一種紫色瓶子草的組培快繁方法
【專利摘要】本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及一種紫色瓶子草的組培快繁方法,包括如下步驟：取健壯母株帶頂芽的莖段為外植體，分別進(jìn)行①外植體用0.1%升汞消毒8～10min，②將消毒后的頂芽接入添加了6?BA、NAA的誘導(dǎo)與分化培養(yǎng)基中培養(yǎng)，③愈傷或不定芽團(tuán)塊接入到添加了6?BA、BR與NAA的增殖培養(yǎng)基中培養(yǎng),④葉片5～12片、株高≥35mm的葉片≥3片、葉寬≥3mm的葉片≥4片的芽團(tuán)接入添加了活性炭的生根培養(yǎng)基中培養(yǎng)。本發(fā)明提供了一種紫色瓶子草組培快繁方法，可以在短時(shí)間內(nèi)獲得大量無(wú)性繁殖的紫色瓶子草組培苗。
【專利說(shuō)明】
一種紫色瓶子草的組培快繁方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明屬于植物組織培養(yǎng)領(lǐng)域，具體涉及一種紫色瓶子草的組培快繁方法?！颈尘凹夹g(shù)】
[0002]紫色瓶子草為瓶子草科瓶子草屬多年生草本食蟲植物。瓶子草外形奇美，葉子成瓶狀，側(cè)臥，顏色鮮艷，帶有絢麗的紫色網(wǎng)紋。瓶子草可誘捕昆蟲，其籠子可分泌蜜汁與消化液，引誘并捕食昆蟲。是當(dāng)今世界最受歡迎的趣味植物之一，具有很高的觀賞價(jià)值和經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
[0003]目前，瓶子草的繁殖的方法主要有分株、播種和組培。
[0004]分株繁殖，春季脫盆后，除去根際基質(zhì)，用利刀將根莖切成3?4叢，每叢至少具一小瓶狀葉。栽培基質(zhì)采用細(xì)河沙、泥炭土或腐葉土、苔蘚或活水苔混合物。
[0005]播種繁殖，瓶子草在自然狀態(tài)下開花少，結(jié)果率低，需人工授粉提高結(jié)果率。種子采收后，需經(jīng)“濕冷積層”的階段才會(huì)發(fā)芽。而從種子到成熟植株約需3?5年。[〇〇〇6]組培繁殖，難度較大。目前，國(guó)內(nèi)外相關(guān)的研究報(bào)道很少，主要以嫩芽莖尖、葉片進(jìn)行愈傷組織誘導(dǎo)，然后再誘導(dǎo)愈傷組織分化不定芽，再由不定芽形成完整植株。如東莞市生物技術(shù)研發(fā)所以白葉瓶子草的竦芽莖尖為外植體，經(jīng)消毒、愈傷與不定芽分化誘導(dǎo)、增殖、 生根，形成完整植株，目前已規(guī)?；a(chǎn)。華南農(nóng)業(yè)大學(xué)以瓶子草單芽及葉片為外體值，經(jīng)消毒、愈傷與不定芽分化誘導(dǎo)、增殖、生根，形成完整植株，但仍處于科研階段。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0007]本發(fā)明的目的在于提供一種紫色瓶子草的組培快繁方法，通過(guò)對(duì)紫色瓶子草莖尖及莖段的誘導(dǎo)，獲得大量的紫色瓶子草再生植株。
[0008]本發(fā)明提供一種紫色瓶子草組培快繁的方法，包括如下步驟:采集紫色瓶子草帶頂芽的莖段為外植體，依次進(jìn)行①外植體消毒，②愈傷組織誘導(dǎo)與不定芽分化，③繼代增殖，④不定芽生根，獲得紫色瓶子草再生植株。
[0009]所述采集紫色瓶子草帶頂芽的莖段，是在控水7?10d后采集，要求母株健壯。
[0010]所述①外植體消毒，是以帶頂芽的莖段為外植體，以0.1%升汞為消毒劑，消毒8? lOmin，之后無(wú)菌水漂洗2?3次。
[0011]所述②愈傷組織誘導(dǎo)與不定芽分化，是將消毒后帶頂芽的莖段接入誘導(dǎo)與分化化培養(yǎng)基中；1個(gè)莖段/杯，26±l°c，300?18001UX培養(yǎng)，光照12h/d。頂芽培養(yǎng)20d后開始萌動(dòng)， 培養(yǎng)30d后，頂芽抽長(zhǎng)，莖段長(zhǎng)出新芽/葉。
