懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型屬于微生物細(xì)胞學(xué)裝置，具體涉及一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置。
【背景技術(shù)】
[0002]免疫熒光染色技術(shù)是常用細(xì)胞與分子生物學(xué)實(shí)驗(yàn)方法，它應(yīng)用抗原-抗體反應(yīng)原理，以熒光物質(zhì)標(biāo)記抗體而進(jìn)行抗原定位，用于觀察目的蛋白的表達(dá)以及蛋白間是否存在共定位或共表達(dá)關(guān)系。
[0003]對(duì)于多見(jiàn)的貼壁細(xì)胞免疫熒光染色，常用且普遍采用的是使細(xì)胞“爬片”于多聚賴氨酸包被的載體表面，然后進(jìn)行經(jīng)典的染色操作。然而對(duì)于在干細(xì)胞研究中常用的懸浮細(xì)胞球，因?yàn)樗毁N壁，所以在經(jīng)典的實(shí)驗(yàn)操作過(guò)程中極易造成細(xì)胞球的丟失。盡管現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道使用多聚賴氨酸包被的蓋玻片即可將懸浮細(xì)胞球粘附于蓋玻片[1~3]，但實(shí)際操作結(jié)果并非如此，即使使用多聚賴氨酸包被的蓋玻片，仍僅有10%?20%細(xì)胞球會(huì)粘附于蓋玻片表面，且其中95%以上的細(xì)胞球會(huì)在經(jīng)典操作過(guò)程中丟失，最終導(dǎo)致樣本量過(guò)少而實(shí)驗(yàn)失敗。
[0004]針對(duì)懸浮細(xì)胞的不貼壁性，現(xiàn)有文獻(xiàn)報(bào)道了多種可用于懸浮細(xì)胞球的免疫熒光染色方法。
[0005]Geraldo, S.等人研究發(fā)現(xiàn)將細(xì)胞球固定于膠原蛋白凝膠中確實(shí)可以保證細(xì)胞球不丟失[4]，但此種方法仍然存在缺陷:首先，凝膠中的膠原蛋白纖維會(huì)起到遮擋作用，影響共聚焦顯微鏡的激發(fā)光強(qiáng)度和穿透距離;其次，為了達(dá)到同樣的染色效果，染色過(guò)程中需要抗體工作液濃度加倍甚至三倍，并延長(zhǎng)抗體孵育時(shí)間，增加了消耗的時(shí)間和實(shí)驗(yàn)經(jīng)費(fèi)[5] ο如果將含細(xì)胞球的膠原蛋白凝膠鋪于細(xì)胞小室內(nèi)，雖然可以在一定程度上減少抗體工作液量，但是實(shí)際應(yīng)用中，小室底部的有孔PET膜會(huì)影響高倍鏡下對(duì)細(xì)胞細(xì)節(jié)的觀察。
[0006]參考文獻(xiàn)
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【發(fā)明內(nèi)容】

[0012]本實(shí)用新型是為了克服現(xiàn)有技術(shù)中存在的懸浮細(xì)胞球不貼壁生長(zhǎng)難以制樣以及現(xiàn)有懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色方法存在的各種缺點(diǎn)而提出，其目的是提供一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置。
[0013]本實(shí)用新型的技術(shù)方案是:
[0014]—種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，包括細(xì)胞小室，所述細(xì)胞小室為上端敞口的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，細(xì)胞小室的底面為有機(jī)材料膜，還包括套裝于細(xì)胞小室下端外部的染色套件，染色套件是中空且上端敞口的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，中部形成內(nèi)底，內(nèi)底為下陷的圓錐面。
[0015]所述細(xì)胞小室上緣均布多個(gè)弧形缺口，且沿細(xì)胞小室的外圓周壁均布多個(gè)掛件，弧形缺口與掛件交錯(cuò)分布。
[0016]所述內(nèi)底到染色套件頂端的垂直距離小于等于細(xì)胞小室外部的掛件下緣到細(xì)胞小室底面的垂直距離。
[0017]所述染色套件的上端內(nèi)徑與細(xì)胞小室下端外徑緊配合。
[0018]所述染色套件采用具有韌性的材料制成。
[0019]本實(shí)用新型的有益效果是:
[0020]本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、制造成本低，使用方便，利于推廣應(yīng)用；內(nèi)底呈圓錐面設(shè)計(jì)有利于液體的聚集;染色套件采用具有韌性的材料制成能夠達(dá)到將上室內(nèi)液體吸至下室的目的。
【附圖說(shuō)明】
[0021]圖1本實(shí)用新型的結(jié)構(gòu)示意圖。
[0022]其中:
[0023]I細(xì)胞小室2染色套件
[0024]3內(nèi)底4掛件
