同時去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及一種去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用，尤其是由假單胞菌Zl和不動桿菌Yl復(fù)合而成的一種用于同時去除苯胺和苯胺降解過程中釋放的氨氮的復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用。
【背景技術(shù)】
[0002]苯胺是一種無色、油狀、可燃且高毒性液體，是重要的有機(jī)化工原料，被廣泛應(yīng)用于國防、印染、塑料、油漆、農(nóng)藥和醫(yī)藥等行業(yè)，是一類嚴(yán)重污染環(huán)境和危害人體健康的有害物質(zhì)。近年來，對苯胺廢水處理的研究日趨成熟，去除廢水中苯胺類有機(jī)物的方法大致分為:物理法、化學(xué)法和生物法。但苯胺在降解過程中會釋放出氨氮，氨氮是水質(zhì)監(jiān)測的綜合指標(biāo)之一，高濃度氨氮會引起水體富營養(yǎng)化，威脅生態(tài)環(huán)境與人體健康。因此，需要考慮去除在降解苯胺過程中釋放的氨氮，盡量減少污染物及副產(chǎn)物的排放，這不僅對實(shí)際應(yīng)用有參考價值，也對水源保護(hù)有重要意義。
[0003]由于污染物結(jié)構(gòu)的復(fù)雜性與種類的多樣性，選擇多種微生物組成一個生物體系，讓其中的各個細(xì)菌發(fā)揮其最佳功能，并利用微生物之間的協(xié)同作用來高效率降解污染物符合實(shí)踐的需要。由于苯胺降解細(xì)菌在去除苯胺的過程中釋放出大量氨氮，而異養(yǎng)硝化細(xì)菌又具有在高C/N條件下有效降解氨氮的作用，將這兩類菌制成復(fù)合菌劑，可以有效地同時去除苯胺和苯胺在降解過程中積累的氨氮。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0004]本發(fā)明的目的是提供一種同時去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用，該復(fù)合菌劑能夠同時有效地去除嚴(yán)重污染環(huán)境的苯胺以及在苯胺降解過程中積累的氨氮。
[0005]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。
[0006]—種同時去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑，所述復(fù)合菌劑是由苯胺降解菌和異養(yǎng)硝化細(xì)菌復(fù)合而構(gòu)成；其中:
[0007]苯胺降解菌，屬于假單胞菌屬(Pseudomonas)，命名為:Pseudomonas sp.Zl ;保藏登記號為:CGMCC N0.11444 ;保藏機(jī)構(gòu)為:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC);保藏時間為:2015年9月24日；
[0008]異養(yǎng)硝化細(xì)菌，屬于不動桿菌屬(Acinetobacter);命名為:Acinetobactersp.Yl ;保藏登記號為:CGMCC N0.6563 ;保藏機(jī)構(gòu)為:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC);保藏時間為:2012年9月14日。
[0009]其中，假單胞菌Zl和不動桿菌Yl的菌液體積之比是1:1。
[0010]一種用于上述同時去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑的制備方法，所述制備方法是下列步驟進(jìn)行的:
[0011](I)假單胞菌Zl的制備方法
[0012]從4°C保藏的斜面上挑取少量菌體接種到10mL液體培養(yǎng)基中，在120rpm、30°C下振蕩培養(yǎng)18h，至菌懸液OD6。。值為0.6?0.8時停止培養(yǎng)，獲得假單胞菌Zl菌液；所述假單胞菌 Zl 的培養(yǎng)基成分為=KH2PO4L Og/L ；K2HP041.0g/L ；NaCl 1.0g/L ；MgS040.00 5g/L ;MnSO40.0017g/L ；H3B030.00116g/L ；ZnSO4.7H20 0.00115g/L ；FeS04.7H20 0.003g/L ;苯胺0.4g/L ;pH 值為 7.0-7.2 ;
[0013](2)不動桿菌Yl的制備方法
