專利名稱：：一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑和方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：、本發(fā)明涉及一種細(xì)胞分類試劑及對細(xì)胞進(jìn)行分類的方法，特別是涉及一種用于對血液中白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑以及利用該試劑對血液中白細(xì)胞進(jìn)行分類檢測的方法。
背景技術(shù)：
：用患者的全血對白細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)，為臨床診斷和治療提供依據(jù)，具有十分重要的意義。迄今為止，有關(guān)對白細(xì)胞進(jìn)行分類的裝置和方法發(fā)表了許多。這些裝置是將血液用溶血劑或染色劑處理，基于處理后的細(xì)胞的物理學(xué)、電學(xué)或光學(xué)特性來對白細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)。例如，有的分類方法采用染色劑對白細(xì)胞進(jìn)行染色，檢測染色后白細(xì)胞發(fā)出的熒光來對白細(xì)胞進(jìn)行分類；有的分類方法采用溶血劑對白細(xì)胞進(jìn)行特殊處理，檢測其電信號或光散射信號，從而對白細(xì)胞進(jìn)行分類?，F(xiàn)有技術(shù)一公開了使用白細(xì)胞四分類測定用試劑和嗜堿細(xì)胞測定用試劑，將白細(xì)胞五分類的方法。白細(xì)胞四分類測定用試劑包括至少一種離子表面活性劑、至少一種帶負(fù)電的有機(jī)化合物、一種非離子表面活性劑和緩沖劑，其與第一份血樣作用，將血細(xì)胞分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、嗜酸細(xì)胞和嗜堿細(xì)胞加中性粒細(xì)胞四個類群；嗜堿細(xì)胞測定用試劑，與第二份血樣作用，將血細(xì)胞分成嗜堿細(xì)胞和其他細(xì)胞類群。綜合兩種結(jié)果將白細(xì)胞五分類。檢測方法為兩角度激光散射法。現(xiàn)有技術(shù)二提出了通過兩角度光散射使用白細(xì)胞四分類試劑和嗜堿細(xì)胞測定試劑將白細(xì)胞五分類和計數(shù)的方法，四分類試劑包括至少一種離子表面活性劑用以溶解紅細(xì)胞和損傷白細(xì)胞膜，至少一種帶負(fù)電的有機(jī)化合物用以與白細(xì)胞中帶正電荷的物質(zhì)結(jié)合使白細(xì)胞形態(tài)發(fā)生變化，一種非離子表面活性劑和用以調(diào)pH的緩沖液。嗜堿細(xì)胞測定試劑包括至少一種聚合度3-10的聚氧乙烯類非離子表面活性劑，至少一種陽離子表面活性劑，一種緩沖液調(diào)pH至2.5-4.0。在第一份血樣中加入第一試劑將白細(xì)胞分成四個群:淋巴細(xì)胞群、單核細(xì)胞群、嗜酸細(xì)胞群、中性粒和嗜堿細(xì)胞群；在第二份血樣中加入第二試劑，根據(jù)細(xì)胞的形態(tài)和大小，用來區(qū)分白細(xì)胞中的嗜堿細(xì)胞，從而獲得白細(xì)胞五分類結(jié)果。現(xiàn)有技術(shù)三是關(guān)于對白細(xì)胞四分類的試劑，這種試劑包括至少一種離子表面活性劑，可以是陽離子或兩性表面活性劑中一種，用來溶解紅細(xì)胞同時部分損傷白細(xì)胞膜；至少含一種帶陰離子的有機(jī)化合物，通過與白細(xì)胞上帶正電荷的組分結(jié)合使各類白細(xì)胞形態(tài)差異顯現(xiàn)；一種非離子表面活性劑和用來調(diào)整pH值的緩沖劑。檢測方法可為兩角度激光散射法。現(xiàn)有技術(shù)四提出使用含至少一種陰離子或兩性表面活性劑短時間內(nèi)溶解紅細(xì)胞，同時維持白細(xì)胞在一定時間內(nèi)保持或接近原始狀態(tài)，通過收集前角光散射和側(cè)向光散射信號對白細(xì)胞進(jìn)行四分類?