金合歡提取物、制取方法及其用途
【專利摘要】一種金合歡的提取物，先使用極性溶劑進(jìn)行提取，所得粗提液經(jīng)吸附樹脂吸附并以水和乙醇組成的洗脫液洗脫后制得。本發(fā)明以單一的金合歡植物為原材料制取，簡單高效，對(duì)酪氨酸酶活性具有抑制作用，即可應(yīng)用于化妝品，也可制成食品、動(dòng)物用飼料、藥品和準(zhǔn)藥品等。
【專利說明】金合歡提取物、制取方法及其用途

【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種植物提取物，尤其涉及一種金合歡植物的提取物、制取方法以及 其在化妝品，或在食品、動(dòng)物用飼料、藥品和準(zhǔn)藥品等中的應(yīng)用。

【背景技術(shù)】
[0002] 膚色是人們審美的標(biāo)準(zhǔn)之一。對(duì)于亞洲女性，白皙膚色更是一種普遍追求。為此， 各種產(chǎn)品應(yīng)運(yùn)而生，如：增白產(chǎn)品、防紫外線產(chǎn)品和膜產(chǎn)品等。
[0003] 經(jīng)研究，皮膚顏色由皮膚細(xì)胞中所含的各種色素綜合決定。在眾多色素中，黑素細(xì) 胞中所含的黑色素量是最主要的決定因素。進(jìn)一步研究證實(shí)，酪氨酸酶（EC1. 14. 18. 1)是 黑色素合成的關(guān)鍵酶。由此，通過抑制酪氨酸酶活性，以減少黑色素生成，從而達(dá)到美白的 護(hù)膚效果成為研發(fā)護(hù)膚產(chǎn)品的重要依據(jù)之一（實(shí)用醫(yī)學(xué)雜志[刀，2005,21，1364-1366;廈 門大學(xué)學(xué)報(bào)（自然科學(xué)版）[J]，2007,46,274-282)。在這些產(chǎn)品中常用的美白劑如：氫醌、 曲酸、熊果苷和Vc衍生物等幾種，這些物質(zhì)或穩(wěn)定性較差而難以實(shí)現(xiàn)清除活潑氧的作用， 或具有相當(dāng)?shù)募?xì)胞毒性。因此，酪氨酸酶抑制劑的安全性是美白護(hù)膚產(chǎn)品研發(fā)過程中需要 并重考慮的因素。
[0004] 日本專利特開平10-25238公開了一種皮膚外用劑，該用于皮膚外用的制劑包含 通過將金合歡屬植物黑荊（Acacia mearnsii De Wild.)的樹皮和日本落葉松的心材等用 溶劑如：甲醇、丙酮、乙醇或水等溶劑提取和柱分離等手段得到提取物。其中，黑荊提取物具 有抑制酪氨酸酶活性。
[0005] 中國發(fā)明專利ZL200680055582. 7公開了一種含有來自金合歡屬樹皮的物質(zhì)的抗 氧化組合物，以水、醇或醇溶液提取金合歡屬植物的樹皮而得。該組合物可應(yīng)用于食品、動(dòng) 物用飼料、藥品、準(zhǔn)藥品和化妝品等。但并未公開該組合物具有酪氨酸酶抑制作用，也未公 開金合歡屬植物具有美白作用。
[0006] 來源于天然植物的具有酪氨酸酶抑制劑作用的物質(zhì)或組合物具有安全性高，成本 低廉等優(yōu)點(diǎn)，正日漸得到護(hù)膚產(chǎn)業(yè)的重視。


