一種檸檬苦素類化合物及其制備方法
【專利摘要】本發(fā)明公開了一種新的檸檬苦素類化合物及其制備方法，屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域。該化合物為首次報道，是一種結(jié)構(gòu)新穎的檸檬苦素化合物，可以從兩面針的干燥根中提取、分離純化得到。體外試驗證明該化合物對缺氧培養(yǎng)條件下人胰腺癌MiaPaCa?2細胞有明顯的增殖抑制作用，隨著化合物(Ⅰ)濃度的增加和作用時間的延長，抑制作用愈明顯，即在一定濃度范圍內(nèi)存在時間——劑量依賴性。這可能成為胰腺癌治療的另一新思路，可以用來開發(fā)成治療胰腺癌的藥物。
【專利說明】
一種檸檬苦素類化合物及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從兩面針的干燥根中分離得到的一種檸檬苦 素化合物，含其的藥物組合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 兩面針[Zanthoxylum nitidum(Roxb. )DC.]又名蔓椒、兩背針、入地金牛，屬蕓香 科花椒屬植物，傳統(tǒng)入藥部位為根，是臨床常用中藥，廣泛分布于我國廣西、廣東、云南、臺 灣等南方省份。兩面針最早以蔓椒之名記載于《神農(nóng)本草經(jīng)》;《全國中草藥匯編》記載："兩 面針活血，麻醉止痛，主治神經(jīng)痛、胃、十二指腸潰瘍、胃腸絞痛、膽道蛔蟲病引起的疼痛、咽 喉腫痛，并用于皮膚粘膜麻醉"。它在中醫(yī)臨床上的應(yīng)用十分廣泛，可治療風濕麻痹、牙痛、 腰腿痛、跌打損傷腫痛以及咽炎、淋巴結(jié)炎等感染性疾病。
[0003] 兩面針化學(xué)成分方面的研究較為系統(tǒng)，目前從兩面針中已分離多種化合物，分屬 于生物堿類、木脂素類、香豆素類、脂肪酸類等。生物堿類化合物是兩面針中最主要的化學(xué) 成分，其藥理活性最為顯著，具有較強的抗腫瘤活性。
[0004] 氯化兩面針堿是兩面針中活性生物堿類的主成分，在抗炎、鎮(zhèn)痛、心血管系統(tǒng)疾病 以及抗氧化活性等方面具有廣泛的藥理活性。兩面針的提取物具有廣泛的藥理活性，如鎮(zhèn) 痛、消炎、止血作用及對化學(xué)性肝損傷的保護作用等;其作為馳名的牙膏品牌而開發(fā)的系列 口腔護理產(chǎn)品，則是基于兩面針提取液顯著的抗菌消炎和止血作用。而兩面針在民間用藥 的組合方劑中應(yīng)用也十分廣泛，對等常見病癥均有顯著的療效，也有報道以兩面針為主成 分的組合中藥對跌打損傷、關(guān)節(jié)腫痛、腰椎間盤突出癥、痛經(jīng)、血栓外痔、凍瘡、口腔潰瘍及 慢性潰瘍性結(jié)腸炎等病癥均有較好的療效。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從兩面針的干燥根中分離得到的一種檸檬苦素化合物， 含其的藥物組合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的：
[0007] -種檸檬苦素化合物，具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物(I):
[0008] v i
[0009]所述的化合物(I)的制備方法，包含以下操作步驟：
[0010] (a)將兩面針的干燥根粉碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無 醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯 萃取物和正丁醇萃取物；
[0011] (b)步驟（a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再用 75 %乙醇洗脫8個柱體積，收集75 %洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫濃縮物；
[0012] (C)步驟(b)中75 %乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1、30:1、 15:1和8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；
[0013] ⑷步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為15:1、8:1和5:1的二 氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；
[0014] (e)步驟（d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為 75 %的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物 (1)〇
[0015] 進一步地，步驟(a)中，用85%乙醇熱回流提取，合并提取液。
