血細(xì)胞分析儀用試劑的制作方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)療診斷儀器用試劑，尤其涉及一種血細(xì)胞分析儀用試劑。
【背景技術(shù)】
[0002] 傳統(tǒng)血液學(xué)常規(guī)檢查方法是借助于顯微鏡進(jìn)行人工血液紅細(xì)胞、白細(xì)胞技術(shù)和血 涂片染色后顯微鏡進(jìn)行肉眼人工白細(xì)胞分類，這樣操作效率低，費(fèi)時(shí)費(fèi)力，無(wú)發(fā)滿足市場(chǎng)的 需求。隨著科技的發(fā)展，自血細(xì)胞分析儀問(wèn)世改變了以上的情況。
[0003] 隨著科學(xué)技術(shù)日新月異的發(fā)展，血細(xì)胞分析的技術(shù)有了很大的進(jìn)步，能夠準(zhǔn)確提 供27項(xiàng)檢測(cè)參數(shù)，為臨床檢查提供了更為準(zhǔn)確有效的方法。血細(xì)胞五分類技術(shù)是當(dāng)前最為 先進(jìn)的分析技術(shù)，是采用了庫(kù)爾特原理、比色法及半導(dǎo)體激光流式細(xì)胞技術(shù)等先進(jìn)技術(shù)，主 要機(jī)型有BC5100/5180/5300/5380/5310/5390,中文的操作界面，使用方便。該五分類自 動(dòng)血細(xì)胞分析儀可以檢測(cè)紅細(xì)胞、白細(xì)胞、血紅蛋白、血小板和平均紅細(xì)胞體積的等等的參 數(shù)，它通過(guò)檢測(cè)人體的血液細(xì)胞的數(shù)目對(duì)各種疾病進(jìn)行診斷，可及時(shí)監(jiān)測(cè)人體的身體狀況， 減少發(fā)病機(jī)率或控制病情，是目前臨床檢查的重要手段之一。
[0004]五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀檢測(cè)血液細(xì)胞數(shù)目時(shí)需要與配套試劑一起使用，血細(xì) 胞分析以配套試劑的稀釋液主要是提供一個(gè)與血漿相同的滲透壓和電導(dǎo)率的作用；溶血?jiǎng)?一方面是溶解紅細(xì)胞，進(jìn)行白細(xì)胞的分類與計(jì)數(shù)，另一方面是溶解紅細(xì)胞，釋放血紅蛋白， 形成穩(wěn)定的血紅蛋白衍生物，進(jìn)行血紅蛋白的測(cè)定；清洗液主要是清洗管道，避免標(biāo)本之間 的污染。目前深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司的五分類血細(xì)胞分析用試劑的溶血?jiǎng)?主要以季銨鹽鹽離子表面活性劑為主要成分，稀釋液主要以次黃嘌呤或黃嘌呤類化合物或 其鹽為主要成分。深圳邁瑞生物醫(yī)療電子股份有限公司的五分類血細(xì)胞分析用試劑(邁瑞 BC-6800五分類血細(xì)胞分析儀（國(guó)食藥監(jiān)械（準(zhǔn)）字2007第3031324號(hào))專用試劑)具有特 異性高、靈敏度高和高通量的優(yōu)點(diǎn)，具有廣闊的市場(chǎng)前景。但是，該五分類細(xì)胞分析儀原裝 試劑試劑成本高，供貨周期長(zhǎng)的缺陷，無(wú)法滿足市場(chǎng)的需求。
[0005] 平均紅細(xì)胞體積（MCV)增多是大細(xì)胞性貧血，MCV減少是小細(xì)胞性低色素性貧血， 檢測(cè)MCV對(duì)貧血性疾病治療具有重要意義。MCV是從紅血球（RBC)數(shù)、白血球（WBC)數(shù)、白 血球分類、血紅蛋白濃度（Hb)、血細(xì)胞比容（Ht)和血小板（PLT)數(shù)這些細(xì)胞分析值中計(jì)算 得到重要項(xiàng)目中的一項(xiàng)，MCV可以是由血細(xì)胞比容本紅細(xì)胞數(shù)所除而得到，即Ht/RBC值得 至lj，MCV就是單個(gè)紅血球的平均容積，其單位為fL、飛升或10_15L。