，F(xiàn)有技術(shù)五提出了一種從全血樣本中快速分離、分析白細(xì)胞的方法和試劑系統(tǒng)。該溶血劑系統(tǒng)由第一試劑選自甲酸、乙酸及兩者的混合物和第二試劑抑制劑組成。試劑使紅細(xì)胞溶解并使白細(xì)胞發(fā)生微小改變以使可通過儀器對細(xì)胞進(jìn)行五分類。其優(yōu)點和獨特性在于其驚人的溶血速度并能對白細(xì)胞進(jìn)行進(jìn)一步修飾。溶血后加入抑制劑，防止進(jìn)一步的溶血及白細(xì)胞明顯的變化。血樣經(jīng)過處理后能保持細(xì)胞的免疫化學(xué)特性。檢測方法可為兩角度光散射法，或直流阻抗和射頻阻抗法，或直流阻抗和光散射法。現(xiàn)有技術(shù)六公開了一種對白細(xì)胞進(jìn)行五分類的溶血劑和方法。溶血劑包括芳香族氧乙醇、pK值接近8.5的有機(jī)緩沖劑、非離子去垢劑。首先，血樣與稀釋液混合，加入所述溶血劑溶解紅細(xì)胞，在至少30秒內(nèi)不影響白細(xì)胞的光散射特性，通過收集四個角度光散射信號，從而對白細(xì)胞進(jìn)行五分類。現(xiàn)有技術(shù)七是通過一種pH2.6-4的酸性溶解劑對紅細(xì)胞快速溶解和白細(xì)胞保持完整后加入抑制劑可以對白細(xì)胞進(jìn)行五分類的方法，其檢測系統(tǒng)可以使用光散射也可以使用射頻/直流阻抗法。但是，以上現(xiàn)有技術(shù)中還存在許多不足。比如，現(xiàn)有技術(shù)三、四都是通過兩角度光散射法將白細(xì)胞進(jìn)行分成淋巴細(xì)胞，單核細(xì)胞，中性粒細(xì)胞和嗜酸性粒細(xì)胞四個類群，但不能將嗜堿性粒細(xì)胞分離出來?，F(xiàn)有技術(shù)一、二中公開的分類方法都是通過兩種試劑分別與兩份血樣作用，在兩個通道進(jìn)行分類，綜合對白細(xì)胞進(jìn)行五分類；現(xiàn)有技術(shù)六可以在一個通道中對白細(xì)胞進(jìn)行五分類，但要檢測四個角度的散射光信號，儀器的構(gòu)成變得復(fù)雜，儀器的成本較高?，F(xiàn)有技術(shù)五、七提到的分類技術(shù)，可在一個通道中對白細(xì)胞進(jìn)行五分類，卻只能在常溫下反應(yīng)，但隨著氣溫的變化環(huán)境溫度是有差異的，很難保證處于25度恒溫狀態(tài)，測量結(jié)果隨著溫度變化會產(chǎn)生波動，降低了結(jié)果的準(zhǔn)確性。假如在此方法基礎(chǔ)上消除溫度對反應(yīng)的影響，需要增加恒溫裝置，不僅需要加熱裝置，同時需要配備制冷裝置，大大提高了儀器成本。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明的目的是針對現(xiàn)有技術(shù)的不足，提供一種能夠在較寬溫度范圍內(nèi)、在一個通道中準(zhǔn)確地將白細(xì)胞進(jìn)行五分類的試劑系統(tǒng)和方法。為實現(xiàn)上述目的，本發(fā)明采用了以下技術(shù)方案本發(fā)明公開了一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，所述試劑包括a、可以溶解紅細(xì)胞，且使白細(xì)胞的細(xì)胞膜部分損傷的至少兩種陽離子表面活性劑；b、可與白細(xì)胞內(nèi)陽離子結(jié)合，使白細(xì)胞之間產(chǎn)生形態(tài)差異的至少一種帶疏水基團(tuán)及陰離子基團(tuán)的有機(jī)化合物；c、能夠?qū)H值調(diào)整在28范圍內(nèi)的緩沖劑。所述對白細(xì)胞進(jìn)行分類是指將白細(xì)胞分為與淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞以及嗜堿性粒細(xì)胞分別對應(yīng)的五個集團(tuán)。優(yōu)選的，所述陽離子表面活性劑為季銨鹽型陽離子表面活性劑。