一種從桔梗中提取桔梗皂苷d的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于桔梗提取分離領(lǐng)域，涉及一種提取桔梗皂苷D的方法，具體涉及一種 從桔梗中提取桔梗皂苷D的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 結(jié)梗（Platycodon grandiflorum(Jacq. )A. DC.)為結(jié)?？平Y(jié)梗屬多年生草本植 物。其根是常用中藥，中國(guó)和日本的多版藥典均有收載。具有宣肺利咽、祛痰排膿之功效。 用于咳嗽痰多、胸悶不暢、咽痛、肺癰吐膿等癥。
[0003] 20世紀(jì)40年代由日本學(xué)者最早開始對(duì)桔梗進(jìn)行了化學(xué)研宄。迄今為止的研宄表 明除多糖外，其主要成分為齊墩果酸五環(huán)三萜皂苷，其他尚含有黃酮、聚炔、留體、酚酸、月旨 肪酸等類型的化合物。
[0004] 作為桔梗中主要化學(xué)成分的桔梗皂甙對(duì)人體的新陳代謝起著重要的生理作用，現(xiàn) 已發(fā)現(xiàn)，桔梗皂甙具有抗菌、抗病毒、消炎、抗氧化等多種生理活性。Shin等研宄結(jié)果表明， 桔梗皂苷D和桔梗皂苷D3在體內(nèi)外均能增加大鼠和倉鼠呼吸道黏蛋白的釋放，祛痰效果明 顯O
[0005] CN101240005A -種從桔梗中制備桔梗皂苷D的方法及其在抗癌藥物中的應(yīng)用中 提到桔梗原料采用70%醇提取，濃縮，采用石油醚、乙酸乙酯、正丁醇分別提取，正丁醇層經(jīng) 大孔樹脂柱層析、硅膠柱層析得桔梗皂苷D。
[0006] CN101856382A -種提取分離桔梗皂苷有效成分的新方法，采用堿性乙醇水溶液浸 提，丁醇萃取，柱層析，得到桔梗皂苷純度為80 % -90 %。
[0007] CN102423334A桔梗皂苷和桔梗多糖的綜合提取方法桔梗打漿，超聲提取，過濾，超 濾，透過液上大孔樹脂，乙醇洗脫，濃縮干燥。
[0008] ZL02132764. 5從桔梗中提取桔?？傇碥蘸蛦误w桔梗皂苷D的方法，采用乙醇提 取，DlOl純化得總皂苷，在中低壓柱層析上分離，用硅膠薄層鑒定。
[0009] CN1566137A桔梗總皂苷生產(chǎn)工藝水煮沸，濃縮，吸附樹脂床分離，水洗，70%醇洗， 濃縮得桔?？傇碥?。
[0010] CN101084917A -種桔?？傇碥盏闹苽浞椒▔A性溶液提取，上大孔型陰離子，堿水 洗脫。
[0011] 盧朝國(guó)等人采用二氧化碳超臨界萃取桔梗有效成分，對(duì)比了夾帶劑效果，再采用 5000分子量超濾截留，純化皂甙含量38. 9%。
[0012] 鄭毅男等人研宄白花桔梗活性成分的研宄，醇提，濃縮加入丙酮，濃縮，正丁醇萃 取，將所得粗皂甙溶解，注入離心薄層儀上，用氯仿甲醇混合溶劑洗脫，再采用制備型薄層 層析。
[0013] 徐猻等人研宄桔梗、黨參藥效物質(zhì)的提取分離，桔梗原料采用石油醚回流2次，再 用乙醇提取，回收提取渣用乙醇回流，正丁醇萃取，得總皂甙。將總皂甙產(chǎn)品上硅膠柱，梯度 洗脫，得桔梗皂甙D。
[0014] 文獻(xiàn)《桔梗皂苷元提取分離及活性研宄》中采取水閃式提取，過濾，上AB-8大孔樹 脂柱，乙醇洗脫，干燥得桔?？傇碥铡?br>[0015] 現(xiàn)有技術(shù)中提到的大多是提取桔?？傇碥?，而對(duì)于桔梗皂苷D的分離純化比較 少，主要集中在提取、萃取、柱層析等方法。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0016] 本發(fā)明提供了一種從桔梗原料中提取桔梗皂苷D的方法，操作便捷，產(chǎn)品含量高， 回收率高，所用溶劑危害小，適合于大生產(chǎn)操作。
[0017] 本發(fā)明的具體技術(shù)方案如下：