[0006] 在制備MCV分析的全血樣品過(guò)程中，目前技術(shù)上存在的主要問(wèn)題是實(shí)際的MCV會(huì) 隨著血液采集后經(jīng)歷的時(shí)間而改變。臨床診斷中MCV值是必要而又重要的，它應(yīng)在血樣采 集后立即獲得，也就是，該值應(yīng)當(dāng)與原始血液的MCV值相一致。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0007] 為了解決現(xiàn)有技術(shù)五分類細(xì)胞分析儀原裝試劑試劑成本高，供貨周期長(zhǎng)的缺陷， 本發(fā)明目的在于自主研發(fā)一種成本低廉、試劑性能優(yōu)越的適于五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀 用試劑。
[0008] 本發(fā)明提供的血細(xì)胞分析儀用試劑，包括稀釋液，其特征在于所述的稀釋液的組 分及含量為：磷酸二氫鉀1. 0-5. Og/L、磷酸氫二鈉3. 0-6. Og/L、硫酸鈉2. 0-7. Og/L、氯化 鈉 2. 0-7. Og/L、Proclin 300 0? 1-0. 5g/L、EDTA-2K 0? 3-0. 8g/L ;所述稀釋液的 pH 值為 6. 0~7. 0,所述稀釋液的電導(dǎo)率為15. 0~20. 0 ms/cm，所述稀釋液的滲透壓270~320 mOsm/ kg。
[0009] 本發(fā)明的上述血細(xì)胞分析儀用試劑，它還包括E0I溶血?jiǎng)?，所述的E0I溶血?jiǎng)┑慕M 分及含量為：十四烷基三甲基氯化銨L 0-4. 0g/L、HEPES 2. 0-10. 0g/L、硫酸鈉1. 0-7. 0g/ L、氯化鈉2.0-8.0g/L ;所述E0I溶血?jiǎng)┑膒H值為4.0~5.0,所述E0I溶血?jiǎng)┑碾妼?dǎo)率 10. 0~15. 0 ms/cm，所述 E0I 溶血?jiǎng)┑臐B透壓 330~380 m0sm/kg。
[0010] 本發(fā)明的上述血細(xì)胞分析儀用試劑，它還包括LH溶血?jiǎng)?，所述的LH溶血?jiǎng)┑慕M分 及含量為：0P-10 1. 0-5. 0g/L、十二烷基三甲基氯化銨5. 0-20. 0g/L、苯甲酸1. 0-6. 0g/L、 氯化鈉 15. 0-25. 0g/L、Proclin 300 0? 2-0. 9g/L ;所述 LH 溶血?jiǎng)┑?pH 值為 2. 0~3. 0,所述 LH溶血?jiǎng)┑碾妼?dǎo)率30. 0~40. 0 ms/cm，所述LH溶血?jiǎng)┑臐B透壓400~700 m0sm/kg。
[0011] 本發(fā)明的上述血細(xì)胞分析儀用試劑，它還包括E0II染色液，所述的E0II染色液 的組分及含量為：八烷基三甲基氯化銨〇? 5-3. 0g/L、TRIS 2. 0-8. 0g/L、甲酸0? 5-3. 0g/L、 硫酸鈉2. 0-8. 0g/L、氯化鈉4. 0-10. 0g/L、酸性紅73 3-6mg/L ;所述E0II染色液的pH值 10. 0~11.0,所述E0II染色液的電導(dǎo)率為20. 0~25. 0 ms/cm，所述E0II染色液的滲透壓為 450~500 m0sm/kg。
[0012] 本發(fā)明的上述血細(xì)胞分析儀用試劑，它還包括清洗液，所述的清洗液的組分及含 量為：NP-10 0? 1-3. 0g/L、L-64 0? 1-2. 0g/L、硼酸 1. 0-3. 0g/L、十水合四硼酸鈉 0? l-o. 5g/ L、Proclin 300 0.1-0. 5g/L、氯化鈉 8. 0-12. 0g/L、無(wú)水硫酸鈉 3. 0-10. 0g/L;所述清 洗液的pH值7. 0~7. 5，所述清洗液的電導(dǎo)率15. 0~20. 0 ms/cm，所述清洗液的滲透壓 250~350m0sm/kg。
