一種新的檸檬苦素類化合物及其制備方法和醫(yī)藥用圖
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于藥物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及從東風桔的干燥根中分離得到的一種具有保 護肝臟作用的檸檬苦素類化合物及其制備方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 東風桔Zwxi/bJia(Poir).Oliv.為蕓香科酒餅勒屬植物，始載于 《嶺南采藥錄》，目前為《全國中草藥匯編》及《衛(wèi)生部藥品標準》中藥成方制劑第三冊附錄收 載。東風桔藥用根與根莖，其性辛、苦，微溫，歸肺、胃、脾經(jīng)，有祛風解表、化痰止咳、理氣定 痛的功效。海南、廣西、廣東、福建等地歷來沿用本品治療急、慢性氣管炎，臨床效果較好，另 外有研究表明其具有較好的化痰、止咳、平喘的功效。東風桔作為一種民間用藥，其療效明 顯，而且廣泛應(yīng)用于各大醫(yī)院復方中，引起了國內(nèi)外學者的興趣，對其研究逐漸深入。隨著 研究的不斷深入，東風桔的化學成分和藥理活性越來越受到人們的重視。
[0003] 東風桔包含的化學成分復雜多樣，迄今為止主要分離得到揮發(fā)油、檸檬苦素類、生 物堿、香豆素類、黃酮類等成分。檸檬苦素類化合物是由大戟烷或甘遂烷型三萜衍生而來的 一類高度氧化的四降三萜類化合物，是蕓香科植物主要特征的化學成分，結(jié)構(gòu)獨特，具有明 顯的抗癌和抗菌等生物活性。近年來的研究比較多，主要集中在其化學結(jié)構(gòu)、生物合成和生 物活性等方面。蕓香科植物中檸檬苦素類化合物主要分為3類：檸檬苦素苷元類、降解型檸 檬苦素類和糖苷型檸檬苦素類，其中以苷元居多。
[0004] 海南、廣西、廣東、福建等地歷來沿用東風桔治療急、慢性氣管炎，取得了較好的臨 床效果，但對于本品藥理活性研究的文獻報道相對比較少。曾廣輝等報道東風桔藥材具有 止咳、化痰的功效，能減少痰液蛋白的水平，其生物堿有解痙作用，平喘效果較好。東風桔糖 衣片是以東風桔的根與莖經(jīng)過水煎液提取而成，在對東風桔糖衣片的止咳平喘藥理實驗研 究中，用18~22g小鼠按成人20倍劑量ig給藥，濃氨水噴霧致咳，EDT5。為131. 9%，表明其 有止咳作用；用220~250g豚鼠以磷酸組織胺噴霧致喘，給藥前致喘時間為136s，給藥后 為412s，平喘有效率302. 94%，證明東風桔糖衣片有平喘作用。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 本發(fā)明的目的是提供一種從東風桔的干燥根中分離得到的一種具有保護肝臟作 用的檸檬苦素化合物及其制備方法。
[0006] 本發(fā)明的上述目的是通過下面的技術(shù)方案得以實現(xiàn)的： 具有下述結(jié)構(gòu)式的化合物（I)，
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[0007] 所述的化合物（I)的制備方法，包含以下操作步驟：（a)將東風桔的干燥根粉碎， 用70~80%乙醇熱回流提取，合并提取液，濃縮至無醇味，依次用石油醚、乙酸乙酯和水飽和 的正丁醇萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物和正丁醇萃取物；（b)步驟（a)中 乙酸乙酯萃取物用大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個柱體積，再用75%乙醇洗脫洗脫8 個柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物浸膏；（c)步驟（b)中75%乙醇 洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1、50:1、30 :1、15:1和1:1的二氯甲烷-甲 醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4用正相硅膠進一步分離，依次用體積比為 20:1、12:1和5:1的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2用十八 烷基硅烷鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8~10 個柱體積洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I)。
[0008] 進一步地，所述大孔樹脂為AB-8型大孔吸附樹脂。
[0009] 進一步地，所述用乙醇熱回流提取采用的乙醇濃度為75%。
[0010] -種藥物組合物，其中含有治療有效量的所述的化合物（I)和藥學上可接受的載 體。
[0011] 所述的化合物（I)在制備保護肝臟的藥物中的應(yīng)用。
[0012] 所述的藥物組合物在制備保護肝臟的藥物中的應(yīng)用。
[0013] 本發(fā)明化合物用作藥物時，可以直接使用，或者以藥物組合物的形式使用。
