分析裝置及自動分析裝置的制造方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及對利用抗原抗體反應(yīng)的微粒凝集反應(yīng)進行散射光測定的方法及裝置，特別涉及自動分析裝置上的散射光測定法。
【背景技術(shù)】
[0002]使來自光源的光照射試樣和試劑混合形成的反應(yīng)液，利用特定波長的透光量的變化算出吸光度，根據(jù)Lambert — Beer定律對試樣中的被測物質(zhì)的濃度進行定量的自動分析裝置正在被廣泛應(yīng)用。在這些裝置中，在反復(fù)進行旋轉(zhuǎn)和停止的槽盤的圓周上排列多個保持反應(yīng)液的槽，在槽盤旋轉(zhuǎn)過程中通過規(guī)定位置的透射光測定部，以15秒左右的間隔用約10分鐘測定從反應(yīng)槽內(nèi)的反應(yīng)液中透過的光量的時間系列數(shù)據(jù)作為反應(yīng)過程數(shù)據(jù)，根據(jù)光量的變化算出吸光度，對被測定物質(zhì)的濃度進行定量。
[0003]用自動分析裝置測定的反應(yīng)主要有基質(zhì)和酶的顯色反應(yīng)、抗原和抗體的免疫反應(yīng)這2種。采用前者反應(yīng)的分析被稱為生物化學(xué)分析，作為檢測項目有LDH(乳酸脫氫酶)、ALP (堿性磷酸酶)、AST(門冬氨酸氨基轉(zhuǎn)移酶)等。采用后者反應(yīng)的分析被稱為免疫分析，作為檢測項目有CRP(C反應(yīng)性蛋白)、IgG(免疫球蛋白)、RF(類風(fēng)濕因子)等。在后者測定的被測定物質(zhì)中，存在在血中濃度低的低濃度區(qū)域要求定量的檢測項目，在這樣的項目中采用乳膠免疫分析，使用在表面與抗體偶聯(lián)(結(jié)合)的乳膠粒子作為增感劑。在乳膠免疫分析中，試劑中含有的乳膠粒子表面的抗體將作為試樣中含有的被測定物質(zhì)的抗原識別并結(jié)合后的結(jié)果，乳膠粒子通過抗原發(fā)生凝集，形成乳膠粒子的凝集體。在以往的自動分析裝置中，使光照射該凝集體分散形成的反應(yīng)液，測定在乳膠粒子的凝集體上不發(fā)生散射而透過的透光量。抗原的濃度越高，一定時間后的凝集體的尺寸變得越大，由于更多的光發(fā)生散射，所以透光量減少。因此，根據(jù)作為反應(yīng)過程數(shù)據(jù)測定的光量能夠?qū)乖瓭舛冗M行定量。
[0004]近年來，乳膠免疫分析的更高靈敏度備受期待，不是測定透射光，而是嘗試測定散射光。例如，專利文獻I公開了使用光闌將透射光和散射光分離，同時測定透射光和散射光的系統(tǒng)。專利文獻2公開了在自動分析裝置中將2個波長的檢測光強度的差值自動算出并算出分析結(jié)果的系統(tǒng)。此外，在自動分析裝置以外，專利文獻3公開了對于包含透射光和散射光的檢測信號，獲取在波長670nm和940nm的差，計量血中外源性大分子的系統(tǒng)。
[0005]現(xiàn)有技術(shù)文獻
[0006]專利文獻
[0007]專利文獻I日本特開2001 —141654號公報
[0008]專利文獻2日本特開平03— 065654號公報
[0009]專利文獻3日本特開平06— 038947號公報

【發(fā)明內(nèi)容】

[0010]發(fā)明要解決的問題
[0011]在利用散射光的自動分析裝置中，到目前為止還沒有根據(jù)多個波長的反應(yīng)過程數(shù)據(jù)進行運算，實現(xiàn)高靈敏度的方法。專利文獻I雖然公開了通過同時進行透射光測定和散射光測定實現(xiàn)高靈敏度的結(jié)構(gòu)，但并不是作為適合自動分析裝置的結(jié)構(gòu)而考慮的。在專利文獻2中雖然通過運算多個波長的數(shù)據(jù)，在吸光度方面實現(xiàn)噪音的降低，但關(guān)于散射光的數(shù)據(jù)運算方法并沒有公開。專利文獻3，作為計量的對象是外源性大分子，并不是能夠獲得乳膠免疫分析中反應(yīng)過程數(shù)據(jù)的方法。
[0012]為使乳膠免疫分析實現(xiàn)高靈敏度而測定散射光時，需要降低因氣泡、灰塵等干擾物質(zhì)引起的噪音。特別是，因為使用反應(yīng)過程數(shù)據(jù)進行測定，由于氣泡、灰塵在反應(yīng)過程中長大或增加等原因引起信號變化成為問題。
[0013]此外，乳膠免疫分析的試劑中含有的乳膠粒子根據(jù)試劑種類的不同在反應(yīng)液中的密度有一定范圍，因氣泡、灰塵等干擾物質(zhì)引起的噪音影響根據(jù)試劑而不同。因此，期望使用相同的光學(xué)體系，不易受試劑的種類影響的噪音消除方法。
