專利名稱：廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及抗腫瘤藥物，特別涉及一種廣譜型的抗腫瘤復(fù)合疫苗。
背景技術(shù)：
癌癥己成為人類的"第一殺手"。據(jù)美國紐約時報2009年報告，從1996 年到2005年，按人口和年齡矯正，心腦疾病死亡數(shù)下降60%以上，而癌癥死 亡數(shù)僅降低5%。
自1971年以來，全世界投入癌癥研究的總經(jīng)費，扣除通貨膨脹因素，大 約是2000億美元；癌癥研究領(lǐng)域的研究論文已經(jīng)達到156萬篇，但腫瘤死亡 率未明顯降低；追求知識本身成了終極目標(biāo)，對PubMed在線數(shù)據(jù)庫的檢索表 明，有150855篇論文是以老鼠為實驗對象，但真正對癌癥治療有價值的論文 極少。
癌癥治療的主要困難是無法解決癌癥轉(zhuǎn)移?；熓悄壳肮J的主要的治療 癌癥轉(zhuǎn)移的手段。但真正對化療有效的癌癥只有7%，另有15%的患者應(yīng)用化 療后，生存時間可能較預(yù)期的不用化療的生存期為長，但不是治愈，甚至不是 恢復(fù)生活質(zhì)量。有報導(dǎo)說，接受化療的人發(fā)生繼發(fā)性腫瘤的可能性增加18倍 (New England J Medicine 1996)。還有一份調(diào)查顯示，75%的腫瘤科醫(yī)生表示， 如果自己得癌癥，將不會接受化療(Ulrich Abel德國)。
新的化療藥，包括分子靶向藥物，沒有解決腫瘤轉(zhuǎn)移。兩位意大利藥理學(xué) 家對1995 2000年在歐洲上市的12種新藥，同相應(yīng)的批準(zhǔn)療法進行比較，沒 有發(fā)現(xiàn)這些新藥對患者生存率有任何實質(zhì)性優(yōu)越之處，生活質(zhì)量也沒有改善， 安全性也沒有改進，而這種藥物的價格卻大幅度上升，其中一種新藥比"舊藥" 貴350倍(Garattini, S and Bertele'V. BMJ 2002; 325:269 271)。
癌癥免疫愈來愈受到重視。美國著名癌癥專家Kattlove說"免疫療法可 能是唯一致癌于死地的方法。""令人振奮的是，我們看到(免疫療法)將成為抗癌之戰(zhàn)新武器。"研究低毒、廉價、高效和廣譜的癌癥疫苗是人們夢寐以 求的理想，是當(dāng)前全世界的研究熱點。
早在幾千年以前，人們就發(fā)現(xiàn)細菌、真菌、病毒和原蟲感染后腫瘤可退縮，
這種現(xiàn)象實際上就是原始的腫瘤免疫治療。紐約紀(jì)念醫(yī)院外科醫(yī)生Willian Coley在100多年前對這種天然現(xiàn)象進行研究，開發(fā)了一種殺癌性細菌疫苗。 他觀察到，人工誘發(fā)的發(fā)熱對腫瘤退縮有決定性作用。Coley用2種細菌即化 膿性鏈球菌和沙雷靈桿菌制成疫苗。實驗研究發(fā)現(xiàn)后一種細菌能增加前一種細 菌的毒性。這種疫苗引起感染癥狀如炎癥、發(fā)熱和寒顫，但無急性感染發(fā)生。 這就是所謂"Coley毒素"?？偨Y(jié)896例患者的資料，他們的癌癥診斷均得到 病理證實，不能手術(shù)治療。接受Coley疫苗治療后，5年生存率34% 73%， 類似于未手術(shù)的肉瘤患者疫苗治療后的成績(13% 79%)。
有一份回顧性研究，使用癌癥流行病學(xué)終端結(jié)果的資料，評價了Coley方 案治療的患者的10年生存率，并與現(xiàn)代常規(guī)治療比較。這一研究雖然有標(biāo)本 大小和分期的限制，但仍然發(fā)現(xiàn)，盡管花費數(shù)十億美元發(fā)展現(xiàn)代癌癥治療，但 接受現(xiàn)代常規(guī)治療的病人并不比100年以前就開始應(yīng)用的Coley治療的病人有 更好的結(jié)局。如果我們花費同樣多的努力和基金研究Coley創(chuàng)立的治療，那么 今天癌癥治療會是一個什么樣的局面？
癌癥免疫治療的最早實例可以追溯到幾千年以前。EbersPapurus (公元前 1550年)曾記載，偉大的埃及醫(yī)生Imhotep(公元前2600年)即用切開腫瘤(腫 脹處)，敷上泥罨劑(poultice)，使之感染的方法進行治療。17和18世紀(jì)， 簡陋的癌癥免疫治療曾被廣泛應(yīng)用并得到接受。例如，Tanchou在1844年曾發(fā) 表一篇癌癥專著，對怎樣實施免疫治療進行了闡述"已知(有些)淋巴結(jié)和 原發(fā)性新生物在合并感染過程中，常消失，不再復(fù)發(fā)?！凑者@種設(shè)想，大 量的觀察應(yīng)該確立一種方案(化膿指數(shù))，即手術(shù)后讓身體不同部位甚至傷口 處保留感染。"作者列舉了其他醫(yī)生的許多病例，成功地確立了這種治療方案。
