專利名稱：：用于治療丙型肝炎的化合物的制作方法用于治療丙型肝炎的化合物對相關申請的交叉參考本申請要求2007年1月11日提交的美國臨時申請60/884,459的優(yōu)先權。
背景技術：
：丙型肝炎病毒(HCV)是主要的人類病原體，其在世界范圍內感染估計一億七千萬人，大致是1型人類免疫缺陷病毒感染數(shù)量的5倍。這些HCV感染個體中相當大的部分發(fā)展成嚴重的進行性肝臟疾病，包括肝硬化和肝細胞癌(Lauer，G.M.;Walker,B.D.N.Engl.J.Med.2001,345,41-52)。HCV是正鏈RNA病毒?；趯λ茢喟被嵝蛄羞M行的比較和5，-非翻譯區(qū)的廣泛相似性，已經把HCV歸類為黃病毒科中獨立的屬。黃病毒科的所有成員都具有包封的病毒體，其含有的正鏈RNA基因組通過翻譯單一的連續(xù)的可讀框而編碼所有已知的病毒專屬性蛋白質。在整個HCV基因組的核苷酸和所編碼的氨基酸序列中發(fā)現(xiàn)了相當程度的異質性。已經表征了至少6種主要的基因型，并且已經描述了多于50種的亞型。HCV的主要基因型在世界范圍內的分布是不同的，并且HCV遺傳異質性的臨床重要性仍然是難以確定的，盡管對基因型對發(fā)病和治療的可能影響行了大量的研究。單鏈HCVRNA基因組的長度大約是9500個核苷酸，并且具有單一的可讀框(ORF),其編碼由大約3000個氨基酸組成的單一的大的多蛋白。在被感染的細胞中，這種多蛋白在多個位點被細胞蛋白酶和病毒蛋白酶裂解，從而產生結構蛋白和非結構(NS)蛋白。就HCV來說，成熟的非結構蛋白(NS2、NS3、NS4A、NS4B、NS5A和NS5B)的產生受到兩種病毒蛋白酶的影響。認為第一種病毒蛋白酶是金屬蛋白酶，并且在NS2-NS3接合處進行裂解；第二種病毒蛋白酶是包含在NS3的N-末端區(qū)域內的絲氨酸蛋白酶(也稱為NS3蛋白酶)，并且介導NS3下游的所有隨后裂解，既在NS3-NS4A裂解位點以順式進行裂解，又在其余的NS4A-NS4B、NS4B-NS5A、NS5A-NS5B位點以反式進行裂解。NS4A蛋白似乎具有多種功能，其充當NS3蛋白酶的輔因子，并且可能有助于NS3及其它病毒復制酶組分的膜定位。NS3蛋白與NS4A形成復合物，這似乎是在所有位點進行加工活動由此提高蛋白質水解效率所必需的。NS3蛋白還顯示出三磷酸核苷酶和RNA解旋酶活性。NS5B(也稱為HCV聚合酶)是依賴于RNA的RNA聚合酶，在HCV的復制中涉及所述酶。在"StructuralAnalysisoftheHepatitisCVirusRNAPolymeraseinComplexwithRibonucleotides(Bressanelli;S.etal.，JournalofVirology2002，3482-3492)和DefrancescoandRice,ClinicsinLiverDisease2003,7,211-242中描述了HCVNS5B蛋白。目前，最有效的HCV療法使用a-干擾素和利巴韋林的組合，其在40%的患者中產生持續(xù)的效果(Poynard,T.etal.Lancet1998，352，1426-1432)。最新的臨床結果證明，作為單一療法，PEG化的a-干擾素優(yōu)于未修飾的a-干擾素(Zeuzem,S.etal,N.Engl.J.Med.2000，343,1666-1672)。然而，即使就涉及PEG化a-干擾素和利巴韋林組合的實驗性治療方案而言，相當多的患者也沒有出現(xiàn)病毒載量的持續(xù)減少。因此，就開發(fā)用于治療HCV感染的有效療法而言，存在明顯和迫切的需要。
發(fā)明內容本發(fā)明一方面是式I化合物或其可藥用鹽W為氫、卣素、烷基、烯基、羥基、芐基氧基、烷氧基或卣代烷氧基;W為環(huán)烷基；其中R1為-C02R5或-CONR6R'Rs為氫或烷基；R6為氫、烷基、烷基S(V、環(huán)烷基SCV、卣代烷基SCV、(R9)2NSOr或(R'。)S02-;R7為氫或烷基；RS為氫、烷基、環(huán)烷基、(環(huán)烷基)烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、芐基、節(jié)基氧基羰基或吡啶基；W為氫或烷基；R'o為氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、N-(R")哌嗪基(N-(R")piperazinyl，N上取代有R11的哌。秦基)、嗎啉基、硫嗎啉基(thiomorpholinyl)、高p底咬基(homopiperidinyl)或高嗎啉基(homomorpholinyl);R"為氫或烷基；以及虛線表示單鍵或雙鍵。本發(fā)明另一方面是式I化合物，其中R^為-CONR611、R"為烷基S02-、環(huán)烷基SOr、卣代烷基SOr、(R9)2NS02-或(R^)S02-;以及R為氫。本發(fā)明另一方面是式I化合物，其中R為氫。本發(fā)明另一方面是式I化合物，其中R"為曱氧基。本發(fā)明另一方面是式I化合物，其中W為環(huán)己基。本發(fā)明另一方面是式I化合物，其中^為(R、NS02-或(R^S02-。本發(fā)明另一方面是式I化合物，其中如在下面結構式中那樣，虛線表示單鍵。本發(fā)明另一方面是式I化合物其具有如下立體化學。本發(fā)明另一方面是式I化合物其具有如下立體化合物。本發(fā)明另一方面是式I化合物，其中如在下面結構式中那樣，虛線表示雙鍵。任何變量(包括R1、R2、R3、R4、R5、R6、R7、R8、R9、R1Q、R11和虛線)的任何范圍可獨立與任何其它變量的范圍一起使用。除非另有說明，這些術語具有下述意義。"烷基"的意思是由1至6個碳所組成的直鏈或支鏈烷基。"烯基，，的意思是由2至6個碳所組成且具有至少一個雙鍵的直鏈或支鏈烷基。"環(huán)烷基"的意思是由3至7個碳所組成的單環(huán)環(huán)系。"羥基烷基"、"烷氧基"及具有經取代烷基部份的其它術語包括由針對所述烷基部份的1至6個碳原子所組成的直鏈與支鏈異構體。"卣代烷基"與"囟代烷氧基，，包括所有卣化異構體，從單卣素取代的烷基至全囟素取代的烷基。"芳基"包括碳環(huán)芳族取代基與雜環(huán)芳族取代基。括號與多重括號術語意在向本領域技術人員闡明鍵合關系。例如，如((R)烷基)那樣的術語指進一步被取代基R取代的烷基取代基。本發(fā)明包括所述化合物的所有可藥用鹽形式?？伤幱名}為其中抗衡離子不會顯著地助長化合物的生理活性或毒性且其本身作為藥理等價物的那些可藥用鹽。這些鹽可根據(jù)一般有機技術使用商購試劑來制備。一些陰離子鹽形式包括醋酸鹽、醋硬脂酸鹽(acistrate)、苯磺酸鹽、溴化物、氯化物、檸檬酸鹽、富馬酸鹽、葡萄糖醛酸鹽、氫溴酸鹽、鹽酸鹽、氬碘酸鹽、碘化物、乳酸鹽、馬來酸鹽、曱磺酸鹽、硝酸鹽、雙幾萘酸鹽、磷酸鹽、琥珀酸鹽、硫酸鹽、酒石酸鹽、曱苯磺酸鹽及昔萘酸鹽(xinofoate)。一些陽離子鹽形式包括銨鹽、鋁鹽、千星(benzathine)鹽、鉍鹽、鈣鹽、膽^威鹽、二乙胺鹽、二乙醇胺鹽、鋰鹽、鎂鹽、葡甲胺鹽、4-苯基環(huán)己胺鹽、哌。秦鹽、鉀鹽、鈉鹽、丁三醇胺(tromethamine)鹽及鋅鹽。本發(fā)明的一些化合物具有不對稱碳原子(例如下文結構)。本發(fā)明包括所有立體異構形式，包括對映異構體與非對映異構體以及立體異構體的混合物如外消旋體。一些立體異構體可使用本領域中已知的方法來制備。所述化合物的立體異構混合物與相關中間體的立體異構混合物可根據(jù)本領域中已知的方法來分離成單獨的異構體。合成方法所述化合物可通過本領域已知的方法(包括如下所述的那些方法)來制備。一些試劑和中間體在本領域中是已知的。其它試劑和中間體可通過本領域已知的方法使用商購原料來制備。用于描述化合物合成的變量(例如所編號的"R"取代基)僅意在說明如何制備，而不應該與權利要求書中或本說明書其它段落中所使用的變量相混淆。方案中所使用的縮寫通常符合本領域中所使用的慣用意義。可將2-淡—3-環(huán)己基-lH-p引咮-6-曱酸曱酯水解成2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸(參見方案1)。該化合物可使用例如l，l，-羰基二咪唑(CDI)及1，8-二氮雜二環(huán)[5.4.0]十一碳-7-烯(DBU)而在無水THF(四氫呋喃)中與各種磺酰脲(sulfonylurea)縮合。所得到的?；蝓０?acylsulfamide)可使用例如蘇楚基(Suzuki)偶聯(lián)反應條件而與各種2-曱酰基苯基硼酸或2-曱?；交鹚狨ミM行已知的偶聯(lián)反應，從而得到所繪類型的環(huán)狀半縮醛胺中間體(cyclichemiaminalintermediate)?？赏ㄟ^如下方式將這些化合物轉化為吲咮并苯并氮雜萆衍生物這些化合物在DMF(二曱基曱酰胺)中用2-(二曱氧基磷?；?丙烯酸曱酯在碳酸銫的影響下通過連續(xù)的麥克爾(Michael)反應和HornerEmmons反應進4亍處理。方案1<formula>formulaseeoriginaldocumentpage10</formula>也可使N經保護的哌溱與中間體吲哚并苯并氮雜萆酸偶聯(lián)，并且所得到的哌。秦曱酰胺可使用本領域已知的方法來進行脫保護和使用各種合成方案來進行衍生，其中一些示例性實例如下所示(參見方案2)。方案2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage11</formula>可用于合成本發(fā)明一些化合物的中間體涉及方案3所示的吲哚并苯并氮雜萆叔丁酯的制備。該方法學涉及對所示吲哚曱酯進行堿催化水解，然后形成叔丁酯(例如與亞硫酰氯和叔丁醇鉀反應或用碳酸銀和叔丁基溴進行烷基化)。所得到的化合物使用與先前所概述相似的化學方法來進行轉化，得到如上所示的吲哚并苯并氮雜蕈的混合酯。這些中間體可用于如下可選擇的方法，所述可選擇的方法可如方案4所示用于制備?；蝓０吠榛鶚蚪拥倪哙汉王；酋０吠榛鶚蚪拥倪哙?。叔丁酯基的斷裂可產生酸，所述酸可與各種磺酰胺和磺酰脲偶聯(lián)。隨后進行水解，得到相關的脂肪酸，所述脂肪酸可與各種烷基橋接的哌嗪(alkyl-bridgedpiperazine)偶聯(lián)。例如，O-(lH-苯并三唑-l-基)-N,N，N，,N，-四曱基銀-四氟硼酸鹽和二異丙基乙胺于DMSO(二曱基亞砜)中的溶液可得到烷基橋接的哌嗪曱酰胺。方案4生物學方法當在以下HCVRdRp檢測中測定時，所述化合物展現(xiàn)了對抗HCVNS5B的活性。對HCVNS5BRdRp進行克隆、表達及純化將對HCV基因型1b的NS5B蛋白進行編碼的cDNA克隆至pET21逸達載體中。將所述蛋白質表達成截掉C末端的18個氨基酸(theproteinwasexpressedwithan18aminoacidC-terminaltruncation)"提高溶解度。大腸桿菌活力細胞系BL21(DE3)用于所述蛋白質的表達。使培養(yǎng)物在37。C生長約4小時，直到培養(yǎng)物達到600納米處的光密度為2.0。使培養(yǎng)物冷卻至20。C，并用lmMIPTG進行誘導。加入新鮮的氨千青霉素至最終濃度為50微克/毫升，并使細胞在2(TC生長過夜。使細胞沉淀(3升)溶解以供純化，得到15-24毫克經純化的NS5B。溶胞緩沖液由20mMTris-HCl(pH7.4)、500mMNaCl、0.5%TritonX-IOO、lmMDTT、lmMEDTA、20%甘油、0.5毫克/毫升溶菌酶、10mMMgCl2、15孩t克/毫升脫氧核糖核酸酶I及完全TM蛋白酶抑制劑藥片(Roche)所組成。加入溶胞緩沖液后，使用組織勻漿器來使經冷凍的細胞沉淀重新懸浮。為了降低樣品的粘度，使用與Branson超聲波處理器相連的微尖頭來使溶胞產物的等分液在水上接受超聲波處理。