一種中成藥、保健食品中甾體類(lèi)抗炎藥的篩查方法
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明公開(kāi)一種檢測(cè)中成藥、保健食品中甾體類(lèi)抗炎藥的方法及其應(yīng)用的試劑盒，旨在提供一種專(zhuān)屬、靈敏、簡(jiǎn)便、現(xiàn)場(chǎng)可操作性強(qiáng)的快速檢驗(yàn)方法；該方法由以下步驟組成：1）取1份量供試品置于具塞試管中，加提取有機(jī)溶劑3~4ml，振搖1min，得到供試品粗提液；（2）用有機(jī)系微孔濾膜，過(guò)濾出2份濾液，各約1ml，分別置于2個(gè)無(wú)色玻璃容器中；（3）向其中一份濾液中加入約0.2ml四氮唑試劑作為供試溶液，另一份作為對(duì)照溶液，并將2份溶液密封混勻；（4）將2份溶液放置2~3min后，在3min內(nèi)進(jìn)行比色觀察；（5）結(jié)果判斷：如果供試溶液顯色且比對(duì)照溶液顏色深，則判定為陽(yáng)性，反之為陰性。
【專(zhuān)利說(shuō)明】一種中成藥、保健食品中留體類(lèi)抗炎藥的篩查方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明公開(kāi)一種檢測(cè)方法，具體是一種利用化學(xué)試劑檢測(cè)中成藥、保健食品中甾體類(lèi)抗炎藥的方法，屬于醫(yī)藥檢測(cè)【技術(shù)領(lǐng)域】。
【背景技術(shù)】
[0002]糖皮質(zhì)激素(glucocorticoid, GCS)是由腎上腺皮質(zhì)中束狀帶分泌的一類(lèi)甾體激素，主要為皮質(zhì)醇(cortisol)，具有調(diào)節(jié)糖、脂肪、和蛋白質(zhì)的生物合成和代謝的作用，還具有抑制免疫應(yīng)答、抗炎、抗毒、抗休克作用。稱(chēng)其為“糖皮質(zhì)激素”是因?yàn)槠湔{(diào)節(jié)糖類(lèi)代謝的活性最早為人們所認(rèn)識(shí)，在臨床工作中，皮質(zhì)激素因具有較強(qiáng)的抗炎抗變態(tài)反應(yīng)作用而廣泛應(yīng)用于支氣管哮喘和炎癥重癥治療中。
[0003]在支氣管哮喘的常規(guī)治療中，當(dāng)抗生素應(yīng)用、支氣管擴(kuò)張劑使用、止咳化痰等對(duì)癥治療不能達(dá)到滿(mǎn)意療效時(shí)，在無(wú)絕對(duì)禁忌證時(shí)應(yīng)用皮質(zhì)激素進(jìn)行沖擊治療。風(fēng)濕及類(lèi)風(fēng)濕性關(guān)節(jié)炎為常見(jiàn)病，是骨關(guān)節(jié)的一種慢性炎癥性和破壞性疾病，屬于頑固性疾病，患者需要長(zhǎng)期服藥以控制病情。藥物治療主要包括非留體類(lèi)抗炎藥(NSAIDs)、腎上腺皮質(zhì)激素和改善病情的抗風(fēng)濕藥物。而皮質(zhì)激素主要用于重癥治療，原則上也已小劑量短期治療為宜。
[0004]近年來(lái)保健食品、中藥中非法添加化學(xué)藥物的案件屢見(jiàn)不鮮。傳統(tǒng)中藥在我國(guó)有著幾千年的歷史，并以毒副作用小、安全性高深受百姓信賴(lài)，不法分子借此牟取暴利，向保健食品、中藥中加入化學(xué)藥物，以達(dá)到短期見(jiàn)效的目的。長(zhǎng)期服用非法添加的保健食品、中成藥，危害巨大，不止延誤病情，且副作用明顯，尤其是腎上腺皮質(zhì)激素類(lèi)，這種即使在西醫(yī)治療下都需要謹(jǐn)慎使用的藥物，已被發(fā)現(xiàn)在止咳平喘類(lèi)及抗風(fēng)濕類(lèi)保健食品、中成藥中有非法添加的案例。因此對(duì)皮質(zhì)激素類(lèi)藥物非法添加應(yīng)加大打擊和監(jiān)管力度。