在18 19世紀(jì)，其他治療策略尚有應(yīng)用腐敗性(細菌)敷料敷于潰瘍性 腫瘤上，使之感染，或誘發(fā)感染如丹毒、壞疽和梅毒。但在Coley發(fā)明用死菌 疫苗治療之前，這種用活菌誘發(fā)感染仍是一冒險的事。
許多學(xué)者研究了 Coley混合細菌疫苗引起腫瘤退縮的機制，希冀找出Coley疫苗的"活性成分"，探求這種疫苗導(dǎo)致腫瘤退縮的反應(yīng)中宿主產(chǎn)生的因子。 細胞因子，如腫瘤壞死因子、白介素和干擾素被認為是起作用的可能因子。但 真正的機制不是想象得那樣一個或幾個因子起作用。任何對致病因子的免疫反 應(yīng)總是復(fù)雜的，有大量細胞因子參與， 一種或一組激發(fā)另一種另一組，同時有
多種細胞反應(yīng)。這種免疫鎖鏈可由使用粗制Coley疫苗激發(fā)，但難以由單一的 細胞因子復(fù)制。BCG是治療表淺性膀胱癌的有效制劑，是目前唯一常規(guī)使用的 抗腫瘤細菌疫苗。BCG直接應(yīng)用于腫瘤部位，并需反復(fù)應(yīng)用。在膀胱內(nèi)注射這 種疫苗后，許多細胞因子從尿中可測出，例如IL-1、 -2、 -6、 -8、 -10、 -12、 -18， 以及干擾素-C誘導(dǎo)蛋白-lO、巨噬細胞刺激因子和TNF-a[115 121]。治療過程 中許多細胞因子上調(diào)，另一些則下調(diào)。
實際上，我們所知的這些免疫調(diào)節(jié)因子僅是感染和腫瘤退縮過程中復(fù)雜免 疫反應(yīng)的一小部分。
BCG的作用在周部，表現(xiàn)為局部炎癥和免疫反應(yīng)。為了消除侵襲性癌腫， 必須引發(fā)全身性反應(yīng)，但因為BCG是活菌疫苗，顯然這種策略有一定風(fēng)險。 正因為此原因，BCG目前只限用于表淺性膀胱癌。
業(yè)已證實，許多微生物，包括細菌、真菌、病毒和原蟲，均有引起腫瘤退 縮的作用。由此推測，細胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)(I型)而不是體液免疫反應(yīng)(II 型)是引起癌腫退縮的關(guān)鍵。但是許多自發(fā)性退縮的病例以及實驗性動物感染 (如曲霉菌、瘧疾、旋毛蟲或錐蟲)后腫瘤抑制，被激發(fā)的是體液免疫反應(yīng)， 而且，注射Coley疫苗后幾個小時內(nèi)腫瘤就可退縮，但原發(fā)性適應(yīng)性反應(yīng)卻在 幾天到1周才出現(xiàn)，說明這種免疫反應(yīng)不是細菌感染后腫瘤退縮的原發(fā)機制。 Coley的經(jīng)驗和對一些自發(fā)性腫瘤退縮病例的探索性研究均提示感染刺激的 腫瘤退縮是"非特異性"天生免疫反應(yīng)的結(jié)果。
某些病例感染刺激后腫瘤部分退縮， 一旦過了感染的急性發(fā)熱期，則殘存 腫瘤會再長，如果感染再發(fā)生，或再誘發(fā)感染，則腫瘤可如同以前那樣再退縮。 Coley指出，疫苗應(yīng)每天注射，只要病人能耐受，停用疫苗即使幾天，有時也 會引起腫瘤再長。這又一次提示，特異性適應(yīng)性抗腫瘤免疫不是這種疫苗的原 發(fā)機制。
天生性免疫反應(yīng)的重要介導(dǎo)因子是Toll樣受體家族，主要表達于巨噬細胞和樹突狀細胞。這些受體影響著天生性防衛(wèi)反應(yīng)和調(diào)節(jié)修復(fù)反應(yīng)。有人發(fā)現(xiàn)，
Coley疫苗的抗原復(fù)合物是一種重要因子，能啟動許多對防衛(wèi)反應(yīng)有關(guān)的Toll 樣受體。多種微生物均能引起腫瘤退縮的事實，說明天生性免疫反應(yīng)存在一種 一致的特性，導(dǎo)致腫瘤退縮。
免疫反應(yīng)具有重要的雙重作用，以維持宿主的完整性。免疫系統(tǒng)主要在防 衛(wèi)外來病原體中被識別，發(fā)揮作用；但在組織修復(fù)過程中同樣起重要作用。在 傷口愈合過程中，白細胞活化，參與基質(zhì)降解，生長因子產(chǎn)生，新的血管和淋 巴管生成。如果傷口是無菌的，細胞毒性防衛(wèi)功能便不會被激活。但是，腫瘤 是部分"自我的"，部分"外來的"，能從腫瘤內(nèi)白細胞激發(fā)一種修復(fù)性生長 促進性反應(yīng)。
免疫系統(tǒng)怎樣促進或抑制腫瘤生長？如同傷口一樣，不斷擴張的腫瘤釋放 化學(xué)因子和其他細胞因子，這些因子吸引白細胞，同時釋放信號，增加氧和營 養(yǎng)物水平，由此一種異常的和有害的修復(fù)反應(yīng)產(chǎn)生，從而促進腫瘤生長。白細 胞，尤其是巨噬細胞，存在于許多快速生長的腫瘤內(nèi)。巨噬細胞是多功能的適 應(yīng)性很強的吞噬細胞，在酸性傷口環(huán)境中生命長。而且，巨噬細胞導(dǎo)致所有免 疫細胞的生成、動員和活化。有證據(jù)顯示，單核/巨噬細胞能分化為內(nèi)皮前體細 胞和成纖維細胞。有趣的是，來自腫瘤的成纖維細胞在體外能刺激腫瘤細胞， 但正常組織內(nèi)成纖維細胞沒有這種作用。因此，巨噬細胞在腫瘤形成中可能起 關(guān)鍵性作用。
