基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì)的耐深播性的制作方法
【專利摘要】基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì)的耐深播性，主要步驟：（1）采用PVC管進(jìn)行深播試驗，在3cm、15cm和20cm三種播深處理下共同探討耐深播性與相關(guān)性狀的關(guān)系，篩選出耐深播鑒定指標(biāo)及適宜的篩選深度。（2）利用隸屬函數(shù)法評價各自交系的耐深播性大小。（3）利用70對多態(tài)性微衛(wèi)星標(biāo)記分析51份自交系的耐深播遺傳多樣性。（4）結(jié)合自交系在三種播深下的性狀表現(xiàn)，耐深播性評價結(jié)果及耐深播種質(zhì)微衛(wèi)星標(biāo)記結(jié)果來挖掘玉米耐深播種質(zhì)類群。此方法從形態(tài)學(xué)和分子生物角度研究了玉米種質(zhì)的耐深播性，重復(fù)性強(qiáng)，結(jié)果可靠，能夠大大提高耐深播種質(zhì)篩選與應(yīng)用效率。
【專利說明】基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì)的耐深播性

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于農(nóng)業(yè)新品種選育【技術(shù)領(lǐng)域】，涉及玉米自交系耐深播性鑒定指標(biāo)的篩選 方法，特別涉及基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì)的耐深播性。 技術(shù)背景
[0002] 種子萌發(fā)階段是作物能否在干旱條件下完成生育周期的關(guān)鍵時期之一，苗期遇干 旱時出苗能力下降，保苗率降低，嚴(yán)重影響田間苗數(shù)，從而導(dǎo)致減產(chǎn)。玉米對干旱比較敏感， 干旱缺水不僅阻礙玉米生長發(fā)育，干擾生理過程，而且嚴(yán)重影響產(chǎn)量，深播是玉米苗期避旱 的重要途徑之一，研究玉米種質(zhì)資源的耐深播特性對干旱地區(qū)玉米生產(chǎn)和耐深播育種具 有重要意義。
[0003] 作物的耐深播性是受多種因素綜合作用的一個非常復(fù)雜的遺傳性狀，機(jī)理極其復(fù) 雜，且易受環(huán)境影響，因此這給作物的耐深播性研究帶來了諸多困難。目前玉米的耐深播性 雖有報道，學(xué)者普遍認(rèn)為出苗率是耐深播種質(zhì)鑒定的重要指示指標(biāo)，但是對玉米其它耐深 播種質(zhì)鑒定指標(biāo)的篩選罕見報道。
[0004] 學(xué)者已經(jīng)提出了一些作物耐深播評價方法。張磊等(張磊，劉志增，黃亞群，陳 景堂，祝麗英.46個玉米自交系耐深播特性分析.河北農(nóng)業(yè)大學(xué)學(xué)報，2007，30(3): 18-21.)在15cm播深下，利用根莖長評價了玉米自交系的耐深播性；張曉龍等(張曉龍，陳 佳慧，林琪，蘭進(jìn)好.小麥新品系耐深播特性分析.農(nóng)業(yè)科技通報，2009, 6: 49-51， 51.)在小麥上利用供試材料的平均地中莖長，并做Duncan多重比較，評價了小麥品系的耐 深播性；彭云玲等(彭云玲，楊芳林，趙小強(qiáng)，任續(xù)偉.不同玉米自交系耐深播能力的 差異分析.干旱地區(qū)農(nóng)業(yè)研究，2014，，32(1) :25-32.)在15cm播深下，利用出苗率、中胚軸 長、胚芽鞘長、中胚軸與胚芽鞘之和、苗長、根長、根數(shù)等7個性狀對45份自交系進(jìn)行聚類分 析，評價了各材料的耐深播性。雖然利用這些方法也能評價作物的耐深播特性，但是這些方 法只注重了個別指標(biāo)，或模糊的將材料聚成不同類型，而對材料的耐深播性缺乏全面地評 價,也不清楚材料的耐深播性大小,更不清楚玉米耐深播種質(zhì)類群，因此給玉米耐深播種質(zhì) 篩選和應(yīng)用帶來了很大的盲目性。
