專利名稱：生物傳感器及其制造方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物傳感器，特別涉及利用色譜的生物傳感器及其制造方法。
免疫色譜傳感器的結(jié)構(gòu)一般具有添加被檢查溶液的添加層、多個(gè)展開層、終端上設(shè)有吸收層，該展開層的局部具有將被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物的抗體固定化的抗體固定化部。而且在該抗體固定化部的添加層側(cè)標(biāo)記，與被該抗體固定化部固定化的抗體不同的表位(抗原決定基)對(duì)應(yīng)的抗體以可以通過被檢查溶液溶出的干燥狀態(tài)保持在標(biāo)記試劑保持部。這樣的色譜傳感器的反應(yīng)形態(tài)被稱之為夾層反應(yīng)，形成被固定化的抗體、被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物、標(biāo)記抗體的夾層復(fù)合體。另外，所述被檢查溶液在同一分子內(nèi)具有同一的結(jié)構(gòu)，例如在2聚體以上的抗原的情況，在所述標(biāo)記試劑保持部上沒有必要保持和所述固定化的抗體不同的表位對(duì)應(yīng)的抗體，也可以做成保持和該固定化的抗體相同的表位對(duì)應(yīng)的抗體。
下面對(duì)使用這樣的免疫色譜傳感器的測(cè)定方法進(jìn)行說明。
首先在添加層添加必要量的被檢查溶液，被檢查溶液浸透在展開層中，開始測(cè)定。然后在所述抗體固定化部，通過和該固定化抗體結(jié)合的標(biāo)記抗體，檢測(cè)測(cè)定結(jié)果。作為該標(biāo)記抗體一般的標(biāo)記物有膠體金粒子等，通過這樣利用膠體金粒子等標(biāo)記抗體，在抗體固定化部上的測(cè)定對(duì)象物和抗體的結(jié)合可以通過膠體金粒子目視看到，可以通過目測(cè)得到測(cè)定結(jié)果。
另外，盡管這里說明了抗原抗體反應(yīng)的夾層反應(yīng)作為測(cè)定原理的情況，但是除此之外也可能將競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)作為測(cè)定原理。該種情況也同樣可以通過確認(rèn)抗體固定化部(或者測(cè)定對(duì)象物為抗體的情況為抗原固定化部)上的標(biāo)記抗體的結(jié)合狀態(tài)，得到測(cè)定結(jié)果。
另外，作為得到測(cè)定結(jié)果的方法這里說明了需要根據(jù)目測(cè)定性判定的情況，但是所需要的測(cè)定結(jié)果為半定量或需要精度更高的判定時(shí)，有如下方法，使用一般的反射分光光度計(jì)的密度模式分析器讀取反射吸光度的方法；或者采用特開平10-274624號(hào)公報(bào)公開的光學(xué)讀取裝置，利用透過方式讀取的方法；特開平10-274653號(hào)公報(bào)中公開的利用照相機(jī)等將測(cè)定結(jié)果以圖象進(jìn)行照相讀取、演算處理的方法等。
這樣的免疫色譜傳感器近幾年做成適應(yīng)在醫(yī)療診斷現(xiàn)場(chǎng)上依據(jù)POC(測(cè)試點(diǎn).觀察.護(hù)理)的觀點(diǎn)、迅速、簡(jiǎn)便、正確、而且價(jià)格低、容易得到的測(cè)定裝置，由于測(cè)定操作簡(jiǎn)便，不僅醫(yī)療現(xiàn)場(chǎng)，而且也被廣泛的應(yīng)用在一般家庭中限定的測(cè)定項(xiàng)目的診斷等。
但是，使用免疫色譜傳感器的測(cè)定，在被檢查溶液滲透的過程中，必須依賴人為的操作困難、也就是展開層具有的滲透性。這里一方面具有操作簡(jiǎn)便的免疫色譜傳感器的優(yōu)點(diǎn)，另外在精度方面存在缺點(diǎn)。也就是展開層的平行側(cè)面開放的免疫色譜傳感器被檢測(cè)溶液滲透速度不均一，這樣的狀況下不僅是測(cè)定對(duì)象物的展開不均一，而且標(biāo)記試劑的展開也不均一，難于得到高精度的定量。另外具有這樣構(gòu)成的免疫色譜傳感器只能具有定性或定量精度低的半定量的性能，進(jìn)行測(cè)定時(shí)限于使用在低精度的測(cè)定項(xiàng)目中。而且由于展開層的平行側(cè)面開放，被檢查溶液的狀態(tài)也受到影響，例如將血液成分等做成被檢查溶液的情況，由于難于進(jìn)行高精度的測(cè)量，導(dǎo)致被檢查溶液的種類也受到限制。
為了解決該問題，特開2001-66310號(hào)公報(bào)中公開色譜定量測(cè)定裝置，其中，在色譜裝置的展開層的表面以及平行側(cè)面上，緊密地包覆液體不透過性薄片，使被檢查溶液的浸透狀態(tài)均勻，實(shí)現(xiàn)更高精度的測(cè)定。
但是在所述特開2001-66310號(hào)公報(bào)中公開的色譜儀器上不只是需要組裝施工方法上需要繁雜的操作，例如使用十分薄的膜作為展開層時(shí)，密閉添加被檢查溶液的部分的平行側(cè)面的操作繁雜，存在問題。
另外，作為批量生產(chǎn)免疫色譜傳感器的展開層的施工方法，一般的是在展開層上成批形成試劑成分，最終切斷分離展開層，利用該方法制作特開2001-66310號(hào)公報(bào)上公開的色譜儀器的免疫色譜傳感器時(shí)，不能密閉平行側(cè)面，為了密閉其平行側(cè)面，必須使切斷后的免疫色譜傳感器一個(gè)一個(gè)分別制作，存在問題。另外，利用膠帶等的液體不透過性薄片將這樣的平行側(cè)面一個(gè)一個(gè)地密閉的操作需要繁雜的操作，而且還需要得到該結(jié)構(gòu)使用的材料，結(jié)果成本高，存在問題。
而且，在成批形成所述的展開層的施工方法中，以相對(duì)展開層被檢查溶液的展開方向橫斷的形態(tài)，形成試劑成分。并且利用所述施工方法形成、平行側(cè)面開放著的結(jié)構(gòu)的免疫色譜傳感器，在出現(xiàn)展開層不均一的被檢查溶液的浸透的情況下，展開層的平行側(cè)面部分的流速容易發(fā)生變化，結(jié)果標(biāo)記試劑以及被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物通過所述試劑固定化部分的量完全發(fā)生變化，在該試劑固定化部分結(jié)合的標(biāo)記試劑成分的量在試劑固定化部分的中央部和平行側(cè)面部分變得不均一，使測(cè)定精度低下，存在問題。并且，產(chǎn)生這樣的問題的原因例如有，成批形成展開層的制造施工方法等，含有切斷展開層的工序的制造施工方法上的切斷方法是由剪切機(jī)、剪刀、模壓機(jī)、閘刀式剪切機(jī)、旋轉(zhuǎn)式剪切機(jī)、截紙機(jī)等的刀具決定的。也就是利用刀具切斷所述展開層時(shí)，必須接觸該展開層切斷，并且在展開層上由于多數(shù)情況使用無紡布、玻璃纖維、纖維素纖維、薄膜等，相對(duì)接觸壓產(chǎn)生形狀變化的材料，所以在切斷時(shí)形狀變化會(huì)變得不均一，從而產(chǎn)生測(cè)定時(shí)的不均一浸透。
本發(fā)明是為了解決所述的問題點(diǎn)而進(jìn)行的，目的在于提供可以使展開層上的被檢查溶液的浸透整齊，并且制造方法簡(jiǎn)單，成本低而且精度高的生物傳感器及其制造方法。
這樣使被檢查溶液的浸透整齊，不僅可以進(jìn)行更高精度的定量測(cè)定，而且對(duì)于平行側(cè)面的密閉不需要新材料，可以使操作過程簡(jiǎn)易化，通過減少材料和減少制造工序數(shù)量，實(shí)現(xiàn)低成本化，可以提供更高精度而且成本低的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求2所述的生物傳感器具有展開被檢查溶液的展開層，含有相對(duì)該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向包含平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在所述展開層的浸透方向包含平行側(cè)面的局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分。在該生物傳感器上，所述展開層使相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向，所述標(biāo)記試劑部分的平行側(cè)面和所述固定化試劑部分的平行側(cè)面上的試劑成分變性失活。
這樣可以提供的生物傳感器能夠防止所述展開層的側(cè)面部分的不均一的被檢查溶液的浸透引起的所述固定化試劑部分的測(cè)定精度的低下。
本發(fā)明的權(quán)利要求3所述的生物傳感器是一種在權(quán)利要求2所述的生物傳感器中，所述展開層相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或者整體被熔融固化密閉著。
