氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定茶葉中蒽醌殘留量的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明涉及一種測(cè)定茶葉中污染物殘留量的方法，尤其涉及一種氣相色譜-質(zhì)譜 /質(zhì)譜測(cè)定茶葉中蒽醌殘留量的方法。
【背景技術(shù)】
[0002] 蒽醌（AnthraquinoneAQ，CASNo84-65-1，C14Hs02)是一種應(yīng)用廣泛的化學(xué)產(chǎn)品。 作為蒽醌型染料的母體，9, 10-蒽醌是合成分散染料、酸性染料、還原染料以及活性染料的 母體；作為造紙過程的添加劑，9, 10-蒽醌可以加快脫木素的速度，提高紙漿得率；在農(nóng)業(yè) 方面，蒽醌曾被用作驅(qū)鳥劑應(yīng)用于稻田和油料作物種植區(qū)，目前9, 10-蒽醌在歐盟或其他 國(guó)家均未再有登記用于農(nóng)業(yè)生產(chǎn)。在我國(guó)，蒽醌也未在我國(guó)茶樹上及其他作物上登記使用。 雖然AQ被認(rèn)為低毒，但是EFSA(EuropeanFoodSafetyAuthority)在重評(píng)估報(bào)告中指出， AQ可能存在致癌風(fēng)險(xiǎn)。其分子結(jié)構(gòu)式如下所示：
[0003]
[0004] 歐盟規(guī)定蒽醌在茶葉中的最大殘留|很量（MRL)標(biāo)準(zhǔn)為0· 02mg/kg，中國(guó)未規(guī)定蒽 醌在茶葉中的最大殘留限量。文獻(xiàn)對(duì)茶葉中蒽醌未見報(bào)道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005] 為了解決上述的技術(shù)問題，本發(fā)明提供一種氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定茶葉中蒽 醌殘留量的方法，該方法簡(jiǎn)便、穩(wěn)定，測(cè)定低限為〇. 〇2mg/kg，并且完全滿足國(guó)內(nèi)外有關(guān)法規(guī) 對(duì)茶葉中蒽醌殘留的要求，可為茶葉蒽醌殘留的監(jiān)管提供技術(shù)支持。
[0006] 為了實(shí)現(xiàn)上述的目的，本發(fā)明采用了以下的技術(shù)方案：
[0007] 氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜測(cè)定茶葉中蒽醌殘留量的方法，該方法包括以下的步驟：
[0008] 1)樣品處理
[0009] 稱取茶葉試樣2g，于50mL離心管中，加入0. 5mL0. 2μg/mL蒽醌-D8溶液，再加入 20mL正己燒-丙酮溶液，正己燒-丙酮體積比為1 :1，以10 000r/min均質(zhì)0. 5min，加入2g 氯化鈉，禍旋lmin,以4 000r/min離心3min，將上層提取溶液轉(zhuǎn)移入濃縮瓶中，用20mL正 己烷-丙酮溶液清洗均質(zhì)器刀頭，并將此提取液倒入殘?jiān)校瑴u旋lmin，以4OOOr/min離 心3min，合并提取液，在45°C以下水浴減壓濃縮至近干，用3mL正己烷溶解殘?jiān)⑥D(zhuǎn)移至 弗羅里硅土凈化柱，通常再用50mL正己烷-乙醚混合溶劑洗脫，正己烷-乙醚體積比8:2， 流速為3mL/min，收集全部洗脫液，在45°C以下水浴減壓濃縮至近干，加入2.OmL丙酮溶解 殘?jiān)?，過0. 22μm濾膜，供氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜儀測(cè)定；
[0010] 2)測(cè)定
[0011] 標(biāo)準(zhǔn)工作液和樣品溶液在以下設(shè)定的氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜條件下進(jìn)樣：
[0012] ①蒽醌的質(zhì)譜參數(shù)
[0013]
[0014] 其中*代表定量離子；
[0015] ②氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜的儀器條件參數(shù)
[0016] 氣相色譜：
[0017] 色譜柱：HP-5MS，30m長(zhǎng)度X0. 25mm內(nèi)徑X0. 25μπι膜厚
[0018] 程序柱溫：100°C保持lmin，以20°C/min的速率升溫至300°C，保持lOmin
[0019] 流速：1.OmL/min
[0020] 進(jìn)樣量：1μL
[0021] 進(jìn)樣口溫：300°C
[0022] 進(jìn)樣方式不分流進(jìn)樣；
[0023] 質(zhì)譜條件：
[0024] 電離方式：EI
[0025] 電離能量：70eV
[0026] 離子源溫度：280°C
[0027] 四級(jí)桿溫度：不加溫
[0028] 接 口溫度：300Γ
[0029] 測(cè)定方式：選擇反應(yīng)監(jiān)測(cè)模式（SRM);
[0030] 定性確證時(shí)相對(duì)離子豐度的最大允許偏差：
[0031] 相對(duì)尚子豐度> 50%，允許的相對(duì)偏差±20%
[0032] 相對(duì)離子豐度> 20 %~50%，允許的相對(duì)偏差±25%
[0033] 相對(duì)離子豐度> 10 %~20%，允許的相對(duì)偏差±30%
[0034] 相對(duì)尚子豐度< 10%，允許的相對(duì)偏差±50% ;
[0035] 3)空白試驗(yàn)
