一種早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種和培育方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及一種植物的育種和培育方法，尤其涉及一種松散型紫花椰菜的育種和培育方法，屬于植物栽培【技術(shù)領(lǐng)域】。本發(fā)明利用松散型白花椰菜育種材料與半緊實(shí)型紫花椰菜育種材料雜交得到種子F1，F(xiàn)1播種后選擇綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株自交得到F2；F2播種后選擇松散型紫花椰菜單株，以單核靠邊期至雙核早期的適合小孢子培養(yǎng)的花蕾進(jìn)行小孢子培養(yǎng)，創(chuàng)制大量正常的再生植株,對(duì)松散型紫花椰菜優(yōu)異DH植株進(jìn)行自交，獲得松散型紫花椰菜優(yōu)異DH株系03－12作為輪回親本與白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料CMS05－6先雜交，經(jīng)過(guò)5代回交轉(zhuǎn)育選育成綜合性狀優(yōu)良的細(xì)胞質(zhì)雄性不育系CMS08－2，選擇DH株系為父本與優(yōu)良的細(xì)胞質(zhì)雄性不育系CMS08－2試配雜交組合。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種和培育方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種植物的育種和培育方法，尤其涉及一種松散型紫花椰菜的育種和培育方法，屬于植物栽培【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]松散型紫花椰菜以其株型緊湊，生長(zhǎng)期短，葉片顏色綠，花莖、花蕾紫色，花球松散、花莖長(zhǎng)，品味佳，商品性高，抗逆性、抗病性強(qiáng)的特點(diǎn)而越來(lái)越受到種植戶(hù)和消費(fèi)者的歡迎。松散型紫花椰菜主要以肥嫩的花蕾和花莖供食用，花蕾和花莖紫色翠美，肉質(zhì)脆嫩，風(fēng)味香甜，營(yíng)養(yǎng)豐富，富含維生素A、B、C、E、蛋白質(zhì)、花青素，礦物質(zhì)等多種營(yíng)養(yǎng)成份。它集合了松散型花椰菜的優(yōu)點(diǎn)，同時(shí)又去掉了緊實(shí)型花椰菜的缺點(diǎn)，更有松散型花椰菜之外的花球顏色區(qū)別，是特色花椰菜，備受消費(fèi)者的喜愛(ài)。它比緊實(shí)型花椰菜甜脆可口 ；其外觀(guān)之美、風(fēng)味之佳遠(yuǎn)遠(yuǎn)在緊實(shí)型花椰菜之上。此外，松散型紫花椰菜還有健胃助消化、且富含花青素和抗癌物質(zhì)，其中的抗癌物質(zhì)高，是一種美味與保健完美結(jié)合的高品質(zhì)、高檔次的功能型綠色蔬菜。目前，蔬菜基地正大面積種植松散型紫花椰菜，以供應(yīng)國(guó)內(nèi)外市場(chǎng)。
[0003]松散型紫花椰菜有較強(qiáng)的雜種優(yōu)勢(shì)，目前生產(chǎn)雜交一代主要有兩種途徑，即利用自交不親和系和顯性細(xì)胞核雄性不育系配制雜交種。但利用自交不親和系制種要花費(fèi)大量的人力和時(shí)間進(jìn)行親本繁殖(通過(guò)人工蕾期授粉)，成本很高，推廣面積受制種量制約。更不利的是親本長(zhǎng)期連續(xù)自交易產(chǎn)生生活力退化，使一些優(yōu)良的性狀會(huì)丟失，雜交種的雜交率很難達(dá)到100%。利用顯性細(xì)胞核雄性不育系制種繁鎖，復(fù)雜，不易推廣。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是針對(duì)現(xiàn)有技術(shù)存在的缺陷，提出一種早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種和培育方法，所得的松散型紫花椰菜新品種具有產(chǎn)量高，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)的優(yōu)勢(shì)。
[0005]本發(fā)明利用早熟、優(yōu)質(zhì)、抗病的松散型白花椰菜育種材料與優(yōu)質(zhì)、抗病的半緊實(shí)型紫花椰菜育種材料花期人工去雄配制雜交一代種子Fl，F(xiàn)l播種后5葉I心時(shí)采用低溫處理后定植，經(jīng)過(guò)田間鑒定，選擇早熟、抗病性強(qiáng)、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好等綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株自交得到F2 ；F2播種后5葉I心時(shí)采用低溫處理后定植，田間鑒定篩選早熟、抗病、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好的松散型紫花椰菜單株，以單核靠邊期至雙核早期的適合小孢子培養(yǎng)的花蕾進(jìn)行小孢子培養(yǎng)，創(chuàng)制大量正常的再生植株，田間采用植株形態(tài)特征法鑒定，多為自發(fā)雙單倍體，篩選早熟、抗病、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好的松散型紫花椰菜優(yōu)異DH植株進(jìn)行自交，獲得大量植物學(xué)性狀穩(wěn)定、配合力好、花粉量大的DH株系，并選擇其中一個(gè)松散型紫花椰菜優(yōu)異DH株系03 - 12作為輪回親本與白花椰菜綜合性狀優(yōu)良細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料CMS05 — 6先雜交，后經(jīng)過(guò)5代回交轉(zhuǎn)育選育成綜合性狀優(yōu)良的細(xì)胞質(zhì)雄性不育系CMS08 - 2，其不育系表現(xiàn)為雌蕊功能正常，無(wú)異源胞質(zhì)的不良影響，不育性穩(wěn)定徹底，不育株率和不育度均達(dá)100%，具有較高的產(chǎn)量配合力。輪回親本為保持系。選擇利用小孢子培養(yǎng)的植物學(xué)性狀穩(wěn)定、配合力好、花粉量大的DH株系為父本與優(yōu)良的細(xì)胞質(zhì)雄性不育系CMS08 - 2試配雜交組合。其具體方法如下:一種早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，包括以下步驟:
[0006]第一步、將松散型白花椰菜和半緊實(shí)型紫花椰菜雜交得到種子Fl ；
[0007]第二步、將Fl播種，當(dāng)小苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)采用低溫處理后定植，選擇早熟、抗病性強(qiáng)、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好等綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良的單株進(jìn)行自交得到種子F2;
[0008]第三步、將F2播種，當(dāng)小苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)采用低溫處理后定植，田間鑒定選擇早熟、抗病、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好的松散型紫花椰菜單株，選擇單株上單核靠邊期至雙核早期的花蕾，進(jìn)行小孢子培養(yǎng)得到單倍體材料；
[0009]第四步、將所述單倍體材料在田間自然加倍得到DH植株，進(jìn)行自交留種，分別編號(hào)播種，待苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)，采用低溫處理后定植，加代處理并按照第三步的標(biāo)準(zhǔn)選擇優(yōu)良的松散型紫花椰菜DH株系；
[0010] 第五步、按照第三步的標(biāo)準(zhǔn)選擇所述松散型紫花椰菜DH株系作為輪回親本，與白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育源進(jìn)行雜交，獲得雜交種子；
[0011]第六步、將所述雜交種子播種后，待苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)，低溫處理后定植，加代處理，進(jìn)行田間鑒定，選擇植株低溫下幼苗不黃化，生殖生長(zhǎng)期花朵開(kāi)放正常，植株直立，葉片深綠，有蠟粉，抽薹分枝多，分枝半直立，枝條挺立，光合能力強(qiáng)，雄蕊退化，雌蕊正常，花器官發(fā)育正常，蜜腺大，花蜜多，以及不育株率和不育度100%的松散型紫花椰菜不育系單株;
[0012]第七步、將所述松散型紫花椰菜DH株系作為回交父本與第六步所述松散型紫花椰菜不育系單株進(jìn)行4-5代回交轉(zhuǎn)育，得到松散型紫花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系，所述松散型紫花挪采DH株系為其保持系；
[0013]第八步、以所述松散型紫花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系為母本，以所述松散型紫花椰菜DH株系為父本進(jìn)行雜交，經(jīng)田間觀(guān)察、鑒定、小區(qū)評(píng)比，生產(chǎn)試驗(yàn)，篩選出性狀優(yōu)良的松散型紫花椰菜雜交組合，即松散型紫花椰菜新品種。
[0014]本發(fā)明利用細(xì)胞質(zhì)雄性不育系制種可以克服利用自交不親和系制種的一系列缺陷。我國(guó)對(duì)細(xì)胞質(zhì)雄性不育研究雖然起步較晚，在細(xì)胞質(zhì)雄性不育研究中，我國(guó)的育種工作者在引進(jìn)國(guó)外研究成果和材料的基礎(chǔ)上作了進(jìn)一步的研究，取得了一定的進(jìn)展，通過(guò)引進(jìn)的改良白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育源，不育性穩(wěn)定，不受環(huán)境條件影響，花器官發(fā)育良好，雄蕊均退化，雌蕊正常，蜜腺大，花蜜多，不育株率和不育度均為100%，克服了苗期低溫黃化，花器官發(fā)育異?，F(xiàn)象，結(jié)實(shí)率高，所有的甘藍(lán)類(lèi)蔬菜品種都可以作為它的保持系。