[0013] 作為本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選實(shí)施例，本發(fā)明提供的五分類全自動(dòng)血細(xì)胞分析儀用試 劑由稀釋液、E0I溶血?jiǎng)?、LH溶血?jiǎng)0II染色液和清洗液組成，所述的稀釋液的組分 及含量為：磷酸二氫鉀1. 0-5. 0g/L、磷酸氫二鈉3. 0-6. 0g/L、硫酸鈉2. 0-7. 0g/L、氯化 鈉 2. 0-7. 0g/L、Proclin 300 0? 1-0. 5g/L、EDTA-2K 0? 3-0. 8g/L ;所述稀釋液的 pH 值為 6. 0~7. 0,所述稀釋液的電導(dǎo)率為15. 0~20. 0 ms/cm，所述稀釋液的滲透壓270~320 mOsm/ kg。
[0014] 其中，所述的E0I溶血?jiǎng)┑慕M分及含量為：十四烷基三甲基氯化銨1.0-4. 0g/L、 HEPES 2. 0-10. 0g/L、硫酸鈉 1. 0-7. 0g/L、氯化鈉 2. 0-8. 0g/L ;所述 E0I 溶血?jiǎng)┑?pH 值為 4. 0~5. 0,所述E0I溶血?jiǎng)┑碾妼?dǎo)率10. 0~15. 0 ms/cm，所述E0I溶血?jiǎng)┑臐B透壓330~380 m0sm/kg〇
[0015] 其中，所述的LH溶血?jiǎng)┑慕M分及含量為：0P-10 1.0-5. 0g/L、十二烷基三甲基氯 化銨5. 0-20. 0g/L、苯甲酸1. 0-6. 0g/L、氯化鈉15. 0-25. 0g/L、Proclin 300 0? 2-0. 9g/L; 所述LH溶血?jiǎng)┑膒H值為2. 0~3. 0,所述LH溶血?jiǎng)┑碾妼?dǎo)率30. 0~40. 0 ms/cm，所述LH溶 血?jiǎng)┑臐B透壓400~700 m0sm/kg。
[0016] 其中，所述的E0II染色液的組分及含量為：八烷基三甲基氯化銨0.5-3. 0g/L、 TRIS 2. 0-8. Og/L、甲酸 0? 5-3. Og/L、硫酸鈉 2. 0-8. Og/L、氯化鈉 4. 0-10.0 g/L、酸性紅 73 3-6mg/L ;所述EOII染色液的pH值10. 0~11. 0,所述EOII染色液的電導(dǎo)率為20. 0~25. 0 ms/ cm,所述E0II染色液的滲透壓為450~500 mOsm/kg。
[0017] 其中，所述的清洗液的組分及含量為：NP-10 0? 1-3. 0g/L、L-64 0? 1-2. 0g/L、硼酸 1. 0-3. 0g/L、十水合四硼酸鈉 0? 1-0. 5g/L、Proclin 300 0? 1-0. 5g/L、氯化鈉 8. 0-12. 0g/ L、無(wú)水硫酸鈉3. 0-10. 0g/L ;所述清洗液的pH值7. 0~7. 5,所述清洗液的電導(dǎo)率15. 0~20. 0 ms/cm，所述清洗液的滲透壓250~350m0sm/kg。
[0018] 本發(fā)明的血細(xì)胞分析儀用試劑，優(yōu)選的試劑配方如下： 所述的稀釋液的組分及含量為：磷酸二氫鉀1. 0-3. 0g/L、磷酸氫二鈉 4. 0-6. 0g/L、硫酸鈉 3. 0-5. 0g/L、氯化鈉 3. 0-5. 0g/L、Proclin 300 0? 2-0. 4g/L、EDTA-2K 0. 4-〇. 6g/L ； 進(jìn)一步的，所述的E0I溶血?jiǎng)┑慕M分及含量為：十四烷基三甲基氯化銨1. 0-3. 0g/L、 HEPES 2. 0-6. 0g/L、硫酸鈉 1. 0-4. 0g/L、氯化鈉 2. 0-5. 0g/L。
[0019] 進(jìn)一步的，所述的LH溶血?jiǎng)┑慕M分及含量為：0P-10 1.0-3.0g/L、十二烷基 三甲基氯化銨 8. 0-12. 0g/L、苯甲酸 2. 0-4. 0g/L、氯化鈉 18. 0-22. 0g/L、Proclin 300 0. 2-〇. 6g/L ； 進(jìn)一步的，所述的EOII染色液的組分及含量為：八烷基三甲基氯化銨0. 5-2. 0g/L、 TRIS 4. 0-6. 0g/L、甲酸 0? 5-2. 0g/L、硫酸鈉 3. 0-6. 0g/L、氯化鈉 6. 0-10. 0g/L、酸性紅 73 4. 〇-6. 0mg