專利名稱：由麥類植物制備葡萄糖水溶液的方法
由麥類植物制備葡萄糖水溶液的方法本發(fā)明涉及一種由麥類(Triticeae)谷物，例如黑麥、黑小麥，或尤其是小麥谷物 的淀粉組分制備葡萄糖水溶液的方法。本發(fā)明還涉及用于制備有機化合物的基于葡萄糖的 發(fā)酵方法，其中所制備的用于發(fā)酵的葡萄糖通過本發(fā)明方法由麥類谷物的淀粉組分制備。葡萄糖，尤其是葡萄糖水溶液是許多化學(xué)品和制備有機產(chǎn)品的發(fā)酵方法的基礎(chǔ)碳 源。例如，在發(fā)酵中，由所用微生物引起葡萄糖分子的代謝，由此使它們轉(zhuǎn)化為有價值的所 需有機產(chǎn)物。如此制備的有機產(chǎn)物的范圍例如包括低分子量揮發(fā)性化合物，如乙醇，脂族羧 酸，氨基酸，維生素，類胡蘿卜素，糖醇，糖酸和多元醇，以及酶和有機聚合物。取決于工藝條件和待生產(chǎn)的產(chǎn)物，這類通常已知的發(fā)酵工藝?yán)貌煌奶荚?。這 些碳源包括經(jīng)由甜菜糖蜜和甘蔗糖蜜的純蔗糖，源自淀粉水解產(chǎn)物的葡萄糖，還有甘油。在常規(guī)的由淀粉到葡萄糖的生產(chǎn)中，首先由天然淀粉源，如土豆，木薯，谷物，如小 麥、玉米、大麥、黑麥、黑小麥或稻分離淀粉，隨后通常通過酶促液化水解，隨后酶促糖化。在通過液化和糖化淀粉來生產(chǎn)葡萄糖中，所用材料通常為預(yù)純化的淀粉，即將天 然淀粉源如土豆木薯和谷物，如小麥、玉米、大麥、黑麥、黑小麥或稻分級為淀粉組分和非淀 粉組分，然后液化/糖化。在由麥類植物谷物(下文稱為麥類谷物)分離淀粉中的主要問題是分離谷蛋白。 與從玉米粒分離玉米淀粉的情況(其中在浸泡玉米粒的過程中谷蛋白與淀粉一起被萃取) 不同，來自麥類谷物的谷蛋白在浸泡過程中與谷物粘在一起并包圍淀粉。由麥類，尤其是小麥分離淀粉通常通過Martin方法或改變的Martin方法， 稱作糊狀物方法(batter method)進(jìn)行(為此參見J. R. Daniel等，“March and other Polysaccharides (淀粉禾口其他多糖)〃 ,UllmannsEncyclopedia of Industrial Chemistry,第5版，⑶-ROM)。在Martin方法中，首先通過干磨方法將麥類植物谷物研磨形 成面粉，其中分離掉大部分殼(husk)組分(糠)。隨后，用每重量份面粉為約0.5重量份的 水捏合面粉，以形成生面團(tuán)，在靜置時間之后，通過用水漂洗由其萃取淀粉組分。從如此得 到的淀粉懸浮液中分離殘留纖維和谷蛋白組分。糊狀物方法與上述方法的不同之處在于， 為了制備生面團(tuán)，每重量份面粉使用約1重量份水，隨后將生面團(tuán)懸浮于兩倍量的水中，并 通過篩分從該懸浮液中除去谷蛋白和殘留纖維組分。在兩種情況下，得到稀淀粉懸浮液，隨 后將其供入液化/糖化以制備葡萄糖。以此方式獲得非常純的葡萄糖。將分離的谷蛋白干 燥并以所謂的谷蛋白粉(vital gluten)銷售。然而，分離淀粉的現(xiàn)有技術(shù)方法較復(fù)雜且產(chǎn)生大量廢水。此外，在分離淀粉中產(chǎn)生 的副產(chǎn)物和廢產(chǎn)品，如蛋白質(zhì)(谷蛋白)，以及芽成分和纖維成分必須在進(jìn)一步加工之前干 燥，這需要顯著的能量消耗。此外，設(shè)備要求高，因此相應(yīng)的裝置需要很大的資金費用。另 一方面，由于谷物，尤其是小麥?zhǔn)侵匾牡矸墼?，因此并不缺乏提供由這些淀粉源得到適用 于發(fā)酵工藝的葡萄糖的更有利的替代的嘗試。為了可利用谷物的淀粉組分，原則上可將通過干磨制備的谷粉(其除了胚乳組 分(淀粉、脂肪、蛋白質(zhì)，即谷蛋白)外還通常含有來自殼的纖維組分)作為整體供入 酶促液化/糖化。以此方式獲得含水葡萄糖，其含有大量來自谷物非淀粉組分的不溶性固體。通過干磨谷物，隨后通過液化/糖化生產(chǎn)葡萄糖的工藝是已知的且例如描述 于“The Alcohol Textbook-Α reference for the beverage, fuel and industrial alcohol industries (醇教材-飲料、燃料和工業(yè)酒精工業(yè)參考書)‘‘，Jaques等(編 輯)，Nottingham Univ. Press 1995，ISBN 1-8977676-735，第 2 章，第 7-23 頁，以及 McAloon 等，“Determining the cost of producing ethanol from corn starch and lignocellulosic feedstocks (確定由玉米淀粉和木素纖維素原料生產(chǎn)乙醇的成本)〃， NREL/TP-580-28893, National Renewable Energy Laboratory，2000 年 10 月。通過將整個研磨材料糖化得到的葡萄糖在工業(yè)規(guī)模上迄今為止僅用于生產(chǎn)生物 乙醇。其原因為該方法固有的數(shù)個缺點首先，在如此產(chǎn)生的含水葡萄糖中的高百分?jǐn)?shù)的不 溶性成分的后果是葡萄糖水溶液的高粘度，甚至在低濃度的葡萄糖時也如此，此外含水葡 萄糖是假塑性的。結(jié)果是，在如此產(chǎn)生的含水葡萄糖中的葡萄糖的最大濃度通常限于30重 量％。雖然高葡萄糖濃度對通過發(fā)酵生產(chǎn)生物乙醇并不是必須的，或由于在發(fā)酵過程中形 成的乙醇的毒性，甚至對于發(fā)酵生物乙醇的生產(chǎn)是有問題的，葡萄糖的低濃度導(dǎo)致其他化 學(xué)品的生產(chǎn)中體積流量不希望地增加。此外，不溶性成分可對發(fā)酵具有不利作用，例如對于 氧氣轉(zhuǎn)移速率和/或用于發(fā)酵的微生物的氧氣需求具有不利作用。此外，這些固體使得隨 后的加工和通過發(fā)酵獲得的產(chǎn)物的分離明顯變得更困難。在通過厭氧發(fā)酵生產(chǎn)生物乙醇， 隨后通過蒸餾分離中，這些問題僅具有較小影響。此外，不利的是，在小麥中例如占小麥所 含組分的約20重量％的谷蛋白級分未被利用并額外污染了廢水料流。近年來，對通過干磨方法生產(chǎn)的葡萄糖在精細(xì)化學(xué)品的發(fā)酵生產(chǎn)的用途有各種報 道(參見WO 2005/1162 和WO 2007/(^8804)。描述于這些申請中的干磨方法并隨后液 化/糖化允許生產(chǎn)具有增加的糖濃度的含水葡萄糖，而不必分離存在于淀粉源中的不溶性 固體。然而，在某些情況下，使用以此方式生產(chǎn)的葡萄糖導(dǎo)致微生物繁殖被抑制或者延緩。如上所述，通過液化/糖化得自干磨法的整個研磨材料生產(chǎn)的含水葡萄糖不僅包 含可發(fā)酵的糖組分，還有大量不可發(fā)酵的不溶性固體。當(dāng)將這種含水葡萄糖用于發(fā)酵，以生 產(chǎn)生物乙醇或生產(chǎn)精細(xì)化學(xué)品時，這些固體通過了發(fā)酵方法，并因此增加了體積流量。在分 離發(fā)酵產(chǎn)物之后，它們保留為固體，必須將其處理或至少可將其用作動物飼料。然而，由于 不可發(fā)酵的一些成分本身為有價值產(chǎn)物，多個作者已經(jīng)報道了在發(fā)酵之前分離這些組分中 的一些或全部。其中在液化之后和糖化之前除去面粉的谷蛋白組分的各種方法已經(jīng)有描述(參 見US 4，287，304和CN 1173541)。申請人自己觀察發(fā)現(xiàn)，在液化淀粉階段分離不溶性組分 是有問題且復(fù)雜的，并且造成葡萄糖損失。沒有描述將這些方法用于麥類植物，如小麥谷物 的面粉。然而，尤其是在歐洲，除了玉米之外，尤其還有麥類植物，如小麥、黑麥和黑小麥?zhǔn)?令人感興趣的淀粉源。然而，迄今為止除了開頭所述的生產(chǎn)生物乙醇的方法外，僅描述了其 中將麥類谷物的淀粉組分預(yù)純化的那些方法。本發(fā)明的目的是提供一種由麥類谷物生產(chǎn)葡萄糖含量為至少32重量％，尤其是 至少或高于35重量％的濃縮含水葡萄糖的方法，該方法不具有現(xiàn)有技術(shù)的缺點。所得葡萄 糖尤其應(yīng)不僅適用于生產(chǎn)生物乙醇，而且首先還應(yīng)適用于由其生產(chǎn)各種精細(xì)化學(xué)品。該方 法尤其應(yīng)允許聯(lián)合得到產(chǎn)物谷蛋白而沒有大的葡萄糖損失。