[0015]本發(fā)明所采用的細(xì)胞質(zhì)雄性不育系除雄性不育徹底，不育株率和不育度均為100%，克服了苗期低溫黃化，花器官發(fā)育異?，F(xiàn)象的性狀外，還具有抗逆性強(qiáng)，抗病性強(qiáng)的特點(diǎn)，而且植株直立，葉片深綠，有蠟粉，抽薹分枝多，分枝半直立，枝條挺立，光合能力強(qiáng)，雄蕊退化，雌蕊正常，花瓣大，顏色濃黃，蜜腺大，花蜜多，柱頭直立，不彎曲，蜜蜂訪(fǎng)花頻率高，時(shí)間長(zhǎng)，平均達(dá)10秒/朵，易授粉，平均莢長(zhǎng)達(dá)15 cm左右，結(jié)實(shí)率達(dá)20粒/莢，籽粒飽滿(mǎn)，產(chǎn)量高等特點(diǎn)。同時(shí)，松散型紫花椰菜收獲的營(yíng)養(yǎng)體，在利用細(xì)胞質(zhì)雄性不育系配制雜交種時(shí)，不需要恢復(fù)系，只需要父本系即可。
[0016]本發(fā)明方法的所述第一步中，松散型白花椰菜選用植株直立，葉片綠色，花球半圓、頂略平，花球松，花枝長(zhǎng)18~24 Cm，球色乳白色，蕾粒細(xì)，單球質(zhì)量700 — 800g,花器官發(fā)育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開(kāi)花習(xí)性良好，易授粉，結(jié)莢長(zhǎng)，結(jié)實(shí)率高，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)的植株；所述半緊實(shí)型紫花椰菜選用植株直立，葉片綠色，花球半圓形，花球略松，花枝長(zhǎng)8~12 Cm，球色深紫色，蕾粒細(xì)，單球質(zhì)量800 — 1000g,花器官發(fā)育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開(kāi)花習(xí)性良好，易授粉，結(jié)莢長(zhǎng)，結(jié)實(shí)率高，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)的植株。并采用花期人工去雄配制雜交一代種子Fl。
[0017]所述第四步中，所述DH植株依據(jù)植株形態(tài)特征法選擇植株無(wú)黃化，無(wú)畸形葉，葉色、葉形正常、植株生長(zhǎng)正常，花球蕾粒發(fā)育正常，花粉量大，能正常結(jié)實(shí)，進(jìn)行田間鑒定。
[0018]所述第五步中，DH株系的單株與白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料CMS05 — 6進(jìn)行人工剝蕾或花期套袋雜交，露出柱頭后，將優(yōu)良且穩(wěn)定松散型紫花椰菜DH株系單株的花粉涂于其上，柱頭正常膨大，獲得雜交種子。
[0019]所述低溫處理的條件是溫度5.4~11.60C，光照度2000LX的光照培養(yǎng)箱內(nèi)春化處
理20天。
[0020]所述加代處理方法是指每年加代1-2代?；ㄒ耸蔷G體春化作物，與大白菜種子春化不同，植株對(duì)低溫春化要求不嚴(yán)，四季均可開(kāi)花，采用5葉I心的小苗低溫處理能加快春化速度，較普通栽培提早15 - 20天開(kāi)花，較種子春化方式更直接有效，選擇性強(qiáng)。具體方法為:將則收下的種子脫粒干凈，去掉癟籽、破子，曬干；1月初穴盤(pán)育苗，白天18-22°C，夜晚15 — 18°C，5葉I心時(shí)放置光照培養(yǎng)箱，白天8 — 10°C，夜晚6 — 7°C，培養(yǎng)20天后即可定植，田間利用水簾、風(fēng)機(jī)、遮光網(wǎng)控制夏季高溫、利用燃油控溫設(shè)備提高冬季低溫，常年溫度控制在15_28°C之 間，而且在花球形成初期至抽薹開(kāi)花初期，白天10:30 — 14:30，在大棚內(nèi)利用霧化裝置，使大棚內(nèi)空氣相對(duì)濕度保持在70% — 80%之間，土壤保持濕潤(rùn)，田間鑒定菌核病、黑腐病的抗病性以及抗逆性的強(qiáng)弱，確保優(yōu)選單株的抗病性強(qiáng)、抗逆性強(qiáng)，定植后60天可以抽薹開(kāi)花，然后進(jìn)行人工回交授粉。轉(zhuǎn)育早代，回交父本較細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料提前10天、同天、推后10天分3次播種，調(diào)節(jié)花期，花期相遇時(shí)進(jìn)行人工剝蕾或花期套袋雜交，5月底6月初收獲；6月下旬再次播種，方法同上，11月底12月初即可收獲，實(shí)現(xiàn)一年2代加代快速選育。
