一種特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品及其制備方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于生物化學(xué)領(lǐng)域，設(shè)及一種特殊醫(yī)學(xué)用途配方食品及其制備方法，W及 其制備醫(yī)療藥品的用途，尤其設(shè)及一種通過將乳清蛋白進(jìn)行酶解，制備得到的乳清蛋白膚， W及其制備方法和一種制備醫(yī)療藥品的用途。
【背景技術(shù)】
[0002] 乳源生物活性膚的研究始于1979年，德國的化anti等人通過酶解牛乳酪蛋白得到 了一些多膚產(chǎn)物，并證明它們具有類嗎啡活性，從此人們展開了生物活性膚方面的研究。經(jīng) 過近20年的探索，到目前為止，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)了多種乳源生物活性膚。國外對乳蛋白來源的ACE 抑制膚研究較為深入，尤其是日本對來源于乳清蛋白、酪蛋白和酸奶中的ACE抑制膚進(jìn)行了 較多的研究，取得了較大的進(jìn)展。國內(nèi)目前對此方面的研究剛剛起步。乳清蛋白是工業(yè)上生 產(chǎn)干酪或干酪素過程中的液態(tài)副產(chǎn)物乳清中的蛋白質(zhì)。它具有吸收率高、脂肪與糖類含量 極低，同時含有豐富的含硫氨基酸等特點(diǎn)，具有改善屯、血管、糖尿病、嬰兒營養(yǎng)、抗衰老、提 高免疫力等保健功能。乳清蛋白W其優(yōu)質(zhì)的蛋白質(zhì)組成，極高的生物利用價值和特殊的生 理功能，受到國際上的廣泛關(guān)注，在運(yùn)動營養(yǎng)、醫(yī)療保健和食品加工等方面的應(yīng)用前景廣 闊。
[0003] 目前對乳清蛋白研究主要集中在乳清蛋白成分分析、乳清多糖多膚的制備、酶解 工藝及抗氧化活性的研究上。乳清蛋白中含有大量不同活性的生物活性膚，運(yùn)些膚或自然 存在于乳清蛋白中或源于乳蛋白水解后的產(chǎn)物，由于其分子量較小，在小腸內(nèi)可W完整膚 段的形式被人體吸收。乳清蛋白經(jīng)蛋白酶水解，不僅能夠顯著改善其溶解性、穩(wěn)定性、乳化 性、起泡性能等，而且降解后產(chǎn)生的膚段更易于機(jī)體的吸收、轉(zhuǎn)運(yùn)和利用。此外，通過對乳清 蛋白的酶解能有效破壞一些致敏結(jié)構(gòu)，從而消除其致敏性，不會引起人體的免疫排斥反應(yīng)， 且具有多種特殊的生理活性功能。
[0004] 乳清蛋白經(jīng)蛋白酶酶解得到小分子乳清蛋白膚，乳清蛋白膚主要是由2-7個氨基 酸組成的多膚混合物，是一種多功能營養(yǎng)因子，具有免疫調(diào)節(jié)、抗血栓、抗高血壓、降膽固 醇、抗菌等多種生理活性功能，可制成天然降血壓藥、患者營養(yǎng)補(bǔ)劑、嬰幼兒食品、老年食 品、運(yùn)動食品和各種功能健康食品等，可廣泛應(yīng)用于食品和醫(yī)藥等行業(yè)。
[0005] 目前，乳源生物活性膚的制備主要采用酶解法，使用的蛋白水解酶W單一酶為主， 主要有膜蛋白酶、胃蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶等，而對于大多數(shù)乳蛋白 來源的生物活性膚的制備來說，單一酶法制備的生物活性膚含量低，分離和提純難度大。國 內(nèi)外也有一些關(guān)于復(fù)合蛋白酶水解乳清蛋白制取乳清蛋白膚的研究報道，但也主要是W上 述膜蛋白酶、胃蛋白酶、堿性蛋白酶、中性蛋白酶、木瓜蛋白酶的兩種或者多種酶聯(lián)合，期望 提高酶解效果及改善多膚的含量。然而，上述所有方法仍然存在操作繁瑣、起始乳清蛋白濃 度過低、活性膚產(chǎn)率低、成本高等缺陷。乳源生物活性膚的工業(yè)化生產(chǎn)還有一定的難度。
[0006] 發(fā)明的內(nèi)容