目前認為，巨噬細胞分泌許多因子，其中某些刺激血管和淋巴管生長(如 血小板衍生生長因子、血管內(nèi)皮生長因子-A、 -B、 -C禾口-D)。但巨噬細胞能通 過反應(yīng)性氧和氮代謝物生成，直接殺滅腫瘤細胞。巨噬細胞表達參與防衛(wèi)和修 復(fù)的ToU樣受體，說明在免疫介導(dǎo)的腫瘤生長和退縮之間存在精細平衡。無菌 性腫瘤內(nèi)缺氧和壞死的存在能促進刺激腫瘤生長的因子釋放。Coley疫苗或細 菌、病毒或真菌產(chǎn)物能使平衡轉(zhuǎn)向防衛(wèi)性免疫反應(yīng)。文獻中混淆了什么是免疫 反應(yīng)，什么是其副反應(yīng)。例如，高劑量白介素-2治療黑色素瘤的文獻，常指出 這種治療的流感樣癥狀"是易于處理的，……為了控制發(fā)熱、頭痛和肌痛，常 預(yù)防性應(yīng)用退熱劑"。殊不知，這種治療一方面剌激免疫系統(tǒng)，產(chǎn)生干擾素-a， 但另一方面，這種作用又被退熱劑中止。事實上，這種流感樣癥狀能改善患者生存期。免疫治療失k在某種程度上是由于過多顧慮副反應(yīng)，因而使用免疫抑 制性藥物。
單一細胞因子治療常引起明顯毒性，這是由于這種治療是一種非自然的挑
戰(zhàn)。Coley疫苗不是沒有不良反應(yīng)，但重要的是要認識到這種治療引起的癥狀 如發(fā)熱、寒顫、疲勞等是機體對免疫調(diào)節(jié)的正常適應(yīng)性反應(yīng)，能促進腫瘤退縮， 同時能改善癌性疼痛，減少鴉片類和退熱劑等藥物用量，而這些藥物能抑制免 疫反應(yīng)。
免疫系統(tǒng)是引起腫瘤自發(fā)性退縮的主要因素。 一些免疫抑制治療如化療、 放療和退熱劑，以及無菌性技術(shù)和抗生素引起的感染減輕，均能減弱免疫系統(tǒng) 引發(fā)的腫瘤退縮。對肺癌病人所作的回顧性研究提示，意外性感染對生存期有 明顯的有益影響。膀胱癌、肺癌和結(jié)直腸癌手術(shù)后感染并不少見，這種感染如 何恰當(dāng)控制，既讓其發(fā)揮刺激抗腫瘤免疫，又不致危及病人生命，是值得進一 步研究的課題。
在使用70多年以后，Coley疫苗1963年被美國FDA設(shè)定為"新藥"范疇。 這一裁定要求任何對此有興趣的人要對基本上類似于Coley治療的方案，進行 大量的昂貴試驗。這實際上阻礙發(fā)展一種便宜的有效的適用于各種癌癥的療 法。
進一步研究Coley疫苗可采用以下途徑(1)試用于動物自發(fā)性腫瘤， 這方面可以尋求獸醫(yī)的幫助。(2)試用于看來無生存希望的轉(zhuǎn)移性腫瘤病例， 即作I期研究，探討在終末期病人的療效。
Coley提出的腫瘤退縮的幾個關(guān)鍵點，包括誘導(dǎo)發(fā)熱(方法、程度)、注 射途徑(直接腫瘤內(nèi)注射抑或一般的皮下注射)，以及注射次數(shù)、時間等，應(yīng) 該予以研究；同時，對疫苗的副作用要進行量化；支持誘導(dǎo)和維持發(fā)熱的因素， 是治療轉(zhuǎn)移性疾病的基本因素，也要進一步分析；此外，治療的作用如何通過 測定血清腫瘤標(biāo)記、細胞因子表達以及免疫細胞數(shù)及其活性進行監(jiān)測。
可以預(yù)期， 一旦Coley治療原理得到進一步研究，并將其與已經(jīng)獲得的大 量人類治療實踐聯(lián)系起來，則更廣泛的人類研究就可能展開。不管怎樣，微生 物疫苗的抗腫瘤作用是無法視而不見的，其在未來腫瘤治療中的地位最終肯定 會得到公認。重新對Coley治^產(chǎn)生興趣，正確評價其科學(xué)貢獻，似乎將癌癥治療拖向 倒退，但從現(xiàn)代常規(guī)治療的緩慢進展看，退后一步可能預(yù)示將使腫瘤治療向前 跨進一大步。
遺憾的是，目前已很少有人對抗腫瘤中發(fā)熱反應(yīng)的作用予以重視?？焖偕?長的腫瘤內(nèi)含有大量白細胞，這些細胞在機體防衛(wèi)和修復(fù)中起一定作用，但其 修復(fù)功能也促進腫瘤生長。腫瘤內(nèi)感染可重建防衛(wèi)功能，引起腫瘤退縮。顯然， Coley療法在過去、現(xiàn)在和將來均具有一定地位，它為我們提供了一難得的機 會去發(fā)展一種廣譜的便宜的有效的腫瘤治療手段。