[0036] 除不加試樣外，均按上述步驟1)、步驟2)操作步驟進(jìn)行；
[0037] 4)結(jié)果計(jì)算和表述
[0038] 用色譜數(shù)據(jù)處理機(jī)或按以下公式計(jì)算試樣中蒽醌的含量，計(jì)算結(jié)果須扣除空白 值：
[0039]
[0040] 式中：
[0041] --試樣中蒽醌的殘留量，單位為毫克每千克；
[0042] Cl--從標(biāo)準(zhǔn)曲線上得到蒽醌的溶液濃度，單位為微克每毫升；
[0043]V-樣液最終定容體積，單位為毫升；
[0044]m--最終樣液所代表的試樣質(zhì)量，單位為克；
[0045] 5)判斷
[0046] 以質(zhì)量濃度X為橫坐標(biāo)，峰面積比值Y為縱坐標(biāo)，繪制5點(diǎn)標(biāo)準(zhǔn)工作曲線，用標(biāo)準(zhǔn) 工作曲線對(duì)樣品進(jìn)行定量，樣品溶液中藥物的響應(yīng)值應(yīng)在儀器檢測(cè)的線性范圍內(nèi)；在上述 色譜條件下，判斷樣品中是否存在相應(yīng)的被測(cè)物，需要滿足如下條件：樣品溶液中出現(xiàn)的質(zhì) 量色譜峰保留時(shí)間與混合標(biāo)準(zhǔn)工作液一致，允許偏差小于±0. 5%，該色譜峰所對(duì)應(yīng)的藥物 在質(zhì)譜定性離子的相對(duì)豐度與濃度相當(dāng)?shù)幕旌匣|(zhì)標(biāo)準(zhǔn)工作液的相對(duì)豐度一致，相對(duì)豐度 偏差不超過上述的規(guī)定，則可確定含有該藥物。
[0047] 作為優(yōu)選，所述的弗羅里娃土凈化柱選用200mmX15mm內(nèi)徑玻璃柱，底部墊約5mm 高脫脂棉和約l〇mm高無(wú)水硫酸鈉，l〇g弗羅里娃土，弗羅里娃土的粒度75μπι~150μπι， 650°C灼燒4h，使用130°C活化4h在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，加2%的水脫活；頂端加約10mm 高無(wú)水硫酸鈉，用正己烷濕法裝柱，棄去淋洗液。
[0048] 本發(fā)明的測(cè)定方法采用氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定茶葉中蒽醌殘留量，方法簡(jiǎn) 便、快速、準(zhǔn)確、可靠，檢測(cè)限、回收率和精密度均符合要求。
[0049] 本發(fā)明的測(cè)定方法具有以下技術(shù)效果：
[0050] 1)首次開發(fā)了氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法同時(shí)測(cè)定茶葉中蒽醌殘留量的方法，填補(bǔ) 了技術(shù)空白；
[0051] 2)提供了氣相色譜-質(zhì)譜/質(zhì)譜法測(cè)定棉花中蒽醌殘留量的最優(yōu)條件。
【附圖說明】
[0052] 圖1為蒽醌和蒽醌-D8混合標(biāo)準(zhǔn)溶液的選擇性離子流圖。
[0053] 圖2為空白茶葉樣品和蒽醌-D8混合溶液的選擇性離子流圖。
[0054] 圖3為空白茶葉樣品添加蒽醌和蒽醌-D8混合標(biāo)準(zhǔn)溶液（0. 02mg/kg)的選擇性離 子流圖。
【具體實(shí)施方式】
[0055]1、試劑和材料
[0056] 1. 1正己烷：色譜純。
[0057]L2丙酮：色譜純。
[0058]1.3乙醚：色譜純。
[0059] 1. 4氯化鈉：分析純，650 °C灼燒4h，在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，貯于密封瓶中備用。
[0060] 1. 5無(wú)水硫酸鈉：分析純，650 °C灼燒4h，在干燥器內(nèi)冷卻至室溫，貯于密封瓶中備 用。
[0061]1. 6 蒽醌、蒽醌-D8 標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（Anthraquinone,，CAS:84_65_1，C14H802;Anthraqu inone-D8,，CAS: 10439-39-1):純度大于等于 99%。
[0062]1. 7標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取經(jīng)適量標(biāo)準(zhǔn)物質(zhì)（1. 6)，用丙酮配制成0.4mg/mL的標(biāo) 準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于〇°C~4°C冰箱內(nèi)避光儲(chǔ)存，有效期6個(gè)月。
[0063]1. 8蒽醌-D8標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備溶液：準(zhǔn)確稱取經(jīng)適量標(biāo)準(zhǔn)品（1. 6)，用丙酮配制成0.4mg/ mL的標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液，于0°C~4°C冰箱內(nèi)避光儲(chǔ)存，有效期6個(gè)月。
[0064]1.9標(biāo)準(zhǔn)中間液的配制：準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量（1. 7)，用丙酮配制成10μg/mL 的標(biāo)準(zhǔn)溶液；準(zhǔn)確移取標(biāo)準(zhǔn)儲(chǔ)備液適量（1. 8)，用丙酮配制成0. 2μg/mL的混合標(biāo)準(zhǔn)溶液于 0°C~4°C冰箱內(nèi)避光儲(chǔ)存，有效期3個(gè)月。
[0065] 1.