1.一種適用于油桐的組培快繁方法,其特征在于:包括外植體選擇、外植體處理、初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)、增殖培養(yǎng)、壯芽培養(yǎng)和生根培養(yǎng)工序,采集半木質(zhì)化、生長健壯的當(dāng)年生油桐嫩枝作為外植體,對外植體進行修剪、滅菌消毒處理后接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中獲取初始芽,再將初始芽接種于增殖培養(yǎng)基中經(jīng)過3-4個周期增殖培養(yǎng),形成叢生芽,將叢生芽接入壯芽培養(yǎng)基中培養(yǎng),最后將高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根,具體操作步驟如下:
(1)外植體選擇:采集半木質(zhì)化、生長健壯的當(dāng)年生油桐嫩枝作為外植體;
(2)外植體處理:將外植體置于自來水下沖洗10-15 min,然后去除外植體葉片,再將外植體浸泡在體積濃度 0.1%的升汞溶液中,控制浸泡時間15-20 min,最后用純凈水洗凈藥物,將外植體裁成帶至少1個腋芽,1.5-3cm長的莖段,視莖段木質(zhì)化程度分類置放容器內(nèi),備用;
(3)初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng):將步驟(2)得到的外植體接種于初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基中培養(yǎng),培養(yǎng)30-35 d,初始芽萌發(fā)、生長;
(4)增殖培養(yǎng):將高≥1cm的初始芽接入增殖培養(yǎng)基中進行增殖培養(yǎng),35-40 d轉(zhuǎn)接一次,循環(huán)往復(fù),經(jīng)3-4個周期的培養(yǎng),形成叢生芽;
(5)壯芽培養(yǎng):將步驟(4)得到的叢生芽進行切割,4-5顆芽/叢,插入壯芽培養(yǎng)基中,培養(yǎng)35-40 d,形成壯芽;
(6)生根培養(yǎng):將步驟(5)得到的高≥2cm的單芽插入生根培養(yǎng)基中誘導(dǎo)生根;余下小芽叢再次接種于步驟(4)的增殖培養(yǎng)基中繼續(xù)增殖,然后再重復(fù)步驟(5),循環(huán)往復(fù),獲得大量壯芽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種適用于油桐的組培快繁方法,其特征在于:所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)基的配方為:1/2改良MS培養(yǎng)基+6-BA 4.0-6.0 mg/L+NAA 2.0-3.0 mg/L+TDZ 1.0-2.0 mg/L+ZT 1.5-2.0 mg/L+ VC 15 mg/L+葉酸10mg/L+VB2 15 mg/+瓊脂3.0 g/L+卡拉膠25 g/L。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種適用于油桐的組培快繁方法,其特征在于:所述的增殖培養(yǎng)基的配方為:1/2改良MS培養(yǎng)基+6-BA 6.0-8.0 mg/L+NAA 2.0-3.0 mg/L+ZT 0.5-1.0 mg/L+VC 15 mg/L+VB2 15 mg+天冬氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.6 g/L+卡拉膠 30 g/L。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種適用于油桐的組培快繁方法,其特征在于:所述的壯芽培養(yǎng)基的配方為:改良MS培養(yǎng)基+6-BA 3.0-4.0 mg/L+NAA 1.0-1.5 mg/L+VC 15 mg/L+VB2 15 mg+天冬氨酸 20 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+卡拉膠 25 g/L。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種適用于油桐的組培快繁方法,其特征在于:所述的生根培養(yǎng)基的配方為:1/2改良MS培養(yǎng)基+6-BA 1.5-2.5 mg/L+NAA 1.0-1.5 mg/L+瓊脂 3.5 g/L+卡拉膠 30 g/L。
6.根據(jù)權(quán)利要求2-5任一所述的一種適用于油桐的組培快繁方法,其特征在于:所述的改良MS培養(yǎng)基的配方為:KNO3 660 mg·L-1;NH4NO3 850 mg·L-1;CaCl2·2H2O 275 mg·L-1;MgSO4·7H2O 280 mg·L-1;Ca(NO3)2·4H2O 600 mg·L-1;KH2PO4 340 mg·L-1;MnSO4·H2O 22.3 mg·L-1;ZnSO4·7H2O 8.6 mg·L-1;CuSO4·5H2O 0.025 mg·L-1;H3BO3 6.2 mg·L-1;Na2MoO4·2H2O 0.025 mg·L-1;KI 0.83 mg·L-1;CoCl2·6H2O 0.025 mg·L-1;維生素B11.0 mg·L-1;維生素B6 0.5 mg·L-1;煙酸 0.5 mg·L-1;甘氨酸 2.0 mg·L-1;肌醇 105 mg·L-1。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種適用于油桐的組培快繁方法,其特征在于:步驟(3)所述的初始芽誘導(dǎo)培養(yǎng)的培育控制條件為:光培養(yǎng)、光照500-1000 lx,培養(yǎng)溫度20±1℃;步驟(4)所述的增殖培養(yǎng)、步驟(5)所述的壯芽培養(yǎng)、步驟(6)所述的生根培養(yǎng)的培育控制條件均為:光培養(yǎng),光照2500-4000 lx,每日光照16 h,培養(yǎng)溫度25-28℃。