[0014]從4°C保藏的斜面上挑取少量菌體接種到10mL液體培養(yǎng)基中，在120rpm、30°C下振蕩培養(yǎng)14h，至菌懸液OD6。。值為1.0?1.2時停止培養(yǎng)，獲得不動桿菌Yl菌液；所述不動桿菌 Yl 的培養(yǎng)基成分為:檸檬酸鈉，4.902g/L ; (NH4)2SO4,0.472g/L ;MgS04，0.05g/L ;K2HPO4,0.2g/L ;NaCl，0.12g/L ;MnS04，0.0lg/L ；FeS04.7H20，0.0lg/L ;pH 值為 7.0-7.2 ；
[0015](3)將上述步驟制備的假單胞菌Zl和不動桿菌Yl按1:1的體積比進(jìn)行混合，獲得微生物復(fù)合菌劑。
[0016]—種用于上述同時去除苯胺和氨氮復(fù)合菌劑的應(yīng)用，所述應(yīng)用是將制備獲得的微生物復(fù)合菌劑用于同時去除苯胺及其苯胺在降解過程中積累的氨氮。
[0017]其中，所述同時去除苯胺及其苯胺在降解過程中積累的氨氮是按接種量為4%的體積比，將復(fù)合菌劑接種于苯胺廢水中。
[0018]所述將復(fù)合菌劑接種于苯胺廢水中是將假單胞菌Zl和不動桿菌Yl按體積比為I: I接種于苯胺廢水，復(fù)合菌劑同時降解苯胺和氨氮，在48h后，苯胺降解率是93.54%,COD降解率是88.41 %，氨氮剩余量為4.39mg/L。
[0019]實(shí)現(xiàn)本發(fā)明上述所提供的一種同時去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑及其制備方法和應(yīng)用，與現(xiàn)有技術(shù)相比，本方法所述復(fù)合菌劑是由假單胞菌(Pseudomonas sp.) ZICGMCCN0.11444和不動桿菌(Acinetobacter sp.) Y1CGMCC N0.6563按1:1的菌液體積之比復(fù)合而成，按接種量4%的體積比將復(fù)合菌劑接種于苯胺廢水中，此時，復(fù)合菌劑同時降解苯胺和氨氮的綜合效果最好，48h后，苯胺降解率為93.54%,COD降解率為88.41 %，氨氮剩余量為 4.39mg/L。
【附圖說明】
[0020]圖1是本復(fù)合菌劑的苯胺降解效果和Zl降解苯胺效果的對比圖。
[0021]圖2是本復(fù)合菌劑的氨氮積累效果和Zl積累氨氮量的對比圖。
[0022]圖3是本復(fù)合菌劑的COD降解效果和Zl降解COD效果的對比圖。
【具體實(shí)施方式】
[0023]以下舉例進(jìn)一步說明本發(fā)明的【具體實(shí)施方式】，但是并不用于限定本發(fā)明的保護(hù)范圍。
[0024]【具體實(shí)施方式】I
[0025]實(shí)施一種同時去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑，該復(fù)合菌劑是由苯胺降解菌和異養(yǎng)硝化細(xì)菌復(fù)合而成。
[0026]苯胺降解菌，屬于假單胞菌屬(Pseudomonas)，其命名為:Pseudomonas sp.Zl ;保藏登記號為=CGMCC N0.11444 ;保藏機(jī)構(gòu)為:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC);保藏時間為:2015年9月24日。
[0027]異養(yǎng)硝化細(xì)菌，屬于不動桿菌屬(Acinetobacter)，其命名為:Acinetobactersp.Yl ;保藏登記號為:CGMCC N0.6563 ;保藏機(jī)構(gòu)為:中國微生物菌種保藏管理委員會普通微生物中心(CGMCC);保藏時間為:2012年9月14日。
[0028]其中，該假單胞菌Zl和不動桿菌Yl的菌液體積之比是1:1。
[0029]【具體實(shí)施方式】2
[0030]實(shí)施一種用于上述【具體實(shí)施方式】I中所述的同時去除苯胺和氨氮的復(fù)合菌劑的制備方法，該制備方法是按下列步驟進(jìn)行的:
[0031](I)假單胞菌Zl的制備方法
[0032]從4°C保藏的斜面上挑取少量菌體接種到10mL液體培養(yǎng)基中，在120rpm、30°C下振蕩培養(yǎng)18h，至菌懸液OD6。。值為0.6?0.8時停止培養(yǎng)，獲得假單胞菌Zl菌液；所述假單胞菌 Zl 的培養(yǎng)基成分為=KH2PO4L Og/L ；K2HP041.0g/L ；NaCl 1.0g/L ；MgS040.00 5g/L ;MnSO40.0017g/L ；H3B030.00116g/L ；ZnSO4.7H20 0.00115g/L ；FeS04.7H20 0.003g/L ;苯胺0.4g/L ;pH 值為 7.0-7.2 ;
[0033](2)不動桿菌Yl的制備方法
[0034]從4°C保藏的斜面上挑取少量菌體接種到10mL液體培養(yǎng)基中，在120rpm、30°C下振蕩培養(yǎng)14h，至菌懸液0D_值為1.0?1.2時停止培養(yǎng)，獲得不動桿菌Yl菌液；所述不動桿菌Yl的培養(yǎng)基成分為:檸檬酸鈉4.902g/L ; (NH4)2SO40.472g/