一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片及其應(yīng)用的制作方法
【專利摘要】一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片，芯片主要由兩層微通道網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成，如圖1所示，下層中的微通道網(wǎng)絡(luò)為迂回的折線通道組合，作為濃度梯度生成單元；如圖2所示，芯片上層中的微通道網(wǎng)絡(luò)由逐層對(duì)稱增加分支通道組合和6列迂回的折線通道及6個(gè)擴(kuò)展通道相連，作為等量分配單元、熒光衍生反應(yīng)單元和熒光檢測(cè)窗。芯片的上下層微通道網(wǎng)絡(luò)相互聯(lián)通。該微流控芯片集成有自動(dòng)濃度梯度生成和等量分配、酶區(qū)域固定、酶催化反應(yīng)產(chǎn)物分離、產(chǎn)物熒光衍生化及熒光檢測(cè)功能，并可用在標(biāo)準(zhǔn)的酶標(biāo)儀上進(jìn)行分析數(shù)據(jù)的采集。為工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥及環(huán)境科學(xué)等各領(lǐng)域的相關(guān)分析提供了一套解決方案。
【專利說明】一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片及其應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及酶催化反應(yīng)分析技術(shù)，具體涉及包含一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片及其應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]酶催化技術(shù)廣泛應(yīng)用于工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥及環(huán)境科學(xué)等各領(lǐng)域，酶催化產(chǎn)物分析更是酶催化反應(yīng)的研究、酶抑制劑的篩選等的關(guān)鍵技術(shù)。熒光分析法在酶催化反應(yīng)分析研究中被廣泛采用，具有專一性強(qiáng)、靈敏度高等優(yōu)點(diǎn)。但酶催化反應(yīng)分析中應(yīng)用熒光分析須具備一定的條件:能制備出有熒光的特定底物；或者在酶催化反應(yīng)條件下產(chǎn)物能轉(zhuǎn)化成有熒光的衍生物。穩(wěn)定的熒光底物通常不易獲得；而在酶催化反應(yīng)環(huán)境中將產(chǎn)物能轉(zhuǎn)化成有熒光的衍生物往往會(huì)影響酶催化反應(yīng)，甚至改變反應(yīng)。這些都是酶催化反應(yīng)分析中熒光分析法應(yīng)用所面對(duì)的問題。
[0003]微流控芯片，指的是把化學(xué)和生物等領(lǐng)域中所涉基本操作單元集成或基本集成到一塊幾平方厘米(甚至更小)的芯片上，由微通道形成網(wǎng)絡(luò)，可以控制流體流經(jīng)整個(gè)系統(tǒng)，用以取代常規(guī)化學(xué)或生物實(shí)驗(yàn)室的各種功能。微流控分析技術(shù)在微米級(jí)結(jié)構(gòu)中操控納升至皮升體積流體，可執(zhí)行樣品預(yù)處理、分離與檢測(cè)等步驟，具有體積小、比表面積大、反應(yīng)時(shí)間短、分析速度快、試劑和樣品用量少、易集成化和自動(dòng)化等優(yōu)點(diǎn)。因此，將微流控技術(shù)與熒光分析法結(jié)合，可在一定程度上克服傳統(tǒng)的微孔板中酶催化反應(yīng)分析中應(yīng)用熒光分析法所遇到的一些問題，近幾年來已引起研究者的廣泛關(guān)注?；谖⒘骺匦酒拿阜治黾夹g(shù)具體一些優(yōu)點(diǎn):(1)酶催化反應(yīng)在微通道中進(jìn)行，由于其體積小，比表面積大，縮短了反應(yīng)時(shí)間，提高了分析效率；(2)可將樣品預(yù)處理、分離與檢測(cè)等操作分區(qū)域集成化，能優(yōu)化分析條件，避免干擾，提高分析的準(zhǔn)確性；(3)操作簡(jiǎn)便，自動(dòng)化程度高，能大大地節(jié)約試劑用量。
