專利名稱：一種地溝油的檢測(cè)試劑及其制備方法和檢測(cè)方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及地溝油檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種地溝油的檢測(cè)試劑及其制備方法和檢測(cè)方法。
背景技術(shù)：
地溝油，是不法分子將下水道中的油膩漂浮物或者將賓館、酒樓的剩飯、剩菜(通稱泔水)回收，經(jīng)過(guò)過(guò)濾、加熱、沉淀、分離、脫色、洗油等工序加工、提煉出的油，其主要成分仍然是甘油三酯，這種被稱作地溝油的三無(wú)產(chǎn)品，不僅質(zhì)量極差、極不衛(wèi)生，而且也比真正的食用油多了許多致病、致癌的毒性物質(zhì)。一旦食用地溝油，它會(huì)破壞人們的白血球和消化道黏膜，引起食物中毒，甚至致癌的嚴(yán)重后果。所以地溝油是嚴(yán)禁用于食用油領(lǐng)域的。但是，也確有一些不法商販?zhǔn)芾骝?qū)動(dòng)而不顧人民群眾生命安全私自生產(chǎn)加工地溝油并作為食用油低價(jià)銷(xiāo)售給一些小餐館，給人們的身心都帶來(lái)極大傷害。購(gòu)買(mǎi)普通食用油時(shí)，一般的消費(fèi)者會(huì)被建議要學(xué)會(huì)感官鑒別。根據(jù)經(jīng)驗(yàn)，食用植物油一般通過(guò)看、聞、嘗、聽(tīng)、問(wèn)五個(gè)方面來(lái)進(jìn)行鑒別。但是對(duì)于對(duì)于摻雜有有害物質(zhì)的劣質(zhì)地溝油，僅僅靠人為的看、聞、嘗、聽(tīng)的感官來(lái)進(jìn)行鑒別是十分困難的。目前，國(guó)內(nèi)尚未制定地溝油鑒別檢測(cè)的國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)方法，雖然國(guó)內(nèi)外研究人員進(jìn)行了一些探索，鑒別油脂優(yōu)劣的常規(guī)指標(biāo)一般是水分、含量、比重、折光率、皂化值、酸價(jià)、氧化值、過(guò)氧化值、羰基值、碘值、揮發(fā)性組分、動(dòng)物油脂、醛和酮類(lèi)化合物(合格食用油所不含的)、電導(dǎo)率等指標(biāo)。但是對(duì)地溝油檢測(cè)的研究報(bào)道并不多見(jiàn)，其主要原因是高酸值的地溝油成分比較復(fù)雜，其檢測(cè)的特異性理化指標(biāo)還處于實(shí)驗(yàn)研討階段，要準(zhǔn)確定性定量目前仍比較困難。

發(fā)明內(nèi)容
為了解決上述問(wèn)題，本發(fā)明的目的之一在于提供了一種能快速檢測(cè)出地溝油的顯色化學(xué)試劑；本發(fā)明的目的之二在于提供了能快速檢測(cè)出地溝油的顯色化學(xué)試劑的制備方法本發(fā)明的目的之三在于提供了用所述顯色化學(xué)試劑快速檢測(cè)地溝油的方法。為了實(shí)現(xiàn)上述目的，本發(fā)明的技術(shù)方案如下一種地溝油的檢測(cè)試劑，包括按照體積百分比計(jì)算的如下物質(zhì)
鄰二氮菲溶液10%~20%
醋酸銨緩沖液10%~20%
鹽酸羥胺鐵溶液10% ~ 20%
二氯曱烷40%~60%。
較佳地，所述鹽酸羥胺鐵溶液由按照質(zhì)量百分比計(jì)算的鹽酸羥胺20 100mg/ml 和硫酸亞鐵0. 1 0. 7mg/ml組成。較佳地，所述鄰二氮菲溶液為質(zhì)量濃度為2 ％ig/ml的鄰二氮菲溶液。較佳地，所述醋酸銨緩沖液為質(zhì)量濃度為0. 6 0. 8mg/ml的醋酸銨緩沖液。較佳地，所述鹽酸羥胺溶液為質(zhì)量濃度為20 100mg/ml的鹽酸羥胺溶液，硫酸亞鐵溶液為質(zhì)量濃度為0. 1 0. 7mg/ml的硫酸亞鐵溶液。