一種復合微生物菌劑的制備方法
【專利摘要】本發(fā)明涉及一種復合微生物菌劑的制備方法，屬于微生物領域。本發(fā)明將剩菜，剩飯分離處理后，加入草炭和綠蘿葉渣混合，并進行發(fā)酵處理，將濾渣與處理過的花生殼、菜籽油混合，制備得菌劑載體，再將菌種接種至培養(yǎng)基中培養(yǎng)并發(fā)酵得菌液，將菌劑載體置于菌中浸泡，利用菌劑載體吸附活菌數(shù)量，即可制備得復合微生物菌劑。本發(fā)明制備的復合微生物菌劑含菌數(shù)量高，每克的復合微生物菌劑中含有活菌數(shù)達到2.5億個以上，提高了復合微生物菌劑的質量，增強了土壤的活性。
【專利說明】
一種復合微生物菌劑的制備方法
技術領域
[0001]本發(fā)明涉及一種復合微生物菌劑的制備方法，屬于微生物領域。
【背景技術】
[0002]復合微生物肥料及微生物菌劑是通過向土壤補充有益微生物菌，通過其分解還原作用，解決土壤的嚴重板結、化肥超標、滲水透氣性下降等一系列問題；同時，可抑制土傳病害，增強土壤的活性，促進作物根部吸收養(yǎng)分，提高作物的免疫力、抗病能力，從根本上提高食品的品質和等級。目前，進行生物菌劑生產(chǎn)的科研單位和企業(yè)基本是以草炭、褐煤、風化煤作為吸附載體，但這些物質中的含水量很高，即使進行高溫烘干其中的含水量也在15?20%，同時由于它們的產(chǎn)地、品種和開采季節(jié)不同，含水量差異很大，因此生產(chǎn)過程中的配料比例和所用的水溶助劑也要隨之發(fā)生變化，且其吸附后菌劑的活菌數(shù)量低。包裹生物菌劑后，需要烘干，即使是低溫烘干，對微生物活菌仍具有一定的殺滅作用，影響產(chǎn)品的最終效果。且包裹生物菌劑后，烘干后需要再冷卻以及過篩，包裹后大小顆粒將被篩出，浪費了生物菌劑，增加了成本。包裹的生物菌劑為菌劑和草炭的混合物，活菌數(shù)較少，消耗量較大且增加了包裹時間，不易達到較高的活菌數(shù)，所以其最終產(chǎn)品活菌數(shù)較低。

【發(fā)明內容】

[0003]本發(fā)明所要解決的技術問題:針對以草炭、褐煤等物質作為吸附載體吸附后的活菌數(shù)量低，影響生物菌劑的質量和肥效的問題，提供了一種將剩菜，剩飯分離處理后，加入草炭和綠蘿葉渣混合，并進行發(fā)酵處理，將濾渣與處理過的花生殼、菜籽油混合，制備得菌劑載體，再將菌種接種至培養(yǎng)基中培養(yǎng)并發(fā)酵得菌液，將菌劑載體置于菌中浸泡，利用菌劑載體吸附活菌數(shù)量，即可制備得復合微生物菌劑的方法，本發(fā)明制備的復合微生物菌劑含菌數(shù)量高，每克的復合微生物菌劑中含有活菌數(shù)達到2.5億個以上，提高了復合微生物菌劑的質量，增強了土壤的活性。
[0004]為解決上述技術問題，本發(fā)明采用的技術方案是:
(1)稱取300?400g花生殼，將其表面清洗干凈后放入烘箱中干燥，將干燥的的花生殼按固液比I: 5加入無水乙醇中浸泡30?40min，浸泡后取出放入質量分數(shù)15%鹽酸溶液中浸泡I?2h后再放入質量分數(shù)15%氫氧化鈉溶液中浸泡3?5h，浸泡后取出，用去離子水沖洗后放入烘箱中烘干，將烘干后的花生殼粉碎、過篩，得120?150目處理后的花生殼粉末，備用；
(2)回收2?3kg廚房里剩菜、剩飯，過濾將油水和濾渣進行分離，收集上層油水備用，把剩下的濾渣放入塑料桶，再向桶中加入500?600g草炭，攪拌混合均勾后向桶中加入300?400g斬碎的綠蘿葉渣，再向桶中加入備用的上層油水、15?20g酵母菌、8?1g纖維素酶，人工混合攪拌均勻后發(fā)酵7?10天，發(fā)酵后過濾得濾渣，將濾渣放入太陽下暴曬3?5天，曬干后粉碎、過篩得100?120目粉末；
(3)將上述制備得到的粉末和步驟(I)備用的花生殼粉末按質量比1:1混合，
再將混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，機械攪拌混合50?70min，混合后得菌劑載體，備用；