[0014]在本發(fā)明中，將第I波長的光和比第I波長的波長長的第2波長的光由同一光路照射裝入有試樣和試劑混合形成的反應(yīng)液的槽，接收各個波長的散射光。接著，求出從表示由反應(yīng)液中的凝集反應(yīng)引起變化的第I波長的散射光的變化光量的信號中減去第2波長的散射光的變化光量乘以依賴于試劑的試劑系數(shù)的信號所得的信號，以該求出的信號為基礎(chǔ)對試樣中的成分量進行定量。
[0015]典型的是，試劑含有在直徑50nm?500nm的表面上結(jié)合了抗體的乳膠粒子，作為第I波長使用0.65 μ m?0.75 μ m范圍的光。作為試劑系數(shù)能夠使用透射槽的第I波長的光和第2波長的光的強度比，但也可以將每種試劑的試劑系數(shù)預(yù)先存儲在存儲部，將其適當(dāng)讀取并利用。
[0016]發(fā)明的效果
[0017]根據(jù)本發(fā)明，在乳膠免疫分析中，可以將由干擾物質(zhì)引起的噪音消除。
[0018]上述以外的課題、結(jié)構(gòu)以及效果，通過以下實施方式的說明而明確。
【附圖說明】
[0019]圖1為說明在抗原抗體反應(yīng)中測定出的散射光隨時間變化的概略圖。
[0020]圖2為表示自動分析裝置的一個實施例的整體結(jié)構(gòu)例的概略圖。
[0021]圖3為散射光測定部的概略圖。
[0022]圖4為光源單元的概略圖。
[0023]圖5為散射光接收部的概略圖。
[0024]圖6為表示由氣泡產(chǎn)生的噪音影響和運算結(jié)果的圖。
【具體實施方式】
[0025]以下，參照附圖對本發(fā)明的實施方式進行說明。
[0026]圖1為說明在抗原抗體反應(yīng)中測定的散射光隨時間變化的概略圖。在具有散射光測定部的自動分析裝置上，首先在添加了第一試劑的試樣中混合直徑為50nm?500nm的乳膠粒子分散形成的第二試劑(基準(zhǔn)狀態(tài))，檢測經(jīng)過一定時間后的(凝集狀態(tài))的散射光或透射光的變化光量。另外，準(zhǔn)備使用已知濃度的抗原測定的變化光量的校準(zhǔn)數(shù)據(jù)，通過與該數(shù)據(jù)比較，算出試樣中的抗原濃度。在本發(fā)明中，根據(jù)散射光的第I波長、第2波長各自的信號，使用下述的運算后的信號準(zhǔn)備校準(zhǔn)數(shù)據(jù)。因為變化光量也與照射光的強度成比例，所以預(yù)先調(diào)整第I波長和第2波長的光源強度差在20%以內(nèi)。或者預(yù)先測定第I波長和第2波長的光源強度比，用該強度比除散射光強度，抑制因光源強度的不均勻引起的散射光強度的不均勻?；蛘咴诓蹆?nèi)加入純水，測定透射槽的第I波長和第2波長的透射光強度比，通過用該強度比除散射光強度，也可以對于因光源強度的不均勻引起的散射光強度的不均勻進行修正。
[0027]圖2為表示自動分析裝置的一實施例的整體結(jié)構(gòu)例的概略圖。本實施例的自動分析裝置能夠同時測定透射光和散射光。本實施例的自動分析裝置具有:試樣盤3、試劑盤6、槽盤9這3種盤，在這些盤之間轉(zhuǎn)移試樣、試劑的分注機構(gòu)，控制這些分注機構(gòu)的控制回路23，透射光測定回路24，散射光測定回路25，對測定的數(shù)據(jù)進行處理的PC (計算機)等數(shù)據(jù)處理部26，作為對數(shù)據(jù)處理部26輸入數(shù)據(jù)的界面的輸入部27，輸出部28。數(shù)據(jù)處理部26具備分析數(shù)據(jù)的分析部、以及將控制數(shù)據(jù)、測定數(shù)據(jù)、分析時使用的數(shù)據(jù)、分析結(jié)果數(shù)據(jù)等存儲的數(shù)據(jù)存儲部。
[0028]在試樣盤3的圓周上配置了多個收納試樣I的試樣杯2。在試劑盤6上配置了多個收納試劑4的試劑瓶5。在槽盤9的圓周上配置了多個在內(nèi)部使試樣I和試劑4混合形成反應(yīng)液7的槽8。試樣分注機構(gòu)10將固定量的試樣I從試樣杯2轉(zhuǎn)移至槽8。試劑分注機構(gòu)11將固定量的試劑4從試劑瓶5轉(zhuǎn)移至槽8。攪拌部12在槽8內(nèi)將試樣I和試劑4攪拌混合。洗凈部14從分析結(jié)束后的槽8中將反應(yīng)液7排出洗凈。在被洗凈的槽8內(nèi)再次由分注機構(gòu)10分注下一個試樣1，由試劑分注機構(gòu)11分注新的試劑4，在其他反應(yīng)中使用。槽8浸入在溫度、流量被控制的恒溫槽內(nèi)的恒溫流體15中，槽8及其中的反應(yīng)液7在保持一定溫度的狀態(tài)下被轉(zhuǎn)移。恒溫流體15例如使用水，恒溫流體溫度