一種熒光超分子納米粒子及其制備方法和應用
【技術領域】
[0001] 本發(fā)明屬于納米超分子材料技術領域，特別是一種巧光超分子納米粒子及其制備 方法和應用。
【背景技術】
[0002] 利用納米科技實現(xiàn)癌癥的祀向治療，對于人類健康發(fā)展有著巨大的潛力。因 此，構(gòu)筑祀向載藥傳輸體系來特異性的殺死癌細胞而不影響正常細胞是一件非常重要 的事情，參見：K.Wang,D.S.Guo,X.Wang,Y.Liu.ACSnano. 2011,5, 2880-2894。由于 透明質(zhì)酸具有一些優(yōu)秀的特質(zhì)，如低毒性、生物兼容性、生物可降解性、高穩(wěn)定性、良好 的水溶性并且易于化學修飾，最重要的是基于癌細胞表面過表達的透明質(zhì)酸受體的 祀向性，利用透明質(zhì)酸來構(gòu)筑祀向載藥傳輸體系是一個十分熱口的研究課題，參見： A.Singh,M.Corvelli,S.A.Unterman,K.A.Wepasnick,P.McDonnell,J.H.Elisseeff. NatureMater. 2014, 13, 988-995 ; (2)K.Y.Choi,H.Y.Yoon,J. -H.Kim,S.M.Bae，R. -W. Park,Y. -M.Kang,I. -S.Kim,I.C.Kwon,K.Choi,S.Y.Jeong,K.Kim,J.H.Park.ACS nano. 2011，5, 8591-8599 ; (3)Y.M.Zhang,Y.Cao,Y.Yang,J. -T.Chen,Y.Liu.Chem. Comm. 2014, 50, 13066-13069。近年來人們通過努力已經(jīng)構(gòu)筑了一些基于透明質(zhì)酸的納米粒 子，但存在著化學修飾過程太過煩瑣或者所構(gòu)筑粒子太疏松導致藥物易于泄露等問題。
[0003] 自2001年一類由于分子內(nèi)阻轉(zhuǎn)而具有聚集誘導發(fā)光特質(zhì)的分子被報道W來，四 苯乙締及其衍生物因其易于合成并易于進一步化學修飾脫穎而出，參見：J.Luo,Z.Xie,J. W.Lam,L.Qieng,H.Qien,C.Qiu,B.Z.Tang.Qiem.Comm. 2001, 18, 1740-1741。很多四苯乙締 衍生物都可W通過n~相互作用形成緊致的納米粒子，并且出現(xiàn)巧光的大幅度增強，參 見：G.Liang,J.W.Lam,W.Qin,J.Li,N.Xie,B.Z.Tang.Qiem.Comm. 2014, 50, 1725-1727。
[0004] 由于W超分子手段構(gòu)筑的納米顆粒是通過多重弱的可逆的相互作用的協(xié)同作用 而形成的，因此利用主客體相互作用構(gòu)筑納米平臺受到了人們廣泛的關注。到現(xiàn)在為止，W n~JT相互作用、氨鍵等非共價鍵相互作用已經(jīng)被科研工作者運用的淋漓盡致，而W主客 體相互作用來搭建的納米平臺的報道還并不多。在眾多大環(huán)分子中，環(huán)糊精因為其良好的 水溶性和生物兼容性尤為突出，更重要的是環(huán)糊精是一種可W通過簡單的酶反應制得的半 天然產(chǎn)物，有著適中的空腔尺寸可W在水相中選擇性的鍵合客體分子，參見：Y.H.Zhang,Y. Chen,Y. -M.Zhang,Y.Yang,J. -T.Chen,Y.Liu.Sci.Rep. 2014, 4. 7471-7476. (2)N.Li,Y. 畑en,Y. -M.Zhang,Y.Yang,Y.Su,J. -T.Chen,Y.Liu.Sci.Rep. 2014, 4, 4164-4170. (3) Y.Yang,Y. -M.Zhang,Y.Qien,D.Zhao,J. -T.Qien,Y.Liu.Qiem.Eur.J. 2012, 14, 4208-4215。 因此通過環(huán)糊精與合適客體構(gòu)筑的納米粒子在生物技術和藥物領域有著廣泛的應用前景。
[0005] 目前，利用抗癌藥物對癌癥患者進行治療過程中抗癌藥物在殺傷癌細胞的同時對 人體正常細胞也有很大的毒害作用，因此制備生物兼容的納米載體材料對抗癌藥進行負 載、運輸和祀向釋放W此來減少抗癌藥對于正常細胞的毒害作用或者提高抗癌藥對癌細胞 的殺傷效果在日常生活中具有巨大的實際應用價值。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明的目的是針對上述技術分析和存在問題，提供巧光超分子納米粒子及其制 備方法和應用，該超分子納米粒子系基于四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒的 二元超分子組裝的可降解納米粒子，首先四苯乙締橋聯(lián)了四個P環(huán)糊精可W和修飾在透 明質(zhì)酸上的金剛燒通過主客體相互作用鍵合，有效的形成緊致的納米粒子，其次四苯乙締 提供了疏水的微環(huán)境有利于阿霉素的負載而透明質(zhì)酸的纏繞可W有效的防止藥物泄露，而 透明質(zhì)酸骨架的存在可W識別過量表達透明質(zhì)酸的癌細胞使得納米粒子具有祀向性，負載 后的阿霉素對癌細胞的殺傷作用較之單純的阿霉素有明顯的上升，而其對正常細胞的毒害 作用較之單純的阿霉素有明顯的下降。 陽007] 本發(fā)明的技術方案：