[0005]皮質(zhì)激素類(lèi)藥物分子具有留體結(jié)構(gòu)，與阿司匹林等非留體類(lèi)抗炎藥相對(duì)應(yīng)，成為甾體類(lèi)抗炎藥；ci7位上的α -醇酮基具有還原性，代表藥物有醋酸潑尼松、潑尼松、醋酸氫化可的松、可的松、氫化可的松、醋酸地塞米松、地塞米松等。留體類(lèi)皮質(zhì)激素藥物，具有良好抗炎的作用，也兼有抗變態(tài)反應(yīng)的療效，但使用這類(lèi)藥物不良反應(yīng)明顯，主要有脂質(zhì)代謝和水鹽代謝紊亂，表現(xiàn)為滿(mǎn)月臉，向心性肥大、高血壓、骨質(zhì)疏松等嚴(yán)重不良反應(yīng)，甚至引起股骨壞死。這類(lèi)藥物若非法摻雜在祛風(fēng)濕、止咳平喘類(lèi)中成藥和保健食品中，極易引起嚴(yán)重不良反應(yīng)，給廣大患者造成嚴(yán)重危害。
[0006] 申請(qǐng)人:在專(zhuān)項(xiàng)打擊非法添加化學(xué)藥品活動(dòng)中發(fā)現(xiàn)，部分祛風(fēng)濕中成藥和保健食品中違法添加了留體類(lèi)抗炎藥。查處在祛風(fēng)濕類(lèi)和止咳平喘類(lèi)中成藥和保健食品中擅自添加皮質(zhì)激素類(lèi)化學(xué)藥品的違法行為，是一項(xiàng)長(zhǎng)期的任務(wù)，涉及范圍廣，檢驗(yàn)工作量大。
[0007]目前，檢驗(yàn)中成藥和保健食品中留體類(lèi)抗炎藥摻雜的方法主要有高效液相色譜法，液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法。高效液相色譜法和液相色譜-質(zhì)譜聯(lián)用法靈敏度高，結(jié)果準(zhǔn)確可靠，但不適合流動(dòng)性大的現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)，在廣大的農(nóng)村地區(qū)和經(jīng)濟(jì)欠發(fā)達(dá)的中小城市開(kāi)展檢驗(yàn)活動(dòng)有一定的難度。
【發(fā)明內(nèi)容】

[0008]針對(duì)上述問(wèn)題，本發(fā)明旨在提供一種克服現(xiàn)有技術(shù)存在的缺點(diǎn)，分析成本低，不需要使用貴重分析儀器，專(zhuān)屬性強(qiáng)，靈敏度高，現(xiàn)象易于觀察，適用于現(xiàn)場(chǎng)檢驗(yàn)中成藥、保健食品是否摻雜留體類(lèi)抗炎藥的檢驗(yàn)方法。
[0009]本發(fā)明的第二目的在于提供上述方法在制備留體類(lèi)抗炎藥快速檢驗(yàn)試劑盒的應(yīng)用。
[0010]本發(fā)明的第三目的在于提供上述方法在檢驗(yàn)祛風(fēng)濕類(lèi)和止咳平喘類(lèi)中成藥、保健食品是否摻雜甾體類(lèi)抗炎藥的篩查中的應(yīng)用。
[0011]本發(fā)明的第一技術(shù)方案是這樣的一種中成藥、保健食品中留體類(lèi)抗炎藥的篩查方法，依次由以下步驟組成:(I)取I份量供試品置于具塞試管中，加提取有機(jī)溶劑3?4ml，振搖lmin，得到供試品粗提液；(2)用有機(jī)系微孔濾膜，過(guò)濾出2份濾液，各約1ml，分別置于2個(gè)無(wú)色玻璃容器中；(3)向其中一份濾液中加入約0.2ml四氮唑試劑作為供試溶液，另一份作為對(duì)照溶液，并將2份溶液密封混勻；(4)將2份溶液放置2?3min后，在3min內(nèi)進(jìn)行比色觀察；(5)結(jié)果判斷:如果供試溶液顯紅色且比對(duì)照溶液顏色深，則判定為陽(yáng)性，反之為陰性。
[0012]所述的I份量供試品為一次服用量的供試品。
[0013]上述中成藥、保健食品中留體類(lèi)抗炎藥的篩查方法，其特征在于，所述的膠囊和軟膠囊取內(nèi)容物置于具塞試管中，片劑和丸劑先研細(xì)，再置于具塞試管中。
[0014]上述中成藥、保健食品中留體類(lèi)抗炎藥的篩查方法，其特征在于，所述中成藥、保健食品包括聲稱(chēng)具有祛風(fēng)濕、止咳平喘等可能添加皮質(zhì)激素即留體類(lèi)抗炎藥的中成藥、保健食品。
