專利名稱：一種用于治療流感病毒感染的中藥制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及中藥制備工藝及制劑的制備方法，更具體的說是一種預(yù)防和治療流感病毒感染的半枝蓮提取物及其制備方法，及以該提取物為主要成分制成的各種中藥制劑。
背景技術(shù)：
流行性感冒又稱流感，是由流感病毒引起的急性呼吸道傳染病。在我國每年都要爆發(fā)流行性感冒，而且不斷變異，當(dāng)前沒有理想的治療藥物?，F(xiàn)有的各種治療流行性感冒病毒的中藥制劑，多為復(fù)方制劑，如雙黃連、銀翹、羚羊、桑菊等，雖然具有一定的療效，但多成份導(dǎo)致質(zhì)量難以重復(fù)，生產(chǎn)可控性差。因此市場上迫切需要療效肯定、質(zhì)量可控的預(yù)防與治療流感病毒感染的中藥制劑，以滿足廣大患者的需求。
本發(fā)明采用的半枝蓮為唇形科植物半枝蓮Scutellaria barbata D.Don的全草。全草含有生物堿、富含黃酮類、酚類、萜類、甾體、多糖等成分，中國藥典2000版一部89頁收載半枝蓮，半枝蓮有很多的藥效功能，具有抗菌、抗炎、抗病毒等活性，對機(jī)體的細(xì)胞免疫有促進(jìn)作用，對癌細(xì)胞有一定的抑制作用，有清熱、解毒、活血、祛瘀、消腫、止痛等功效。
近年來半枝蓮的上述功效已引起了人們的高度重視，因此，常以復(fù)方的形式用于預(yù)防或治療流感病毒引起的各種感染。而半枝蓮總黃酮提取物作為一個有效部位，其抗病毒的研究以及半枝蓮提取物中，總黃酮、總生物堿主要成分含量的研究未見文獻(xiàn)報道。我們經(jīng)過篩選和分離，得到了半枝蓮的有效部位，產(chǎn)品大部分成分比較清楚，質(zhì)量容易控制，作用比較肯定。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明所要解決的技術(shù)問題是在克服現(xiàn)有藥物不足的基礎(chǔ)上，提供一種能明顯預(yù)防與抑制流感病毒感染，且質(zhì)量比較容易控制，總黃酮含量高的半枝蓮提取物，以減少雜質(zhì)，提高療效。
本發(fā)明的另一個目的在于，提供了半枝蓮提取物有效部位的制備工藝，除采用一些已知方法外，還采用了一些重要步驟來提高半枝蓮提取物中總黃酮的含量。
本發(fā)明的再一個目的在于，提供一種以半枝蓮提取物的有效部位為主要活性成分制成的各種中藥制劑。
為解決上述問題，本發(fā)明研究制定了如下技術(shù)方案一種用于治療流感病毒感染的半枝蓮提取物，其特征在于半枝蓮提取物由總黃酮、生物堿、甾體、糖類等成分組成，其中總黃酮含量為20％-90％，總生物堿含量0.5-10％。
總黃酮，含有紅花素carthamidin、5，7，4’三羥基-8甲氧基黃酮(5，7，4’-trihydroxy-8-methoxyflavanone)、異紅花素isocarthamidin、印黃芩素scutellarein、野黃芩苷scutellarin；其中5，7，4’三羥基-8甲氧基黃酮(4’-羥基漢黃芩素)0.1mg/Kg-400mg/Kg對流感病毒有抑制作用。
半枝蓮提取物的制備方法，其特征在于A溶劑提取將半枝蓮全草粉碎用溶劑A(加熱或滲漉)提取，得粗提物；B溶劑分離純化提物采用B溶劑經(jīng)分離純化、富集得混合物，測得總黃酮含量為20％-90％，總生物堿含量0.5-10％；方法包括a.液液萃取法粗提物用溶劑B采用逆流分配法連續(xù)提取6小時得萃取提取物；b.酸沉淀法粗提物經(jīng)稀堿調(diào)PH6-9，用B溶劑提取，水層用稀酸調(diào)PH2-5，得酸性沉淀物，水層再用B溶劑提取，得萃取物，將酸性沉淀物與萃取物合并得混合物；c.吸附洗脫法粗提物經(jīng)大孔樹脂柱或硅膠柱層析或聚酰胺柱方法用溶劑B洗脫，收集各組分蒸干得提取物。
制備方法中，提取溶劑A為水、30-90％乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮；分離純化溶劑B為二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、異丙醇、正丁醇、石油醚、乙醚、水-乙酸乙酯、水-正丁醇、0.1-20％稀酸溶液、0.1-20％稀堿溶液、乙酸乙酯。
