基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及用于檢測(cè)硫化氫（H2S）的熒光探針，具體地說(shuō)是一種基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針及其應(yīng)用。熒光探針為以半菁染料或花菁染料作為熒光母體，并在母體上引入間硝基苯胺或間硝基苯酚。所述熒光探針用于水體或生物體內(nèi)外硫化氫的檢測(cè)。本發(fā)明探硫化氫熒光探針的這類化合物，在硫化氫存在下對(duì)應(yīng)的熒光強(qiáng)度發(fā)生變化，可用于硫化氫的檢測(cè)，大大降低外部條件的干擾，提高檢測(cè)準(zhǔn)確度。尤其是，這類化合物用作熒光探針，可用于細(xì)胞內(nèi)硫化氫的檢測(cè)，這對(duì)深入研究硫化氫在生物體內(nèi)的產(chǎn)生、輸送及累積等過(guò)程的動(dòng)力學(xué)機(jī)理，進(jìn)一步了解硫化氫的生理和毒理作用具有重要意義。
【專利說(shuō)明】基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及用于檢測(cè)硫化氫(H2S)的熒光探針，具體地說(shuō)是一種基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]幾個(gè)世紀(jì)以來(lái)，硫化氫(H2S)在對(duì)環(huán)境毒性和毒害影響方面已經(jīng)引起了很多的注意。當(dāng)人體暴露于外源性硫化氫之中時(shí)，此氣體可以通過(guò)肺部被迅速地吸收從而進(jìn)入血液循環(huán)系統(tǒng)，然后在人體中產(chǎn)生毒害作用。現(xiàn)在普遍認(rèn)為硫化物以氰化物類似的方式抑制氧化酶而產(chǎn)生生理毒性。然而最近有關(guān)生命體內(nèi)源性H2S的研究工作都致力于其若干生理功能。繼一氧化氮(NO)和一氧化碳(CO)之后，H2S被確定為第三個(gè)具有生物活性的氣體，被稱為氣體遞質(zhì)或氣體介體。H2S廣泛分布于全身各處，據(jù)估計(jì)其生理相關(guān)濃度的范圍從納摩爾級(jí)到毫摩爾級(jí)水平不等。在生理濃度水平下，硫化氫參與一系列的生理過(guò)程，包括調(diào)節(jié)血管張力、心肌收縮、神經(jīng)傳導(dǎo)、胰島素分泌等。一旦細(xì)胞不能維持其硫化氫的生理范圍內(nèi)水平，便會(huì)引起動(dòng)脈和肺動(dòng)脈高壓、阿爾茨海默氏癥、胃粘膜損傷、肝硬化等疾病。此外，硫化氫也表現(xiàn)為用作活性氧物種和活性氮物種的抗氧化清除劑。此外許多研究還顯示出三個(gè)氣體遞質(zhì)，H2S、N0和CO，之間還有各種交互作用指示著人體的健康與疾病。因此，近年來(lái)對(duì)生物體內(nèi)源性硫化氫的研究興趣也穩(wěn)步增長(zhǎng)方興未艾。
[0003]熒光探針是有效檢測(cè)生命體內(nèi)H2S的手段之一。一個(gè)具有應(yīng)用前景的熒光探針應(yīng)具有作用前后熒光變化明顯 、對(duì)目標(biāo)分子響應(yīng)快、選擇性好、可用于實(shí)時(shí)可逆檢測(cè)等優(yōu)點(diǎn)。Christopher J.Chang等公開了一類用以檢測(cè)硫化氫的突光探針SFl及SF2 (結(jié)構(gòu)見圖1,C.J.Chang et.al, J.Am.Chem.Soc.，2011，133，10078)，與 H2S 作用后熒光增強(qiáng)從而檢測(cè)H2S的存在。但是這類熒光探針對(duì)對(duì)硫化氫響應(yīng)慢，不能用于快速地檢測(cè)&3。Binghe Wang等公開了一種檢測(cè)H2S的突光探針DNS-Az (結(jié)構(gòu)見圖1, B.Wang et.al, Angew.Chem.1nt.Ed.，2011，50，9672)，但此探針的激發(fā)發(fā)射波長(zhǎng)位于紫外區(qū)，不能有效避免生物自體熒光的干擾，同時(shí)紫外光對(duì)生物體光漂白作用很大，易于損傷生物樣品。上述探針都是熒光增強(qiáng)型探針，沒有波長(zhǎng)的變化，無(wú)法實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)。為達(dá)到充分穿透到組織內(nèi)部和避免細(xì)胞自發(fā)熒光干擾目的，大大降低外部環(huán)境的干擾，實(shí)現(xiàn)定量檢測(cè)，仍然需要開發(fā)具有較長(zhǎng)激發(fā)發(fā)射波長(zhǎng)的可操作性熒光探針。因此，開發(fā)具有良好選擇性，可在近紅外區(qū)進(jìn)行檢測(cè)生物體系中H2S的熒光探針具有重要意義。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的在于，提供一種基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針及其應(yīng)用。
[0005]為實(shí)現(xiàn)上述目的本發(fā)明采用的技術(shù)方案為:
[0006]一種基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針，熒光探針為以半菁染料或花菁染料作為熒光母體，并在母體上引入間硝基苯胺或/和間硝基苯酚。[0007]所述熒光探針為以半菁染料或花菁染料作為熒光母體，并在母體上引入間硝基苯胺或間硝基苯酚，如結(jié)構(gòu)式1、II所示；
[0008]
【權(quán)利要求】
1.一種基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針，其特征在于:熒光探針為以半菁染料或花菁染料作為熒光母體，并在母體上引入間硝基苯胺或/和間硝基苯酚。
2.按權(quán)利要求1所述的基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針，其特征在于:所述熒光探針為以半菁染料或花菁染料作為熒光母體，并在母體上引入間硝基苯胺或間硝基苯酚，如結(jié)構(gòu)式1、II所示；
3.—種權(quán)利要求1所述的基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于:所述熒光探針用于水體或生物體內(nèi)外硫化氫的檢測(cè)。
4.按權(quán)利要求3所述的基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于:所述熒光探針用于檢測(cè)生物體系內(nèi)硫化氫，并進(jìn)行細(xì)胞或組織的熒光成像。
5.按權(quán)利要求3或4所述的基于硝基還原檢測(cè)細(xì)胞內(nèi)硫化氫的熒光探針的應(yīng)用，其特征在于:將通式I或II與待測(cè)定水體或生物體內(nèi)外的硫化氫從而導(dǎo)致熒光強(qiáng)度的改變，所得通式II1、IV結(jié)構(gòu)的化合物；
【文檔編號(hào)】C07D209/12GK103664735SQ201210348010
【公開日】2014年3月26日 申請(qǐng)日期:2012年9月18日 優(yōu)先權(quán)日:2012年9月18日
【發(fā)明者】陳令新, 于法標(biāo), 王銳, 陳浩 申請(qǐng)人:中國(guó)科學(xué)院煙臺(tái)海岸帶研究所