[0005] 微衛(wèi)星標(biāo)記，也稱為簡單重復(fù)序列（simple sequence repeats、SSR)，作為一種新 興的分子標(biāo)記，在遺傳多樣性分析、基因定位、分子標(biāo)記輔助育種等領(lǐng)域具有重要意義。由 于隸屬函數(shù)法能夠綜合多種因素對作物的某一性狀進(jìn)行評價，因此該方法對作物的性狀評 價具有重要意義。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0006] 本發(fā)明要解決的技術(shù)問題在于提供基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì) 的耐深播性。以此篩選出廣泛適合于玉米耐深播性鑒定的參考指標(biāo)及適宜的篩選深度；提 出一種玉米耐深播性綜合評價新方法并進(jìn)行耐深播性評價；在此基礎(chǔ)上，分別結(jié)合材料的 性狀表現(xiàn)及耐深播性評價結(jié)果，從分子生物學(xué)角度挖掘玉米耐深播種質(zhì)類群，進(jìn)一步了解 耐深播種質(zhì)的遺傳多樣性，為耐深播種質(zhì)的篩選與應(yīng)用提供理論依據(jù)。
[0007] 為了解決上述技術(shù)問題，本發(fā)明采用如下技術(shù)方案：基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù) 法研究玉米種質(zhì)的耐深播性，包括如下步驟： (1) 收集材料：收集51份玉米自交系材料； (2) 種子清選：在51份材料中分別選取飽滿一致、無破損的種子10粒各10份； (3) 深播試驗：采用PVC盆栽試驗法，往尼龍網(wǎng)封底的高40cm、直徑15cm的PVC管中 分層裝入蛭石，然后分別將步驟（2)所得的51份自交系的種子10粒均勻地播于蛭石上，再 分別蓋3cm、15cm和20cm蛭石使管內(nèi)蛭石高度達(dá)40cm。其中3cm為對照處理，15cm和20cm 為兩個深播處理，每一處理3次重復(fù)，播前統(tǒng)一配土、裝缽、澆水；在室內(nèi)條件下萌發(fā)IOd后 統(tǒng)計出苗率，每一處理選取整體一致的幼苗6株測定其胚芽鞘長、中胚軸長、中胚軸與胚芽 鞘之和、苗長及根長； (4) 培養(yǎng)黃化苗：51份自交系各取10粒種子先用CldH2O清洗2次，再用體積百分比為 75%的酒精消毒lOmin，最后用CldH 2O沖洗3次，將種子放在滅過菌且鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿 上，澆適量ddH20,放置培養(yǎng)箱中25°C進(jìn)行暗培養(yǎng)，待黃化苗長至:T5cm時迅速剪其黃化苗， 裝入自封袋中編號，-70°C保存； (5) DNA提取：用CTAB法提取步驟（4)所得的自交系黃化苗全基因組DNA，用質(zhì)量百分 比為1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA質(zhì)量，用德國MPLEN微量分光光度儀檢測DNA濃度； (6) PCR擴(kuò)增：PCR反應(yīng)在Biometra-TlPCR儀上進(jìn)行，采用IOuL反應(yīng)體系，包括 Mix5. OuL，lmmol/L 正、反 SSR 引物各 0· 3uL，CldH2O 3. 