所述的稀酸溶液為鹽酸、硫酸、磷酸、草酸、醋酸；稀堿溶液為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉。
所述的大孔樹脂型號是D-101、AB-8型、NK-9。
具體提取方法如下(1)、將半枝蓮全草粉碎，用水提取，得半枝蓮的粗提物，上大孔樹脂柱分離。用水和不同濃度的乙醇(30-90％)洗脫。收集各部分，測黃酮，30-60％乙醇洗脫部分野黃芩苷含量最高1.5-60％。乙醇(30-90％)洗脫物得混合物總黃酮含量20-90％。
(2)、將半枝蓮全草粉碎，用乙醇30-90％提取，得半枝蓮的粗提物。粗提取物加入堿液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，(堿用NaOH，KOH，Na2CO3，NaHCO3)，得堿性藥液，用有機(jī)溶劑萃取，分出溶媒層，水層再用酸調(diào)pH至2-4，(酸用HCl，H2SO4，H3PO4，HAC)，溶液用有機(jī)溶劑萃取，萃取物濃縮得混合物，總黃酮含量20-90％。
(3)、將半枝蓮全草粉碎，用稀堿0.1-20％溶液提取，粗提物進(jìn)行硅膠柱層析，分離，用溶媒洗脫得提取物。
(4)、將半枝蓮全草粉碎，用水提取，得半枝蓮的粗提物，粗提物進(jìn)行硅膠柱層析，分離，用溶媒洗脫得提取物。
(5)、將半枝蓮全草粉碎，用稀堿0.1-20％溶液提取，得半枝蓮的粗提物，用酸調(diào)pH至2-5，溶液用有機(jī)溶劑萃取，萃取物濃縮得混合物，總黃酮含量20-90％。
半枝蓮提取物的有效部位為主要活性成分制成的各種中藥制劑，其特征在于(1)、10％-60％的半枝蓮全草提取物和40％-90％藥用輔料組成的口服制劑；(2)、0.5％-30％的半枝蓮全草提取物和70％-99.5％藥用輔料組成的注射劑；其中，半枝蓮全草提取物由總黃酮、生物堿、甾體、糖類等成分組成，總黃酮含量為20％-90％，總生物堿含量0.5-10％。
本發(fā)明所述的口服制劑可以是片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸，用于臨床的劑量為每日服用按生藥材計6-50克；注射劑可以是水針劑或粉針劑，用于臨床的劑量為每日注射按生藥材計3-30克。
本發(fā)明所采用的藥用輔料包括填充劑(如甘露醇、乳糖、聚乙二醇)，粘合劑(淀粉、微晶纖維素)，崩解劑(如羧甲基纖維素、低取代的羥丙基纖維素)，潤滑劑(如滑石粉、硬脂酸鎂)，濕潤劑(如丙二醇、乙醇)，抗氧劑(如焦亞硫酸鈉、硫代硫酸鈉)，防腐劑(苯甲醇)等，它們可以是常用劑量，以常用的配比與半枝蓮全草提取物混合，當(dāng)半枝蓮全草提取物用量確定后，各藥用輔料之間的配比可以根據(jù)需要適當(dāng)調(diào)節(jié)。
各種藥物制劑的制備具體操作如下(1)、按配置總量計稱取含10-60％半枝蓮全草提取物，加入40-90％的填充劑、粘合劑、崩解劑、潤滑劑、矯味劑等，充分?jǐn)嚢杌旌现瞥深w粒，在60-70℃干燥2-4小時壓制成片，使每片含半枝蓮全草提取物40-240mg；或?qū)⒅瞥傻臐耦w粒直接在60-70℃干燥2-4小時，然后充填入空膠殼中，使每粒膠囊含半枝蓮全草提取物30-180mg。
(2)、按配置總量計稱取含0.5-30％半枝蓮全草提取物，加入70-99.5％的溶劑、防腐劑，充分混合，加活性炭脫色，過濾，用小于0.45μm微空濾膜過濾，經(jīng)超濾后灌封，100℃滅菌30-60分鐘，使每ml含半枝蓮全草提取物5-300mg；或?qū)⑺脼V液按標(biāo)準(zhǔn)分裝后，在真空條件下冷凍干燥制成凍干粉針劑。
(3)、按配置總量計稱取含10％-60％半枝蓮全草提取物，加入40％-90％的填充劑、崩解劑、矯味劑等，充分?jǐn)嚢杌旌嫌?2-14目篩制成顆粒。在60-70℃干燥2-4小時，使每克顆粒劑含半枝蓮全草提取物100-600mg。
