專利名稱：蘆丁酯類化合物的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及化合物及其主要作用領(lǐng)域，具體的，涉及抗艾滋病的藥物化合物，包括口服、外用、牙周給藥、關(guān)節(jié)用藥以及注射等給藥途徑。
背景技術(shù)：
被稱為“二十世紀(jì)瘟疫”的艾滋病在全球廣為傳播，至2002年底，全球感染上艾滋病毒者和患病者超過(guò)4200萬(wàn)。據(jù)我國(guó)政府公布的數(shù)據(jù)，全國(guó)已超過(guò)100萬(wàn)人感染上了艾滋病毒。因此，艾滋病的防治已成為一個(gè)國(guó)際性的重大課題。
齊多夫定(AZT)1987年被美國(guó)FDA批準(zhǔn)上市以來(lái)，已有23個(gè)藥物上市，這些藥物都是人工合成的化學(xué)藥物。從天然產(chǎn)物中尋找治療艾滋病的新藥正方興未艾。目前從植物、海洋生物、微生物、等的產(chǎn)物中，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了一些化合物具有抑制HIV的活性。蘆丁就是其中之一，其為植物槐樹的水提取物，經(jīng)化學(xué)修飾得到的蘆丁酯類化合物，具有較強(qiáng)的抗艾滋病毒作用。
本實(shí)驗(yàn)在中科院昆明動(dòng)物研究所分子與細(xì)胞免疫學(xué)實(shí)驗(yàn)室進(jìn)行，用多種國(guó)際上通用的研究化合物抗HIV活性的檢測(cè)方法，用不同的病毒菌株和不同的HIV感染的敏感細(xì)胞，檢測(cè)了這些蘆丁酯類化合物的抗HIV活性，每次實(shí)驗(yàn)都以FDA批準(zhǔn)的國(guó)際通用抗HIV有效藥物AZT作對(duì)照。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明提供一種涉及抗艾滋病毒(HIV)藥物蘆丁酯類化合物，其分子式為 其中X是所有可能的酸根，A是所有可能的陽(yáng)離子，R是H或者XA。
本發(fā)明所說(shuō)的酸根，包括有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸，通常選用SO42-，PO43-，CH3COO-等。
本發(fā)明所說(shuō)的陽(yáng)離子，通常選用Li+，K+，Na+，Ca2+等。
本發(fā)明的特點(diǎn)是可從天然產(chǎn)物中獲得，具有較強(qiáng)的抗艾滋病毒作用，易于制備，價(jià)格低廉，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
具體實(shí)施例方式
本發(fā)明將結(jié)合實(shí)施例作進(jìn)一步的說(shuō)明。
實(shí)施例一 本發(fā)明化合物的一種制備方法以蘆丁硫酸酯為例，其制備方法如下1、取植物槐樹的水提取物；2、經(jīng)吡啶及相應(yīng)的酸處理，選用氯磺酸處理，取濾液；3、濾液經(jīng)甲醇處理得沉淀，再用正丁醇萃取，取固體干燥即得。
實(shí)施例二 蘆丁磷酸酯(代號(hào)為P-12)的藥理作用1、蘆丁磷酸酯對(duì)淋巴細(xì)胞的毒性作用我們采用MTT的方法，以實(shí)驗(yàn)室T細(xì)胞系和正常人外周血單個(gè)核細(xì)胞(PBMC)為對(duì)象，測(cè)定了樣品對(duì)淋巴細(xì)胞的毒性作用，經(jīng)過(guò)多次實(shí)驗(yàn)，計(jì)算出IC50(50％inhibition concentration)[抑制50％的被測(cè)細(xì)胞生長(zhǎng)的化合物細(xì)胞毒性濃度]，結(jié)果報(bào)告如下。
(1)蘆丁磷酸酯(P-12)對(duì)C8166細(xì)胞的毒性作用具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表1，表1

(2)P-12對(duì)MT-2細(xì)胞的毒性作用具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表2，表2

(3)P-12對(duì)人PBMC的毒性作用具體數(shù)據(jù)見(jiàn)表3，
表3

2、蘆丁磷酸酯體外抗HIV-1的活性的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(1)合胞體形成抑制實(shí)驗(yàn)以噻唑藍(lán)(MTT)法測(cè)定化合物對(duì)實(shí)驗(yàn)室T細(xì)胞株C8166細(xì)胞的毒性，細(xì)胞病變(CPE)法測(cè)定該化合物對(duì)已適應(yīng)了實(shí)驗(yàn)室T細(xì)胞株的HIV-1IIIB誘導(dǎo)C8166細(xì)胞形成合胞體的抑制作用，計(jì)算出EC50，IC50及TI值[EC50(50％effectiveconcentration)為抑制合胞體形成達(dá)50％時(shí)的化合物濃度；IC50(50％inhibition concentration)為抑制50％的宿主細(xì)胞生長(zhǎng)的化合物細(xì)胞毒性濃度；TI為IC50/EC50的比值，即治療指數(shù)]，結(jié)果見(jiàn)下表4表4