7uL，50ng/uL DNAO. 7uL ;PCR 反應(yīng)程 序為：951：預(yù)變性51^11，1個循環(huán)；941：變性3〇8,5〇-591：退火3〇8,721：延伸3〇8，共36個 循環(huán)；最后72°C延伸10 min，4°C結(jié)束并保存；擴(kuò)增產(chǎn)物用質(zhì)量百分比為8%非變性聚丙烯酰 胺凝膠電泳，銀染； (7) 篩選SSR標(biāo)記：從玉米基因組數(shù)據(jù)庫網(wǎng)站（http://www. Maize⑶B. org)中選擇了 均勻分布于玉米全基因組的230對SSR引物，由上海生工生物工程有限公司合成；選擇黃早 四、掖478、丹340、齊319、Mol7和B73這6份國內(nèi)玉米雜種優(yōu)勢群的標(biāo)準(zhǔn)測驗種為多態(tài)性 SSR引物篩選材料，用步驟（5)所得的這6份自交系的DNA，同時進(jìn)入步驟（6)，若上述6份 自交系PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在兩份或兩份以上自交系間有差異，則認(rèn)為這對引物為多態(tài)性引物， 總共篩選出了 70對條帶清晰、多態(tài)性好的SSR引物； (8) 耐深播種質(zhì)的微衛(wèi)星標(biāo)記：用步驟（7)所得的70對SSR引物和步驟（5)所得51份 自交系的DNA同時進(jìn)入步驟（6)，分析51份自交系的耐深播遺傳多樣性； (9) 結(jié)果分析：對步驟（3)測得的數(shù)據(jù)用統(tǒng)計軟件SPSS16. 0的相關(guān)程序進(jìn)行方差分 析、相關(guān)分析及描述統(tǒng)計，篩選出玉米耐深播性鑒定指標(biāo)及適宜的篩選深度，利用隸屬函 數(shù)法對51份自交系的耐深播性進(jìn)行綜合評價，評價每一自交系的耐深播性；用Patentin version3. 5軟件生成70對多態(tài)性SSR引物序列，對步驟（8)統(tǒng)計的數(shù)據(jù)用NTYSY-pc2. 1軟 件分析51份自交系的耐深播遺傳多樣性并劃分種質(zhì)類群；最后結(jié)合自交系在三種播深下 的性狀表現(xiàn)、耐深播性綜合評價結(jié)果及耐深播種質(zhì)微衛(wèi)星標(biāo)記結(jié)果來挖掘玉米耐深播種質(zhì) 類群。
[0008] 本發(fā)明以51份玉米自交系為試材，在3cm、15cm和20cm三種播深處理下，進(jìn)行深 播試驗來共同探討出苗率、胚芽鞘長、中胚軸長、中胚軸與胚芽鞘之和、苗長及根長與耐深 播性的關(guān)系，以此篩選出廣泛適合于玉米耐深播性鑒定的參考指標(biāo)及適宜的篩選深度；根 據(jù)耐深播鑒定指標(biāo)及適宜的篩選深度，用隸屬函數(shù)法對51份自交系的耐深播性進(jìn)行綜合 評價；結(jié)合各自交系在三種播深下的性狀表現(xiàn)，耐深播性綜合評價結(jié)果及耐深播種質(zhì)微衛(wèi) 星標(biāo)記結(jié)果確定了玉米耐深播種質(zhì)類群。本發(fā)明提供的方法在室內(nèi)進(jìn)行，重復(fù)性好，結(jié)果 可靠，不僅能綜合多種環(huán)境、多個耐深播相關(guān)性狀，從形態(tài)學(xué)客觀、準(zhǔn)確地評價玉米種質(zhì)的 耐深播性大小，還從分子生物學(xué)角度揭示了耐深播種質(zhì)類群，因此大大提高了耐深播玉米 種質(zhì)的篩選、應(yīng)用效率與目的性，為玉米耐深播育種奠定了堅實的基礎(chǔ)，具有很高的應(yīng)用價 值。
[0009] 本領(lǐng)域的技術(shù)人員清楚，玉米自交系種子試驗材料并非限于51份，本發(fā)明以51份 玉米自交系種子試驗材料為例，是為了清楚描寫技術(shù)方案的內(nèi)容。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0010] 圖1是利用UPGM聚類分析法將51份自交系劃分為I和II兩大優(yōu)勢群的圖。

【具體實施方式】
[0011] 本發(fā)明下述實施例中所用方法，如無特殊說明，均為常規(guī)方法；所用器材、試劑均 為通過商業(yè)途徑從試劑公司購買的常規(guī)器材、試劑。