這樣可以防止所述展開層的側(cè)面部分的不均一的被檢查溶液的浸透引起的所述固定化試劑部分的測(cè)定精度的低下，而且使所述檢查溶液的浸透整齊，可以進(jìn)行更高精度的定量測(cè)定，提供更高精度的生物傳感器。另外可以提供在所述平行側(cè)面密閉時(shí)不需要新的材料，可以使制造過程簡(jiǎn)易化，可以實(shí)現(xiàn)減少材料和減少制造工序數(shù)量帶來的低成本化的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求4所述的生物傳感器是一種如下所述的裝置，在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器中，所述展開層除添加所述被檢查溶液局部的表面、或者表面以及里面用液體不透過性的薄片覆蓋，所述展開層以及所述液體不透過性的薄片相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或者整體被熔融固化密閉著。
這樣通過密閉所述展開層的表面、里面還有所述平行側(cè)面，防止所述被檢查溶液錯(cuò)誤的添加，可以提供高正確性測(cè)定的、正確性高的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求5所述的生物傳感器是一種如下所述的裝置，在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器中，所述展開層除添加所述被檢查溶液方向相對(duì)的起點(diǎn)和終點(diǎn)局部的表面、或者表面以及里面用液體不透過性的薄片覆蓋，所述展開層以及所述液體不透過性的薄片相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或者整體被熔融固化密閉著。
這樣由于液體不透過性薄片覆蓋所述展開層的表面、里面，遮斷液體，而且利用熔融固化密閉所述平行側(cè)面進(jìn)行遮斷，防止所述被檢查溶液錯(cuò)誤的添加，可以提供高正確性測(cè)定。另外，通過所述展開層的被檢查溶液的展開方向?qū)?yīng)的終端部的開放，利用水分的蒸發(fā)，或者殘存在添加部的被檢查溶液的水頭差的關(guān)系，有著被檢查溶液直至干燥為止向著下流方向持續(xù)浸透的效果，不需要用于使多余的被檢查溶液吸收的吸收材料，制成更加簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)，可以提供低成本而且正確性高的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求6所述的生物傳感器是一種如下所述的裝置，在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3所述的任何一項(xiàng)中所述的生物傳感器中，所述展開層由硝化纖維素構(gòu)成。
這樣可以提供制造操作容易的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求7所述的生物傳感器是一種如下所述的裝置，在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3所述的任何一項(xiàng)中所述的生物傳感器中，所述展開層的平行側(cè)面利用激光熔融固化密閉。
這樣可以使所述展開層的平行側(cè)面的必要部分更高速、更均一地熔融固化，使熔融固化的部分具有均一性，提供更加高精度的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求8所述的生物傳感器在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3所述的任何一項(xiàng)中所述的生物傳感器中，包括所述固定化試劑以及標(biāo)記試劑的該傳感器的整體處于干燥狀態(tài)。
這樣可以提供保存穩(wěn)定性好并且移動(dòng)自如的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求9所述的生物傳感器，在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3所述的任何一項(xiàng)中所述的生物傳感器中，所述生物傳感器是一種在可以濕潤的多孔性材料上形成所述固定化試劑和所述標(biāo)記試劑的復(fù)合體，由此進(jìn)行測(cè)定的免疫色譜法的試片。
這樣作為簡(jiǎn)易方法在市場(chǎng)上不斷推廣的免疫色譜中，可以提供高精度而且正確性高的免疫色譜法。
本發(fā)明的權(quán)利要求10所述的生物傳感器，在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3所述的任何一項(xiàng)中所述的生物傳感器中，所述生物傳感器是一種在可以濕潤的多孔性材料上，通過所述被檢查溶液的添加操作進(jìn)行測(cè)定的一步免疫色譜法試片。
這樣作為簡(jiǎn)易方法在市場(chǎng)上不斷普及的一步免疫色譜中，可以提供高精度而且正確性高的一步免疫色譜法。
本發(fā)明的權(quán)利要求11所述的生物傳感器，在權(quán)利要求1至權(quán)利要求3所述的任何一項(xiàng)中所述的生物傳感器中，所述固定化試劑和所述標(biāo)記試劑在同一平面而且同一部件上形成著。
這樣使用更少材料構(gòu)成所述生物傳感器，實(shí)現(xiàn)低成本化簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)，利用簡(jiǎn)單的結(jié)構(gòu)，使測(cè)定值的波動(dòng)降低，提高測(cè)定的精度，提供正確性高的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求12所述的生物傳感器的制造方法制造的生物傳感器，具有展開被檢查溶液的展開層，含有在該展開層的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在所述展開層的局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分。在制造生物傳感器的方法中，包括熔融固化密閉所述展開層的相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面的一部分或整體的熔融工序。
這樣在所述展開層的平行側(cè)面熔融固化密閉，使側(cè)面密閉時(shí)，可以不需要新的材料，可以制作更低成本的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求13所述的生物傳感器的制造方法是一種在權(quán)利要求12所述的生物傳感器的制造方法中，所述熔融工序通過激光照射所述展開層的所述側(cè)面的一部分或整體進(jìn)行的。
這樣可以使所述展開層的側(cè)面的物理的非接觸性的熔融固化，不產(chǎn)生所述展開層的接觸壓帶來的形狀變化，可以制造高精度的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求14所述的生物傳感器的制造方法制造的生物傳感器，具有展開被檢查溶液的展開層，含有在該展開層的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在所述展開層的局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分。在制造生物傳感器的方法中，包括使薄片狀的所述展開層相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行切斷，同時(shí)使該展開層的切斷面熔融固化密閉的切斷熔融工序。
這樣通過一邊切斷所述薄片狀的展開層，一邊同時(shí)使該側(cè)面熔融固化，密閉，不需要更高精度的或新的密閉操作，可以制作簡(jiǎn)易而且成本低的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求15所述的生物傳感器的制造方法是一種在權(quán)利要求14所述的生物傳感器的制造方法中，所述切斷熔融工序通過激光裁切所述薄片狀的展開層進(jìn)行的。
這樣通過激光裁切所述薄片狀的展開層的過程，使所述展開層的平行側(cè)面熔融固化，密閉，不需要更高精度的或新的密閉操作，可以制作簡(jiǎn)易而且成本低的生物傳感器?；蛘邔?duì)所述展開層的側(cè)面可以通過物理的非接觸使其熔融固化，不產(chǎn)生所述展開層的接觸壓帶來的形狀變化，可以制造高精度的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求16所述的生物傳感器的制造方法制造的生物傳感器，具有展開被檢查溶液的展開層，包括含有該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向相對(duì)的平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在含有所述展開層的浸透方向?qū)?yīng)的平行側(cè)面局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分。在制造該生物傳感器的方法中，包含使所述標(biāo)記試劑部分以及所述固定化試劑部分在所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面上的試劑成分變性失活的變性失活工序。