在本發(fā)明具體實施方式中，所述陽離子表面活性劑進(jìn)一步優(yōu)選為具有下式所示結(jié)構(gòu)的季銨鹽型陽離子表面活性劑，R4.X-IR2其中，R1為C原子數(shù)616的垸基或鏈烯基，R2及R3為C原子數(shù)14的烷基或鏈烯基，R4為C原子數(shù)14的垸基或鏈烯基或芐基，X為鹵素原子。所述有機(jī)化合物的疏水基團(tuán)優(yōu)選自芳香族組成的基團(tuán)、C原子數(shù)6以上的烴基形成的基團(tuán)或者C原子數(shù)大于6的雜環(huán)，所述有機(jī)化合物的陰離子基團(tuán)優(yōu)選為羧基或磺酸基。在本發(fā)明優(yōu)選的實施方式中，所述有機(jī)化合物為酸性色素。所述試劑可以進(jìn)一步包括醇類，并且所述醇類占所述試劑的體積百分比濃度為0.110%。所述醇類優(yōu)選為甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或2-苯氧乙醇。本發(fā)明還公開了一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的方法，所述方法包括將上述的白細(xì)胞分類試劑與血樣混合后測定細(xì)胞的大小和形態(tài)信息。具體地，所述方法包括在104(TC的溫度條件下，將所述白細(xì)胞分類試劑與血樣按10100:1的比例混合1230s后，通過低角度和高角度兩種散射光分別測定細(xì)胞的大小和形態(tài)信息，所述低角度散射光的測定角度為15度，高角度散射光的測定角度為620度。由于采用了以上技術(shù)方案，使本發(fā)明具備的有益效果在于利用本發(fā)明的試劑及方法進(jìn)行白細(xì)胞分類檢測，可以在快速將紅細(xì)胞溶解的同時，實現(xiàn)在同一個通道中將白細(xì)胞進(jìn)行五分類，分為與淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞以及嗜堿性粒細(xì)胞分別對應(yīng)的五個集團(tuán)；并且，利用本發(fā)明的試劑及方法對白細(xì)胞進(jìn)行分類檢測時，不僅可以在常溫下進(jìn)行，也可以在1040。C的溫度條件下進(jìn)行，一方面擴(kuò)展了溫度適用范圍，另一方面在高于室溫的條件下反應(yīng)有利于消除環(huán)境溫度對反應(yīng)的影響，增加結(jié)果的可靠性和穩(wěn)定性，還可以避免使用制冷裝置，儀器成本較低；此外，利用本發(fā)明的試劑和方法可以實現(xiàn)只需檢測兩個角度的散射光信號即可對白細(xì)胞進(jìn)行五分類，從而降低了儀器成本。圖l、2、3是利用本發(fā)明的一種白細(xì)胞分類試劑分別對三份血樣進(jìn)行白細(xì)胞五分類的結(jié)果圖；'圖4是利用本發(fā)明的另一種白細(xì)胞分類試劑對白細(xì)胞進(jìn)行五分類的結(jié)果圖5是利用本發(fā)明的又一種白細(xì)胞分類試劑對白細(xì)胞進(jìn)行五分類的結(jié)果圖中0表示碎片，l表示淋巴細(xì)胞，2表示單核細(xì)胞，3表示中性粒細(xì)胞，4表示嗜酸性粒細(xì)胞，5表示嗜堿性粒細(xì)胞。具體實施例方式本發(fā)明的白細(xì)胞分類試劑，主要包括a、可以溶解紅細(xì)胞，且使白細(xì)胞的細(xì)胞膜部分損傷的至少兩種陽離子表面活性劑；b、可與白細(xì)胞內(nèi)陽離子結(jié)合，使白細(xì)胞之間產(chǎn)生形態(tài)差異的足量的至少一種帶疏水基團(tuán)及陰離子基團(tuán)的有機(jī)化合物；c、能夠?qū)H值調(diào)整在28范圍內(nèi)的緩沖劑。將上述組成的白細(xì)胞五分類用試劑加入到全血樣本中，通過測定細(xì)胞大小和形態(tài)信息，能夠?qū)准?xì)胞中淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞相對應(yīng)五個集團(tuán)進(jìn)行分類計數(shù)。