)I頻率設(shè)定為45Hz，主機(jī)2頻率設(shè)定為20Hz，擠汁機(jī)2頻率設(shè)定為40Hz，得堇菜總黃酮粗提液4.2T ;堇菜總黃酮粗提液自流至?xí)簝?chǔ)罐經(jīng)由出液泵連續(xù)泵至濃縮罐濃縮，得堇菜總黃酮粗濃縮液2T ;調(diào)節(jié)物料泵閥門，使堇菜總黃酮粗濃縮液以0.5L/min進(jìn)入萃取塔，調(diào)劑溶劑泵閥門，使乙酸乙酯以2L/min進(jìn)入萃取塔，得堇菜總黃酮乙酸乙酯萃取液6T ；濃縮得堇菜總黃酮濃縮膏600kg ;堇菜總黃酮濃縮膏拌600kg活化硅膠，置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為70:15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘
0.lml/g硅膠，得洗脫液3T ;洗脫液回收溶劑后濃縮干燥得堇菜總黃酮半成品145kg ;堇菜總黃酮半成品用2.9T50%丙酮水溶液40°C熱溶，過濾，回收乙醇，濃縮至d = 1.05，放置析出晶體，抽濾得堇菜總黃酮成品52kg，含量96.5%。
[0028]實(shí)施例3:
[0029]稱取堇菜800kg，洗凈后，由提升機(jī)加料口以80kg/h的速度勻速加入，80%丙酮水溶液用管道泵以250kg/h的流量由進(jìn)液管加入，提升機(jī)頻率設(shè)定為22Hz，主機(jī)I頻率設(shè)定為18Hz，擠汁機(jī)I頻率設(shè)定為50Hz，主機(jī)2頻率設(shè)定為22Hz，擠汁機(jī)2頻率設(shè)定為45Hz，得堇菜總黃酮粗提液2.5T ;堇菜 總黃酮粗提液自流至?xí)簝?chǔ)罐經(jīng)由出液泵連續(xù)泵至濃縮罐濃縮，得堇菜總黃酮粗濃縮液250L;調(diào)節(jié)物料泵閥門，使堇菜總黃酮粗濃縮液以0.8L/min進(jìn)入萃取塔，濃縮得堇菜總黃酮濃縮膏27kg ;堇菜總黃酮濃縮膏拌27kg活化硅膠，置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為65:15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，得洗脫液135kg ;洗脫液回收溶劑后濃縮干燥得堇菜總黃酮半成品19kg ；堇菜總黃酮半成品用570L50%丙酮水溶液40°C熱溶，過濾，回收乙醇，濃縮至d = 1.03，放置析出晶體，抽濾得堇菜總黃酮成品12kg，含量97.5%。
【權(quán)利要求】
1.一種堇菜總黃酮的制備新工藝，其特征在于該方法包括如下步驟: 1)將堇菜清洗后加入連續(xù)逆流提取罐用丙酮水溶液回流提?。? 2)將經(jīng)I)處理的提取液過濾，得黃酮粗提液: 3)將所得黃酮粗提液濃縮，得黃酮粗濃縮液； 4)將所得黃酮粗濃縮液泵入連續(xù)萃取灌組物料罐，萃取溶劑為乙酸乙酯，經(jīng)由萃取塔得黃酮乙酸乙酯萃取液； 5)將黃酮乙酸乙酯萃取液濃縮，得總黃酮濃縮膏； 6)將總黃酮濃縮膏拌硅膠，并將拌好的混合物至于硅膠柱上方，經(jīng)乙酸乙酯和石油醚混合液洗脫，得洗脫液； 7)將洗脫液回收溶劑后濃縮干燥得堇菜總黃酮半成品； 8)將堇菜總黃酮半成品用丙酮水溶液溶解，過濾，回收丙酮，濃縮，放置析出晶體，抽濾得堇菜總黃酮成品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堇菜總黃酮的制備新工藝其特征在于所述的步驟I)中，堇菜清洗后進(jìn)行丙酮水溶液回流提取。提取溶劑為50%~85%的丙酮水溶液。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堇菜總黃酮的制備新工藝其特征在于所述的步驟I)中，提取的設(shè)備為逆流提取生產(chǎn)線，包括提升機(jī)、進(jìn)料傳送、逆流提取罐組主機(jī)1、掏料器1、擠汁機(jī)1、逆流提取罐組主機(jī)2、掏料器2、擠汁機(jī)2、出料傳送、中間泵、出液泵、暫存罐、換熱器、進(jìn)液閥門等。粉碎過篩后原料由提升機(jī)加料口處勻速加入，提取液自流至?xí)簝?chǔ)罐經(jīng)由出液泵連續(xù)泵出。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堇菜總黃酮的制備新工藝其特征在于所述的步驟I)中，逆流生產(chǎn)線參數(shù)為，提升機(jī)頻率15~30Hz，主機(jī)I頻率18~20Hz，擠汁機(jī)I頻率45~50Hz，主機(jī)2頻率20~22Hz，擠汁機(jī)2頻率40~45Hz，出液泵流量0.5~2T/h，進(jìn)料100~400kg/h。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堇菜總黃酮的制備新工藝其特征在于所述的步驟4)中，萃取步驟由連續(xù)卒取te組完成，包括溶劑te、物料te、重液te、輕液te、殘液te、卒取塔、流量計(jì)、物料泵等。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堇菜總黃酮的制備新工藝其特征在于所述的步驟4)中，連續(xù)萃取罐組參數(shù)為，溶劑泵流量I~3L/min，物料泵流量0.4~lL/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堇菜總黃酮的制備新工藝其特征在于所述的步驟6)中，硅膠層析步驟采用濕法裝柱，保留液面，將濃縮膏按重量1:1拌活化后硅膠，并將拌好的混合物置于硅膠柱上方，洗脫液為乙酸乙酯:石油醚體積比為50~85:15的乙酸乙酯與石油醚混合物，洗脫流速每分鐘0.lml/g硅膠，洗脫體積為5BV。硅膠活化條件為，IlO0C 30min。
8.根據(jù)權(quán)利要求1所述的堇菜總黃酮的制備新工藝其特征在于所述的步驟8)中，堇菜總黃酮的半成品用9~16倍量50%丙酮水溶液40°C熱溶。濃縮密度為d = 1.03~1.05。
【文檔編號(hào)】A61K36/86GK103690693SQ201310694945
【公開日】2014年4月2日 申請(qǐng)日期:2013年12月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月13日
【發(fā)明者】姚德坤, 蘇學(xué)輝, 姚德利, 張亞紅, 姚航, 黃運(yùn)生, 吳海龍, 孟祥敏 申請(qǐng)人:大興安嶺嘉迪歐營(yíng)養(yǎng)原料有限公司