這樣可以使所述展開層的平行側(cè)面的周邊的試劑成分失活，可以制作防止在該展開層的側(cè)面上產(chǎn)生不均一的被檢查溶液的浸透帶來的測(cè)定精度的降低的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求17所述的生物傳感器的制造方法是一種在權(quán)利要求16所述的生物傳感器的制造方法中，所述變性失活工序通過激光照射所述側(cè)面進(jìn)行的。
這樣可以對(duì)所述展開層的平行側(cè)面通過非接觸使試劑成分變性，可以制造高精度的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求18所述的生物傳感器的制造方法制造的生物傳感器，具有展開被檢查溶液的展開層，包括含有該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向相對(duì)的平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在含有所述展開層的浸透方向?qū)?yīng)的平行側(cè)面局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分。在制造該生物傳感器的方法中，包括所述展開層的所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面的一部分或整體熔融固化，密閉，同時(shí)使所述標(biāo)記試劑部分以及所述固定化試劑部分、所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面上的試劑成分變性失活的熔融失活工序。
這樣通過使所述展開層熔融固化、密閉的同時(shí)工序，可以使該平行側(cè)面的試劑成分變性失活，可以制造通過一次操作可以進(jìn)行的，更加簡(jiǎn)單、而且高精度的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求19所述的生物傳感器的制造方法是一種在權(quán)利要求18所述的生物傳感器的制造方法中，所述熔融失活工序通過激光照射所述側(cè)面進(jìn)行的。
這樣對(duì)所述展開層的側(cè)面通過物理的非接觸可以使其熔融固化，不產(chǎn)生所述展開層的接觸壓帶來的形狀變化，可以制造高精度的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求20所述的生物傳感器的制造方法制造的生物傳感器具有展開被檢查溶液的展開層，包括含有該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向相對(duì)的平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在含有所述展開層的浸透方向?qū)?yīng)的平行側(cè)面局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分。在制造該生物傳感器的方法中，包括使薄片狀的所述展開層沿相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行地切斷，同時(shí)使該展開層的切斷面熔融固化，密閉，而且使所述標(biāo)記試劑部分以及所述固定化試劑部分、所述側(cè)面上的試劑成分變性失活的切斷熔融失活工序。
這樣在切斷所述展開層的同時(shí)，使展開層熔融固化，密閉，而且利用同時(shí)工序可以使平行側(cè)面的試劑成分變性失活，可以制造通過一次操作可以進(jìn)行切斷、熔融變性失活的，更加簡(jiǎn)單、低成本而且高精度的生物傳感器。
本發(fā)明的權(quán)利要求21所述的生物傳感器的制造方法是一種在權(quán)利要求20所述的生物傳感器的制造方法中，所述切斷熔融失活工序通過激光裁切所述薄片狀的展開層進(jìn)行的。
這樣在切斷所述展開層的同時(shí)，使展開層熔融固化，密閉，而且利用同時(shí)工序可以使平行側(cè)面的試劑成分變性失活，可以制造通過一次操作可以進(jìn)行切斷、熔融變性失活的，更加簡(jiǎn)單、低成本而且高精度的生物傳感器。另外對(duì)所述展開層的側(cè)面通過物理的非接觸可以使其熔融固化，不產(chǎn)生所述展開層的接觸壓帶來的形狀變化，可以制造高精度的生物傳感器。
圖2是顯示本發(fā)明實(shí)施方案2中的生物傳感器的結(jié)構(gòu)的側(cè)面圖。
圖3是顯示本發(fā)明實(shí)施方案3中的生物傳感器的結(jié)構(gòu)的側(cè)面圖。
圖4是顯示本發(fā)明實(shí)施方案4中的試劑固定化部不接觸展開層的平行側(cè)面的生物傳感器的切斷前后的剖面的結(jié)構(gòu)的圖。
圖5是顯示本發(fā)明實(shí)施方案4中的試劑固定化部接觸展開層的平行側(cè)面的生物傳感器的切斷前后的剖面的結(jié)構(gòu)的圖。
圖6是利用已有的切斷工序切斷的生物傳感器的剖面的顯微鏡照片。
圖7是利用本發(fā)明的實(shí)施方案4的切斷工序切斷的生物傳感器的剖面的顯微鏡照片。
圖8是顯示本發(fā)明實(shí)施方案5中的生物傳感器的結(jié)構(gòu)的側(cè)面圖。
圖9是顯示本發(fā)明實(shí)施方案5中的生物傳感器的測(cè)定狀態(tài)的模式圖。


圖10是顯示本發(fā)明實(shí)施例的2種免疫色譜法試片上hCG濃度和測(cè)定結(jié)果的關(guān)系的圖。
發(fā)明的最佳實(shí)施方案下面對(duì)本發(fā)明的實(shí)施方案進(jìn)行說明。
實(shí)施方案1本發(fā)明實(shí)施方案1中的傳感器及其制造方法中，被檢查溶液是以均一的速度在展開層上浸透的。
首先使用圖1對(duì)本發(fā)明實(shí)施方案1中的傳感器的構(gòu)成進(jìn)行說明。
圖1是顯示本發(fā)明實(shí)施方案1中的生物傳感器的結(jié)構(gòu)的立體圖；圖1(a)是顯示只有展開層的該傳感器構(gòu)成圖；圖1(b)顯示在展開層的上部配設(shè)液體不透過性薄片材料的構(gòu)成圖；圖1(c)顯示在展開層的上部配設(shè)液體不透過性薄片材料、在其下邊配設(shè)基板的構(gòu)成圖。
在圖1上，1顯示在展開層上添加被檢查溶液的添加部，利用無紡織物構(gòu)成。2是展開層上的反應(yīng)部，硝化纖維素構(gòu)成。3顯示吸收浸透在展開層上的溶液的吸水部，由玻璃纖維濾紙構(gòu)成。在這些展開層上使用的材料只要是由被檢查溶液可以濕潤的材料就可以，可以用濾紙、無紡織物、膜、布等任意的多孔質(zhì)材料構(gòu)成。
另外，4是標(biāo)記試劑保持部，在展開層上相對(duì)被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物的抗體用金膠體標(biāo)記，以可由被檢查溶液溶出的干燥狀態(tài)保持。5是試劑固定化部，將被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物相對(duì)的抗體固定化，利用和標(biāo)記試劑不同的表位結(jié)合，以形成被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物和標(biāo)記試劑的復(fù)合的以干燥狀態(tài)被固定化。在本實(shí)施方案1中，所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5在展開層上的局部形成斑點(diǎn)狀，特別具有所述被檢查溶液中添加方向相對(duì)的平行側(cè)面上試劑不接觸的構(gòu)成。另外，在這里將所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5的形狀做成斑點(diǎn)形狀，但是不一定要是斑點(diǎn)形狀，只要是由所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5相對(duì)所述展開層的平行側(cè)面不接觸的形狀形成，其形狀可以自由選擇。另外具有所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5的展開層的構(gòu)成是一種被稱作在抗原抗體反應(yīng)中的夾層式反應(yīng)的結(jié)構(gòu)，通過選擇試劑，如果使用和被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的試劑，也可以將該展開層的構(gòu)成做成競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。另外，除抗原抗體反應(yīng)以外的也一樣，在欲利用特異的結(jié)合的情況，可以利用任意的試劑成分構(gòu)成。另外，對(duì)于標(biāo)記方法，所述的金膠體也只是一個(gè)例子而已，除此之外還有酶、蛋白質(zhì)、色素、熒光色素、金屬溶膠、非金屬溶膠、膠乳等的著色粒子等，根據(jù)需要可以任意選擇。