[0018] -種從桔梗中提取桔梗皂苷D的方法，包括以下步驟：
[0019] 1]提取
[0020] 將桔梗粉碎后，在30°C -80°C條件下，用濃度為90%的乙醇溶液提取2-3次，然后 過濾處理，得提取液；所述桔梗和乙醇溶液的質(zhì)量比為1:5 ;
[0021] 2] -次超濾
[0022] 將步驟1所得的提取液采用不同截留分子量膜分離，收集超濾液和濃液；所述膜 截留分子量為 2000-5000dalton、5000-8000dalton、10000-20000dalton ;
[0023] 3]二次納濾
[0024] 將步驟2中超濾液采用不同截留分子量膜分離，再次收集所得納濾液和濃 液，取濃液烘干后得干燥物；所述膜截留分子量為150-450dalt 〇n、400-600dalt〇n、 800-1000dalton ；
[0025] 4]重結(jié)晶
[0026] 在50°C -100°C條件下，向步驟3干燥物中加入溶劑進(jìn)行溶解，加入活性炭脫色 l_2h，過濾后加入溶劑0. 1-0. 5倍量的丙酮溶液，結(jié)晶，抽濾，得白色粉末狀物質(zhì)，即為桔梗 皂苷D ;所述溶劑為水、異丙醇、正丁醇、乙腈中的一種或幾種混合；所述干燥物、溶劑、活性 炭的質(zhì)量比為1:3-10:0. 05。
[0027] 上述步驟1中，將桔梗粉碎后，在40°C條件下，用5倍量濃度為90%的乙醇溶液提 取2次，然后過濾處理。
[0028] 上述步驟2中，將步驟1中過濾所得的提取液采用膜截留分子量為 5000-8000dalton的超濾膜分離，收集超濾液和濃液。
[0029] 上述步驟3中，將步驟2中超濾液采用截留分子量為400-600dalton的納濾膜分 離，再次收集所得納濾液和濃液，取濃液烘干后得干燥物。
[0030] 上述步驟4中，在60°C條件下，向步驟3干燥物中加入濃度為80%異丙醇進(jìn)行溶 解，加入活性炭脫色l_2h，過濾后加入異丙醇0. 25倍量的丙酮溶液，結(jié)晶，抽濾，得白色粉 末狀物質(zhì)，即為桔梗皂苷D ;所述干燥后的濃液、溶劑、活性炭的質(zhì)量比為1:4:0.05。
[0031] 上述步驟2、3中的膜包括管式膜、中空纖維膜、卷式膜。
[0032] 上述步驟2中的膜的材質(zhì)為PVC、PES、PAN或PVDF。
[0033] 上述步驟3中的膜的材質(zhì)為CA、SPS或PVA。
[0034] 本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)：
[0035] 1、采用高純度乙醇提取，將大部分大極性雜質(zhì)去除；
[0036] 2、使用不同截留分子量的超濾膜純化桔梗皂苷，提高可操作性；
[0037] 3、使用溶劑少，減少對(duì)環(huán)境的污染和對(duì)人體的傷害。
【具體實(shí)施方式】
[0038] 實(shí)施例一
[0039] 取桔梗原料Ikg粉碎，用原料量5倍質(zhì)量的90%乙醇水溶液于80°C攪拌提取，共 提取2次，得到提取液。
[0040] 將提取液采用截留分子量為10000-20000dalton的超濾膜分離，得到超濾液和濃 液，將超濾液采用截留分子量為800-1000dalton的納濾膜分離，得到納濾液和濃液，濃液 烘干。將干燥物采用8倍量乙腈80°C溶解，加入活性炭脫色，過濾，加入乙腈溶液10 %丙酮， 放入冰箱過夜結(jié)晶，抽濾，得3. 39g白色粉末狀物質(zhì)，為桔梗皂苷D。含量98. 4%，回收率為 83. 4%〇
[0041] 實(shí)施例二
[0042] 取桔梗原料Ikg粉碎，用原料量5倍質(zhì)量的90%乙醇水溶液于40°C攪拌提取，共 提取2次，得到提取液。
[0043] 將提取液采用截留分子量為5000-8000dalton的超濾膜分離，得到超濾液和濃 液，將超