[0012]所述誘導(dǎo)與分化培養(yǎng)基是以MS改培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，含有1?3mg/L 6-BA(6-芐基氨基噪呤，Benzylaminmopurine)、0 ? 01?0 ? lmg/L NAA(a-萘乙酉愛，1-Naphthaleneacetic acid), 30g/L鹿糖，5.5g /L瓊酯，pH6.0。
[0013]所述的MS改培養(yǎng)基，其特征在于:硝酸鉀、硝酸氨、硫酸鎂、硫酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、 磷酸二氫鉀、鉬酸鈉、硼酸用量減半。
[0014]所述③繼代增殖，切下直徑5?10mm的愈傷團(tuán)塊或2?4個(gè)芽的不定芽團(tuán)接入增殖培養(yǎng)中，10團(tuán)/杯，26± 1°C，1500?30001ux培養(yǎng)，光照12h/d。增殖培養(yǎng)30d后，愈傷或不定芽團(tuán)塊增殖率多4。
[0015]所述增殖培養(yǎng)基是以MS改培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，含有1?3mg/L的6-BA(6-芐基氨基嘌呤， Benzylaminmopurine)、0.01?0 ? lmg/L BR(蕓苔素內(nèi)酯，Brassinolide)、0 ? 01?0 ? lmg/L NAA (a-萘乙酸，1-Naphthaleneacetic acid)，30g/L鹿糖，6g /L瓊酯，pH6.0〇[〇〇16] 所述④不定芽生根，切下葉片5?12片、株高彡35mm的葉片彡3片、葉寬彡3mm的葉片彡4片、根長(zhǎng)彡20mm的芽團(tuán)接入生根培養(yǎng)基中。50團(tuán)/杯，21 ±1°C，1500?30001ux培養(yǎng)，光照12h/d。
[0017]所述生根培養(yǎng)基是以MS改培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，含有l(wèi)g/L AC(活性炭，Acticarbon)， 30g/L蔗糖，6g /L瓊酯，pH6.0。培養(yǎng)1周后，即可煉苗移栽。
[0018]本發(fā)明的創(chuàng)新之處是公開了紫色瓶子草頂芽及莖段愈傷誘導(dǎo)、不定芽分化、增殖、 生根的培養(yǎng)基配方及其規(guī)?；M培快繁的一種方法。本發(fā)明引入了蕓苔素內(nèi)酯，提高了紫色瓶子草的增殖系數(shù)，目前，國(guó)內(nèi)外尚無(wú)相關(guān)研究報(bào)道。
[0019]本發(fā)明有利于規(guī)?；敝硟?yōu)良趣味食蟲植物紫色瓶子草種苗，滿足人們提高生活質(zhì)量對(duì)紫色瓶子草盆花的要求，豐富家庭、辦公場(chǎng)所的趣味植物景觀?！揪唧w實(shí)施方式】
[0020]—種紫色瓶子草組培快繁方法，該方法包括以下步驟。
[0021]實(shí)施例1:①選取外植體:選取健壯無(wú)病蟲害的紫色瓶子草為母株，取其帶頂芽的莖段為外植體， 去除葉片與外層苞片，備用。
[0022]②外植體消毒:在超凈工作臺(tái)上，將帶頂芽的莖段裝入無(wú)菌空瓶，以0.1%升汞為消毒劑，消毒1 Omin，之后無(wú)菌水漂洗2次。無(wú)菌率71.4%。
[0023]③愈傷組織誘導(dǎo)與不定芽分化:將消毒后的帶頂芽莖段接入誘導(dǎo)與分化培養(yǎng)基中；1個(gè)莖段/杯，26±1°C，300?18001ux培養(yǎng)，光照12h/d，l個(gè)月轉(zhuǎn)代1次。誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基: MS改+2 ? 5mg/L 6-BA+0 ? 05mg/LNAA+30g/L蔗糖+5 ? 5g /L瓊酯，pH6 ? 0。頂芽培養(yǎng)20d后開始萌動(dòng)，培養(yǎng)30d后，頂芽抽長(zhǎng)，莖段長(zhǎng)出新芽/葉。