經超聲處理的溶胞產物在4。C以100，000xg離心l小時，并過濾經過0.2微米濾器單元(Corning)。使用三個連續(xù)的色譜步驟來純化蛋白質肝素瓊脂糖CL-6B、PolyU瓊脂糖4B及HiTrapSP瓊脂糖(Pharmacia)。色語緩沖液與溶胞緩沖液相同，但不含有溶菌酶、脫氧核糖核酸酶I、MgCl2或蛋白酶抑制劑，且緩沖液的NaCl濃度根據(jù)將蛋白質加載至色語柱上的需要而調整。各色語柱以NaCl梯度液洗脫，所述梯度液的長度在5至50個柱體積之間變化，這取決于色語柱的類型。在最終色譜步驟后，所得到的酶純度〉90。/。(基于SDS-PAGE分析)。將酶分成等分液，并貯存在-8(TC。標準HCVNS5BRdRp酶檢測在96孔板(Costar3912)中在最終體積為60微升的情況下進行HCVRdRp基因型lb檢測。檢測緩沖液由20mMHepes(pH7.5)、2.5mMKCl、2.5mMMgCl2、lmMDTT、1.6單位RNAse抑制劑(PromegaN2515)、0.1毫克/毫升BSA(PromegaR3961)及2Y。甘油所組成。所有化合物在DMSO中連續(xù)稀釋(3倍)并在水中進一步稀釋，以使DMSO在檢測中的最終濃度為2。/。。HCVRdRp基因型lb酶在最終濃度為28nM時使用。聚A(polyA)模板在6nM時使用，且生物素化的寡dT12引物在最終濃度為180nM時使用。模板是商購得到的(Amersham27-4110)。生物素化的引物由SigmaGenosys制備。3H-UTP在0.6pCi(0.29nM總UTP)時使用。通過加入酶來引發(fā)反應，在30。C孵育60分鐘，并通過加入25微升含有SPA珠粒(4微克/微升，AmershamRPNQ0007)的50mMEDTA來停止。在室溫孵育〉1小時后，將板在PackardTopCountNXT上讀取。經1務改的HCVNS5BRdRp酶檢測經修改的酶檢測基本上按照關于標準酶檢測所描述的那樣來進行，不同的是，將生物素化的寡dT12引物預捕獲在鏈霉抗生物素(streptavidin)涂覆的SPA珠粒上，其方式是將引物與珠粒在檢測緩沖液中混合，并在室溫孵育一小時。離心除去未結合的引物。使與引物結合的珠粒重新懸浮在20mMHepes緩沖液(pH7.5)中，并在引物的最終濃度為20nM以及珠粒的最終濃度為0.67微克/微升時用于檢測。檢測中的加入順序如下將酶(14nM)力。到經稀釋的化合物中，接著加入模板(0.2nM)、3H-UTP(0.6pCi,0.29pM)及與引物結合的珠粒的混合物，以引發(fā)反應，所給濃度為最終濃度。使反應在30。C進行4小時?；衔锏腎C5o值使用七種不同的[I]([I]為抑制濃度)來確定。使用方程式y(tǒng)=A+((B-A)/(1+(((:/^"0)))通過抑制作用來計算ICso值。FRET檢測制劑為了進行HCVFRET篩選檢測，使用96孔細胞培養(yǎng)板。FRET肽(Anaspec,Inc.)(Talianietal.，Anal.Biochem.1996，240，60-67)在其一端附近含有熒光供體即EDANS，并且在另一端附近含有受體即DABCYL。通過供體與受體之間的分子間共振能量轉移(RET)來使所述肽的熒光淬滅，但當NS3蛋白酶使所述肽裂解時，產物不再發(fā)生RET淬滅，且供體的焚光變得顯而易見。檢測試劑如下制備將得自Promega(弁E153A)的5x細胞熒光素酶細胞培養(yǎng)物溶胞i式劑(cellLuciferasecellculturelysisreagent)用<11120稀釋至1x,力口入NaCl至最終為150mM，并且將FRET肽自2mM儲備液稀釋至最終為20pM。為了制備板，帶有或不帶有海紫羅蘭屬熒光素酶(Renillaluciferase)報告子基因的HCV復制子細胞用胰蛋白酶處理，并置于96孔板的各孔中，其中將經滴定的測試化合物加到第3列至第12列中；第1列和第2列含有對照化合物(HCV蛋白酶抑制劑)，且最底行含有不帶有化合物的細胞。然后，將板置于37。C的CCV咅養(yǎng)箱中。檢測加入上述測試化合物(FRET;f全測制劑)后，在不同時間將板取出，且向每個孔中加入Alamar藍色溶液(TrekDiagnostics,#00-100),作為細胞毒性的測量方法。在Cytoflour4000儀器(PEBiosystems)中讀取后，將板以PBS沖洗，然后通過向每個孔中加入30微升上述FRET肽檢測試劑(FRET檢測制劑)而用于FRET檢測。接著，將板置于Cytoflour4000儀器中，其已被設定成激發(fā)波長為340nm/發(fā)射波長為4卯nm,以自動模式歷時20次循環(huán)，且板在動態(tài)模式中讀取。典型地，在讀取后使用終點分析的信號對噪聲為至少三倍?；蛘撸贏lamar藍色讀取后，將板以PBS沖洗，加入不帶有酚紅的50微升DMEM(高葡萄糖)，然后使用PromegaDual-GloLuciferaseAssaySystem,將板用于熒光素酶檢測。通過對相對的HCV復制子抑制作用及相對的細胞毒性值進行定量而對化合物進行分析。為了計算細胞毒性值，將得自對照孔的平均Alamar藍色焚光信號設定為100%無毒性。接著，將各化合物測試孔中的各個信號除以平均對照信號并乘以100%，以確定細胞毒性百分比。為了計算HCV復制子抑制值，平均背景值得自在檢測結束時含有最高量HCV蛋白酶抑制劑的兩個孔。這些值類似于得自天然Huh-7細胞的那些值。然后，將背景值從得自對照孔的平均信號中扣除，且將此值用作100%活性。接著，將各化合物測試孔中的各個信號除以背景扣除后的平均對照15值并乘以100%，以確定活性百分比。將蛋白酶抑制劑滴定的ECso值計算成可使FRET或焚光素酶活性降低50%的濃度。針對化合物板所得到的兩個值即細胞毒性百分比與活性百分比用于確定有待進一步分析的重要化合物?；衔锏拇硇詳?shù)據(jù)報道在表l中。表l<table>tableseeoriginaldocumentpage17</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage18</column></row><table>A>0.5|iM;B為0.001nM-0.5nM;CO.02nM,但沒有確定確切值。使用預孵育方案來確定ICso值；使用FRET檢測來確定EQo值。藥物組合物和治療方法所述化合物展現(xiàn)出對抗HCVNS5B的活性，且可用于治療HCV與HCV感染。因此，本發(fā)明的另一個方面為一種組合物，其包含本發(fā)明的化合物或其可藥用鹽及可藥用載體。本發(fā)明的另一個方面為一種組合物，其還包含具有抗HCV活性的化合物。本發(fā)明的另一個方面為一種組合物，其中具有抗HCV活性的化合物為干擾素。在本發(fā)明的另一個方面，所述干擾素選自干擾素a2B、PEG化的(pegylated)干擾素a、同感干擾素(consensusinterferon)、干擾素a2A及淋巴細胞樣干擾素T。本發(fā)明的另一個方面為一種組合物，其中具有抗HCV活性的化合物為環(huán)孢菌素。在本發(fā)明的另一個方面，所述環(huán)孢菌素為環(huán)孢菌素A。本發(fā)明的另一個方面為一種組合物，其中具有抗HCV活性的化合物選自白細胞介素2、白細胞介素6、白細胞介素12、可4是高1型輔助T細胞應答發(fā)展的化合物、干擾RNA、反義RNA、Imiqimod、利巴韋林、5，-單磷酸肌苦脫氫酶抑制劑、金剛烷胺及金剛乙胺。本發(fā)明的另一個方面為一種組合物，其中具有抗HCV活性的化合物可有效抑制靶標的功能以治療HCV感染，所述靶標選自HCV金屬蛋白酶(HCVmetalloprotease)、HCV絲氨酸蛋白酶(HCVserineprotease)、HCV聚合酶(HCVpolymerase),HCV解螺旋酶(HCVhdicase)、HCVNS4B蛋白(HCVNS4Bprotein)、HCV進入(HCVentry)、HCV組裝(HCVassembly)、HCV釋出(HCVegress)、HCVNS5A蛋白(HCVNS5Aprotein)、IMPDH及核苷類似物(nucleosideanalog)。本發(fā)明的另一個方面為一種組合物，其包含本發(fā)明的化合物或其可藥用鹽、可藥用載體、干擾素及利巴韋林。"^XW^另一個方面為一種抑制HCV復制子(HCVreplicon)功能的方法，其包括使HCV復制子與式I化合物或其可藥用鹽接觸。本發(fā)明的另一個方面為一種抑制HCVNS5B蛋白功能的方法，其包括使HCVNS5B蛋白與式I化合物或其可藥用鹽接觸。本發(fā)明的另一個方面為治療患者中HCV感染的方法，其包括向所述患者給予治療有效量的本發(fā)明化合物或其可藥用鹽。本發(fā)明的另一個方面是抑制HCV復制子功能的方法。本發(fā)明的另一個方面是抑制HCVNS5B蛋白功能的方法。本發(fā)明的另一個方面為治療患者中HCV感染的方法，其包括向所述患者給予治療有效量的本發(fā)明化合物或其可藥用鹽，并且給予(之前、之后或同時)另一種具有抗HCV活性的化合物。本發(fā)明的另一個方面為其中其它具有抗HCV活性的化合物為干擾素的方法。本發(fā)明的另一個方面為其中所述干擾素選自干擾素a2B、PEG化的干擾素a、同感干擾素、干擾素a2A及淋巴細胞樣干擾素i;的方法。本發(fā)明的另一個方面為其中其它具有抗HCV活性的化合物為環(huán)孢菌素的方法。本發(fā)明的另一個方面為其中所述環(huán)孢菌素為環(huán)孢菌素A的方法。本發(fā)明的另一個方面為其中其它具有抗HCV活性的化合物選自白細胞介素2、白細胞介素6、白細胞介素12、可提高1型輔助T細胞應答發(fā)展的化合物、干擾RNA、反義RNA、Imiqimod、利巴韋林、5，-單磷酸肌苷脫氫酶抑制劑、金剛烷胺及金剛乙胺的方法。靶標功能以治療HCV感染的方法，所述靶標選自HCV金屬蛋白酶、HCV絲氨酸蛋白酶、HCV聚合酶、HCV解螺旋酶、HCVNS4B蛋白質、HCV進入、HCV組裝、HCV釋出、HCVNS5A蛋白質、IMPDH及核普類似物。本發(fā)明的另一個方面為其中其它具有抗HCV活性的化合物可有效抑制HCV生命循環(huán)中的靶標而非HCVNS5B蛋白的功能的方法。"治療有效"的意思是提供有意義的患者益處所需要的藥物量，如肝炎與HCV感染領域中的執(zhí)業(yè)醫(yī)師所理解的那樣。"患者，，的意思是被HCV病毒感染且適于治療的人們，如肝炎與HCV感染領域中的執(zhí)業(yè)醫(yī)師所理解的那樣。"治療"、"療法"、"給藥方案"、"HCV感染"及相關術語如肝炎與HCV感染領域中的執(zhí)業(yè)醫(yī)師所理解的那樣來使用。本發(fā)明的化合物一般以藥物組合物的形式來給予，所述組合物包含治療有效量的本發(fā)明化合物或其可藥用鹽及可藥用載體，且可含有常規(guī)的賦形劑。治療有效量為提供有意義的患者益處所需要的量。可藥用載體為具有可接受安全性的常規(guī)已知載體。組合物涵蓋所有常見的固體形式與液體形式，包括膠嚢劑、片劑、錠劑與粉末劑以及液體混懸劑、糖漿劑、酏劑及溶液劑。組合物使用一般制劑技術來制備，且常規(guī)的賦形劑(諸如粘合劑與潤濕劑)與介質(諸如水與醇)通常用于組合物。固體組合物通常被配制成劑量單位，且每份劑量提供約1至1000毫克活性成份的組合物是優(yōu)選的。劑量的一些實例為l毫克、IO毫克、100毫克、250毫克、500毫克及1000毫克。一般而言，其它藥物可按與臨床上所使用的經典單位范圍相似的單位范圍存在。典型地，其為0.25-1000毫克/單位。液體組合物通常在劑量單位范圍內。一般而言，液體組合物的單位劑量范圍可以是l-100毫克/毫升。劑量的一些實例為l毫克/毫升、10毫克/毫升、25毫克/毫升、50毫克/毫升及100毫克/毫升。一般而言，其它藥物可按與臨床上所使用的經典單位范圍相似的單位范圍存在。