(4)、按配置總量計稱取含10％-60％半枝蓮全草提取物，加入40％-90％的填充劑、抗氧劑等，加熱熔融溫度(40-90℃)，使原料和輔料充分混溶，滴制成丸，使每粒滴丸含半枝蓮全草提取物4-30mg。
本發(fā)明的制備方法中可以采用水、乙醇30-90％為提取溶媒，提取液再進(jìn)行分離、有機(jī)溶劑萃取、富集，得有效成分，這樣可以將半枝蓮全草中含有的生物堿、富含黃酮類、甾體、多糖等成分充分提取出來。按常規(guī)進(jìn)行半枝蓮紫外測定(參見中國藥典2000版一部89頁，附錄33頁)測得含總黃酮(20-90％)、甾體(1-10％)、生物堿(0.5-10％)、多糖(10-20％)，按常規(guī)進(jìn)行半枝蓮HPLC測定(參見中國藥典2000版一部89頁，附錄38頁)，測得野黃芩苷1.5-60％等。
本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)在于(1)、本品為單味中藥的有效成分組成，可用于預(yù)防或治療流感病毒引起的各種感染，如支氣管炎、肺炎等，療效顯著，服用劑量小，毒副作用小，質(zhì)量穩(wěn)定，安全性高。
(2)、制備工藝簡單經(jīng)濟(jì)、實用，溶媒可以循環(huán)使用，更適合工業(yè)化生產(chǎn)。同時所得半枝蓮全草提取物可以制成常用的各種劑型。
(3)、由于是純中藥制劑避免了注射疫苗或服用西藥所帶來的過敏反應(yīng)和一些毒副作用，可以滿足不同患者預(yù)防和治療流感病毒的需求。
本發(fā)明制得的半枝蓮提取物對流感病毒感染有治療作用，通過藥效學(xué)試驗說明如下其中的樣品代號分別來源于實施例1-3所表述的內(nèi)容。
取實施例1-3得到的樣品，測定在體內(nèi)的抗病毒活性。

將流感病毒鼠肺適應(yīng)株(A/PR/8/34)(購于中科院病毒所)重復(fù)傳代并檢測血凝滴度，選擇滴度1∶640以上的尿囊液作實驗毒種原液，取實驗病毒種原液，用1460培養(yǎng)液稀釋為1/20、1/50、1/100三個稀釋度。無菌分裝冷凍保存。選取19-23g昆明種小鼠24只，隨機(jī)分為3組，每組8只。將小鼠用乙醚麻醉后，分別滴鼻感染病毒種原液以及四個稀釋度的病毒液，每鼠50ul。記錄小鼠感染時間，出現(xiàn)肺炎癥狀的時間和感染后小鼠死亡的天數(shù)，選擇引起小鼠60-90％死亡的病毒液用于正式試驗感染，確定1/50病毒樣品感染小鼠作為病毒感染模型。
體重15～19g昆明種小鼠100只，雌雄各半，隨機(jī)分為10組，分別為空白對照組、模型對照組、A、B、C、D、E、F組。除空白對照組外，各組小鼠用選定濃度的病毒稀釋液滴鼻感染，每鼠0.05ml。自感染后第五天開始繼續(xù)給藥7天，給藥劑量為10g生藥/kg體重，觀察小鼠發(fā)病率和生存狀況，對各組動物的存活率和存活時間加以比較，結(jié)果見下表。


注*與模型對照組相比，卡方精確概率法檢驗結(jié)果p＜0.05；綜合試驗結(jié)果，半枝蓮提取物C、B、D、H對流感病毒感染的小鼠治療作用明顯，能明顯提高生存率。
具體實施例方式
實施例中，所用的乙醇為藥用級，氫氧化鈉、硫酸為分析純，其它有機(jī)溶媒為工業(yè)級。半枝蓮藥材產(chǎn)地為河南、河北，大孔樹脂購自南開大學(xué)化工廠，半枝蓮紫外測定(參見中國藥典2000版一部89頁，附錄33頁)測得含總黃酮，半枝蓮HPLC測定(參見中國藥典2000版一部89頁，附錄38頁)，測得野黃芩苷等。
以下結(jié)合較佳實施例，對本發(fā)明做進(jìn)一步的描述，對依據(jù)本發(fā)明提供的具體實施方式
詳細(xì)說明如下；為了簡單和清楚的目的，下文恰當(dāng)?shù)氖÷粤斯夹g(shù)的描述，以免那些不必要的細(xì)節(jié)影響對本技術(shù)方案的描述。
實施例1將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量水加熱提取2次，得半枝蓮的粗提物(A)。上大孔樹脂柱(D101型或AB8)分離，接收未吸附的藥液，濃縮得12g，用水和不同濃度的乙醇(30-90％)洗脫。收集各部分，水洗部分干燥后得26g，30-60％乙醇部分得干膏67g，80-90％乙醇部分乙醇部分8g。測總黃酮，30-60％乙醇洗脫部分野黃芩苷含量最高(4.2％)。得混合物，混合物含總黃酮33.8％，總生物堿含量1.5％，甾體含量1.8％，糖類含量10.2％。