[0021]所述小孢子培養(yǎng)方法參見(jiàn)顧宏輝、虞慧芳、趙振卿、王建升、盛小光、張曉輝的發(fā)明專(zhuān)利花椰菜高二倍體率小孢子再生植株的培養(yǎng)方法(申請(qǐng)?zhí)?00910101723.X)。供體植株是選擇植株與花蕾健壯的紫花椰菜植株；并從中選擇花瓣與花藥長(zhǎng)度比在0.5 - 0.8之間，處于單核靠邊期至雙核早期的紫花椰菜花蕾培養(yǎng)，其它培養(yǎng)方法相同。
[0022]上述方法的所述優(yōu)良且穩(wěn)定的白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系代號(hào)CMS05 - 6，所述優(yōu)良且穩(wěn)定的松散型紫花椰菜DH株系回交父本即保持系代號(hào)03 - 12，所述松散型紫花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系代號(hào)CMS08 - 2，所述優(yōu)良且穩(wěn)定松散型紫花椰菜DH株系父本系代號(hào)09 — 16。生物學(xué)性狀參見(jiàn)【具體實(shí)施方式】部分的表1 一表5。
[0023]本發(fā)明進(jìn)一步提供一種早熟、抗病、松散型紫花椰菜的培育方法，包括以下步驟:采用簡(jiǎn)易大棚采種，不育系與相應(yīng)的保持系以1:2栽培，開(kāi)花期在棚內(nèi)放蜜蜂授粉，每個(gè)大棚2箱，花期過(guò)后拔除保持系，從不育系植株采種得到母本種子，父本采種棚在開(kāi)花期通過(guò)蜜蜂授粉，提高采種質(zhì)量。
[0024]培育時(shí)，培育基地采用自然屏障隔離，隔離距離在1500米以上，父本與母本按照1:2進(jìn)行定植，定植至簡(jiǎn)易大棚避雨栽培，氣溫30°C以上時(shí)四周通風(fēng)，開(kāi)花前注意雜株的及時(shí)發(fā)現(xiàn)和拔除，開(kāi)花期在棚內(nèi)放蜜蜂授粉，每個(gè)大棚2箱，花期過(guò)后拔除父本系，加強(qiáng)田間病蟲(chóng)害的管理。
[0025]本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)如下:
[0026](I)雄性不育系為細(xì)胞質(zhì)不育，隨母性遺傳，其不育性穩(wěn)定，不育株率和不育度均為100 %，花器官發(fā)育正常，開(kāi)花結(jié)實(shí)性狀良好，幼苗低溫條件下不黃化，抽薹分枝多，分枝半直立，枝條挺立，光合能力強(qiáng)，雄蕊退化，雌蕊正常，蜜腺大，花蜜多，柱頭直立，不彎曲，蜜蜂訪(fǎng)花頻率高，時(shí)間長(zhǎng)，易授粉，產(chǎn)量高等特點(diǎn)，多代回交不退化，轉(zhuǎn)育容易，生長(zhǎng)勢(shì)旺，組合力強(qiáng)。
[0027](2)育種材料是綠體春化作物，對(duì)低溫春化要求不嚴(yán)，四季均可開(kāi)花，只要避開(kāi)高溫和寒冷對(duì)開(kāi)花結(jié)實(shí)不利影響外，利用降溫和加溫設(shè)備把棚內(nèi)溫度調(diào)到15_28°C，可保證育種進(jìn)展順利，縮短育種年限，加快育種進(jìn)程，提高育種效率，在花球形成初期至抽薹開(kāi)花初期增加空氣相對(duì)濕度，對(duì)鑒定植株的抗病性和抗逆性更直接有效，選擇性強(qiáng)。
[0028](3)轉(zhuǎn)育早代，不育系比保持系植株生長(zhǎng)勢(shì)強(qiáng)，具有種間雜交優(yōu)勢(shì)。
[0029](4)轉(zhuǎn)育早代，不育系的晚抽薹比保持系強(qiáng)，花椰菜花枝再生能力弱，僅僅靠摘心無(wú)法調(diào)節(jié)花期相遇，因此轉(zhuǎn)育早代回交父本較細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料提前10天、同天、推后10天分3次播種，調(diào)節(jié)花期。
[0030](5)用不育系配制Fl，種子產(chǎn)量高，制種成本低，省工。 病性強(qiáng)，增產(chǎn)明顯。
[0032](7)通過(guò)游離小孢子培養(yǎng)和常規(guī)育種相結(jié)合，聚合花椰菜與紫花椰菜的早熟、莖長(zhǎng)、花球松散、優(yōu)質(zhì)、抗病、抗逆等高效基因，培育出目標(biāo)性狀突出、綜合性狀優(yōu)良的松散型紫花椰菜新品種。
[0033](8)利用白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系作轉(zhuǎn)育母本較其它甘藍(lán)類(lèi)細(xì)胞質(zhì)雄性不育系轉(zhuǎn)育速度快I 一 2代。
[0034]本發(fā)明提供的該材料的獲得方法簡(jiǎn)便，成本低廉，便于推廣，市場(chǎng)前景廣闊。
【專(zhuān)利附圖】

【附圖說(shuō)明】
[0035]圖1為本發(fā)明一個(gè)實(shí)施例的育種流程圖。
【具體實(shí)施方式】