[0004]本發(fā)明的目的在于提供一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片及其應(yīng)用，可作為酶、抑制劑活性分析及藥物快速篩選的工具。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0005]本發(fā)明的目的在于提供一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片及其應(yīng)用。本發(fā)明集成了樣品溶液的分配、濃度梯度的生成、酶的吸附固定、沖洗、孵育反應(yīng)和產(chǎn)物熒光衍生反應(yīng)等單元操作，通過連接微量注射泵自動(dòng)運(yùn)行，完成操作后可置于普通酶標(biāo)儀上檢測(cè)讀取數(shù)據(jù)。
[0006]為實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用的技術(shù)方案如下:
[0007]—種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片，芯片主要由兩層微通道網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成，其上設(shè)置輸入輸出小孔，在輸入輸出孔上裝置可拆卸的連接接頭，通過細(xì)管線與微量注射泵和廢液回收池相接。整塊集成化微流控芯片的尺寸與標(biāo)準(zhǔn)的多孔板相同以便能裝進(jìn)酶標(biāo)儀里。[0008]集成化微流控芯片的結(jié)構(gòu)如圖1和圖2所示；圖3為用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片組裝結(jié)構(gòu)和透視示意圖；4圖是用聚甲基硅酮基材制作的實(shí)物圖。
[0009]本發(fā)明將芯片設(shè)計(jì)成上下兩層微通道網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)，下層中的微通道網(wǎng)絡(luò)為迂回的折線通道組合，這種迂回的折線通道從右至左(或從左至右)逐層分支增加一列，交錯(cuò)排列，作為濃度梯度生成單元；在其最右端(或最左端)設(shè)有2個(gè)輸入口，試劑、酶和藥物等由此輸入口進(jìn)入芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)；迂回的折線通道增擴(kuò)至6個(gè)出口，每列出口處有一個(gè)穿透芯片基材的孔，這些孔有兩個(gè)功能:①作為酶固定和酶催化反應(yīng)的主要區(qū)域聯(lián)通上下兩層微通道網(wǎng)絡(luò)的通路。
[0010]芯片上層中的微通道網(wǎng)絡(luò)分為兩個(gè)功能單元，以下層6個(gè)聯(lián)通孔相應(yīng)的位置為界。左側(cè)(或右側(cè))的微通道網(wǎng)絡(luò)由逐層增加分支通道組合，作為等量分配單元，微通道網(wǎng)絡(luò)左端(或左端)設(shè)有2個(gè)輸入口，熒光衍生劑和相關(guān)試劑等由此輸入口進(jìn)入上層芯片微通道網(wǎng)絡(luò)；每個(gè)通道的末端與另外6列迂回的折線通道相連。
[0011]上層芯片右側(cè)(或左側(cè))的微通道網(wǎng)絡(luò)由6列迂回的折線通道組合，起始端分別與下層6個(gè)聯(lián)通孔對(duì)齊，作為熒光衍生反應(yīng)區(qū)。迂回的折線通道的末端設(shè)計(jì)成擴(kuò)展通道，作為酶標(biāo)儀檢測(cè)窗，共6個(gè)檢測(cè)窗的間距與標(biāo)準(zhǔn)的微孔板的孔距相同，使芯片與標(biāo)準(zhǔn)的酶標(biāo)儀兼容。通道最終匯聚于芯片上的廢液口。