典型地，其為1-100毫克/毫升。本發(fā)明涵蓋所有常規(guī)的給藥模式，且口服方法與腸胃外方法是優(yōu)選的。一般而言，給藥方案可類似于臨床上所使用的其它藥物。典型地，每日劑量可以是每日l-100毫克/公斤體重。一般而言，口服方式需要較多的化合物，而腸胃外方式需要較少的化合物。然而，具體的給藥方案可由醫(yī)師通過合理的醫(yī)藥判斷來確定。20本發(fā)明也涵蓋在組合療法中給予所述化合物的方法。即所述化合物可與可用于治療肝炎及HCV感染的其它藥物一起使用，但所述化合物與所述其它藥物分開使用。在這些組合方法中，所述化合物通?？纱钆淦渌幬锒悦咳?-100毫克/公斤體重的每日劑量來給予。其它藥物一般可按治療上所使用的量來給予。然而，具體的給藥方案可由醫(yī)師通過合理的醫(yī)藥判斷來確定。適于組合物及方法的化合物的一些實例列在表2中。表2<table>tableseeoriginaldocumentpage21</column></row><table><table>tableseeoriginaldocumentpage22</column></row><table>具體實施例方式使用下述柱和條件得到下述中間體和實施例的分析性LCMS數(shù)據(jù)。停止時間梯度時間+l分鐘；起始濃度0%B,除非另有說明；洗脫劑A:50/。CH3CN/95。/。H20(含有10mMNH4OAc(乙酸銨))(對于柱A、D和E)，100/oMeOH/90。/oH20(含有0.1。/。TFA(三氟乙酸))(對于柱B和C);洗脫劑B:95。/。CH3CN/5。/。H20(含有10mMNH40Ac)(對于柱A、D和E),90。/。MeOH/10。/。H2O(含有0.1。/。TFA)(對于柱B和C);柱A:Phenomenex10(a4.6x50mmC18;柱B:PhenomenexCl810|i3.0x50mm;柱C:Phenomenex4.6x50mmC1810p;柱D:PhenomenexLinaCI83.0x50mm;柱E:Phenomenex5p4.6x50mmC18。制備性HPLC數(shù)據(jù)。梯度歷時20分鐘線性變化，除非另有說明；起始濃度15%B,除非另有說明；結束濃度100%B;洗脫劑A:5。/。CH3CN/95。/。H20(含有10mMNH4OAc);洗脫劑B:95。/。CH3CN/5。/。H20(含有10mMNH4OAc);柱SunfirePrepC18OBD5p30x腦mm。中間體12-溴-3-環(huán)己基-lH-W咮-6-曱酸曱酯在2°C將新重結晶的三溴化吡啶4翁(pyridiniumtribromide)(在熱AcOH(乙酸)(5mL/1g)中重結晶，用冷AcOH沖洗，并在高真空下用KOH干燥)逐份(歷時10分鐘)加到攪拌的3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-甲酸曱酉旨(60g,233mmol)(使用在WO2004/065367中描述的方法來制備)于CHC1/THF(四氫呋喃)(1:1,1.25L)中的溶液中。將反應溶液在0-5。C攪拌2.5小時，并用飽和NaHS03水溶液(1L)、INHC1(1L)和鹽水(1L)洗滌。干燥(MgS04)有機層并濃縮。將所得紅色油狀物用Et20(乙醚)稀釋并濃縮。將所得粉色固體溶解在Et2O(200mL)中，用己烷(300mL)處理并部分濃縮。過濾收集固體，用己烷沖洗。將母液濃縮至干，并重復上述操作。合并固體，得到2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸曱酯(64g，l卯mmol,82%)，其為蓬^^粉色固體，所述固體不經進一步純化即〈吏用。'H畫R(300MHz,CDC13)S8.47(寬單峰，1H)，8,03(d,J=1.4Hz，1H),7.74(dd，J=l,4，8.8Hz,1H),7.69(d,J=8.8Hz,1H),3.92(s，3H),2.82(tt,J=3.7,11.7Hz，IH)，1.98-1.72(m，7H)，1.50-1.27(m,3H)。13C麗R(75MHz,CDC13)5168.2,135.6,130.2,123.1,120.8，120.3,118,7，112.8,110.7，52.1,37.0,32.2(2),27.0(2),26.1。LCMS:m/e334(M-H)、保留時間3.34分鐘,柱A,4分鐘梯度。23中間體2<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>2-溴-3-環(huán)己基-lH-丐l咮-6-曱酸將2-溴-3-環(huán)己基-lH-卩引咮-6-曱酸曱酉旨(20g,60腿ol)和LiOH(3.8g，160mmol)于MeOH/THF/H20(l:l:l,300mL)中的溶液在90。C加熱2小時。反應混合物在冰/水浴中冷卻，用濃度為1M的HC1溶液(約160mL)中和，用水(250mL)稀釋，并在室溫攪拌l小時。過濾收集沉淀物，用水沖洗，干燥，得到2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸(定量)，其不經進一步純化即使用?？捎脕硖峁?-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸的可選擇方法如下所述。將2-溴-3-環(huán)己基-1H-口引哚-6-曱酸曱酉旨(117g，349mmo1)和LiOH'H20(26.4g，629mmol)于MeOH/THF/H20(1:1:1,1.8L)中的溶液回流加熱3小時。將反應混合物在冰/水浴中冷卻至約2"C，用1MHC1(約650mL)中和(加入速度使溫度不超過5°C)，用水(1L)稀釋，并攪拌，同時溫熱至環(huán)境溫度。過濾收集沉淀物，用水沖洗，干燥，得到2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸的單110"溶劑化物(135.5§，345誰01,99%)，其為黃色固體，所述固體不經進一步純化即使用。'HNMR(300MHz,CDC13)Sll.Ol(寬單峰，1H),8.77(s,1H),8.07(d,J=1.5Hz,1H),7.82(dd,J=1.5，8.8Hz,1H)，7'72(d，J=8.8Hz,1H)，3.84-3.74(m，4H)，2.89(m,1H),1.98-1.72(m,IIH)，1.50-1.24(m,3H)。13CNMR(75MHz,CDC13)5172.7,135.5,130.7,122.3,120.9(2),118.8,113.3,111.1，67.9(2)，37.0，32.2(2)，27.0(2),26.1,25.5(2)。LCMS:m/e320(M鄰，保留時間2.21分鐘，柱A，4分鐘梯度。中間體3<formula>formulaseeoriginaldocumentpage24</formula>2-溴-3-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；?lH-丐l咮-6-曱酰胺在22。C將U，-羰基二咪唑(1.17g，7.2mmol)加到攪拌的2-溴-3-環(huán)己基"H-P引咮-6-曱酸(2.03g，6.3mmol)于THF(6mL)中的溶液中。立即有。02放出，當放出減慢時，將溶液在5(TC加熱1小時，然后冷卻到22°C。加入N，N-二曱基硫酰胺(0.94g，7.56mmo1)，然后滴加DBU(1.34g，8.8腿ol)于THF(4mL)中的溶液。繼續(xù)攪拌24小時。將混合物在乙酸乙酯和稀HC1之間分配。乙酸乙酯層先后用水和鹽水洗滌，用Na2S04干燥。將萃取物濃縮至干，留下標題化合物，其為淺黃色易碎泡沫狀物(2.0g，74%,通過NMR估計純度〉90%)。'H畫R(300MHz,DMSO-D6)Sppm1.28畫1.49(m,3H)1.59-2.04(m,7H)2.74-2.82(m,1H)2.88(s,6H)7.57(dd，J=8.42，1.46Hz，1H)7.74(d,J=8.78Hz,1H)7.91(s,1H)11.71(s，1H)12.08(s,1H)。制備2-溴-3-環(huán)己基-N-[(二甲基氨基)磺?；鵠-lH-吲哚-6-曱酰胺的可選擇方法描述如下。在氮氣氣氛下向配備有機械攪拌器、溫度控制器、氮氣進口和冷凝器的1L四頸圓底燒瓶中加入2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸(102.0g，0.259摩爾)和無水THF(300mL)。攪拌10分鐘后，逐份加入CDI(50.3g，0.31摩爾)。然后將反應混合物加熱至50。C并保持2小時。冷卻到30。C后，一次性加入N，N-二曱基氨基磺酰胺(41.7g,0.336摩爾)，然后歷時1小時滴加DBU(54.1mL,0.362摩爾)。然后將反應混合物在室溫攪拌20小時。真空除去溶劑，將殘余物在EtOAc(乙酸乙酯)和1NHC1(1:1,2L)之間分配。分離有機層，水層用EtOAc(500mL)萃取。合并的有機層用鹽水(1.5L)洗滌并用MgS04干燥。過濾溶液，真空濃縮，得到粗產物(111.0g)。在60。C將粗產物懸浮在EtOAc(400mL)中。向懸浮液中緩慢加入庚烷(2L)。攪拌所得懸浮液并冷卻到0°C。然后對其進行過濾。濾餅用少量庚烷沖洗，并真空風干(housevacuumairdried)2天。收集產物，其為白色固體(92.0g,83%)。NMR(MeOD，300MHz)57.89(s,H),7.77(d,J=8.4Hz，1H),7.55(dd，J:8.4和1.8Hz,1H)，3.01(s,6H),2.73-2.95(m，1H),1.81畫2.05(m，8H)，1.39-1.50(m,2H);m/z429(M+H)+。中間體4253-環(huán)己基-N-(二甲基氨基)磺酰基]-2-(2-曱?；?冬曱氧基苯基)-lH-吲咮-6-曱酰胺將2-溴-3-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺酰基]-lH-吲咮-6-曱酰胺(4.28g,0.01摩爾)、4-曱氧基-2-曱?；交鹚?2.7g,0.015摩爾)、2-二環(huán)己基膦基-2，,6，-二曱氧基-聯(lián)苯(4111^，0.0001摩爾)、乙酸鈀(11.2mg)和微細研磨的碳酸鉀(4.Mg，0.02摩爾)于曱苯(30mL)中的混合物在氮氣氣氛下回流攪拌30分鐘，此時LC/MS分析顯示反應完成。然后反應混合物用乙酸乙酯和水稀釋，然后用過量稀HC1酸化。然后收集乙酸乙酯層，用稀HC1、水和鹽水洗滌。然后干燥(硫酸鎂)有機溶液，過濾并濃縮，得到膠狀物。膠狀物用己烷(250ml)和乙酸乙酯(25mL)稀釋，并將混合物在22i:攪拌20小時，在此期間產物轉化成亮黃色顆粒狀固體(4.8g)，所述固體不經進一步純化即使用。制備3-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-2-(2-曱酰基-4-曱氧基苯基)-1H-p引。呆-6-曱酰胺的可選擇方法如下提供。向漿化的2-溴-3-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺酰基]-吲哚-6-曱酰胺(54.0g，126mmo1)、4-曱氧基-2-曱?；交鹚?29.5g,164mmol)和LiCl(13.3g,315mmol)于EtOH(乙醇)/曱苯(l:l,1L)中的溶液中加入Na2CO3(40.1g,379mmol)的水(380mL)溶液。將反應混合物攪拌10分鐘，然后加入Pd(PPh3)4(四(三苯基膦)釔)(11.3g,lO.Ommol)。反應溶液用氮氣沖洗，并在70。