[0036]本實(shí)施例中第一次作為母本的白花椰菜胞質(zhì)雄性不育系標(biāo)準(zhǔn)代號(hào)CMS05 - 6、優(yōu)良且穩(wěn)定的DH株系標(biāo)準(zhǔn)代號(hào)03 - 12、紫花椰菜胞質(zhì)雄性不育系標(biāo)準(zhǔn)代號(hào)CMS08 — 2、優(yōu)良且穩(wěn)定的DH株系標(biāo)準(zhǔn)代號(hào)09 - 16，可以根據(jù)需要在市場(chǎng)上購(gòu)買(mǎi)到(例如到鎮(zhèn)江瑞繁農(nóng)藝有限公司購(gòu)買(mǎi)，地址江蘇省句容市寧杭路112號(hào))，本發(fā)明切實(shí)可行。
[0037]如圖1所示，本實(shí)施例的育種流程如下:所述第一步中，松散型白花椰菜選用植株直立，葉片綠色，花球半圓、頂略平，花球松，花枝長(zhǎng)18~24 Cm，球色乳白色，蕾粒細(xì)，單球質(zhì)量700 - 800g,花器官發(fā)育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開(kāi)花習(xí)性良好，易授粉，結(jié)莢長(zhǎng)，結(jié)實(shí)率高，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)的植株；所述半緊實(shí)型紫花椰菜選用植株直立，葉片綠色，花球半圓形，花球略松，花枝長(zhǎng)8~12 Cm，球色深紫色，蕾粒細(xì)，單球質(zhì)量800 -1OOOg,花器官發(fā)育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開(kāi)花習(xí)性良好，易授粉，結(jié)莢長(zhǎng)，結(jié)實(shí)率高，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)的植株。具體是在第一年3月下旬用3份不同類(lèi)型(不同熟期、不同葉形和葉色)松散型白花椰菜優(yōu)良的育種材料(慶美80天松花菜、美青松50天散花菜、美玉松90天松花菜)，2份不同類(lèi)型(不同熟期、不同葉形和葉色)半緊實(shí)型紫花椰菜優(yōu)良的育種材料(多紫多福80天、多紫多福100天)雜交，得到12份不同類(lèi)型的雜交Fl后代，于當(dāng)年6月初收獲Fl種子；當(dāng)年夏季出月下旬)將12份不同類(lèi)型的Fl播種，分別播種于72孔穴盤(pán)中，蔬菜專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土育苗，植株有5葉I心時(shí)，將其放置在溫度5.4~11.6°C，光照度2000Lx的光照培養(yǎng)箱內(nèi)春化處理20天后，將植株在花盆內(nèi)定植并擺放在大棚內(nèi)生長(zhǎng)，田間利用水簾、風(fēng)機(jī)、遮光網(wǎng)控制夏季高溫、利用燃油控溫設(shè)備提高冬季低溫，常年溫度控制在15-28°C之間，以利于植株生長(zhǎng)，在花球形成初期至抽薹開(kāi)花初期，白天10:30 — 14:30，在大棚內(nèi)利用霧化裝置，使大棚內(nèi)空氣相對(duì)濕度保持在70% — 80%之間，土壤保持濕潤(rùn)，田間鑒定菌核病、黑腐病的抗病性以及抗逆性等其他綜合性狀。Fl代由于收獲種子數(shù)量不等，種植株數(shù)50~70株不等，當(dāng)年9月經(jīng)田間觀(guān)察、鑒定，篩選8個(gè)早熟、花球松散、紫色、花莖長(zhǎng)、蕾粒細(xì)、抗病、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好的優(yōu)良單株自交，11月初得到8份F2種子；11月中旬播種于72孔穴盤(pán)中，蔬菜專(zhuān)用營(yíng)養(yǎng)土育苗，植株有5葉I心時(shí)，將其放置在溫度5.4~11.6°C，光照度2000Lx的光照培養(yǎng)箱內(nèi)春化處理20天后，將植株在花盆內(nèi)定植并擺放在大棚內(nèi)生長(zhǎng)，田間利用水簾、風(fēng)機(jī)、遮光網(wǎng)控制夏季高溫、利用燃油控溫設(shè)備提高冬季低溫，常年溫度控制在15-28°C之間，以利于植株生長(zhǎng)，在花球形成初期至抽薹開(kāi)花初期，白天10:30 - 14:30，在大棚內(nèi)利用霧化裝置，使大棚內(nèi)空氣相對(duì)濕度保持在70%-80%之間，土壤保持濕潤(rùn)，田間鑒定菌核病、黑腐病的抗病性以及抗逆性等其他綜合性狀。
[0038]第二年3月下旬以單核靠邊期至雙核早期的適合小孢子培養(yǎng)的花蕾進(jìn)行小孢子培養(yǎng)，創(chuàng)制大量正常的再生植株，第二年5月下旬植株移栽大棚內(nèi)，田間采用植株形態(tài)特征法鑒定，多為自發(fā)雙單倍體(DH)，第二 8月上旬田間觀(guān)察、鑒定，篩選優(yōu)良單株自交，第二年10月上旬獲得種子并編號(hào) ，第二年11月上旬播種、經(jīng)田間觀(guān)察、鑒定，篩選早熟、花球松散、紫色、花莖長(zhǎng)、蕾粒細(xì)、抗病、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好的優(yōu)良DH株系繁殖，
[0039]第三年3月開(kāi)花，株系間繁殖，5月底獲得穩(wěn)定的DH株系親本10份，并于第三年10月初至11月初分三期播種。