[0008] 一種巧光超分子納米粒子，其構(gòu)筑單元W四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精為主體，W透 明質(zhì)酸金剛燒為客體，通過主-客體包結(jié)配位相互作用構(gòu)筑超分子組裝體，主客體構(gòu)筑單 元的結(jié)構(gòu)如下：
[0009]
[0010] 主體
[0011]
柳1引客體
[0013] -種所述巧光超分子納米粒子制備方法，將四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì) 酸金剛燒溶解于水中并均勻混合，制得巧光超分子納米粒子溶液，所述四苯乙締四橋聯(lián)0 環(huán)糊精與透明質(zhì)酸金剛燒的用量比按照環(huán)糊精和金剛燒單元的摩爾比為1:1，四苯乙締四 橋聯(lián)0環(huán)糊精的濃度為6x105mol/L。
[0014] 一種所述巧光超分子納米粒子的應用，將抗癌藥阿霉素負載到超分子納米粒子 中。
[0015] 本發(fā)明的優(yōu)點是：該基于四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒的二元超 分子組裝構(gòu)筑的巧光超分子納米粒子，制備方法簡便，主、客體原料用量少，對藥物的負載 率高；該巧光超分子納米粒子的透明質(zhì)酸骨架可W特異性的結(jié)合癌細胞表面過表達的透明 質(zhì)酸受體，賦予了該載體良好的主動祀向性；該巧光超分子納米粒子可W負載抗癌藥阿霉 素且負載后的阿霉素對癌細胞的殺傷作用較之單純的阿霉素有明顯增強，而其對正常細胞 的毒害作用較之單純的阿霉素有明顯下降，其在抗癌藥物負載、運輸和祀向釋放領域具有 廣闊的應用前景。
【附圖說明】
[0016] 圖1為四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精的核磁氨譜。
[0017] 圖2為不同濃度四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精的紫外吸收光譜譜圖（內(nèi)插圖為紫外 吸收隨四苯乙締四橋聯(lián)P環(huán)糊精濃度變化的線性擬合曲線）。
[0018] 圖3為不同濃度四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精的巧光發(fā)射光譜譜圖。
[0019] 圖4為自下而上分別為四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精，四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精、 金剛燒甲酸鋼和透明質(zhì)酸混合物，四苯乙締四橋聯(lián)P環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒混合物的 巧光發(fā)射光譜譜圖。
[0020] 圖5為四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒組裝體的透射電子顯微鏡圖 像。
[0021] 圖6為四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和的動態(tài)激光光散射圖。
[0022] 圖7為四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒組裝體的C電位圖。
[0023] 圖8為自下而上分別為四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒組裝體，負載 了阿霉素的四苯乙締四橋聯(lián)P環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒組裝體的紫外吸收光譜譜圖。
[0024] 圖9為負載了阿霉素的四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金剛燒組裝體在憐 酸緩沖和醋酸緩沖中的藥物釋放曲線。
[0025] 圖10自左向右分別為NI冊T3細胞（正常細胞）在阿霉素，四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán) 糊精和透明質(zhì)酸金剛燒組裝體，負載了阿霉素的四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金 剛燒組裝體溶液中進行解化48小時后的相對細胞存活率對比圖。
[0026] 圖11為自左向右分別為MCF-7細胞（癌細胞）在阿霉素，四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán) 糊精和透明質(zhì)酸金剛燒組裝體，負載了阿霉素的四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸金 剛燒組裝體，W及過量透明質(zhì)酸和負載了阿霉素的四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精和透明質(zhì)酸 金剛燒組裝體溶液中進行解化48小時后的相對細胞存活率對比圖。
【具體實施方式】 陽〇27] 實施例1 :
[0028] 一種巧光超分子納米粒子，其構(gòu)筑單元W四苯乙締四橋聯(lián)0環(huán)糊精為主體，W透 明質(zhì)酸金剛燒為客體，通過主-客體包結(jié)配位相互作用構(gòu)筑