，調(diào)控二氧化碳流量為20L/h，萃取壓力為20MPa，萃取溫度為65°C，萃取時(shí)間 為2h，減壓分離制得到雞血藤提取液，保留雞血藤殘?jiān)?53 :稱取五味子、丹參、山楂、紅花、黃連、麥冬、枸杞子、肉桂和知母，加入所述雞血藤殘 渣，加入粗粉總量5倍重量的蒸餾水浸泡6小時(shí)，煮沸4小時(shí)，過濾，得到濾液和濾渣，往濾 渣中加入初始藥材3倍重量的純化水，煮沸1小時(shí)，過濾得到濾液并保存濾渣，合并兩次濾 液，濃縮，得到在65°C檢測(cè)相對(duì)密度為1. 20的浸膏A，備用； S4:往S3的濾渣中加入6倍重量的濃度75%的乙醇，回流提取2次，每次4小時(shí)，過濾， 合并濾液，減壓蒸餾除去乙醇并濃縮，得到65°C相對(duì)密度為1. 20的浸膏B，備用； S5:合并浸膏A、浸膏B和雞血藤提取物，加入用于制備膠囊制劑的輔料，裝入膠囊殼 中，即得本發(fā)明實(shí)施例3中藥組合物的膠囊劑。
[0028] 本發(fā)明涉及的中藥組合物對(duì)糖尿病腎病大鼠模型的治療作用 1、制備模型 選擇健康雄性成年SD大鼠50只，體重0. 3kg-0. 4kg，用高脂飼料喂養(yǎng)，不限攝水。將 大鼠進(jìn)行單側(cè)腎臟結(jié)扎手術(shù)后用鏈脲佐菌素注射腹腔。手術(shù)前大鼠禁食12h，注射戊巴比妥 鈉溶液進(jìn)行麻醉，確認(rèn)麻醉后，將大鼠沿腎蒂結(jié)扎腎臟動(dòng)靜脈及輸尿管。術(shù)后2周時(shí)，各組 大鼠禁食18h，然后一次性腹腔注射2 %鏈脲佐菌素溶液0. 45g/kg，具體給藥體積為5. 5ml/ kg，注射后大鼠自由攝食攝水。造模完成72h后，經(jīng)尾靜脈采血測(cè)血糖。造模成功標(biāo)準(zhǔn)：① 空腹血糖彡16. 65mmol/L ;②尿糖強(qiáng)陽性；③尿量大于對(duì)照組的50%，即造模成功。
[0029] 2、實(shí)驗(yàn)分組及給藥 造模結(jié)束后，將50只大鼠隨機(jī)分為5組，每組10只，分別為模型組、吡咯列酮組、中藥 A組、中藥B組和中藥C組。各組分別給予下述治療藥物： 模型組：灌胃等體積的蒸餾水； 吡咯列酮組：灌胃吡咯列酮〇. 25g/kg*d ; 中藥A組：灌胃本發(fā)明實(shí)施例1制備的中藥組合物膠囊劑0. 25 g/kg*d ; 中藥B組：灌胃本發(fā)明實(shí)施例2制備的中藥組合物膠囊劑0. 25 g/kg*d ; 中藥C組：灌胃本發(fā)明實(shí)施例3制備的中藥組合物膠囊劑0. 25 g/kg*d。
[0030] 上述各組每天灌胃給藥一次，連續(xù)8周，正常飼養(yǎng)。采血測(cè)定空腹血糖以及尿微量 白蛋白。
[0031] 3、指標(biāo)測(cè)定 (1)血糖的測(cè)定：所有大鼠分別于給藥前和給藥8周后取尾靜脈血檢測(cè)空腹血糖，將取 出的血樣放入蛋白沉淀劑中，室溫放置5min后，離心10min(3000r/min)，取上清液，用葡萄 糖氧化酶法測(cè)定血糖值。
[0032] (2)尿中微量白蛋白的測(cè)定：將給藥8周后大鼠分別放于代謝籠中飼養(yǎng)，收集隔夜 12小時(shí)尿，準(zhǔn)確記錄尿量。取5ml，疊氮鈉處理后，離心（2000r/min)9min，取上清液置于一 20°C冰箱中保存待測(cè)尿白蛋白。取相應(yīng)濃度的白蛋白標(biāo)準(zhǔn)液400ml加入上清液中，分別加 入200ml 0. 231mmol/L溴酸藍(lán)顯色劑，混勾，用紫外分光光度計(jì)，于600nm波長(zhǎng)下測(cè)定0D 值。
[0033] 4、實(shí)驗(yàn)結(jié)果與討論 表1本發(fā)明涉及的中藥組合物對(duì)糖尿病腎病大鼠空腹血糖的影響
