專利名稱：一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法。
背景技術(shù)：
黃酮類化合物是自然界廣泛存在的一類天然產(chǎn)物，其基本母核為2—苯基色原酮類，指兩個(gè)具有酚羥基的苯環(huán)(A、B環(huán))通過(guò)中央3個(gè)碳原子相互連接而成的一系列化合物，按照中央3碳鏈的差異，可分為黃酮類、黃酮醇類、二氫黃酮類、二氫黃酮醇類、花色素類、查耳酮類、二氫查耳酮類、異黃酮類、二氫異黃酮類等等，實(shí)驗(yàn)證明類黃酮化合物對(duì)動(dòng)物及人體有以下作用①抗氧化、清除自由基作用；②對(duì)維生素C有增效作用；③通過(guò)保護(hù)細(xì)胞免疫、免受致癌物的損害、抑制腫瘤細(xì)胞增殖及抗自由基作用而具抗癌作用；④能與金屬螯合，保護(hù)酶和細(xì)胞膜的活性；⑤能降低血脂和血膽固醇；⑥異黃酮有類雌激素的作用；⑦保肝作用。蜂膠、銀杏、沙棘等黃酮在市場(chǎng)上已獲得成功。
苦參富含生物堿類和黃酮類成份，目前的研究主要集中在苦參生物堿方面，而從苦參根分離的黃酮類化合物已有32種，多數(shù)為二氫黃酮和二氫黃酮醇類，少數(shù)為黃酮類、黃酮醇類、異黃酮類、查耳酮類及多環(huán)系黃酮類，包括苦參醇A、B、D、E、F、J等等。苦參黃酮A環(huán)上有異戊烯取代基存在，并且大多數(shù)黃酮在A環(huán)的C8位上取代基以lavandulyl的分枝異戊烯基側(cè)鏈形式存在，黃酮的異戊烯基化增加了黃酮化合物的親脂性，使其在生物體內(nèi)更容易透過(guò)細(xì)胞膜到達(dá)作用目標(biāo)，因而異戊烯基黃酮具有較強(qiáng)的抗微生物活性、抗炎活性、抗癌活性以及酪氨酸酶抑制活性(天然產(chǎn)物研究與開(kāi)發(fā)，2004，16(2)172)?？鄥ⅫS酮類提取物對(duì)Alloxan糖尿病模型大鼠有明顯降糖作用，而生物堿無(wú)降糖作用(海峽藥學(xué)雜志，1998，10(1)9)，有關(guān)苦參生物堿提取分離的報(bào)導(dǎo)很多，高紅寧等(廣東藥學(xué)院學(xué)報(bào)，2003，19(4)334)通過(guò)微濾、大孔樹(shù)脂、醇沉精制氧化苦參堿與苦參總黃酮，但未實(shí)現(xiàn)生物堿與黃酮的分離；專利(200410030937.X)提供了一種苦參總黃酮的提取方法，但是，該方法中沒(méi)有涉及苦參生物堿類與黃酮類有效成分的分離的內(nèi)容和步驟，所得到的產(chǎn)品應(yīng)該是苦參生物堿和苦參黃酮類的混合物產(chǎn)品。有關(guān)苦參異戊烯基黃酮類的提取分離鮮見(jiàn)報(bào)導(dǎo)。
黃酮鹽類產(chǎn)品具有和黃酮的生物活性，化學(xué)性質(zhì)相對(duì)穩(wěn)定，可以和堿性藥物配伍，易于保存等優(yōu)點(diǎn)，有關(guān)其產(chǎn)品或生產(chǎn)工藝，尚未見(jiàn)報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法。
本發(fā)明是由于苦參生物堿在植物體內(nèi)和各種有機(jī)酸結(jié)合形成鹽，用酸水將生物堿完全提取出來(lái)，而黃酮類活性物質(zhì)是不溶于酸水，保留在植物體內(nèi)?？鄥ⅫS酮類物質(zhì)易溶于醇、酯、酮以及堿水等溶劑，可以用醇、酯、酮以及堿水等溶劑進(jìn)行提取得到含量較高的苦參總黃酮及黃酮鹽類產(chǎn)品。
本發(fā)明的具體操作步驟如下(1)、以粒度為10～120目的苦參為原料與酸水以1∶5～10重量比例混合，在10～40℃，完全提取苦參生物堿，過(guò)濾，濾液用來(lái)提純制備苦參生物堿，濾渣抽干；(2)、將(1)所得濾渣與溶劑按1g∶4～12ml的比例混合，提取，過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理得到80％的苦參總黃酮或黃酮鹽類產(chǎn)品。
如(1)所述酸水可為任何酸性水溶液，優(yōu)選鹽酸、硫酸、醋酸或硝酸水溶液，酸水的pH值以2～6為佳。
如(1)所述酸水提取生物堿可以通過(guò)浸泡、滲漉、超聲提取等任何可將生物堿完全提取出來(lái)的方法。
如(2)所述溶劑為任何可以溶解黃酮溶劑或者溶液，優(yōu)選低級(jí)醇、低級(jí)酯、低級(jí)酮、醚類以及上述任何溶劑的混合溶液或者堿的水溶液溶液。優(yōu)選甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮、乙醚以及上述任何溶劑的混合溶液。堿的水溶液優(yōu)選氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫納等的任何濃度水溶液。堿的水溶液優(yōu)選pH值為9～14的溶液，優(yōu)選pH值為9～11的溶液。