C(內部監(jiān)測)加熱過夜，然后冷卻至室溫。反應混合物用EtOAc(lL)和EtOH(100mL)稀釋，用INHC1水溶液(lL)和鹽水(500mL)小心洗滌，干燥(MgS04),過濾并濃縮。將殘余固體與Et2O(乙醚)(600mL)—起攪拌1小時，過濾收集，得到3-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺酰基]-2-(2-曱酰基-4-曱氧基苯基)-lH-吲咮-6-曱酰胺(52.8g,109mmol，87%)，其為黃色粉末，所述粉末不經進一步純化即使用。！HNMR(300MHz，d6畫DMSO)511.66(s，1H)，8.17(s,1H)，7.75(d,J=8.4Hz,1H),7.74(d,J=8.4Hz,1H),7.59(dd,J=1.4,8.4Hz,1H),7.23陽7.16(m,2H),7.08(dd,J=2.6,8.4Hz，1H),6.54(d,J=8.8Hz,1H),3.86(s,3H)，3.22-3.08(m,1H),2.91(s,6H),2,00-1.74(m，7H)，1,60畫1.38(m,3H)。13CNMR(75MHz，CDC13)5165.7,158,8,147.2，139.1,134.3,132.0，123.4,122.0,119.2,118.2,114.8,112.3,110.4，109.8,79.6，45.9，37.2(2)，34.7,32.0(2)，25,9(2),24.9。LCMS:m/e482(M-H)曙，保留時間2.56分鐘,柱A，4分鐘梯度。26中間體11-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺跣基1-6-乙氧基-8-曱氧基-6H-異吲哚并[2，l-a吲咮-3-曱酰胺向配備有溫度控制器、冷凝器、氮氣進口和機械攪拌器的5L四頸圓底燒瓶中加入曱苯(900mL)、EtOH(900mL)、2-溴-3-環(huán)己基-N-(N,N-二曱基氨磺酰基)-lH-吲哚-6-曱酰胺(90g,0.21摩爾)、2-曱?；?4-曱氧基苯基硼酸(49.2g,0.273摩爾)和LiCl(22.1g，0.525摩爾)。所得溶液用氮氣鼓泡15分鐘。加入Na2C03(66.8g，0.63摩爾)的水(675mL)溶液，并且反應混合物用氮氣再鼓泡10分鐘。加入Pd(PPh3)4(7.0g,6.3mmol)，將反應混合物加熱至70。C并保持20小時。冷卻至35。C后，緩慢加入1NHC1溶液(1.5L)。將所得混合物轉移到6L分液漏斗中，用EtOAc(2xl.5L)萃取。合并的有機萃取物用鹽水(2L)洗滌，用MgS04干燥，過濾并真空濃縮，得到黃色固體，所述黃色固體用20。/。EtOAc/己烷(450mL,50。C至0。C)研磨，得到3-環(huán)己基-N-(N,N-二曱基氨磺酰基)-2-(2-曱?；?4-曱氧基苯基)-lH-吲哚-6-曱酰胺(65.9g),其為黃色固體。HPLC純度為98%。將來自研磨的母液真空濃縮。殘余物與EtOH(50mL)回流3小時。然后將溶液冷卻至0°C。過濾沉淀物，用經冷卻的TBME(叔丁基曱基醚)(5")(20mL)洗滌。將濾餅真空風干，得到額外量的標題化合物，其為白色固體(16.0g)。HPLC純度為99%。'HNMR(CDC13,300固z)S8.75(s,1H)，7.96(s,1H),7.73(d,J=8.4Hz,1H)，7.67(d,J=8.4Hz,1H)，7.45(dd，J=8.4和1.4Hz:1H),7.09(d,J=2.2Hz,1H)，6.98(dd,J-8.4和2.2Hz,1H),6.50(s，1H)，3.86(s，3H):3.05(s,6H)，2.92-3.13(m,3H),1,85-1.93(m，7H),l唇1.42(m,3H),1.05(t，J=7.lHz，3H)。m/z512(M+H)+。中間體6273-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-2-(2-曱?；?4-曱氧基苯基)-lH-吲哚-6-曱酰胺將11-環(huán)己基-N-(N，N-二曱基氨磺?；?-6-乙氧基-8-曱氧基-6H-異吲哚并[2,l-a]吲咮-3-曱酰胺溶解在THF(75mL)中。向溶液中加入2NHC1溶液(300mL)。在室溫將混合物在氮氣氣氛下劇烈攪拌16小時。過濾所得懸浮液，用經冷卻的TBME(2x30mL)洗滌。將濾餅真空風干(vacuumdry)過夜，得到標題化合物，其為黃色固體。HPLC純度為99。/。。]HNMR(DMS0-d6，300MHz)S11.65(s，1H)，8.16(s，1H),7.76(d，J=5.9Hz,1H),7'73(d，J=5.9Hz,1H),7.58(dd，J=8.5和1.5Hz，1H)，7.17畫7.20(m,2H),7.08(dd,J=8.5和1.4Hz,1H)，6.55(d，J=8.6Hz,IH)，3.86(s,3H),3.14-3.18(m，IH)，2.91(s,6H)，1.75-1.99(m,7H)，1.48-1.60(m,3H);m/z484(M+H)+。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>13-環(huán)己基-10-[[[(二曱基氨基)磺酰基]氨基羰基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，l-a[2苯并氮雜萆-6-曱酸曱酯將3-環(huán)己基-:^-(1^>^二曱基氨磺?；?-2-(2-曱酰基-4-曱氧基苯基)-111-吲哚-6-曱酰胺(《Sg，0.01摩爾)、2-(二曱氧基磷?；?丙烯酸曱酯(9.^，0.02摩爾)和碳酸銫(7.1g,0.02摩爾)于DMFp8mL)中的混合物在油浴溫度55°C攪拌20小時。將混合物倒入冰-水中并用稀HCl酸化，從而使粗產物沉淀。收集固體，千燥并進行硅膠(110g)快速色譜(使用含有2%乙酸的乙酸乙酯和二氯曱烷(1:10)溶液)。合并均一的餾分(homogeneousfraction)并蒸發(fā)，得到標題化合物，其為淺黃色固體(3.9g,71%收率)。MS:552(M=H+)。<formula>formulaseeoriginaldocumentpage28</formula>制備13-環(huán)己基-10-[[[(二曱基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-曱氧基-7H-吲咮并[2,l-a][2]苯并氮雜革-6-曱酸曱酯的可選擇方法如下提供。將11-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-6-羥基-8-曱氧基-6H-異吲哚并[2,l-a]吲哚-3-曱酰胺(環(huán)狀半縮醛胺)(63.0g，130mmo1)、2-(二曱氧基磷?；?丙烯酸曱酯(60g,261mmo1)、碳酸銫(106g,326mmol)于DMF(400mL)中的溶液在60。C(浴溫)力。熱4.5小時。加入額外的2-(二曱氧基磷?；?丙烯酸曱酯(15g,65mmol)和碳酸銫(21.2g,65mmo1)，將反應混合物在60。C加熱過夜，然后冷卻至室溫。攪拌的反應混合物用H20(1L)稀釋，用INHC1水溶液(800mL)緩慢中和，攪拌3小時，然后過濾收集沉淀物。固體用Et2O(800mL)研磨，干燥，得到13-環(huán)己基-10-[[[(二曱基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-曱氧基-7&p引。呆并[2，l-a][2]笨并氮雜萆-6-曱酸甲酯(70.2g，127mmo1，98%)，其為黃色固體，所述固體不經進一步純化即使用。NMR(300MHz，CDC13)58.67(s,1H)，8.09(s，1H)，7.86(d，J=8.4Hz,1H)，7.80(s，1H),7.50(d，J=8.4Hz，1H)，7.42(d，J=8.8Hz,1H)，7.08(dd，J=2.6,8.8Hz,1H)，6.98(d,J=2.6Hz,1H)，5.75-5.5l(m，1H),4,29-4.01(m，1H)，3'89(s，3H),3.82(s,3H),3.05(s，6H)，2.87-2.73(m,1H),2.11-1.12(m，IOH)。LCMS:m/e550(M陽Hy，保留時間3.21分鐘，柱A，4分鐘梯度。中間體82-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸(l，l-二曱基乙基)酯向機械攪拌的2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸(80g，0.24mmol)于無水二氯曱烷(1.2L)和THF(100mL)中的溶液中加入活化的分子篩(4A,80g)和碳酸銀(275g，0.99mmo1)。將反應混合物冷卻至0°C，滴加叔丁基溴(142g，1.04mmol)。將混合物在室溫攪拌過夜，通過TLC(己烷-乙酸乙酯80:20,Rf(產物)二0.7)進行監(jiān)測。如果留有任何溴代酸未發(fā)生轉化，則加入額外的10%碳酸銀，并再繼續(xù)機械攪拌2-4小時。結束后，將反應混合物過濾通過薄的硅藻土床。過濾介質(filtrand)用二氯曱烷(500mL)洗滌。真空濃縮合并的濾液，由此得到的粗產物通過硅膠色譜(230-400目)(用0-2%乙酸乙酯/石油醚的梯度進行洗脫)進行純化。合并均一的餾分，減壓蒸發(fā)，得到80g(85。/。)標題化合物。HPLC:90.1。/。(RT-6.56分鐘)，柱C18BDS,(50x4.6mm)，流動相0.P/。TFA/水:ACN(30—100—30)的梯度，流速0.8mL/分鐘。LCMS:99.8%(RT=4.44min)，柱Geneis,C1850x4.6腿，流動相0.1%曱酸/水:ACN(70—95—70)的梯度，流速0.8mL/分鐘，M-l=376.5。'HNMR(CDCl3)(400MHz)51.37-1.40(m，3H，環(huán)己基)，1.62(s,9H,*又丁基)，1.80-1.94(兩組多重峰，分別是3H和4H,環(huán)己基部分)，2.81(m，1H，環(huán)己基-苯曱?；腃H(CHofcyc,Hexyl-benzylic)),7,70-7,75(m,2H，吲咮-H4和Hs),8.04(s，lH，p引咮-H7)，8.52(s，1H，p引咮-NH)。3-環(huán)己基-2-(2-曱?；?4-曱氧基苯基)-lH-吲哚-6-甲酸(l，l-二曱基乙基)酯<formula>formulaseeoriginaldocumentpage30</formula>將2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸叔丁西旨(72g，0.19mmol)溶解在曱苯和乙醇的1:1混合物(720mL)中并脫氣。然后加入LiCl(23.9g,0.51mmo1)，接著加入碳酸鈉(720mL,經單獨脫氣的濃度為l.OM的溶液)和Pd-tetrakis(13.1g,O.Ollmmol)。攪拌0.25小時后，加入2-甲?；?4-曱氧基苯基硼酸(41.1g，0.22mmo1),將反應混合物加熱至85°C并保持4小時。然后通過TLC(己烷-乙酸乙酯80:20,Rf(產物)-0.55)監(jiān)測反應。結束后，將反應混合物冷卻至室溫，加入水(1.0L),然后加入乙酸乙酯(1.0L)。有機層用鹽水洗滌，干燥并真空濃縮，得到標題化合物，其為黃色固體。收率75g(74%)。HPLC:99.7%(RT=6.30min)，柱C18BDS(4.6x50mm)，SC-307,流動相0.1%TFA/水:ACN(30—100—30)的梯度，流速0.8mL/分鐘。