實施例2將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取2次(加熱或滲漉)，得半枝蓮的粗提物(B)。上大孔樹脂柱(D101型或AB8)分離，接收未吸附的藥液，濃縮得15g(F)，用水和不同濃度的乙醇(30-90％)洗脫。收集各部分，水洗部分干燥后得35g(G)，30-60％乙醇部分得干膏79g(H)，80-90％乙醇部分乙醇部分14g。測總黃酮，30-60％乙醇洗脫部分野黃芩苷含量最高(10.5％)。得混合物35g，混合物含總黃酮63.1％，總生物堿含量2.1％，甾體含量1.0％，糖類含量5.2％。
實施例3將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取(加熱或滲漉)2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用5％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，用三氯甲烷(或石油醚)萃取。分出溶媒層，棄去，水層再用5％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得30g(C)，溶液用三氯甲烷(或石油醚)萃取，分層，水層，濃縮得86g(E)，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得40g(D)，與酸性沉淀混合均勻，得混合物70g。混合物含總黃酮59.7％，總生物堿含量3.8％，甾體含量2.0％，糖類含量4.2％等。
實施例4將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取(加熱或滲漉)2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用1％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，用乙酸乙酯(或正丁醇)萃取。分出溶媒層，棄去，水層再用1％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得24g，溶液用乙酸乙酯(或正丁醇)萃取，分層，水層棄去，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得48g，與酸性沉淀混合均勻，得混合物72g。混合物含總黃酮61.8％，總生物堿含量2.5％，甾體含量2.4％，糖類含量3.9％等。
實施例5將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取(加熱或滲漉)2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用3％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，用石油醚(或乙酸乙酯)萃取。分出溶媒層，棄去，水層再用3％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得26g，溶液用正丁醇(或乙酸乙酯)萃取，分層，水層棄去，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得47g，與酸性沉淀混合均勻，得混合物73g。混合物含總黃酮58.8％，總生物堿含量2.8％，甾體含量2.4％，糖類含量3.5％等。