6表示液體不透過性薄片材料，例如由透明PET帶構(gòu)成。該液體不透過性薄片材料6是一種密封包覆除添加部1之外的展開層的構(gòu)成，通過使該液體不透過性薄片材料6包覆在展開層所述的部分，遮斷保護(hù)向被檢查溶液的添加部1之外的點(diǎn)狀附著，同時(shí)可以防止來自外部的污染，如對(duì)展開層無意地接觸被檢查溶液，被檢查者用手等直接接觸展開層等。該液體不透過性薄片材料6優(yōu)選使用透明的材料，特別是包覆試劑固定化部5的部分，由于是確認(rèn)測(cè)定結(jié)果的部分，所以至少優(yōu)選維持可以透過的狀態(tài)。另外在不需要傳感器具有高精度的結(jié)果，或者將形成的展開層最終放入中空箱中的情況，也可以不需要所述液體不透過性薄片材料6。
7表示保持展開層的基板，例如白色PET薄膜構(gòu)成基板7具有增強(qiáng)展開層的作用，同時(shí)在使用血液、唾液、尿等具有感染危險(xiǎn)的溶液作為被檢查溶液中的情況，具有將其遮斷的作用。而且所述基板7濕潤展開層，具有光透過性的情況，也可以具有遮斷光的效果。另外，這里規(guī)定將基板7配設(shè)在展開層的下部，也可以取代基板7利用液體不透過性薄片材料6包覆展開層的里面。這種情況在使用血液、唾液、尿等具有感染危險(xiǎn)的溶液作為被檢查溶液中的情況，具有將其遮斷的作用。而且，由于可以減少傳感器的材料數(shù)，所以可以更加降低成本。
8表示熔融固化部，是利用CO2激光使所述展開層的平行側(cè)面熔融，通過其冷卻使其固化而形成。在本實(shí)施方案1中由于所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5不接觸所述展開層的平行側(cè)面，所以即使使其側(cè)面熔融，所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5也不受影響。因而，可以將所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5的試劑量放至最小限，試劑價(jià)格高的情況以及只有微量的情況下更有效。另外，本實(shí)施方案1中，熔融方法使用CO2激光，除此之外，也可以使用受激準(zhǔn)分子激光、氬激光、YAG激光、氦氖激光、紅寶石激光等。另外，除激光之外，也可以使用加熱金屬等使其接觸，使所述展開層的平行側(cè)面熔融，而且也可以根據(jù)所述展開層的材料通過有機(jī)溶劑等使其溶融。另外，所述的熔融方法是一個(gè)例子，只要能夠使所述展開層的平行側(cè)面融合，使用任何方法都可以。
下面，使用圖1對(duì)具有以上構(gòu)成的本實(shí)施方案1的生物傳感器的測(cè)定方法進(jìn)行說明。本實(shí)施方案1中例舉的生物傳感器是一步免疫色譜的試片，使用時(shí)的基本的測(cè)定操作是只要添加被檢查溶液的操作，其測(cè)定就可以開始。這里的免疫色譜法是一種測(cè)定體系，表示使用可以濕潤的多孔質(zhì)材料，使其形成固定化試劑和標(biāo)記試劑的復(fù)合體，由此進(jìn)行測(cè)定的免疫測(cè)定法，利用抗原抗體反應(yīng)的測(cè)定體系，相對(duì)在通常免疫測(cè)定法中B/F分離等必要的洗凈操作，被檢查溶液浸透色譜法擔(dān)體，通過該過程實(shí)現(xiàn)B/F分離。另外在這樣的免疫色譜法中，通常的所有的試劑處于干燥狀態(tài)，作為標(biāo)記該試劑的標(biāo)記物一般地使用金膠體、膠乳，也可以使用磁性粒子、酶、金屬膠體等。另外標(biāo)記物為酶的場(chǎng)合等，作為使用者的測(cè)定操作包括添加酶底物以及反應(yīng)終止試劑的操作。
具有上述的生物傳感器的測(cè)定首先是通過在添加部1適量添加被檢查溶液開始。將被檢查溶液添加到添加部1，被檢查溶液浸透到展開層。展開層利用熔融固化部8密閉其側(cè)面，所以側(cè)面的被檢查溶液的浸透速度沒有加快，以均一的速度浸透下去。并且當(dāng)被檢查溶液到達(dá)標(biāo)記試劑保持部4，保持在該標(biāo)記試劑保持部4上的標(biāo)記試劑便開始溶出。其后，被檢查用溶液開始浸透，被檢查溶液達(dá)到試劑固定化部分5，其后被檢查溶液被吸水部3所吸收。
并且，其測(cè)定結(jié)果可以通過確認(rèn)經(jīng)過某一定時(shí)間之后的試劑固定化部分5上的標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)得到。本實(shí)施方案1中，所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5不接觸所述展開層的平行側(cè)面，而且將其平行側(cè)面熔融密閉，所以在試劑固定化部分5上被檢查溶液進(jìn)行均一的浸透，通過該試劑固定化部5的標(biāo)記試劑以及被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物均一地浸透試劑固定化部分5的各面，消除局部的結(jié)合量的差，可以得到精度高的均一的測(cè)定的結(jié)果。
另外測(cè)定所述試劑固定化部分5上的標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)的方法可以通過目測(cè)進(jìn)行必要的定性判斷，在需要進(jìn)行精度更高的測(cè)定的情況，使用光學(xué)手段，測(cè)定該標(biāo)記試劑的結(jié)合量，由此可以得到定量的結(jié)果。另外，本實(shí)施方案1中，由于可以將所述試劑固定化部分5的形狀做成被驗(yàn)者容易確認(rèn)的形狀，所以作為測(cè)定該試劑固定化部分5上的標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)的方法，可以說適合目測(cè)判定。
如上所述，利用本實(shí)施方案1得到的生物傳感器及其制造方法，在展開層上的局部上和該平行側(cè)面不接觸的將所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5形成斑點(diǎn)狀等，做成相對(duì)該展開層上的被檢查溶液浸透的方向，將所述平行側(cè)面的一部分或者整體熔融固化，密閉，因此可以使展開層上的被檢查溶液的浸透整齊，可以進(jìn)行更高精度的定量測(cè)定。另外由于使展開層本身熔融固化，所以不需要密閉平行側(cè)面的新的材料，可以使制造過程簡(jiǎn)單化，通過減少材料和減少制造施工數(shù)量實(shí)現(xiàn)低成本化。
另外作為展開層的原理使用蛋白質(zhì)等結(jié)合比較容易的硝化纖維素，由此可以容易地制造生物傳感器。
另外，通過利用激光熔融固化展開層的平行側(cè)面，密閉，可以使平行側(cè)面的必要的部分更加高速而且均一地熔融固化，而且也可以使熔融固化的部分保持均一性。也可以使展開層的側(cè)面在非接觸狀態(tài)物理地熔融固化，可以不產(chǎn)生展開層的接觸壓帶來的形狀變化，結(jié)果可以進(jìn)行高精度的測(cè)定。
另外，本實(shí)施方案1中，舉例說明了利用抗原抗體的生物傳感器，除了抗原抗體反應(yīng)以外只要是特異性結(jié)合反應(yīng)體系，就可以同樣地實(shí)施。對(duì)于測(cè)定操作，也不限于利用添加被檢查溶液的添加操作進(jìn)行測(cè)定的一步操作，例如在添加被檢查溶液之外，由于標(biāo)記物為酶，需要添加反應(yīng)終止試劑等，有時(shí)需要稀釋檢測(cè)物等，在該測(cè)定操作中盡管需要多個(gè)操作，也同樣可以實(shí)施。
首先使用圖2對(duì)本發(fā)明實(shí)施方案2中的傳感器的構(gòu)成進(jìn)行說明。
圖2是顯示本發(fā)明實(shí)施方案2中的使展開層的平行側(cè)面的試劑成分變性失活的狀態(tài)的生物傳感器的立體圖；圖2(a)顯示只有展開層的該傳感器構(gòu)成圖；圖2(b)顯示在展開層的上部配設(shè)有液體不透過性薄片材料的構(gòu)成圖；圖2(c)顯示在展開層的上部配設(shè)有液體不透過性薄片材料、在其下部配設(shè)有基板的構(gòu)成圖。
在圖2上，本實(shí)施方案2的生物傳感器和實(shí)施方案1同樣是一步免疫色譜法的試片，在展開層上形成標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5。但是，本實(shí)施方案中以帶狀形成所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5，具有試劑接觸所述展開層上的被檢查溶液的添加方向?qū)?yīng)的平行側(cè)面的結(jié)構(gòu)。并且9顯示試劑失活部，是通過CO2激光使展開層的標(biāo)記試劑保持部4的側(cè)面部分和試劑固定化部5的側(cè)面部分失活而得的。另外在使展開層的側(cè)面的試劑成分失活的時(shí)候，優(yōu)選使其側(cè)面部分周邊均一地進(jìn)行失活的方法，例如通過使加熱的金屬面接觸側(cè)面使其失活的方法，以及涂敷以及噴霧酸、堿等使蛋白質(zhì)變性的溶液的方法等。另外在圖2中，對(duì)于和圖1相同的部分使用相同的符號(hào)，省略說明。