如(2)所述濾液經(jīng)過(guò)的處理有二種方法方法一如果提取苦參黃酮用的溶劑為堿的水溶液，則可以將提取液加酸至pH值為中性，然后固液分離，固體干燥，即得苦參總黃酮固體粉末；所述濾液經(jīng)過(guò)的處理也可以是直接將濾液干燥得到苦參總黃酮的鹽作為最終產(chǎn)品。
所述的酸可以是任何溶于水的有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸，優(yōu)選鹽酸、硫酸、硝酸或醋酸等。
所述的固液分離可以是任何一種將固液兩相分離的技術(shù)，優(yōu)選過(guò)濾或離心沉淀。
所述的干燥優(yōu)選噴霧干燥、減壓蒸餾、真空冷凍干燥、閃蒸或自然蒸發(fā)晾干。
方法二如果提取液為除堿的水溶液以外的任何上述溶液或溶劑，可以將溶劑回收，然后干燥得到苦參總黃酮固體粉末。
所述的干燥噴霧干燥、真空冷凍干燥、閃蒸或自然蒸發(fā)。
本發(fā)明提取制備的苦參總黃酮可以制作成各種形式的產(chǎn)品，如粉末、各種苦參黃酮溶液以及苦參總黃酮的鹽類產(chǎn)品。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)如下
1、苦參黃酮類成分大多數(shù)A環(huán)的C8位上都有以lavandulyl的分枝異戊烯基側(cè)鏈形式存在的取代基，這是苦參黃酮類所獨(dú)有的，是區(qū)別于提取黃酮類的重要特征。
2、所述lavandulyl分枝異戊烯基側(cè)鏈增加黃酮的親脂性，使其在生物體內(nèi)更容易透過(guò)細(xì)胞膜到達(dá)作用目標(biāo)，因而苦參總黃酮較其他黃酮具有更強(qiáng)的抗微生物活性、抗炎活性、抗癌活性以及酪氨酸酶抑制活性。
3、首次實(shí)現(xiàn)分別提取苦參生物堿和苦參黃酮，首次得到不含苦參生物堿的苦參總黃酮類及其鹽類產(chǎn)品。
4、采用提取苦參堿后的苦參殘?jiān)鼮樵仙a(chǎn)苦參總黃酮及其鹽類產(chǎn)品，原料成本低，工藝簡(jiǎn)單，適合工業(yè)生產(chǎn)。
5、得到的苦參總黃酮及其鹽類產(chǎn)品含量較高，總黃酮產(chǎn)品是黃色固體粉末，總黃酮鹽類產(chǎn)品為紅棕色固體結(jié)晶。
具體實(shí)施例方式
實(shí)施例1〔1〕10～40目的苦參粉末100g加入pH＝3的鹽酸水溶液600ml，10℃超聲提取30min，靜置，過(guò)濾，濾渣用上述鹽酸溶液洗滌至無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入500ml乙醇超聲常溫提取，30min，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)黃色或者色澤很淺；合并提取液，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)，得到黃色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮80％(UV)。
實(shí)施例2〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝5的醋酸水溶液500ml，20℃浸泡6小時(shí)，靜置，過(guò)濾，濾渣用上述鹽酸溶液洗滌至無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入400ml甲醇浸泡6小時(shí)，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)黃色或者色澤很淺；合并提取液，自然蒸發(fā)晾干，得到黃色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮82％(UV)。
實(shí)施例3〔1〕80～120目的苦參粉末100g，用pH＝4的硫酸水溶液30℃滲漉提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入500ml乙酸乙酯回流2小時(shí)，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)黃色或者色澤很淺；合并提取液，真空冷凍干燥，得到黃色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮89％(UV)。
實(shí)施例4〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝6的硝酸水溶液1000ml，40℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入500ml乙酸乙酯和乙醇的混合液(1∶1，V/V)浸泡6小時(shí)，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)黃色或者色澤很淺；合并提取液，閃蒸，得到黃色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮88％(UV)。
