反義寡核苷酸作為TGF?R信號傳導(dǎo)的抑制劑的制作方法

文檔序號：11632944閱讀：758來源：國知局

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說明書

本發(fā)明涉及反義寡核苷酸，它們作為tgf-r信號傳導(dǎo)的抑制劑的用途，含有此類反義寡核苷酸的藥物組合物以及用于預(yù)防和治療神經(jīng)系統(tǒng)、神經(jīng)變性和過度增殖性包括腫瘤疾病的用途。

tgf-β以三種已知亞型(tgf-β1，tgf-β2和tgf-β3)存在于人中。這些在神經(jīng)變性疾病如als和一些人類癌癥中上調(diào)，并且已經(jīng)證明了該生長因子在神經(jīng)變性疾病、急性創(chuàng)傷和神經(jīng)炎癥和衰老的病理狀況中的表達(dá)增加。轉(zhuǎn)化生長因子-β(tgf-β1)的同種型也被認(rèn)為參與先兆子癇的發(fā)病機(jī)制。

活化的tgf-β通過三種不同的受體類型對靶細(xì)胞發(fā)揮作用：i型(tgfri)，也稱為激活素樣激酶(alk；53kda)，ii型(tgfrii；70-100kda)和iii型(tgfriii；200-400kda)。tgf-β受體是單程絲氨酸/蘇氨酸激酶受體。而ii型受體激酶是組成型活性的，i型受體需要被激活。該過程通過將配體結(jié)合到tgfrii來啟動；這觸發(fā)包含配體和i型和ii型受體的復(fù)合物的瞬時形成?？紤]到配體的二聚體組成，受體復(fù)合物最有可能由兩對每種受體類型形成的四聚體結(jié)構(gòu)組成。

tgf-β信號傳導(dǎo)通過其受體和下游通過smad蛋白發(fā)生。通過將tgf-β同種型與特異性tgfri/ii受體對結(jié)合引發(fā)的smad依賴性細(xì)胞信號傳導(dǎo)導(dǎo)致細(xì)胞內(nèi)smad的磷酸化，隨后將活化的smad復(fù)合體轉(zhuǎn)移到細(xì)胞核中以影響特異性靶基因表達(dá)。信號發(fā)散到其它途徑和來自相鄰信號通路的收斂產(chǎn)生高度復(fù)雜的網(wǎng)絡(luò)。取決于環(huán)境和細(xì)胞環(huán)境，tgf-β信號傳導(dǎo)導(dǎo)致多種不同的細(xì)胞應(yīng)答，如腫瘤細(xì)胞中的細(xì)胞增殖、分化、運動和細(xì)胞凋亡。在癌癥中，通過促進(jìn)腫瘤生長、誘導(dǎo)上皮-間質(zhì)轉(zhuǎn)化(emt)、阻止抗腫瘤免疫反應(yīng)、增加腫瘤相關(guān)纖維化、調(diào)節(jié)細(xì)胞外基質(zhì)(ecn)和細(xì)胞遷移、并最終增強(qiáng)血管發(fā)生，tgf-β可直接(稱為tgf-β信號傳導(dǎo)的內(nèi)在作用)或間接(稱為外在作用)影響腫瘤生長。確定tgf-β信號傳導(dǎo)是否具有腫瘤啟動或抑制功能的因子(例如濃度，時間，局部暴露)是主要研究和討論的問題。目前，推測tgf-β信號傳導(dǎo)的腫瘤抑制功能在早期癌癥階段中喪失，類似于其它腫瘤抑制因子的隱性功能喪失突變。因此，存在幾種用于通過阻斷tgf-β信號傳導(dǎo)途徑治療潛在癌癥的藥理學(xué)方法，如galunisertib和tew-7197的研究，其都是tgfri的小分子抑制劑并正在進(jìn)行臨床研究，以及抗tgfrii抗體的ly3022859。

由轉(zhuǎn)化生長因子(tgf-β)家族的蛋白提供的信號代表在生理條件下控制神經(jīng)干細(xì)胞的系統(tǒng)，但類似于其它細(xì)胞類型，神經(jīng)干細(xì)胞在轉(zhuǎn)化至癌癥干細(xì)胞后從該控制釋放。tgf-β是參與腦的各種生理和病理生理過程的多功能細(xì)胞因子。在損傷或缺氧后和在神經(jīng)變性過程中，當(dāng)其調(diào)節(jié)和抑制炎癥反應(yīng)時其在成人腦中被誘導(dǎo)。損傷后，雖然tgf-β通常是神經(jīng)保護(hù)的，但其通過抑制神經(jīng)干細(xì)胞增殖并誘導(dǎo)瘢痕形成的纖維化/神經(jīng)膠質(zhì)增生來限制腦的自我修復(fù)。類似于其對神經(jīng)干細(xì)胞的效應(yīng)，tgf-β顯示出對大多數(shù)細(xì)胞類型的抗增殖控制；然而，矛盾的是，許多腫瘤逃避tgf-β控制。此外，這些腫瘤發(fā)展出將tgf-β的抗增殖作用改變?yōu)橹掳┬盘柕臋C(jī)制，主要是通過編排大量tgf-β介導(dǎo)的對基質(zhì)、遷移和侵襲、血管發(fā)生和最重要地免疫逃逸機(jī)制的效應(yīng)。因此，tgf-β參與腫瘤進(jìn)展(參見圖3)。