[0012]分別刻有上述微通道網(wǎng)絡(luò)的兩片聚甲基硅酮基材，連同最下層沒有通道的第三片聚甲基硅酮基材精確對(duì)準(zhǔn)，粘貼鍵合成本發(fā)明用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片。
[0013]所述用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片的應(yīng)用過程如下:
[0014]1.將雙通道微量注射泵的針頭分別與芯片上輸入口 C1、C2連接管線連通，與固定酶相關(guān)的通道修飾劑、交聯(lián)劑、洗滌液等由注射泵經(jīng)下層通道的輸入口 C1、C2，恒速、定量地注入芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)，液體流過芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)后，經(jīng)末端穿透芯片基材的孔進(jìn)入上層芯片通道，此時(shí)上層芯片通道輸入口 C3、C4關(guān)閉，液體由廢液口 C5流出芯片。
[0015]2.打開上層芯片通道輸入口 C3、C4，關(guān)閉廢液口 C5。與固定酶相關(guān)的酶、穩(wěn)定劑、緩沖液及洗滌液等由注射泵經(jīng)下層通道的輸入口 C1、C2，恒速、定量地注入芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)，液體流過芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)后，經(jīng)末端穿透芯片基材的孔進(jìn)入芯片上層微通道，再經(jīng)上層芯片輸入口 C3、C4流出芯片。
[0016]3.將兩臺(tái)雙通道微量注射泵的針頭分別與芯片上入口 Cl、C2 ;C3、C4連接管線連通，與酶催化反應(yīng)相關(guān)的底物、抑制劑、緩沖液及洗滌液等由注射泵經(jīng)芯片下層通道的輸入口 C1、C2，恒速、定量地注入芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)，底物與通道上固定的酶結(jié)合，發(fā)生酶催化反應(yīng)，產(chǎn)物經(jīng)末端穿透芯片基材的孔進(jìn)入芯片上層通道。與此同時(shí)，與熒光衍生化反應(yīng)相關(guān)的試劑等由注射泵經(jīng)芯片上層通道的輸入口 C3、C4，恒速、定量地注入芯片上層微通道網(wǎng)絡(luò)，并與酶催化反應(yīng)的產(chǎn)物匯合，混合后反應(yīng)生成熒光衍生物。流體注入檢測(cè)窗后經(jīng)廢液口C5流出芯片。
[0017]4.待酶催化的反應(yīng)完成或達(dá)到平衡、熒光衍生化反應(yīng)完成穩(wěn)定后，拆除芯片上的連接接頭及管線。將芯片裝入標(biāo)準(zhǔn)的酶標(biāo)儀，檢測(cè)各檢測(cè)窗的熒光信號(hào)，提供分析數(shù)據(jù)。
[0018]本發(fā)明具有如下優(yōu)點(diǎn):
[0019]1.本發(fā)明的微流控芯片集成了試劑自動(dòng)濃度梯度生成和等量分配、酶區(qū)域固定、酶催化反應(yīng)產(chǎn)物分離、產(chǎn)物熒光衍生化及熒光檢測(cè)功能，為工業(yè)、農(nóng)業(yè)、醫(yī)藥及環(huán)境科學(xué)等各領(lǐng)域的相關(guān)分析提供了一套解決方案。
[0020]2.本發(fā)明的微流控芯片設(shè)計(jì)成上下兩層微通道網(wǎng)絡(luò)，將酶催化反應(yīng)與產(chǎn)物熒光衍生化分在不同區(qū)域進(jìn)行，避免了熒光衍生化反應(yīng)對(duì)酶催化反應(yīng)的相互干擾，減少了分析誤差。
