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一種降鈣素原(pct)定量檢測試劑盒的制作方法

文檔序號:10139714閱讀:984來源:國知局
一種降鈣素原(pct)定量檢測試劑盒的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本實(shí)用新型涉及檢測試劑盒,具體涉及一種降鈣素原(PCT)定量檢測試劑盒。
【背景技術(shù)】
[0002]目前,PCT的檢測方法較多,不僅可以定性亦可以做到定量檢測。常用的方法有下述幾種:放射免疫分析法、化學(xué)發(fā)光法、電化學(xué)發(fā)光法、透射免疫濁度法、干式免疫熒光法及膠體金比色法。
[0003]放射免疫分析法利用人工合成的多克隆抗體特異地識別和連接合成氨基酸降鈣素原。該法檢測耗時長(19?22h),而且有放射性元素的污染,使用受到限制。化學(xué)發(fā)光法(ILMA)運(yùn)用雙單克隆抗體(降鈣素原抗體和抗降鈣素原抗體),分別與PCT分子結(jié)合,可排除交叉反應(yīng)。但該方法操作費(fèi)時,操作人員必須具備專門的操作技能,2h后才可以出結(jié)果。電化學(xué)發(fā)光法靈敏度高、線性范圍寬、適用面廣,但電化學(xué)發(fā)光法測定需要專門的儀器及配套試劑,且多為進(jìn)口,成本較為昂貴,在基層實(shí)驗(yàn)室很難開展。透射免疫濁度法是將樣品中的PCT與試劑中的PCT單克隆抗體發(fā)生抗原-抗體反應(yīng),使反應(yīng)液濁度增加,并在一定范圍內(nèi)反應(yīng)液濁度與所加入抗原的量呈線性關(guān)系。但該方法準(zhǔn)確度低。干式免疫熒光法運(yùn)用免疫層析技術(shù),將熒光標(biāo)記的降鈣素原單克隆抗體包被于試紙條上,檢測樣本與試紙條上的標(biāo)記抗體混合,根據(jù)熒光抗體的信號強(qiáng)度測量降鈣素原的含量。此方法制備簡單,操作成本低,但由于標(biāo)記抗體與抗原的結(jié)合為固相反應(yīng),使其反應(yīng)不夠充分,活性較差,影響檢測結(jié)果。膠體金比色法采用膠體金技術(shù),包括膠體金標(biāo)記的抗降鈣素原的單克隆抗體和用作包被的抗降鈣素原多克隆抗體,當(dāng)標(biāo)本(血清或血漿)加入標(biāo)本孔,金標(biāo)單克隆抗體與標(biāo)本中的PCT結(jié)合,形成金標(biāo)記的抗原抗體復(fù)合物。該法具有快速簡便,易觀察的特點(diǎn),但無法準(zhǔn)確測定PCT含量。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本實(shí)用新型所要解決的技術(shù)問題是提供一種降鈣素原(PCT)定量檢測試劑盒。
[0005]本實(shí)用新型是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的:一種降鈣素原(PCT)定量檢測試劑盒,包括檢測緩沖液、檢測板和ID芯片,其特征是:所述檢測緩沖液為熒光染料標(biāo)記的PCT單克隆抗體;所述檢測板包括外包裝板塊和試紙條;外包裝板塊分為加樣區(qū)、反應(yīng)區(qū)和吸水區(qū);所述試紙條為多層膜結(jié)構(gòu)且包被有PCT單克隆抗體和羊抗鼠抗體。
[0006]進(jìn)一步的,所述試紙條的多層膜結(jié)構(gòu)包括底板,以及在底板上依次搭接地粘貼玻璃纖維、固相抗體反應(yīng)膜和上端吸水紙;所述多層膜的各層膜之間緊密相連且至少部分重置。
[0007]進(jìn)一步的,加樣區(qū)對應(yīng)試紙條的玻璃纖維;反應(yīng)區(qū)對應(yīng)試紙條的固相抗體反應(yīng)膜;為硝酸纖維素膜上包被檢測線和質(zhì)控線;所述檢測線包被與標(biāo)記抗體配對的PCT單克隆抗體;所述質(zhì)控線包被羊抗鼠抗體;吸水區(qū)對應(yīng)試紙條的上端吸水紙。