因此，研究具有應(yīng)用前景的抗腫瘤疫苗將是一項造福人民的既重要又緊迫 的任務(wù)。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的任務(wù)是提供一種廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，它能促進內(nèi)源性干擾素、 IL-2、 TNF分泌，增強巨噬細胞吞噬功能；促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化；提高NK細胞 活性；改變T細胞亞群；改變腫瘤細胞膜的凝集素受體；在形態(tài)學(xué)上，增加脾 臟濕重；促進脾生發(fā)中心增殖等。
本發(fā)明的技術(shù)解決方案如下
一種廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，它包含靜脈注射用脂肪乳劑，它還包含百白破 疫苗、風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、布病疫苗以及輔 料。
所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗還包含細菌疫苗為綠膿桿菌疫苗。 所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗還包含PBS緩沖液。
所述輔料包含Lecithin卵磷脂、Dextran葡聚糖、吐溫-80以及注射用油。 所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗 10% 15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗 10% 15%，癤病疫苗10% 15%，靜脈注射用脂肪乳劑20% 30%，輔料 10% 15。％， PBS緩沖液為余量用于補足100%重量百分比。
所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗 10% 15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗10% 15%，療病疫苗10% 15%，綠膿桿菌疫苗10% 15。％，靜脈注射用 脂肪乳劑20% 30%，，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量用于補足100%重 量百分比。
所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方的第一實施例，其組分含量以重量百分比 計為百白破疫苗10%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián) 疫苗13%，癤病疫苗13%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料14%， PBS緩沖 液20%。
所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方的第二實施例，其組分含量以重量百分比 計為百白破疫苗15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián) 疫苗15%，癤病疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料10%， PBS緩沖 液17%。
所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方的第三實施例，其組分含量以重量百分比 計為百白破疫苗12%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3%,傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián) 疫苗10%，癤病疫苗10%，綠膿桿菌疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑30%, 輔料10%， PBS緩沖液15%。
我國著名血液腫瘤專家王振義院士，全世界應(yīng)用誘導(dǎo)分化療法治療急性早 幼粒細胞白血病的發(fā)明者，早在上世紀(jì)80年代就提出抗擊癌癥必須"換一個 思路"，主張從提高機體整體免疫入手，實行多靶位免疫攻擊，即"多成分多 靶點作用"。他的這一理念包括.，(1)癌細胞的形成和發(fā)展與機體免疫處于 平衡狀態(tài)，只要機體免疫能力存在并保持足夠水平，癌細胞就不能生成或很快 被消滅(凋亡)或"休眠"。癌細胞并非單純在增殖，同時也在不斷凋亡。只 要免疫一癌細胞平衡向免疫側(cè)稍微傾斜，腫瘤就會因大量癌細胞凋亡而停止生 長。(2)癌細胞非常復(fù)雜，其表面和細胞內(nèi)，有許多"靶點"(抗原)，更 重要的是，癌細胞具有遺傳學(xué)不穩(wěn)定性。與正常細胞分裂其遺傳信息會全部復(fù) 制到下一代的情況不同，癌細胞分裂時，遺傳信息會不斷改變，分化出無數(shù)各 有特點的不同細胞。機體抗癌免疫的基礎(chǔ)就是不同的免疫細胞或細胞因子作用 于不同的癌細胞靶點，但單一的免疫細胞或因子("單槍匹馬")不一定能消 滅癌細胞。(3)免疫治療不能靠"輸入"，而是靠"激發(fā)"，不是"激發(fā)"一種免疫成分，而是"激發(fā)""f軍萬馬"。被激發(fā)的免疫成分會隨著癌細胞 遺傳信息的改變而變化，"機動靈活"。這種激發(fā)，只能靠非特異性免疫。復(fù) 合疫苗符合這一設(shè)想。