[0021]3.本發(fā)明在微流控芯片的操作中利用微通道網(wǎng)絡(luò)的流向控制，將酶固定在芯片的下層微通道中，將酶催化反應(yīng)產(chǎn)生的產(chǎn)物帶離酶催化反應(yīng)區(qū)，隨后產(chǎn)物與熒光衍生化試劑在上層通道特定區(qū)域反應(yīng)生成熒光衍生物，熒光衍生物純度高，熒光發(fā)光效率高，提高了熒光檢測(cè)的靈敏度。
[0022]4.本發(fā)明的集成化微流控芯片所設(shè)計(jì)的熒光檢測(cè)窗的排列與傳統(tǒng)的多孔板一致，可應(yīng)用在標(biāo)準(zhǔn)的酶標(biāo)儀上進(jìn)行分析數(shù)據(jù)的采集。與傳統(tǒng)的多孔板技術(shù)相比，本發(fā)明省去了配制不同濃度樣品溶液繁冗操作，同時(shí)在檢測(cè)方法上又與傳統(tǒng)的多孔板技術(shù)兼容，無需特殊操作和配備專用設(shè)備。
【專利附圖】

【附圖說明】
[0023]圖1為用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)示意圖。圖中Cl和C2所示為連接下層道的輸入口。當(dāng)需要生成不同濃度的樣品溶液時(shí)，Cl和C2分別輸入最低和最高濃度的溶液。
[0024]圖2為用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片上層微通道網(wǎng)絡(luò)結(jié)構(gòu)示意圖。圖中C3和C4所示為連接上層道的輸入口，C5為廢液口。熒光衍生化試劑由C3和C4輸入芯片上層通道。圖中所示的虛線圓圈為與下層通微道網(wǎng)絡(luò)連通孔的連接位置。
[0025]圖3為用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片組裝順序透視示意圖。
[0026]圖4為聚二甲基硅氧烷材料制成的用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片實(shí)物圖。
[0027]圖5用產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度對(duì)底物的濃度作圖，表征酶的活性。
[0028]圖6用產(chǎn)物的熒光強(qiáng)度對(duì)抑制劑的濃度作圖，表征的抑制劑活性。
【具體實(shí)施方式】
[0029]一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片，當(dāng)需要一系列不同濃度的樣品溶液時(shí)，只須配制最高和最低兩個(gè)不同的樣品溶液經(jīng)Cl，C2輸入，在流經(jīng)芯片的下層微通道中的逐層增加分支的迂回的折線通道時(shí)，兩個(gè)不同濃度的樣品溶液經(jīng)歷了不斷地定量分配、混合；再分配、再混合，最后生成一個(gè)濃度梯度的樣品溶液供分析處理。
[0030]將酶固定在芯片的下層微通道中，酶催化反應(yīng)產(chǎn)生的產(chǎn)物被帶到上層微通道網(wǎng)絡(luò)，不同濃度的產(chǎn)物與經(jīng)C3、C4輸入的等量的熒光衍生化試劑在上層通道反應(yīng)生成熒光衍生物。生成的熒光衍生物在激發(fā)光照射時(shí)發(fā)出熒光，可記錄到不同的強(qiáng)度熒光信號(hào)供數(shù)據(jù)分析處理。該用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片可作為酶、抑制劑活性分析及藥物快速篩選的工具。
[0031]實(shí)施例1
[0032]將雙通道微量注射泵的針頭分別與芯片輸入口 Cl、C2連接管線連通，輸入口 C3、C4開啟，液體由輸入口 C3、C4和廢液口 C5流出芯片。用0.1M NaOH沖洗通道30min，蒸餾水清洗后再用0.1M HCl沖洗30min，最后用0.01PBS緩沖液沖洗芯片通道。