[0012] 基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì)的耐深播性，按以下步驟進(jìn)行： (1)收集材料：收集黃早四、掖478、丹340、齊319、M〇17與B73等51份自交系。
[0013] (2)種子清選：從51份自交系中分別選取飽滿一致、無破損的種子10粒各10份， 供試驗所用。
[0014] (3)深播試驗：采用PVC盆栽實驗法，先往尼龍網(wǎng)封底的高40cm、直徑15cm的PVC 管中分層裝入蛭石，然后分別將51份自交系中飽滿一致、無破損的種子10粒均勻地播于蛭 石上，再分別蓋3cm、15cm和20cm蛭石使管內(nèi)蛭石高度達(dá)40cm。其中3cm為對照處理，15cm 和20cm為兩種深播處理，每一處理3次重復(fù)，播前統(tǒng)一配土、裝缽、澆水；在室內(nèi)條件下萌發(fā) IOd后統(tǒng)計出苗率，每一處理選取整體一致的幼苗6株測定其胚芽鞘長、中胚軸長、苗長及 根長。
[0015] (4)培養(yǎng)黃化苗：51份自交系各取10粒種子先用CldH2O清洗2次，再用體積百分 比為75%的酒精消毒lOmin，最后用CldH 2O沖洗3次，將種子放在滅過菌且鋪有兩層濾紙的 培養(yǎng)皿上，澆適量ddH20,放置培養(yǎng)箱中25°C進(jìn)行暗培養(yǎng)，待黃化苗長至:T5cm時迅速剪其 黃化苗，裝入自封袋中編號，_70°C保存。
[0016] (5) DNA提?。河肅TAB法從51份自交系的黃化苗中提取各材料的全基因組DNA， 用質(zhì)量百分比為1%瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA質(zhì)量，用德國MPLEN微量分光光度儀檢測DNA 濃度。
[0017] (6) PCR擴(kuò)增：PCR反應(yīng)在Biometra-TlPCR儀上進(jìn)行，采用IOuL反應(yīng)體系，包括 Mix5. OuL，lmmol/L 正、反 SSR 引物各 0· 3uL，CldH2O 3. 7uL，50ng/uL DNAO. 7uL ;PCR 反應(yīng)程 序為：951：預(yù)變性51^11，1個循環(huán)；941：變性3〇8,5〇-591：退火3〇8,721：延伸3〇8，共36個 循環(huán)；最后72°C延伸10 min，4°C結(jié)束并保存；擴(kuò)增產(chǎn)物用質(zhì)量百分比為8%非變性聚丙烯酰 胺凝膠電泳，銀染。
[0018] (7)篩選SSR標(biāo)記：從玉米基因組數(shù)據(jù)庫（Maize Genome Database)網(wǎng)站（http:// www. Maize⑶B. org)中選擇了均勻分布于玉米全基因組的230對SSR引物，由上海生工生物 工程有限公司合成；選擇黃早四、掖478、丹340、齊319、M 〇17和B73這6份國內(nèi)玉米雜種優(yōu) 勢群的標(biāo)準(zhǔn)測驗種為多態(tài)性SSR引物篩選材料，用步驟（5)所得的這6份自交系的DNA，同 時進(jìn)入步驟（6)，若上述6份自交系PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在兩份或兩份以上自交系間有差異，則認(rèn) 為這對引物為多態(tài)性引物，從均勻分布于玉米全基因組的230對SSR標(biāo)記中篩選出了 70對 條帶清晰、多態(tài)性好的SSR多態(tài)性引物。
[0019] (8)耐深播種質(zhì)的微衛(wèi)星標(biāo)記：用步驟（7)所得的70對多態(tài)性SSR引物和步驟（5) 所得51份自交系的DNA同時進(jìn)入步驟（6)，分析51份自交系的耐深播遺傳多樣性。
[0020] (9)測定計算下述指標(biāo)： 出苗率（%)=(出苗數(shù)/播種數(shù)）*1〇〇; 胚芽鞘長（cm)=從胚芽鞘節(jié)到胚芽鞘頂端的長度； 中胚軸長（cm)=從種子到胚芽鞘節(jié)之間的長度； 中胚軸與胚芽鞘之和（cm)=從種子到胚芽鞘頂端的長度； 苗長（cm)=中胚軸和胚芽鞘接合點(diǎn)以上部分的長度； 根長（cm)=最長根的長度。
