專利名稱：Cci－779作為抗腫瘤劑的用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及利用3-羥基-2(羥甲基)-2-甲基丙酸的雷帕霉素42酯(CCI-779)作為抗腫瘤劑。
雷帕霉素是吸水鏈霉菌產(chǎn)生的一種大環(huán)三烯抗生素，已經(jīng)發(fā)現(xiàn)其在體內(nèi)和體外都具有抗真菌，尤其是抗白色念珠菌活性[C.Vezina etal.，J.Antibiot.28,721(1975)；S.N.Sehgal et al.，J.Antibiot.28,727(1975)；H.A.Baker et al.，J.Antibiot.31,539(1978)；美國(guó)專利3,929,992；和美國(guó)專利3,993,749]。此外，單獨(dú)的雷帕霉素(美國(guó)專利4,885,171)或其與溶鏈菌(美國(guó)專利4,401,653)組合具有抗腫瘤活性。
在FASEB 3,3411(1989)中公開了雷帕霉素具有免疫抑制效用。已經(jīng)證明，環(huán)孢菌素A和FK-506以及其他大環(huán)分子也可作為有效的免疫抑制劑，從而可有效防止移植排異發(fā)生[FASEB 3,3411(1989)；FASEB 3,5256(1989)；R.Y.Calne et al.，Lancet 1183(1978)；and U.S.Patent 5,100,899]。R.Martel et al.[Can.J.Physiol.Pharmacol.55，48(1977)]公開了雷帕霉素在實(shí)驗(yàn)性變應(yīng)性腦脊髓炎模型，即一種多發(fā)性硬化癥模型中；在輔助的關(guān)節(jié)炎模型，即類風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎模型中是有效的；并可有效抑制IgE樣抗體的形成。
雷帕霉素在預(yù)防或治療系統(tǒng)性紅斑狼瘡[美國(guó)專利5,078,999]、肺炎[美國(guó)專利5,080,899]、胰導(dǎo)素依賴型糖尿病[美國(guó)專利5,321,009]、皮膚病如鱗屑病[美國(guó)專利5,286,730]、腸道疾病[美國(guó)專利5,286,731]、平滑肌細(xì)胞增生及血管損傷后內(nèi)膜肥厚[美國(guó)專利5,288,711和5,516,781]、成人T細(xì)胞白血病/淋巴瘤[歐洲專利申請(qǐng)525,960 A1]、眼炎[美國(guó)專利5,387,589]、惡性癌[美國(guó)專利5,206,018]、心臟炎癥疾病[美國(guó)專利5,496,832]及貧血[美國(guó)專利5,561,138]方面也是有用的。
美國(guó)專利5,362,718公開了包括CCI-779在內(nèi)的雷帕霉素羥基酯的制備和應(yīng)用。
發(fā)明詳述本發(fā)明提供了將CCI-779作為抗腫瘤劑，其尤其適用于對(duì)于標(biāo)準(zhǔn)治療來(lái)講非常難治的腫瘤或?qū)τ谀切┎贿m于標(biāo)準(zhǔn)治療的患者。CCI-779在治療腎癌、軟組織癌、乳腺癌、肺的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、宮頸癌、子宮癌、頭和頸癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、胰腺癌、淋巴瘤、黑色素瘤、小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌方面尤其有用。
如本發(fā)明所用的術(shù)語(yǔ)“治療”指提供給患有腫瘤病的哺乳動(dòng)物以有效劑量的CCI-779，目的是抑制這些動(dòng)物體內(nèi)腫瘤的生長(zhǎng)、根除腫瘤或緩解腫瘤。
如本發(fā)明中所用的術(shù)語(yǔ)“提供”指提供CCI-779，指直接給藥以CCI-779或給藥以能夠在患者體內(nèi)形成有效劑量CCI-779的前體藥物、衍生物或類似物。
如本發(fā)明中所用術(shù)語(yǔ)“難治的腫瘤”指利用適于該給定腫瘤的標(biāo)準(zhǔn)化學(xué)治療之后患者體內(nèi)的腫瘤一般仍進(jìn)展。
美國(guó)專利5,362,718對(duì)CCI-779制劑有描述，因此此處引用作為參考。