[0033]完成上述通道沖洗后，將輸入口 C3、C4關(guān)閉，液體由廢液口 C5流出芯片。經(jīng)輸入口 C1、C2，以10μ L/min恒定流速，將BSA(lmg/mL)輸入芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)，并靜置3.5小時(shí)。然后，再依次輸入蛋白A (20 μ g/mL)和I %戊二醛的混合溶液、兔免疫球蛋白IgG (5 μ g/mL溶于0.01M PBS)溶液，孵育10分鐘。后用洗滌液以50 μ L/min流速?zèng)_洗通道30s，洗去未被固定的兔疫球蛋白。
[0034]接著關(guān)閉廢液口 C5，啟開入口 C3、C4，液體由C3、C4流出芯片。將脲酶標(biāo)記羊抗兔免疫球蛋白IgG抗體(5μ L/mL溶于含0.1% BSA的0.01M PBS)經(jīng)輸入口 C1、C2，以10 μ L/min的流速輸入芯片通道,孵育10分鐘。后用洗漆液在50 μ L/min流速下沖洗60s,洗去未結(jié)合的脲酶標(biāo)記抗兔免疫球蛋白IgG。由于微通道具有較大的比表面積，脲酶標(biāo)記的抗兔免疫球蛋白IgG很快地?cái)U(kuò)散，與兔免疫球蛋白IgG進(jìn)行免疫反應(yīng)而被固定。
[0035]實(shí)施例2
[0036]將按實(shí)施例1中所述操作步驟將脲酶固定于微流控芯片通道內(nèi)，芯片置于37°C恒溫槽內(nèi)，兩臺(tái)雙通道微量注射泵的針頭分別與芯片上輸入口 Cl、C2 ;C3、C4連接管線連通。由輸入口 Cl、C2，將兩種不同濃度脲(0mM、0.5mM)的0.2M磷酸鹽緩沖溶液，以10 μ L/min恒定流速，輸入下層微通道網(wǎng)絡(luò)。經(jīng)濃度梯度生成單元生成6列不同濃度的脲溶液與通道上固定的脲酶接觸發(fā)生酶催化反應(yīng)。孵育3min，脲被酶水解產(chǎn)生氨，經(jīng)6個(gè)聯(lián)通孔分別帶到上層微通道網(wǎng)絡(luò)。同時(shí)，將OPA試劑(即熒光衍生化試劑，由鄰苯二甲醛100mg/mL無水乙醇溶液、巰基乙醇5 μ L/mL無水乙醇溶液和0.2M磷酸鹽緩沖液按體積比1:1: 18混合)，經(jīng)輸入口 C3、C4，以10 μ L/min恒定流速輸入上層微通道網(wǎng)絡(luò)，流經(jīng)等量分配單元生成6列相同濃度的OPA溶液，隨后與水解產(chǎn)生的氨混合反應(yīng)生成熒光衍生物。靜置反應(yīng)10min后，拆除芯片上的連接管線，關(guān)閉所有輸入、輸出口。將芯片置于酶標(biāo)儀中，設(shè)置激發(fā)波長(zhǎng)為420nm檢測(cè)475nm波長(zhǎng)的熒光信號(hào)，檢測(cè)記錄到6個(gè)不同強(qiáng)度的熒光信號(hào)分別對(duì)應(yīng)氨的生成量。用熒光強(qiáng)度對(duì)底物的濃度作圖(見圖5)，可表征酶的活性。
[0037]實(shí)施例3
[0038]將按實(shí)施例1中所述操作步驟將脲酶固定于微流控芯片通道內(nèi)，芯片置于37°C恒溫槽內(nèi)，兩臺(tái)雙通道微量注射泵的針頭分別與芯片上輸入口 Cl、C2 ;C3、C4連接管線連通。由輸入口 Cl、C2，將兩種不同濃度的乙?；u肟酸(0mM、0.1mM)和相同濃度脲(0.1mM)的0.2M磷酸鹽緩沖溶液，以10 μ L/min恒定流速注入下層微通道網(wǎng)絡(luò)。經(jīng)濃度梯度生成單元生成6列不同濃度的乙?；u肟酸和相同濃度脲的溶液，與通道上固定的脲酶接觸發(fā)生酶催化反應(yīng)，同時(shí)乙?；u肟酸對(duì)脲酶產(chǎn)生抑制作用。孵育3min，脲被酶水解產(chǎn)生氨，經(jīng)6個(gè)聯(lián)通孔分別帶到上層微通道網(wǎng)絡(luò)。同時(shí)，將OPA試劑經(jīng)輸入口 03工4，以1(^17!^11恒定流速輸入上層微通道網(wǎng)絡(luò)，流經(jīng)等量分配單元生成6列相同濃度的OPA溶液，隨后與水解產(chǎn)生的氨混合反應(yīng)生成熒光衍生物。靜置反應(yīng)10min后，拆除芯片上的連接管線，關(guān)閉所有輸入、輸出口。將芯片置于酶標(biāo)儀中，設(shè)置激發(fā)波長(zhǎng)為420nm檢測(cè)475nm波長(zhǎng)的熒光信號(hào)，檢測(cè)記錄到6個(gè)不同強(qiáng)度的熒光信號(hào)分別對(duì)應(yīng)氨的生成量。用熒光強(qiáng)度對(duì)抑制劑的濃度作圖(見圖6)，可表征的抑制劑活性，通過數(shù)據(jù)處理，得到抑制劑Ic5O 0.058±0.003mM。