[0021] (10)耐深播性評價：利用隸屬函數(shù)法對51份自交系進(jìn)行耐深播性綜合評價，其公 式為： Ui j= (Xi J-Xjfflin)/(Xjfflax-Xjfflin)(I) Uij=I- (Xij-Xjfflin) / (Xjfflax-Xjfflin) (2) 式中：Uij表示i材料j指標(biāo)的耐深播隸屬值；Xij表示i材料j指標(biāo)的測定值；Xjmin 表不所有材料j指標(biāo)的最小值；Xjmax表不所有材料j指標(biāo)的最大值。若所測指標(biāo)與材料的 耐深播性呈正相關(guān)，則采用（1)式計算隸屬值，反之則用（2)式。累加各指標(biāo)的具體隸屬值， 并求出平均值后進(jìn)行比較，平均值越大，自交系的耐深播性越強(qiáng)。
[0022] (11)實驗結(jié)果分析 (11. 1)玉米耐深播篩選深度的確定 整體而言，隨著播深的增加（3cm增加到15cm或20cm)，51份自交系的出苗率、苗長及 根長呈降低趨勢，而中胚軸長、胚芽鞘長、中胚軸與胚芽鞘之和呈增加趨勢，這些性狀在各 自交系間變化幅度不同。說明與對照3cm播深相比，15cm和20cm播深更適宜于玉米耐深播 性的篩選。
[0023] (11. 2)玉米耐深播性鑒定指標(biāo)的篩選 由表1所示，出苗率、中胚軸長、胚芽鞘長、中胚軸與胚芽鞘之和、苗長及根長在自交系 間差異極顯著，說明這6個性狀受自交系本身遺傳特性的控制，因此在耐深播鑒定時對它 們選擇是有效的。出苗率、中胚軸長、胚芽鞘長、中胚軸與胚芽鞘之和、苗長在播深間差異極 顯著，根長在播深間差異顯著，說明播深極顯著影響自交系的出苗率、中胚軸長、胚芽鞘長、 中胚軸與胚芽鞘之和、苗長，顯著影響根長，并且這些性狀隨著播種深度的增加其變化增 大。另外，除根長在自交系與播深互作間差異不顯著外，其余5個性狀在自交系與播深互作 間的差異也達(dá)到極顯著水平，說明自交系的這6個性狀對播深的敏感程度不同，出苗率、中 胚軸長、胚芽鞘長、中胚軸與胚芽鞘之和，苗長對播深的敏感程度高，而根長對播深的敏感 程度低。綜上所述，除出苗率作為玉米耐深播性的指示指標(biāo)外，中胚軸長、胚芽鞘長、中胚軸 與胚芽鞘之和、苗長、根長等也可以作為耐深播性的鑒定指標(biāo)。

【權(quán)利要求】
1. 基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì)的耐深播性，其特征在于包括如下步 驟： (1) 收集材料：收集51份玉米自交系材料； (2) 種子清選：在51份材料中分別選取飽滿一致、無破損的種子10粒各10份； (3) 深播試驗：采用PVC盆栽試驗法，往尼龍網(wǎng)封底的高40cm、直徑15cm的PVC管中 分層裝入蛭石，然后分別將步驟（2)所得的51份自交系的種子10粒均勻地播于蛭石上，再 分別蓋3cm、15cm和20cm蛭石使管內(nèi)蛭石高度達(dá)40cm ;其中3cm為對照處理，15cm和20cm 為兩個深播處理，每一處理3次重復(fù)，播前統(tǒng)一配土、裝缽、澆水；在室內(nèi)條件下萌發(fā)IOd后 統(tǒng)計出苗率，每一處理選取整體一致的幼苗6株測定其胚芽鞘長、中胚軸長、中胚軸與胚芽 鞘之和、苗長及根長； (4) 培養(yǎng)黃化苗：51份自交系各取10粒種子先用CldH2O清洗2次，再用體積百分比為 75%的酒精消毒lOmin，最后用CldH 2O沖洗3次，將種子放在滅過菌且鋪有兩層濾紙的培養(yǎng)皿 上，澆適量ddH20,放置培養(yǎng)箱中25°C進(jìn)行暗培養(yǎng)，待黃化苗長至:T5cm時迅速剪其黃化苗， 裝入自封袋中編號，-70°C保存； (5) DNA提取：用CTAB法提取步驟（4)所得的自交系黃化苗全基因組DNA，用質(zhì)量百分 比為1%的瓊脂糖凝膠電泳檢測DNA質(zhì)量，用德國MPLEN微量分光光度儀檢測DNA濃度； (6) PCR擴(kuò)增：PCR反應(yīng)在Biometra-TlPCR儀上進(jìn)行，采用IOuL反應(yīng)體系，包括 Mix5. OuL，lmmol/L 正、反 SSR 引物各 0? 