[0040]第三年從歐洲、日本等地引進(jìn)多份白花椰菜雄性不育材料，同年8月下旬在鎮(zhèn)江農(nóng)科所蔬菜基地種植，經(jīng)田間觀(guān)察、鑒定，發(fā)現(xiàn)1份材料(CMS05 - 6)不育株率和不育度均為100%，克服了苗期低溫黃化，花器官發(fā)育異?，F(xiàn)象，結(jié)實(shí)率高的性狀外，還具有抗逆性強(qiáng)，抗病性強(qiáng)的特點(diǎn)，而且植株直立，葉片深綠，有蠟粉，抽薹分枝多，分枝半直立，枝條挺立，光合能力強(qiáng)，雄蕊退化，雌蕊正常，花瓣大，顏色濃黃，蜜腺大，花蜜多，柱頭直立，不彎曲，蜜蜂訪(fǎng)花頻率高，時(shí)間長(zhǎng)，平均達(dá)10秒/朵，易授粉，平均莢長(zhǎng)達(dá)15 cm左右，結(jié)實(shí)率達(dá)20粒/莢，籽粒飽滿(mǎn)，產(chǎn)量高等特點(diǎn)，田間鑒定后選留優(yōu)良單株假植于大棚越冬；
[0041]第四年3月底用6份不同類(lèi)型(不同熟期、不同葉形和葉色)優(yōu)良且穩(wěn)定的DH株系與之雜交，得到6份不同類(lèi)型的雜交Fl后代，于當(dāng)年6月初收獲Fl種子；當(dāng)年6月底將6份不同類(lèi)型的Fl及回交父本播種，待植株有5葉I心時(shí)，進(jìn)行春化(條件與上述植株春化條件相同)，春化后，將植株在花盆內(nèi)定植并擺放在大棚內(nèi)生長(zhǎng)，大棚內(nèi)溫度、相對(duì)濕度調(diào)節(jié)同前述，保持土壤濕潤(rùn)，以利于植株生長(zhǎng)，在生長(zhǎng)過(guò)程中多次鑒定植株的長(zhǎng)勢(shì)、抗病性、抗逆性以及其他綜合性狀。Fl代由于收獲種子數(shù)量不等，種植株數(shù)60~100株不等。在生長(zhǎng)過(guò)程中多次鑒定各植株長(zhǎng)勢(shì)、抗病性、抗逆性以及其它綜合農(nóng)藝性狀，在開(kāi)花期間檢查Fl植株的育性，篩選不育株率和花朵不育度均為100%的不育株,其中1份材料(父本為03 —12)的不育株在低溫下幼苗不黃化，生殖生長(zhǎng)期花朵開(kāi)放正常，雄蕊均退化，雌蕊正常，蜜腺大，花蜜多，植株直立，葉片深綠，有蠟粉，抽薹分枝多，分枝半直立，枝條挺立，光合能力強(qiáng)等綜合性狀優(yōu)良，然后將Fl與回交父本03 - 12 (回交父本03 - 12種子分批多年播種，且回交父本較細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料提前10天、同天、推后10天分3次播種，調(diào)節(jié)花期，花期相遇時(shí)進(jìn)行人工剝蕾或花期套袋回交，第四年11月上旬獲得BCl種子，將BCl于當(dāng)年秋季(11月下旬)播種，待植株有5葉I心時(shí)，進(jìn)行春化(條件與上述植株春化條件相同)，春化后，將植株置于溫度為15~28°C大棚環(huán)境中，大棚內(nèi)溫度、相對(duì)濕度調(diào)節(jié)同前述，保持土壤濕潤(rùn)，開(kāi)花時(shí)選取部分植株單株套袋自交檢查其育性，發(fā)現(xiàn)不育率和不育度為100%，然后BCl為母本與03 — 12 (與BCl種植方法相同)回交，得到回交二代BC2。
[0042]將BC2于第五年夏季出月底)播種，待植株有5葉I心時(shí)時(shí)，進(jìn)行春化(條件與上述植株春化條件相同)，春化后，將植株置于溫度28°C以下的大棚中，進(jìn)行加代繁殖，即BC2與03 — 12回交，得到回交三代BC3 ； [0043]第五年秋季(11月下旬)將BC3播種，春化，春化后將植株置于溫度為15~28°C大棚中，開(kāi)花后選部分植株套袋自交，檢查不育率為100%，BC3與03 - 12回交得到回交四代 BC4。
[0044]將BC4于第六年夏季(6月底)播種，春化，春化后，將植株置于溫度28°C以下的大棚中，進(jìn)行加代繁殖，11月上旬選育出I個(gè)綜合農(nóng)藝性狀優(yōu)良及不育性穩(wěn)定的不育系CMS08 - 2 ;同時(shí)回交父本(03 - 12)為相應(yīng)的雄性不育系CMS08 — 2的保持系03 — 12。
[0045]第七年3月下旬，不育系CMS08 — 2與其它優(yōu)良且穩(wěn)定的DH株系親本試配雜交組合82個(gè)，當(dāng)年8月初參加田間品種比較試驗(yàn)，進(jìn)行田間鑒定、篩選，配合力測(cè)定，最終選育出性狀優(yōu)良的早熟、抗病松散型紫花椰菜新品種紫玉60 (CMS08-2X09- 16)，該品種較圓玉(CK)早熟10天、采收期長(zhǎng)約10天、產(chǎn)量3265.3Kg/667 m2，較圓玉(CK) 3102.8Kg/667 m2增產(chǎn)5.2%，抗菌核病，黑腐病性強(qiáng)、口感脆甜，綜合農(nóng)藝性狀表現(xiàn)優(yōu)良，見(jiàn)表6，表7。
[0046]二紫玉60特征特性