[0015]上述中成藥、保健食品中留體類(lèi)抗炎藥的篩查方法，其特征在于，所述的留體類(lèi)抗炎藥具有C17-C1-醇酮基，具有還原性能與四氮唑試液反應(yīng)，包括醋酸潑尼松、潑尼松、醋酸氫化可的松、可的松、氫化可的松、醋酸地塞米松、地塞米松等。
【權(quán)利要求】
1.一種中成藥、保健食品中留體類(lèi)抗炎藥的篩查方法，其特征在于，依次包括下述步驟:(I)取1份量供試品置于具塞試管中，加提取有機(jī)溶劑3~4ml，振搖lmin，得到供試品粗提液；(2)用有機(jī)系微孔濾膜，過(guò)濾出2份濾液，各約1ml，分別置于2個(gè)無(wú)色玻璃容器中；(3)向其中一份濾液中加入約0.2ml四氮唑試劑作為供試溶液，另一份作為對(duì)照溶液，并將2份溶液密封混勻；(4)將2份溶液放置2~3min后，在3min內(nèi)進(jìn)行比色觀察；(5)結(jié)果判斷:如果供試溶液顯紅色且比對(duì)照溶液顏色深，則判定為陽(yáng)性，反之為陰性； 所述的1份量供試品為一次服用量的供試品。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，所述的留體類(lèi)抗炎藥具有C17-α -醇酮基，具有還原性，能與四氮唑試液反應(yīng)。
3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的方法，其特征在于，所述的留體類(lèi)抗炎藥為醋酸潑尼松，潑尼松，醋酸氫化可的松，可的松，氫化可的松，醋酸地塞米松，地塞米松中的一種或多種的混合。
4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(1)中所述的提取有機(jī)溶劑為堿性乙醇溶液，該堿性由氫氧化鈉、氫氧化鉀、或氫氧化四丁基銨中的一種或多種混合物提供。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的方法，其特征在于，先將氫氧化鈉、氫氧化鉀、或氫氧化四丁基銨中的一種或多種混合物用無(wú)水甲醇配制堿性濃溶液，再與乙醇混合；所述乙醇為優(yōu)級(jí)純無(wú)水乙醇或無(wú)醛乙醇。
6.根據(jù)權(quán)利要求5所述的方法，其特征在于，制得的堿性乙醇溶液的pH為13以上，且含水量在5%以下。
7.根據(jù)權(quán)利要求1所述的方法，其特征在于，步驟(3)所述的四氮唑試劑為氯化三苯四氮唑，藍(lán)四氮唑中的任一一種或兩者的混合；該四氮唑試劑用無(wú)水乙醇配制成0.2%~Ο.5%的顯色溶液，并在棕色試劑瓶中避光保存。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的方法，其特征在于，四氮唑試劑為氯化三苯四氮唑。
9.應(yīng)用權(quán)利要求1所述方法的留體類(lèi)抗炎藥快速檢驗(yàn)試劑盒，其特征在于，包括盒體，盒體內(nèi)設(shè)有至少一個(gè)盛有4ml提取溶劑的具塞試管，至少一個(gè)盛有Iml四氮唑試劑的棕色試劑瓶，至少二個(gè)無(wú)色透明的反應(yīng)瓶，至少一個(gè)5ml的一次性注射器，以及有機(jī)系微孔濾膜。
10.權(quán)利要求1所述的檢測(cè)方法在中成藥和保健食品中是否摻入留體類(lèi)皮質(zhì)激素的篩選檢驗(yàn)中的應(yīng)用。
【文檔編號(hào)】G01N21/78GK103616376SQ201310569766
【公開(kāi)日】2014年3月5日 申請(qǐng)日期:2013年11月13日 優(yōu)先權(quán)日:2013年11月13日
【發(fā)明者】孫晶, 馮有龍, 曹玲, 樊夏雷, 宮旭, 尚姝, 吳莉, 蘆麗, 張?jiān)倨? 申請(qǐng)人:江蘇省食品藥品檢驗(yàn)所, 中國(guó)食品藥品檢定研究院, 宮旭