制備檢測(cè)試劑的方法，具體為試劑的配置(1)、鄰二氮菲溶液的配制取鄰二氮菲，加水使之溶解，搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鄰二氮菲溶液；(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的醋酸銨緩沖液；(3)、鹽酸羥胺鐵溶液的配制取鹽酸羥胺、硫酸亞鐵，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鹽酸羥胺鐵溶液；檢測(cè)試劑配置(1)、先往反應(yīng)器內(nèi)依次加入所述鄰二氮菲溶液、醋酸銨緩沖液、鹽酸羥胺鐵溶液， 搖勻后制得混合溶液I (溶液顯磚紅色)；(2)、再往裝有混合溶液I的反應(yīng)器內(nèi)加入二氯甲烷，用力振搖1 aiiin，制得所述檢測(cè)試劑(靜置分層，二氯甲烷層(下層)透明無(wú)色，得到所述試劑)。用所述檢測(cè)試劑檢測(cè)地溝油的方法，包括如下制備步驟步驟A、從地溝油油樣中提取十二烷基苯磺酸鈉溶液；步驟B、檢測(cè)試劑的配置試劑的配置(1)、鄰二氮菲溶液的配制取鄰二氮菲，加水使之溶解，搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鄰二氮菲溶液；(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的醋酸銨緩沖液；(3)、鹽酸羥胺鐵溶液的配制取鹽酸羥胺、硫酸亞鐵，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鹽酸羥胺鐵溶液；檢測(cè)試劑配置(1)、先往反應(yīng)器內(nèi)依次加入所述鄰二氮菲溶液、醋酸銨緩沖液、鹽酸羥胺鐵溶液， 搖勻后制得混合溶液I ；(2)、再往裝有混合溶液I的反應(yīng)器內(nèi)加入二氯甲烷，用力振搖0. 5 2min，制得所述檢測(cè)試劑。步驟C、將步驟A中提取得到的十二烷基苯磺酸鈉溶液1 anl，加入到步驟B中所制得的檢測(cè)試劑中，振蕩搖勻、靜置分層后，下層(二氯甲烷層)顯示呈現(xiàn)淺紅色至深紅色，表明待測(cè)油樣中存在十二烷基苯磺酸鈉，可證實(shí)該油樣為地溝油。較佳地，步驟A從地溝油油樣中提取十二烷基苯磺酸鈉溶液，具體為取IOml油樣品，加乙醇10 15ml，搖勻，在80 100°C水浴中加熱5 lOmin，取出，劇烈震蕩3 5min,5000 10000r/min離心3 5min，收集上清液得到十二烷基苯磺酸鈉溶液。較佳地，所述乙醇為體積百分比為40% 60%的乙醇溶液。其篩查原理為地溝油，是不法分子將下水道中的油膩漂浮物或者將賓館、酒樓的剩飯、剩菜(通稱泔水)回收，經(jīng)過(guò)過(guò)濾、加熱、沉淀、分離、脫色、洗油等工序加工、提煉出的油。十二烷基苯磺酸鈉(簡(jiǎn)稱DBS，以下同)為常用洗滌劑，被大量使用于餐飲業(yè)的清洗消毒環(huán)節(jié)中，具有中等毒性，動(dòng)物實(shí)驗(yàn)表明有明顯促致癌作用。該物質(zhì)在天然食用油中不可能存在，但用于精制地溝油的原材料-含有洗碗水中的洗滌劑，且加工、精制過(guò)程難以去除該洗滌劑化學(xué)成分，導(dǎo)致性質(zhì)穩(wěn)定的DBS殘留在地溝油中，因此，選擇DBS作為鑒別地溝油的特異指標(biāo)，專屬性強(qiáng)。本發(fā)明包括按照體積百分比計(jì)算的鄰二氮菲溶液10% 20%、醋酸銨緩沖液 10% 20%、鹽酸羥胺鐵溶液10% 20%、二氯甲烷40% 60% ；在pH值為2 9的溶液中，鄰二氮菲與亞鐵離子形成紅色的穩(wěn)定絡(luò)合物，加入二氯甲烷作萃取試劑，當(dāng)溶液含中有十二烷基苯磺酸鈉時(shí)，十二烷基苯磺酸鈉作為陰離子表面活性劑，有很好的降低液體表面張力和潤(rùn)濕、滲透和乳化的性能，改變了二氯甲烷對(duì)紅色絡(luò)合物的萃取能力，故二氯甲烷層呈現(xiàn)淺紅色至紅色，二氯甲烷層色度與十二烷基苯磺酸鈉的量呈正相關(guān)，本方法檢出限為 20 μ g/ml。向鄰二氮菲中加入鹽酸羥胺鐵溶液，目的使鄰二氮菲與!^2+生成紅色穩(wěn)定絡(luò)合物，加入含有十二烷基苯磺酸鈉的提取溶液，改變二氯甲烷對(duì)紅色絡(luò)合物的萃取能力，二氯甲烷萃取層顯色。其絡(luò)合過(guò)程如下本發(fā)明克服現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)的缺陷，建立能適用于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)、分析成本低的快速篩查方法。