[0016]進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0017] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學(xué)上可接受的載 體。
[0018] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0019] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學(xué)上可接受的、對 人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0020] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等;用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0021]與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明的有益效果體現(xiàn)在：
[0022]化合物（I)對缺氧培養(yǎng)條件下人胰腺癌MiaPaCa-2細胞有明顯的增殖抑制作用，隨 著化合物（I)濃度的增加和作用時間的延長，抑制作用愈明顯，即在一定濃度范圍內(nèi)存在時 間--劑量依賴性。
【附圖說明】
[0023] 圖1為化合物(I)結(jié)構(gòu)式；
[0024] 圖2為化合物（I)計算E⑶和實驗E⑶圖。
【具體實施方式】
[0025] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0026] 主要材料、試劑來源及儀器類型：
[0027]乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學(xué)試劑有限 公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學(xué)試劑有限公司。
[0028]實施例1:化合物(I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證
[0029] (a)將兩面針的干燥根(8kg)粉碎，用85%乙醇熱回流提取(30LX3次），合并提取 液，濃縮至無醇味（6L)，依次用石油醚(6L X 3次）、乙酸乙酯（6L X 3次）和水飽和的正丁醇 (6LX3次)萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物(375g)和正丁醇萃取物；（b)步驟 (a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙醇洗 脫8個柱體積，收集75 %洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫濃縮物（129g); (c)步驟（b)中 75 %乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1 (8個柱體積）、30 :1 (8個柱體 積）、15:1(8個柱體積)和8:1(10個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分；（d)步 驟(c)中組分4(27g)用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為12:1(8個柱體積）、8:1(10個 柱體積)和5:1(8個柱體積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟(d)中組分2 (15g)用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75 %的甲醇水溶液等度洗 脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I) (40mg)。
[0030] 結(jié)構(gòu)確證:冊431]\^顯示[]\1+他]+為111/2 591.2214，結(jié)合核磁特征可得分子式為 C31H36〇1Q，不飽和度為 14。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)δΗ(ρρπι，DMS〇-d6，400MHz):H-3(4 · 99，s)，H-5 (2.88，t，J = 6.7)，H-6(2.23，dd，J = 6.7)，H-6(2.01，dd，J = 6.7)，H-ll(5.73，dd，J = 4.4， 3.3)，H-12(2.04，dd，J=18.5,4.4)，H-12(2.47，dd，J=18.5,3.3)，H-14(1.73，dd，J = 12.3,6.9)，H-15(2.67，dd，J=18.4,6.9)，H-15(2.98，dd，J=18.4，12.3)，H-17(5.06，s)， H-18(0.95，s)，H-19(1.19，s)，H-21(7.26，br，s)，H-22(6.18，br，s)，H-23(7.33，t，J= 1.7)，H-28(0.81，s)，H-29(0.73，s)，H-30(3.34，s)，H-2，（5.89，dq，J=15.5，1.7)，H-3' (7.09，dq，J=15.5,7.0)，H-4,（1.92，dd，J = 7.0，1.7)，8-OH(3.95，br，s)，7-0CH3(3.61， s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)3。