(2)病毒抗原合成的抑制實(shí)驗(yàn)用測(cè)定P24抗原的方法，檢測(cè)被檢化合物對(duì)HIV-1IIIB急性感染的C8166細(xì)胞的病毒抗原合成的抑制作用，計(jì)算出EC50，IC50及TI值，結(jié)果見(jiàn)表5
表5

從以上可看出1、蘆丁磷酸酯對(duì)淋巴細(xì)胞的毒性作用小，對(duì)C8166、MT-2、PBMC的細(xì)胞毒性作用很弱，IC50值均在10mM左右，而AZT的IC50值在3μM左右，所以AZT對(duì)細(xì)胞的毒性比蘆丁磷酸酯對(duì)細(xì)胞的毒性要大3000倍；2、以合胞體形成抑制實(shí)驗(yàn)測(cè)定的蘆丁磷酸酯的EC50值分別為0.24μM、0.23μM、0.20μM，而AZT相應(yīng)的EC50值分別為0.08μM、0.07μM、0.07μM，蘆丁磷酸酯的EC50比AZT的EC50值大約3倍，蘆丁磷酸酯的治療指數(shù)TI值分別為42083、45652、53500，AZT的TI值分別為38750、44286、44286，所以蘆丁磷酸酯的治療指數(shù)和AZT的治療指數(shù)無(wú)明顯差異；3、病毒抗原合成抑制實(shí)驗(yàn)表明，蘆丁磷酸酯的EC50分別為14.29μM、17.15μM、18.02μM，而AZT的EC50為10.4μM，蘆丁磷酸酯的IC50為10.1mM，AZT的IC50為3.1mM蘆丁磷酸酯的治療指數(shù)分別是706.8、588.9、560.5，AZT的治療指數(shù)是298.1。所以蘆丁磷酸酯的治療指數(shù)(TI值)比AZT的治療指數(shù)大約2倍。
通過(guò)實(shí)驗(yàn)可以得出結(jié)論蘆丁酯類化合物是一種低毒有效的抗HIV化合物。
本發(fā)明通過(guò)以上描述和實(shí)施例進(jìn)行了說(shuō)明，以上描述為非限制性的，并不限制本發(fā)明的權(quán)利要求范圍。
權(quán)利要求
1.一種蘆丁酯類化合物，其分子式為 其中X是所有可能的酸根，A是所有可能的陽(yáng)離子，R是H或者XA。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘆丁酯類化合物，其特征是所說(shuō)的酸根，包括有機(jī)酸和無(wú)機(jī)酸，通常選用SO42-，PO43-，CH3COO-等。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘆丁酯類化合物，其特征是所說(shuō)的陽(yáng)離子，通常選用Li+，K+，Na+，Ca2+等。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的蘆丁酯類化合物，其特征是該類化合物可用于制備抗艾滋病毒的藥物。
5.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的蘆丁酯類化合物，其特征是制備藥物的制劑形式可選擇口服制劑、注射制劑、外用制劑。
6.根據(jù)權(quán)利要求1或4所述的蘆丁酯類化合物，其特征是所制備的藥物的給藥途徑包括口服、注射、外用、口腔內(nèi)牙周給藥、關(guān)節(jié)給藥。
全文摘要
本發(fā)明提供一種蘆丁酯類化合物，結(jié)構(gòu)式為其中X是所有可能的酸根；A是所有可能的陽(yáng)離子；R是H或者XA。本發(fā)明提供的化合物，具有較強(qiáng)的抗艾滋病毒作用，可用于制備抗艾滋病病毒的藥物。制備該藥物的制劑形式可選擇口服制劑、注射制劑、外用制劑。本發(fā)明的特點(diǎn)是可從天然產(chǎn)物中獲得，易于制備，價(jià)格低廉，適于工業(yè)化生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61K31/7048GK1657535SQ200410016489
公開(kāi)日2005年8月24日 申請(qǐng)日期2004年2月20日 優(yōu)先權(quán)日2004年2月20日
發(fā)明者陳憶庭, 王新蕾, 蔡君 申請(qǐng)人:浙江現(xiàn)代中藥與天然藥物研究院有限公司