本發(fā)明屬于油桐無性繁殖技術(shù)，涉及一種油桐組培苗瓶內(nèi)生根的方法。
背景技術(shù)：
油桐（Vernicia fordii (Hemsl.) Airy Shaw），大戟科油桐屬，屬落葉喬木，樹皮灰色，枝條粗壯，葉卵圓形，花雌雄同株，花萼外面密被棕褐色微柔毛；花瓣白色，有淡紅色脈紋，倒卵形，子房密被柔毛，核果近球狀，種皮木質(zhì)。花果期3-9月。分布于中國的陜西、河南、江蘇、安徽、浙江、江西、福建、臺灣、湖南、湖北、廣東、海南、廣西、四川、貴州、云南等省區(qū)。油桐與油茶、核桃、烏桕并稱中國四大木本油料植物。油桐生于1000米以上的地區(qū)，喜溫暖 ，忌嚴(yán)寒 。冬季氣溫落差18℃有利于油桐生長發(fā)育 ，但長期處在－10℃以下會引起凍害。適生于緩坡及向陽谷地，盆地及河床兩岸臺地。富含腐殖質(zhì)、土層深厚、排水良好、中性至微酸性沙質(zhì)壤土最適油桐生長。
油桐栽培方式有桐農(nóng)間作、營造純林、零星種植和林桐間作等。組織培養(yǎng)技術(shù)是一種快速無性繁殖技術(shù)，選擇油桐優(yōu)良家系或者無性系為材料，通過組織培養(yǎng)方法繁殖苗木，既可以滿足生產(chǎn)上的數(shù)量要求，又可保持母本性狀。然而在組培過程中，常常出現(xiàn)生根率低、生根不統(tǒng)一、根系數(shù)量少以及根系不粗壯的問題。
技術(shù)實現(xiàn)要素：
本發(fā)明的目的在于提供一種能提高油桐組培苗的生根率，根系數(shù)量以及根系萌發(fā)整齊度的油桐組培苗瓶內(nèi)生根的方法。
為了實現(xiàn)上述發(fā)明目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下：
一種油桐組培苗瓶內(nèi)生根的方法，選取增殖繼代油桐小苗，先進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，置于適宜環(huán)境中培養(yǎng)，獲得帶根組培苗，主要操作步驟如下：
（1）取材：選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄，備用；
（2）預(yù)生根培養(yǎng)：將步驟（1）修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中,在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)；
（3）生根培養(yǎng)：待步驟（2）中的單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，在特定的光溫環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。
以上所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IBA 1.0～2.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.0～2.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 1.0～2.0mg/L+ABT1#0.5～2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L。
以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
以上步驟（2）和步驟（3）所述的光溫環(huán)境為：溫度20±1℃，濕度55～70%，光照強(qiáng)度2000～2500lux，光照15～16h/d。
本發(fā)明具有的優(yōu)點(diǎn)及有益效果如下：
1、本發(fā)明采用1/2改良ER培養(yǎng)基作為基本培養(yǎng)基，同時重點(diǎn)調(diào)整了與油桐生根的相關(guān)的微量元素和有機(jī)成分，使得培養(yǎng)基更科學(xué)，更有針對性，更易促使油桐繼代芽生根，效果顯著。
2、本發(fā)明在生根誘導(dǎo)前采用低濃度IBA和抗壞血酸（VC）對繼代單芽進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)，然后再進(jìn)行生根培養(yǎng)，可使組培苗發(fā)根統(tǒng)一，發(fā)根速度快，根系粗壯且數(shù)量較多。
3、本發(fā)明在增殖繼代單芽經(jīng)過30～35d時間預(yù)生根培養(yǎng)后轉(zhuǎn)入生根培養(yǎng)，即可達(dá)到預(yù)生根培養(yǎng)效果，又避免了小苗在預(yù)生根培養(yǎng)階段長出根系而使后期生根培養(yǎng)發(fā)根不整齊。
4、本發(fā)明的在特定的光溫條件下進(jìn)行預(yù)生根和生根培養(yǎng)，適應(yīng)油桐組培苗的生長特性，促進(jìn)苗木的生長。
5、本發(fā)明縮短了油桐繼代芽生根周期，生根率高，根系多，質(zhì)量好，生根組培苗移栽成活率高，可實現(xiàn)油桐組培產(chǎn)業(yè)化育苗，為人工無性系林的建設(shè)提供優(yōu)質(zhì)種苗，具有較好的經(jīng)濟(jì)效益、社會效益和生態(tài)效益。
具體實施方式
下面結(jié)合實施例對本發(fā)明作進(jìn)一步說明。
實施例1：
選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中, 所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IBA 1.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 2.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度55～60%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 1.0mg/L+ABT1#0.5 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度55～60%，光照強(qiáng)度2000lux，光照16h/d環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長出根系。
以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
實施例2：
選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中, 所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IBA 1.5mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.0mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度60～65%，光照強(qiáng)度2000lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 1.5mg/L+ABT1#1.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度60～65%，光照強(qiáng)度2000lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長出根系。
以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。
實施例3：
選取經(jīng)常規(guī)組培中壯芽培養(yǎng)35～40d的油桐繼代芽，消毒瓶子外表后，在超凈工作臺上的無菌空間內(nèi)，選取繼代芽叢中生長健壯、高度1～2cm的單芽，于節(jié)下2～3mm處剪切，清除基部葉片和葉柄。將修剪后的單芽接種于預(yù)生根培養(yǎng)基中, 所述的預(yù)生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IBA 2.0mg/L+維生素C 6g/L++VC 1.5mg/L +卡拉膠25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度65～70%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行預(yù)生根培養(yǎng)。待單芽經(jīng)過30～35d預(yù)生根培養(yǎng)后，將單芽轉(zhuǎn)接入生根培養(yǎng)基，所述的生根培養(yǎng)基其原料含量為：1/2改良ER培養(yǎng)基+IAA 2.0mg/L+ABT1#2.0 mg/L+蔗糖25g/L+瓊脂5.0g/L，在溫度20±1℃，濕度65～70%，光照強(qiáng)度2500lux，光照15h/d的環(huán)境中進(jìn)行生根培養(yǎng)。培養(yǎng)15-20d，90%以上的單芽長出根系。
以上所述的改良ER培養(yǎng)基的配方為：NH4NO3 1150mg/L + KNO3 980mg/L + CaCl2.2H2O 440mg/L + MgSO4..7H2O 370mg/L + KH2PO4 440mg/L + H3BO3 0.63mg/L + MnSO4..4H2O 20.9mg/L + ZnSO4.4H2O 7.56H2Omg/L + Na2MoO4.H2O 0.025mg/L + CuSO4..5H2O 0.0025mg/L + CoCl2.6H2O 0.0025mg/L + FeSO4 27.8mg/L + NaEDTA 37.3mg/L + 肌醇 50mg/L + 煙酸 0.5mg/L + 鹽酸吡哆醇 0.5mg/L + 甘氨酸 2mg/L。