一種蔬菜和水果中四氯蟲酰胺殘留量的測定方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種蔬菜和水果中四氯蟲酰胺殘留量的測定方法，更具體地說是采用 氣相色譜-負化學(xué)離子源-質(zhì)譜（GC-NCI-MS)定性定量測定蔬菜和水果中殘留的四氯蟲酰 胺含量的方法，屬于農(nóng)藥殘留量的測定技術(shù)領(lǐng)域。
【背景技術(shù)】
[0002] 雙酰胺類殺蟲劑是近年來全球熱門的殺蟲劑產(chǎn)品，可廣泛應(yīng)用于水稻、蔬菜、棉花 等作物的害蟲控制，具有低毒、環(huán)境安全、高活性等優(yōu)點，包括氯蟲苯甲酰胺、氰蟲酰胺、氟 蟲雙酰胺等品種，四氯蟲酰胺（SYP-9080)是由中化集團下屬沈陽化工研宄院研發(fā)、中化農(nóng) 化有限公司經(jīng)營的新產(chǎn)品，我國首個具有自主知識產(chǎn)權(quán)的雙酰胺類殺蟲劑，已獲得國家農(nóng) 業(yè)部的臨時登記。
[0003] 四氯蟲酰胺（SYP-9080)屬于魚尼丁受體激活劑類殺蟲劑，其通過與害蟲體內(nèi)魚 尼丁受體結(jié)合，打開鈣離子通道，使儲存在細胞內(nèi)的鈣離子持續(xù)釋放到肌漿中，鈣離子和肌 漿中基質(zhì)蛋白結(jié)合，引起肌肉持續(xù)收縮。昆蟲體癥狀表現(xiàn)為抽搐、拒食，最終死亡。四氯蟲 酰胺為低毒、廣譜殺蟲劑，對鱗翅目害蟲均具有很好的活性。防治對象包括稻縱卷葉螟、二 化螟、小菜蛾、甜菜夜蛾、玉米螟、甘蔗螟、小卷蛾、食心蟲等。
[0004] 隨著四氯蟲酰胺的登記、推廣和使用，有關(guān)四氯蟲酰胺殘留消解動態(tài)及最終殘留 量等環(huán)境行為的研宄勢必增加，同時，作為我國主要出口市場的歐盟、日本等國家規(guī)定若田 間使用農(nóng)藥沒有在該國家登記，沒有制定相應(yīng)的殘留限量標(biāo)準時，出口至其國家的食品農(nóng) 產(chǎn)品包括畜禽肉等動物源性食品中殘留限量均實行0. 〇lmg/L的"一律標(biāo)準"。
[0005] 迄今為止，未見國內(nèi)外有關(guān)于食品農(nóng)產(chǎn)品中四氯蟲酰胺殘留量檢測方法的報道， 配備負化學(xué)電離源的氣相色譜質(zhì)譜（GC-NCI-MS)分析食品農(nóng)產(chǎn)品中農(nóng)藥殘留具有很大優(yōu) 勢，負化學(xué)離子源（NCI源）被稱為質(zhì)譜"軟電離源"，對含電負性集團的分析物具有高選擇 性和高靈敏度，由于其特征性強，利用其進行殘留分析時，基質(zhì)干擾很少，可很準確地對目 標(biāo)物進行定性和定量分析?，F(xiàn)各種檢測機構(gòu)和企業(yè)均購置了氣相色譜-質(zhì)譜儀（GC-MS)，一 般也都配備了負化學(xué)離子源（NCI)，現(xiàn)很多類農(nóng)藥均含有電負性基團，有機氯和擬除蟲菊酯 類農(nóng)藥分子大都含有一F、一C1、一Br或一C00 -等強電負性基團；有機磷農(nóng)藥分子大都含 有=S、一 0R、一P、一 0 -、一C1、或一P= 0等電負性基團；而近年來開發(fā)的新型農(nóng)藥中大 多含有一F基團，因此，使用GC-NCI-MS可方便實現(xiàn)多種農(nóng)藥的多殘留分析，與GC-NCI-MS 相比，能獲得更好的抗干擾能力、更低的靈敏度和更好的選擇性，四氯蟲酰胺屬電負性化合 物，因此，建立氣相色譜-負化學(xué)離子源-質(zhì)譜（GC-NCI-MS)定性和定量分析蔬菜和水果中 四氯蟲酰胺殘留量的檢測方法具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是提供一種蔬菜和水果中四氯蟲酰胺殘留量的測定方法。
[0007] 為實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明所采用的技術(shù)方案是：一種蔬菜和水果中四氯蟲酰胺殘 留量的測定方法，包括如下步驟：
[0008] (1)提取 稱取樣品于具塞離心管中，加入乙腈或含1 %乙酸的乙腈溶液均質(zhì)提取lmin，加入氯 化鈉或乙酸鈉中的一種和無水硫酸鎂，振蕩后離心。
[0009] ⑵凈化 移取樣品提取液上清液于離心管中，加入基質(zhì)分散固相萃取劑，渦旋振蕩，離心，吸取 一定量凈化液氮氣吹干后，用體積比為1/1的丙酮/正己烷混合溶劑溶解定容，過膜后，待 氣相色譜-負化學(xué)離子源-質(zhì)譜（GC-NCI-MS)檢測。