注：與模型組比較，*p < 〇? 05, ** P < 0? 01 ; 由表1可知，中藥A和B組給藥后大鼠的血糖值明顯降低，與模型組相比，有顯著性的 差異（P < 0. 01)，其中，中藥B組的血糖變化值最大；中藥A、B、C組的血糖值優(yōu)于吡咯列 酮組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異；可見，本發(fā)明涉及的中藥組合物可以顯著降低糖尿病腎病大鼠的血 糖，本發(fā)明涉及的中藥組合物可用于治療糖尿病腎病。
[0034] 表2本發(fā)明涉及的中藥組合物對(duì)糖尿病腎病大鼠尿微量白蛋白的影響
注：與模型組比較，*p < 〇? 05, ** P < 0? 01。
[0035] 由表3可知，與模型組相比，吡咯列酮組和中藥A、B、C組的尿微量白蛋白含量均有 顯著性差異（P< 〇.〇1)?？梢?，本發(fā)明中藥組合物在治療糖尿病腎病大鼠尿微量白蛋白方 面有很好的協(xié)同作用，其治療效果優(yōu)于吡咯列酮組，但無統(tǒng)計(jì)學(xué)差異，這表明本發(fā)明涉及的 中藥組合物在延緩糖尿病腎病病情發(fā)展方面具有突出的治療優(yōu)勢(shì)。
[0036] 本發(fā)明涉及的中藥組合物對(duì)糖尿病腎病臨床患者志愿者的療效觀察 一、診斷標(biāo)準(zhǔn) 中醫(yī)診斷標(biāo)準(zhǔn)：尿中有泡沫，乏力，惡心嘔吐，面色萎黃或晦暗，身重浮腫，腰膝酸軟及 腹脹，夜尿頻多，健忘，失眠，頭暈耳鳴，手足心熱，舌質(zhì)紫暗或舌淡或瘀斑，舌苔厚膩，脈沉 細(xì)或澀；辨證為脾腎虛弱、肺失通調(diào)、水瘀互結(jié)、水濁不分。
[0037] 二、臨床療效評(píng)價(jià)標(biāo)準(zhǔn) 顯效：臨床癥狀改善明顯，腰膝酸軟、疲乏無力、口干咽燥、夜尿頻多等消失或基本消 失，血糖水平波動(dòng)在正常范圍內(nèi)，血壓彡128/80mmHg，24h尿蛋白< 30mg，血尿素氮及肌酐 均降至正常水平； 有效：臨床癥狀減輕，腰膝酸軟、疲乏無力、口干咽燥、夜尿頻多等得到明顯改善，空腹 血糖控制理想，血壓波動(dòng)在140/90mmHg左右，24h尿蛋白和血尿素氮肌酐均有下降，但未完 全好轉(zhuǎn)； 無效：臨床癥狀改善不明顯，血壓及血糖無下降或有下降但不理想，24h尿蛋白定量 及血尿素氮肌酐均未下降，或下降未達(dá)到有效標(biāo)準(zhǔn)。
[0038] 三、臨床試驗(yàn) 1、一般資料 將所有入選糖尿病腎病臨床志愿者患者隨機(jī)分成3組，治療A組60例，治療B組60例， 治療C組60例，對(duì)照組60例。年齡為45歲-60歲，4組年齡、性別、癥狀等影響因素，經(jīng)統(tǒng) 計(jì)學(xué)處理，無顯著性差異，符合分組條件。
[0039] 2、治療方法 治療A組：服用實(shí)施例1制備得到的膠囊，每日3次，每次3粒，連服1個(gè)月； 治療B組：服用實(shí)施例2制備得到的膠囊，每日3次，每次3粒，連服1個(gè)月； 治療C組：服用實(shí)施例3制備得到的膠囊，每日3次，每次3粒，連服1個(gè)月； 對(duì)照組：服用糖脈康顆粒（國(guó)藥準(zhǔn)字Z10970026, 5g*10袋/盒)，一次1袋，一日3次，連 服1個(gè)月。
[0040] 3、治療結(jié)果，如表3所示。
[0041] 表3治療效果
本試驗(yàn)采用糖脈康顆粒作為對(duì)照組，糖脈康顆粒有養(yǎng)陰清熱，活血化瘀，益氣固腎，降 血糖的作用，可用于治療糖尿病II型及并發(fā)癥等患者，通過與本發(fā)明涉及的中藥組合物治 療效果進(jìn)行比較，體現(xiàn)本發(fā)明涉及的中藥組合物在治療尿病腎病方面的療效，治療A組、治 療B組和治療C組的顯效率均大于80%，總有效率均大于89%，優(yōu)于對(duì)照組的顯效率和總有 效率?？梢?，本發(fā)明涉及的藥物組合物療效好，顯效率高，可以作為治療糖尿病腎病的藥物 使用。