實(shí)施例5〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝2的鹽酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入500ml丙酮和乙醇的混合液(1∶1，V/V)浸泡6小時(shí)，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)黃色或者色澤很淺；合并提取液，減壓蒸溜，得到黃色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮85％(UV)。
實(shí)施例6〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝3的鹽酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入500ml丙酮和乙醚的混合液(1∶1，V/V)回流2小時(shí)，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)黃色或者色澤很淺；合并提取液，自然蒸發(fā)晾干，得到黃色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮86％。
實(shí)施例7〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝3的鹽酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入500ml乙酸甲酯和甲醇的混合液(3∶1，V/V)超聲提取，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)黃色或者色澤很淺；合并提取液，真空冷凍干燥，得到黃色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮84％。
實(shí)施例8〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝3的醋酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅加入氫氧化鈉水溶液(pH＝9)超聲提取，過(guò)濾，濾餅重復(fù)提取、過(guò)濾至提取液無(wú)色或者色澤很淺；合并提取液，噴霧干燥，得到紅棕色粉末產(chǎn)品。
實(shí)施例9〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝3的鹽酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅用碳酸氫納水溶液(pH＝10)滲漉提取液無(wú)色或者色澤很淺；合并提取液，自然蒸發(fā)晾干，得到紅棕色粉末產(chǎn)品。
實(shí)施例10〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝3的鹽酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅用碳酸氫納水溶液(pH＝10)滲漉提取液無(wú)色或者色澤很淺；合并提取液，加入鹽酸中和至中性，過(guò)濾，濾餅自然蒸發(fā)晾干，得到黃色色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮81％。
實(shí)施例11〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝3的鹽酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅用氫氧化鉀水溶液(pH＝12)滲漉提取液無(wú)色或者色澤很淺；合并提取液，加入醋酸中和至中性，過(guò)濾，濾餅真空冷凍干燥，得到黃色色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮82％。
實(shí)施例12〔1〕40～80目的苦參粉末100g加入pH＝3的鹽酸水溶液400ml，30℃超聲提取至提取液無(wú)生物堿；過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理，可獲得各種苦參生物堿產(chǎn)品。
〔2〕將(1)中過(guò)濾得到的濾餅用碳酸鈉水溶液(pH＝10)滲漉提取液無(wú)色或者色澤很淺；合并提取液，加入醋酸中和至中性，過(guò)濾，濾餅真空冷凍干燥，得到黃色色粉末產(chǎn)品，經(jīng)檢測(cè)含總黃酮80％。
權(quán)利要求