在臨床前體外和體內(nèi)標(biāo)準(zhǔn)藥理學(xué)檢驗(yàn)程序以及兩個(gè)I期人臨床試驗(yàn)中對(duì)CCI-779的抗腫瘤活性進(jìn)行了確定，而此檢驗(yàn)程序測(cè)定了CCI-779對(duì)人腎細(xì)胞癌癥(一種進(jìn)展迅速的疾病，其治療選擇非常有限)的治療。應(yīng)用的方法及得到的結(jié)果簡(jiǎn)述如下。
臨床前檢驗(yàn)程序體外檢驗(yàn)程序從美國(guó)典型培養(yǎng)物保藏中心(ATCC)，Bethesda，MD.得到腎腫瘤細(xì)胞系HTB-44和CRL-1161。從Dr.J.Fidler，M.D.Anderson Hospital，Houston，TX處得到了SN12-C細(xì)胞系。將細(xì)胞置于添加有2mM谷氨酰胺、1mM丙酮酸鈉、5ml青霉素-鏈霉素溶液、1mM非必需氨基酸溶液、10％胎牛血清的MEM(Gibco)中。將細(xì)胞(5×103)鋪于96孔平板中，終體積為200ml，在37℃下孵育24小時(shí)。隨后向培養(yǎng)物中添加以100ug/ml起始的CCI-779對(duì)數(shù)稀釋液，孵育48小時(shí)。在最后的5個(gè)小時(shí)內(nèi)，利用1μci3H-胸苷(New England Nuclear，6.7ci/mM)對(duì)細(xì)胞進(jìn)行脈沖處理。隨后收獲細(xì)胞并利用液相閃爍分光光度計(jì)確定胸苷的攝取程度。IC50確定為產(chǎn)生對(duì)照未處理細(xì)胞中最大胸苷攝取的50％的濃度。
體內(nèi)檢測(cè)程序從Charles River Labs，Wilmington，DE，獲得6-8周齡的Balb/c nu/nu小鼠。對(duì)小鼠(n＝10/組)皮下注射重新懸浮在50％ Matrigel(BD Biosciences)溶液中的5×106個(gè)細(xì)胞并允許腫瘤生長(zhǎng)。當(dāng)腫瘤大小達(dá)100mg時(shí)，對(duì)小鼠口服給藥以25mg/kgCCI-779。在整個(gè)實(shí)驗(yàn)過(guò)程中，連續(xù)5天給予CCI-779，重復(fù)14天循環(huán)。用于CCI-779的制劑為50％乙醇、49％phosal、1％tween 80載體以用于重新懸浮CCI-779，其中在給藥前將貯存液重新懸浮到載體的1∶10稀釋液中。利用游標(biāo)卡尺對(duì)腫瘤生長(zhǎng)進(jìn)行評(píng)估并利用公式1×w2/2將體積(1×w×h)轉(zhuǎn)化為質(zhì)量。
結(jié)果在存在或不存在CCI-779的情況下培養(yǎng)人腎細(xì)胞腫瘤，為期3天，利用對(duì)照組相對(duì)于治療組細(xì)胞的3H-胸苷摻入來(lái)確定其對(duì)腫瘤生長(zhǎng)的影響。表1展示了所有3個(gè)檢測(cè)細(xì)胞系的IC50(50％生長(zhǎng)抑制濃度)處于低nM范圍內(nèi)。
表1 CCI-779對(duì)體外人腎腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響腎腫瘤細(xì)胞系 CCI-779 IC50(nM)HTB-44 5.0CRL-11612.0SN12-C 5.5通過(guò)向裸鼠的脅腹移植腫瘤細(xì)胞體內(nèi)評(píng)估了CCI-779在兩個(gè)人腎細(xì)胞系(HTB-44和CRL-1161)中的效用。一旦腫瘤大小達(dá)到約100mg，對(duì)小鼠進(jìn)行CCI-779或載體對(duì)照處理。利用25mg/kg CCI-779處理顯著抑制了小鼠體內(nèi)腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)(表2)。
表2 CCI-779對(duì)裸鼠異種移植物中的人腎腫瘤細(xì)胞生長(zhǎng)的影響腫瘤質(zhì)量(mg)天數(shù)細(xì)胞系 藥物處理 07 21 3549 55HTB-44 對(duì)照 288±21 219±18 616±551095±44 2033±247 2412±342CCT 290±15 156±13*252±48*453±85*980±155*1050±183*％T/C101 7141 4148 44CRL-1161對(duì)照 273±18 355±36 413±60480±127 546±170 507±156CCI 272±14 219±16*226±17*200±21*229±28*268±30％T/C100 6260 4242 53*p值-＜.05％T/C-處理的/對(duì)照×100