[0047]早熟，定植后60天即可開(kāi)始采收。植株半直立、株高約58cm,開(kāi)展度約60cm,葉片深綠色，花球松散，花球重lOOOg，花莖長(zhǎng)19 - 23 Cm，花莖粗約2.3cm，花球紫色，花莖紫色，肉質(zhì)脆甜，品質(zhì)優(yōu)，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)，采收期長(zhǎng)達(dá)10天。
[0048]三繁殖、制種技術(shù)要點(diǎn)
[0049]I親本繁殖:采用簡(jiǎn)易大棚采種，不育系與相應(yīng)的保持系以1:2栽培。開(kāi)花期在棚內(nèi)放蜜蜂授粉，每個(gè)大棚2箱，花期過(guò)后拔除保持系。從不育系植株采種得到母本種子。父本采種棚在開(kāi)花期通過(guò)蜜蜂授粉，提高采種質(zhì)量。
[0050]2雜種一代制種技術(shù):
[0051](I)嚴(yán)格隔離:在制種基地一定要采取嚴(yán)格隔離措施，最好是自然屏障隔離，隔離距離應(yīng)在1500米以上。
[0052](2)播期調(diào)整:以本發(fā)明的不育系CMS08 — 2為母本，優(yōu)良DH株系親本09 — 16為父本進(jìn)行雜交制種。由于父母本的花期不一致，在制種時(shí)為了能使父母本花期相遇，提高種子產(chǎn)量，在播種時(shí)需要根據(jù)制種地氣候條件調(diào)整父母本的播種期。
[0053](3)定植比例:一般情況下，父本與母本按照1:2進(jìn)行定植。
[0054](4)田間管理:在江蘇地區(qū)，一般9月下旬播種，72孔穴盤(pán)育苗，5_6葉直接定植簡(jiǎn)易大棚避雨栽培，氣溫達(dá)30°C以上時(shí)四周通風(fēng)，開(kāi)花前注意雜株的及時(shí)發(fā)現(xiàn)和拔除。開(kāi)花期在棚內(nèi)放蜜蜂授粉，每個(gè)大棚2箱，花期過(guò)后拔除父本系。加強(qiáng)田間病蟲(chóng)害的管理。
[0055]表1紫花椰菜DH自交系03 — 12與白花椰菜胞質(zhì)雄性不育系CMS05 — 6回交轉(zhuǎn)
育后代性狀
[0056]
【權(quán)利要求】
1.一種早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，包括以下步驟: 第一步、將松散型白花椰菜和半緊實(shí)型紫花椰菜雜交得到種子Fl ； 第二步、將Fl播種，當(dāng)小苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)采用低溫處理后定植，選擇早熟、抗病、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好的松散型紫花椰菜單株進(jìn)行自交得到種子F2 ； 第三步、將F2播種，當(dāng)小苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)采用低溫處理后定植，田間鑒定選擇早熟、抗病性強(qiáng)、抗逆性強(qiáng)、品質(zhì)好的松散型紫花椰菜單株，選擇單株上單核靠邊期至雙核早期、花瓣與花藥長(zhǎng)度比在0.5 — 0.8之間的花蕾，進(jìn)行小孢子培養(yǎng)得到單倍體材料； 第四步、將所述單倍體材料在田間自然加倍得到DH植株，進(jìn)行自交留種，分別編號(hào)播種，待苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)，采用低溫處理后定植，加代處理并按照第三步的標(biāo)準(zhǔn)選擇優(yōu)良的松散型紫花椰菜DH株系； 第五步、按照第三步的標(biāo)準(zhǔn)選擇所述松散型紫花椰菜DH株系作為輪回親本，與白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育源進(jìn)行雜交，獲得雜交種子； 第六步、將所述雜交種子播種后，待苗長(zhǎng)至5葉I心時(shí)，低溫處理后定植，加代處理，進(jìn)行田間鑒定，選擇植株低溫下幼苗不黃化，生殖生長(zhǎng)期花朵開(kāi)放正常，雄蕊退化，雌蕊正常，花器官發(fā)育正常，蜜腺大，花蜜多，以及不育株率和不育度100%的松散型紫花椰菜不育系單株； 第七步、將所述松散型紫花椰菜DH株系作為回交父本與第六步所述松散型紫花椰菜不育系單株進(jìn)行4-5代回交轉(zhuǎn)育，得到松散型紫花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系，所述松散型紫花挪采DH株系為其保持系； 第八步、以所述松散型紫花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育系為母本，以所述松散型紫花椰菜DH株系為父本進(jìn)行雜交，經(jīng)田間觀(guān)察、鑒定、小區(qū)評(píng)比，生產(chǎn)試驗(yàn)，篩選出性狀優(yōu)良的松散型紫花椰菜雜交組合，即松散型紫花椰菜新品種。