一類氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，其制備方法及應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】一類氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，其制備方法及應(yīng)用。所述氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光染料具有如下結(jié)構(gòu)通式I。本發(fā)明所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針背景熒光低，加入次氯酸后，熒光增強(qiáng)快速明顯，可達(dá)100倍；其熒光強(qiáng)度與次氯酸濃度在納摩爾范圍內(nèi)呈現(xiàn)良好的線性關(guān)系，檢測(cè)限為0.56納摩爾；選擇性好，對(duì)其他活性氧物質(zhì)如H2O2，O2-，TBHP，HO·，TBO·，1O2，NO·幾乎無響應(yīng)且在較寬范圍內(nèi)不受pH的干擾；可用于活細(xì)胞內(nèi)次氯酸的檢測(cè)。
【專利說明】一類氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，其制備方法及應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及精細(xì)化工領(lǐng)域一類熒光探針、其制備方法和用途，尤其涉及一類氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，制備方法及其在次氯酸根檢測(cè)方面的應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]熒光探針作為功能性染料在科學(xué)技術(shù)的各個(gè)領(lǐng)域取得了廣泛應(yīng)用，尤其在生命科學(xué)、臨床醫(yī)療診斷、免疫分析檢測(cè)等方面的研究成為熱點(diǎn)。在眾多熒光染料中，氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川(BDP)熒光染料具有摩爾消光系數(shù)較高、熒光量子產(chǎn)率高、光譜性質(zhì)穩(wěn)定、光熱高、化學(xué)穩(wěn)定性好、分子量小和細(xì)胞毒性較低等優(yōu)點(diǎn)，作為生物分子熒光探針和成像熒光試劑等已被廣泛應(yīng)用。
[0003] 作為生物體內(nèi)一種重要的活性氧，次氯酸(HClO)在生理上主要是由氯離子和過氧化氫在髓過氧化酶催化作用下反應(yīng)生成。在細(xì)胞環(huán)境內(nèi)，由于次氯酸/次氯酸根的強(qiáng)氧化性，其可殺滅外來細(xì)菌，阻止入侵，調(diào)控細(xì)胞生命周期。隨著年齡的增長(zhǎng)，人體內(nèi)次氯酸的濃度會(huì)逐漸的增加。但是過量的次氯酸/次氯酸根卻會(huì)引發(fā)一系列疾病如骨關(guān)節(jié)炎，心血管疾病等，因此發(fā)展一種有效監(jiān)測(cè)次氯酸的方法越來越受到研究者的關(guān)注。
[0004]近年來，相關(guān)研究人員開發(fā)出一系列可用于檢測(cè)水溶液或生物體內(nèi)的次氯酸/次氯酸根的熒光探針。這些探針主要基于次氯酸的強(qiáng)氧化性，如:聯(lián)苯甲酰肼氧化機(jī)理；羥肟酸氧化；脫肟反應(yīng)機(jī)理；對(duì)甲氧基酚氧化機(jī)理；硫原子氧化機(jī)理等。但是，這些探針普遍存在響應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)，靈敏度不高，選擇性差，易受pH干擾等缺點(diǎn)。吡咯是合成BDP的一種重要原料，同時(shí)我們發(fā)現(xiàn)它可以選擇性地被次氯酸氧化而對(duì)其他活性氧(如H2O2,.0H等)不敏感。而且，由于吡咯具有芳香性且氮上的未共用電子對(duì)參與構(gòu)成環(huán)狀大η鍵，削弱了它與質(zhì)子結(jié)合的能力，因此可以很好地避免PH的干擾。除此之外，吡咯的富電性使得其可以有效地對(duì)一些熒光團(tuán)產(chǎn)生光誘導(dǎo)電子轉(zhuǎn)移(PET)效應(yīng)，從而降低背景熒光，提高探針靈敏度。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]為解決以上現(xiàn)有技術(shù)中次氯酸根熒光探針響應(yīng)時(shí)間長(zhǎng)、靈敏度不高、選擇性差和易受PH干擾等缺點(diǎn)，本發(fā)明提供一類氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，以2，4-二甲基吡咯為識(shí)別基團(tuán)，以氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川染料為熒光團(tuán)，提高探針選擇性(不受其他活性氧和PH干擾)和靈敏度，加快響應(yīng)時(shí)間，并且具有良好的生物應(yīng)用。
[0006]本發(fā)明的技術(shù)目的通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn):
[0007]—類氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，具有如下結(jié)構(gòu)通式1:
[0008]
【權(quán)利要求】
1.一類氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，具有如下結(jié)構(gòu)通式1:
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，其特征在于所述&和&各自獨(dú)立地選自H或甲基。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，其特征在于所述&和1?3均為甲基。
4.根據(jù)權(quán)利要求1~3中任一權(quán)利要求所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，其特征在于所述R2選自氫或乙基。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針，其特征在于所述R2為氫。
6.權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針的制備方法，包括以下步驟:以具有結(jié)構(gòu)通式II的化合物與丙烯酰氯按照摩爾比為I~5:1反應(yīng)，然后在堿存在條件下與三氟化硼絡(luò)合得到所述氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針；
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的制備方法，其特征在于具有結(jié)構(gòu)通式II的化合物與丙烯酰氯的反應(yīng)摩爾比為3:1。
8.權(quán)利要求1-5中任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針在檢測(cè)次氯酸根中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述的氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針在檢測(cè)次氯酸根中的應(yīng)用，其特征在于所述氟化硼絡(luò)合二吡咯甲川熒光探針用于活細(xì)胞中次氯酸根的檢測(cè)。
【文檔編號(hào)】C09K11/06GK103666456SQ201310643027
【公開日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2013年12月2日 優(yōu)先權(quán)日:2013年12月2日
【發(fā)明者】樊江莉, 朱浩, 彭孝軍, 王靜云 申請(qǐng)人:大連理工大學(xué)