臨床試驗(yàn)進(jìn)行了兩個(gè)單試劑(CCI-779)I期臨床試驗(yàn)。在第一個(gè)研究中，每?jī)傻饺艹掷m(xù)5天每天進(jìn)行CCI-779 30min i.v.輸注。在第二個(gè)研究中，每周對(duì)CCI-779進(jìn)行30min i.v.輸注。這兩個(gè)試驗(yàn)都是開放標(biāo)記、逐漸增加劑量、單向、多中心研究。只要能夠耐受CCI-779并且疾病沒(méi)有明顯的進(jìn)展，就可對(duì)患者繼續(xù)進(jìn)行治療。應(yīng)用了下列合格標(biāo)準(zhǔn)入選標(biāo)準(zhǔn)1.進(jìn)行了晚期癌(實(shí)體瘤以及在第一個(gè)研究中為淋巴瘤)組織學(xué)診斷且標(biāo)準(zhǔn)治療難治或不適合進(jìn)行標(biāo)準(zhǔn)治療的患者。
2.可檢測(cè)或可進(jìn)行評(píng)估的疾病。
3.化學(xué)治療和放射治療結(jié)束后至少3周(自亞硝基脲或絲裂霉素C后6周)。
4.使用其他研究試劑結(jié)束后至少4周。
5.年齡至少為18歲。
6.適當(dāng)?shù)墓撬琛⒛I和肝臟功能。
7.血清膽固醇≤350mg/dL，甘油三酯≤300mg/dL.
8.ECOG表現(xiàn)狀況0-2。
9.預(yù)期壽命至少3個(gè)月。
10.簽字、注明日期、有目擊證人的書面同意。
總共有63位患者和24位患者分別參與了第一和第二次研究。劑量水平為0.75-24mg/m2和7.5-220mg/m2，分別進(jìn)行每2周中的5天每天一次給藥，和每周給藥的方案。
得到的結(jié)果總結(jié)如下在采用每周給藥方案的患有腎癌的患者中，觀察到1位患者具有部分反應(yīng)(腫瘤大小下降≥50％)，2位患者具有較小反應(yīng)(腫瘤大小下降≥25％但＜50％)。在采用每日給藥×5的方案的腎癌患者中，在持續(xù)約5個(gè)月的時(shí)間內(nèi)觀察到1位患者具有較小反應(yīng)、1位患者具有未確定的較小反應(yīng)以及1位患者具有穩(wěn)定的疾病(腫瘤大小增加＜25％-減少＜25％)。在采用每日給藥×5的方案的軟組織內(nèi)瘤患者中，在持續(xù)約5個(gè)半月的觀察中，一位患者具有可能的部分反應(yīng)，2位患者具有較小反應(yīng)，以及1位患者具有穩(wěn)定的疾病。在采用每周給藥方案的乳腺癌患者中觀察到1位患者具有部分反應(yīng)。在采用每周給藥方案的肺神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤患者中觀察到1位患者具有部分反應(yīng)。在采用每日給藥×5方案的宮頸癌患者中，觀察到1位患者具有較小反應(yīng)。在采用每日給藥×5方案的子宮癌患者中，觀察到1位患者具有未確定的較小反應(yīng)。在采用每日給藥×5方案的頭和頸癌患者中在約8個(gè)半月里觀察到1位患者具有穩(wěn)定的疾病。在采用每日給藥×5方案的非小細(xì)胞肺癌患者中觀察到1位患者具有部分反應(yīng)?？紤]到這些研究中的這些患者患有標(biāo)準(zhǔn)治療非常難治的晚期癌癥，也考慮到這些研究是效力常常有限的I期臨床試驗(yàn)，這些結(jié)果尤其令人吃驚，其中I期臨床試驗(yàn)效力有限是因?yàn)槠渲饕繕?biāo)是確定待評(píng)定的藥物的安全性和耐受性。
基于這些臨床前和臨床檢測(cè)程序的結(jié)果，CCI-779在治療腫瘤，尤其是難治腫瘤方面是有用的。更特別的，CCI-779在治療腎癌、軟組織癌、乳腺癌、肺的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、宮頸癌、子宮癌、頭和頸癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、胰腺癌、淋巴瘤、黑色素瘤、小細(xì)胞肺癌、卵巢癌、結(jié)腸癌方面是有用的。