(？?111，0130-(16，1001抱）：209.4((：，1-〇,78.1((：，2-〇,84.2(〇1，3-C)，38.7(C，4-C)，46.9(CH，5-C)，30.6(CH2,6-C)，172.7(C，7-C)，70.3(C，8-C)，136.5(C，9- C)，50.6(C，10-C)，126.3(CH，11-C)，31.1(CH2，12-C)，34.7(C，13-C)，38.7(CH，14-C)，28.6 (CH2，15-C)，169.0(C，16-C)，81.2(CH，17-C)，22.6(CH3，18-C)，13.9(CH 3，19-C)，121.2(C， 20-C)，140.1(CH，21-C)，108.8(CH，22-C)，143.1(CH，23-C)，19.7(CH 3,28-C)，23.2(CH3,29-C)，63.8(CH，30-C)，164.6(C，1'-C)，120.7(CH，2'-C)，147.5(CH，3'-C)，18.1(CH3,4'-C)， 51.7(CH 3,7-0CH3);碳原子標記參見圖1。紅外光譜顯示該化合物含有羥基和羰基基團 (3438cnf 1和1728cnf1)。4和13C NMR數(shù)據(jù)的分析表明該化合物為檸檬苦素類化合物，包含四 個叔甲基，一個甲氧基，一個三取代雙鍵，一個三取代的環(huán)氧乙烷，一個酮羰基，三個酯羰基 以及一個β-取代呋喃環(huán)。HMBC譜中，H3-19(δΗΙ. 19，s)和H-30(δΗ3.34，s)與C-l (SC209.4)的 相關(guān)性表明C-1為酮羰基。兩個碳信號0〇78.1，2-(：;63.8,3〇-〇以及質(zhì)子信號0!13.34, 8， H-30)表明該化合物含有一個30，2-環(huán)氧基團。此外，C-3 (SC84.8)位上連有一個2-丁烯酸乙 酯。腿8<：譜中，!1-3(4.99,8)，!1-2'（5.89，(^，了=15.5，1.7)和!1-3'（7.09，(^，了=15.5,7.0) 與C-Γ (δ(： 164.6)的相關(guān)性驗證了上述推論。H-2 '和H-3 '之間的耦合常數(shù)(J = 15.5Hz)表明 2_丁烯酸乙酯結(jié)構(gòu)為E構(gòu)型。HMBC譜中，-OCH3(δΗ3 · 61，s)與C-7(δ(：172 · 7)，H-6(δΗ2 · 23，dd， 了 = 6.7抱；2.〇1，(1(1，1 = 6.7抱）與(：-50〇46.9)和(：-7的相關(guān)性表明(：-60〇3〇.6)連有一個甲 氧羰基片段。根據(jù)HMBC譜中H-17(5.06，s)與C-20(SC121.2)，C-21(SC14(hl)和022(δ C108.8)的相關(guān)性，可推斷呋喃環(huán)位于C-17位上。ROESY譜中，Η-5與Η 3-29，Η-5與Η-17,以及 Η-υβ與Η-17表明這些質(zhì)子為β-構(gòu)型。此外，Η-14與Η3-18的交叉峰表明Me-18和Η-14是α-構(gòu) 型。綜合氫譜、碳譜、HMBC譜和R0ESY譜，以及文獻關(guān)于相關(guān)類型核磁數(shù)據(jù)，可基本確定該化 合物如圖1所示，立體構(gòu)型進一步通過ECD試驗確定，理論值與實驗值基本一致(圖2)。
[0031]實施例2:化合物(I)藥理作用試驗 [0032] -、材料和儀器
[0033]人胰腺癌MiaPaCa-2細胞由天津醫(yī)科大學(xué)附屬腫瘤醫(yī)院腫瘤研究所惠贈。化合物 (I)自制，HPLC歸一化純度大于98% ABS、胰蛋白酶-EDTA消化液購于美國Hyclone公司。PBS 粉購于天津潤泰科技發(fā)展有限公司。DMEM低糖培養(yǎng)液購于美國Gibco公司。MTT購于美國 Sigam公司。DMS0購于北京化工廠。注射用青霉素鈉購于哈藥集團制藥總廠。注射用硫酸鏈 霉素購于大連美羅大藥廠。
[0034]超凈工作臺、細胞培養(yǎng)箱(美國Thermo公司），4°C冰箱、-20°C冰箱（山東青島海爾 公司），-80°C冰箱(FormaScientific)，電熱鼓風干燥箱(天津?qū)嶒瀮x器廠），光學(xué)顯微鏡（日 本Olympus公司），倒置相差顯微鏡(德國leica公司），超速低溫離心機（日本日立公司），酶 標儀（上海科華生物工程股份有限公司），E-Centrifug e(WealteC)，微量加樣器（德國 Eppendorf)，電子恒溫水浴鍋(余姚市東方電工儀器廠），高壓滅菌鍋（山東新華醫(yī)療器械有 限公司），電子天平(上海天平儀器廠）。