1.一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于包括如下步驟(1)以粒度為10～120目的苦參為原料與酸水以1∶5～10重量比例混合，在10～40℃，完全提取苦參生物堿，過(guò)濾，濾液用來(lái)提純制備苦參生物堿，濾渣抽干；(2)將(1)所得濾渣與溶劑按1g∶4～12ml的比例混合，提取，過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理得到苦參總黃酮或黃酮鹽類產(chǎn)品。
2.如權(quán)利要求1所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于如(1)所述酸水為酸性水溶液。
3.如權(quán)利要求2所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的酸性水溶液為鹽酸、硫酸、醋酸或硝酸水溶液，酸水的pH值為2～6。
4.如權(quán)利要求1所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于如(2)所述溶劑為低級(jí)醇、低級(jí)酯、低級(jí)酮、醚類以及其混合溶液或堿的水溶液。
5.如權(quán)利要求4所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的溶劑為甲醇、乙醇、乙酸乙酯、乙酸甲酯、丙酮、乙醚或者其混合溶液。
6.如權(quán)利要求4所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的堿的水溶液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉或碳酸氫納的水溶液，pH值為9～14。
7.如權(quán)利要求4所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的pH值為9～11。
8.如權(quán)利要求1所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于如(2)所述濾液經(jīng)過(guò)的處理為如果提取苦參黃酮用的溶劑為堿的水溶液，將提取液加酸至pH值為中性，然后固液分離，固體干燥，即得苦參總黃酮固體粉末。
9.如權(quán)利要求8所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的酸是任何溶于水的有機(jī)酸或無(wú)機(jī)酸。
10.如權(quán)利要求9所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的酸為鹽酸、硫酸、硝酸或醋酸。
11.如權(quán)利要求8所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的固液分離是過(guò)濾或離心沉淀。
12.如權(quán)利要求8所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的干燥優(yōu)選噴霧干燥、減壓蒸餾、真空冷凍干燥、閃蒸或自然蒸發(fā)晾干。
13.如權(quán)利要求1所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于如(2)所述濾液經(jīng)過(guò)的處理為如果提取苦參黃酮用的溶劑為堿的水溶液，直接將濾液干燥得到苦參總黃酮的鹽。
14.如權(quán)利要求1所述的一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法，其特征在于所述的如(2)所述濾液經(jīng)過(guò)的處理為如果提取液為低級(jí)醇、低級(jí)酯、低級(jí)酮或醚類時(shí)，將溶劑回收，然后干燥得到苦參總黃酮固體粉末。
全文摘要
一種生產(chǎn)苦參總黃酮及黃酮鹽類的方法是以粒度為10～120目的苦參為原料與酸水以1∶5～10重量比例混合，在10～40℃，完全提取苦參生物堿，過(guò)濾，濾液用來(lái)提純制備苦參生物堿，濾渣抽干；所得濾渣與溶劑按1g∶4～12ml的比例混合，提取，過(guò)濾，濾液經(jīng)過(guò)處理得到苦參總黃酮或黃酮鹽類產(chǎn)品。本發(fā)明具有實(shí)現(xiàn)分別提取苦參生物堿和苦參黃酮，原料成本低，工藝簡(jiǎn)單，適合工業(yè)生產(chǎn)的優(yōu)點(diǎn)。
文檔編號(hào)C07D311/62GK1793136SQ200510048249
公開(kāi)日2006年6月28日 申請(qǐng)日期2005年12月27日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月27日
發(fā)明者侯相林, 鄧天昇, 劉鵬飛 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院山西煤炭化學(xué)研究所