下面利用圖2說明具有這樣構(gòu)成的本實(shí)施方案2的生物傳感器的測(cè)定方法。
首先是通過在添加部1適量添加被檢查溶液開始所述生物傳感器的測(cè)定。一旦被檢查溶液添加到添加部1，被檢查溶液就浸透到展開層。當(dāng)被檢查溶液浸透到標(biāo)記試劑保持部4，標(biāo)記試劑便開始溶出。但是由于標(biāo)記試劑保持部4上，展開層側(cè)面的標(biāo)記試劑失活，所以該標(biāo)記試劑不溶出或者失去其特異的性質(zhì)。這里所述的特異的性質(zhì)是指例如抗原抗體反應(yīng)這樣的特異性的結(jié)合反應(yīng)或者在標(biāo)記試劑保持部4上的標(biāo)記試劑中使用酶等的場(chǎng)合等的特異性的反應(yīng)。
其后，展開層的被檢查溶液開始浸透，被檢查溶液達(dá)到試劑固定化部5，其后被檢查溶液被吸水部3所吸收。即使在該試劑固定化部5上，由于展開層側(cè)面的試劑變性失活，試劑固定化部5的側(cè)面部分上也不發(fā)生反應(yīng)。
這樣的所述展開層上的被檢查溶液的浸透由于不使用機(jī)械性的操作，所以根據(jù)展開層的性質(zhì)進(jìn)行。并且該展開層的側(cè)面處于展開層中的細(xì)孔被寸斷的狀態(tài)，其形狀依據(jù)和中央部分的不同，展開層的兩側(cè)面和中央部產(chǎn)生浸透速度的變化。因而在本實(shí)施方案2中，如上所述使展開層側(cè)面的試劑變性失活，在展開層的側(cè)面部不發(fā)生反應(yīng)，可以除去所述被檢查溶液的浸透不均一的部分的試劑固定化部5的側(cè)面上的標(biāo)記試劑的結(jié)合。另外這里的細(xì)孔叫做展開層中的多孔，所謂的展開層的中央部表示側(cè)面以外的部分。
并且，利用所述的生物傳感器的測(cè)定結(jié)果可以通過確認(rèn)經(jīng)過某一定時(shí)間之后的試劑固定化部分5上，標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)得到。測(cè)定所述的試劑固定化部5的標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)的方法，可以通過目測(cè)進(jìn)行必要的定性判斷，在需要進(jìn)行精度高的測(cè)定的情況，使用光學(xué)手段，測(cè)定該標(biāo)記試劑的結(jié)合量，由此可以得到定量的結(jié)果。
如上所述，根據(jù)本實(shí)施方案2得到的生物傳感器及其制造方法，在展開層上以帶狀形成所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5，由于使該展開層上的標(biāo)記試劑保持部4的平行側(cè)面和試劑固定化部5的平行側(cè)面變性失活，所以在展開層的側(cè)面部上不發(fā)生反應(yīng)，可以防止不均一的被檢查溶液的浸透產(chǎn)生的測(cè)定精度的低下。
另外所述展開層的試劑失活部9由于通過激光照射通過非接觸使其試劑成分變性失活，所以在變性失活工序上可以不產(chǎn)生接觸壓產(chǎn)生的所述展開層的形狀變化，可以防止所述展開層的形狀變化產(chǎn)生的浸透的不均一，結(jié)果可以制作高精度的生物傳感器。
本發(fā)明實(shí)施方案3中的傳感器及其制造方法是使被檢查溶液以均一的速度浸透展開層，使所述展開層的被檢查溶液的浸透方向相對(duì)的平行側(cè)面熔融固化、密閉，和所述展開層上以帶狀形成的標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5、所述平行側(cè)面部分的試劑成分變性失活同時(shí)進(jìn)行。
首先使用圖3對(duì)本發(fā)明實(shí)施方案3中的傳感器的構(gòu)成進(jìn)行說明。
圖3是顯示本發(fā)明實(shí)施方案3中的將展開層的平行側(cè)面熔融固化而密閉，而且使試劑成分變性失活的生物傳感器的結(jié)構(gòu)的立體圖；圖3(a)顯示只有展開層的該傳感器構(gòu)成圖；圖3(b)顯示在展開層的上部配設(shè)有液體不透過性薄片材料的構(gòu)成圖；圖3(c)顯示在展開層的上部配設(shè)有液體不透過性薄片材料、在其下部配設(shè)有基板的構(gòu)成圖。
在圖3上，本實(shí)施方案3的生物傳感器是和實(shí)施方案2同樣帶狀形成標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5的，利用CO2激光等照射相對(duì)該展開層上的被檢查溶液添加方向平行的側(cè)面整體，熔融固化該平行側(cè)面，密閉(熔融固化部8)，同時(shí)使該平行側(cè)面的試劑成分變性失活(試劑失活部9)。另外在圖3中，對(duì)于和圖2相同的部分使用相同的符號(hào)，省略說明。
下面利用圖3說明具有這樣構(gòu)成的本實(shí)施方案3的生物傳感器的測(cè)定方法。
首先是通過在添加部1適量添加被檢查溶液開始所述生物傳感器的測(cè)定。一旦被檢查溶液添加到添加部1，被檢查溶液就浸透到展開層。所述展開層由于利用熔融固化部8密閉其側(cè)面，所以該側(cè)面的浸透速度不快，可以以均一的速度浸透。并且當(dāng)所述被檢查溶液浸透到標(biāo)記試劑保持部4，標(biāo)記試劑便開始溶出。但是由于標(biāo)記試劑保持部4上，展開層側(cè)面的標(biāo)記試劑失活，所以該標(biāo)記試劑不溶出或者失去其特異的性質(zhì)。這里所述的特異的性質(zhì)是指例如抗原抗體反應(yīng)這樣的特異性的結(jié)合反應(yīng)或者在標(biāo)記試劑保持部4上的標(biāo)記試劑中使用酶等的場(chǎng)合等的特異性的反應(yīng)。
其后，展開層的被檢查溶液開始浸透，被檢查溶液達(dá)到試劑固定化部5，其后被檢查溶液被吸水部3所吸收。即使在該試劑固定化部5上，由于展開層側(cè)面的試劑變性失活，試劑固定化部5的側(cè)面部分上也不發(fā)生反應(yīng)。
這樣的生物傳感器上的測(cè)定結(jié)果可以通過確認(rèn)經(jīng)過某一定時(shí)間之后的試劑固定化部分5上的標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)得到。本實(shí)施方案3中，所述展開層的平行側(cè)面熔融密閉，所以在所述試劑固定化部5上，被檢查溶液進(jìn)行均一地浸透，通過該試劑固定化部5的標(biāo)記試劑以及被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物均一地浸透試劑固定化部5各面，消除部分的結(jié)合量的差，可以得到精度高的均一的測(cè)定結(jié)果。而且在本實(shí)施方案3中，由于所述展開層的標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5的平行側(cè)面變性失活，可以利用該試劑固定化部5的側(cè)面不產(chǎn)生標(biāo)記試劑結(jié)合，消除由該展開層的平行側(cè)面和中央部的浸透速度的變化帶來的試劑固定化部5上的被檢查溶液的浸透的不均一，可以得到精度更高的測(cè)定結(jié)果。另外這里所述的展開層的中央部表示側(cè)面以外的部分。另外測(cè)定所述的試劑固定化部5的標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)的方法，可以通過目測(cè)進(jìn)行必要的定性判斷，在需要進(jìn)行精度高的測(cè)定的情況，使用光學(xué)手段，測(cè)定該標(biāo)記試劑的結(jié)合量，由此可以得到定量的結(jié)果。
如上所述，本實(shí)施方案3得到的生物傳感器及其制造方法，在展開層上以帶狀形成所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5，由于使相對(duì)所述展開層上的被檢查溶液的浸透方向，平行側(cè)面的一部分或整體熔融固化而密閉，和該平行側(cè)面的所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5上的試劑成分變性失活同時(shí)進(jìn)行，所以使被檢查溶液向所述展開層的浸透整齊，而且消除向所述試劑固定化部5的平行側(cè)面的浸透帶來的精度惡化，可以進(jìn)行更高精度的定量測(cè)定。另外由于使展開層本身熔融固化，所以不需要用于密閉平行側(cè)面的新的材料，可以簡(jiǎn)化制造過程，通過減少材料和減少制造施工數(shù)量實(shí)現(xiàn)低成本化。
另外，通過利用和蛋白質(zhì)溶液結(jié)合的硝化纖維素作為展開層的原料，可以容易地制造生物傳感器。