[0042] 由于已經(jīng)通過以上較佳實(shí)施例描述了本發(fā)明，在本發(fā)明的精神和/或范圍內(nèi)，任 何針對(duì)本發(fā)明的替換/或組合來實(shí)施本發(fā)明，對(duì)于本領(lǐng)域的技術(shù)人員來說都是顯而易見 的，且包含在本發(fā)明之中。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種中藥組合物用于制備治療糖尿病腎病藥物中的用途，其特征在于，所述中藥組 合物包括以下重量份數(shù)的制備原料：雞血藤9-15份、五味子8-12份、丹參10-15份、山楂 3-10份、紅花3-10份、黃連3-10份、麥冬6-12份、枸杞子6-15份、肉桂3-10份和知母6-12 份。2. 如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述中藥組合物包括以下重量份數(shù)的制備 原料：雞血藤9份、五味子8份、丹參10份、山楂3份、紅花3份、黃連9份、麥冬6份、枸杞 子6份、肉桂3份和知母6份。3. 如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述中藥組合物包括以下重量份數(shù)的制備 原料：雞血藤15份、五味子12份、丹參15份、山楂3份、紅花3份、黃連10份、麥冬12份、 枸杞子15份、肉桂10份和知母12份。4. 如權(quán)利要求1所述的用途，其特征在于，所述中藥組合物包括以下重量份數(shù)的制備 原料：雞血藤12份、五味子14份、丹參12份、山楂6份、紅花6份、黃連6份、麥冬8份、枸 杞子10份、肉桂6份和知母8份。5. 如權(quán)利要求1-4任一所述的用途，其特征在于，所述中藥組合物被制成膠囊劑、片 劑、散劑、顆粒劑或丸劑。6. 如權(quán)利要求1-4任一項(xiàng)所述的用途，其特征在于，所述中藥組合物的制備方法包含 下述步驟： SI:分別稱取各味藥材，洗去雜質(zhì)，干燥后分別粉碎，過70-90目篩，備用； 52 :稱取雞血藤粗粉，置于超臨界二氧化碳萃取裝置中，加入粗粉重量的35-45%體積 分?jǐn)?shù)為60-90%的乙醇，調(diào)控二氧化碳流量為15-20L/h，萃取壓力為15-20MPa，萃取溫度為 45 65°C，萃取時(shí)間為I. 5-2h，減壓分離制得到雞血藤提取液，保留雞血藤殘?jiān)? 53 :稱取五味子、丹參、山楂、紅花、黃連、麥冬、枸杞子、肉桂和知母，加入所述雞血藤殘 渣，加入藥材總量2-7倍重量的蒸餾水浸泡3-7小時(shí)，煮沸2-5小時(shí)，過濾，得到濾液和濾 渣，往濾渣中加入初始藥材1-3倍重量的純化水，煮沸1-2小時(shí)，過濾得到濾液并保存濾渣， 合并兩次濾液，濃縮，得到在65°C檢測(cè)相對(duì)密度為1. 20-1. 25的浸膏A，備用； S4:往S3的濾渣中加入5-7倍重量的濃度65-75%的乙醇，回流提取2次，每次2-5小 時(shí)，過濾，合并濾液，減壓蒸餾除去乙醇并濃縮，得到65°C相對(duì)密度為1. 20-1. 25的浸膏B， 備用； S5:合并所述浸膏A、所述浸膏B和所述雞血藤提取液，添加輔料，利用現(xiàn)代通用的中藥 制劑技術(shù)制成臨床需要的成品制劑。
【專利摘要】本發(fā)明屬于中藥技術(shù)領(lǐng)域，涉及一種中藥組合物用于制備治療糖尿病腎病藥物中的用途。所述中藥組合物包括以下重量份數(shù)的制備原料：雞血藤9-15份、五味子8-12份、丹參10-15份、山楂3-10份、紅花3-10份、黃連3-10份、麥冬6-12份、枸杞子6-15份、肉桂3-10份和知母6-12份。本發(fā)明涉及的中藥組合物的組方合理，協(xié)同作用強(qiáng)，對(duì)糖尿病腎病具有非常顯著的效果。
【IPC分類】A61P3/10, A61P13/12, A61K36/8968
【公開號(hào)】CN105213777
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201510754245
【發(fā)明人】鄧?guó)P桂
【申請(qǐng)人】廣東聚智誠(chéng)科技有限公司
【公開日】2016年1月6日
【申請(qǐng)日】2015年11月9日