實施例6將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取(加熱或滲漉)2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用5％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，用三氯甲烷(或乙酸乙酯)萃取。分出溶媒層，棄去，水層再用5％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得33g，溶液用石油醚(或正丁醇)萃取，分層，水層棄去，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得32g，與酸性沉淀混合均勻，得混合物65g?；旌衔锖傸S酮60.9％，總生物堿含量3.6％，甾體含量2.8％，糖類含量3.1％等。
實施例7將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用5％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，用石油醚(或乙酸乙酯)萃取。分出溶媒層，棄去，水層再用5％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得22g，溶液用乙醚(或正丁醇)萃取，分層，水層棄去，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得43g，與酸性沉淀混合均勻，得混合物65g。混合物含總黃酮60.2％，總生物堿含量1.6％，甾體含量1.4％，糖類含量4.7％等。
實施例8將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用3％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，濾過，棄去沉淀物，上清液用3％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得25g，溶液用三氯甲烷(或石油醚)萃取，分層，水層棄去，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得46g，與酸性沉淀混合均勻，得混合物71g。混合物含總黃酮58.6％，總生物堿含量1.7％，甾體含量2.0％，糖類含量4.4％等。
實施例9將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用5％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，濾過，棄去沉淀物，上清液用5％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得34g，溶液用乙酸乙酯(或正丁醇)萃取，分層，水層棄去，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得45g，與酸性沉淀混合均勻，得混合物79g。混合物含總黃酮56.2％，總生物堿含量1.3％，甾體含量1.8％，糖類含量4.9％等。
實施例10將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇提取2次，合并2次提取液，減壓回收乙醇，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提取物用7％NaOH液進(jìn)行調(diào)節(jié)pH至7-8，得堿性藥液，濾過，棄去沉淀物，上清液用7％硫酸調(diào)pH至2-4，放置，離心，酸性沉淀備用，干燥后得32g，溶液用異丙醇(或乙醚)萃取，分層，水層棄去，溶媒層濃縮得萃取物，干燥后得43g，與酸性沉淀混合均勻，得混合物75g?；旌衔锖傸S酮54.3％，總生物堿含量1.8％，甾體含量2.0％，糖類含量5.0％等。
實施例11將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量1％氫氧化鈉(或碳酸鈉)溶液提取2次，合并2次提取液，減壓濃縮，得半枝蓮的粗提物，藥渣棄去。粗提物上硅膠柱，用三氯甲烷(或乙酸乙酯、甲醇)洗脫，收集各部分，用鎂粉-鹽酸進(jìn)行定性鑒別，合并陽性部分，減壓濃縮，得混合物30g?；旌衔锖傸S酮85％，甾體含量1.6％等。