【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 本發(fā)明的一個(gè)目的在于提供一種金合歡提取物的制取方法。
[0008] 本發(fā)明的另一個(gè)目的在于提供一種金合歡提取物，具有抑制酪氨酸酶活性的作 用。
[0009] 本發(fā)明的又一個(gè)目的在于提供一種金合歡的提取物，以此護(hù)理皮膚具有美白效 果，使用安全，對(duì)人體皮膚無任何副作用。
[0010] 本發(fā)明的再一個(gè)目的在于提供一種金合歡的提取物，作為活性組分應(yīng)用于食品、 動(dòng)物用飼料、藥品、準(zhǔn)藥品和化妝品等產(chǎn)品。
[0011] 本發(fā)明所稱的"金合歡"是指植物澳洲金合歡（Acacia dealbata link.)，尤其是 其花蕾、樹皮和樹葉。
[0012] 如技術(shù)人員通常所能理解的，提高表面積有利于物質(zhì)的溶出率，從而提高活性成 分的提取效果。因此，加工方法，如：切成塊、片和條，尤其是制成粉末(如：平均粒徑小于 2. 5mm)等方式制得的金合歡也應(yīng)包括于本發(fā)明。
[0013] 本發(fā)明所稱的"提取物"是指提取自金合歡的含有一種或多種具有抑制酪氨酸酶 活性物質(zhì)的組合物或混合物。各個(gè)活性物質(zhì)按比例簡單混合，或與其它物質(zhì)形成另一種形 式，如：但不僅限于膠束、脂質(zhì)體和懸濁液等。
[0014] 本發(fā)明所稱的"活性物質(zhì)"或"活性成分"是指通過體外酶抑制實(shí)驗(yàn)證明能夠抑制 酪氨酸酶活性的化合物、聚合物、核酸、多肽、蛋白質(zhì)及各自以離子鍵、共價(jià)鍵、配位鍵或疏 水相互作用等化學(xué)鍵形成的復(fù)合物和結(jié)合物。
[0015] 本發(fā)明所稱的"加工"或"預(yù)加工"應(yīng)理解為以物理方式對(duì)原材料進(jìn)行的分解或拆 分，以各種方式(如：切、鋸、壓、研磨、攪拌或粉碎等）將體積較大的材料分為體積較小的材 料，如：段狀、塊狀、片狀、條狀、顆粒狀、粉狀或末狀。
[0016] 本發(fā)明所稱的"極性溶劑"是指含有羥基或羰基等極性基團(tuán)的有機(jī)溶劑，如：但 不僅限于水、甲酰胺、二甲基甲酰胺、六甲基磷酰胺、四甲基乙二胺、三乙胺、三丁胺、三辛 胺、乙酸、三氟乙酸、乙腈、甲酸甲酯、乙酸乙酯、碳酸二甲酯、二甲亞砜、丙酮、甲乙酮、二氧 六環(huán)、吡啶、四氫呋喃、甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇和乙醚等一種或幾種，優(yōu)先選擇乙醇水 溶液，濃度為 30v/v%-90v/v%，或?yàn)?50v/v%-90v/v%，或?yàn)?30v/v%-39v/v%、40v/v%-49v/v%、 50v/v%_70v/v% 和 70v/v%_90v/v% 之一種或幾種，或?yàn)?50v/v%、51v/v%、52v/v%、53v/v%、 54v/v%>55v/v%>60v/v%>65v/v%>66v/v%>67v/v%>68v/v%>69v/v%>70v/v%>71v/v%>72v/v%> 73v/v%、74v/v%、75v/v%、76v/v%、77v/v%、78v/v%、79v/v%、80v/v%、81v/v%、82v/v%、83v/v%、 84v/v%、85v/v%、86v/v%、87v/v%、88v/v%、89v/v% 和 90v/v% 之一種或幾種。
[0017] 本發(fā)明所稱的"吸附樹脂"是本領(lǐng)域一般技術(shù)人員所了解的大孔吸附樹脂，優(yōu)先選 擇弱極性的或中等極性的吸附樹脂，如：但不僅限于X-5、AB-8、D101、XDA-6、LX-21、NK-9、 D3520和WLD等，尤其是AB-8樹脂。