王振義同時指出現(xiàn)代醫(yī)學(xué)硏究癌癥，研究一個個靶點， 一個個細胞，純 之又純，非常"科學(xué)"，但犯了機械唯物論錯誤。癌癥是機體的"病"，人能 生癌，也應(yīng)能滅癌。不能只看癌不看人。他認為，復(fù)合疫苗是一種"整體治療"， 符合"天人合一"的哲學(xué)思想。在王振義的抗癌理念指導(dǎo)下，孔潤蓮醫(yī)生研究 微生物疫苗的抗腫瘤作用。在單用不同疫苗的基礎(chǔ)上，將多種市售微生物疫苗 以不同組合，添加連接劑及一定的佐劑，制成復(fù)合疫苗，進行了各種毒性及抗 腫瘤試驗，并作為院內(nèi)制劑試用于中晚期癌癥病人；徐克成醫(yī)生介入了復(fù)合疫 苗的臨床觀察、隨訪和療效的鑒定，初步總結(jié)出復(fù)合疫苗的理論基礎(chǔ)和臨床應(yīng) 用可行性及其前景，為進一步研究并"成藥"打下基礎(chǔ)。
本發(fā)明是由多種市售細菌疫苗和病毒疫苗以及其它原料復(fù)合而成，在配方 并加以佐劑下制成一種廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗。本發(fā)明的復(fù)合疫苗具有如下特 點
1、 復(fù)合疫苗是一種用已經(jīng)批準(zhǔn)上市的微生物疫苗和病毒疫苗作為原料制 成的生物制品。依抑瘤率和毒性，進行篩選，包括疫苗選擇和含量比例、輔料
選擇，以及疫苗與輔料的比例，先后試驗30余種疫苗組合，作了40余組抑瘤
試驗，最終確定一組抑瘤率最高、效果最強的配方。
2、 將多種疫苗混合制成復(fù)合疫苗，能激發(fā)或誘導(dǎo)不同的免疫細胞或細胞
因子，從而綜合地作用于腫瘤，產(chǎn)生協(xié)同效果。
3、 動物試驗證明對多種腫瘤模型具有明顯的抑瘤效應(yīng)，提高試驗動物的 免疫能力，并延長荷瘤實驗動物生存期。
4、 有的疫苗成分具有載體作用，能天然地感染職業(yè)性抗原提呈細胞，激 發(fā)I型和II型抗原提呈途徑，誘導(dǎo)強有力的天然性和適應(yīng)性免疫反應(yīng)。
5、 本復(fù)合疫苗中非疫苗成分能增加疫苗分子的彌散性和穩(wěn)定性，促進疫 苗分子滲透入效應(yīng)細胞，有的本身即具有誘導(dǎo)機體免疫功能的作用。
應(yīng)用本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，則是一種 強人體抗腫瘤能力的措 施，可誘導(dǎo)癌細胞休眠，讓患者長期無病生存或帶瘤生存。按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，根據(jù)組分和配方制作，制作方法簡單， 抗瘤譜廣，安全無毒，幾乎無副反應(yīng)，如能幵發(fā)成為新藥，其價格便宜，尤其 它所具有的社會與經(jīng)濟意義將是不可估量的。
具體實施例方式
本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗主要包含百白破疫苗、風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗、 傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗、靜脈注射用脂肪乳劑以及輔料。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其配方可由百白破疫苗、風(fēng)疹麻疹二聯(lián) 疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗、靜脈注射用脂肪乳劑、輔 料以及PBS緩沖液組成。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其配方也可由百白破疫苗、風(fēng)疹麻疹二 聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗、綠膿桿菌疫苗、靜脈注
射用脂肪乳劑、輔料以及PBS緩沖液組成。綠膿桿菌疫苗是細菌疫苗。
本發(fā)明的復(fù)合疫苗配方中的輔料包含Lecithin卵磷脂、Dextran葡聚糖、吐 溫-80以及注射用油等。PBS緩沖液是溶劑，起到溶解輔料中固體原料、平衡 PH和保護試劑的作用。
