專利名稱：：一種干擾素脂質(zhì)體注射液的制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及生物醫(yī)藥領(lǐng)域，具體的涉及一種干擾素脂質(zhì)體注射液的制備方法。
背景技術(shù)：
：脂質(zhì)體最初是在20世紀(jì)60年代由英國學(xué)者Bangham和Standish將磷脂分散在水中進(jìn)行電鏡觀察時(shí)發(fā)現(xiàn)的。磷脂分散在水中自然形成多層囊泡，每層均為脂質(zhì)的雙分子層；囊泡中央和各層之間被水相隔開，雙分子層厚度約為4納米。后來，將這種具有類似生物膜結(jié)構(gòu)的雙分子小囊稱為脂質(zhì)體。1971年英國萊門等人開始將脂質(zhì)體用于藥物載體。脂質(zhì)體是一種定向藥物載體，屬于靶向給藥系統(tǒng)的一種新劑型。它可以將藥物粉末或溶液包埋在直徑為納米級(jí)的微粒中，這種微粒具有類細(xì)胞結(jié)構(gòu)，進(jìn)入人體內(nèi)主要被網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)吞噬而激活機(jī)體的自身免疫功能，并改變被包封藥物的體內(nèi)分布，使藥物主要在肝、脾、肺和骨髓等組織器官中積蓄，從而提高藥物的治療指數(shù)，減少藥物的治療劑量和降低藥物的毒性。干擾素是一組具有多種功能的活性蛋白質(zhì)(主要是糖蛋白)，是一種由單核細(xì)胞和淋巴細(xì)胞產(chǎn)生的細(xì)胞因子。它們?cè)谕N細(xì)胞上具有廣譜的抗病毒、影響細(xì)胞生長和分化、調(diào)節(jié)免疫功能等多種生物活性。干擾素的分類根據(jù)干擾素蛋白質(zhì)的氨基酸結(jié)構(gòu)、抗原性和細(xì)胞來源，可將其分為IFN-a、IFN-卩、目前上巿的干擾素制劑主要是重組人a干擾素，制劑形式主要是注射液與凍干粉針。脂質(zhì)體作為一種藥物載體形式，非常適合于生物活性蛋白質(zhì)類藥物的活性保持。自上世紀(jì)六十年代，發(fā)現(xiàn)脂質(zhì)體以來，脂質(zhì)體的研究已歷時(shí)近半個(gè)世紀(jì)的發(fā)展歷程。其作為藥物傳遞載體等多方面應(yīng)用的優(yōu)勢(shì)已被人們所認(rèn)同。然而在過去的40年中，盡管人們對(duì)脂質(zhì)體的研發(fā)投入了大量人力和物力，但目前已產(chǎn)業(yè)化上巿的脂質(zhì)體藥物只有4種，而且成功上巿的脂質(zhì)體多是藥物本身與脂質(zhì)體的膜材磷脂具有較強(qiáng)的相互作用的特殊性藥物，不具有通用性。多數(shù)藥物脂質(zhì)體不能產(chǎn)業(yè)化上巿的原因主要有藥物的包封率較低。脂質(zhì)體制備工藝的難以實(shí)現(xiàn)產(chǎn)業(yè)化生產(chǎn)水平；特別是脂質(zhì)體的物理化學(xué)穩(wěn)定性差，長期貯存易于產(chǎn)生脂質(zhì)體粒子聚集、融合引起粒徑變化，導(dǎo)致被包封藥物的滲漏。
發(fā)明內(nèi)容(一)要解決的技術(shù)問趙本發(fā)明的目的是提供一種包封率高、穩(wěn)定性好的干擾素脂質(zhì)體注射液的制備方法。(二)技術(shù)方案本發(fā)明提供了一種干擾素脂質(zhì)體注射液的制備方法，它包括如下步驟(1)制備脂質(zhì)膜將注射用卵磷脂和維生素E溶于適量無水乙醇，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去溶劑，制成脂質(zhì)膜；(2)制備干擾素溶液將干擾素原液與保護(hù)劑溶液混合，制成干擾素溶液；(3)制備干擾素脂質(zhì)體將干擾素溶液加入制備好脂質(zhì)膜的容器中，水化；水化后的溶液經(jīng)高壓均質(zhì)，制成干擾素脂質(zhì)體溶液；再將干擾素脂質(zhì)體溶液過濾、分裝，得到干擾素脂質(zhì)體注射液成品。其中，所述步驟(1)中注射用卵磷脂和維生素E的配比按重量份計(jì)為99:1-9:1。優(yōu)選地，注射用卵磷脂和維生素E的配比按重量份計(jì)為19:1。所述步驟(2)中保護(hù)劑溶液由緩沖鹽溶液與膠原蛋白、羥乙基淀粉、明膠、琥珀酰明膠中的一種或幾種組成。保護(hù)劑溶液中的緩沖鹽溶液離子強(qiáng)度為20mM800mM，pH范圍為3.5~6.5;膠原蛋白濃度為0.5~15%(V/V)，羥乙基淀粉濃度為2-10%(V/V)，明膠濃度為2~15%(V/V)，琥珀酰明膠濃度為0.5—15%(V/V)。所得注射液中干擾素活性單位為100萬IU/ml~2000萬IU/tnl。(三)有益效果釆用本發(fā)明所述的方法步驟簡便，生產(chǎn)成本低，易于工業(yè)化生產(chǎn)。獲得干擾素脂質(zhì)體的包封率高，穩(wěn)定性好，產(chǎn)品中干擾素活性易于保持，便于貯藏和運(yùn)輸。采用本發(fā)明所述方法制成的干擾素脂質(zhì)體注射液包封率90%以上，粒徑均勻，在41C保存一年，包封率及粒徑分布無明顯變化，干擾素活性穩(wěn)定。