3uL，CldH2O 3. 7uL，50ng/uL DNAO. 7uL ;PCR 反應(yīng)程 序為：95°0預(yù)變性5!^11，1個循環(huán)；941：變性3〇8,5〇-591：退火3〇8,721：延伸3〇8，共36個 循環(huán)；最后72°C延伸10 min，4°C結(jié)束并保存；擴(kuò)增產(chǎn)物用質(zhì)量百分比為8%非變性聚丙烯酰 胺凝膠電泳，銀染； (7) 篩選SSR標(biāo)記：從玉米基因組數(shù)據(jù)庫網(wǎng)站（http://www. Maize⑶B. org)中選擇了 均勻分布于玉米全基因組的230對SSR引物，由上海生工生物工程有限公司合成；選擇黃早 四、掖478、丹340、齊319、Mol7和B73這6份國內(nèi)玉米雜種優(yōu)勢群的標(biāo)準(zhǔn)測驗種為多態(tài)性 SSR引物篩選材料，用步驟（5)所得的這6份自交系的DNA，同時進(jìn)入步驟（6)，若上述6份 自交系PCR擴(kuò)增產(chǎn)物在兩份或兩份以上自交系間有差異，則認(rèn)為這對引物為多態(tài)性引物， 總共篩選出了 70對條帶清晰、多態(tài)性好的SSR引物； (8) 耐深播種質(zhì)的微衛(wèi)星標(biāo)記：用步驟（7)所得的70對SSR引物和步驟（5)所得51份 自交系的DNA同時進(jìn)入步驟（6)，分析51份自交系的耐深播遺傳多樣性； (9) 結(jié)果分析：對步驟（3)測得的數(shù)據(jù)用統(tǒng)計軟件SPSS16. 0的相關(guān)程序進(jìn)行方差分 析、相關(guān)分析及描述統(tǒng)計，篩選出玉米耐深播性鑒定指標(biāo)及適宜的篩選深度，利用隸屬函 數(shù)法對51份自交系的耐深播性進(jìn)行綜合評價，評價每一自交系的耐深播性；用Patentin version3. 5軟件生成70對多態(tài)性SSR引物序列，對步驟（8)統(tǒng)計的數(shù)據(jù)用NTYSY-pc2. 1軟 件分析51份自交系的耐深播遺傳多樣性并劃分種質(zhì)類群；最后結(jié)合自交系在三種播深下 的性狀表現(xiàn)、耐深播性綜合評價結(jié)果及耐深播種質(zhì)微衛(wèi)星標(biāo)記結(jié)果來挖掘玉米耐深播種質(zhì) 類群。
2. 如權(quán)利要求1所述的基于微衛(wèi)星標(biāo)記和隸屬函數(shù)法研究玉米種質(zhì)的耐深播性，其特 征在于步驟（9)結(jié)果分析所述的利用隸屬函數(shù)法對51份自交系進(jìn)行耐深播性綜合評價，其 公式為： Uij= (Xij - Xjfflin)/(Xjfflax-Xjfflin) (I) Uij=I-(Xij- Xjfflin)/(Xjfflax- Xjfflin) (2) 式中：Uij表示i材料j指標(biāo)的耐深播隸屬值；Xij表示i材料j指標(biāo)的測定值；Xjmin 表不所有材料j指標(biāo)的最小值；Xjmax表不所有材料j指標(biāo)的最大值；若所測指標(biāo)與材料的 耐深播性呈正相關(guān)，則采用（1)式計算隸屬值，反之則用（2)式；累加各指標(biāo)的具體隸屬值， 并求出平均值后進(jìn)行比較，平均值越大，自交系的耐深播性越強(qiáng)。
【文檔編號】C12Q1/68GK104313134SQ201410511905
【公開日】2015年1月28日 申請日期:2014年9月29日 優(yōu)先權(quán)日:2014年9月29日
【發(fā)明者】彭云玲, 趙小強(qiáng), 閆慧萍, 武博洋 申請人:甘肅農(nóng)業(yè)大學(xué)