由于一般是進(jìn)行化學(xué)治療，所以施治醫(yī)生在包括疾病的嚴(yán)重程度、患者對(duì)疾病的反應(yīng)、與治療相關(guān)的毒性、患者年齡以及健康等在內(nèi)的多種因素基礎(chǔ)上對(duì)劑量方法進(jìn)行緊密的監(jiān)視。在利用CCI-779獲得的治療結(jié)果基礎(chǔ)上，我們預(yù)測(cè)當(dāng)采用每日給藥方案時(shí)的起始靜脈輸注劑量為約0.1-100mg/m2，而當(dāng)采用每周給藥方案時(shí)為1-1000mg/m2。其他的劑量方案和變化都是可預(yù)測(cè)的，并且通過(guò)醫(yī)生的指導(dǎo)來(lái)確定。CCI-779優(yōu)選的以靜脈輸注和口服方式給藥，優(yōu)選以片劑或膠囊形式給藥。其他給藥途徑也是可行的，例如通過(guò)植入物、腸胃外給藥(除靜脈給藥外，如腹膜內(nèi)和皮下注射)、直腸給藥、鼻內(nèi)給藥、陰道內(nèi)給藥和經(jīng)皮給藥。
可按照給藥途徑對(duì)劑量方案進(jìn)行調(diào)整。例如，口服給藥劑量常常高出靜脈給藥劑量10倍。我們期望CCI-779可作為唯一的活性化學(xué)治療劑給藥或作為含有多于一個(gè)抗腫瘤劑的化學(xué)治療方案中的一部分進(jìn)行給藥。利用協(xié)同化學(xué)治療劑常常要求對(duì)每種特定藥物劑量減少，從而增加了特定試劑的安全范圍。
含有本發(fā)明的活性化合物的口服制劑可包括任何傳統(tǒng)的口服形式，包括片劑、膠囊、頰形式、含片、錠劑和口服液體、懸浮液或溶液。膠囊可含有活性化合物與惰性填料和/或稀釋劑如藥學(xué)可接受的淀粉(如玉米、土豆或木薯淀粉)、糖類、人工增甜劑、粉末狀纖維素如結(jié)晶和微晶纖維素、面粉、明膠、樹膠等的混合物。有用的片劑可通過(guò)傳統(tǒng)的壓制、濕制粒法或干制粒法并利用藥學(xué)可接受的稀釋劑、粘合劑、潤(rùn)滑劑、崩解劑、表面改性劑(包括表面活性劑)、懸浮劑或穩(wěn)定劑，包括但并不局限于硬脂酸鎂、硬脂酸、滑石、十二烷基硫酸鈉、微晶纖維素、羧甲基纖維素鈣、聚乙烯吡咯烷酮、明膠、海藻酸、阿拉伯膠、黃原膠、檸檬酸鈉、復(fù)合硅酸鹽、碳酸鈣、甘氨酸、糊精、蔗糖、山梨醇、磷酸氫鈣、硫酸鈣、乳糖、高嶺土、甘露醇、氯化鈉、滑石、干淀粉和粉末狀糖類。優(yōu)選的表面改性劑包括非離子型和陰離子型表面改性劑。表面改性劑的代表性示例包括但并不局限于泊洛沙姆188、潔爾滅、硬脂酸鈣、十六醇十八醇混合物、cetomacrogol乳化蠟、脫水山梨醇酯、膠體二氧化硅、磷酸鹽、十二烷基硫酸鈉、硅酸鋁鎂和三乙醇胺。此處的口服制劑可利用標(biāo)準(zhǔn)的延遲或控制釋放制劑來(lái)改變活性化合物的吸收?？诜苿┮舶ńo予包含在含有所需的適當(dāng)增溶劑或乳化劑的水或果汁中的活性成分。
在一些情況下，以氣溶膠形式直接通過(guò)氣道給予化合物也是我們所需要的。
本發(fā)明的化合物也可通過(guò)腸胃外或腹膜內(nèi)給藥?？稍谶m于與表面活性劑如羥丙基纖維素混合的水中制備作為游離堿或藥學(xué)可接受鹽的這些化合物的溶液或懸浮液。也可在甘油、液體聚乙二醇及其與油的混合物中制備分散體。在普通貯存和應(yīng)用條件下，這些制劑含有防腐劑以防止微生物生長(zhǎng)。
適于注射應(yīng)用的藥物形式包括無(wú)菌水溶液或分散體以及用于臨時(shí)制備無(wú)菌注射液和分散體的無(wú)菌粉末。在所有情況下，這些形式必需是無(wú)菌的且必需為流體從而保存易于注射的能力。其在制備和貯存條件下必需是穩(wěn)定的，并且貯存在可防止微生物如細(xì)菌和真菌污染的條件下。載體可為含有如水、乙醇、多元醇(如甘油、丙二醇和液體聚乙二醇)、它們合適的混合物及植物油的溶劑或分散介質(zhì)。
對(duì)于本公開內(nèi)容的目的來(lái)講，經(jīng)皮給藥應(yīng)理解為通過(guò)體表和包括上皮和粘膜組織在內(nèi)的身體通道的襯進(jìn)行的所有給藥。這樣的給藥可通過(guò)利用本發(fā)明的化合物或其藥學(xué)可接受的鹽以洗劑、霜?jiǎng)?、泡沫、貼劑、懸浮液、溶液和栓劑(直腸和陰道)形式進(jìn)行。