【權(quán)利要求】
1.一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片及其應(yīng)用，其特征在于:芯片主要由兩層微通道網(wǎng)絡(luò)構(gòu)成， 設(shè)有2個(gè)輸入口與芯片下層微通道網(wǎng)絡(luò)連接，微通道網(wǎng)絡(luò)為迂回的折線通道組合，這種迂回的折線通道由入輸口端開始逐層延伸，每層增加一個(gè)分支，交錯(cuò)排列，作為濃度梯度生成單元，迂回的折線通道增擴(kuò)至6列，每列末端處有一個(gè)穿透芯片基材的孔，這些孔有兩個(gè)功能:作為酶固定和酶催化反應(yīng)的主要區(qū)域、作為聯(lián)通上下兩層微通道網(wǎng)絡(luò)的通道； 設(shè)有2個(gè)輸入出口和I個(gè)廢液口與芯片上層微通道網(wǎng)絡(luò)連接，通道由輸入出口端開始逐層延伸，每層增加一個(gè)分支，交錯(cuò)排列，作為等量分配單元，增擴(kuò)至6列，繼而改為6列迂回的折線通道延伸作為衍生化反應(yīng)區(qū)，再續(xù)成擴(kuò)展通道為檢測(cè)窗口，6列通道最終匯聚于同一個(gè)廢液口。
2.權(quán)利要求1所述用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片，其特征在于:芯片上下兩層的微通道網(wǎng)絡(luò)通過中間的連通孔相互連通，可通過改變芯片上的入輸口和廢液口的開啟或關(guān)閉來控制芯片通道內(nèi)液體的流向，具有將酶催化反應(yīng)和產(chǎn)物衍生化反應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行的功能，芯片上設(shè)置的檢測(cè)窗口的排列和集成化微流控芯片的尺寸都與標(biāo)準(zhǔn)的酶標(biāo)儀兼容。
3.一種用于酶催化產(chǎn)物熒光檢測(cè)的集成化微流控芯片的應(yīng)用，其特征在于:酶、酶固定劑、底物、藥物、熒光衍生劑及洗滌液等依次經(jīng)由微流控芯片上的輸入口定量輸入芯片通道； 只須配制最高和最低兩個(gè)不同濃度的樣品溶液經(jīng)芯片下層輸入口輸入，可生成所需的不同濃度梯度的樣品溶液供給下一個(gè)功能單元； 通過下層芯片輸入口將與固定酶相關(guān)的通道修飾劑、交聯(lián)劑、洗滌液等經(jīng)由芯片下層輸入芯片通道，關(guān)閉上層芯片輸入出口，液體由廢液口流出芯片；然后開啟上層芯片輸入出口，關(guān)閉廢液口，將酶、穩(wěn)定劑、緩沖液及洗滌液等經(jīng)由芯片下層輸入口輸入芯片通道，關(guān)閉廢液口，開啟上層芯片輸入出口，液體經(jīng)上層芯片輸入出口流出芯片，實(shí)現(xiàn)酶的區(qū)域固定；通過下層芯片輸入口將底物、藥物樣品等溶液輸入芯片通道，同時(shí)通過上層芯片輸入出口將與產(chǎn)物衍生化相關(guān)試劑注入芯片通道，液體由廢液口流出芯片，實(shí)現(xiàn)酶催化反應(yīng)和產(chǎn)物衍生化反應(yīng)分區(qū)域進(jìn)行； 待酶催化反應(yīng)完成或達(dá)到平衡、熒光衍生化反應(yīng)完成穩(wěn)定后，拆除芯片上的連接接頭及管線，將芯片裝入標(biāo)準(zhǔn)的酶標(biāo)儀，采集、記錄分析數(shù)據(jù)。
【文檔編號(hào)】G01N21/64GK103801412SQ201210443857
【公開日】2014年5月21日 申請(qǐng)日期:2012年11月8日 優(yōu)先權(quán)日:2012年11月8日
【發(fā)明者】成志毅, 張琴, 唐修雯 申請(qǐng)人:中山大學(xué)