[0008]該實(shí)用新型的有益之處是,本實(shí)用新型檢測原理應(yīng)用免疫熒光雙抗體夾心法,檢測緩沖液中含有熒光染料標(biāo)記的PCT單克隆抗體,試紙條的檢測線包被與標(biāo)記抗體配對的PCT單克隆抗體,標(biāo)記抗體與包被抗體為協(xié)同抗體,能與抗原的多個位點(diǎn)結(jié)合,形成雙抗體夾心復(fù)合物,配對抗體與樣本中的抗原緊密的結(jié)合在一起,可排除因檢測樣本中各種各樣蛋白質(zhì)的非特異性吸附產(chǎn)生的干擾,所形成的雙抗體夾心免疫復(fù)合物穩(wěn)定性好,具有靈敏度高,特異性強(qiáng)等優(yōu)點(diǎn)。并且檢測緩沖液中以新型熒光染料替代傳統(tǒng)的膠體金、量子點(diǎn)和熒光顆粒,進(jìn)一步提高了檢測的靈敏度和準(zhǔn)確性。為臨床診斷提供了可靠的依據(jù)。本實(shí)用新型以液相反應(yīng)取代固相反應(yīng),與傳統(tǒng)的試紙條檢測方法相比,液相反應(yīng)具有材料混合均一,穩(wěn)定性好,反應(yīng)活性高等優(yōu)勢,增加檢測結(jié)果的準(zhǔn)確性。綜上所述,本實(shí)用新型具有檢測靈敏度高,準(zhǔn)確性好,可定量檢測等優(yōu)點(diǎn)。
【附圖說明】
[0009]圖1是本實(shí)用新型實(shí)施例的試紙條與外包裝板塊的整體結(jié)構(gòu)示意圖;
[0010]圖2是本實(shí)用新型實(shí)施例的試紙條與外包裝板塊的裝配圖。
[0011 ] 圖中,1玻璃纖維,2硝酸纖維素膜,3上端吸水紙,4底板,5檢測線,6質(zhì)控線,7試紙條,8加樣區(qū),9反應(yīng)區(qū),10吸水區(qū),11外包裝板塊。
【具體實(shí)施方式】
[0012]下面,結(jié)合附圖以及【具體實(shí)施方式】,對本實(shí)用新型做進(jìn)一步描述:
[0013]本實(shí)用新型提供了一種可定量檢測降鈣素原的試劑盒,其利用具有優(yōu)良特性的新型熒光染料作為標(biāo)記物,結(jié)合免疫熒光雙抗體夾心法,實(shí)現(xiàn)血清、血漿的降鈣素原的檢測。
[0014]如圖1所示,一種降鈣素原(PCT)定量檢測試劑盒,包括檢測緩沖液、檢測板和ID芯片。所述檢測緩沖液為熒光染料標(biāo)記的PCT單克隆抗體;所述檢測板包括外包裝板塊11和試紙條7 ;外包裝板塊11分為加樣區(qū)8、反應(yīng)區(qū)9和吸水區(qū)10 ;所述試紙條7為多層膜結(jié)構(gòu)且包被有PCT單克隆抗體和羊抗鼠抗體。所述ID芯片已確定好了線性,由該試劑盒配套的免疫熒光定量分析儀檢測系列質(zhì)控品得到。
[0015]本實(shí)用新型檢測降鈣素原的檢測板呈長條狀,包括外包裝板塊11,以及設(shè)置與外包裝板塊11內(nèi)部的試紙條7。
[0016]所述試紙條7包括底板4以及依次搭接地粘貼于底板4上的玻璃纖維1、硝酸纖維素膜2和上端吸水紙3等各層膜結(jié)構(gòu),各層之間緊密相連且部分重疊。
[0017]底板4為低熒光特性,承載前述各種膜結(jié)構(gòu),其根據(jù)試紙條7的形狀對應(yīng)裁剪而成,如本實(shí)施例為長條形。
[0018]玻璃纖維1為待檢樣品收集區(qū),其前端搭接粘貼于底板4前端上,后端搭接覆蓋于硝酸纖維素膜2前端。
[0019]硝酸纖維素膜2是一種低熒光特性膜,該膜上劃設(shè)有兩條平行帶5、6,兩平行帶5、6沿硝酸纖維素膜2的寬度方向設(shè)置并間隔一定距離,且具有一定深度。硝酸纖維素膜2的前端搭設(shè)于玻璃纖維1與底板4上端吸水紙3之間且搭接粘貼于底板4上。
[0020]硝酸纖維素膜2包含一條包被有PCT單克隆抗體的檢測線5和一條包被有羊抗鼠抗體的質(zhì)控線6。該檢測線5和質(zhì)控線6分別為對應(yīng)包被在硝酸纖維素膜2的兩條平行帶。
[0021]上端吸水紙3對應(yīng)板塊的吸水區(qū),其前端覆蓋于硝酸纖維素膜2后端一定長度,其后端彳合接于底板4后端。
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