這樣通過激光熔融固化展開層的平行側(cè)面，密閉，可以使平行側(cè)面的必要的部分更高速地并且均一的熔融固化，可以保持熔融固化部分的均一性。另外可以使展開層的側(cè)面以非接觸狀態(tài)物理地熔融固化，不產(chǎn)生所述展開層的接觸壓帶來的形狀變化，結(jié)果可以制造高精度的生物傳感器。
下面使用圖4以及圖5對(duì)本發(fā)明實(shí)施方案4中的生物傳感器的制造工序進(jìn)行說明。
圖4是具有本實(shí)施方案4的斑點(diǎn)狀的試劑固定化部的生物傳感器的切斷工序前后的A-A’剖面圖，圖4(a)顯示切斷前的狀態(tài)，圖4(b)顯示切斷后的狀態(tài)。另外，圖5是具有本實(shí)施方案4的帶狀的試劑固定化部的生物傳感器的切斷工序前后的A-A’剖面圖，圖5(a)顯示切斷前的狀態(tài)，圖5(b)顯示切斷后的狀態(tài)。另外圖4以及圖5表示圖1(c)以及圖3(c)的A-A’剖面圖，圖1以及圖3相同的部分使用相同的符號(hào)，省略說明。
圖4(a)中生物傳感器展開層和液體不透過性薄片材料6和基板7形成為片狀。這里所述的片狀是指圖4(a)所示的生物傳感器多個(gè)連接的切斷前的狀態(tài)。并且在本實(shí)施方案4中，使用CO2激光切斷圖4(a)的薄片狀的生物傳感器，由1片薄片狀生物傳感器制造圖4(b)所示的多個(gè)生物傳感器。另外利用本實(shí)施方案4的生物傳感器的制造工序，切斷薄片狀生物傳感器的同時(shí)，該側(cè)面如圖4(b)所示熔融固化，形成熔融固化部8，使用1個(gè)工序，可以切斷而且密閉該切斷面。
另外在圖5(a)中也同樣，生物傳感器以薄片狀形成，使用CO2激光切斷圖5(a)的薄片狀的生物傳感器，由1片薄片狀生物傳感器制造圖5(b)所示的多個(gè)生物傳感器。另外在圖5中，所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5以帶狀形成，所以利用1個(gè)工序切斷，而且密閉該切斷面，同時(shí)所述標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部5的側(cè)面的試劑成分變性失活，可以利用1個(gè)切斷工序，在所述生物傳感器上形成熔融固化部8和試劑失活部9。
利用圖6以及圖7比較本實(shí)施方案4的制造工序得到的生物傳感器的剖面狀態(tài)和已往的制造工序得到的生物傳感器的剖面狀態(tài)。圖6顯示用已有的切斷方法切斷生物傳感器的場(chǎng)合，相對(duì)被檢查溶液浸透方向平行側(cè)面的顯微鏡照片，圖7顯示用本實(shí)施方案4的切斷方法切斷的場(chǎng)合，相對(duì)被檢查溶液浸透方向平行側(cè)面的顯微鏡照片。
使用CO2激光切斷，同時(shí)熔融固化其斷面，通過本實(shí)施方案4的制造工序制造得到的生物傳感器側(cè)面如圖7所示，生物傳感器的側(cè)面被熔融固化，密閉。另一方面，利用刀具切斷，利用已有的制造工序制造的生物傳感器的側(cè)面如圖6所示由于刀具的接觸，展開層的側(cè)面受傷，形狀發(fā)生變化。
另外對(duì)比所述的圖6和圖7，相對(duì)圖6的展開層的側(cè)面的變形，可以確認(rèn)圖7的展開層的側(cè)面保持多孔質(zhì)的狀態(tài)，是熔融固化的密閉狀態(tài)。
如上所述，利用本實(shí)施方案4得到的生物傳感器以及其制造方法，由于利用激光切斷薄片狀的生物傳感器，同時(shí)熔融固化其切斷面，密閉，所以在生物傳感器制造工序中，不需要通過切斷工序和另外的工序進(jìn)行密閉操作，可以提供簡(jiǎn)單低成本而且高精度的生物傳感器。
實(shí)施方案5本發(fā)明實(shí)施方案5中的傳感器及其制造方法具有高精度、高正確性的精度，同時(shí)可以實(shí)現(xiàn)低成本化、制造工序簡(jiǎn)單，將展開層設(shè)定為單一部件材料，而且去除吸水部等，除去了展開層的始點(diǎn)以及終點(diǎn)的液體不透過性薄片。
首先使用圖8對(duì)本發(fā)明實(shí)施方案5中的生物傳感器的構(gòu)成進(jìn)行說明。
圖8是顯示本實(shí)施方案5的利用熔融固化密閉的生物傳感器的立體圖，圖8(a)顯示在展開層上部配設(shè)液體不透過性薄片材料，圖8(b)顯示在展開層的上部配設(shè)液體不透過性薄片材料，在下部配設(shè)基板。
圖8中，1表示在展開層上添加被檢查溶液的添加部，和反應(yīng)部2是同一部件。2是展開層上的反應(yīng)部，由硝化纖維素構(gòu)成。10顯示所述展開層上、沒有液體不透過性薄片覆蓋的終端開放部。這些在展開層使用的材料只要是可以利用被檢查溶液濕潤的材料就可以，可以使用濾紙、無紡布、膜、布等任意的多孔質(zhì)材料構(gòu)成。
生物傳感器的低成本化，以及制造工序的簡(jiǎn)單化為目的的情況，展開層優(yōu)選用一個(gè)部件構(gòu)成，而且即使是被檢查溶液為微量(100μL)、或者極微量(10μL以下)的情況，由于需要所述被檢查溶液在展開層展開，所以展開層優(yōu)選厚度比較薄的材料。因而作為展開層的材料優(yōu)選使用硝化纖維素等的膜。
另外4是標(biāo)記試劑保持部，在展開層上的局部被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物對(duì)應(yīng)的抗體利用金膠體標(biāo)記，另外以干燥狀態(tài)保持著以使被檢查溶液可以溶出。5是試劑固定化部，使被檢查溶液終端中的測(cè)定對(duì)象物對(duì)應(yīng)的抗體固定化，利用和標(biāo)記試劑不同的表位結(jié)合，以干燥狀態(tài)被固定化，用于形成被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物和標(biāo)記試劑的復(fù)合體。所述的展開層的構(gòu)圖被稱之為抗原抗體反應(yīng)中的夾層反應(yīng)。通過選擇試劑如果使用和被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)的試劑，也可以進(jìn)行競(jìng)爭(zhēng)反應(yīng)。另外，對(duì)于抗原抗體反應(yīng)以外的也一樣，在欲利用特異性的結(jié)合的情況，可以利用任意的試劑成分構(gòu)成。另外，對(duì)于標(biāo)記方法，所述的金膠體也只是一個(gè)例子而已，除此之外還有酶、蛋白質(zhì)、色素、熒光色素、金屬溶膠、非金屬溶膠、膠乳等的著色粒子等，根據(jù)需要可以任意選擇。
生物傳感器的高精度化、低成本化以及其制造工序簡(jiǎn)單化為目的的場(chǎng)合，所述兩試劑成分被保持或固定化在同一部件上，添加部1、反應(yīng)部2、吸水部3不是分別的部件，是一個(gè)部件，而且所述試劑成分優(yōu)選配設(shè)在同一平面上不同的部分。
6表示液體不透過性薄片材料，例如由透明PET帶構(gòu)成。該液體不透過性薄片材料6是一種密封包覆除添加部1和展開層的終端開放部10的展開層的構(gòu)成，通過使該液體不透過性薄片材料6包覆在展開層所述的部分，遮斷保護(hù)向被檢查溶液的添加部1以及終端開放部10之外的點(diǎn)狀附著，同時(shí)可以防止來自外部的污染，如對(duì)展開層無意地接觸被檢查溶液，被檢查者用手等直接接觸展開層等。該液體不透過性薄片材料6優(yōu)選使用透明的材料，特別是包覆試劑固定化部5的部分由于是確認(rèn)測(cè)定結(jié)果的部分，所以優(yōu)選至少維持可以透過的狀態(tài)。而且通過使浸透展開層的被檢查溶液保持浸透均一性，可以得到高精度的測(cè)定結(jié)果，為此優(yōu)選液體不透過性薄片材料6相對(duì)展開層密封包覆著。
7表示保持展開層的基板，例如由白色PET薄膜構(gòu)成?；?具有增強(qiáng)展開層的作用，同時(shí)在使用血液、唾液、尿等具有感染危險(xiǎn)的溶液作為被檢查溶液中的情況，具有將其遮斷的作用。而且所述基板7在濕潤展開層，具有光透過性的情況，也可以具有遮斷光的效果。
8表示熔融固化部，是利用CO2激光使所述展開層的平行側(cè)面熔融，通過其冷卻使其固化形成。這里熔融方法使用CO2激光，除此之外，也可以使用受激準(zhǔn)分子激光、氬激光、YAG激光、氦氖激光、紅寶石激光等。另外，除激光之外，也可以使用加熱金屬等使其接觸，使所述展開層的平行側(cè)面熔融，而且也可以利用所述展開層的材料通過有機(jī)溶劑等使其溶融。另外，所述的融合方法是一個(gè)例子，只要能夠使所述展開層的平行側(cè)面融合，使用任何方法都可以。
下面，使用圖9是顯示本實(shí)施方案5的生物傳感器的測(cè)定方法的模式圖。
生物傳感器的測(cè)定首先是通過在添加部1適量添加被檢查溶液11開始(圖9(a))。一旦被檢查溶液11添加到添加部1，被檢查溶液11就浸透展開層(圖9(b))。所述展開層由于利用熔融固化部8密閉其側(cè)面，所以側(cè)面的被檢查溶液11的浸透速度沒有加快，以均一的速度浸透展開層。并且當(dāng)被檢查溶液11到達(dá)標(biāo)記試劑保持部4，保持在該標(biāo)記試劑保持部4上的標(biāo)記試劑便開始溶出。其后，被檢查用溶液11開始浸透，被檢查溶液11達(dá)到試劑固定化部5，其后到達(dá)終端開放部10(第9(c)圖)。到達(dá)終端開放部10的被檢查溶液11通過蒸發(fā)被干燥，再通過水頭差的關(guān)系浸出到和添加部1上的被檢查溶液11相同的高度(圖9(d))。