[0010] (3)標(biāo)準工作溶液的配制 將不含四氯蟲酰胺的同種類基質(zhì)空白樣品按上述步驟（1)、（2)處理時，得樣品提取凈 化殘渣，加入適量溶劑和混合標(biāo)準溶液，渦旋混勻，配制成至少3個濃度的四氯蟲酰胺系列 混合標(biāo)準工作液。
[0011] (4)氣相色譜-負化學(xué)離子源-質(zhì)譜法（GC-NCI-MS)測定 將步驟（3)中的各濃度梯度的標(biāo)準工作液進行GC-NCI-MS測定，以標(biāo)準工作液的色譜 峰面積對其相應(yīng)濃度進行回歸分析，得到標(biāo)準工作曲線；在相同條件下將步驟（2)中凈化 后的樣品液注入GC-NCI-MS進行測定，測得樣品液中四氯蟲酰胺的色譜峰面積，代入標(biāo)準 曲線，得到樣品液中四氯蟲酰胺含量，然后根據(jù)樣品液所代表試樣的質(zhì)量計算得到樣品中 四氯蟲酰胺殘留量。
[0012] 步驟（1)中樣品若為脫水蔬菜和水果，需降低稱樣量，并加適量水充分浸潤。
[0013] 步驟⑴中米用乙腈提取時加入氯化鈉鹽析，米用含1 %乙酸的乙腈溶液提取時 加入乙酸鈉鹽析；含水量較少的樣品鹽析時需加入一定量的水。
[0014] 步驟（2)中基質(zhì)分散固相萃取劑由無水硫酸鎂、C18和PSA組成，每體積提取液中 無水硫酸鎂、C18和PSA加入量分別為150mg、50mg和25mg。
[0015] 步驟（4)中氣相色譜條件為：色譜柱：HP-5MS毛細管色譜柱，柱長30m，內(nèi)徑 0. 25mm，膜厚0. 25ym;進樣口溫度250°C;載氣：He，不分流模式進樣，進樣量：1yL;恒流模 式，流速1.OmL/min;升溫程序：初溫60°C保持2min，以每分鐘20°C的速度升至200°C，然后 以每分鐘2°C的速度升至220°C，再以每分鐘20°C的速度升至280°C，保持lOmin;傳輸線溫 度：280°C。
[0016] 步驟⑷中質(zhì)譜條件為：離子源溫度150°C;四極桿溫度150°C;電離模式：負化 學(xué)電離，即NCI模式，能量70eV;掃描方式：選擇離子監(jiān)測（SIM)模式，監(jiān)測的離子為：332、 334、336。
[0017] 步驟（4)中測定樣液和基質(zhì)標(biāo)準工作溶液時，若樣液中農(nóng)藥色譜峰保留時間與標(biāo) 準溶液中相應(yīng)農(nóng)藥保留時間相一致，并且在扣除背景后的樣品質(zhì)譜圖中，所選擇的離子均 出現(xiàn)，而且離子豐度比與標(biāo)準溶液的離子豐度比相一致，則可判斷樣液中存在這種農(nóng)藥；若 上述兩個條件不能同時滿足，則判斷不含該種農(nóng)藥。
[0018] 本發(fā)明的有益效果在于：
[0019] 本發(fā)明利用分散固相萃取技術(shù)，建立了簡便、快速并能有效避免樣品中基質(zhì)干擾 的樣品前處理方法，將此前處理方法結(jié)合GC-NCI-MS應(yīng)用于蔬菜和水果中四氯蟲酰胺定 性確證和定量檢測，平均回收率為87. 1%?94. 6%，平均相對標(biāo)準偏差（RSD)為4. 3%? 6. 6%，檢出限低于4.75yg/kg，具有操作簡便、快速、準確、靈敏度高及重復(fù)性好的優(yōu)點。能 滿足0.01mg/kg殘留限量的"一律標(biāo)準"技術(shù)要求，為保障我國人民食品安全、對外出口貿(mào) 易健康發(fā)展提供有力的技術(shù)支撐。
【附圖說明】
[0020] 圖1為濃度為100ng/mL的四氯蟲酰胺標(biāo)液的GC-NCI-MS選擇離子色譜圖。
[0021] 圖2為不含四氯蟲酰胺的蘋果空白樣品的GC-NCI-MS選擇離子色譜圖。
[0022] 圖3為添加在空白蘋果基質(zhì)中的四氯蟲酰胺的GC-NCI-MS選擇離子色譜圖。
[0023] 圖4為以不含四氯蟲酰胺的蘋果空白樣品為基質(zhì)配制的四氯蟲酰胺標(biāo)準工作曲 線。
【具體實施方式】
[0024] 現(xiàn)以以下實施實例來說明本發(fā)明，但并不是限制本發(fā)明的范圍。
[0025] 實施例中使用的儀器與試劑
[0026] T18Basic均質(zhì)器（IKA，Germany) ;5810R離心機（Eppendorf，Germany) ;MS3 基 本型旋渦混合器（IKA，Germany) ;7890N氣相色譜-5975C質(zhì)譜儀（Agilent，USA);乙二 胺-N-丙基硅烷（PSA)吸附劑（40?60ym)、十八烷基硅烷鍵合相（C18)凈化劑（40? 60ym)均購于美國安捷倫科技有限公司。