[0007] 為解決上述問題，本發(fā)明提供了一種特殊醫(yī)學(xué)用途醫(yī)療食品，其中包含質(zhì)量為乳 清蛋白膚的百萬分之一至萬分之一的葉酸和質(zhì)量為乳清蛋白膚千分之一至千分之五的煙 酸，分子量小于1000道爾頓的乳清蛋白膚達(dá)98% W上。
[0008] 為解決上述問題，本發(fā)明還提供了一種制備上述特殊醫(yī)學(xué)用途醫(yī)療食品的方法， 其特征在于包括W下步驟：
[0009] (1)制備質(zhì)量百分比為1%-25%的乳清蛋白懸液；
[0010] (2)向乳清蛋白懸液中加入質(zhì)量為乳清蛋白的百萬分之一至萬分之一的葉酸或千 分之一至千分之五的煙酸；
[0011] (3)向乳清蛋白懸液中加入復(fù)合蛋白酶進(jìn)行酶解；
[0012] (4)將復(fù)合蛋白酶滅活后濃縮；
[OOU] (5)將濃縮后的產(chǎn)物進(jìn)行噴霧干燥，即得復(fù)合乳清蛋白膚產(chǎn)品。
[0014] 其中，所述的乳清蛋白懸液的濃度優(yōu)選質(zhì)量百分比為5%-20%。
[0015] 其中，所述葉酸的濃度優(yōu)選十萬分之零點(diǎn)五至十萬分之五。
[0016] 其中，步驟(3)所述的復(fù)合蛋白酶的含量為乳清蛋白量的0.1% - 1%。
[0017] 其中，步驟(3)所述的復(fù)合蛋白酶由枯草桿菌蛋白酶(Bioprase SP-20)、酵母蛋白 酶Denazyme AP、木瓜蛋白酶、風(fēng)味蛋白酶、渡蘿蛋白酶、膜蛋白酶、中性蛋白酶、動物蛋白水 解酶、酸性蛋白酶和胃蛋白酶中的任意兩種或兩種W上組成。
[001引其中，所述的兩種復(fù)合蛋白酶的組成按照（1-5) :(5-1)的重量比例組成，優(yōu)選按照 (1-3) :(3-1)的重量比例組成，優(yōu)選按照（1-2) :(2-1)的重量比例組成。
[0019] 其中，步驟(3)的酶解的時間為1-10小時。
[0020] 為解決上述問題，本發(fā)明還提供了一種特殊醫(yī)學(xué)用途醫(yī)療食品用于治療精神障礙 的用途，具有抗焦慮的醫(yī)療用途。
[0021] 為解決上述問題，本發(fā)明還提供了一種上述特殊醫(yī)學(xué)用途的醫(yī)療食品或根據(jù)上述 方法制備的產(chǎn)品用于制備治療精神障礙的藥品的用途，尤其用于制備抗焦慮用途的藥品。
[0022] 本發(fā)明所設(shè)及的產(chǎn)品具有高活性，高吸收率，高營養(yǎng)，高安全性，無副作用的特點(diǎn)。 本發(fā)明設(shè)及的方法可使得乳清蛋白充分酶解，乳清蛋白膚產(chǎn)率高，制得的乳清蛋白膚主要 為由2~5個氨基酸組成的多膚混合物組成，非常易于機(jī)體吸收，產(chǎn)品活性較高，乳清蛋白的 充分酶解徹底破壞一些致敏結(jié)構(gòu)，從而進(jìn)一步降低其致敏性，降低乳清蛋白引起人體免疫 排斥反應(yīng)的可能性，且制備方法操作簡單，適于工業(yè)化生產(chǎn)的應(yīng)用。
【具體實(shí)施方式】
[0023] 下面將結(jié)合具體實(shí)施例對本發(fā)明作進(jìn)一步的闡述。但運(yùn)些實(shí)施例僅是范例性的， 并不對本發(fā)明的范圍構(gòu)成任何限制。本領(lǐng)域技術(shù)人員應(yīng)該理解的是，在不偏離本發(fā)明的精 神和范圍下可W對本發(fā)明技術(shù)方案的細(xì)節(jié)和形式進(jìn)行修改或替換，但運(yùn)些修改和替換均落 入本發(fā)明的保護(hù)范圍內(nèi)。
[0024] (一)測定方法介紹：
[0025] 1.膚分子量分布測定方法
[0026] 采用高效凝膠過濾色譜法測定分析所得乳清多膚的分子量及含量。
[0027] 測定儀器及方法：
[002引（1)色譜條件：色譜柱:TSKGEL2000SW X L(規(guī)格7.8mm X 300mm X Sum);流動相:S氣 乙酸：乙臘:水= 0.07:15:85;檢測波長:214nm;上樣量:2化レ流速:0.5mUmin。