[0024]④繼代增殖:切下直徑5?10mm的愈傷團(tuán)塊或2?4個(gè)芽的不定芽團(tuán)接入增殖培養(yǎng)中，10團(tuán)/杯，26±1°(:，1500~300011?培養(yǎng)，光照1211/(1。增殖培養(yǎng)30(1后，愈傷或不定芽團(tuán)塊增殖率彡4。增殖培養(yǎng)基:MSg^2.5mg/L 6-BA+0.05mg/L BR+0.08mg/L NAA+30g/L蔗糖+5.5g /L 瓊酯，pH6.0。[〇〇25] ⑤不定芽生根:切下葉片5?12片、株高彡35mm的葉片彡3片、葉寬彡3mm的葉片彡4 片、根長(zhǎng)彡20mm的芽團(tuán)接入生根培養(yǎng)基中。50團(tuán)/杯，21±1°(:，1500~300011?培養(yǎng)，光照1211/d〇[〇〇26]生根培養(yǎng)基:MS改+0.1g/L AC+30g/L蔗糖+6g /L瓊酯，pH6.0。培養(yǎng)7d后，即可煉苗移栽。[〇〇27] 實(shí)施例2:①選取外植體:選取健壯無(wú)病蟲害的紫色瓶子草為母株，取其帶頂芽的莖段為外植體，去除葉片與外層苞片，備用。
[0028]②外植體消毒:在超凈工作臺(tái)上，將帶頂芽的莖段裝入無(wú)菌空瓶，以0.1%升汞為消毒劑，消毒8min，之后無(wú)菌水漂洗3次。無(wú)菌率76.3%。[〇〇29]③愈傷組織誘導(dǎo)與不定芽分化:將消毒后的帶頂芽莖段接入誘導(dǎo)與分化培養(yǎng)基中；1個(gè)莖段/杯，26±1°C，300?18001ux培養(yǎng)，光照12h/d，l個(gè)月轉(zhuǎn)代1次。誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基: MS改+3mg/L 6-BA+0.lmg/LNAA+30g/L蔗糖+5.5g /L瓊酯，pH6.0。頂芽培養(yǎng)22d后開始萌動(dòng)， 培養(yǎng)30d后，頂芽抽長(zhǎng)，莖段長(zhǎng)出新芽/葉。
[0030]④繼代增殖:切下直徑5?10mm的愈傷團(tuán)塊或2?4個(gè)芽的不定芽團(tuán)接入增殖培養(yǎng)中，10團(tuán)/杯，26±1°(:，1500~300011?培養(yǎng)，光照1211/(1。增殖培養(yǎng)30(1后，愈傷或不定芽團(tuán)塊增殖率彡4。增殖培養(yǎng)基:MS改+3mg/L 6-BA+0.lmg/L BR+0.1mg/L NAA+30g/L蔗糖+5.5g /L 瓊酯，pH6.0。
[0031]⑤不定芽生根:切下葉片5?12片、株高彡35mm的葉片彡3片、葉寬彡3mm的葉片彡4 片、根長(zhǎng)彡20mm的芽團(tuán)接入生根培養(yǎng)基中。50團(tuán)/杯，21±1°(:，1500~300011?培養(yǎng)，光照1211/d〇[〇〇32]生根培養(yǎng)基:MS改+0.1g/L AC+30g/L蔗糖+6g /L瓊酯，pH6.0。培養(yǎng)7d后，即可煉苗移栽。