(4)按重量份數(shù)計，分別選取20?30份牛肉膏，15?25份蛋白胨，30?35份瓊脂，15?20份濃度為2.5g/L氯化鈉溶液，0.8?1.0份磷酸氫二鈉，I?3份磷酸二氫鈉和40?50份去離子水，攪拌混合后在110?120°C下滅菌處理5?1min，滅菌處理得培養(yǎng)基，分別按接種量I?3%枯草芽孢桿菌、2?5%巨大芽孢桿菌和2?4%短小芽孢桿菌接種到培養(yǎng)到培養(yǎng)基中，攪摔混合10?15min;
(5)將上述攪拌后的混合物放入發(fā)酵罐中，在28?35°C和轉速為120?150r/min轉速下發(fā)酵5?7天，發(fā)酵結束后過濾得過濾液，將步驟(3)備用的菌劑載體放入過濾液中浸泡，浸泡5?10天后過濾，將濾渣自然風干即可得到復合微生物菌劑。
[0005]本發(fā)明的應用方法:將本發(fā)明制備的復合微生物菌劑用于棉花種植，在其秧苗期，在秧苗根際處撒上上述制備的復合微生物菌劑，撒入的量為8?1kg/畝，待其自然成長17?25天后，可發(fā)現(xiàn)，與施用普通的微生物菌劑相比，株高增加25?30cm，每株鈴數(shù)增加20?23個，有效促進了棉花的生長。
[0006]本發(fā)明與其他方法相比，有益技術效果是:
(1)本發(fā)明制備的復合微生物菌劑含菌數(shù)量高，每克的復合微生物菌劑中含有活菌數(shù)達到2.5億個以上，提高了復合微生物菌劑的質量；
(2)本發(fā)明制備步驟簡單，所需成本低。
【具體實施方式】
[0007]首先稱取300?400g花生殼，將其表面清洗干凈后放入烘箱中干燥，將干燥的的花生殼按固液比1:5加入無水乙醇中浸泡30?40min，浸泡后取出放入質量分數(shù)15%鹽酸溶液中浸泡I?2h后再放入質量分數(shù)15%氫氧化鈉溶液中浸泡3?5h，浸泡后取出，用去離子水沖洗后放入烘箱中烘干，將烘干后的花生殼粉碎、過篩，得120?150目處理后的花生殼粉末，備用;再回收2?3kg廚房里剩菜、剩飯，過濾將油水和濾渣進行分離，收集上層油水，再把剩下的濾渣放入塑料桶，向桶中加入500?600g草炭，攪拌混合均勾后向桶中加入300?400g斬碎的綠蘿葉渣，再向桶中加入備用的上層油水、15?20g酵母菌、8?1g纖維素酶，人工混合攪拌均勻后發(fā)酵7?10天，發(fā)酵后過濾得濾渣，將濾渣放入太陽下暴曬3?5天，曬干后粉碎、過篩得100?120目粉末;接著將上述制備得到的粉末和步驟備用的花生殼粉末按質量比1:1混合，再將混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，機械攪拌混合50?70min，混合后得菌劑載體，備用;按重量份數(shù)計，分別選取20?30份牛肉膏，15?25份蛋白胨，30?35份瓊脂，15?20份濃度為2.5g/L氯化鈉溶液，0.8?1.0份磷酸氫二鈉，I?3份磷酸二氫鈉和40?50份去離子水，攪拌混合后在110?120 °C下滅菌處理5?1min，滅菌處理得培養(yǎng)基，分別按接種量I?3%枯草芽孢桿菌、2?5%巨大芽孢桿菌和2?4%短小芽孢桿菌接種到培養(yǎng)到培養(yǎng)基中，攪拌混合10?15min;最后將上述攪拌后的混合物放入發(fā)酵罐中，在28?35°C和轉速為120?150r/min轉速下發(fā)酵5?7天，發(fā)酵結束后過濾得過濾液，將備用的菌劑載體放入過濾液中浸泡，浸泡5?10天后過濾，將濾渣自然風干即可得到復合微生物菌劑。
[0008]實例I