這些和其他目的通過下文所述的方法實現(xiàn)。因此，本發(fā)明涉及一種由麥類植物谷物的淀粉組分生產(chǎn)葡萄糖含量為至少32重 量％的葡萄糖水溶液的方法，其包括如下步驟a)將谷物分級干磨，其中將谷物分離為包含淀粉的胚乳級分(面粉)和糠級分；b)將胚乳級分轉(zhuǎn)化為含水懸浮液；c)將含水懸浮液的淀粉組分液化和酶促糖化，得到含水葡萄糖，其中含水葡萄糖 的淀粉含量至少30重量％ ；其中使存在于胚乳級分中的谷蛋白部分從步驟C)中得到的含水葡萄糖中貧化和 /或從進(jìn)行步驟c)之前的胚乳級分的含水懸浮液中貧化。本發(fā)明方法具有許多優(yōu)點。首先，通過本發(fā)明方法生產(chǎn)葡萄糖水溶液的裝置資源 遠(yuǎn)小于常規(guī)方法中的裝置資源，并且通過本發(fā)明方法生產(chǎn)葡萄糖水溶液所需的能量消耗遠(yuǎn) 小于常規(guī)方法中所需的能量消耗。第二，可通過本發(fā)明方法得到的葡萄糖特別適合用作生 產(chǎn)化學(xué)品的發(fā)酵方法中的碳源。不僅其比液化/糖化整個研磨材料獲得的葡萄糖溶液顯著 適合，而且在許多微生物的情況下，與純葡萄糖或可通過液化和糖化純淀粉得到的葡萄糖 相比，該碳源導(dǎo)致用于發(fā)酵的許多微生物的更好生長和/或基于所用葡萄糖導(dǎo)致更高的產(chǎn) 量。此外，借助本發(fā)明方法可生產(chǎn)具有高葡萄糖濃度的葡萄糖溶液?？筛鶕?jù)本發(fā)明獲得的 葡萄糖的粘度性能顯著優(yōu)于通過液化/糖化整個研磨材料生產(chǎn)的葡萄糖的那些性能。術(shù)語“糠”或“殼”應(yīng)理解為指麥類谷物的硬外殼，果皮(通常為谷物的< 10重 量％)?！翱方M分”或“殼組分”為其片段或部分。“糠級分”或“殼級分”基本包含糠或殼級 分，但也可包含谷物的其他成分，尤其是部分胚乳。術(shù)語“胚乳”理解為指主要包含淀粉的麥類谷物部分(通常為谷物的70-85重 量％ )?！芭呷榧壏帧被景呷椴糠?，但是也可包含其他組分，例如部分糠。術(shù)語“谷蛋白”應(yīng)理解為指麥類谷物的蛋白質(zhì)組分。蛋白質(zhì)組分基本位于胚乳中。 麥類谷物中的蛋白質(zhì)比例顯著取決于各麥類植物的類型和品種，通?；谂呷闉?-13重 量％，以及基于整個谷物為約8-20重量％。通過本發(fā)明方法生產(chǎn)的葡萄糖溶液具有以其他方式生產(chǎn)的葡萄糖溶液所不具備 的特征組成。因此，它們是新的并且同樣是本發(fā)明的主題。在本發(fā)明方法中，使胚乳級分的谷蛋白部分貧化。所述貧化不僅可在進(jìn)行步驟C) 之前，即在步驟c)中液化之前，而且也可從步驟C)中得到的葡萄糖中，即在步驟C)中糖化 之后進(jìn)行。在優(yōu)選實施方案中，從步驟c)中得到的葡萄糖中分離至少子量(subquantity)的 谷蛋白(作為另一步驟d))。從葡萄糖中貧化的谷蛋白的量基于在本發(fā)明方法中貧化的谷 蛋白的總量優(yōu)選為至少30重量％，尤其是至少40重量％，如30-100重量％，尤其是40-100重量％。同樣可以在進(jìn)行步驟C)之前貧化谷蛋白，即從胚乳級分的含水懸浮液中貧化谷 蛋白。然而，此時通常從供入步驟c)的胚乳級分中僅除去子量的谷蛋白。在步驟c)之前 貧化的谷蛋白的量基于在本發(fā)明方法中貧化的谷蛋白的總量通常不超過70重量％，尤其 是60重量％，例如基于在本發(fā)明方法中貧化的谷蛋白的總量為10-70重量％，尤其是20-60 重量％。因此，根據(jù)另一實施方案，在進(jìn)行步驟c)之前貧化部分谷蛋白并且從步驟c)中獲得的含水葡萄糖中進(jìn)行谷蛋白的貧化。在進(jìn)行步驟C)之前分離的情況下，可在本發(fā)明方法中獲得的谷蛋白組分可以所 謂的谷蛋白粉(vital gluten)利用和銷售。與之相反，在本發(fā)明方法中，在從葡萄糖中分離的過程中得到的谷蛋白組分是新 的并且其顯著之處在于特定量，這使其區(qū)別于其他方法中獲得的谷蛋白組分并且使其適用 于許多應(yīng)用。因此，本發(fā)明還涉及在步驟d)中產(chǎn)生的谷蛋白。步驟a)在本發(fā)明方法的步驟a)中，對麥類谷物進(jìn)行分級干磨。分級研磨用于粉碎麥類谷 物并用于將麥類谷物分離為其組分，即為胚芽、胚乳和殼組分(下文中也稱為糠組分)。麥類植物的谷物通常為來自小麥、黑麥或黑小麥的谷物，或這些谷物的混合物。優(yōu) 選來自小麥的谷物，尤其是來自軟質(zhì)小麥品種的那些。然而，硬質(zhì)小麥品種也是合適的。根據(jù)本發(fā)明，大部分，即至少70重量％，尤其是至少80重量％的存在于麥類谷物 中的殼組分在該階段中與麥類谷物的剩余組分，即胚乳分離，以形成高纖維的糠級分。胚乳 級分基本包含麥類谷物的淀粉和蛋白質(zhì)組分，以及糠級分的剩余部分?？芳壏钟只景?， 即包含至少60重量％，尤其是至少80重量％的存在于麥類谷物中的殼組分，以及至多25% 的胚乳級分。基于胚乳級分的組分總量，優(yōu)選胚乳級分在貧化之后除了水之外包含不超過20 重量％，尤其是不超過10重量％，特別優(yōu)選不超過5重量％，特別是不超過2重量％或不超 過1.5重量％糠組分(粗纖維)，如0. 1-20重量％，經(jīng)常0. 1-10重量％，尤其是0. 2-5重 量％，特別優(yōu)選0. 3-2重量％，或0. 3-1. 5重量％。為了避免淀粉損失，可將糠級分供入分離胚乳組分的另一后處理，將胚乳組分再 循環(huán)至本發(fā)明方法。或者，可將糠級分供入其他用途，以及僅將胚乳級分和任選少量糠，即 基于存在于麥類谷物中的糠組分低于20重量％的糠供入步驟b)中的液化/糖化。對于將麥類谷物在步驟a)中進(jìn)行分級干磨，麥類谷物可以輸送來的那樣使用。然 而，優(yōu)選使用清潔的麥類谷物。清潔工藝從麥類谷物中不僅除去了粗顆粒雜質(zhì)，如木片、植 物部分如莖或葉，小石頭，碎玻璃，螺絲等，還除去了細(xì)碎顆粒雜質(zhì)如碎麥類谷物，其他種 子，石子和沙。分離可以本身已知的方式，例如通過篩選(sieving)、過篩(sifting)或這些 措施的組合進(jìn)行。此時，通常按照如下程序，其中首先從麥類谷物和細(xì)碎顆粒雜質(zhì)中分離粗 顆粒，然后從麥類谷物中分離細(xì)碎顆粒。粒度至少大于15-20mm限度的那些認(rèn)為是粗顆粒。 最大粒度不超過1. 5-3. 5mm的值的那些認(rèn)為是細(xì)碎顆粒。由于細(xì)碎雜質(zhì)不僅包括沙和粉組分，而且包括碎麥類谷物，有利的是對細(xì)碎雜質(zhì) 再進(jìn)行分級。為此，將細(xì)碎雜質(zhì)分離為基本包含沙和其他粉狀材料的最大粒度為0. 5-2. 5mm 的第一級分，和基本包含小或碎麥類谷物的粒度為至少2. 5-3. 5mm的略微較粗級分。后一 級分又可返回到清潔谷物中以減少淀粉損失。第一級分可加入源自分級的糠級分中。隨后對已經(jīng)如此清潔的麥類谷物進(jìn)行分級干磨。分級干磨以本身已知的方式進(jìn) 行。干磨通常劃分為第一研磨階段，其中除去殼并分離為胚乳級分和糠級分，以及第二研磨 階段，其中將胚乳級分研磨成所需粒度。對本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員清楚的是，分離通常并不完 全，而是僅進(jìn)行至達(dá)到級分的所需純度，即分離掉胚芽時，胚乳級分通常仍包含至多30重 量％，優(yōu)選不超過20重量％的存在于麥類谷物中的殼組分。