本發(fā)明的一種廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百 白破疫苗10% 15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙 三聯(lián)疫苗10% 15%，癤病疫苗10% 15%，靜脈注射用脂肪乳劑20% 30 %，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量用于補足100%重量百分比。
本發(fā)明的又一種廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為 百白破疫苗10% 15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副傷寒 乙三聯(lián)疫苗10% 15%，布病疫苗10% 15%，綠膿桿菌疫苗10% 15%， 靜脈注射用脂肪乳劑20% 30%，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量用于 補足100%重量百分比。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第一實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗10%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗13%，癤病疫苗13%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料14 %， PBS緩沖液20X。按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合，苗配方制作的第二實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗15%，癤病疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料IO %， PBS緩沖液17%。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第三實施例配方，其組分含量
以重量百分比計為百白破疫苗12%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲
副傷寒乙三聯(lián)疫苗10%，癤病疫苗105^，綠膿桿菌疫苗10%，靜脈注射用脂 肪乳劑30%，輔料10%， PBS緩沖液15X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第四實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗15%,風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗15%,癤病疫苗12%,綠膿桿菌疫苗12。％，靜脈注射用脂 肪乳劑21%，輔料13%， PBS緩沖液7X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第五實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗13%,風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗10%，癤病疫苗15%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料15 %， PBS緩沖液19%。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第六實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗10%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗12%，癤病疫苗15%,綠膿桿菌疫苗15%，靜脈注射用脂 肪乳劑20%，輔料11%, PBS緩沖液9X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第七實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗11%,風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗6%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗13%,癤病疫苗13%,綠膿桿菌疫苗11%，靜脈注射用脂 肪乳劑22%，輔料12%， PBS緩沖液12X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第八實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗13%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗4%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗14%,癤病疫苗11。