因此，tgf受體ii(轉(zhuǎn)化生長因子，β受體ii；同義使用的符號：tgf-βii型受體，tgfbr2；aat3；faa3；lds1b；lds2；lds2b；mfs2；riic；taad2；tgfr-2；tgfβ-rii，tgf-rii，tgf-rii)(特別是其抑制)被驗證為治療神經(jīng)變性疾病如als和過度增殖性疾病如癌癥和纖維化疾病的靶標(biāo)。

因此，本申請的目的是提供能夠抑制tgf受體ii(tgf-rii)表達(dá)并因此減少tgf受體ii(tgf-rii)的量并減少tgf-β下游信號傳導(dǎo)的活性的藥學(xué)活性化合物。

本發(fā)明的目的通過獨立權(quán)利要求的教導(dǎo)內(nèi)容來解決。本發(fā)明的進(jìn)一步有利的特征、方面和細(xì)節(jié)根據(jù)本申請的從屬權(quán)利要求、說明書、附圖和實施例是明顯的。

令人驚訝的是，在數(shù)千種候選物質(zhì)中，例如蛋白-核苷酸復(fù)合物，sirna，微小rna(mirna)，核酶，適體，cpg寡聚物，dna-酶，核糖開關(guān)，脂質(zhì)，肽，小分子，筏或細(xì)胞膜穴樣內(nèi)陷的修飾劑，高爾基體的修飾劑，抗體及其衍生物，特別是嵌合體，fab片段和fc片段，含有l(wèi)na(lockednucleicacids)的反義寡核苷酸是用于本文公開的用途的最有希望的候選物。

因此，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或與編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)，并且反義寡核苷酸分別包含能夠與所述序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個核苷酸是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域雜交或與編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)，并且反義寡核苷酸分別包含能夠與所述序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)雜交的序列。

或者，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)，并且反義寡核苷酸分別包含與所述序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)互補的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個核苷酸是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域雜交或與編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)，并且反義寡核苷酸分別包含與序列tggtccattc(seq.idno.4)或序列ccctaaacac(seq.idno.5)或序列actaccaaat(seq.idno.6)或序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)或序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)或序列ttattaatgc(seq.idno.9)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggtccattc(seq.idno.4)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tggtccattc(seq.idno.4)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggtccattc(seq.idno.4)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tggtccattc(seq.idno.4)雜交的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ccctaaacac(seq.idno.5)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ccctaaacac(seq.idno.5)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ccctaaacac(seq.idno.5)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ccctaaacac(seq.idno.5)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ccctaaacac(seq.idno.5)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ccctaaacac(seq.idno.5)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列actaccaaat(seq.idno.6)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列actaccaaat(seq.idno.6)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列actaccaaat(seq.idno.6)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列actaccaaat(seq.idno.6)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列actaccaaat(seq.idno.6)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列actaccaaat(seq.idno.6)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)gacgcgtat(seq.idno.7)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)tctatgacg(seq.idno.8)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ttattaatgc(seq.idno.9)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ttattaatgc(seq.idno.9)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ttattaatgc(seq.idno.9)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ttattaatgc(seq.idno.9)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的開放閱讀框的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ttattaatgc(seq.idno.9)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ttattaatgc(seq.idno.9)互補的序列。

本發(fā)明的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選包含4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選本發(fā)明的反義寡核苷酸含有3至10個lna單元，并且特別地在反義寡核苷酸的5'末端含有1至5個lna單元，和在反義寡核苷酸的3'末端含有1至5個lna單元，并且在lna單元之間含有至少7個，更優(yōu)選至少8個dna單元。

此外，反義寡核苷酸可以含有常見的核堿基，例如腺嘌呤，鳥嘌呤，胞嘧啶，胸腺嘧啶和尿嘧啶以及其常見的衍生物。本發(fā)明的反義寡核苷酸還可以含有修飾的核苷酸間橋例如硫代磷酸酯或二硫代磷酸酯來代替磷酸酯橋。這樣的修飾可以僅存在于反義寡核苷酸的lna區(qū)段中，或僅存在于反義寡核苷酸的非lna區(qū)段中。