[0033]上述實(shí)施例用來(lái)解釋說(shuō)明本發(fā)明，而不是對(duì)本發(fā)明進(jìn)行限制。本發(fā)明的保護(hù)范圍由所附的權(quán)利要求來(lái)限定。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種紫色瓶子草的組培快繁方法，包括如下步驟:取健壯紫色瓶子草植株帶項(xiàng)芽的莖段為外植體，依次進(jìn)行①外植體消毒，②愈傷組織 誘導(dǎo)與不定芽分化，③繼代增殖，④不定芽生根。2.根據(jù)權(quán)利要求1，所述紫色瓶子草的組培快繁方法，其特征在于:所述①外植體消毒， 以帶頂芽的莖段為外植體，以0.1%升汞為消毒劑，消毒8?lOmin，之后無(wú)菌水漂洗2?3次。3.根據(jù)權(quán)利要求1，所述紫色瓶子草的組培快繁方法，其特征在于:所述②愈傷組織誘 導(dǎo)與不定芽分化，將消毒后的帶頂芽莖段接入誘導(dǎo)分化培養(yǎng)基中，26±rC，300?ISOOlux培 養(yǎng)，光照12h/d;頂芽培養(yǎng)20d后開始萌動(dòng)，培養(yǎng)30d后，頂芽抽長(zhǎng)，莖段長(zhǎng)出新芽/葉。4.根據(jù)權(quán)利要求3,所述紫色瓶子草的組培快繁方法，其特征在于，所述誘導(dǎo)與分化培 養(yǎng)基是以MS改培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，含有1?3mg/L 6-BA(6-節(jié)基氨基噪呤，Benzylaminmopurine)、 0.01?0.1mg/L NAA(a-蔡乙酸，1-Naphthaleneacetic acid), 30g/L鹿糖，5.5g /L瓊酯， pH6.0 〇5.根據(jù)權(quán)利要求4,所述的MS改培養(yǎng)基(下同)，其特征在于:硝酸鉀、硝酸氨、硫酸鎂、硫 酸錳、硫酸鋅、硫酸銅、磷酸二氫鉀、鉬酸鈉、硼酸用量減半。6.根據(jù)權(quán)利要求1，所述紫色瓶子草的組培快繁方法，其特征在于:所述③繼代增殖，切 下直徑5?10mm的愈傷團(tuán)塊或2?4個(gè)芽的不定芽團(tuán)接入增殖培養(yǎng)中，10團(tuán)/杯，26 ±1°C， 1500?3000 lux培養(yǎng)，光照12h/d;增殖培養(yǎng)30d后，愈傷或不定芽團(tuán)塊增殖率彡4。7.根據(jù)權(quán)利要求6，所述紫色瓶子草的組培快繁方法，其特征在于:所述增殖培養(yǎng)基是 以皿5改培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，含有1~311^/1^的6-1^(6-節(jié)基氨基噪呤，1361127131111111]1(^111'；[116)、0.01~ 0.1mg/L BR(蕓苔素內(nèi)酯，Brassinolide)、0.01?0.1mg/L NAA(a-蔡乙酸，1-Naphthaleneacetic acid)，30g/L鹿糖，6g /L瓊酯，pH6.0。8.根據(jù)權(quán)利要求1，所述紫色瓶子草的組培快繁方法，其特征在于:所述④不定芽生根， 切下葉片5?12片、株高彡35mm的葉片彡3片、葉寬彡3mm的葉片彡4片、根長(zhǎng)彡20mm的芽團(tuán)接 入生根培養(yǎng)基中；50團(tuán)/杯，21 ± 1°C，1500?3000lux培養(yǎng)，光照12h/d。9.根據(jù)權(quán)利要求8,所述紫色瓶子草的組培快繁方法，其特征在于:所述生根培養(yǎng)基是 以MS改培養(yǎng)基為基礎(chǔ)，含有l(wèi)g/L AC(活性炭，Acticarbon)，30g/L蔗糖，6g /L瓊酯，pH6.0; 培養(yǎng)1周后，即可煉苗移栽。
【文檔編號(hào)】A01H4/00GK106069783SQ201610639585
【公開日】2016年11月9日
【申請(qǐng)日】2016年8月8日 公開號(hào)201610639585.0, CN 106069783 A, CN 106069783A, CN 201610639585, CN-A-106069783, CN106069783 A, CN106069783A, CN201610639585, CN201610639585.0
【發(fā)明人】吳子平, 紀(jì)超群
【申請(qǐng)人】吳子平