[0035]二、試驗方法 [0036] 1、細胞培養(yǎng)：
[0037] (1)常氧培養(yǎng):將人胰腺癌MiaPaCa-2細胞放入5 % C02、37 °C、飽和濕度的C02孵箱中 貼壁培養(yǎng)，適時換培養(yǎng)液，細胞貼壁生長融合至80 %~90 %時傳代。
[0038] (2)缺氧培養(yǎng):將人胰腺癌MiaPaCa-2細胞放在5 % C02、94 %N2、1 % 02、37 °C、飽和濕 度的缺氧小室中培養(yǎng)。缺氧小室建立:缺氧裝置為可調(diào)式培養(yǎng)容器，有一進氣孔和一出氣 孔。實驗時，將缺氧培養(yǎng)的細胞放入可調(diào)式培養(yǎng)容器內(nèi)，由進氣孔充入低氧混合氣體(5% C02+95 % N2+l % 02)，測得小室內(nèi)氧氣濃度維持在1 %后密閉，移入細胞培養(yǎng)箱中，37 °C培養(yǎng)。 每24h再沖氣和換氣一次后置37°C培養(yǎng)箱繼續(xù)培養(yǎng)，分別在24h、48h、72h后收集各組細胞， 用于MTT實驗。
[0039] 2、細胞增殖的檢測
[0040] (1)收集對數(shù)生長期MiaPaCa-2細胞，制備成單細胞懸液進行計數(shù)，調(diào)整濃度以每 孔5 X 103個細胞接種96孔細胞培養(yǎng)板中，每孔總體積100yL(邊緣孔用同體積的無菌ros填 充），于5%C02、37°C、飽和濕度的C02培養(yǎng)箱中培養(yǎng)，待細胞形成單層后棄上清給予不同濃度 化合物（I)處理。
[0041 ] (2)分空白對照組(不加藥物處理的等體積培養(yǎng)液)和化合物（I)藥物20ymol/L、40 4111〇1/1、8(^111〇1/1)，每組設(shè)6個平行孔，實驗重復(fù)三次，置入37°(：，5%0)2、94%吣、1%0 2的缺 氧小室中分別培養(yǎng)24h、48h、72h。
[0042] (3)用PBS輕輕沖洗96孔細胞培養(yǎng)板2次后，每孔加入10yL MTT(5mg/mL)，繼續(xù)培養(yǎng) 4h后離心棄上清，每孔加入15yL的DMS0,放在搖床上振蕩15min，使結(jié)晶物充分溶解。
[0043] (4)酶聯(lián)免疫檢測儀于570nm處測量各孔的吸光度值(A值），計算細胞增殖抑制率。
[0044] (5)抑制率（％ )=(空白對照組平均A值-藥物組平均A值)/空白對照組平均A值X 100%〇
[0045] (6)以濃度為橫軸，抑制率（％ )為縱軸繪制抑制率直方圖。
[0046] 3、統(tǒng)計學(xué)方法
[0047]采用SPSS 17.0進行數(shù)據(jù)處理，計量資料計量資料符合正態(tài)分布的，以均數(shù)士標準 差（S±s)表示，均數(shù)間比較采用單因素方差分析或t檢驗，以P〈0.05為差異有統(tǒng)計學(xué)意義。 [0048]三、結(jié)果及結(jié)論
[0049] MTT結(jié)果顯示：（1)化合物（I)干預(yù)人胰腺癌MiaPaCa-2細胞同等時間（24h、48h、 72h)時，隨著化合物（I)濃度(在實驗濃度范圍間內(nèi)）的增加，其所對應(yīng)的0D值越小，表明在 缺氧條件下化合物（I)對人胰腺癌MiaPaCa-2細胞干預(yù)時間相同時，隨著藥物濃度的增加， 細胞存活率降低。結(jié)果見表1 (注:aP〈〇.01VS對照組;bP〈0.01VS 20ymol/L組;。P〈0.01VS 40μ mol/L組）。
[0050] (2)不同濃度的（20ym〇l/L、40ym〇l/L、80ym 〇l/L)化合物（I)干預(yù)人胰腺癌 MiaPaCa-2細胞48h后，不同濃度作用下細胞增殖抑制率分別為（20.13 ± 0.80) %、（ 34.83 土 0.66) %、（45.68± 1.45) %，抑制率隨藥物濃度增加呈上升趨勢，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P 〈0·05) JOymol/L的化合物（I)干預(yù)胰腺癌MiaPaCa-2細胞24h、48h、72h后，MiaPaCa-2細胞 生長抑制率分別為（38.78±0.92)%、（45.68±1.45)%、（55.95±2.20)%，呈時間依賴性 增高，組間差異有統(tǒng)計學(xué)意義(P〈〇.〇5)。結(jié)果見表2(注: aP〈0.01VS對照組;bP〈0.01VS 20μ mol/lig^PW.OlVS 40ymol/L組）。
[00511結(jié)論，化合物（I)對缺氧培養(yǎng)條件下人胰腺癌MiaPaCa-2細胞有明顯的增殖抑制作 用，隨著化合物（I)濃度的增加和作用時間的延長，抑制作用愈明顯，即在一定濃度范圍內(nèi) 存在時間一一劑量依賴性。這可能成為胰腺癌治療的另一新思路。