這樣使本生物傳感器不需要吸收多余的被檢查溶液11所用的新的材料，可以使被檢查溶液1在展開層上沿著一定的方向，從添加部1方向向終端開放部10方向浸透。另外本實(shí)施方案5中，添加部1以及終端開放部10表示被露出開發(fā)狀態(tài)下的情況，根據(jù)需要在被檢查溶液11為污染物質(zhì)的情況，為了不使被檢查溶液11附著在使用者的手上，也可以用保護(hù)材料構(gòu)成添加部1以及終端開放部10，或者將具有所述構(gòu)成的展開層投入到中空箱中。
并且，測(cè)定結(jié)果可以通過確認(rèn)經(jīng)過某一定時(shí)間之后的試劑固定化部分5上的標(biāo)記試劑的結(jié)合狀態(tài)得到。在本發(fā)明中，如上所述將試劑固定化部5上的展開層的平行側(cè)面熔融密閉，所以展開層上的被檢查溶液11進(jìn)行均一的浸透，因而通過該試劑固定化部5的標(biāo)記試劑以及被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物均一地浸透試劑固定化部分5的各面，消除試劑固定化部5的中央部和側(cè)面部上的標(biāo)記試劑的結(jié)合量的差，從而可以得到精度高的均一的測(cè)定的結(jié)果。
測(cè)定所述試劑固定化部5上的標(biāo)記試劑的方法也可以通過目測(cè)進(jìn)行必要的定性判斷。在需要進(jìn)行精度高的測(cè)定的情況，通過使用光學(xué)手段，測(cè)定試劑固定化部5上的標(biāo)記試劑的結(jié)合量，可以得到定量的結(jié)果。
另外，本實(shí)施方案5中，舉例說明在所述展開層上以帶狀形成標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部分5的情況，對(duì)于所述展開層上以斑點(diǎn)狀形成標(biāo)記試劑保持部4以及試劑固定化部分5的情況也一樣。
如上所述，利用本實(shí)施方案5得到的生物傳感器及其制造方法，對(duì)被檢查溶液11浸透的方向，熔融展開層的平行側(cè)面的一部分或者整體部分熔融固化，密閉，因此可以使展開層上的被檢查溶液的浸透整齊，進(jìn)行更高精度的定量測(cè)定。同時(shí)，通過利用液體不透過性薄片6使除去所述展開層的始端部分以及終端部分的部分密封包覆，可以不需要添加被檢查溶液的部分的部件、甚至是吸收被檢查溶液水的吸水部的部件。
另外由于使展開層本身熔融固化，所以不需要密閉平行側(cè)面所用的新材料，可以使制造過程簡(jiǎn)單化，在保持傳感器性能的同時(shí)，通過減少材料和減少制造施工數(shù)量實(shí)現(xiàn)低成本化。
另外作為展開層的原料使用蛋白質(zhì)等結(jié)合比較容易的硝化纖維素，而且所述試劑成分在展開層和同一平面上形成，由此可以容易地制造生物傳感器。
另外，通過利用激光熔融固化展開層的平行側(cè)面，密閉，可以使平行側(cè)面必要的部分更加高速而且均一地熔融固化，而且也可以使熔融固化的部分保持均一性。另外也可以通過激光使其熔融，使展開層以非接觸狀態(tài)物理地熔融固化，可以不產(chǎn)生展開層的接觸壓帶來的形狀變化，結(jié)果可以進(jìn)行高精度的測(cè)定。
實(shí)施例下面通過實(shí)施例對(duì)本發(fā)明進(jìn)行更具體的說明，只要不超過其宗旨，本發(fā)明不限于所述的這些實(shí)施例。
本實(shí)施例中，對(duì)在硝化纖維素膜中含有抗HCG-β抗體固定化線段、以及抗hCG-α抗體和金屬膠體的復(fù)合體的寬帶的免疫色譜法展開層進(jìn)行如下制造，在所述免疫色譜法展開層的上部配設(shè)液體不透過性薄片，在其下部配設(shè)基板。然后，為了形成各個(gè)傳感器，制成由CO2激光切斷的免疫色譜試片和由刀具(截紙機(jī))切斷的免疫色譜試片，使用各個(gè)免疫色譜試片測(cè)定尿中的hCG，比較其測(cè)定值的離散度。
A.免疫色譜法展開層的配制首先準(zhǔn)備用磷酸緩沖溶液稀釋的、調(diào)整好濃度的抗hCG-β抗體溶液，使用溶液流出裝置將該抗體溶液涂敷在硝化纖維素膜上。這樣可以在硝化纖維素膜上得到檢測(cè)用的抗體固定化線。將該硝化纖維素膜干燥后，浸漬在含有1％的脫脂乳的Tris-HCl緩沖溶液中，緩慢地振搖30分鐘。30分鐘之后，將膜轉(zhuǎn)移到Tris-HCl緩沖溶液槽中，緩慢振搖10分鐘，之后在另外的Tris-HCl緩沖溶液槽中再緩慢振動(dòng)10分鐘，洗凈膜。進(jìn)行2次如上的洗凈操作之后，從洗凈液中取出膜，在室溫干燥。
利用0.01％氯金酸、在回流中的100℃的溶液中加入檸檬酸溶液配制金膠體。金膠體再連續(xù)回流30分鐘之后冷卻，利用0.2M的碳酸鉀溶液調(diào)配到pH9。該金膠體溶液中加入hCG-α抗體，進(jìn)行數(shù)分鐘的攪拌，之后再添加10％BSA(牛血清白蛋白)溶液pH9使其最終為1％量，進(jìn)行攪拌，配成抗體金膠體復(fù)合物(標(biāo)記抗體)溶液。分離標(biāo)記抗體，將其懸濁于洗凈緩沖液(1％BSA磷酸緩沖液)中，之后進(jìn)行離心分離，單獨(dú)洗凈分離標(biāo)記抗體。用洗凈緩沖溶液懸濁該標(biāo)記抗體，用0.8μm的過濾器進(jìn)行過濾，之后配成最初的金膠體溶液量的10分之一，在4℃儲(chǔ)藏。
將如上所述制成的標(biāo)記抗體溶液放置在溶液流出裝置上，涂敷在與抗hCG-β抗體固定化干燥膜上的抗體固定化位置相分離的位置上，之后使膜干燥。這樣在固定化膜上可以得到標(biāo)記抗體保持部位。
這樣可以完成免疫色譜法展開層。
B.免疫色譜試片的制作在厚度為0.5mm的白色PET組成的基板上粘貼如上所述制成的疫色譜展開層，再在上部、從標(biāo)記抗體保持部分到終端部分，開放終端部存在的使吸水部層合的部分，張貼由厚度100μm的透明PET組成的液體不透過性薄片。然后制造以2.5mm的寬度，由CO2激光切斷，使展開層的側(cè)面熔融固化密閉的免疫色譜試片，和由刀具(截紙機(jī))切斷的免疫色譜試片。再在各個(gè)終端部粘貼玻璃纖維濾紙作為吸水部。這樣可以制造2種免疫色譜試片。另外，在本實(shí)施例中，雖然粘貼玻璃纖維濾紙作為吸水部。但是不一定需要吸水部，對(duì)于添加所述被檢查溶液的始端和終端除外的所述免疫色譜展開層，密封液體不透過性薄片使其包覆，這樣也可以使所述展開層的終端部保持和吸水部同樣的效果。總之，通過開放展開層的終端部分，容易使被檢查溶液蒸發(fā)，而且通過水頭差的關(guān)系，到達(dá)所述展開層的終端的被檢查溶液的液面利用和始端的液面形成同樣的高度。
C.被檢查溶液的配制通過在人尿中添加已知濃度的hCG溶液，配制成各種已知濃度的hCG溶液。
D.尿中hCG的測(cè)定方法在如上所述制成的2種免疫色譜法試片上的試樣添加部上，添加20μl以上的含有Hcg的尿，向吸水部方向進(jìn)行展開處理，使其進(jìn)行抗原抗體反應(yīng)，進(jìn)行固定化部上的顯色反應(yīng)。這里使用反射型分光光度計(jì)(CS9300；島津制作所制)測(cè)定在件中添加試樣5分鐘之后的顯色狀況，計(jì)算處理顯色度。
圖10是顯示本發(fā)明的實(shí)施例的所述2種免疫色譜法試片上的hCG濃度和測(cè)定結(jié)果之間關(guān)系的圖，圖10(a)顯示利用CO2激光裁斷的免疫色譜法試片的測(cè)定結(jié)果，圖10(b)顯示利用刀具(截紙機(jī))裁斷的免疫色譜法試片的測(cè)定結(jié)果。
首先在免疫色譜試片上添加含有hCG濃度各為100、1000、10000U/l的hCG的尿，進(jìn)行展開處理。然后，利用使用反射型分光光度計(jì)測(cè)定520nm的波長的吸光度，帶入預(yù)先做成的顯示hCG濃度和吸光度的關(guān)系的檢測(cè)線，得到換算值。
結(jié)果，圖10(a)上顯示使用CO2激光切斷的試片的CV值(變異系數(shù))為3～10％，圖10(b)上顯示刀具(截紙機(jī))切斷的試片的CV值(變異系數(shù))為20～35％，具有大的離散度。由以上可以確認(rèn)在使用CO2激光切斷的試片的測(cè)定中，具有高精度的定量精度。
產(chǎn)業(yè)上利用的可能性本發(fā)明涉及的生物傳感器以及其制造方法可以提高分析對(duì)象物液體試樣和標(biāo)記試劑的反應(yīng)結(jié)果的精度，另外這樣的高精度生物傳感器在制造工序上簡(jiǎn)單化，而且成本低，非常有用。
權(quán)利要求
1.一種生物傳感器，其中具有展開被檢查溶液的展開層，含有在該展開層的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在所述展開層的局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分，其特征為，所述展開層、相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或整體被熔融固化密閉著。