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，其特征在于:所述第一步中，松散型白花椰菜選用植株直立，葉片綠色，花球半圓、頂略平，花球松，花枝長(zhǎng)18~24 Cm，球色乳白色，蕾粒細(xì)，單球質(zhì)量700 — 800g,花器官發(fā)育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開(kāi)花習(xí)性良好，易授粉，結(jié)莢長(zhǎng)，結(jié)實(shí)率高，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)的植株；所述半緊實(shí)型紫花椰菜選用植株直立，葉片綠色，花球半圓形，花球略松，花枝長(zhǎng)8~12 Cm，球色深紫色，蕾粒細(xì)，單球質(zhì)量800 — lOOOg，花器官發(fā)育正常，花瓣顏色濃黃，柱頭直立，蜜腺大，花蜜多，開(kāi)花習(xí)性良好，易授粉，結(jié)莢長(zhǎng)，結(jié)實(shí)率高，抗病性強(qiáng)，抗逆性強(qiáng)的植株。
3.根據(jù)權(quán)利要求1所述早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，其特征在于:所述第一步中，采用花期人工去雄配制雜交一代種子Fl。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，其特征在于:所述第四步中，所述DH植株依據(jù)植株形態(tài)特征法選擇植株無(wú)黃化，無(wú)畸形葉，葉色、葉形正常、植株生長(zhǎng)正常，花球蕾粒發(fā)育正常，花粉量大，能正常結(jié)實(shí)，進(jìn)行田間鑒定。
5.根據(jù)權(quán)利要求1所述早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，其特征在于:所述第五步中，DH株系的單株與白花椰菜細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料CMS05 — 6進(jìn)行人工剝蕾或花期套袋雜交，露出柱頭后，將優(yōu)良且穩(wěn)定松散型紫花椰菜DH株系單株的花粉涂于其上，柱頭正常膨大，獲得雜交種子。
6.根據(jù)權(quán)利要求1所述早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，其特征在于:所述低溫處理的條件是溫度5.4~11.6°C，光照度2000Lx的光照培養(yǎng)箱內(nèi)春化處理20天。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述早熟、抗病、松散型紫花椰菜的育種方法，其特征在于:所述加代處理是每年加1-2代，具體是將收下的種子脫粒干凈，去掉癟籽、破子，曬干，于I月初穴盤(pán)育苗，白天18-22°C，夜晚15 - 18°C，5葉I心時(shí)放置光照培養(yǎng)箱，白天8 — 10°C，夜晚6 — 7°C，培養(yǎng)20天 后即可定植，常年溫度控制在15-28°C之間，在花球形成初期至抽薹開(kāi)花初期，白天10:30 — 14:30，大棚內(nèi)用霧化裝置，保持大棚內(nèi)空氣相對(duì)濕度在70% — 80%之間，土壤保持濕潤(rùn)，田間鑒定菌核病、黑腐病等病害的抗性以及抗逆性的強(qiáng)弱，確保優(yōu)選單株的抗病性強(qiáng)、抗逆性強(qiáng)，定植后待抽薹開(kāi)花，進(jìn)行人工回交授粉，轉(zhuǎn)育早代，回交父本較細(xì)胞質(zhì)雄性不育源材料提前10天、同天、推后10天分3次播種，調(diào)節(jié)花期，花期相遇時(shí)進(jìn)行人工剝蕾或花期套袋雜交，5月底6月初收獲；6月下旬再次播種，方法同上，11月底12月初即可收獲，實(shí)現(xiàn)一年2代加代快速選育。
8.一種早熟、抗病、松散型紫花椰菜的培育方法，包括以下步驟:采用簡(jiǎn)易大棚采種，不育系與相應(yīng)的保持系以1:2栽培，開(kāi)花期在棚內(nèi)放蜜蜂授粉，每個(gè)大棚2箱，花期過(guò)后拔除保持系，從不育系植株采種得到母本種子，父本采種棚在開(kāi)花期通過(guò)蜜蜂授粉，提高采種質(zhì)量。
9.根據(jù)權(quán)利要求8所述早熟、抗病、松散型紫花椰菜的培育方法，其特征在于:培育基地采用自然屏障隔離，隔離距離在1500米以上，父本與母本按照1:2進(jìn)行定植，定植至簡(jiǎn)易大棚避雨栽培，氣溫30°C以上時(shí)四周通風(fēng)，開(kāi)花前注意雜株的及時(shí)發(fā)現(xiàn)和拔除，開(kāi)花期在棚內(nèi)放蜜蜂授粉，每個(gè)大棚2箱，花期過(guò)后拔除父本系，加強(qiáng)田間病蟲(chóng)害的管理。
【文檔編號(hào)】A01H1/04GK103975849SQ201410232173
【公開(kāi)日】2014年8月13日 申請(qǐng)日期:2014年5月28日 優(yōu)先權(quán)日:2014年5月28日
【發(fā)明者】秦文斌, 戴忠良, 吳國(guó)平, 毛忠良, 潘躍平, 姚悅梅, 潘永飛, 張振超, 王建華, 陳智超, 肖燕, 劉小鳳 申請(qǐng)人:鎮(zhèn)江瑞繁農(nóng)藝有限公司