在第一階段(經(jīng)常也稱作脫殼或脫糠)，例如通過滾筒磨機粉碎小麥谷物。第一階 段可作為一步研磨步驟(單程研磨)進(jìn)行且優(yōu)選以多個研磨步驟進(jìn)行。在一步研磨步驟之 后，將研磨的材料以本身已知的方式分離為胚乳級分和糠級分。在該情況下，程序通常如下 進(jìn)行，其中首先進(jìn)行分離為胚乳級分以及糠級分，該糠級分仍包含部分胚乳級分。在第二個 研磨步驟中，將被分離出來且包含部分胚乳級分的糠級分分離為其組分。由于研磨材料的 胚乳組分通常具有比研磨材料的糠級分顆粒小的粒度，第一分離可以簡單方式通過篩分方 法或通過過篩進(jìn)行。自然，各分離步驟可包含這些措施的組合。已經(jīng)證明對于步驟a)有利的是谷物具有一定的水分含量，其基于谷物的總重量 通常為10-30重量％，經(jīng)常是10-25重量％，尤其是13-20重量％。因此，在干磨之前或之 中，使不具有所需水分含量的谷物與一定量的水混合。在加入水之后，在進(jìn)一步加工之前優(yōu) 選將小麥儲存0. 5-36小時，由此使得粘附在表面的水分可擴(kuò)散入谷物內(nèi)部。因此，步驟a) 中的研磨通常在基于所用小麥谷物質(zhì)量為10-30重量％，經(jīng)常10-25重量％的水存在下進(jìn) 行。優(yōu)選水的量為13-20重量％，尤其是14- 重量％。水優(yōu)選在第一個研磨階段之前加 入，但也可在第一個研磨階段之中加入。在第一個研磨階段的多步程序中，也可在各研磨步 驟之間再調(diào)節(jié)水含量。也可任選以蒸汽形式加入水。熟練技術(shù)人員可通過分析所用小麥谷 物，以及在各步驟中得到的研磨材料而容易地測定水含量并且可容易地確定所需的額外水 量。在第二研磨階段中進(jìn)一步研磨胚乳級分。在該情況下，纖維組分可以上述方式再 被分離。典型的是2-4個階段的方法。多段的特征導(dǎo)致各級分的較高純度和胚乳級分的 較高淀粉產(chǎn)量。在該情況下，將胚乳級分調(diào)至對液化/糖化工藝最有利的粒度。該步驟經(jīng) 常也稱作精磨。在精磨中，通常將胚乳級分研磨至0. 01-1. 5mm的平均粒徑，優(yōu)選研磨至 0. 025-lmm,特別是0. 05-0. 6mm的粒度。平均粒徑是基于質(zhì)量的且以本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員 熟知的方式，優(yōu)選借助篩分析測定。已經(jīng)證明尤其有利的是，至少80重量％，尤其是至少90 重量％，特別是至少95重量％的顆粒具有不超過0. 4mm的直徑。在多段精磨程序的情況 下，各研磨步驟之后優(yōu)選分離為其尺寸大于所需最大尺寸的顆粒和其尺寸不超過所需最大 限度的顆粒。然后，僅將過大的顆粒供入另一研磨階段。類似的是，可將糠級分進(jìn)一步研磨以分離出粘附其上的胚乳部分，其中進(jìn)行胚乳 組分和糠組分的分離。可將在該工藝中出現(xiàn)的富胚乳級分再循環(huán)入第一研磨階段的胚乳級 分中。返回優(yōu)選在精磨之前或之中進(jìn)行。如此分離的級分通常具有下文所述的組成?？芳壏滞ǔ＞哂腥缦铝康南铝薪M分 (基于全部干物質(zhì))粗蛋白8-18重量％，淀粉8-20重量 ％，粗纖維25-65重量％，粗脂肪2-10重量％，粗灰分3-12重量％。糠的水分含量通常為5-20重量％，優(yōu)選8和14重量％。胚乳級分通常具有如下量的下列組分(基于全部干物質(zhì))粗蛋白3-30重量％，優(yōu)選5-15重量％，
淀粉50-90重量％，優(yōu)選55-85重量％，粗纖維0. 1-20重量％，優(yōu)選0. 1-10重量％，尤其是0.2-5重量％，特別是0.3-2重量％或0. 3-1. 5重量％，粗脂肪0. 1-5重量％，優(yōu)選0. 2-2重量％，粗灰分0-15重量％，優(yōu)選0. 1-3重量％。胚乳的水分含量通常為5-20重量％，優(yōu)選8-14重量％。對于糠和胚乳級分，僅報道了通過其典型分析而給出的與飼料相關(guān)的那些組分。 在該情況下，對粗蛋白所給的值包括乘以因子6. 25的總凱氏(Kjeldahl)氮，換言之，除了 蛋白質(zhì)之外，例如還包括其它游離氨基酸、核酸和無機氮。對粗纖維所給的值包括作為其主 要成分的纖維素和半纖維素，還檢測到殼物質(zhì)如木素。粗脂肪的值包括例如溶于脂肪溶劑 如石油醚或己烷的所有物質(zhì)如甘油三酯、游離脂肪酸和磷脂。粗灰分包括在550°C下加熱較 長時間之后剩下的所有無機組分。它們基本為呈氧化物和鹽形式的礦物質(zhì)。除了單獨分析 的淀粉，非淀粉多糖如戊聚糖通過所選分析技術(shù)并不包括或僅不準(zhǔn)確地包括。本文所用的名稱粗蛋白、粗纖維組分、粗脂肪和粗灰分對熟練技術(shù)人員是已知 的并且例如在下述文獻(xiàn)中定義Naumann，C.，Bassler, R. , 1976. VDLUFA-Methodenbuch, 第 3 卷，Die chemische Untersuchung von Futtermitteln[German Association of Agricultural Analytical and Research Institutes (VDLUFA) Method Book,第 3 卷，飼 料的化學(xué)分析](活頁版，具有1983、1988、1993、1997和2004增補版)，VDLUFA-Verlag, Darmstadt，德國[編輯了德國的與飼料評價相關(guān)的所有參數(shù)/方法]。步驟b)然后，將所得的在下文中也稱作面粉的研磨材料轉(zhuǎn)化為含水懸浮液，所述研磨材 料處理基本包含胚乳級分以及因此的淀粉組分。根據(jù)本發(fā)明的第一個實施方案，遵循以下程序使全部量的研磨材料與含水液體， 如淡水，再循環(huán)工藝水，例如來自隨后發(fā)酵或蒸發(fā)的再循環(huán)工藝水，或與這些液體的混合物 混合，其中得到淀粉含量為至少30重量％的含水懸浮液。該程序經(jīng)常也稱為漿料化。優(yōu)選選擇面粉的量，以使懸浮液基于懸浮液(漿料)總重量包含30-55重量％， 優(yōu)選32-50重量％，非常特別優(yōu)選35-45重量％淀粉。由于，通常Ikg淀粉在液化/糖化 工藝中產(chǎn)生> 1.0至1. Ikg單糖、二糖和寡糖，因此，在糖化之后，單糖、二糖和/或寡糖在 所得葡萄糖中的總濃度為至少320g/kg，經(jīng)常> 320至600g/kg，優(yōu)選330_500g/kg，尤其是 350-495g/kg,特別是380-495g/kg。在該情況下，基于單糖、二糖和/或寡糖的總量，葡萄糖 通常占至少80重量％，尤其是至少90重量％。通常選擇所用水的溫度，以使懸浮液的溫度為30-53°C，優(yōu)選40_50°C，非常特別 優(yōu)選44-48 °C。優(yōu)選不超過53 °C的溫度，以防止淀粉不希望的膠凝化。面粉懸浮液可不連續(xù)或連續(xù)制備，并且步驟C)中所需的任何用于調(diào)節(jié)PH的助劑 如氫氧化鈣和/或硫酸以及液化酶可預(yù)先與含水液體混合，或可單獨加入面粉/水混合物 中。此處可以任何順序加入。在不連續(xù)生產(chǎn)面粉懸浮液的情況下，可使用任何類型的混合 反應(yīng)器。在連續(xù)生產(chǎn)的情況下，通常使用緩慢或快速的連續(xù)混合器。在該實施方案中，在步驟C)中的糖化之后將谷蛋白貧化。根據(jù)本發(fā)明的第二實施方案，在糖化之前將谷蛋白貧化。貧化通常僅以步驟C)中使用的胚乳級分的子量進(jìn)行，因此谷蛋白存在于步驟c)中，并在步驟C)之后進(jìn)行進(jìn)一步的 谷蛋白貧化。谷蛋白的貧化通常以類似于開頭所述的方法，如糊狀物方法或Martin方法進(jìn)行。根據(jù)優(yōu)選實施方案，i)將子量的胚乳級分，通常20-70%，尤其是30-60%轉(zhuǎn)化為淀粉含量小于30重 量％，通常20至< 30重量％，如20- 重量％的胚乳級分的稀含水懸浮液，ii)從該懸浮液中貧化谷蛋白組分，優(yōu)選直至至少70%，尤其是至少80%，特別是 至少90%的貧化度，其中得到貧谷蛋白的胚乳級分的稀含水懸浮液，和iii)將另一胚乳級分懸浮在步驟ii)中獲得的含水懸浮液中，以使所得懸浮液的 淀粉含量為至少30重量％。在步驟i)中，程序通常如下進(jìn)行將所需子量與約0.8-1. 1重量份水性液體，如新 鮮水，再循環(huán)工藝水，如來自隨后發(fā)酵或蒸發(fā)的再循環(huán)工藝水，或與這些液體的混合物一起 捏合，以形成生面團(tuán)。該生面團(tuán)包含胚乳級分的淀粉和谷蛋白組分。任選在短的靜置段(通 ?？蔀?0分鐘至1小時)之后，將生面團(tuán)懸浮在上述水性液體中。液體量通常為1. 