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尿液細胞分離芯片及試劑的制作方法

文檔序號:5883675閱讀:361來源:國知局
專利名稱:尿液細胞分離芯片及試劑的制作方法
技術領域
本發(fā)明涉及測定尿細胞及有形成分分離的一種芯片和相關配套試劑。更具體的體現(xiàn)在,本發(fā)明設計了一種尿液細胞、尿液管型以及尿液鹽類結(jié)晶等有形成分分離芯片,并配有一種分離試劑,能夠?qū)⒛蛞褐屑毎?、管型等有機有形成分與鹽類結(jié)晶等進行分離,應用于尿液分析儀器中尿液細胞、管型等有形成分的分類和數(shù)量測定的裝置。
背景技術
尿液中紅細胞、白細胞、上皮細胞、管型等與尿液鹽類結(jié)晶均具有一定形態(tài),均屬于尿液中的有形成分。關于尿液中的紅細胞、白細胞、大圓上皮細胞、鱗狀上皮細胞、透明管型、細胞管型以及鹽類結(jié)晶的分類和數(shù)量測定,對于泌尿系疾病的診斷和治療效果觀察具有重要臨床價值。因此,尿液分析儀器公司一直致力于尿液有形成分的分析技術的研發(fā)。目前關于尿液中有形成分的分析儀器,主要依靠尿液有形成分高速攝像技術或尿液流式細胞分離技術兩種測定裝置,對于尿液中尿液細胞等有形成分進行分類和數(shù)量測定?;跀z影技術的尿液分析儀,對于鑒別尿液細胞等有形成分準確率較高,但是對于尿液中有形成分的數(shù)量測定準確率低。而基于流式細胞分離技術的尿液分析儀,對于尿液中有形成分的數(shù)量測定準確率高,但是對于尿液細胞等有形成分的鑒別能力低,容易造成尿液紅細胞與鹽類結(jié)晶等錯誤辨認,造成結(jié)果準確率低和重復性差。本發(fā)明技術彌補了上述兩種分析方法的不足,能夠準確鑒別尿液細胞等有形成分和對尿液細胞進行定量分析。1983年,美國國際遙控影像系統(tǒng)有限公司(international remote imaging systems Co, Ltd)研制了世界上第一臺“YollowIRIS”高速攝影式的尿液分析儀。這種儀器是將尿液中細胞、管型等有形成分展示在計算機熒屏上,由掌握尿液有形成分形態(tài)學特點的專家進行鑒別和分類。1990年,美國國際遙控影像系統(tǒng)有限公司與日本東亞醫(yī)療電子有限公司聯(lián)合生產(chǎn)了,影像流式細胞技術UA-100型尿液分析儀,用于尿液中細胞、管型等有形成分的分類和定量測定。雖然該儀器對原來的尿液分析儀進行了改革,但尿液細胞等有形成分的分類處理能力低,重復性差,尿液管型分辨不清。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明解決的技術問題是克服了尿液流式細胞芯片技術對于尿液管型、尿液細胞辨別能力低、重復性差和高速攝影技術對于尿液細胞等有形成分定量測定能力低的缺點。 提供了一種首先將尿液中細胞、尿液管型和尿液鹽類結(jié)晶等有形成分進行分離和分類,然后分別對于尿液中有形成分進行定量分析的芯片技術。本發(fā)明提出解決上述技術問題采用的技術方案是本發(fā)明對于尿液中細胞、管型和鹽類結(jié)晶等有形成分進行分離的芯片,首先將尿液存放于芯片的中心部位(圖1)。芯片中心部位(1)結(jié)構(gòu)為體積100-500U1的圓形槽狀結(jié)構(gòu),其槽的壁(2)上有四個缺口(14、 16、18和20),在外壁上配有緊密包裹的帶有四個缺口(13、15、17和19)的橡皮圈,轉(zhuǎn)動橡皮圈使橡皮圈上的缺口與芯片中心部位缺口重合時,借助離心力能夠從中心部位進入其外