所述的陽離子表面活性劑為季銨鹽型陽離子表面活性劑，其結(jié)構(gòu)式如下所示R4I.X-I其中R1為C原子數(shù)616的垸基或鏈烯基；R2及R3為原子數(shù)14的烷基或鏈烯基；R4為C原子數(shù)為14的烷基或鏈烯基或芐基；X為鹵素原子。所述陽離子表面活性劑，其用量應(yīng)足以溶解紅細(xì)胞，并造成白細(xì)胞的細(xì)胞膜部分損失。具體用量為10010000mg/L，優(yōu)選2006000mg/L，最優(yōu)選5005000mg/L，也可以根據(jù)使用的表面活性劑的種類作適當(dāng)調(diào)整。下表l中舉例列出了可用于本發(fā)明的各表面活性劑及其最適用量。同時，這些表面活性劑可以只使用兩種或兩種以上任意組合使用。表l表面活性劑的最適用量<table>tableseeoriginaldocumentpage9</column></row><table>無論使用哪種表面活性劑組合，其對白細(xì)胞的溶解力，只要能使白細(xì)胞膜開孔到胞質(zhì)可以部分溢出，與陽離子結(jié)合的有機(jī)化合物能夠進(jìn)入的程度即可，最好使用遠(yuǎn)遠(yuǎn)少于使細(xì)胞完全裸核時的用量。表面活性劑的溶血效果和R1的鏈長是成正比的，C原子數(shù)越多，溶血能力越強(qiáng)。本發(fā)明中，除表面活性劑外，還有一種化合物可以和細(xì)胞內(nèi)陽離子結(jié)合導(dǎo)致細(xì)胞類群間形態(tài)差異顯現(xiàn)。這種化合物，帶有疏水基團(tuán)(如由芳香族組成的基團(tuán)、由C原子數(shù)6個以上的烴基形成的基團(tuán)以及C原子數(shù)大于6的雜環(huán)等)及陰離子基團(tuán)(如羧基、磺酸基等)，在水中帶負(fù)電荷，能與白細(xì)胞結(jié)合使白細(xì)胞形態(tài)發(fā)生改變。幾乎所有酸性色素如酸性藍(lán)系列、直接藍(lán)、酸性綠、酸性黃、甲基紅、甲基橙、苯胺藍(lán)、茜素黃等都可以滿足要求。使用量為101000mg/L，優(yōu)選20500mg/L。本發(fā)明中，還含有調(diào)整pH用的緩沖劑。對于緩沖劑沒有特定的要求，可以為常用緩沖體系如甲酸、鄰苯二甲酸、乙酸、磷酸、TRIS、硼酸、碳酸等。本發(fā)明試劑中pH調(diào)整到28范圍內(nèi)。緩沖劑的使用量通常為5100mM。此外，本發(fā)明中還可以含有一定量的醇類作為助溶劑。醇類作為助溶劑對種類沒有特別要求，甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇、2-苯氧乙醇等均可用于本發(fā)明。作為助溶劑的醇類，其用量占本發(fā)明的試劑的體積百分比濃度通常為0.110%左右。利用本發(fā)明的方法對白細(xì)胞進(jìn)行分類的具體過程包括，將本發(fā)明的上述試劑加入全血中混合一定時間后，檢測細(xì)胞的形態(tài)和大小信息，根據(jù)細(xì)胞形態(tài)與大小的不同將細(xì)胞分成與淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞相對應(yīng)五個集團(tuán)，檢測系統(tǒng)同時對五類細(xì)胞進(jìn)行分類計數(shù)o血樣與本發(fā)明試劑的混合比例沒有特別的限制，但通常按照血樣與本發(fā)明試劑的體積比為1:10100的比例混合。通常在兩者混合1230秒后就可以進(jìn)行檢測。用本發(fā)明的試劑及方法進(jìn)行白細(xì)胞分類時，在1040°C溫度范圍內(nèi)均可以進(jìn)行。對每一個具體的反應(yīng)，只要將反應(yīng)溫度固定在1040"C范圍的任一溫度下，就都能夠保證分類結(jié)果的穩(wěn)定。本發(fā)明優(yōu)選的溫度為35'C。選用該溫度的原因是由于該溫度高于室溫，因此在實際應(yīng)用中只需加熱裝置就可以實現(xiàn)恒溫，而不必增加制冷裝置，大大節(jié)約了儀器成本。