7-3重 量份/1重量份生面團(tuán)。通常通過篩分從懸浮液中基本貧化或除去谷蛋白組分。隨后，可任 選進(jìn)行細(xì)篩分以除去纖維組分。或者，所需子量可與約0. 4-0. 6重量份水性液體，如新鮮水，再循環(huán)工藝水，如來 自隨后發(fā)酵或蒸發(fā)的再循環(huán)工藝水，或與這些液體的混合物一起捏合，以形成生面團(tuán)。任選 在短的靜置段(通常可為10分鐘至1小時)之后，通過用上述水性液體處理以及機械能的 作用，如通過捏合而從生面團(tuán)中洗出貧谷蛋白的淀粉級分。隨后，可任選進(jìn)行細(xì)篩分以除去 剩余的谷蛋白和纖維組分。在兩種情況下，均獲得胚乳級分的稀的貧谷蛋白的含水懸浮液，其淀粉含量通常 小于30重量％，通常為20-30重量％。隨后通過加入在步驟a)中獲得的胚乳級分(面粉) 以得到淀粉含量為至少30重量％的胚乳級分的含水懸浮液的方式混合該稀懸浮液。面粉 的量優(yōu)選以使得懸浮液基于懸浮液的總重量為30-55重量％，優(yōu)選32-50重量％，非常特別 優(yōu)選35-45重量％淀粉的方式而選擇。步驟iii)中的懸浮液可以與生產(chǎn)第一個實施方案的面粉懸浮液相似的方式而生 產(chǎn)，其中步驟c)中所需的任何用于調(diào)節(jié)pH的助劑如氫氧化鈣和/或硫酸以及液化酶可預(yù) 先與稀含水懸浮液混合，或可單獨加入面粉懸浮液中。此處加入順序是任意的。步驟c)然后使步驟b)中生產(chǎn)的懸浮液經(jīng)受酶促液化和糖化，其中使胚乳級分的淀粉組 分水解為葡萄糖。在第一個步驟c. 1)中，進(jìn)行懸浮液中的淀粉組分的液化，其中使淀粉組 分通常消化或水解以形成具有4-20，尤其是8-12個葡萄糖單元的糖鏈。該步驟在下文中也 被稱作液化。液化可通過加入酶而常規(guī)進(jìn)行。該方法由開頭引用的現(xiàn)有技術(shù)，如開頭引用 白勺“The Alcohol Textbook-Α reference for the beverage, fuel and industrial alcohol industries (醇教材-飲料、燃料和工業(yè)酒精工業(yè)參考書)〃，第2章，第7_23頁 已知。原則上，所有淀粉液化酶可用于液化面粉中的淀粉部分，尤其使用α -淀粉酶(酶分類EC 3.2. 1. 1)，例如可由地衣芽孢桿菌(Bacillus lichenformis)或嗜熱脂肪芽孢桿 菌(Bacillus staerothermophilus)得到的α -淀粉酶，尤其是就生物乙醇生產(chǎn)而言，用 于液化通過干磨方法得到的液化材料的那些酶。適用于液化的α-淀粉酶也可市購，例如 可以iTermamyl 120 L，類型L購自Novozymes ；或以Spezyme購自Genencor。也可將各種 α -淀粉酶的組合用于液化。漿料中的酶濃度基于淀粉含量通常為0. 01-0. 4重量％，優(yōu)選 0. 02-0. 3重量％，經(jīng)常0. 03-0. 2重量％，非常特別優(yōu)選0. 04-0. 1重量％。另外，任選進(jìn)一步加入木聚糖酶。木聚糖酶的用量通常為至多2.0重量％ (基 于所用淀粉)，如0. 01-2重量％，經(jīng)常0. 02-1重量％，優(yōu)選0. 05-0. 5重量％。例如可以 Shearzyme 500L(Novozymes A/S)購得的這類酶降低了液化和糖化過程中淀粉懸浮液的 粘度和最終的葡萄糖溶液的粘度。尤其當(dāng)本發(fā)明方法在工業(yè)上進(jìn)行時，經(jīng)常僅需少量的木 聚糖酶，且因此用于這類方法中的木聚糖酶的用量基于所用淀粉可為0. 02-0. 5重量％，尤 其是0. 05-0. 2重量％。有利的是，選擇淀粉液化酶和面粉的量，以使足以降低膠凝過程中的粘度，從而可 例如借助攪拌器而有效混合懸浮液。優(yōu)選反應(yīng)混合物在膠凝過程中的粘度最大為20 -S, 特別優(yōu)選最大為15 · s，非常特別優(yōu)選最大為8 *s。粘度通常用Haake粘度計，使用M5 測量體系的Roto Visko RV20類型和MVDIN測量裝置在50°C的溫度和200s—1的剪切速率 下測量。液化經(jīng)常在至少一種鈣鹽存在下進(jìn)行。此時，漿料中的鈣濃度通過加入鈣鹽而通 常調(diào)節(jié)至10-200ppm，優(yōu)選15-100ppm，非常特別優(yōu)選20-60ppm。然而，鈣離子的存在并不是 強制的，已知用于液化和糖化的一系列液化酶在鈣不存在下也產(chǎn)生良好的轉(zhuǎn)化率和產(chǎn)率， 因此，此時可不加入鈣鹽。為確保淀粉液化酶的最佳活性，液化優(yōu)選至少有時在液化酶的最佳PH下進(jìn)行，經(jīng) 常在略微酸性范圍的pH下，通常在4. 0-7. 0，優(yōu)選5. 0-6. 5，特別優(yōu)選5. 3-6. 0下進(jìn)行。pH 調(diào)節(jié)通常在液化開始之前或開始時進(jìn)行；通常在液化過程中監(jiān)測該PH以及任選調(diào)節(jié)。優(yōu)選 用稀無機酸如HCl、HN03W2SO4或H3PO4,有機酸如乙酸，堿金屬氫氧化物如NaOH或Κ0Η，堿土 金屬氫氧化物如氫氧化鎂或氫氧化鈣調(diào)節(jié)PH。優(yōu)選用氫氧化鈣和/或硫酸調(diào)節(jié)pH。為了液化，將步驟b)中生產(chǎn)的懸浮液優(yōu)選在高于淀粉膠凝溫度的溫度下加熱。 通常選擇80-120°C，優(yōu)選90-115°C，特別優(yōu)選95-110°C的溫度，其中溫度優(yōu)選比膠凝溫度 (小麥淀粉的膠凝化溫度)高至少漲，尤其是10K，特別優(yōu)選至少20K，例如10-80K，尤其是 20-60K。液化也可在膠凝化溫度之下，例如使用WO 2004/113551所述的酶或酶組合進(jìn)行。在用于液化淀粉部分的優(yōu)選實施方案中，首先通過弓I入直接蒸汽將漿料加熱至高 于淀粉膠凝化溫度的溫度。通常加熱至比各膠凝化溫度高至少10K，尤其是至少20K，例如 10-80K，尤其是20-60K的溫度。優(yōu)選將懸浮液加熱至80-120°C，尤其是90_115°C，特別是 95-110°C的溫度。用于加熱的直接蒸汽通常為具有至少105°C，尤其是至少110°C，例如110-210°C 的溫度的過熱蒸汽。然而，也可使用飽和蒸汽。優(yōu)選將蒸汽在超計大氣壓下引入懸浮液。因 此，蒸汽優(yōu)選具有至少1.5巴，例如1.5-16巴，尤其是2-12巴的壓力。將直接蒸汽引入漿料的進(jìn)行方式通常使得在過壓(overpressure)下，優(yōu)選1_10 或11巴，尤其是1.5-5巴的過壓和優(yōu)選在高速下將蒸汽引入懸浮液中。由于引入蒸汽，懸浮液立即加熱至高于90°C的溫度，也就是說高于膠凝化溫度的溫度。用直接蒸汽加熱優(yōu)選在連續(xù)裝置中進(jìn)行，漿料在特定的進(jìn)料壓力下連續(xù)供入其 中，該壓力是懸浮液粘度、進(jìn)料速率和裝置幾何形狀的結(jié)果，并且在懸浮液的進(jìn)料區(qū)中，熱 蒸汽經(jīng)由可調(diào)節(jié)的噴嘴在基于進(jìn)料壓力的過壓下供入裝置中。由于蒸汽在過壓下供入，不 僅加熱了懸浮液，而且機械能也引入了該體系中，這促進(jìn)了面粉顆粒的進(jìn)一步混合，導(dǎo)致特 別均勻的能量輸入，因此導(dǎo)致面粉中的顆粒狀淀粉顆粒特別均勻的膠凝化。這些裝置的幾 何形狀通常為管式。蒸汽優(yōu)選沿著管式裝置的縱軸引入。懸浮液通常相對于蒸汽流以通常 不超過50°的低角度(shallow angle)供入。可調(diào)節(jié)噴嘴通常具有圓錐幾何形狀并且在蒸 汽流動方向逐漸變細(xì)。將設(shè)置在縱向可移動棒上的針或圓錐設(shè)置在噴嘴內(nèi)。該針或圓錐與 噴嘴的圓錐形成間隙。通過縱向轉(zhuǎn)移針或棒，可以簡單方式調(diào)節(jié)間隙尺寸和因此的噴嘴開 口的橫截面積，由此可以簡單方式調(diào)節(jié)蒸汽的引入速率。此外，這些裝置通常具有混合管，在引入蒸汽之后向混合管中輸送入懸浮液，并且 將懸浮液排出裝置。該混合管通常設(shè)置在引入蒸汽的方向上?；旌瞎芎蛧娮焱ǔＰ纬奢斔?懸浮液的間隙。經(jīng)由該間隙，額外的剪切力在輸送過程中作用于懸浮液上，這增加了引入懸 浮液的機械能量?；旌瞎芸杀辉O(shè)置為在縱向上移動。通過移動混合管，可以簡單方式調(diào)節(jié) 間隙開口尺寸和因此的裝置中的壓降。這類裝置由現(xiàn)有技術(shù)已知其名稱為噴射式蒸煮鍋，例如顯示于上文引用 的〃 The Alcohol Textbook(醇教材)〃，第2章，