Z，綠膿桿菌疫苗13%，靜脈注射用脂 肪乳劑23%，輔料13%， PBS緩沖液9X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第九實施例配方，其組分含量以重量百分比計為百白破疫苗14%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗11%,癤病疫苗14%,綠膿桿菌疫苗12%，靜脈注射用脂 肪乳劑25%，輔料11%， PBS緩沖液10X。
按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗配方制作的第十實施例配方，其組分含量 以重量百分比計為百白破疫苗12%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗4%，傷寒副傷寒甲 副傷寒乙三聯(lián)疫苗12%，癤病疫苗14%，靜脈注射用脂肪乳劑30%，輔料ll %， PBS緩沖液17%。
經(jīng)動物試驗確認所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗幾乎沒有毒性。自1990年至 2008年近十年來，上海醫(yī)工院、中國科學(xué)院上海生化所、藥物所等單位對該復(fù) 合疫苗進行數(shù)次小鼠急性毒性試驗，用量相當(dāng)于人用量的卯0 1500倍，未見 任何毒性反應(yīng)，在觀察期的小鼠全部存活，尸檢主要臟器未見明顯病理變化， 顯示其十分安全。
研究表明，所述復(fù)合疫苗能促進內(nèi)源性干擾素、白細胞介素-2、腫瘤壞死 因子-a分泌，增強巨噬細胞吞噬功能；促進淋巴細胞轉(zhuǎn)化；提高NK細胞活性； 改變T細胞亞群；改變腫瘤細胞膜的凝集素受體；在形態(tài)學(xué)上，增加脾臟濕重； 促進脾生發(fā)中心增殖等。推測該復(fù)合疫苗能全方位促進抗腫瘤免疫包括天然免 疫和適應(yīng)性免疫。
曾將本復(fù)合疫苗與經(jīng)典化療藥物環(huán)磷酰胺比較，發(fā)現(xiàn)前者短期的抑瘤效果 雖然沒有化療藥物高，但是非常明顯地顯示出，使用本復(fù)合疫苗能提高NK細 胞活性，而化療藥物卻使之降低。實驗研究還顯示，對實驗性腫瘤，本復(fù)合疫 苗具有抑制腫瘤生長作用，對鼠肝癌、鼠S180肉瘤、鼠膀胱癌和鼠B16黑色 素瘤的抑瘤率達50%以上；對HAC腹水癌和Ehrlich腹水癌具有預(yù)防其生成作 用。
經(jīng)過若干年的臨床實踐和動物試驗研究證實，本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫 苗具有一定的療效，能抗腫瘤，抗難治性慢性感染，抗免疫紊亂及低下，抗某 些代謝性疾病，包括動脈粥樣硬化。在腫瘤治療方面，本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù) 合疫苗可與三大常規(guī)治療方法并用，能增效、減毒，尤其適用于經(jīng)三大常規(guī)治 療無指征或無效的進展性腫瘤，其抗癌效應(yīng)較為明顯且全面，除了消瘤作用外， 還有改善KPS、升白、鎮(zhèn)痛和防復(fù)發(fā)等作用。
14當(dāng)然，本技術(shù)領(lǐng)域內(nèi)的一般技術(shù)人員應(yīng)當(dāng)認識到，上述諸實施例僅是用來 說明本發(fā)明，而并非用作對本發(fā)明的限定，只要在本發(fā)明的實質(zhì)精神范圍內(nèi)， 對上述實施例的變換、變型都將落在本發(fā)明權(quán)利要求的范圍內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，它包含靜脈注射用脂肪乳劑，其特征在于，它還包含百白破疫苗、風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗以及輔料。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，它還包含細菌疫苗為綠膿桿菌疫苗。