3圍的高比重分離緩沖液G)。儲存外圍高比重分離緩沖液的芯片⑷同樣為圓形槽狀結(jié)構(gòu), 包圍于中心芯片(1)的外圍,其外壁同樣有四個缺口(21、23、25和27),尿液中有形成分能夠通過缺口進入四個有形成分收集器。該配套高比重分離緩沖液的化學成分為5% -50% 蔗糖/磷酸緩沖液,PH7.4。將分離芯片存放于一個馬達上,加給芯片50-2000rpm/min轉(zhuǎn)速的旋轉(zhuǎn),尿液中細胞、管型和鹽類結(jié)晶等有形成分,借助離心力從中心芯片向外層芯片進行分離,有形成分分別收集到(9、10、11和12)四個收集器內(nèi)。然后根據(jù)加入尿液的量計算尿液中有形成分的數(shù)量和分類的種類。有形成分收集器為最層三角形或圓形收集器,分別是9、10、11、12四個。根據(jù)尿液有形成分的大小、比重分離有形成分分別進入9、10、11和12等四個收集器,使尿液中細胞等有形成分進行初步分離。芯片部分包括芯片框架和芯片底板。芯片框架為塑料材料制成框架結(jié)構(gòu),芯片底板為玻璃、有機塑料、石英玻片。在底板上附框架,框架(2、5、7)高度為2mm,芯片壁上合包裹于芯片壁上的橡皮圈的缺口,高度與芯片框架高度相同,去口長度為6-10mm。在框架和底片之間利用粘合劑將一層尼龍薄膜粘合在上述兩框架之間或利用微刻融技術制備微芯片。本法將尿液中細胞、管型和鹽類結(jié)晶等有形成分初步劃分成四個類型,每種類型根據(jù)尿液有形成分的形態(tài)學特點,再進行劃分類型。根據(jù)收集的每種有形成分進行形態(tài)學成分的數(shù)量測定。


本說明書包括四幅附1為本發(fā)明所述尿液細胞分離芯片的平面圖,其中芯片內(nèi)部結(jié)構(gòu)與上面相接處的一面朝向觀察者,去掉了底蓋和上蓋部分,使這些內(nèi)部結(jié)構(gòu)暴露出來。圖2為本發(fā)明所述(圖1)芯片中尿液儲存芯片結(jié)構(gòu)平面圖,夾在底蓋和上蓋之間的內(nèi)部結(jié)構(gòu)圖。圖3為包裹在尿液儲存芯片周圍的分離液芯片結(jié)構(gòu)平面圖,夾在底片和上蓋之間。圖4為抱在分離液外層和尿液有形成分收集器的平面結(jié)構(gòu)圖。
具體實施例方式下面以具體實施例進一步解釋發(fā)明,但不限制本發(fā)明范圍。參閱圖1為本發(fā)明實施例提供的一種尿液有形成分的示意圖。所述芯片為尿液細胞等有形成分分離和收集的芯片。所述芯片(1)為分離芯片中心,其實是有框架組成的槽狀結(jié)構(gòu),儲存尿液。但框架上存在缺口,能夠通過細胞等有形成分。所述芯片(4)為芯片中心外的結(jié)構(gòu),隔離高比重分離緩沖液,在離心力作用下尿液細胞等有形成分能夠通過外圍的高比重分離緩沖液,進入有形成分分離槽。所述芯片中心區(qū)(1)和高比重分離緩沖液區(qū)域(4)的微制備方法由現(xiàn)有技術可以實現(xiàn)。實例