不僅快速篩查方法快速、簡(jiǎn)便，整個(gè)操作過(guò)程包括顯色溶液制備2min、油樣提取17min，然后加入到顯色溶液中進(jìn)行顯色，整個(gè)操作過(guò)程在20min完成。且無(wú)需對(duì)照品也無(wú)需精密儀器，分析成本低、操作簡(jiǎn)單快速，可適用于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)；而且該方法可以檢出用現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格的地溝油，彌補(bǔ)了現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)缺陷。
具體實(shí)施例方式為了使本領(lǐng)域技術(shù)人員更好的理解本發(fā)明，以下通過(guò)幾個(gè)具體實(shí)施例來(lái)進(jìn)行詳盡說(shuō)明。實(shí)施例1一種地溝油的檢測(cè)試劑，包括0. 5ml鄰二氮菲溶液Qmg/ml)、0. 5ml醋酸銨緩沖液 (0. 6mg/ml)Uml鹽酸羥胺鐵溶液(鹽酸羥胺20mg/ml和硫酸亞鐵0. lmg/ml)、3ml 二氯甲焼。試劑的配制
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(1)、鄰二氮菲溶液取鄰二氮菲(又名二氮雜菲)0. 2g，加水IOOml使溶解，搖勻，即得。(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨0. 3g，加水500ml使溶解，搖勻，即得。(3)、鹽酸羥胺鐵溶液取鹽酸羥胺2g，加硫酸亞鐵0. Olg,加水IOOml使溶解，搖勻，即得。檢測(cè)試劑的配制取試管，依次加入配制好的鄰二氮菲溶液0. 5ml、醋酸銨緩沖液0. 5ml、鹽酸羥胺鐵溶液Iml ；搖勻，溶液顯磚紅色，加入二氯甲烷3ml，用力振搖lmin，靜置分層，二氯甲烷層 (下層)透明無(wú)色，得到所述檢測(cè)試劑。地溝油的測(cè)定取IOml油樣品，加40 %乙醇IOml，搖勻，在80 V水浴中加熱5min，取出，劇烈震蕩 5min, 5000r/min離心3min，收集上清液。取離心得到的上清液Iml加入到上述所述檢測(cè)試劑中，振蕩搖勻，靜置觀察。二氯甲烷層(下層)如呈現(xiàn)淺紅色至深紅色，表明待測(cè)樣品中存在十二烷基苯磺酸鈉，判斷待測(cè)樣品為地溝油。實(shí)施例2一種地溝油的檢測(cè)試劑，包括0. 7ml鄰二氮菲溶液(3mg/ml)、lml醋酸銨緩沖液 (0. 65mg/ml)、0. 5ml鹽酸羥胺鐵溶液(鹽酸羥胺50mg/ml和硫酸亞鐵0. 4mg/ml)、2. 8ml 二氯甲烷。試劑的配制(1)、鄰二氮菲溶液取鄰二氮菲(又名二氮雜菲)0. 3g，加水IOOml使溶解，搖勻，即得。(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨0. 33g，加水500ml使溶解，搖勻，即得。(3)、鹽酸羥胺鐵溶液取鹽酸羥胺5g，加硫酸亞鐵0. 04g,加水IOOml使溶解，搖勻，即得。檢測(cè)試劑的配制取試管，依次加入配置好的鄰二氮菲溶液0. 7ml、醋酸銨緩沖液1ml、鹽酸羥胺鐵溶液0. 5ml ；搖勻，溶液顯磚紅色，加入二氯甲烷2. 8m，用力振搖2min，靜置分層，二氯甲烷層(下層)透明無(wú)色，得到所述檢測(cè)試劑。地溝油的測(cè)定取IOml油樣品，加45 %乙醇1 Iml，搖勻，在90 V水浴中加熱6min，取出，劇烈震蕩 3min, 7000r/min離心％iin，收集上清液。取離心得到的上清液2ml加入到上述所述檢測(cè)試劑中，振蕩搖勻，靜置觀察。二氯甲烷層(下層)如呈現(xiàn)淺紅色至深紅色，表明待測(cè)樣品中存在十二烷基苯磺酸鈉，判斷待測(cè)樣品為地溝油。實(shí)施例3一種地溝油的檢測(cè)試劑，包括Iml鄰二氮菲溶液(％ig/ml)、lml醋酸銨緩沖液 (0. 