[0018] 本發(fā)明中，金合歡提取物所用的極性溶劑量并沒有特別的限定，應(yīng)使金合歡與極 性溶劑充分接觸。適用于本發(fā)明的極性溶劑用量，如：但不僅限于使用重量5-60倍，或 10-20倍，或10-50,或20-50倍于金合歡的極性溶劑即可對(duì)金合歡原材料取得良好的提取 效果。重量倍數(shù)如：但不僅限于 10、15、20、25、26、27、28、29、30、31、32、33、34、35、36、37、 38、39、40、41、42、43、44、45、46、47、48、49、50、51、52、53、54、55、56、57、58、59 和 60 能較好 的適用于本發(fā)明并取得提取效果。
[0019] 極性溶劑能浸潤金合歡，但活性物質(zhì)的浸出率或溶出率仍較低，有必要采用進(jìn)一 步方法如：但不僅限于煎、煮、回流、攪拌、勻漿和超聲等提取方式，以提高作業(yè)效率。這些方 法可單獨(dú)或組合使用，也可以重復(fù)多次。上述提取方式經(jīng)適量的時(shí)間（不超過2小時(shí))如：但 不僅限于〇. 5-1. 0小時(shí)，0. 5-2. 0小時(shí)以及1. 0-2. 0小時(shí)等即可增加活性物質(zhì)的浸出率或溶 出率。
[0020] 洗脫液洗脫是本發(fā)明獲得活性物質(zhì)的關(guān)鍵步驟之一，有助于提取物對(duì)酪氨酸酶 抑制效果的提高，但是其洗脫的具體方式，如：線性梯度洗脫、等度洗脫和階梯式梯度洗脫 等不得限定本發(fā)明。為了適應(yīng)生產(chǎn)規(guī)模和分離介質(zhì)(如：吸附樹脂）的需要，本領(lǐng)域技術(shù)人 員可選擇并適用任何一種或幾種洗脫方式，并收集相應(yīng)的洗脫液。本發(fā)明提供的洗脫方 式，如：以水和乙醇組成洗脫液，依次以水、20v/v%±5v/v%乙醇、40v/v%±5v/v%乙醇、60v/ v%±5v/v%乙醇和80v/v%±5v/v%乙醇進(jìn)行洗脫，形成總梯度為20v/v%_80v/v%乙醇洗脫 方式，并分別收集洗脫液；又如：以水和乙醇組成洗脫液，依次以水、40v/v%±5v/v%乙醇 和80v/v%±5v/v%乙醇進(jìn)行洗脫，并分別收集洗脫液；再如：以水和乙醇組成洗脫液，進(jìn)行 20v/v%_80v/v%乙醇、20v/v%_60v/v%乙醇或30v/v%_50v/v%乙醇線性梯度洗脫，并收集洗 脫液。
[0021] 本發(fā)明提供的一種金合歡提取物的制取方法，使用極性溶劑對(duì)金合歡進(jìn)行提取， 如：但不僅限于施以煎、煮、回流、攪拌、勻漿和超聲之一種或幾種提取方式處理而得金合歡 粗提液，再經(jīng)吸附樹脂吸附后，以水和乙醇組成的洗脫液洗脫，并收集洗脫液而得。
[0022] 經(jīng)測定，以本發(fā)明提供的方法制得各種金合歡的提取物，具有抑制酪氨酸酶活性 的作用，能顯著抑制黑色素生成。進(jìn)一步實(shí)驗(yàn)驗(yàn)證，以此護(hù)理皮膚具有美白效果，可應(yīng)用于 食品、動(dòng)物用飼料、藥品、準(zhǔn)藥品和化妝品等產(chǎn)品。
[0023] 本發(fā)明技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的有益效果：
[0024] 本發(fā)明以單一的金合歡植物為原材料，尤其是金合歡植物的花蕾、樹皮和樹葉，使 產(chǎn)品質(zhì)量可控，效用穩(wěn)定。
[0025] 本發(fā)明先使用極性溶劑進(jìn)行提取，所得粗提液經(jīng)吸附樹脂吸附并洗脫后制得金合 歡提取物。該技術(shù)方案簡單高效，適合于以工業(yè)化方式對(duì)金合歡植物中的活性物質(zhì)進(jìn)行提 取、利用和開發(fā)。
[0026] 本發(fā)明制取提取物的方法安全可靠，便于在食品、動(dòng)物用飼料、藥品、準(zhǔn)藥品和化 妝品等產(chǎn)品中的應(yīng)用。