[0025]5 缺口。
具體實(shí)施例
[0026]下面結(jié)合說(shuō)明書附圖及實(shí)施例對(duì)本實(shí)用新型懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置進(jìn)行詳細(xì)說(shuō)明:
[0027]如圖1所示，一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，包括細(xì)胞小室I，所述細(xì)胞小室I為上端敞口的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，上緣均布多個(gè)弧形缺口 5，且沿細(xì)胞小室I的外圓周壁均布多個(gè)掛件4，弧形缺口 5與掛件4交錯(cuò)分布，細(xì)胞小室I的底面為有機(jī)材料膜，其特征在于:還包括套裝于細(xì)胞小室I下端外部的染色套件2，染色套件2是中空且上端敞口的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，中部形成內(nèi)底3，內(nèi)底3為下陷的圓錐面。
[0028]所述內(nèi)底3到染色套件2頂端的垂直距離小于等于細(xì)胞小室I外部的掛件4下緣到細(xì)胞小室I底面的垂直距離。
[0029]所述染色套件2的上端內(nèi)徑與細(xì)胞小室I下端外徑緊配合。
[0030]所述染色套件2采用具有韌性的材料制成，滿足染色套件2套裝于細(xì)胞小室I下端外部時(shí)，染色套件2與細(xì)胞小室緊配合，能夠達(dá)到將上室內(nèi)液體吸至下室的目的。
[0031]本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、制造成本低，使用方便，利于推廣應(yīng)用；內(nèi)底呈圓錐面設(shè)計(jì)有利于液體的聚集;染色套件采用具有韌性的材料制成能夠達(dá)到將上室內(nèi)液體吸至下室的目的。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，包括細(xì)胞小室(I)，所述細(xì)胞小室(I)為上端敞口的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，細(xì)胞小室(I)的底面為有機(jī)材料膜，其特征在于:還包括套裝于細(xì)胞小室(I)下端外部的染色套件(2)，染色套件(2)是中空且上端敞口的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，中部形成內(nèi)底(3)，內(nèi)底(3)為下陷的圓錐面。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，其特征在于:所述細(xì)胞小室(I)上緣均布多個(gè)弧形缺口(5)，且沿細(xì)胞小室(I)的外圓周壁均布多個(gè)掛件(4)，弧形缺口(5)與掛件(4)交錯(cuò)分布。3.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，其特征在于:所述內(nèi)底(3)到染色套件(2)頂端的垂直距離小于等于細(xì)胞小室(I)外部的掛件(4)下緣到細(xì)胞小室(I)底面的垂直距離。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，其特征在于:所述染色套件(2)的上端內(nèi)徑與細(xì)胞小室(I)下端外徑緊配合。5.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，其特征在于:所述染色套件(2)采用具有韌性的材料制成。
【專利摘要】本實(shí)用新型公開(kāi)了一種懸浮細(xì)胞球免疫熒光染色裝置，屬于微生物細(xì)胞學(xué)裝置，包括細(xì)胞小室，所述細(xì)胞小室為上端敞口的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，弧形缺口與掛件交錯(cuò)分布，細(xì)胞小室的底面為有機(jī)材料膜，還包括套裝于細(xì)胞小室下端外部的染色套件，染色套件是中空的圓臺(tái)型結(jié)構(gòu)，中部形成內(nèi)底，內(nèi)底為下陷的圓錐面。本實(shí)用新型結(jié)構(gòu)簡(jiǎn)單、制造成本低，使用方便，利于推廣應(yīng)用；內(nèi)底呈圓錐面設(shè)計(jì)有利于液體的聚集；染色套件采用具有韌性的材料制成能夠達(dá)到將上室內(nèi)液體吸至下室的目的。
【IPC分類】G01N1/31
【公開(kāi)號(hào)】CN205262836
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201521055669
【發(fā)明人】楊學(xué)軍, 張辰, 李濤, 于圣平, 劉波, 周星辰
【申請(qǐng)人】天津醫(yī)科大學(xué)總醫(yī)院
【公開(kāi)日】2016年5月25日
【申請(qǐng)日】2015年12月17日