實施例12將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量水提取，得半枝蓮的粗提物，粗提物上聚酰胺柱，用水和不同濃度的乙醇洗脫，收集各部分，用鎂粉-鹽酸進(jìn)行定性鑒別，合并陽性部分，減壓濃縮，得混合物50g，混合物含總黃酮65.7％，總生物堿含量1.3％，糖類含量5.3％等。
實施例13將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量50％乙醇(加熱或滲漉)提取，得半枝蓮的粗提物，粗提物上聚酰胺柱，用水和不同濃度的乙醇洗脫，收集各部分，用鎂粉-鹽酸進(jìn)行定性鑒別，合并陽性部分，減壓濃縮，得混合物57g，混合物含總黃酮68.2％，總生物堿含量1.8％，甾體含量1.3％、糖類含量4.5％等。
實施例14將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量1％氫氧化鈉(或碳酸鈉)溶液提取，得半枝蓮的粗提物，用5％硫酸調(diào)pH至2-4，溶液用有機(jī)溶劑三氯甲烷(乙酸乙酯或丁醇)萃取，萃取物濃縮得混合物58g，混合物含總黃酮64.8％，甾體含量1.1％、糖類含量4.2％等。
實施例15將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量30％乙醇(加熱或滲漉)提取，得半枝蓮的粗提物，加水溶解，溶液用有機(jī)溶劑石油醚萃取，石油醚層棄去，水層加乙醇，使含醇量達(dá)75％乙醇醇沉，濾過，棄去沉淀物，上清液，濃縮收醇，得浸膏，加水溶解，用逆流分配法連續(xù)萃取6小時，溶劑水-乙酸乙酯，萃取物濃縮得混合物52g，混合物含總黃酮63.5％，甾體含量1.2％、糖類含量4.5％等。
實施例16將半枝蓮全草粉碎，稱取1公斤，用18倍量30％乙醇(加熱或滲漉)提取，得半枝蓮的粗提物，加水溶解，溶液用有機(jī)溶劑石油醚萃取，石油醚層棄去，水層加乙醇，使含醇量達(dá)75％乙醇醇沉，濾過，棄去沉淀物，上清液，濃縮收醇，得浸膏，加水溶解，用逆流分配法連續(xù)萃取6小時，溶劑水-正丁醇，萃取物濃縮得混合物55g，混合物含總黃酮64.6％，甾體含量1.5％、糖類含量4.7％等。
實施例17制劑工藝，劑型片劑處方半枝蓮混合物200g微晶纖維素(PH-301) 120g低取代羥丙基纖維素 12g檸檬酸 4g甘露醇 20g微粉硅膠10g硬脂酸 4g滑石粉 30g
橘子香精適量制成1000片將上述原料充分?jǐn)嚢杌旌现瞥深w粒，在60-70℃干燥2-4小時壓制成片，使每片含半枝蓮全草提取物40-240mg。
實施例18制劑工藝，劑型膠囊劑處方半枝蓮混合物150g微晶纖維素 90g微粉硅膠23g淀粉25g硬脂酸 2g滑石粉 10g制成1000粒膠囊將制成的濕顆粒直接在60-70℃干燥2-4小時，然后充填入空膠殼中，使每粒膠囊含半枝蓮全草提取物30-180mg。
實施例19制劑工藝，劑型顆粒劑處方半枝蓮混合物500g乳糖350g羧甲基淀粉鈉135g蛋白糖 5g檸檬酸 10g橘子香精適量制成1000g顆粒劑攪拌混合用12-14目篩制成顆粒。在60-70℃干燥2-4小時，使每克顆粒劑含半枝蓮全草提取物100-600mg。
實施例20制劑工藝，劑型滴丸劑處方半枝蓮混合物20g聚乙二醇400010g
聚乙二醇600030g焦亞硫酸鈉 適量制成1000粒滴丸加熱熔融溫度(40-90℃)，使原料和輔料充分混溶，滴制成丸，使每粒滴丸含半枝蓮全草提取物4-30mg。
實施例21制劑工藝，劑型水劑處方半枝蓮混合物10g苯甲醇 2毫升丙二醇 300毫升碳酸鈉 適量注射用水適量制成1000毫升(水針)將上述原料充分混合，加活性炭脫色，過濾，用小于0.45um微空濾膜過濾，經(jīng)超濾后灌封，100℃滅菌30-60分鐘，使每ml含半枝蓮全草提取物5-300mg。
實施例22制劑工藝，劑型粉針劑處方半枝蓮混合物10g苯甲醇 2毫升碳酸鈉 適量注射用水適量制成50g(粉針)將所得濾液按標(biāo)準(zhǔn)分裝后，在真空條件下冷凍干燥制成干粉針劑。