[0029] (2)標(biāo)準(zhǔn)曲線的制作：用流動相將分子量標(biāo)準(zhǔn)品配成質(zhì)量濃度為5mg/mL的標(biāo)準(zhǔn)品 溶液，W相對保留時間為橫坐標(biāo)，分子量的對數(shù)為縱坐標(biāo)，作標(biāo)準(zhǔn)曲線。
[0030] (3)乳清多膚分子量分布的測定:取待測的乳清多膚樣品0.5mg，加流動相稀釋成 5mg/mL的溶液，微孔濾膜(0.45um)過濾后作供試品溶液。W面積歸一法計算含量;根據(jù)相對 保留時間，對照標(biāo)準(zhǔn)曲線，計算分子量。
[0031 ] 2.乳清蛋白水解度測定方法
[0032] (1)溶液中可溶性氮的測定方法(微量擴(kuò)散法）
[0033] 取乳清蛋白酶解澄清液5ml，加入Ig消化催化劑和IOml濃硫酸，在高溫下消化至黃 綠色后，取出冷卻至室溫，加水定容。然后取5ml加入到擴(kuò)散皿的外室，并在擴(kuò)散皿的內(nèi)室加 入2ml的棚酸溶液，向外室中加入4ml濃化0田容液，并迅速蓋上蓋片。在自然條件放置24h左 右后，用標(biāo)準(zhǔn)的鹽酸溶液滴定棚酸溶液至紫羅蘭色即可。
[0034] 含氮量N( % ) = (V2-V1) X NH X 0.014 X 稀釋倍數(shù)/樣品重量 X 100 %
[0035] 注；
[0036] Vi:空白所需鹽酸溶液體積(ml);
[0037] V2:滴定待測液耗用標(biāo)準(zhǔn)酸體積(ml);
[0038] NH:標(biāo)準(zhǔn)酸當(dāng)量濃度；
[0039] 0.0141ml當(dāng)量氮的克數(shù)。
[0040] (2)水解度的測定方法-S氯乙酸法
[0041 ] 取IOml酶解物中加入IOmlS氯乙酸，在水浴中加熱20min，然后在4000r/min轉(zhuǎn)速 下離屯、15min。
[0042]水解度通常的定義為：水解度（DH) =(被水解的膚鍵數(shù)/原料中的總膚鍵數(shù)）X 100%，也可W表示為水解度(DH) = (乳清蛋白經(jīng)酶解后的含氮量-空白試樣的含氮量)/(乳 清蛋白未經(jīng)酶解的含氮量-空白試樣的含氮量）
[00創(chuàng)（二)試驗(yàn)材料
[0044] 乳清蛋白采購自河南集美化工有限公司和紐西蘭乳品原料有限公司；胃蛋白酶 120萬u/g、膜蛋白酶250萬u/g(國藥集團(tuán)化學(xué)試劑有限公司）；渡蘿蛋白酶85萬u/g、木瓜蛋 白酶80萬u/g(廣西南寧龐博生物科技有限公司），中性蛋白酶200萬u/g(上海寶豐生化有限 公司）；枯草桿菌蛋白酶（Bioprase SP-20)、酵母蛋白酶Denazyme AP可從化gase QiemteX 購買;標(biāo)準(zhǔn)分子量試劑核糖核酸酶、人膜島素、人生長激素釋放抑制因子為中國藥品生物制 品檢定廣品。
[0045] (立)實(shí)施例
[0046] 實(shí)施例1
[0047] 稱取50g乳清蛋白，水化，配制成l.Owt%的乳清蛋白懸液，向乳清蛋白懸液中加入 質(zhì)量為乳清蛋白量的百萬分之一的葉酸及千分之五的煙酸，向乳清蛋白懸液中加入質(zhì)量為 乳清蛋白量的0.1%的膜蛋白酶和木瓜蛋白酶（按照2:1的重量比例組成）d45°C恒溫條件 下，在恒溫酶解罐中酶水解化后得完全透明溶液。經(jīng)檢測，乳清蛋白的水解度為36.5%，然 后將反應(yīng)體系乳清蛋白酶水解液迅速升溫至l〇〇°C并保持20min，使酶失活?？刂扑舛?，然 后將所得的乳清蛋白膚溶液濃縮、噴霧干燥，控制進(jìn)風(fēng)溫度190°C、出風(fēng)溫度95°C、進(jìn)料流量 40ml/min，得到粉末狀復(fù)合乳清蛋白膚產(chǎn)品。經(jīng)檢測，本實(shí)施例所制備的乳清蛋白膚含量 (W干基計)達(dá)98.5%;膚分子量分布范圍為:小于1000道爾頓的占99%。
[004引實(shí)施例2
[0049]稱取50g乳清蛋白，水化，配制成5.Owt%乳清蛋白懸液，向乳清蛋白懸液中加入質(zhì) 量為乳清蛋白量的十萬分之