具體實(shí)施例方式以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。實(shí)施例l干擾素脂質(zhì)體注射液的制備1、制備脂質(zhì)膜將注射用卵磷脂、維生素E，按照9:1比例混合，溶于適量無水乙醇，45'C減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去溶劑，制成脂質(zhì)膜。2、制備干擾素溶液配制pH為5.5，20mM磷酸鹽緩沖液，2%琥珀酰明膠溶液，與干擾素原液混合后制成干擾素溶液。3、制備干擾素脂質(zhì)體將干擾素溶液加入制備好脂質(zhì)膜的容器中，水化。水化后的溶液經(jīng)髙壓均質(zhì)，制成干擾素脂質(zhì)體。千擾素脂質(zhì)體溶液經(jīng)0.22um無菌濾膜過濾后分裝，得到干擾素脂質(zhì)體注射液成品。以上制備的樣品于4'C保存一年，包封率及活性變化見下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage5</column></row><table>實(shí)施例2干擾素脂質(zhì)體注射液的制備1、制備脂質(zhì)膜將注射用卵磷脂、維生素E，按照49:1比例混合，溶于適量無水乙醇，45匸減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去溶劑，制成脂質(zhì)膜。2、制備干擾素溶液配制pH為5.5,20mM磷酸鹽緩沖液，5%羥乙基淀粉溶液，與干擾素原液混合后制成干擾素溶液。3、制備干擾素脂質(zhì)體將干擾素溶液加入制備好脂質(zhì)膜的容器中，水化水化后的溶液經(jīng)高壓均質(zhì)，制成干擾素脂質(zhì)體。干擾素脂質(zhì)體溶液經(jīng)0.22咖無菌濾膜過濾后分裝，得到干擾素脂質(zhì)體注射液成品。以上制備的樣品于4'C保存一年，包封率及活性變化見下表:<table>tableseeoriginaldocumentpage6</column></row><table>本發(fā)明所述方法是利用薄膜分散法與高壓均質(zhì)法結(jié)合制備干擾素脂質(zhì)體注射液，形成的脂質(zhì)體粒徑均一，包封率高。干擾素分子被有效包封于脂質(zhì)體微粒中，維生素E與保護(hù)劑能防止脂質(zhì)體及干擾素的氧化與分解，有效避免藥物泄漏與活性降低，提高制劑的穩(wěn)定性。以上制備的兩個(gè)樣品于4'C保存一年，包封率及活性均保持穩(wěn)定，說明本發(fā)明所述方法制備的干擾素脂質(zhì)體注射液穩(wěn)定性良好。權(quán)利要求1、一種干擾素脂質(zhì)體注射液的制備方法，它包括如下步驟(1)制備脂質(zhì)膜將注射用卵磷脂和維生素E溶于適量無水乙醇，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)揮去溶劑，制成脂質(zhì)膜；(2)制備干擾素溶液將干擾素原液與保護(hù)劑溶液混合，制成干擾素溶液；(3)制備干擾素脂質(zhì)體將干擾素溶液加入制備好脂質(zhì)膜的容器中，水化；水化后的溶液經(jīng)高壓均質(zhì)，制成干擾素脂質(zhì)體溶液；再將干擾素脂質(zhì)體溶液過濾、分裝，得到干擾素脂質(zhì)體注射液成品。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中注射用卵磷脂和維生素E的配比按重量份計(jì)為99:1-9:1。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于所述步驟(1)中注射用卵磷脂和維生素E的配比按重量份計(jì)為19:1。4、根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于所述步驟(2)中保護(hù)劑溶液由緩沖鹽溶液與膠原蛋白、羥乙基淀粉、明膠、琥珀酰明膠中的一種或幾種組成。5、根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于所述步驟(2)保護(hù)劑溶液中的緩沖鹽溶液離子強(qiáng)度為20mM~800mM，pH范圍為3.5~6.5;膠原蛋白濃度為0.5~15%，羥乙基淀粉濃度為2~10%，明膠濃度為2~15%，琥珀酰明膠濃度為0.5~15%。全文摘要本發(fā)明提供了一種干擾素脂質(zhì)體注射液的制備方法。該方法包括如下步驟制備脂質(zhì)膜、制備干擾素溶液以及制備干擾素脂質(zhì)體。根據(jù)本發(fā)明所述方法生產(chǎn)的干擾素脂質(zhì)體注射液工藝簡單、包封率高、穩(wěn)定性好。文檔編號(hào)A61P31/12GK101590220SQ20081011370公開日2009年12月2日申請(qǐng)日期2008年5月29日優(yōu)先權(quán)日2008年5月29日發(fā)明者春吉,周德勝,張春麗申請(qǐng)人:北京凱因科技股份有限公司