使用本發(fā)明可以在一個通道中對白細(xì)胞進(jìn)行五分類，檢測細(xì)胞的形態(tài)和大小信息的方法優(yōu)選使用激光檢測法。該方法可以利用公知的裝置，采用測定角度為15度的低角度散射光來測定細(xì)胞的大小信息，并采用測定角度為620度的高角度散射光測定細(xì)胞的形態(tài)信息。該裝置可以選用如中國專利95115317衛(wèi)中所描述的裝置，也可以選用本領(lǐng)域技術(shù)人員所公知的其他裝置。而散射光的檢測可以通過常用的光電二極管傳感器完成。下面通過具體的實施例對本發(fā)明做進(jìn)一步詳細(xì)的描述。實施例l一種用于白細(xì)胞五分類的試劑，該試劑由以下成分組成鄰苯二甲酸lg2-苯氧乙醇2.5g癸基三甲基氯化銨3.5￡.辛基三甲基溴化銨1.75g甲苯胺藍(lán)0.025g補(bǔ)水到1LpH4.6按上述配方配制的試劑將pH調(diào)整到4.6。在溫度保持35度的條件下，在10lU血中加入lml上述試齊!j?；旌?5秒后開始用激光檢測法檢測白細(xì)胞。采用測定角度為15度的低角度散射光測定細(xì)胞的大小信息，并采用測定角度為620度的高角度散射光測定細(xì)胞的形態(tài)信息。用上述配制的試劑測試了三個血樣，結(jié)果如圖l、圖2、圖3所示，白細(xì)胞被分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞五個類群。實施例2一種用于白細(xì)胞五分類的試劑，該試劑由以下成分組成磷酸二氫鈉0.6g磷酸氫二鈉4.77g甲醇.8g十二烷基三甲基氯化銨0.5g辛基三甲基溴化銨3g酸性藍(lán)0.05g補(bǔ)水到1LpH7.5按上述配方配制的試劑將pH調(diào)整到7.5。在溫度保持35度的條件下，在lOlU血中加入lml上述試齊U?；旌?5秒后開始用激光檢測法檢測白細(xì)胞。采用測定角度為15度的低角度散射光測定細(xì)胞的大小信息，并采用測定角度為620度的高角度散射光測定細(xì)胞的形態(tài)信息。結(jié)果如圖4所示，白細(xì)胞被分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞五個類群。實施例3一種用于白細(xì)胞五分類的試劑，該試劑由以下成分組成甲酸1.5g甘氨酸lg異丙醇10g十二烷基二甲基芐基氯化銨0.2g辛基三甲基氯化銨3g甲基紅0.05g補(bǔ)水到1LpH2.8按上述配方配制的試劑將pH調(diào)整到2.8。在溫度保持35度的條件下，在10ul血中加入lml上述試劑。混合15秒后開始用激光檢測法檢測白細(xì)胞。采用測定角度為15度的低角度散射光測定細(xì)胞的大小信息，并采用測定角度為620度的高角度散射光測定細(xì)胞的形態(tài)信息。結(jié)果如圖5所示，白細(xì)胞被分成淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞和嗜堿性粒細(xì)胞五個類群。以上內(nèi)容是結(jié)合具體的優(yōu)選實施方式對本發(fā)明所作的進(jìn)一步詳細(xì)說明，不能認(rèn)定本發(fā)明的具體實施只局限于這些說明。對于本發(fā)明所屬
技術(shù)領(lǐng)域：
的普通技術(shù)人員來說，在不脫離本發(fā)明構(gòu)思的前提下，還可以做出若干簡單推演或替換，都應(yīng)當(dāng)視為屬于本發(fā)明的保護(hù)范圍。權(quán)利要求1.一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于所述試劑包括a、可以溶解紅細(xì)胞，且使白細(xì)胞的細(xì)胞膜部分損傷的至少兩種陽離子表面活性劑；b、可與白細(xì)胞內(nèi)陽離子結(jié)合，使白細(xì)胞之間產(chǎn)生形態(tài)差異的至少一種帶疏水基團(tuán)及陰離子基團(tuán)的有機(jī)化合物；c、能夠?qū)H值調(diào)整在2～8范圍內(nèi)的緩沖劑。