LCMS:98.0%(RT=5.28min)，柱Geneis,C18(50x4.6腿),流動相0.1%曱酸/水:ACN(70—95—70)的梯度，流速0.8mL/分鐘，M-l=432.2。'HNMR(DMSO-d6)(400MHz)51.40-1.48(m，3H,環(huán)己基)，1.57(s,9H,叔丁基)，中間體91.84-1.90(m,7H,環(huán)己基部分)，3.09(m,1H,環(huán)己基-苯甲?；腃H),3.84(s，3H,OCH3)，6.55(d,J=4Hz,1H,芳基H2'),7.06(d,1H,芳基&')，7,08(s,1H,芳基H6')，7.23(d，1H，吲味-Hs),7.53(d，J=8Hz，1H,吲哚-Hj)，7.70-7.75(m,2H，NH+p引哚陽H7)，8.06(s，1H，CHO)。中間體1013-環(huán)己基-3-曱氧基7H-吲哚并[2，l-al[21苯并氮雜蕈-6，10-二曱酸10-(1，1-二曱基乙基)酯'6-曱酯將3-環(huán)己基-2-(2-曱?；?4-曱氧基苯基)-111-吲哚-6-曱酸叔丁酯(62.5g，0.144mmol)溶解在無水DMF(1.2L)中并機械攪拌。然后加入碳酸銫(84g,0.17mmol)和2-(二曱氧基磷?；?丙烯酸曱酯(GC純度為65-70%,562g,0.18mmo1)，將反應混合物加熱至65。C并保持4小時，并且通過TLC(己烷-乙酸乙酯80:20,1^產物)=0.7)監(jiān)測反應。結束后，將混合物冷卻至室溫，然后用水(1.0L)淬滅。黃色固體沉淀出來，過濾收集所述固體并風干。然后將該物質在曱醇中漿化，過濾，真空干燥，得到產物，其為黃色粉末(70g，90%)。HPLC:99.1%(RT=6.45分鐘)，柱C18BDS(4.6x50mm)，流動相0.1%TFA/水:ACN(30—100—30)的梯度，流速0.8毫升/分鐘。LCMS:100%(RT=7.00分鐘)，柱Geneis,C18(50x4.6mm)，流動相0.1%曱酸/水:ACN(70—95—70)的梯度，流速0.8毫升/分鐘，M+l=502.2。！HNMR(CDCl3)(400MHz)S1.10-1.30(m,3H,環(huán)己基)，1.64(s,9H，叔丁基)，1.77-2.07(m,7H,環(huán)己基部分)，2.80(m，1H，環(huán)己基-苯曱酰基的CH)，3.84(s，3H,OCH3),3.93(s,3H,COOCH3),4.15和5.65(兩個寬峰，各為1H，烯丙?；腃H2(allylicCH2))，6.95(s,1H，芳基H6'),7.01(d，1H,芳基Hr)，7.53(d，J=8Hz，1H,芳基Hy),7.70(d,J=4Hz,1H，吲咮-&),7.84(s+d,2H,烯基的H+吲哚-HO，8.24(s,1H,口引咮-H7);13CNMR(CDCl3)(100.0MHz)S166.92，165.71,158.96，142.28,136.47,13.50,134.61,132.43，132.01，129.73，124.78,124.68,120.33，119.39,119.04,115.62,115.05，111.27，80.27,55.49，52.50，39.09，36.81,33.40，28.3827.15,26.28。中間體112-(二曱氧基氧膦基)-2-丙烯酸曱酯向配備有機械攪拌器、冷凝器、溫度控制器和氮氣進口的5L四頸圓底燒瓶中加入低聚曱醛(40.5g,1.35摩爾)、MeOH(曱醇)(2L)和哌啶(2mL)。將反應混合物在氮氣氣氛下加熱至回流并保持3小時。冷卻到50。C后，一次性加入2-(二曱氧基磷?；?乙酸曱酯(150g，0.824摩爾)。將反應混合物繼續(xù)回流18小時。冷卻到室溫后，真空濃縮反應溶液，得到透明無色油狀物。在配備有溫度控制器、氮氣進口、磁力攪拌器和迪安-斯托克分水器(Dean-Starkapparatus)的3L四頸圓底燒〗fe中將上述油狀物溶解在無水曱苯(1L)中。向溶液中加入TsOH.H20(曱磺酸水合物)(5.2g)。然后將反應混合物共沸回流18小時，從而除去曱醇。冷卻到室溫后，將溶液真空濃縮，得到黃色油狀物，將其在150-155。C/0.2mmHg的條件下真空蒸餾，得到產物，其為無色油狀物(135.0g)。根據(jù)'HNMR確定純度為90%。'HNMR(CDCl3，300MHz)S7.0(dd,J=42.4和1.5Hz，1H)，6.73(dd，J=20.5和1.8Hz,1H),3.80(s,6H)，3.76(s,3H)。中間體123-曱基-8-(苯基曱基)-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1辛烷在安裝有機械攪拌器、回流冷凝器和溫度計的5L三頸圓底燒瓶中將順式_1-千基-2，5-二(氯曱基)p比咯烷鹽酸鹽(37.5g,0.13摩爾)(如在公開的PCT專利申請WO200232卯2中所描述的那樣來制備)懸浮在CH3CN(900mL)t。將攪拌的懸浮液溫熱至50°C，加入NaHC03(97g，1.1摩爾)，并將懸浮液溫熱至70。C。加入Nal(50g，0.33摩爾)并在70。C攪拌5分鐘，此時將加料漏斗固定在冷凝器的頂部。向加料漏斗中加入48mL4()o/()含水MeNH2(甲胺)(0.55摩爾)于850mLCH3CN中的溶液，并且將該溶液逐滴加入(加入速率保持在10-15ml/分鐘)。75分鐘后，加入完成，此時將反應混合物冷卻到室溫，過濾出固體，并將溶劑濃縮至約800mL。將反應混合物倒入EtOAc(800mL)中，用1NNaOH(2xl00mL)洗滌。水相用EtOAc(2xl00mL)再次萃取，合并的有機相用Na2S04干燥并濃縮。將所得殘余物加載到硅膠(620g)上，用2.8。/。MeOH/0.4。/。濃NH40H/CHCl3(總共6L)洗脫。收集純的餾分(從2L至4L)。濃縮，得到8.76g(32。/。收率)標題化合物，其為棕色油狀物。'HNMR(400MHz,CDC13)5ppm1.79畫1.87(m,2H)1.92-1.99(m，2H)2.23(s,3H)2.27-2.37(m，2H)2.54-2.63(m，2H)3.10(s,2H)3.52(s，2H)7.20-7.26(m,1H)7.30(t，J=7.30Hz,2H)7.36-7.42(m，2H)。LC方法溶劑A=10%MeOH/90%H2O/0.1%TFA，溶劑B=90%MeOH/10%H2O/0.1%TFA,起始％8=0%，最終％8=100，流速=4毫升/分鐘，梯度時間=2分鐘，運行時間=3分鐘，柱Phenomenex-Luna10|imC1850mmx3.0mm,Rt=0,23min;MS:(ES+)m/z(M+H)+=217.3。通過柱還得到6.1g混合餾分(通過NMR積分確定純度為>80%)。中間體13*2HCI3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛烷二鹽酸鹽將N-甲基-N-千基二環(huán)二胺(14.22g，65.7mmol)溶解在650ml甲醇中，加入17ml濃度為12M的鹽酸水溶液。在氮氣氣氛下將溶液置于2L帕爾瓶(Parrbottle)中，并向反應混合物中加入3.66g20。/o氫氧化把/炭。將混合物置于帕爾振蕩器(Parrshaker)上在60psig的氫氣下保持17小時。通過TLC分析(硅膠板，用10體積份2M氨/曱醇的卯體積份氯仿溶液洗脫)判斷反應完成。將反應混合物過濾通過硅藻土塞，然后先后用水和曱醇對所述塞進行沖洗。將合并的濾液真空濃縮，加入曱醇和苯直到得到均一的溶液。然后加入75mL濃度為2.0M的鹽酸/乙醚。從產物溶液中真空除去揮發(fā)物。使用曱醇/苯混合物在產物溶液中反復對水進行共沸，由此最終得到淺黃色固體。將固體產物即3-曱基-3,8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛烷真空干燥過夜，得到11.98g(91。/。)吸濕性固體。將產物從燒瓶中取出并由于其吸濕性而將其裝在氮氣氣氛下的手套式袋子(glovebag)中。'H雨R(500MHz，DMSO-D6)Sppm1.96-2.14(m，2H)2.34(d,J=8.24Hz，2H)2.66(s，3H)3.46(d,J=ll,90Hz,2H)3.58(s,3H,含有H20)4.17(s，2H)9,92(s，1H)10.21(s，1H)11.39(s,1H);13CNMR(126MHz，DMS0-D6,)Sppm24.04(s,1C)43.49(s，1C)52.50(s，1C)54.47(s,1C)。中間體14和153，8-二氮雜二環(huán)3.2.1辛烷-3-甲酸苯基甲酯和3-(苯基曱基)-3，8-二氮雜二環(huán)3.2.1辛烷將三乙胺(1.44mL,10.363mmol)加到8-叔丁氧羰基-3,8-二氮雜-二環(huán)[3,2.1]辛烷(2.0g，9.421mmol)于CH2Cl2(20mL)t的溶液中，在0。C滴加氯曱酸千酯(1.46mL,10.363mmo1)，并將反應混合物在0。C攪拌0.5小時，然后使其溫熱至室溫，繼續(xù)攪拌3天。然后用水將反應混合物淬滅，并用1NHC1溶液酸化。分離有機層，用鹽水洗滌，干燥(MgS04)并濃縮，得到無色稠厚油狀物，其為粗產物。然后將70mg該物質溶解在1,2-二氯乙烷(2mL)和TFA(0.5mL)中。將反應混合物在室溫攪拌2小時。然后蒸發(fā)溶劑和TFA,得到兩種標題化合物的混合物，其為無色稠厚油狀物。中間體163-環(huán)己烯基-lH-丐l咪-6-曱酸在22。C將環(huán)己酮(96mL,0.926摩爾)加到攪拌的吲咮-6-曱酸曱酯(50.0g，0.335摩爾)于曱醇(920mL)中的溶液中。歷時10分鐘逐份加入曱醇鈉的曱醇溶液(methanolicsodiummethoxide)(416mL,濃度為25%w/w,1.82摩爾)。將混合物回流攪拌18小時，冷卻到室溫，濃縮，用冷水稀釋和用36。/。HC1溶液酸化。過濾收集所得沉淀物，用冷水洗滌，并用五氧化二磷(0.1mm)干燥，得到標題化合物，其為褐色固體(80.9g,97.5%收率)。中間體173-環(huán)己基-lH-丐l咪-6-曱酸將3-環(huán)己烯基-lH-吲哚-6-曱酸(38g)加到帕爾瓶中，然后加入甲醇(lOOmL)和THF(lOOmL)。瓶用氬氣沖洗，并加入10。/。把/炭(1.2g)。然后將燒瓶抽空，隨后再次充入氫氣至壓力為55psi,將所得混合物在室溫振蕩18小時。然后通過過濾經過硅藻土來除去催化劑。濃縮濾液，得到所期望的產物，其為淺紫色固體(30.6g,79%)。ESI-MSm/z244(MH+)。3-環(huán)己基-1H-p引咪-6-曱酸曱酯將亞硫酰氯(lmL)加到攪拌的3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸(30.4g,0.125摩爾)于曱醇(300mL)中的混合物中。將混合物回流攪拌18小時，用脫色炭處理并過濾。將濾液濃縮至約150mL，此時發(fā)生結晶。將濾液冷卻至室溫，并過濾。固體先后用冷曱醇和乙醚洗滌，得到所期望的產物，其為淺紫色固體(22.2g,69%收率)。ESI-MSm/z258(MH+);雨R(300顧z,CDCk)51.35(m,4H),1.63(s,1H)，1.78(m,3H),2.06(d,J=8.05Hz,2H),3.90(m，1H),7.08(d，J=1.83Hz，1H),7.62(s,1H),7.65(s,1H)，7.74(d，J=1.46Hz，1H),7.77(d，J=1.46Hz,1H),8.08(s,1H)。中間體19lH-丐l哚-6-曱酸曱酯將重氮曱烷的乙醚溶液(620mL)緩慢加到經冷卻的(-15。C)攪拌的吲哚-6-曱酸(45&0.27摩爾)于乙醚(25011^)中的懸浮液中。