77mg/ml)Uml鹽酸羥胺鐵溶液(鹽酸羥胺10mg/ml和硫酸亞鐵0. 7mg/ml)、2ml 二氯甲焼。試劑的配制(1)、鄰二氮菲溶液取鄰二氮菲(又名二氮雜菲)0. 4g，加水IOOml使溶解，搖勻，即得。(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨0. 3855g，加水500ml使溶解，搖勻，即得。(3)、鹽酸羥胺鐵溶液取鹽酸羥胺10g，加硫酸亞鐵0. 07g,加水IOOml使溶解，搖勻，即得。檢測(cè)試劑的配制取試管，依次加入配制好的鄰二氮菲溶液1ml、醋酸銨緩沖液1ml、鹽酸羥胺鐵溶液Iml ；搖勻，溶液顯磚紅色，加入二氯甲烷2ml，用力振搖lmin，靜置分層，二氯甲烷層(下層)透明無(wú)色，得到所述檢測(cè)試劑。地溝油的測(cè)定取IOml油樣品，加50%乙醇20ml，搖勻，在80°C水浴中加熱15min，取出，劇烈震蕩5min，10000r/min離心5min，收集上清液。取離心得到的上清液1. 5ml加入到上述所述檢測(cè)試劑中，振蕩搖勻，靜置觀察。二氯甲烷層(下層)如呈現(xiàn)淺紅色至深紅色，表明待測(cè)樣品中存在十二烷基苯磺酸鈉，判斷待測(cè)樣品為地溝油。實(shí)施例4一種地溝油的檢測(cè)試劑，包括Iml鄰二氮菲溶液(％ig/ml)、0. 7ml醋酸銨緩沖液 (0. 8mg/ml)、0· 8ml鹽酸羥胺鐵溶液(鹽酸羥胺80mg/ml和硫酸亞鐵0. 6mg/ml)、2· 5ml 二氯甲烷。試劑的配制(1)、鄰二氮菲溶液取鄰二氮菲(又名二氮雜菲)0. 4g，加水100ml使溶解，搖勻，即得。(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨0. 4g，加水500ml使溶解，搖勻，即得。(3)、鹽酸羥胺鐵溶液取鹽酸羥胺8g，加硫酸亞鐵0. 06g,加水100ml使溶解，搖勻，即得。檢測(cè)試劑的配制取試管，依次加入配制好的鄰二氮菲溶液lml、醋酸銨緩沖液0.7ml、鹽酸羥胺鐵溶液0. 8ml ；搖勻，溶液顯磚紅色，加入二氯甲烷2. 5ml，用力振搖2min，靜置分層，二氯甲烷層(下層)透明無(wú)色，得到所述檢測(cè)試劑。地溝油的測(cè)定取IOml油樣品，加60%乙醇Uml，搖勻，在100°C水浴中加熱8min，取出，劇烈震蕩％iin，8000r/min離心％iin，收集上清液。取離心得到的上清液2ml加入到上述所述檢測(cè)試劑中，振蕩搖勻，靜置觀察。二氯甲烷層(下層)如呈現(xiàn)淺紅色至深紅色，表明待測(cè)樣品中存在十二烷基苯磺酸鈉，判斷待測(cè)樣品為地溝油。以上所述僅為了是本領(lǐng)域技術(shù)人員理解本發(fā)明所列舉的幾個(gè)具體實(shí)施例，并非用來(lái)限制本發(fā)明所要求保護(hù)的范圍。故凡以本發(fā)明權(quán)利要求所述的特征、結(jié)構(gòu)及原理所做的等效變化或修飾，均應(yīng)包括在本發(fā)明權(quán)利要求范圍之內(nèi)。
權(quán)利要求
1.一種地溝油的檢測(cè)試劑，其特征在于，包括按照體積百分比計(jì)算的如下物質(zhì)鄰二氮菲溶液10%~20%醋酸銨緩沖液10%~20%鹽酸羥胺鐵溶液10% ~ 20%二氯曱烷40%~60%。
2.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的檢測(cè)試劑，其特征在于，所述鹽酸羥胺鐵溶液由按照質(zhì)量百分比計(jì)算的鹽酸羥胺20 100mg/ml和硫酸亞鐵0. 1 0. 7mg/ml組成。
3.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的檢測(cè)試劑，其特征在于，所述鄰二氮菲溶液為質(zhì)量濃度為 2 ％ig/ml的鄰二氮菲溶液。
4.根據(jù)權(quán)利要求1中所述的檢測(cè)試劑，其特征在于，所述醋酸銨緩沖液為質(zhì)量濃度為 0. 6 0. 8mg/ml的醋酸銨緩沖液。