經(jīng)皮給藥可通過(guò)利用含有活性化合物和相對(duì)活性化合物為惰性的載體的經(jīng)皮貼劑來(lái)完成，此貼劑對(duì)皮膚無(wú)毒性，并可通過(guò)皮膚進(jìn)行藥物遞送從而系統(tǒng)吸收進(jìn)血管中。載體可為多種形式，例如霜和軟膏、糊劑、凝膠以及閉塞性(occlusive)裝置。霜和油膏可為油包水或水包油型粘性液體或半固體乳劑。由分散在含有活性成分的石油或親水石油中的吸附性粉末組成的貼劑也是適用的。可利用多種閉塞性裝置，如覆蓋在含有或不含載體的含活性成分的儲(chǔ)存器或含有活性成分的基質(zhì)上的半滲透膜將活性成分釋放到血液。在文獻(xiàn)中描述了其他已知的閉塞性裝置。
可利用包括添加或不添加改變栓劑的熔點(diǎn)的蠟的可可脂和甘油在內(nèi)的傳統(tǒng)物質(zhì)來(lái)制備栓劑。也可應(yīng)用水溶性栓劑基，如各種分子量的聚乙二醇。
權(quán)利要求
1.治療有需要的哺乳動(dòng)物中的腫瘤的方法，包括提供給該哺乳動(dòng)物有效量的CCI-779。
2.治療有需要的哺乳動(dòng)物中的難治性腫瘤的方法，包括提供給該哺乳動(dòng)物有效量的CCI-779。
3.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為腎癌。
4.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為軟組織肉瘤。
5.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為乳腺癌。
6.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為肺的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤。
7.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為宮頸癌。
8.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為子宮癌。
9.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為頭和頸癌。
10.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為成膠質(zhì)細(xì)胞瘤。
11.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為非小細(xì)胞肺癌。
12.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為前列腺癌。
13.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為胰腺癌。
14.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為淋巴瘤。
15.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為黑色素瘤。
16.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為小細(xì)胞肺癌。
17.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為卵巢癌。
18.權(quán)利要求1中的方法，其中的腫瘤為結(jié)腸癌。
19.3-羥基-2-(羥甲基)-2-甲基丙酸的雷帕霉素42酯(CCI-779)在制備用于治療哺乳動(dòng)物中的腫瘤的藥物中的用途。
20.3-羥基-2-(羥甲基)-2-甲基丙酸的雷帕霉素42酯(CCI-779)在制備用于治療哺乳動(dòng)物中的難治性腫瘤的藥物中的用途。
21.權(quán)利要求19中的用途，其中的腫瘤為腎癌、軟組織肉瘤、乳腺癌、肺的神經(jīng)內(nèi)分泌腫瘤、宮頸癌、子宮癌、頭和頸癌、成膠質(zhì)細(xì)胞瘤、非小細(xì)胞肺癌、前列腺癌、胰腺癌、淋巴瘤、黑色素瘤、小細(xì)胞肺癌、卵巢癌或結(jié)腸癌。
全文摘要
本發(fā)明提供了CCI－779在腫瘤治療中的應(yīng)用。
文檔編號(hào)A61K31/436GK1678312SQ01818926
公開日2005年10月5日 申請(qǐng)日期2001年11月13日 優(yōu)先權(quán)日2000年11月15日
發(fā)明者G·杜卡特, J·J·小吉邦斯, L·A·希佩徹爾, P·弗洛斯特, C·M·迪斯卡法尼-馬羅 申請(qǐng)人:惠氏公司