加入后，將反應混合中間體18物在-15。C再撹拌1小時，之后通過緩慢加入乙酸(50mL)將反應淬滅。然后將所得混合物減壓濃縮，并使用硅膠(60-120)快速色鐠(使用MDC(二氯曱烷)作為洗脫劑)對殘余物進行純化。中間體203-環(huán)己基-lH-丐l咮-6-曱酸曱酯將環(huán)己酮(42.46mL，0.40摩爾)一次性加到攪拌的吲味-6-曱酸曱酯(47.8g:0.27mmol)于無水二氯曱烷(500mL)中的溶液中。然后將反應混合物冷卻至10°C,滴加三氟乙酸(63.13mL，0.8mmo1)，然后加入三乙基曱硅烷(174.5mL,1.09mmo1)。加入后，使溫度升至室溫，之后將其再攪拌12小時。然后加入二氯曱烷(200mL)，反應混合物先后用10%碳酸氫鈉溶液和鹽水洗滌。有機層用硫酸鈉干燥，過濾并真空濃縮。通過硅膠(60-120)快速色譜(使用己烷-乙酸乙酯(9.5:0.5)混合物作為洗脫劑)對所得殘余物進行純化。合并均一的餾分，蒸發(fā)，得到60g所期望的產物(85。/。)。有關該物質的分析性數(shù)據(jù)與通過上面描述的可選擇路線制備的樣品的分析性數(shù)據(jù)相一致。中間體212-溴-3-環(huán)己基-lH、l咮-6-曱酸曱酯將無水三溴化吡啶錯(12.0g,38mmol)—次性加到攪拌的經冷卻的(冰/水浴)3-環(huán)己基-lH-卩引咮-6-曱酸曱酯(7.71g，30mmol)于THF(80mL)和氯仿(80mL)的混合物中的溶液中。從冷卻浴移開燒瓶，在室溫繼續(xù)攪拌2小時。混合物先后用1MNaHSO3溶液(2x50mL)和1NHCl溶液(50mL)洗滌。然后其用無水硫酸鈉干燥，過濾并濃縮。濃縮物用己烷處理，過濾收集所得沉淀物，得到所期望的產物，其為灰白色固體(5.8g，58。/。)。'HNMR(300MHz，CDC13)S1.38(m,3H),1.85(m，7H),2.81(m，1H)，7.71(m,2H),8.03(s,1H),8.47(s,1H)。將己烷母液濃縮，將殘余物溶解在己烷/乙酸乙酯(5:l)中。使溶液通過硅膠墊(用相同的溶劑)。濃縮洗脫液，然后加入己烷(10mL),使額外的產物沉淀出來，過濾收集所述額外的產物，得到2.8g(28。/。)所期望的產物。中間體2211-環(huán)己基-6-羥基-6H-異吲咮并2，l-a吲咮-3-甲酸曱酯在氮氣氣氛下將攪拌的2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸曱酯(10.1g,3Ommo1)、2-曱?；交鹚?5.4g，36mmo1)、LiCl(3.8g,90mmol)和Pd(PPh3)4(1.6g，1.38匪ol)于濃度為1M的Na2C03溶液(40mL)和1:1EtOH隱曱苯(180mL)中的混合物在85。C加熱3小時。然后將反應混合物冷卻至室溫，并用EtOAc(2xl00mL)萃取。萃取物先后用水和鹽水洗滌，然后干燥(MgS04)，過濾并真空濃縮，得到13.3g粗產物。該物質用DCM(二氯曱烷)和己烷研磨，得到純的所期望的產物(7.52g，70。/。)。LC-MS:m/e360(M-H);344(M畫17)+。'HNMR(400MHz，氯仿-D)Sppm1.33-1.60(m,4H)1.77-2.01(m,6H)2.80(d,J=11.83Hz，1H)3.02-3.18(m,1H)3.89(s,3H)6.49(d，J=11.33Hz，1H)7.34(t，J=7.55Hz，1H)7.46(t,J=7.55Hz，1H)7.62(d，J=7.30Hz，1H)7.66-7.74(m，2H)7.77(d,J=7.81Hz，1H)8.21(s,1H)。中間體23<formula>formulaseeoriginaldocumentpage37</formula>13-環(huán)己基-6-(曱氧基羰基)-7H-吲哚并[2，l-a[2]苯并氮雜蕈-10-曱酸曱酯在氮氣氣氛下將攪拌的11-環(huán)己基-6-羥基-6H-異吲哚并[2，l-a]吲哚-3-曱酸曱酯(3.61g,lOmmol)、Cs2C03(3.91g,12醒ol)和2-膦?；宜崛龝貂?trimethyl2陽phosphonoacetate)(2.86g,14mmol)于無水DMF(40mL)中的懸浮液在60。C加熱3小時。將所得黃色懸浮液冷卻至室溫，并在劇烈攪拌下加入水。形成黃色沉淀物，過濾收集所述沉淀物。固體用水洗滌，然后風干過夜，得到標題化合物，其為黃色粉末(4.124g,96%)。LC/MS:m/e430(MH+);'HNMR(400畫z，氯仿-D)5ppm1.30-l，46(m,J-14.86Hz,2H)1.55(s，2H)1.77(s,2H)1.85-2.18(m,4H)2.76-2.89(m,1H)3.84(s，3H)3.95(s,3H)4.19(s,1H)5.68(s，1H)7.38-7.63(m,4H)7,74(dd，J=8.44,1.39Hz,1H)7.81-7.98(m，2H)8.29(d，J=1.01Hz,1H)。13-環(huán)己基-6-(羧基)-7H-吲哚并2，l-a2苯并氫雜蕈-10-曱酸曱酯將13-環(huán)己基-6-(曱氧基羰基)-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜蕈-10-曱酸曱酯(308mg,0.72mmol)溶解在N，N-二曱基曱酰胺(5mL)中，用LiOH(173mg,7.2mmol)處理。將混合物在50。C加熱4小時，之后真空除去溶劑。將殘余物溶解在H20(5mL)t,通過加入10%HC1水溶液對所得混合物進行酸化。形成沉淀物，過濾收集所述沉淀物，風干，得到標題化合物，其為亮黃色固體(290mg,97%)。ESI-MSm/z[M+l〗=415。除非另有說明，以下一般方法與下述實驗操作一起使用LCMS數(shù)據(jù)停止時間梯度時間+l分鐘；起始濃度除非另有說明，0%B;洗脫劑A:50/oCH3CN/95。/。H20(含有10mMNH40Ac(乙酸銨))(對于柱A和D)，10。/。MeOH/90。/。H2O(含有0.1。/。TFA(三氟乙酸))(對于柱B和C);洗脫劑B:95。/。CH3CN/5。/。H20(含有10mMNH40Ac)(對于柱A和D)，卯o/。MeOH/10。/。H2O(含有0.1。/。TFA)(對于柱B和C);柱A:Phenomenex10|i4.6x50mmC18;柱B:PhenomenexC1810|a3.0x50mm;柱C:Phenomenex中間體244.6x50mmC1810p;柱D:PhenomenexLinaC185|x3.0x50mm;柱E:Phenomenex54.6x5.0mmCI8。向漿化的2-溴-3-環(huán)己基-lH-吲哚-6-曱酸曱酯(4.3g，13rnrno1)、4-曱氧基-2-曱?；交鹚?3.0g,17mmol)和LiCl(2.2g，51匪ol)于EtOH(乙醇)/曱苯(1:1,100mL)中的溶液中加入Pd(PPh3)4(1.4g,Ummol),然后加入濃度為1M的Na2C03(水溶液)(32mL,32mmol)。反應溶液用氮氣沖洗，并在IO(TC加熱3小時，冷卻至室溫。濃縮反應混合物，從而除去EtOH,用H2O(200mL)稀釋，并用EtOAc(2xl50mL)萃取。合并的有機物用鹽水(100mL)洗滌，干燥(MgSO",過濾并濃縮至干。殘余物用CH2Cb研磨，過濾收集固體，并用Et20和CH2Cl2洗滌，得到11-環(huán)己基-6-羥基-8-曱氧基-6H-異卩引咮并[2,l-a]吲哚-3-曱酸曱酯(3.0g,8.0mmol，63%),其為黃色固體，所述固體不經進一步純化即使用。LCMS:m/e374(M+H)+，保留時間3.09分鐘，柱B,3分鐘梯度。中間體25將11-環(huán)己基-6-羥基-8-曱氧基-6H-異吲哚并[2，l-a]吲哚-3-曱酸曱酯(2.9g,7.4mmol)、2-(二曱氧基磷?；?丙烯酸曱酯(2.6g，11mmol)、碳酸銫(3.6g,11mmol)于DMF(20mL)中的溶液在60。C加熱2小時,冷卻至室溫。攪拌的反應混合物用H2O(50mL)稀釋，過濾收集沉淀物，得到13-環(huán)己基-3-曱氧基-711-吲哚并[2,1力][2]苯并氮雜萆-6,10-二曱酸二曱酯(3.3§，7.1mmo1,97%),其為黃色固體，所述固體不經進一步純化即使用。LCMS:m/e460(M+H)+，保留時間3.35分鐘，柱B，3分鐘梯度。將四丁基氫氧化銨溶液(濃度為1M的MeOH溶液，2.2mL,2.2mmol)加到攪拌的13-環(huán)己基-3-甲氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜蕈-6，10-二曱酸二曱酯(1.0g,2.2mmol)于THF(75mL)中的溶液中，在室溫攪拌過夜。將反應混合物濃縮至約30mL,用EtOAc(120mL)稀釋，用濃度為0.5M的HC1(水溶液)(2x50mL)和鹽水(40mL)洗滌，干燥(MgS04),過濾并濃縮至干，得到13-環(huán)己基-3-曱氧基-6-羧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-10-曱酸曱酯(1.0g,2.2mmo1,定量)，其為黃色固體，所述固體不經進一步純化即使用。LCMS:m/e446(M+H)+,保留時間1.54分鐘，柱A,2分鐘梯度。中間體27將濃度為1M的NaOH(水溶液)(5mL，5mmol)加到13-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-6-曱酸曱酯.10-曱酰胺(卯0mg，1.6mmol)于THF/MeOH(l:l，14mL)中的溶液中，將反應混合物在封閉的管中用微波輻射在85。C加熱30分鐘。將反應混合物冷卻，用1MHCl(水溶液)(5mL，5.0mmol)中和，濃縮除去有^/L溶劑。殘余物用1120漿化，過濾收集固體，用H20沖洗，干燥，得到13-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺酰基]-3-曱氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜蕈-10-曱酰胺.6-曱酸(807mg,1.5mmol,92%)，其為黃色固體。LCMS:m/e536(M-H)-，保留時間2.18分鐘，柱A，4分鐘梯度。下面描述的一般方法涉及表3中化合物的實驗數(shù)據(jù)。LCMS數(shù)據(jù)梯度時間2分鐘；流速4毫升/分鐘；停止時間梯度時間+2分鐘；起始濃度0%B;洗脫劑A:10。/。MeOH/90。/。H2O(含有0.1%TFA);洗脫劑B:900/。MeOH/10。/。H2O(含有0.1%TFA);柱1:PhenomenexlOpC184.6x50mm。表3<table>tableseeoriginaldocumentpage41</column></row><table>10-(叔丁氧基羰基)-13-環(huán)己基-3-甲氧基-7H-吲哚并2，l-a[2苯并氮雜蕈-6-曱酸將四丁基氫氧化銨(40。/。的水溶液，14.4mL，22mmol)加到13-環(huán)己基-3-曱氧基-7H-吲哚并[2，l-a][2]苯并氮雜萆-6,10-二曱酸10-叔丁酯.6-曱酯(5.0g,10mmol)于MeOH(40mL)和THF(40mL)中的漿液中，將反應混合物在室溫攪拌過夜(通過LCMS確定完成)。反應混合物用lNHCl(水溶液)(24mL)中和，濃縮，從而除去有機溶劑。淤渣(sludge)用水稀釋，攪拌，并過濾收集固體。