2005年8月3日授予李文生等的名稱為《一種制備細胞芯片的方法及其裝置》公告號CN1661039。詳細披露一種細胞芯片的制備方法及其實現(xiàn)該方法的裝置。體現(xiàn)在通過陣列管與內(nèi)芯之間形成的空腔結(jié)構(gòu),將細胞樣本通過瓊脂糖包埋于空腔內(nèi),細胞瓊脂糖包埋塊在外套與底層固定板之間形成的帶微孔結(jié)構(gòu)的擴大的空腔內(nèi)進行脫水、透明、浸蠟等處理,而后利用陣列管裝置在形成石蠟空心小孔的同時,輕推柱芯使細胞瓊脂包埋塊落入陣列小孔內(nèi),制成了細胞芯片石蠟包埋塊,再經(jīng)過切片、染色即可完成細胞芯片的制備。2008年9月M日一授權于王站會的名稱為《一種微流控細胞芯片》公告號為 CN101270333。詳細披露了一種具有若干個細胞培養(yǎng)單元,每個細胞培養(yǎng)單元具有一個細胞培養(yǎng)區(qū)、一個細胞微流道和一個藥物微流道。在細胞培養(yǎng)區(qū)具有一個入口和一個出口,細胞微流道與細胞培養(yǎng)區(qū)的入口相連通以輸送細胞培養(yǎng)液至所述細胞培養(yǎng)區(qū),藥物微流道與所述細胞培養(yǎng)區(qū)的入口相連通以輸送藥物溶液至細胞培養(yǎng)區(qū),使得細胞培養(yǎng)液輸送方向和藥物溶液輸送方向相同,避免藥物溶液帶走細胞培養(yǎng)區(qū)內(nèi)的細胞。
權利要求
1.一種能夠分離和收集尿液細胞等有形成分的芯片和配套試劑,配套試劑(4)為濃度為 5%-50%的蔗糖溶液,pH為7. 4,測定時將配套分離試劑加在尿液儲存芯片(1)的外圍,在尿液儲存芯片與分離試劑之間存有隔離橡膠層(3、6),但是在芯片框架和橡膠隔離層均有四個缺口 (13、14、15、16、17、18、19、20、21、22、23、24、25、26、27、28),在轉(zhuǎn)動隔離層橡膠,是兩層之間的缺口重合,尿液細胞等有形成分能夠通過尿液隔離層和配套分離試劑層。達到分析尿液細胞等有形成分的小效果。所述測定尿液細胞分離芯片及試劑,其特征在于分離尿液細胞及鹽類結(jié)晶芯片和配套試劑,尿液儲存芯片框架和分離試劑芯片框架結(jié)構(gòu)均加在芯片底蓋和上蓋之間。,在框架外均有橡膠隔離層,在框架和隔離層上均有缺口。
2.根據(jù)權利要求(1)所述的尿液細胞分離芯片,其特征在于所述的尿液儲存芯片框架、分離試劑芯片框架為圓形結(jié)構(gòu),在框架外層有緊密包裹的分離層,在框架和橡膠分兩層上有四個缺口。
全文摘要
本發(fā)明公布了一種適合分離和分析尿液細胞等有形成分的芯片和配套試劑。該芯片包括配套試劑為一種化學混合溶液含有蔗糖濃度為5%-50%,緩沖pH值為7.4;芯片部分包括芯片底板、芯片內(nèi)部的儲存尿液和尿液細胞等有形成分分離芯片結(jié)構(gòu)和有形成分分離緩沖液芯片,外部鏈接尿液有形成分收集器。1.所述測定尿液細胞等有形成分芯片,其特征在于芯片配套分離試劑技巧儲存芯片在尿液儲存芯片的外部,芯片框架與芯片底蓋和上蓋之間緊密結(jié)合。2.根據(jù)權利要求(1)所述的尿液細胞等有形成分分離芯片,其特征在于所述的尿液儲存芯片和分離液芯片均為圓形結(jié)構(gòu),芯片框架上均有四個缺口,在尿液儲存芯片框架和有形成分分離液芯片框架外圍均有緊密包裹的橡膠隔離層,同樣含有四個缺口,轉(zhuǎn)動隔離橡膠層使缺口重合,尿液細胞等有形成分能夠通過缺口。
文檔編號G01N1/38GK102564832SQ201010592390
公開日2012年7月11日 申請日期2010年12月16日 優(yōu)先權日2010年12月16日
發(fā)明者孫續(xù)國 申請人:孫朝, 孫續(xù)國, 邸寶華
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