[0014] 該藥物組合物含有治療有效量的本發(fā)明化合物（I)，其余為藥物學上可接受的、 對人和動物無毒和惰性的可藥用載體和/或賦形劑。
[0015] 所述的可藥用載體或賦形劑是一種或多種選自固體、半固體和液體稀釋劑、填料 以及藥物制品輔劑。將本發(fā)明的藥物組合物以單位體重服用量的形式使用。本發(fā)明藥物可 通過口服或注射的形式施用于需要治療的患者。用于口服時，可將其制成片劑、緩釋片、控 釋片、膠囊、滴丸、微丸、混懸劑、乳劑、散劑或顆粒劑、口服液等；用于注射時，可制成滅菌的 水性或油性溶液、無菌粉針、脂質(zhì)體或乳劑等。
[0016] 說明書附圖 圖1為化合物（I)結(jié)構(gòu)式； 圖2為化合物（I)理論E⑶值與實驗E⑶值比較。
【具體實施方式】
[0017] 下面結(jié)合實施例進一步說明本發(fā)明的實質(zhì)性內(nèi)容，但并不以此限定本發(fā)明保護范 圍。盡管參照較佳實施例對本發(fā)明作了詳細說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員應(yīng)當理解，可以對 本發(fā)明的技術(shù)方案進行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的實質(zhì)和范圍。
[0018] 實施例1 :化合物（I)分離制備及結(jié)構(gòu)確證 試劑來源：乙醇、石油醚、乙酸乙酯、正丁醇、二氯甲烷為分析純，購自上海凌峰化學試 劑有限公司，甲醇，分析純，購自江蘇漢邦化學試劑有限公司。
[0019] 制備方法：（a)將東風桔的干燥根（10kg)粉碎，用75%乙醇熱回流提?。?5LX3 次)，合并提取液，濃縮至無醇味（3L)，依次用石油醚（3LX3次)、乙酸乙酯（3LX3次）和水 飽和的正丁醇（3LX3次）萃取，分別得到石油醚萃取物、乙酸乙酯萃取物（378g)和正丁醇 萃取物；（b)步驟（a)中乙酸乙酯萃取物用AB-8型大孔樹脂除雜，先用10%乙醇洗脫8個 柱體積，再用75%乙醇洗脫8個柱體積，收集75%乙醇洗脫液，減壓濃縮得75%乙醇洗脫物 浸膏（152g); (c)步驟（b)中75%乙醇洗脫浸膏用正相硅膠分離，依次用體積比為80:1 (10 個柱體積)、50:1 (10個柱體積)、30:1 (8個柱體積)、15:1 (8個柱體積）和1:1 (5個柱體 積）的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到5個組分；（d)步驟（c)中組分4 (47g)用正相硅膠進 一步分離，依次用體積比為20:1 (10個柱體積)、12:1 (10個柱體積）和5:1 (6個柱體積） 的二氯甲烷-甲醇梯度洗脫得到3個組分；（e)步驟（d)中組分2 (24g)用十八烷基硅烷 鍵合的反相硅膠分離，用體積百分濃度為75%的甲醇水溶液等度洗脫，收集8-10個柱體積 洗脫液，洗脫液減壓濃縮得到純的化合物（I) (31mg)。
[0020] 結(jié)構(gòu)確證：HR-ES頂S顯示[M+Na]+為m/z667. 3512,結(jié)合核磁特征可得分子式為 QAA。，不飽和度為11。核磁共振氫譜數(shù)據(jù)(ppm,DMS0-4 400MHz):H-l(3.48， ddd，^8.7,3.3,2.3)，H-2(2.25，m)，H-2(1.89，ddd，^16.2,2.9,2.3)，H-3(5.02，dd， 方2. 9,2. 9)，H-5 (2. 23,d，方12. 5)，H-6 (4. 12,dd，方12. 5,3. 2)，H-7 (5. 61，d，方3. 2)， H-9 (2.79，dd，方 12.0,7.5)，H-11 (1.66，1.71，m)，H-12 (1.53，s)，H-12 (2.36，m)，H-15 (5. 80,s)，H-18 (0? 91，s)，H-19 (0? 91，s)，H-21 (7. 45,dd，方 1. 7,0. 8)，H-22 (6. 27， dd，方1. 7,0. 8)，H-23 (7. 31，dd，方1. 7,1. 7)，H-28 (3. 26,br，d，方7. 6)，H-28 (3. 44， d，方7.6)，H-29 (1.10,s)，H-30 (1.21，s)，H-2'（2.22,m)，H-3'（1.39,1.57,m)，H-4' (0.82，t，^7.5)，H-5'（L03，d，^6.9)，H-2"（2.14，m)，H-3"（L28，1.54，m)，H-4" (0.73，t，^7.4)，H-5"（1.00，d，^7.1)，l-0H(4.77，s)，6-0H(5.37，s)，17-0H(6.08， s)，28-0H(4. 24，s);核磁共振碳譜數(shù)據(jù)Sc (ppm,DMS0-成，125Hz):71. 53 (CH，1-C)，30. 28 (CH2,2-C)，73.22 (CH，3-C)，42.34 (C，4-C)，40.57 (CH，5-C)，72.30 (CH，6-C)，72.50 (CH， 7-C)，46.41 (C，8-C)，34.66 (CH，9-C