【專利附圖】

【附圖說明】
[0027] 圖1為本發(fā)明金合歡提取物對(duì)黑色素生成的抑制作用；其中，A表示該欄為采用實(shí) 施例2制得的提取物對(duì)黑色素生成的抑制情況；B表示該欄為實(shí)施例3制得的提取物對(duì)黑 色素生成的抑制情況；C表示實(shí)施例4制得的提取物對(duì)黑色素生成的抑制情況。

【具體實(shí)施方式】
[0028] 以下結(jié)合附圖詳細(xì)描述本發(fā)明的技術(shù)方案。本發(fā)明實(shí)施例僅用以說明本發(fā)明的技 術(shù)方案而非限制，盡管參照較佳實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了詳細(xì)說明，本領(lǐng)域的普通技術(shù)人員 應(yīng)當(dāng)理解，可以對(duì)發(fā)明的技術(shù)方案進(jìn)行修改或者等同替換，而不脫離本發(fā)明技術(shù)方案的精 神和范圍,其均應(yīng)涵蓋在本發(fā)明的權(quán)利要求范圍中。
[0029] 實(shí)施例1金合歡提取條件的優(yōu)選
[0030] 新鮮金合歡l〇g，采用L9 (34)正交試驗(yàn)(藥物研究常用數(shù)學(xué)方法及計(jì)算機(jī)程序[P]， 貴州科技出版社，1997)進(jìn)行提取工藝的優(yōu)化，以料液比（A)、乙醇濃度（B)、提取時(shí)間（C)為 試驗(yàn)因素，以及空白列（D)。以提取率為指標(biāo)進(jìn)行正交設(shè)計(jì)試驗(yàn)，優(yōu)化提取工藝條件。因素 水平設(shè)計(jì)見表1，其中從生產(chǎn)成本考慮，提取時(shí)間一般不超過2小時(shí)，結(jié)果見表2。
[0031] 表1正交試驗(yàn)因素水平
[0032]

【權(quán)利要求】
1. 一種制取金合歡提取物的方法，其特征在于使用極性溶劑對(duì)金合歡進(jìn)行提取處理而 得金合歡粗提液，再經(jīng)吸附樹脂吸附后，以水和乙醇組成的洗脫液洗脫，并收集洗脫液。
2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制取金合歡提取物的方法，其特征在于所述極性溶劑為乙醇 水溶液。
3. 根據(jù)權(quán)利要求2所述的制取金合歡提取物的方法，其特征在于所述乙醇水溶液的濃 度為 50v/v% - 90v/v%。
4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制取金合歡提取物的方法，其特征在于所述極性溶劑的用量 為金合歡重量的5-60倍。
5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制取金合歡提取物的方法，其特征在于所述洗脫液為20v/ v%_80v/v% 乙醇。
6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的制取金合歡提取物的方法，其特征在于所述吸附樹脂為 AB-8。
7. -種根據(jù)權(quán)利要求1-6之一所述的制取金合歡提取物的方法獲得的金合歡提取物。
8. -種含有權(quán)利要求7所述的金合歡提取物在美白領(lǐng)域的應(yīng)用。
9. 一種含有權(quán)利要求7所述的金合歡提取物用于清除自由基。
10. -種含有權(quán)利要求7所述的金合歡提取物在抑制酪氨酸酶活性中的應(yīng)用。
11. 根據(jù)權(quán)利要求8-10之一所述的金合歡提取物的應(yīng)用，其特征在于用于制成食品、 動(dòng)物用飼料、藥品、準(zhǔn)藥品或化妝品。
【文檔編號(hào)】A23K1/14GK104147089SQ201310179899
【公開日】2014年11月19日 申請日期:2013年5月15日 優(yōu)先權(quán)日:2013年5月15日
【發(fā)明者】方兆華, 李慧, 夏增華, 曹平 申請人:伽藍(lán)（集團(tuán)）股份有限公司