圖13中的裝置，并且可市購，例如以 HYDR0HEATER.⑧或 JetCooker 購自美國 Hydro Thermal Corp. Waukesha WI。通常隨后將通過直接蒸汽加熱的漿料輸送入后反應(yīng)區(qū)，以繼續(xù)淀粉組分的膠凝 化。同時，液化酶開始水解淀粉。后反應(yīng)區(qū)中盛行的過壓通常為2-8絕對巴。后反應(yīng)區(qū)中 的溫度通常為80-120°C，尤其是90-115 。取決于懸浮液溫度，在該后反應(yīng)區(qū)中的停留時 間可為1-30分鐘，經(jīng)常2-20分鐘，尤其是5-10分鐘。后反應(yīng)區(qū)通常具有管式或柱幾何形 狀。在一個實施方案中，后反應(yīng)區(qū)具有垂直排列的柱的幾何形狀。在該情況下，將離開蒸汽 處理裝置的懸浮液施加于柱的上部區(qū)域并在底部區(qū)域取出。在本發(fā)明的另一實施方案中， 后反應(yīng)區(qū)域具有管式幾何形狀。在懸浮液離開后反應(yīng)區(qū)之后，通常將其冷卻，然后進(jìn)行第二液化步驟。冷卻可通 過膨脹加壓的溶液而進(jìn)行。膨脹優(yōu)選在至多或低于110°c，尤其是至多或低于105°C，例如 80-110°C，優(yōu)選90-105°C，非常特別優(yōu)選95-100°C的溫度下作為閃蒸進(jìn)行，以冷卻懸浮液。 然后，通常在分開的反應(yīng)器中將如此破壞的淀粉液化。任選有利的是，在設(shè)定第二次液化的 溫度之后加入液化酶的子量，而不是在加熱之前或之中加入所有液化酶。該子量可為液化 酶總量的0-80%，優(yōu)選10-60%，非常特別優(yōu)選15-40%。第二次液化可進(jìn)行30-240分鐘， 優(yōu)選45-180分鐘，非常特別優(yōu)選60-120分鐘的時間。第二次液化可在連續(xù)流動管中進(jìn)行， 在攪拌釜級聯(lián)中連續(xù)進(jìn)行，或者在不連續(xù)攪拌釜中進(jìn)行。當(dāng)使用攪拌釜時，有利的是提供足 夠數(shù)量的攪拌釜，以允許與正在進(jìn)行的操作平行地清潔各攪拌釜而不損失容量。為了將淀粉完全降解為糊精，將反應(yīng)混合物保持在設(shè)定的溫度下，或任選進(jìn)一步 加熱，直到用碘檢測淀粉，或任選用于檢測淀粉的其它測試為陰性或至少基本陰性。在該情 況下，任選可在反應(yīng)混合物中加入一個或多個其他子量的α -淀粉酶，其量例如基于所用 淀粉源總量為0. 001-0. 5重量％，優(yōu)選0. 002-0. 2重量％。
除了通過直接蒸汽加熱漿料之外，也可使用加熱介質(zhì)如蒸汽在已知為"Wide Gap"的換熱器中間接將其加熱至所需溫度，這防止了引入的蒸汽對面粉懸浮液的稀釋。通 常又如對用直接蒸汽加熱所述進(jìn)行后反應(yīng)和第二液化。對于此處采用的措施，類似地適用 上文所述內(nèi)容。以此方式得到含水的淀粉部分水解產(chǎn)物，其包含來自面粉的液化淀粉部分，通常 為糊精以及任選其他寡糖和單糖或二糖，以及面粉的至少部分蛋白質(zhì)組分。在淀粉液化完成之后，使存在于含水的淀粉部分水解產(chǎn)物中的糊精進(jìn)行糖化，即 將其降解為葡萄糖和蔗糖。糖化可以本身已知的方式連續(xù)或不連續(xù)進(jìn)行。在液化淀粉溶液中的糊精(即寡糖)的糖化通常酶促進(jìn)行，即使用至少一種糖化 糊精的酶進(jìn)行。原則上，為此可使用所有葡糖淀粉酶(酶分類EC3. 2. 1.3)，尤其是得至曲 霉(Aspergillus)的葡糖淀粉酶，特別是用于將通過在生物乙醇生產(chǎn)中的干磨方法得到 的材料糖化的那些。適用于糖化的葡糖淀粉酶也可市購，例如可以Dextrozyme GA購自 Novozymes ；或以O(shè)ptidex購自Genencor。也可使用各種葡糖淀粉酶的組合將至少一種糖化酶，尤其是至少一種葡糖淀粉酶加入在液化之后得到的含有糊精 的液體介質(zhì)中，其量基于所用淀粉源的總量通常為0. 001-5. 0重量％，優(yōu)選0. 005-3. 0重 量％，特別優(yōu)選0. 01-2重量％，特別是0. 05-1. 0重量％。通常將液化的淀粉溶液冷卻或通常調(diào)至糖化酶的最佳溫度或略低，例如調(diào)至 40-700C，優(yōu)選50-65°C，尤其是60_63°C，隨后與糖化酶混合。優(yōu)選在液化之后立即使含水 的淀粉部分水解產(chǎn)物經(jīng)受糖化。因此，在加入糖化酶之前，將熱的含水的淀粉部分水解產(chǎn)物 冷卻至上述溫度。有利的是，該冷卻在換熱器中進(jìn)行，其中釋放的能量可用于預(yù)熱其他工藝 料流。有利的是，糖化在所用酶的最佳活性范圍的pH下進(jìn)行，優(yōu)選pH為3. 0-5. 5，尤其 是4. 0-5. 0，特別優(yōu)選4. 2-4. 8。優(yōu)選在加入糖化酶，尤其是葡糖淀粉酶之前將pH調(diào)至所需值。糖化可在攪拌反應(yīng)器中不連續(xù)進(jìn)行，或在流動管中連續(xù)進(jìn)行或特別優(yōu)選在攪拌釜 級聯(lián)中進(jìn)行。當(dāng)使用攪拌釜時，有利的是提供足夠數(shù)量的攪拌釜，以允許與正在進(jìn)行的操作 平行地清潔各攪拌釜而不損失容量。在加入糖化酶之后，將含有糊精的懸浮液在設(shè)定的溫度下優(yōu)選保持一段時間，例 如保持8-72小時或更長，需要的話經(jīng)常12-60小時，優(yōu)選M-54小時，特別優(yōu)選36-48小時， 其中使糊精糖化為單糖和二糖。糖化的進(jìn)行可使用本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員已知的方法，例如 HPLC，酶測試或葡萄糖測試棒進(jìn)行。當(dāng)單糖濃度不再顯著增加或又下降時糖化完成。步驟d)糖化產(chǎn)生葡萄糖水溶液，該溶液除了葡萄糖外還任選進(jìn)一步包含作為固體懸浮形 式的面粉的未水解組分。這些固體主要為胚乳級分的谷蛋白部分。如果谷蛋白未在進(jìn)行步驟C)之前完全貧化，則根據(jù)本發(fā)明，谷蛋白的貧化對在步 驟c)之后的葡萄糖進(jìn)行。在許多情況下，有利的是這類貧化不僅可在進(jìn)行步驟c)之前，而 且也可在其后進(jìn)行。在該情況下，通常首先從待糖化的淀粉材料中貧化子量的谷蛋白，這例 如通過基本或完全貧化在胚乳級分的子量中的谷蛋白組分而進(jìn)行，將貧化谷蛋白的該子量 與來自步驟a)的未貧化谷蛋白組分的剩余胚乳級份合并，例如將其轉(zhuǎn)移至懸浮液，然后進(jìn)行步驟c)和步驟d)。為貧化來自葡萄糖的谷蛋白，通常進(jìn)行以下程序其中將步驟C)中產(chǎn)生的包含谷 蛋白的全部葡萄糖溶液進(jìn)行固體分離。然而，也可僅將步驟b)中產(chǎn)生的包含谷蛋白的葡萄 糖溶液的子料流進(jìn)行固體分離，并將包含谷蛋白的剩余葡萄糖供入其他用途，如生產(chǎn)生物乙醇。貧化通常進(jìn)行至至少70重量％，優(yōu)選至少85重量％，尤其是至少90重量％，或甚 至至少95重量％的包含在葡萄糖溶液中谷蛋白組分被分離的程度。存在的谷蛋白和任選任何糠可以任何已知的液/固分離被分離，其中優(yōu)選機械方 法如離心，潷析和過濾，包括這些措施的組合。為了從葡萄糖溶液中除去固體，已經(jīng)證明有利的是供入分離的葡萄糖溶液的溫度 為60-100°C，尤其是70-90°C，特別優(yōu)選75-85°C。為此，通常將步驟b)中得到的葡萄糖溶 液在貧化固體組分谷蛋白和糠之前加熱至所需溫度。有利的是，加熱在換熱器中進(jìn)行，其中 所需能量可用于冷卻其他工藝料流。