首先稱取400g花生殼，將其表面清洗干凈后放入烘箱中干燥，將干燥的的花生殼按固液比I: 5加入無水乙醇中浸泡40min，浸泡后取出放入質量分數(shù)15%鹽酸溶液中浸泡2h后再放入質量分數(shù)15%氫氧化鈉溶液中浸泡5h，浸泡后取出，用去離子水沖洗后放入烘箱中烘干，將烘干后的花生殼粉碎、過篩，得150目處理后的花生殼粉末，備用;再回收3kg廚房里剩菜、剩飯，過濾將油水和濾渣進行分離，收集上層油水，再把剩下的濾渣放入塑料桶，向桶中加入600g草炭，攪拌混合均勻后向桶中加入400g斬碎的綠蘿葉渣，再向桶中加入備用的上層油水、20g酵母菌、1g纖維素酶，人工混合攪拌均勻后發(fā)酵10天，發(fā)酵后過濾得濾渣，將濾渣放入太陽下暴曬5天，曬干后粉碎、過篩得120目粉末;接著將上述制備得到的粉末和步驟備用的花生殼粉末按質量比1:1混合，再將混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，機械攪拌混合70min，混合后得菌劑載體，備用；按重量份數(shù)計，分別選取30份牛肉膏，25份蛋白胨，35份瓊脂，20份濃度為2.5g/L氯化鈉溶液，1.0份磷酸氫二鈉，3份磷酸二氫鈉和50份去離子水，攪拌混合后在120 °C下滅菌處理1min，滅菌處理得培養(yǎng)基，分別按接種量3%枯草芽孢桿菌、5%巨大芽孢桿菌和4%短小芽孢桿菌接種到培養(yǎng)到培養(yǎng)基中，攪拌混合15min;最后將上述攪拌后的混合物放入發(fā)酵罐中，在35°C和轉速為150r/min轉速下發(fā)酵7天，發(fā)酵結束后過濾得過濾液，將備用的菌劑載體放入過濾液中浸泡，浸泡10天后過濾，將濾渣自然風干即可得到復合微生物菌劑。
[0009]將本發(fā)明制備的復合微生物菌劑用于棉花種植，在其秧苗期，在秧苗根際處撒上上述制備的復合微生物菌劑，撒入的量為1kg/畝，待其自然成長25天后，可發(fā)現(xiàn)，與施用普通的微生物菌劑相比，株高增加30cm，每株鈴數(shù)增加23個，有效促進了棉花的生長。
[0010]實例2
首先稱取300g花生殼，將其表面清洗干凈后放入烘箱中干燥，將干燥的的花生殼按固液比I: 5加入無水乙醇中浸泡30min，浸泡后取出放入質量分數(shù)15%鹽酸溶液中浸泡Ih后再放入質量分數(shù)15%氫氧化鈉溶液中浸泡3h，浸泡后取出，用去離子水沖洗后放入烘箱中烘干，將烘干后的花生殼粉碎、過篩，得120目處理后的花生殼粉末，備用;再回收2kg廚房里剩菜、剩飯，過濾將油水和濾渣進行分離，收集上層油水，再把剩下的濾渣放入塑料桶，向桶中加入500g草炭，攪拌混合均勻后向桶中加入300g斬碎的綠蘿葉渣，再向桶中加入備用的上層油水、15g酵母菌、Sg纖維素酶，人工混合攪拌均勻后發(fā)酵7天，發(fā)酵后過濾得濾渣，將濾渣放入太陽下暴曬3天，曬干后粉碎、過篩得100目粉末;接著將上述制備得到的粉末和步驟備用的花生殼粉末按質量比1:1混合，再將混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，機械攪拌混合50min，混合后得菌劑載體，備用;按重量份數(shù)計，分別選取20份牛肉膏，15份蛋白胨，30份瓊脂，15份濃度為2.5g/L氯化鈉溶液，0.8份磷酸氫二鈉，I份磷酸二氫鈉和40份去離子水，攪拌混合后在110°C下滅菌處理5min，滅菌處理得培養(yǎng)基，分別按接種量1%枯草芽孢桿菌、2%巨大芽孢桿菌和2%短小芽孢桿菌接種到培養(yǎng)到培養(yǎng)基中，攪拌混合1min;最后將上述攪拌后的混合物放入發(fā)酵罐中，在28°C和轉速為120r/min轉速下發(fā)酵5天，發(fā)酵結束后過濾得過濾液，將備用的菌劑載體放入過濾液中浸泡，浸泡5天后過濾，將濾渣自然風干即可得到復合微生物菌劑。
[0011]將本發(fā)明制備的復合微生物菌劑用于棉花種植，在其秧苗期，在秧苗根際處撒上上述制備的復合微生物菌劑，撒入的量為8kg/畝，待其自然成長17天后，可發(fā)現(xiàn)，與施用普通的微生物菌劑相比，株高增加25cm，每株鈴數(shù)增加20個，有效促進了棉花的生長。
[0012]實例3