將濕的固體溶解在EtOAc(約250mL)中，用鹽水(100mL)洗滌，干燥(MgS04),過濾并濃縮，得到10-(叔丁氧基羰基)-13-環(huán)己基-3-曱氧基-7H-吲哚并[2，l-a][2]苯并氮雜萆-6-曱酸(5.73g,11.8mmo1，118%收率)，其為亮黃色固體。產物似乎混合有四丁基銨副產物。所述物質不經進一步純化即使用。'HNMR(300MHz，CDC13)5ppm1.14-2.13(m,10H),1.60(s，9H),2,73-2.86(m,1H):3.89(s,3H),4.03陽4.26(m，1H),5.49-5.80(m,1H)，6'98(d，J=2.6Hz，1H),7.07(dd，J=8.4,2.6Hz，1H)，7,56(d,J=8.4Hz，1H),7.64(dd，J=8.4,1.1Hz,1H),7.79(d，J=8.4Hz,1H),7.89(寬單峰，1H),8.19(s，1H)。LC-MS:保留時間為4.32分鐘；488m/z(MH+)。在ShimadzuLC-10AS液相色譜上記錄LC數(shù)據(jù)，所述色譜配備有Phenomenex-Luna10pC183.0x50mm柱，使用檢測器波長為220nm的SPD-10AVUV-Vis檢測器。使用以下洗脫條件流速為5毫升/分鐘，梯度為100%溶劑A/0。/。溶劑B至0%溶劑A/100。/。溶劑B,梯度時間為4分鐘，保持時間(holdtime)為1分鐘，以及分析時間為5分鐘，其中溶劑A為100/。MeOH/90。/。H2O/0.1。/o三氟乙酸，溶劑B為10%1120/90%]\^011/0.1%三氟乙酸。使用MicromassPlatform用于LC以電噴霧模式確定MS數(shù)據(jù)。實施例113-環(huán)己基-N-(二曱基氨基)磺?；鵯-3-甲氧基-6-(3-甲基-3，8-二氮雜二環(huán)3.2.1辛-8-基)羰基l-7H-吲哚并[2，l-a21苯并氮雜萆-10-曱酰胺向攪拌的13-環(huán)己基-N-[(二甲基氨基)磺酰基]-3-曱氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-10-曱酰胺.6-曱酸(51mg,0.095mmo1)、3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛烷二鹽酸鹽(34mg,0.17mmol)和三乙胺(0.06mL)于DMF(1.OmL)中的溶液中加入HATU(50mg,0.13mmo1)。將反應混合物在室溫攪拌2小時，用MeOH(約lmL)稀釋，并通過制備性HPLC(CH3CN/H20(含有10mMNH4OAc))純化，得到13-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基隱6-[(3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基]-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆—10-曱酰胺(52mg,0.08mmo1,85%),其為黃色固體。'HNMR(300MHz,CDC13)58.3l(s，1H)，7.83(d，J=8,4Hz，1H),7.59(brd,J=8.4Hz，1H)，7.45(d，J=8.8Hz,1H)，7.02(dd，J=2.6,8.8Hz,1H),6.91-6.86(m，2H),5.35-5.16(m，1H),4.34醫(yī)4.16(m，1H)，3.87(s,3H),3.01(s,6H)，2.85-1.03(m，24H)。LCMS:m/e644(M-H)-,保留時間為2.89分鐘，柱A，4分鐘梯度。3-[13-環(huán)己基-10-[[[(二甲基氨基)磺?；鵯氨基羰基卜3-曱氧基-7H-吲哚并2，l-a[2苯并氮雜萆-6-基羰基-3，8-二氮雜二環(huán)3.2.1辛烷-8-甲酸(l，l-二曱基乙基)酯向攪拌的13-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-10-曱酰胺.6-甲酸(300mg，0.56mmo1)、3，8-二氮雜二環(huán)實施例2[3.2.1]辛烷-8-曱酸叔丁酯(150mg，0.71mmol)和三乙胺(0.25mL)于DMF(2.5mL)中的溶液中加入HATU(2-(7-氮雜-lH-苯并三唑-l-基)-l，l,3，3-四曱基銀六氟磷酸鹽)(250mg,0.66mmo1)。將反應混合物在室溫攪拌1小時，用H20(約10mL)稀釋，用濃度為1M的HC1(水溶液)(約0.5mL)酸化，過濾收集沉淀物并用H20沖洗。將固體溶解在MeOH/DMF(l:l)中，通過制備性HPLC(CH3CN/H20(含有10mMNH4OAc))進行純化，得到3-[[13-環(huán)己基-10-[[[(二曱基氨基)磺酰基]氨基]羰基]-3-曱氧基-7H-吲哚并[2，l-a][2]苯并氮雜蕈_6-基]羰基]-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛烷-8-曱酸(1，1-二曱基乙基)酉旨(130mg,0.18mmol，32%),其為黃色固體。'H畫R(300MHz，CDC13)58'85(寬單峰，1H),8.08(s,1H),7.85(d,J=8.4Hz,1H),7.47(d,J=8.4Hz,1H)，7.44(d,J=8.8Hz，1H)，7.03(dd,J=2.6，8.8Hz,1H),6.86(d，J=2.6Hz，1H),6.75(s，IH)，5,25-5.00(m,1H),4,49腳4.01(m,3H),3.88(s,3H),3.35畫2.90(m，2H),3'03(s，6H)，2,86-2.72(m，1H)，2.12-1.12(m,顧)，1.41(s,9H)。LCMS:m/e730(M-H)-,保留時間為3.41分鐘，柱A，4分鐘梯度。13-環(huán)己基-6-(3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1辛-3-基羰基)-N-(二曱基氨基)磺?；?3-曱氧基-7H-吲哚并[2，l-a[2I苯并氮雜萆-10-曱酰胺向3-[[13-環(huán)己基-10-[[[(二曱基氨基)磺?；鵠氨基]羰基]-3-甲氧基-7H-吲哚并[2，"][2]苯并氮雜萆-6-基]羰基]-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛烷-8-曱酸(1,1-二曱基乙基)酯(103mg,0.14醒ol)于CH2Cl2(2mL)中的溶液中加入三氟乙酸(2mL)。將反應混合物在室溫攪拌2小時，濃縮，溶解在MeOH(2mL)中，并通過制備性HPLC(CH3CN/H20(含有10mMNH40Ac))進行純化，得到13-環(huán)己基-6-(3,8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基羰基)-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-10-曱酰胺(77mg，0.12mmo1，87%)，其為淺黃色固體。'HNMR(300MHz，d6-DMSO)58.24(s，1H),7.78(d，J=8.4Hz,實施例31H),7.67(d,J=8.4Hz，IH)，7.50(d，J=8.4Hz，IH)，7.22-7.14(m，2H)，6.95(s，IH),5.19-4.95(m，IH),4.42-4.20(m，IH),3.87(s,3H)，3.82畫2.98(m，7H),2.82畫2.68(m:lH)，2.75(s,6H),2.14隱0.93(m,14H),1.41(s,9H)。LCMS:m/e630(M-H)、保留時間2.54分鐘，柱A，4分鐘梯度。實施例4<formula>formulaseeoriginaldocumentpage45</formula>13-環(huán)己基-]\-[(二曱基氨基)磺?；?6，7-二氫-3-曱氧基-6-[(3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1j辛-8-基)羰基-5H-吲哚并[2，l-a[2苯并氮雜萆-10-曱酰胺將10。/o釔/炭(47mg，0.05mmol)加到13-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基-6-[(3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基]-7H-吲哚并[2，l-a][2]苯并氮雜蕈-10-曱酰胺(52mg，0.086mmoI)于MeOH(3mL)中的溶液中，反應混合物用氮氣(3x)真空沖洗，然后用氫氣(4x)沖洗。將反應混合物在氫氣氣嚢下攪拌過夜。反應混合物用CH2Cl2(lmL)稀釋，加入額外的10%4巴/炭(30mg,0.03mmo1)，反應混合物用氮氣(3x)真空沖洗，然后用氫氣(4x)沖洗。將反應混合物在氫氣氣嚢下攪拌2天，過濾通過硅藻土墊并濃縮。將殘余物溶解在MeOH中，通過制備性HPLC(CH3CN/H20(含有10mMNEUOAc))純化，得到13-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-6，7-二氫-3-曱氧基-6-[(3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基]-5&吲哚并[2，1-3][2]苯并氮雜萆-10-曱酰胺(17mg，0.026mmo1，40。/0)，其為黃色固體。阻轉非對映異構體(atropediastereomer)的混合物。'H畫R(300MHz，CDC13)58.16-7.77(m,2H),7.51-7.41(m，1H),7,37-7.27(m,1H),7.07-6.74(m,2H)，4.77-4.05(m，3H),3.91-3.81(m,3H)，3.77-3.17(m,1H),3.07-2.99(m，6H),2.95-1.09(m，25H)。LCMS:m/e648(M-H)、保留時間2.93分鐘，柱A，4分鐘梯度。實施例513-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基-6-(8-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1辛-3-基)羰基-711-吲哚并[2，1-3[2苯并氮雜蕈-10-曱酰胺在室溫向攪拌的13-環(huán)己基-6-(3,8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基羰基)-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-10-曱酰胺(44mg,0.070mmol)于MeOH/CH2Cl2(1:1,4mL)中的溶液中加入NaCNBH3(氰基硼氫化鈉)(30mg0.48mmo1)，然后加入曱醛(37wt。/o的H20溶液，0.10mL，3.6mmo1)。將反應混合物攪拌30分鐘，然后濃縮至干。將殘余物溶解在MeOH中，通過制備性HPLC(CH3CN/H20(含有10mMNH4OAc))進行純化，得到13-環(huán)己基-N-[(二曱基氨基)磺?；鵠-3-曱氧基-6-[(8-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-3-基)羰基]-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-10-曱酰胺(31mg,0.047mmol，68%)，其為黃色固體。