權(quán)利要求
1.一種用于治療流感病毒感染的半枝蓮提取物，其特征在于半枝蓮提取物由總黃酮、生物堿、甾體、糖類等成分組成，其中總黃酮含量為20％-90％，總生物堿含量0.5-10％。
2.按權(quán)利要求1所述的提取物，其特征在于所述的總黃酮，含有紅花素carthamidin、5，7，4’三羥基-8甲氧基黃酮(5，7，4’-trihydroxy-8-methoxyflavanone)、異紅花素isocarthamidin、印黃芩素scutellarein、野黃芩苷scutellarin；其中5，7，4’三羥基-8甲氧基黃酮(4’-羥基漢黃芩素)0.1mg/Kg-400mg/Kg對流感病毒有抑制作用。
3.權(quán)利要求1所述半枝蓮提取物的制備方法，其特征在于A溶劑提取將半枝蓮全草粉碎用溶劑A(加熱或滲漉)提取，得粗提物；B溶劑純化粗提物采用B溶劑經(jīng)分離純化、富集得混合物，測得總黃酮含量為20％-90％，總生物堿含量0.5-10％；方法包括a.液液萃取法粗提物用溶劑B采用逆流分配法連續(xù)提取6小時得萃取提取物；b.酸沉淀法粗提物經(jīng)稀堿調(diào)PH6-9，用B溶劑提取，水層用稀酸調(diào)PH2-5，得酸性沉淀物；水層再用B溶劑提取，得萃取物，將酸性沉淀物與萃取物合并得混合物；c.吸附洗脫法粗提物經(jīng)大孔樹脂柱或硅膠柱層析或聚酰胺柱方法用溶劑B洗脫，收集各組分蒸干得提取物。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于提取溶劑A為水、0.1-20％稀堿溶液、30-90％乙醇、甲醇、乙酸乙酯、丙酮；分離純化溶劑B為二氯甲烷、三氯甲烷、丁醇、異丙醇、正丁醇、石油醚、乙醚、水-乙酸乙酯、0.1-20％稀酸溶液、0.1-20％稀堿溶液、水-正丁醇、乙酸乙酯。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所述的稀酸為鹽酸、硫酸、磷酸、草酸、醋酸；稀堿為氫氧化鈉、氫氧化鉀、碳酸鈉、碳酸氫鈉。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述的制備方法，其特征在于所用的大孔樹脂型號是D-101、AB-8型、NK-9。
7.權(quán)利要求1-3所述的半枝蓮提取物的中藥制劑，其特征在于(1)、10％-60％的半枝蓮提取物和40％-90％藥用輔料組成的口服制劑；(2)、0.5％-30％的半枝蓮提取物和70％-99.5％藥用輔料組成的注射劑；其中，半枝蓮全草提取物由總黃酮、生物堿、甾體、糖類等成分組成，總黃酮含量為20％-90％，總生物堿含量0.5-10％。
8.如權(quán)利要求7所述的中藥制劑，其特征在于所述的口服制劑為片劑、膠囊劑、顆粒劑、滴丸；注射劑為水針劑或凍干粉針劑。
9.如權(quán)利要求7所述的中藥制劑，其特征在于所述的藥用輔料包括填充劑，粘合劑，崩解劑，潤滑劑，抗氧劑。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種用于治療流感病毒感染的中藥制備工藝及制劑的方法。它包括10－60％的半枝蓮全草提取物和40－90％藥用輔料組成的口服制劑及由0.5％－30％半枝蓮全草提取物和70－99.5％藥用輔料組成的注射劑，其中半枝蓮全草提取物由黃酮、生物堿、甾體、糖類等成分組成的(總黃酮含量為20％－90％)；半枝蓮全草通過水、不同濃度的乙醇提取、分離、富集得到半枝蓮全草提取物。該工藝簡單、經(jīng)濟(jì)、實用，溶媒可以循環(huán)使用，更適合工業(yè)化生產(chǎn)。本品由單味中藥制成制劑，質(zhì)量穩(wěn)定，服用劑量小，療效確切，安全性高，因此將本品開發(fā)成預(yù)防和治療流感病毒感染的中藥制劑是極其有意義的。
文檔編號A61K9/48GK1726958SQ20041002010
公開日2006年2月1日 申請日期2004年7月26日 優(yōu)先權(quán)日2004年7月26日
發(fā)明者徐為人, 馬素珍, 周福軍, 華潔, 閻立萍, 林巳龍, 劉躍鵬 申請人:天津藥物研究院