5.制備權(quán)利要求1所述檢測(cè)試劑的方法，其特征在于，具體為試劑的配置(1)、鄰二氮菲溶液的配制取鄰二氮菲，加水使之溶解，搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鄰二氮菲溶液；(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的醋酸銨緩沖液；(3)、鹽酸羥胺鐵溶液的配制取鹽酸羥胺、硫酸亞鐵，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鹽酸羥胺鐵溶液；檢測(cè)試劑配置(1)、先往反應(yīng)器內(nèi)依次加入所述鄰二氮菲溶液、醋酸銨緩沖液、鹽酸羥胺鐵溶液，搖勻后制得混合溶液I ；(2)、再往裝有混合溶液I的反應(yīng)器內(nèi)加入二氯甲烷，用力振搖1 aiiin，制得所述檢測(cè)試齊LU
6.用權(quán)利要求1所述檢測(cè)試劑檢測(cè)地溝油的方法，其特征在于，包括如下制備步驟步驟A、從地溝油油樣中提取十二烷基苯磺酸鈉溶液；步驟B、試劑的配置試劑的配置(1)、鄰二氮菲溶液的配制取鄰二氮菲，加水使之溶解，搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鄰二氮菲溶液；(2)、醋酸銨緩沖液的配制稱取醋酸銨，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的醋酸銨緩沖液；(3)、鹽酸羥胺鐵溶液的配制取鹽酸羥胺、硫酸亞鐵，加水使溶解，搖勻即得搖勻即得所述質(zhì)量濃度的鹽酸羥胺鐵溶液；檢測(cè)試劑配置(1)、先往反應(yīng)器內(nèi)依次加入所述鄰二氮菲溶液、醋酸銨緩沖液、鹽酸羥胺鐵溶液，搖勻后制得混合溶液I ；(2)、再往裝有混合溶液I的反應(yīng)器內(nèi)加入二氯甲烷，用力振搖1 aiiin，制得所述檢測(cè)試齊LU步驟C、將步驟A中提取得到的十二烷基苯磺酸鈉溶液1 anl，加入到步驟B中所制得的檢測(cè)試劑中，振蕩搖勻、靜置分層后，下層顯示呈現(xiàn)淺紅色至深紅色，表明待測(cè)油樣中存在十二烷基苯磺酸鈉，可證實(shí)該油樣為地溝油。
7.根據(jù)權(quán)利要求6中所述檢測(cè)地溝油的方法，其特征在于，步驟A從地溝油油樣中提取十二烷基苯磺酸鈉溶液，具體為取IOml油樣品，加乙醇10 15ml，搖勻，在80 100°C7jC 浴中加熱5 lOmin，取出，劇烈震蕩3 5min，5000 10000r/min離心3 5min，收集上清液得到十二烷基苯磺酸鈉溶液。
8.根據(jù)權(quán)利要求7中所述檢測(cè)地溝油的方法，其特征在于，所述乙醇為體積百分比為 40% 60%的乙醇溶液。
全文摘要
本發(fā)明涉及地溝油檢測(cè)技術(shù)領(lǐng)域，特別是涉及一種地溝油的檢測(cè)試劑及其制備方法和檢測(cè)方法；包括按照體積百分比計(jì)算的鄰二氮菲溶液10％～20％、醋酸銨緩沖液10％～20％、鹽酸羥胺鐵溶液10％～20％、二氯甲烷40％～60％；本發(fā)明克服現(xiàn)有檢測(cè)技術(shù)的缺陷，建立能適用于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)、分析成本低的快速篩查方法。不僅快速篩查方法快速、簡(jiǎn)便，整個(gè)操作過(guò)程包括顯色溶液制備2min、油樣提取17min，然后加入到顯色溶液中進(jìn)行顯色，整個(gè)操作過(guò)程在20min完成。且無(wú)需對(duì)照品也無(wú)需精密儀器，分析成本低、操作簡(jiǎn)單快速，可適用于現(xiàn)場(chǎng)監(jiān)督檢驗(yàn)；而且該方法可以檢出用現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)檢驗(yàn)合格的地溝油，彌補(bǔ)了現(xiàn)行國(guó)家標(biāo)準(zhǔn)缺陷。
文檔編號(hào)G01N21/78GK102507547SQ20111030204
公開(kāi)日2012年6月20日 申請(qǐng)日期2011年9月28日 優(yōu)先權(quán)日2011年9月28日
發(fā)明者李媛, 殷果, 王玨, 王鐵杰, 秦斌, 肖麗和, 謝普 申請(qǐng)人:深圳市藥品檢驗(yàn)所