2、根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于所述對白細(xì)胞進(jìn)行分類是指將白細(xì)胞分為與淋巴細(xì)胞、單核細(xì)胞、中性粒細(xì)胞、嗜酸性粒細(xì)胞以及嗜堿性粒細(xì)胞分別對應(yīng)的五個集團(tuán)。3、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于所述陽離子表面活性劑為季銨鹽型陽離子表面活性劑。4、根據(jù)權(quán)利要求3所述的一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于所述陽離子表面活性劑為具有下式所示結(jié)構(gòu)的季銨鹽型陽離子表面活性劑，<formula>formulaseeoriginaldocumentpage2</formula>其中，R1為C原子數(shù)616的烷基或鏈烯基，R2及R3為C原子數(shù)14的烷基或鏈烯基，R4為C原子數(shù)14的烷基或鏈烯基或芐基，X為鹵素原子。5、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于所述有機(jī)化合物的疏水基團(tuán)選自芳香族組成的基團(tuán)、C原子數(shù)6以上的烴基形成的基團(tuán)或者C原子數(shù)大于6的雜環(huán)，所述有機(jī)化合物的陰離子基團(tuán)為羧基或磺酸基。6、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于:所述有機(jī)化合物為酸性色素。7、根據(jù)權(quán)利要求2所述的一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于所述試劑包括醇類，并且所述醇類占所述試劑的體積百分比濃度為0.110%。8、根據(jù)權(quán)利要求7所述的一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，其特征在于所述醇類為甲醇、乙醇、異丙醇、正丁醇或2-苯氧乙醇。9、一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的方法，所述方法包括將權(quán)利要求18中任意一項所述的白細(xì)胞分類試劑與血樣混合后測定細(xì)胞的大小和形態(tài)信息。10、根據(jù)權(quán)利要求9所述的方法，其特征在于所述方法包括在104(TC的溫度條件下，將所述白細(xì)胞分類試劑與血樣按10100:1的比例混合1230s后，通過低角度和高角度兩種散射光分別測定細(xì)胞的大小和形態(tài)信息，所述低角度散射光的測定角度為15度，高角度散射光的測定角度為620度。全文摘要本發(fā)明公開了一種對白細(xì)胞進(jìn)行分類的試劑，包括a.至少兩種陽離子表面活性劑；b.至少一種帶疏水基團(tuán)及陰離子基團(tuán)的有機(jī)化合物；c.能夠?qū)H值調(diào)整在2～8范圍內(nèi)的緩沖劑。本發(fā)明還公開了采用上述試劑對白細(xì)胞進(jìn)行分類的方法。利用本發(fā)明的試劑及方法可快速溶解紅細(xì)胞，實現(xiàn)在同一個通道中將白細(xì)胞進(jìn)行五分類，反應(yīng)可以在10～40℃的溫度條件下進(jìn)行并且只需檢測兩個角度的散射光信號即可對白細(xì)胞進(jìn)行五分類檢測。文檔編號G01N33/48GK101470108SQ20071012546公開日2009年7月1日申請日期2007年12月24日優(yōu)先權(quán)日2007年12月24日發(fā)明者喬巖梅,兵劉,劉牧龍,孟祥平,許文娟申請人:深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司