3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，它還包含 PBS緩沖液。
4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，它還包含 PBS緩沖液。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，所述輔料 包含Lecithin卵磷脂、Dextran葡聚糖、吐溫-80以及注射用油。
6. 根據(jù)權(quán)利要求3所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗10%~15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副 傷寒乙三聯(lián)疫苗10% 15%，癤病疫苗10% 15%，靜脈注射用脂肪乳劑20 % 30%，輔料10% 15%, PBS緩沖液為余量用于補足100%重量百分比。
7. 根據(jù)權(quán)利要求4所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方組分含量以重量百分比計為百白破疫苗10% 15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3% 8%，傷寒副傷寒甲副 傷寒乙三聯(lián)疫苗10% 15%，布病疫苗10% 15%,綠膿桿菌疫苗10% 15 %，靜脈注射用脂肪乳劑20% 30。/。，輔料10% 15%， PBS緩沖液為余量 用于補足100%重量百分比。
8. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方的第一實施例，其組分含量以重量百分比計為百白破 疫苗10%,風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗5%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗13%，癤 病疫苗13%，靜脈注射用脂肪乳劑25%，輔料14%， PBS緩沖液20X。
9. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，所述廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方的第二實施例，其組分含量以重量百分比計為百白破 疫苗15%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗8%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗15%，癤 病疫苗10%，靜脈注射用脂肪？Uflj25X，輔料10%， PBS緩沖液17X。
10.根據(jù)權(quán)利要求7所述的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，其特征在于，所述廣譜 抗腫瘤復(fù)合疫苗的配方的第三實施例，其組分含量以重量百分比計為百白破 疫苗12%，風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗3%，傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗10%，布 病疫苗10%，綠膿桿菌疫苗10%，靜脈注射用脂肪乳劑30%，輔料10%， PBS 緩沖液15%。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，它包含靜脈注射用脂肪乳劑、百白破疫苗、風(fēng)疹麻疹二聯(lián)疫苗、傷寒副傷寒甲副傷寒乙三聯(lián)疫苗、癤病疫苗以及輔料。本發(fā)明將多種疫苗混合制成復(fù)合疫苗，能激發(fā)或誘導(dǎo)不同的免疫細胞或細胞因子，從而綜合地作用于腫瘤，產(chǎn)生協(xié)同效果。應(yīng)用本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，則是一種增強人體抗腫瘤能力的措施，可誘導(dǎo)癌細胞休眠，讓患者長期無病生存或帶瘤生存。按本發(fā)明的廣譜抗腫瘤復(fù)合疫苗，根據(jù)組分和配方制作，制作方法簡單，抗瘤譜廣，安全無毒，幾乎無副反應(yīng)，如能開發(fā)成為新藥，其價格便宜，尤其它所具有的社會與經(jīng)濟意義將是不可估量的。
文檔編號A61K39/295GK101628114SQ20091005653
公開日2010年1月20日 申請日期2009年8月17日 優(yōu)先權(quán)日2009年8月17日
發(fā)明者孔潤蓮, 徐克成, 王振義 申請人:孔潤蓮;王振義;徐克成