[0052 ] 表1化合物（I)對人胰腺癌MiaPaCa-2細胞生長的影響(η = 6，X土s)
[0053]
[0054] 表2化合物（I)對人胰腺癌MiaPaCa-2細胞生長抑制率的影響(η = 6，i士 s)
[0055]
[0056」 實施例3
[0057] 片劑的制備:按實施例1方法先制得化合物（I)，以及利用有機酸如酒石酸、或檸檬 酸或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按其與賦形劑重量比為1:7的 比例加入賦形劑，制粒壓片。
[0058] 實施例4
[0059] 口服液的制備:按實施例1方法先制得化合物（I)，以及利用有機酸如酒石酸、或檸 檬酸或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按常規(guī)口服液制法制成口 服液。
[0060] 實施例5
[0061] 膠囊劑或顆粒劑的制備：按實施例1方法先制得化合物（I)，以及利用有機酸如酒 石酸、或檸檬酸或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按其與賦形劑重 量比為1:9的比例加入賦形劑，制成膠囊或顆粒劑。
[0062] 實施例6
[0063] 注射液的制備:按實施例1方法先制得化合物（I)，以及利用有機酸如酒石酸、或檸 檬酸或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，按常規(guī)加注射用水，精濾， 灌封滅菌制成注射液。
[0064] 實施例7
[0065] 無菌粉針的制備:按實施例1方法先制得化合物（I)，以及利用有機酸如酒石酸、或 檸檬酸或甲酸或乙二酸等、無機酸如鹽酸或硫酸或磷酸制成的鹽，將其溶于無菌注射用水 中，攪拌使溶，用無菌抽濾漏斗過濾，再無菌精濾，分裝于安瓿中，低溫冷凍干燥后無菌熔封 得粉針劑。
[0066] 上述實施例的作用在于說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明的保護 范圍。本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換， 而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和保護范圍。
【主權(quán)項】
1. 一種檸檬苦素化合物，其特征在于，具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)， I 1 )〇2. 權(quán)利要求1所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于包含以下操作步驟： (a) 將兩面針的干燥根粉碎，用80~90%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味， 依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物 和正丁醇萃取物； (b) 步驟(a)中正丁醇取物用大孔樹脂除雜，先用5%乙醇洗脫6個柱體積，再用75%乙 醇洗脫8個柱體積，收集75 %洗脫液，減壓濃縮得75 %乙醇洗脫濃縮物； (c) 步驟(b)中75 %乙醇洗脫濃縮物用正相硅膠分離，依次用體積比為65:1、30:1、15:1 和8:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到4個組分； (d) 步驟(c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為15:1、8:1和5:1的二氯甲 烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分； (e) 步驟(d)中組分2用十八烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的 甲醇水溶液等度洗脫，收集8~12個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物(I)。3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于：步驟(a)中，用85%乙醇 熱回流提取，合并提取液。4. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的化合物（I)的制備方法，其特征在于:所述大孔樹脂為AB-8型 大孔吸附樹脂。5. -種藥物組合物，其特征在于：其中含有治療有效量的權(quán)利要求1所述的化合物（I) 和藥學(xué)上可接受的載體。
【文檔編號】A61P35/00GK106008549SQ201610392328
【公開日】2016年10月12日
【申請日】2016年6月3日
【發(fā)明人】朱正直
【申請人】朱正直