專利名稱：雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法
技術(shù)領域：
本發(fā)明涉及牙膏中氯化兩面針堿含量的測定方法，屬于高效液相色譜法測定物質(zhì)含量的技術(shù)領域。
背景技術(shù)：
隨著食品安全事件引起社會廣泛關注，部分學者和社會輿論將視角延伸到“入口形”日化用品領域中，而牙膏作為口腔清潔用品是這一類產(chǎn)品的典型代表，關系到人身安全。對于功能性牙膏的質(zhì)量與安全監(jiān)督不可松懈。我國在中草藥功效方面的研究有著輝煌悠久的歷史，中草藥功效型牙膏從面試至今已有幾十年的歷史，已經(jīng)成為國內(nèi)牙膏市場中的主類產(chǎn)品，一些國際日化用品企業(yè)為了加入中國市場也紛紛對中草藥功效型牙膏進行開發(fā)和生產(chǎn)。這其中不免出現(xiàn)真假難辨、魚目混珠的現(xiàn)象。氯化兩面針堿為蕓香科花椒屬植物兩面針Zan thoxylum ni tidum (Roxb.)DC的干燥根兩面針中的苯并菲定類生物堿,英文名稱:chloride ,分子式:C21H18NO4 - Cl，CAS號:13063-04-2，分子量:382.82，標準品為淡黃色針狀結(jié)晶，溶于甲醇等有機試劑。氯化兩面針堿是兩面針的主要活性有效成分，具有抗炎、鎮(zhèn)痛、解毒等作用。近年來，兩面針藥材資源開始出現(xiàn)匱乏，出現(xiàn)了較多根莖混用現(xiàn)象或偽品，如常見的飛龍掌血屬的飛龍掌血asiatica Lam等,影響藥材質(zhì)量,隨之影響了牙膏中所添加的兩面針活性成分的質(zhì)量。中國藥典以氯化兩面針堿為兩面針含量測定的指標進行檢測。牙膏基質(zhì)為復雜的混合物，通常由摩擦劑、保濕劑、表面活性劑、增稠劑、甜味劑、色素、香精和活性添加物等組成。某些添加成分的化合物碳鏈比較長，在前處理中難以去除，同時，也對色譜柱的柱效有影響。用傳統(tǒng)的高效液相色譜方法去分離、檢測，其中的雜質(zhì)對標準品氯化兩面針堿的測定·有干擾。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明要解決的技術(shù)問題是提供一種雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，本發(fā)明方法操作簡單，快速，選擇性好，重現(xiàn)性好；能夠使目標分析物的色譜峰與雜質(zhì)色譜峰達到較好的基線分離，可以排除牙膏基質(zhì)中干擾物的干擾，準確地對牙膏中的氯化兩面針堿進行定量分析，且分離效果好，線性范圍寬。本發(fā)明所采取的技術(shù)方案是:一種雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，包括以下步驟:(1)繪制氯化兩面針堿的標準曲線(2)準確稱取待測牙膏放置于具塞離心管中，加入甲醇振蕩、搖勻，用甲醇定容；
(3)將步驟(I)的具塞離心管室溫下超聲處理，離心，取上清液用0.22 μ m的有機相濾膜過濾得待測溶液；
(4)利用雙三元高效液相色譜法二維柱分離，紫外檢測器測定待測溶液中氯化兩面針堿，根據(jù)步驟(I)的標準曲線得出牙膏待測溶液中氯化兩面針堿的含量；
采用C18 二維色譜柱測定；
第一維色譜柱為富集柱C18柱(2.1mmX IOOmm, 5 μ m),第二維色譜柱為分析柱C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m)。所述步驟(4)中采用C18 二維色譜柱測定的優(yōu)選條件為:以乙腈和0.02mol/LKH2PO4溶液為流動相，流動相加H3PO4調(diào)節(jié)pH值為2.61 2.75，檢測波長為328nm，進樣量為50uL，色譜柱柱溫為40°C，等梯度洗脫，乙腈與KH2PO4溶液的體積比是35:65，流速為
0.5 L 2mL/min ；
權(quán)利要求
1.一種雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，其特征在于:包括以下步驟:(1)繪制氯化兩面針堿的標準曲線圖； (2)準確稱取待測牙膏放置于具塞離心管中，加入甲醇振蕩、搖勻，用甲醇定容； (3)將步驟(I)的具塞離心管室溫下超聲處理，離心，取上清液用0.22 μ m的有機相濾膜過濾得待測溶液； (4)利用雙三元高效液相色譜法二維柱分離，紫外檢測器測定待測溶液中氯化兩面針堿，根據(jù)步驟(I)的標準曲線得出牙膏待測溶液中氯化兩面針堿的含量； 采用C18 二維色譜柱測定； 第一維色譜柱為富集柱C18柱(2.1mmX IOOmm, 5 μ m),第二維色譜柱為分析柱C18柱(4.6mmX 250mm, 5 μ m)。
2.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，其特征在于:所述步驟(4)中采用C18 二維色譜柱測定的條件為:以乙腈和0.02mol/L KH2PO4溶液為流動相，流動相加H3PO4調(diào)節(jié)pH值為2.61 2.75，檢測波長為328nm，進樣量為50uL，色譜柱柱溫為40°C，等梯度洗脫，乙腈與KH2PO4溶液的體積比是35:65，流速為 0.5 1.2mL/min ； 十通閥的切換時間如下:
3.如權(quán)利要求2所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，其特征在于:步驟(4)中流動相的流速為1.0mL/min。
4.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，其特征在于:步驟(2)中每克待測牙膏定容至10mL。
5.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，其特征在于:步驟(3)中超聲處理的時間為15分鐘。
6.如權(quán)利要求1所述的雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，其特征在于:步驟(3)中IOOOOrpm離心處理5分鐘。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種雙三元二維柱高效液相色譜法測定牙膏中氯化兩面針堿含量的方法，屬于高效液相色譜法測定物質(zhì)含量的技術(shù)領域。包括以下步驟(1)繪制標準曲線圖；(2)將待測牙膏放置于具塞離心管中用甲醇定容；(3)制備待測溶液；(4)利用雙三元高效液相色譜法二維柱分離，紫外檢測器測定氯化兩面針堿，根據(jù)標準曲線得出氯化兩面針堿的含量。本發(fā)明方法操作簡單，快速，選擇性好，重現(xiàn)性好；能夠使目標分析物的色譜峰與雜質(zhì)色譜峰達到較好的基線分離，可以排除牙膏基質(zhì)中干擾物的干擾，準確地對牙膏中的氯化兩面針堿進行定量分析，且分離效果好，線性范圍寬。
文檔編號G01N30/46GK103235068SQ201310137628
公開日2013年8月7日 申請日期2013年4月19日 優(yōu)先權(quán)日2013年4月19日
發(fā)明者張巖, 叢斌, 張敬軒, 劉敬澤, 李揮, 滕文華, 呂品, 龐坤, 李強, 夏靜 申請人:河北省食品質(zhì)量監(jiān)督檢驗研究院