因此，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且12至24個核苷酸中的至少3個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),ctggtccattca(seq.idno.298),tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),tccctaaacact(seq.idno.301),cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),cactaccaaata(seq.idno.304),tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),tggacgcgtatc(seq.idno.307),ggtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),ggtctatgacga(seq.idno.310),tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)，并且反義寡核苷酸分別包含能夠與所述序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),ctggtccattca(seq.idno.298),tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),tccctaaacact(seq.idno.301),cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),cactaccaaata(seq.idno.304),tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),tggacgcgtatc(seq.idno.307),ggtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),ggtctatgacga(seq.idno.310),tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)雜交的序列。

或者，本發(fā)明涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且12至24個核苷酸中的至少3個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),ctggtccattca(seq.idno.298),tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),tccctaaacact(seq.idno.301),cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),cactaccaaata(seq.idno.304),tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),tggacgcgtatc(seq.idno.307),ggtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),ggtctatgacga(seq.idno.310),tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)，并且反義寡核苷酸分別包含能夠與所述序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),ctggtccattca(seq.idno.298),tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),tccctaaacact(seq.idno.301),cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),cactaccaaata(seq.idno.304),tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),tggacgcgtatc(seq.idno.307),ggtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),ggtctatgacga(seq.idno.310),tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),或ctggtccattca(seq.idno.298)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),或ctggtccattca(seq.idno.298)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),或ctggtccattca(seq.idno.298)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ctggtccattc(seq.idno.296),tggtccattca(seq.idno.297),或ctggtccattca(seq.idno.298)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),或tccctaaacact(seq.idno.301)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),或tccctaaacact(seq.idno.301)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),或tccctaaacact(seq.idno.301)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tccctaaacac(seq.idno.299),ccctaaacact(seq.idno.300),或tccctaaacact(seq.idno.301)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),或cactaccaaata(seq.idno.304)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),或cactaccaaata(seq.idno.304)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),或cactaccaaata(seq.idno.304)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列cactaccaaat(seq.idno.302),actaccaaata(seq.idno.303),或cactaccaaata(seq.idno.304)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),或tggacgcgtatc(seq.idno.307)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),或tggacgcgtatc(seq.idno.307)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),或tggacgcgtatc(seq.idno.307)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tggacgcgtat(seq.idno.305),ggacgcgtatc(seq.idno.306),或tggacgcgtatc(seq.idno.307)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)gtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),或ggtctatgacga(seq.idno.310)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)gtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),或ggtctatgacga(seq.idno.310)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)gtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),或ggtctatgacga(seq.idno.310)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)gtctatgacg(seq.idno.308),gtctatgacga(seq.idno.309),或ggtctatgacga(seq.idno.310)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且2至24個核苷酸中的至少三個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列tttattaatgc(seq.idno.311),ttattaatgcc(seq.idno.312),或tttattaatgcc(seq.idno.313)互補的序列。

本發(fā)明的反義寡核苷酸優(yōu)選包含3至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，還更優(yōu)選包含4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，和最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個或更多個，更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318),ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),ctccctaaacacta(seq.idno.323),acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),acactaccaaatag(seq.idno.328),gtggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),gtggacgcgtatcg(seq.idno.333),cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),cggtctatgacgag(seq.idno.338),ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)，并且反義寡核苷酸分別包含能夠與所述序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318),ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),ctccctaaacacta(seq.idno.323),acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),acactaccaaatag(seq.idno.328),gtggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),gtggacgcgtatcg(seq.idno.333),cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),cggtctatgacgag(seq.idno.338),ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)雜交的序列。