此外，已經(jīng)證明有利的是，在貧化固體之前，將葡萄糖溶液的pH調(diào)至4. 0-6. 5，尤 其是4. 5-6. 0，特別優(yōu)選5. 0-5. 5的值。任何堿，但優(yōu)選堿金屬氫氧化物，例如氫氧化鈉水溶 液或氨可用于調(diào)節(jié)PH。貧化產(chǎn)生低固體的葡萄糖溶液和包含谷蛋白以及任選糠組分的富固體級分，其葡 萄糖比例比低固體的葡萄糖溶液低。低固體的葡萄糖溶液可仍包含少量不溶解固體，其量通?；谄咸烟撬芤旱目?體積不超過15體積％，尤其是10體積％，特別是5重量％，并且經(jīng)?；谄咸烟撬芤旱?總體積為0. 001-15體積％，尤其是0. 01-10體積％，特別優(yōu)選0. 02-5體積％。通過將葡萄 糖溶液在刻度離心管中在1650g下離心15分鐘，隨后讀出不溶解固體量而測定不溶解固 體。為了得到高葡萄糖產(chǎn)率，有利的是，將固/液分離得到的富固體級分再懸浮于水 中，然后進(jìn)行重復(fù)的固/液分離。水的量通常為l-151/kg懸浮固體(以干物質(zhì)計算)，或 1-20L/L潮濕的分離固體。該第二固/液分離產(chǎn)生包含在第一固/液分離的固相中的呈溶 解形式的葡萄糖部分的液相。然后將該液相加入第一固/液分離的液相。為了進(jìn)一步增 加葡萄糖產(chǎn)率，該程序，即將所得固體再懸浮于水中并且隨后固/液分離的程序可重復(fù)一 次或數(shù)次，其中將所得葡萄糖水溶液在每種情況下加入第一固/液分離中得到的葡萄糖溶 液。進(jìn)行第二以及任選其他固/液分離的溫度通常為60-100°C，優(yōu)選70-90°C，特別優(yōu) 選75-85°C。對于pH，此處類似地使用上文對第一固/液分離所述的內(nèi)容。用于將第一和其他固/液分離的富固體級分再懸浮的水可以是淡水。然而，經(jīng)常 將更后的固/液分離的葡萄糖水溶液用于再懸浮，以減少淡水對合并的各固/液分離階段 的低固體葡萄糖溶液的稀釋，以及降低淡水的總的需求。在三個依次的固/液分離中，例如 將第三固/液分離的液相用于將第二固/液分離的固相再懸浮，以及將第二固/液分離的 液相用于將第一固/液分離的富固體相再懸浮?；蛘?，除了淡水之外，也可使用工藝水，其 例如作為隨后通過蒸發(fā)葡萄糖溶液的濃縮中的冷凝物產(chǎn)生，或在干燥副產(chǎn)物(如谷蛋白或 生物質(zhì))時產(chǎn)生。
為了進(jìn)一步減少所得葡萄糖水溶液中的固體部分，可能有利的是對葡萄糖水溶液 進(jìn)行所謂的精制步驟，以貧化存在于其中的其他固體。該進(jìn)一步的貧化可通過任何已知的 固/液分離類型，如薄膜過濾，包括微濾和超濾，常規(guī)過濾，浮選，離心，潷析或分離進(jìn)行。作 為此處所述方法的任何所需組合的結(jié)果，多段實施方案也是可行的。可由步驟b)中得到的含水葡萄糖在貧化谷蛋白以及任選存在的糠之后得到的低 固體葡萄糖溶液是新的且特別適用于生產(chǎn)化學(xué)品。因此，該葡萄糖水溶液也是本申請的主 題。干物質(zhì)比例或干物質(zhì)含量理解為指葡萄糖水溶液中溶解和未溶解固體的總量。這 些固體可以本身已知的方式通過蒸發(fā)葡萄糖溶液測定。為此，將一定量的各葡萄糖溶液在 干燥箱中在80°C下蒸發(fā)至干燥。將干的殘留物稱重得到干物質(zhì)含量?；蛘?，可使用干燥車， 為此這例如購自德國PCE，Meschede?；诖嬖谟谄咸烟撬芤褐械墓腆w，即干物質(zhì)含量，葡萄糖水溶液具有如下特征 組分a) 80-98重量％，優(yōu)選93_97重量％葡萄糖以及任選二糖如蔗糖、麥芽糖和異麥芽 糖形式的糖，b)0. 5-7. 0重量％，優(yōu)選1. 0-4. 0重量％粗蛋白，c)0. 01-0. 1 重量 ％ 粗纖維，d)80-1000mg/kg(0. 008-0. 1 重量％ )，優(yōu)選 100_800mg/kg 游離氨基酸，和e)0.01-1.0重量％粗灰分組分。具有這種組成的葡萄糖溶液是新的且同樣是本發(fā)明主題。此外，葡萄糖溶液仍可包含少量來自胚芽的油/脂。然而，大部分的任何油/脂組 分通常在步驟d)中與谷蛋白一起分離。這同樣適用于在進(jìn)行步驟c)之前未分離掉的任何 糠組分。本發(fā)明進(jìn)一步涉及在本發(fā)明方法的步驟d)中產(chǎn)生的谷蛋白。其在本發(fā)明方法中 以基于所用谷物的干物質(zhì)為4-40重量％，尤其是8-30重量％的量產(chǎn)生。谷蛋白通常具有 如下總的組成，其中數(shù)據(jù)在每種情況下基于谷蛋白的全部干物質(zhì)。a) 10-60重量％，尤其是20-55重量％粗蛋白；b) 1-65重量％，尤其是2-60重量％糖組分，c)至多20重量％，經(jīng)常0. 5-10重量％粗脂肪、植物脂肪和/或植物油；d)至多20重量％，尤其是1-12重量％粗纖維組分；和e)至多15重量％，例如0. 1-10重量％也稱作粗灰分的與其不同的固體組分。在步驟d)中分離的谷蛋白為細(xì)碎固體，其水分含量通常在其分離后為50-85重 量％，尤其是陽-75重量％，其中基于分離的谷蛋白的總質(zhì)量。谷蛋白可以本身已知的方式 干燥得到細(xì)碎的，不形成至形成很少的粉塵的非粘性粉末。此處，水分含量通常低于50重 量％，經(jīng)常低于30重量％，特別是低于15重量％。具有35重量％干物質(zhì)比例或基于干谷 蛋白為185%水含量的潮濕谷蛋白同樣表現(xiàn)為固體。谷蛋白顆粒的平均粒度(重均，通過光散射或篩選分析測定)通常為50-600μπι， 尤其是 100-500 μ m。本發(fā)明的谷蛋白具有高的吸水容量且能夠吸收其自身干重的高達(dá)185重量％的水，而不變粘。因此，特別適合作為配制助劑，尤其用于生產(chǎn)本身傾向于粘在一起的潮濕或 糊狀物質(zhì)的固體配制劑。本發(fā)明谷蛋白尤其適用于配制發(fā)酵中產(chǎn)生的生物質(zhì)。以此方式， 得到包含生物質(zhì)和谷蛋白的非粘性產(chǎn)品，并且該產(chǎn)品可例如用作飼料或飼料組分。另外，本發(fā)明谷蛋白的顯著之處在于對油和油狀物質(zhì)，尤其是對植物油的高吸收 容量。因此，特別適用于生產(chǎn)高價值的植物油或植物油組分或具有與生育酚相當(dāng)?shù)男阅艿?物質(zhì)的固體配制劑。通過水解存在于本發(fā)明谷蛋白中的蛋白質(zhì)，可任選在分離出非未水解的谷蛋白組 分之后，生產(chǎn)例如可用于人類營養(yǎng)的可溶的肽。水解例如可通過相應(yīng)的蛋白酶而酶促進(jìn)行。 為分離出未水解的蛋白質(zhì)組分，可使用固/液分離的常規(guī)方法，如離心或過濾法，特別是薄 膜過濾方法。任選可將固/液分離之后得到的含水葡萄糖通過以一段或多段蒸發(fā)濃縮而濃縮 至所需葡萄糖濃度。為此，將葡萄糖水溶液在50-100°C，優(yōu)選70-95°C，特別優(yōu)選80_90°C的 溫度下，優(yōu)選在減壓下濃縮。濃縮優(yōu)選進(jìn)行至得到至少40重量％，尤其是至少50重量％， 特別優(yōu)選至少陽重量％，非常特別優(yōu)選至少60重量％的葡萄糖濃度，濃度例如為40-80重 量％，優(yōu)選50-75重量％，特別優(yōu)選55-70重量％，非常特別優(yōu)選60-65重量％。葡萄糖在牛產(chǎn)有機物質(zhì)中的用涂如此得到的葡萄糖溶液隨后可用作生產(chǎn)有機物質(zhì)，即化學(xué)品的碳源。術(shù)語化學(xué)品應(yīng)在寬意義上解釋且包括所有有機物質(zhì)，即不僅包括確定的低分子量 化合物，低聚物，聚合物，包括酶，而且包括具有特征性能的生物質(zhì)如酵母或單細(xì)胞蛋白質(zhì)， 它們由或可由葡萄糖開始生產(chǎn)。有機物質(zhì)的生產(chǎn)不僅可通過發(fā)酵，而且也可經(jīng)由非發(fā)酵路 線而進(jìn)行。本發(fā)明方法的優(yōu)點尤其在于生產(chǎn)不同于乙醇的化學(xué)品，因為生產(chǎn)乙醇時葡萄糖 質(zhì)量通常需要滿足較高要求?？