HNMR(300MHz，CDC13)58.11(s,1H)，7.79(d,J=8.4Hz,1H),7.66-7.60(m，2H),7.52(d，J=8.8Hz，1H),7.11(dd，J=2.6,8.8Hz,1H),7,00(d，J=2.6Hz,IH)，6.87(s，1H),5,23-5.04(m,IH)，4.48-4.26(m,1H),3.92(s,3H),3.38陽2.77(m,7H)，3.03(s,6H),2.25(寬單峰，3H)，2.16-1.15(m,14H)。LCMS:m/e644(M-H)、保留時間2.69分鐘，柱A,4分鐘梯度。實施例6<formula>formulaseeoriginaldocumentpage46</formula>13-環(huán)己基-3-曱氧基-6-((3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，l-a[2]苯并氮雜蕈-lO-曱酸叔丁酯將HATU(680mg,1.8匪ol)加到攪拌的10-(叔丁氧基羰基)-13-環(huán)己基-3隱曱氧基-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜萆-6-曱酸(670mg,1.37mmol)和3-甲基-3,8-二氮雜二環(huán)[3.2,l]辛烷二鹽酸鹽(560mg,2.81mmol)于DMF(6mL)和TEA(1.2mL,8.2mmol)中的溶液中，將反應混合物攪拌30分鐘(通過LCMS確定完成)。反應混合物用水(約35mL)稀釋(形成沉淀物)并攪拌過夜。過濾收集沉淀物，用水沖洗，在55。C高真空干燥，得到13-環(huán)己基-3-曱氧基-6-((3-曱基-3,8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，l-a][2]苯并氮雜萆-10-曱酸叔丁酯(775mg,1.30mmol,95。/。收率)，其為淺黃色固體。該物質不經進一步純化即使用。'HNMR(300匿z，CDC13)Sppm1.14-3.95(m,24H),1.59(s，9H)，3.86(s,3H),4.21-5.26(m，2H)，6.82(s,1H),6.88(d，J=2.6Hz,1H),7.01(dd，J=8.8,2.6Hz，1H),7.47(d,J=8.8Hz,1H)，7.66(dd,J=8.4,UHz,1H)，7.80(d,J=8.4Hz，1H),8.02(寬單峰，1H)。LC-MS:保留時間為3.72分鐘；m/z596(MH+)。在ShimadzuLC-10AS液相色譜上記錄LC數(shù)據(jù)，所述色譜配備有Phenomenex-Luna1OpC183.0x50mm柱，使用檢測器波長為220nm的SPD-10AVUV-Vis檢測器。使用如下洗脫條件流速為5毫升/分鐘，梯度為100%溶劑A/0。/。溶劑B至0%溶劑A/100。/。溶劑B,梯度時間為4分鐘，保持時間為l分鐘，以及分析時間為5分鐘，其中溶劑A為100/。MeOH/90。/。H2O/0.1。/。三氟乙酸，溶劑B為10。/oH20/90。/。MeOH/0.1。/o三氟乙酸。使用MicromassPlatform用于LC以電噴霧才莫式確定MS數(shù)據(jù)。實施例713-環(huán)己基-3-甲氧基-6-((3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，l-a[2苯并氮雜蕈-lO-曱酸三氟乙酸鹽將13-環(huán)己基-3-曱氧基-6-((3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基)-7H-吲咮并[2,l-a][2]苯并氮雜蕈-10-曱酸叔丁酯(300mg,0.504mmol)溶解在DCE(SmL)中，然后加入TFAC700|al,義(^mmol)(反應混合物變?yōu)榫G色)，將反應混合物在室溫攪拌1小時(通過LCMS確定約70%轉化)。加入更多的TFA(70(Hil，9.09mmol)并將反應混合物攪拌1小時(通過LCMS確定完成)。將反應混合物在旋轉蒸發(fā)儀上濃縮，用乙醚稀釋并再次濃縮，如此重復兩次，得到13-環(huán)己基-3-曱氧基-6-((3-曱基-3,8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜蕈-10-曱酸三氟乙酸鹽(362mg，0.55mmo1,定量)，其為深黃色固體。該物質不經進一步純化即使用。&NMR(300MHz,DMSO-d6)5ppm1.06-2.13(m,21H)，2.68-2.86(m，1H),3.36-3.50(m,2H)，3.90(s,3H),4.11陽5.35(m,2H),7.14(s，IH)，7.18-7.28(m，2H)，7.53(d，J=8.4Hz,1H),7,61(dd,J=8.4,1.1Hz,1H),7.87(d，J=8.4Hz，1H),8.21(寬單峰,IH)，9,55(寬單峰，1H)。LC-MS:保留時間為3.72分鐘；m/z596(MH+)。LC-MS:保留時間為2.50分鐘；538m/z(MH-)。在ShimadzuLC-10AS液相色譜上記錄LC數(shù)據(jù)，所述色譜配備有Phenomenex-Luna10pC184.6x50mm柱，使用檢測器波長為220nm的SPD-10AVUV-Vis檢測器。使用如下洗脫條件流速為5毫升/分鐘，梯度為100%溶劑A/0。/。溶劑B至0%溶劑A/100。/。溶劑B,梯度時間為4分鐘，保持時間為l分鐘，以及分析時間為5分鐘，其中溶劑A為5。/o乙腈/95。/。H2O/10mM乙酸銨，溶劑B為5。/oH2O/95。/。乙腈/10mM乙酸銨。使用MicromassPlatform用于LC以電噴霧模式確定MS數(shù)據(jù)。13-環(huán)己基-N-(異丙基磺?；?-3-甲氧基-6-((3-曱基-3,8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，l-a[2I苯并氮雜萆-10-曱酰胺將CDI(80mg,0.49mmol)加到13-環(huán)己基-3-曱氧基-6-((3-曱基-3,8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8-基)羰基)-7H-吲哚并[2，l-a][2]苯并氮雜蕈-10-曱酸叔丁酯三氟乙酸鹽(200mg,0.30mmol)于THF(1.5mL)中的溶液中，將反應混合物在60。C攪拌2小時。將反應混合物冷卻至室溫，然后將反應溶液的1/3(約0.55mL)力口到攪拌的丙-2-磺酰胺(40mg，0.33mmol)于DBU(0.20mL，1.3mmo1)和THF(0.20mL)中的溶液中。將反應混合物在室溫攪拌過夜(通過LCMS確定完成)，濃縮成油狀物，用1NHC1溶液(約lmL)淬滅(形成沉淀物)，并用EtOAc(2xlmL)萃取。將合并的有機物濃縮至干，溶解在MeOH(1.5mL)中，并通過制備性HPLC(CH3CN/H20(含有10mMNH40Ac))進行純化，得到13-環(huán)己基-^(異丙基磺酰基)-3-曱氧基-6-((3-曱基-3，8-二氮雜二環(huán)[3.2.1]辛-8_基)羰基)-7H-吲哚并[2,l-a][2]苯并氮雜革-10-曱酰胺(28.5mg,0.044mmo1,43%收率)，其為黃色固體。'HNMR(300MHz,CD3OD)Sppm1.13-2.77(m，實施例828H)，2.80-2.93(m，1H),3.93(s，3H),3.90-4.02(m,1H)，4.27-4.65(m,2H),5.11-5.31(m,1H),7.04(s，1H),7.11(d,J=2.6Hz，1H),7.16(dd，J=8.4，2.6Hz,1H),7.56(d,J=8.4Hz,1H),7.67(dd，J=8.4,1.5Hz,1H),7.88(d，J=8.4Hz,1H)，8.18(寬單峰，1H)。LC-MS:保留時間為2.55分鐘；m/z643(MH-)。在ShimadzuLC-10AS液相色譜上記錄LC數(shù)據(jù)，所述色譜配備有Phenomenex-Luna10pC184.6x50mm柱，使用沖企測器波長為220nm的SPD-10AVUV-Vis才企測器。使用如下洗脫條件流速為5毫升/分鐘，梯度為100%溶劑A/0。/。溶劑B至0%溶劑A/100。/。溶劑B,梯度時間為4分鐘，保持時間為l分鐘，以及分析時間為5分鐘，其中溶劑A為5。/o乙腈/95。/。H20/10mM乙酸銨，溶劑B為5%H20/95°/。乙腈/10mM乙酸銨。使用MicromassPlatform用于LC以電噴霧模式確定MS數(shù)據(jù)。權利要求1.式I化合物或其可藥用鹽其中R1為-CO2R5或-CONR6R7；R2為id="icf0002"file="A2008800080650002C2.tif"wi="59"he="11"top="98"left="42"img-content="drawing"img-format="tif"orientation="portrait"inline="yes"/>R3為氫、鹵素、烷基、烯基、羥基、芐基氧基、烷氧基或鹵代烷氧基；R4為環(huán)烷基；R5為氫或烷基；R6為氫、烷基、烷基SO2-、環(huán)烷基SO2-、鹵代烷基SO2-、(R9)2NSO2-或(R10)SO2-；R7為氫或烷基；R8為氫、烷基、環(huán)烷基、(環(huán)烷基)烷基、烷基羰基、烷氧基羰基、芐基、芐基氧基羰基或吡啶基；R9為氫或烷基；R10為氮雜環(huán)丁烷基、吡咯烷基、哌啶基、N-(R11)哌嗪基、嗎啉基、硫嗎啉基、高哌啶基或高嗎啉基；R11為氫或烷基；以及虛線表示單鍵或雙鍵。2.權利要求l的化合物，其中R'為-CONR611、P^為烷基S02-、環(huán)烷基SOr、卣代烷基SOr、(R9)2NSO2-或(R'0)SO2-;以及R為氫。3.權利要求1的化合物，其中R為氫。4.權利要求1的化合物，其中R為曱氧基。5.權利要求1的化合物，其中W為環(huán)己基。6.權利要求1的化合物，其中R6為(R9)2NS02-或(R")S02-。7.權利要求l的化合物，其中虛線表示單鍵。8.權利要求l的化合物，其中虛線表示雙鍵。9.權利要求l的化合物，其選自如下化合物或其可藥用鹽:10.—種組合物，其包含權利要求1的化合物或其可藥用鹽和可藥用載體。11.權利要求10的組合物，其還包含至少一種額外的對HCV具有治療益處的化合物，其中所述化合物選自干擾素、環(huán)孢菌素、白細胞介素、HCV金屬蛋白酶抑制劑、HCV絲氨酸蛋白酶抑制劑、HCV聚合酶抑制劑、HCV解螺旋酶抑制劑、HCVNS4B蛋白抑制劑、HCV進入抑制劑、HCV組裝抑制劑、HCV釋放抑制劑、HCVNS5A蛋白抑制劑、HCVNS5B蛋白抑制劑和HCV復制子抑制劑。12.—種治療丙型肝炎感染的方法，所述方法包括向患者給藥治療有效量的權利要求1的化合物。13.權利要求12的方法，其還包括給藥至少一種額外的對HCV具有治療益處的化合物，其中所述化合物選自干擾素、環(huán)孢菌素、白細胞介素、HCV金屬蛋白酶抑制劑、HCV絲氨酸蛋白酶抑制劑、HCV聚合酶抑制劑、HCV解螺旋酶抑制劑、HCVNS4B蛋白抑制劑、HCV進入抑制劑、HCV組裝抑制劑、HCV釋放抑制劑、HCVNS5A蛋白抑制劑、HCVNS5B蛋白抑制劑和HCV復制子抑制劑。全文摘要本發(fā)明披露了式I化合物及使用所述化合物的組合物和使用所述化合物的方法。所述化合物具有抗丙型肝炎病毒(HCV)的活性，并可用于治療被HCV感染的那些患者。文檔編號C07D487/08GK101631790SQ200880008065公開日2010年1月20日申請日期2008年1月10日優(yōu)先權日2007年1月11日發(fā)明者敏丁,約翰·A·本德,羅伯特·G·金特爾斯申請人:百時美施貴寶公司