2.一種生物傳感器，其中具有展開被檢查溶液的展開層，含有相對(duì)該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向包含平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在所述展開層的浸透方向包含平行側(cè)面的局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分，其特征為，所述展開層使相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向，所述標(biāo)記試劑部分的平行側(cè)面和所述固定化試劑部分的平行側(cè)面上的試劑成分變性失活。
3.如權(quán)利要求2所述的生物傳感器，其中所述展開層、相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或者整體被熔融固化密閉著。
4.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中所述展開層除添加所述被檢查溶液局部的表面、或者表面以及里面用液體不透過性的薄片覆蓋，所述展開層以及所述液體不透過性的薄片、相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或者整體被熔融固化密閉著。
5.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中所述展開層、除添加所述被檢查溶液方向相對(duì)的起端和終端局部的表面、或者表面以及里面用液體不透過性的薄片覆蓋，所述展開層以及所述液體不透過性的薄片、相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或者整體被熔融固化密閉著。
6.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中所述展開層由硝化纖維素構(gòu)成。
7.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中所述展開層的平行側(cè)面利用激光熔融固化密閉著。
8.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中包括所述固定化試劑以及標(biāo)記試劑的該傳感器的整體處于干燥狀態(tài)。
9.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中所述的生物傳感器是一種通過在可以濕潤的多孔性材料上形成所述固定化試劑和所述標(biāo)記試劑的復(fù)合體，進(jìn)行測(cè)定的免疫色譜法的試片。
10.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中所述生物傳感器是一種在可以濕潤的多孔性材料上，通過所述被檢查溶液的添加操作進(jìn)行測(cè)定的一步免疫色譜法試片。
11.如權(quán)利要求1至權(quán)利要求3任何一項(xiàng)所述的生物傳感器，其中所述固定化試劑和所述標(biāo)記試劑在同一平面而且同一部件上形成著。
12.一種生物傳感器的制造方法，其中生物傳感器具有展開被檢查溶液的展開層，含有在該展開層的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在所述展開層的局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分，其特征為包括熔融固化所述展開層、相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面的一部分或整體使之密閉的熔融工序。
13.如權(quán)利要求12所述的生物傳感器的制造方法，其中，所述熔融工序通過激光照射所述展開層的所述側(cè)面的一部分或整體進(jìn)行。
14.一種生物傳感器的制造方法，其中生物傳感器具有展開被檢查溶液的展開層，含有在該展開層的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在所述展開層的局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分，其特征為包括使薄片狀的所述展開層，相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行切斷，同時(shí)使該展開層的切斷面熔融固化、密閉的切斷熔融工序。
15.如權(quán)利要求14所述的生物傳感器的制造方法，其中，所述切斷熔融工序通過激光裁切所述薄片狀的展開層進(jìn)行。
16.一種生物傳感器的制造方法，其中生物傳感器具有展開被檢查溶液的展開層，包括含有該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向相對(duì)的平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在含有所述展開層的浸透方向?qū)?yīng)的平行側(cè)面局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分，其特征為包含使所述標(biāo)記試劑部分以及所述固定化試劑部分在所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面上的試劑成分變性失活的變性失活工序。
17.如權(quán)利要求16所述的生物傳感器的制造方法，其中所述變性失活工序通過激光照射所述側(cè)面進(jìn)行。
18.一種生物傳感器的制造方法，其中生物傳感器具有展開被檢查溶液的展開層，包括含有該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向相對(duì)的平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在含有所述展開層的浸透方向?qū)?yīng)的平行側(cè)面局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分，其特征為包括所述展開層、所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面的一部分或整體熔融固化，密閉，同時(shí)使所述標(biāo)記試劑部分以及所述固定化試劑部分、所述被檢查溶液的浸透方向?qū)?yīng)的平行的側(cè)面上的試劑成分變性失活的熔融失活工序。
19.如權(quán)利要求18所述的生物傳感器的制造方法，其中所述熔融失活工序通過激光照射所述側(cè)面進(jìn)行。
20.一種生物傳感器的制造方法，其中生物傳感器具有展開被檢查溶液的展開層，包括含有該展開層的所述被檢查溶液的浸透方向相對(duì)的平行側(cè)面的局部被固定化的固定化試劑部分，和以被標(biāo)記的干燥狀態(tài)保持在含有所述展開層的浸透方向?qū)?yīng)的平行側(cè)面局部、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的標(biāo)記試劑部分，通過測(cè)定所述固定化試劑部分上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量，定性或定量所述被檢查溶液中的測(cè)定成分，其特征為包括使薄片狀的所述展開層沿相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行地切斷，同時(shí)使該展開層的切斷面熔融固化而密閉，而且使所述標(biāo)記試劑部分以及所述固定化試劑部分、所述側(cè)面上的試劑成分變性失活的切斷熔融失活工序。
21.如權(quán)利要求20所述的生物傳感器的制造方法，其中，所述切斷熔融失活工序通過激光裁切所述薄片狀的展開層進(jìn)行。
全文摘要
本發(fā)明的生物傳感器在展開被檢查溶液的展開層的局部,含有使所述被檢查溶液中的測(cè)定對(duì)象物對(duì)應(yīng)的抗體固定化的固定化試劑部(5),和保持以干燥狀態(tài)在所述展開層的局部標(biāo)記、可以通過所述被檢查溶液的展開而溶出的抗體的標(biāo)記試劑保持部(4),通過測(cè)定所述固定化試劑部分(5)上的所述標(biāo)記試劑的結(jié)合量,定性或定量所述被檢查溶液的中測(cè)定成分,在該生物傳感器上,所述展開層、相對(duì)所述被檢查溶液的浸透方向平行的側(cè)面的一部分或整體被熔融固化,密閉著。具有這樣構(gòu)成的生物傳感器,可以使展開層上的被檢查溶液的浸透整齊,另外利用簡(jiǎn)單的制造方法可以實(shí)現(xiàn)低成本高精度的生物傳感器及其制造方法。
文檔編號(hào)G01N33/558GK1380977SQ01801455
公開日2002年11月20日 申請(qǐng)日期2001年5月29日 優(yōu)先權(quán)日2000年5月29日
發(fā)明者灘岡正剛, 高橋三枝, 田中宏橋, 北脇文久 申請(qǐng)人:松下電器產(chǎn)業(yè)株式會(huì)社