首先稱取350g花生殼，將其表面清洗干凈后放入烘箱中干燥，將干燥的的花生殼按固液比I: 5加入無水乙醇中浸泡35min，浸泡后取出放入質量分數(shù)15%鹽酸溶液中浸泡Ih后再放入質量分數(shù)15%氫氧化鈉溶液中浸泡4h，浸泡后取出，用去離子水沖洗后放入烘箱中烘干，將烘干后的花生殼粉碎、過篩，得130目處理后的花生殼粉末，備用;再回收2kg廚房里剩菜、剩飯，過濾將油水和濾渣進行分離，收集上層油水，再把剩下的濾渣放入塑料桶，向桶中加入550g草炭，攪拌混合均勾后向桶中加入350g斬碎的綠蘿葉渣，再向桶中加入備用的上層油水、17g酵母菌、9g纖維素酶，人工混合攪拌均勻后發(fā)酵8天，發(fā)酵后過濾得濾渣，將濾渣放入太陽下暴曬4天，曬干后粉碎、過篩得110目粉末;接著將上述制備得到的粉末和步驟備用的花生殼粉末按質量比1:1混合，再將混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，機械攪拌混合60min，混合后得菌劑載體，備用;按重量份數(shù)計，分別選取25份牛肉膏，20份蛋白胨，32份瓊脂，17份濃度為2.5g/L氯化鈉溶液，0.9份磷酸氫二鈉，2份磷酸二氫鈉和45份去離子水，攪拌混合后在120°C下滅菌處理1min，滅菌處理得培養(yǎng)基，分別按接種量3%枯草芽孢桿菌、5%巨大芽孢桿菌和3%短小芽孢桿菌接種到培養(yǎng)到培養(yǎng)基中，攪拌混合12min;最后將上述攪拌后的混合物放入發(fā)酵罐中，在30°C和轉速為130r/min轉速下發(fā)酵6天，發(fā)酵結束后過濾得過濾液，將備用的菌劑載體放入過濾液中浸泡，浸泡7天后過濾，將濾渣自然風干即可得到復合微生物菌劑。
[0013]將本發(fā)明制備的復合微生物菌劑用于棉花種植，在其秧苗期，在秧苗根際處撒上上述制備的復合微生物菌劑，撒入的量為9kg/畝，待其自然成長20天后，可發(fā)現(xiàn)，與施用普通的微生物菌劑相比，株高增加27cm，每株鈴數(shù)增加22個，有效促進了棉花的生長。
【主權項】
1.一種復合微生物菌劑的制備方法，其特征在于具體制備步驟為: (1)稱取300?400g花生殼，將其表面清洗干凈后放入烘箱中干燥，將干燥的的花生殼按固液比I: 5加入無水乙醇中浸泡30?40min，浸泡后取出，放入質量分數(shù)15%鹽酸溶液中浸泡I?2h后再放入質量分數(shù)15%氫氧化鈉溶液中浸泡3?5h，浸泡后取出，用去離子水沖洗后放入烘箱中烘干，將烘干后的花生殼粉碎、過篩，得120?150目處理后的花生殼粉末，備用； (2)回收2?3kg廚房里剩菜、剩飯，過濾將油水和濾渣進行分離，收集上層油水備用，再把剩下的濾渣放入塑料桶，向桶中加入500?600g草炭，攪拌混合均勾后向桶中加入300?400g斬碎的綠蘿葉渣，再向桶中加入備用的上層油水、15?20g酵母菌、8?1g纖維素酶，人工混合攪拌均勻后發(fā)酵7?10天，發(fā)酵后過濾得濾渣，將濾渣放入太陽下暴曬3?5天，曬干后粉碎、過篩得100?120目粉末； (3)將上述制備得到的粉末和步驟(I)備用的花生殼粉末按質量比1:1混合， 再將混合后的粉末和菜籽油按固液比2:1混合，機械攪拌混合50?70min，混合后得菌劑載體，備用； (4)按重量份數(shù)計，分別選取20?30份牛肉膏，15?25份蛋白胨，30?35份瓊脂，15?20份濃度為2.5g/L氯化鈉溶液，0.8?1.0份磷酸氫二鈉，I?3份磷酸二氫鈉和40?50份去離子水，攪拌混合后在110?120°C下滅菌處理5?1min，滅菌處理得培養(yǎng)基，分別按接種量I?3%枯草芽孢桿菌、2?5%巨大芽孢桿菌和2?4%短小芽孢桿菌接種到培養(yǎng)到培養(yǎng)基中，攪摔混合10?15min; (5)將上述攪拌后的混合物放入發(fā)酵罐中，在28?35°C和轉速為120?150r/min轉速下發(fā)酵5?7天，發(fā)酵結束后過濾得過濾液，將步驟(3)備用的菌劑載體放入過濾液中浸泡，浸泡5?10天后過濾，將濾渣自然風干即可得到復合微生物菌劑。
【文檔編號】C12N1/20GK105907685SQ201610469778
【公開日】2016年8月31日
【申請日】2016年6月26日
【發(fā)明人】陳毅忠, 薛培龍, 王統(tǒng)軍
【申請人】陳毅忠