赏ㄟ^不涉及發(fā)酵的路線由葡萄糖生產(chǎn)的有機物質(zhì)的實例包括5-羥基甲基糠 醛、乙酰丙酸(laevulic acid)、葡糖酸、葡萄醛酸、2_酮基葡糖酸、戊二酸、山梨醇、異山梨 醇和烷基聚葡糖苷，多元醇，如乙二醇、丙二醇和高果糖玉米糖漿(HFCS)?？赏ㄟ^涉及發(fā)酵的路線由葡萄糖生產(chǎn)的有機物質(zhì)的實例-任選帶有羥基的具有2-10個碳原子的單_、二-和三羧酸，例如酒石酸、衣康酸、 琥珀酸、乙酸、丙酸、乳酸、3-羥基丙酸、富馬酸、馬來酸、2，5-呋喃二甲酸、戊二酸、乙酰丙 酸、葡糖酸、烏頭酸、二氨基庚二酸和檸檬酸；-蛋白質(zhì)氨基酸和非蛋白質(zhì)氨基酸，例如賴氨酸、谷氨酸、蛋氨酸、苯丙氨酸、天冬 氨酸、色氨酸和蘇氨酸；-嘌呤堿和嘧啶堿；-核苷和核苷酸，例如煙酰胺腺嘌呤二核苷酸(NAD)和腺苷-5’-單磷酸鹽(AMP)；-類脂，-優(yōu)選具有10-22個碳原子的飽和和不飽和脂肪酸，例如Y-亞麻酸、二高-Y-亞 麻酸(dihomo-Ylinolenic acid)、花生四烯酸、二十碳五烯酸和二十二碳六烯酸 (docosahexaenoic acid)；-具有3-10個碳原子的二醇，例如丙二醇和丁二醇；-具有3個或更多個羥基，例如3、4、5或6個OH的多元醇，例如甘油、山梨醇、甘露糖醇(manitol)、木糖醇和阿糖醇；-具有至少4個碳原子，例如具有4-22個碳原子的長鏈醇，如丁醇；-碳水化合物，例如透明質(zhì)酸和海藻糖；-脂族胺，尤其是具有3-10個碳原子的脂族二胺，如1，5_戊二胺；-芳族化合物，例如芳族胺、香草醛和靛藍(lán)；-維生素和前維生素，例如抗壞血酸、維生素 、維生素B12和核黃素；-輔因子(cafactor)禾口營養(yǎng)品(nutraceuticals)；-蛋白質(zhì)，例如酶，如淀粉酶，果膠酶，酸，雜化或或中性纖維素酶、酯酶如脂肪酶、 胰酶(pancreases)、蛋白酶、木聚糖酶和氧化還原酶，如漆酶、過氧化氫酶和過氧化物酶、葡 聚糖酶和肌醇六磷酸酶；-酵母，例如面包酵母和啤酒酵母；-類胡蘿卜素，例如番茄紅素、β-胡蘿卜素、蝦青素、玉米黃質(zhì)和角黃素；-具有3-10個碳原子的酮類，如丙酮和3-羥基-2-丁酮；-內(nèi)酯，例如Y-丁內(nèi)酯；-聚羥基鏈烷酸酯，例如聚羥基乙酸酯；-聚交酯；-多糖，例如葡聚糖、甘露聚糖、半乳聚糖；-聚類異戊二烯；-聚酰胺，和-環(huán)糊精。術(shù)語“輔因子”包括出現(xiàn)通常的酶活性所需的非蛋白質(zhì)化合物。這些化合物可為 有機或無機的；本發(fā)明的輔因子分子優(yōu)選為有機的。這類分子的實例為NAD和煙酰胺腺嘌 呤二核苷酸磷酸酯(NADP)；這些輔因子的前體為煙酸(niacin)。術(shù)語“營養(yǎng)品”包括食品添加劑，其在植物和動物，尤其是人類的情況下促進(jìn)健康。 這類分子的實例為維生素、抗氧化劑和某些類脂，例如多不飽和脂肪酸。葡萄糖在發(fā)酵中的用途本發(fā)明優(yōu)選涉及可根據(jù)本發(fā)明得到的葡萄糖溶液在如上所定義的有機物質(zhì)的發(fā) 酵生產(chǎn)中作為葡萄糖源的用途。因此，本發(fā)明進(jìn)一步涉及一種通過發(fā)酵生產(chǎn)有機物質(zhì)的方法，其包括如下步驟i.例如通過根據(jù)本發(fā)明方法生產(chǎn)葡萄糖溶液提供本發(fā)明的葡萄糖水溶液，和ii.將葡萄糖溶液加入包含能夠超量生產(chǎn)有機物質(zhì)的微生物的發(fā)酵介質(zhì)。發(fā)酵可以本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員熟知的任何常規(guī)方式進(jìn)行。為此，通常將每種情況 下所需的微生物使用根據(jù)本發(fā)明生產(chǎn)的含水葡萄糖培養(yǎng)。發(fā)酵方法不僅可不連續(xù)(分批)，而且可半連續(xù)(進(jìn)料-分批程序，包括具有中間 物收獲的進(jìn)料分批)操作，其中半連續(xù)程序是優(yōu)選的。例如，通過本發(fā)明方法得到的葡萄糖水溶液(在下文中也稱作本發(fā)明葡萄糖)_任 選與常規(guī)糖源一起，任選在用水稀釋并加入常規(guī)介質(zhì)組分如緩沖劑，營養(yǎng)鹽，氮源如硫酸 銨、尿素等，包含氨基酸如酵母提取物、胨、CSL等的復(fù)合營養(yǎng)介質(zhì)組分，用所需微生物接種 并且它們可在發(fā)酵條件下繁殖，直至微生物濃度達(dá)到發(fā)酵所需的穩(wěn)態(tài)。在該情況下，本發(fā)明葡萄糖溶液中存在的糖被代謝并且形成有價值的所需產(chǎn)物(也被稱作分批程序或批料 相)。對本發(fā)明而言，常規(guī)糖源指不通過本發(fā)明方法得到的基本上全部可代謝的單糖、 二糖和/或寡糖。這些包括純凈形式的單糖、二糖和/或寡糖及其混合物，以及包含濃度為 至少45重量％的可代謝的單糖、二糖和/或寡糖且通?；静缓蝗苡谒墓腆w的組合 物，例如具有45和50重量％糖的低質(zhì)量糖蜜。由于在本發(fā)明葡萄糖中的高比例的游離氨基酸，可令人驚訝地省略加入其它復(fù)合 營養(yǎng)介質(zhì)組分或它們的量可顯著降低，這是本發(fā)明葡萄糖溶液的另一優(yōu)點。在進(jìn)料-分批程序中，發(fā)酵工藝通過加入可根據(jù)本發(fā)明得到的葡萄糖溶液而進(jìn)一 步繼續(xù)。在該情況下，通過微生物超量生產(chǎn)的代謝產(chǎn)物在發(fā)酵液中累積，其中代謝產(chǎn)物不僅 可存在于微生物細(xì)胞中，而且也可存在于發(fā)酵介質(zhì)的水相中。發(fā)酵優(yōu)選以半連續(xù)，即進(jìn)料-分批方法進(jìn)行。在該情況下，程序如下進(jìn)行首先 使用本發(fā)明葡萄糖溶液和/或其他糖源使微生物繁殖，直至在發(fā)酵罐中達(dá)到所需微生物濃 度。然后，將任選具有一種或多種其它常規(guī)糖源的本發(fā)明葡萄糖水溶液供入發(fā)酵罐。這維 持了發(fā)酵工藝，并且通過微生物超量生產(chǎn)的代謝產(chǎn)物在發(fā)酵液中累積(參見上文)。發(fā)酵液 中的糖含量尤其可經(jīng)由本發(fā)明含水葡萄糖的進(jìn)料速率調(diào)節(jié)。通常而言，調(diào)節(jié)進(jìn)料速率以使 發(fā)酵液中的葡萄糖濃度為> 0重量％至約5重量％，尤其不超過3重量％的值。本發(fā)明葡萄糖任選可在發(fā)酵前滅菌，在其中通常熱殺滅污染微生物。為此，通常將 本發(fā)明葡萄糖加熱至高于80°C的溫度。污染物的殺滅或溶菌可緊鄰發(fā)酵前進(jìn)行。為此，對 所有含糖液體介質(zhì)進(jìn)行滅菌。本發(fā)明尤其涉及一種生產(chǎn)不同于生物乙醇的有機化合物，尤其優(yōu)選具有至少3個 碳原子或具有至少2個碳原子和至少1個氮原子的非揮發(fā)性有機化合物的方法。這些化合 物本身具有氫和任選氧和任選磷和/或硫作為其它原子。在該情況下，非揮發(fā)性有機化合 物理解為指在不經(jīng)歷分解下不可借助蒸餾由發(fā)酵液得到的那些化合物。在大氣壓力下，這 些化合物的沸點通常高于水的沸點，經(jīng)常高于150°C，尤其高于200°C。這些化合物通常為 在標(biāo)準(zhǔn)條件O98K，101.3kPa)下為固態(tài)的化合物。然而，也可在發(fā)酵中使用本發(fā)明的含糖 液體介質(zhì)以生產(chǎn)非揮發(fā)性代謝產(chǎn)物，其在大氣壓力下的熔點低于水的沸點和/或具有油性 稠度。本發(fā)明方法尤其適用于生產(chǎn)酶、氨基酸、維生素、核苷酸、二糖、寡糖、多糖、具有 3-10個碳原子的脂族單羧酸和脂族二羧酸、具有3-10個碳原子的脂族羥基羧酸、具有3-10 個碳原子的酮類、具有4-10個碳原子的鏈烷醇和具有3-10個碳原子，尤其是3-8個碳原子 的鏈烷二醇，和胺，尤其是具有3-10個碳原子的脂族二胺。對本領(lǐng)域熟練技術(shù)人員明顯的是，通過發(fā)酵以該方式生產(chǎn)的化合物在每種情況下 以通過所用微生物生產(chǎn)的對映異構(gòu)體形式得到(如果存在不同對映異構(gòu)體的話)。因此，例 如氨基酸通常以各L對映異構(gòu)體得到。如下文中詳述，用于發(fā)酵的微生物以本身已知的方式指向各代謝產(chǎn)物。它們可以 是天然來源或遺傳修飾的。合適的微生物和發(fā)酵方法例如列在表A中。表A:
權(quán)利要求
1.一種由麥類植物谷物的淀粉組分生產(chǎn)葡萄糖含量為至少32重量％的葡萄糖水溶液 的方法，其包括如下步驟a)將谷物分級干磨，其中將谷物分離為包含淀粉的胚乳級分(面粉)和糠級分；b)將胚乳級分轉(zhuǎn)化為含水懸浮液；c)將含水懸浮液的淀粉組分液化和酶促糖化，得到含水葡萄糖，其中含水葡萄糖的淀 粉含量至少30重量％ ；和其中使存在于胚乳級分中的谷蛋白部分從步驟c)中得到的含水葡萄糖中貧化和/或 從進(jìn)行步驟c)之前的胚乳級分的含水懸浮液中貧化。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其中步驟a)中的研磨在基于所用谷物質(zhì)量為10-30重量％ 的水存在下進(jìn)行。
3.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的方法，其中在步驟a)中，將胚乳級分研磨至 0. 01-1. Onm的平均粒度。
4.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的方法，其中將基于所用胚乳級分中存在的全部谷蛋白 組分至少為70%的谷蛋白分離。
5.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的方法，其中將胚乳級分的至少部分的谷蛋白部分從步 驟c)中得到的含水葡萄糖中貧化。
6.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的方法，其中將胚乳級分中的部分的谷蛋白部分在進(jìn)行 步驟c)之前貧化。
7.根據(jù)權(quán)利要求6的方法，其中在進(jìn)行步驟c)之前貧化谷蛋白包括如下子步驟i)將部分胚乳級分轉(zhuǎn)化為淀粉含量小于30重量％的胚乳級分的稀含水懸浮液； )從胚乳級分的含水懸浮液中貧化谷蛋白，其中得到貧谷蛋白的胚乳級分的稀含水 懸浮液，和iii)將剩余的胚乳級分懸浮在步驟ii)中獲得的含水懸浮液中，以使所得懸浮液的淀 粉含量為至少30重量％。
8.根據(jù)權(quán)利要求6或7的方法，其中將胚乳級分的剩余谷蛋白部分從步驟c)中得到的 含水葡萄糖中貧化。
9.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的方法，其中以使所得葡萄糖溶液包含小于10體積％ 固體的方式貧化谷蛋白。
10.根據(jù)前述權(quán)利要求中任一項的方法，其中所述麥類植物谷物為小麥谷物。
11.一種可通過根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項的方法得到的葡萄糖溶液。
12.根據(jù)權(quán)利要求11的葡萄糖溶液，其基于干物質(zhì)含量包含a)80-98重量％以葡萄糖以及任選二糖形式的糖，b)0.5-7.0重量％粗蛋白，c)0.01-0. 1重量％粗纖維，d)0.008-0. 1重量％游離氨基酸，和e)0.01-1. 0重量％粗灰分組分。
13.根據(jù)權(quán)利要求11或12的葡萄糖溶液，其葡萄糖濃度基于葡萄糖溶液的總重量至少為40重量％。
14.根據(jù)權(quán)利要求11-13中任一項的葡萄糖溶液作為生產(chǎn)有機物質(zhì)的碳源的用途。
15.根據(jù)權(quán)利要求14的用途，其作為通過發(fā)酵生產(chǎn)有機物質(zhì)的葡萄糖源。
16.一種通過發(fā)酵生產(chǎn)有機物質(zhì)的方法，其包括如下步驟 .通過根據(jù)權(quán)利要求1-10中任一項的方法提供葡萄糖溶液，和ii.將葡萄糖溶液加入包含能夠超量生產(chǎn)有機物質(zhì)的微生物的發(fā)酵介質(zhì)中。
17.根據(jù)權(quán)利要求16的方法，其中所述有機物質(zhì)選自任選帶有羥基且具有3-10個碳原 子的單_、二-和三羧酸、蛋白質(zhì)氨基酸和非蛋白質(zhì)氨基酸、嘌呤堿、嘧啶堿；核苷、核苷酸、 類脂；飽和和不飽和脂肪酸；具有4-10個碳原子的二醇、具有3個或更多個羥基的多元醇、 具有至少4個碳原子的長鏈醇、碳水化合物、芳族化合物、維生素、前維生素、輔因子、營養(yǎng) 品、蛋白質(zhì)、酵母、類胡蘿卜素、具有3-10個碳原子的酮、內(nèi)酯、聚羥基鏈烷酸酯、聚交酯、多 糖、聚類異戊二烯、聚酰胺和環(huán)糊精。
18.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)為氨基酸。
19.根據(jù)權(quán)利要求18的方法，其中所述氨基酸選自賴氨酸、蛋氨酸、蘇氨酸和谷氨酸。
20.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)選自維生素和前維生素。
21.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)選自具有2-10個碳原子的脂族單_、二-和三羧酸。
22.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)選自具有3-10個碳原子的脂族羥基羧酸。
23.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)選自具有3-10個碳原子的鏈烷二醇。
24.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)選自具有3-10個碳原子的脂族酮。
25.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)選自具有3-10個碳原子的脂族二胺。
26.根據(jù)權(quán)利要求10的方法，其中所述有機物質(zhì)選自核苷酸。
27.根據(jù)權(quán)利要求17的方法，其中所述有機物質(zhì)選自二糖、寡糖和多糖。
28.根據(jù)權(quán)利要求16-27的方法，其中將得自微生物的生物質(zhì)從發(fā)酵產(chǎn)物的超量生產(chǎn) 的有機物質(zhì)中分離，且其中得到含生物質(zhì)的組合物。
29.—種可通過權(quán)利要求1-10中任一項的方法，通過從葡萄糖溶液中貧化谷蛋白而獲 得的谷蛋白。
30.根據(jù)權(quán)利要求29的谷蛋白，其包含如下組分a)25-55重量％來自麥類谷物的蛋白質(zhì)；b)5-45重量％糖；c)0.5-8重量％植物脂肪和/或植物油；d)至多10重量％粗纖維組分；和e)至多15重量％的與其不同的固體組分； 其中所述數(shù)量基于谷蛋白的干物質(zhì)。
31.根據(jù)權(quán)利要求29或30谷蛋白，其呈粉末形式。
32.根據(jù)權(quán)利要求31的谷蛋白，其中谷蛋白的粉末顆粒的平均粒度為50-900μπι。
33.根據(jù)權(quán)利要求29-32中任一項的谷蛋白作為配制助劑的用途。
34.根據(jù)權(quán)利要求33的用途，其用于配制發(fā)酵中得到的生物質(zhì)。
35.根據(jù)權(quán)利要求29-32中任一項的谷蛋白作為飼料組分的用途。
36.一種飼料組合物，其基本包含在根據(jù)權(quán)利要求29-32中任一項的發(fā)酵中得到的生物質(zhì)和谷蛋白。
全文摘要
本發(fā)明涉及一種由麥類谷物，例如黑麥、黑小麥，或尤其是小麥谷物的淀粉組分制備葡萄糖水溶液的方法。本發(fā)明還涉及用于制備有機化合物的基于葡萄糖的發(fā)酵方法，其中所制備的用于發(fā)酵的葡萄糖通過本發(fā)明方法由麥類谷物的淀粉組分制備。
文檔編號C13K1/06GK102057052SQ200980121955
公開日2011年5月11日 申請日期2009年4月9日 優(yōu)先權(quán)日2008年4月14日
發(fā)明者J·布羅德森, M·博伊, S·弗里爾 申請人:巴斯夫歐洲公司