或者，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318),ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),ctccctaaacacta(seq.idno.323),acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),acactaccaaatag(seq.idno.328),gtggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),gtggacgcgtatcg(seq.idno.333),cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),cggtctatgacgag(seq.idno.338),ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)，并且反義寡核苷酸分別包含能夠與所述序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318),ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),ctccctaaacacta(seq.idno.323),acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),acactaccaaatag(seq.idno.328),gtggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),gtggacgcgtatcg(seq.idno.333),cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),cggtctatgacgag(seq.idno.338),ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列actggtccattc(seq.idno.314),tggtccattcat(seq.idno.315),ctggtccattcat(seq.idno.316),actggtccattca(seq.idno.317),actggtccattcat(seq.idno.318)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),或ctccctaaacacta(seq.idno.323)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),或ctccctaaacacta(seq.idno.323)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),或ctccctaaacacta(seq.idno.323)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ctccctaaacac(seq.idno.319),ccctaaacacta(seq.idno.320),tccctaaacacta(seq.idno.321),ctccctaaacact(seq.idno.322),或ctccctaaacacta(seq.idno.323)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),或acactaccaaatag(seq.idno.328)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),或acactaccaaatag(seq.idno.328)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),或acactaccaaatag(seq.idno.328)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列acactaccaaat(seq.idno.324),actaccaaatag(seq.idno.325),cactaccaaatag(seq.idno.326),acactaccaaata(seq.idno.327),或acactaccaaatag(seq.idno.328)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)tggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),或gtggacgcgtatcg(seq.idno.333)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)tggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),或gtggacgcgtatcg(seq.idno.333)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列g(shù)tggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),或gtggacgcgtatcg(seq.idno.333)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列g(shù)tggacgcgtat(seq.idno.329),ggacgcgtatcg(seq.idno.330),tggacgcgtatcg(seq.idno.331),gtggacgcgtatc(seq.idno.332),或gtggacgcgtatcg(seq.idno.333)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),或cggtctatgacgag(seq.idno.338)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),或cggtctatgacgag(seq.idno.338)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),或cggtctatgacgag(seq.idno.338)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列cggtctatgacg(seq.idno.334),gtctatgacgag(seq.idno.335),ggtctatgacgag(seq.idno.336),cggtctatgacga(seq.idno.337),或cggtctatgacgag(seq.idno.338)互補的序列。

優(yōu)選地，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)雜交的序列。

稍微換一種說法，本發(fā)明還涉及由14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且14至20個更優(yōu)選14至18個核苷酸中的至少4個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域包含序列ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)，并且反義寡核苷酸包含能夠與所述序列ctttattaatgc(seq.idno.339),ttattaatgcct(seq.idno.340),tttattaatgcct(seq.idno.341),ctttattaatgcc(seq.idno.342),或ctttattaatgcct(seq.idno.343)互補的序列。

本發(fā)明的反義寡核苷酸優(yōu)選包含4至11個lna單元，更優(yōu)選4至10個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列表示：5’-n¹-gtcataga-n²-3’(seq.idno.12)或5’-n³-acgcgtcc-n⁴-3’(seq.idno.98)或5’-n¹¹-tgtttagg-n¹²-3’(seq.idno.10)或5’-n⁵-tttggtag-n⁶-3’(seq.idno.11)或5’-n⁷-aatggacc-n⁸-3’(seq.idno.100)或5’-n⁹-attaataa-n¹⁰-3’(seq.idno.101),其中

n¹表示:catggcagaccccgctgctc-,atggcagaccccgctgctc-,tggcagaccccgctgctc-,ggcagaccccgctgctc-,gcagaccccgctgctc-,cagaccccgctgctc-,agaccccgctgctc-,gaccccgctgctc-,accccgctgctc-,ccccgctgctc-,cccgctgctc-,ccgctgctc-,cgctgctc-,gctgctc-,ctgctc-,tgctc-,gctc-,ctc-,tc-,或c-；

n²表示:-c,-cc,-ccg,-ccga,-ccgag,-ccgagc,-ccgagcc,-ccgagccc,-ccgagcccc,-ccgagccccc,-ccgagccccca,-ccgagcccccag,-ccgagcccccagc,-ccgagcccccagcg,-ccgagcccccagcgc,-ccgagcccccagcgca,-ccgagcccccagcgcag,-ccgagcccccagcgcagc,-ccgagcccccagcgcagcg,或–ccgagcccccagcgcagcgg；

n³表示:ggtgggatcgtgctggcgat-,gtgggatcgtgctggcgat-,tgggatcgtgctggcgat-,gggatcgtgctggcgat-,ggatcgtgctggcgat-,gatcgtgctggcgat-,atcgtgctggcgat-,tcgtgctggcgat-,cgtgctggcgat-,gtgctggcgat-,tgctggcgat-,gctggcgat-,ctggcgat-,tggcgat-,ggcgat-,gcgat-,cgat-,gat-,at-,或t-；

n⁴表示:-acaggacgatgtgcagcggc,-acaggacgatgtgcagcgg,-acaggacgatgtgcagcg,-acaggacgatgtgcagc,-acaggacgatgtgcag,-acaggacgatgtgca,-acaggacgatgtgc,-acaggacgatgtg,-acaggacgatgt,-acaggacgatg,-acaggacgat,-acaggacga,-acaggacg,-acaggac,-acagga,-acagg,-acag,-aca,-ac,或-a；

n⁵表示:gcccagcctgccccagaagagcta-,cccagcctgccccagaagagcta-,ccagcctgccccagaagagcta-,cagcctgccccagaagagcta-,agcctgccccagaagagcta-,gcctgccccagaagagcta-,cctgccccagaagagcta-,ctgccccagaagagcta-,tgccccagaagagcta-,gccccagaagagcta-,ccccagaagagcta-,cccagaagagcta-,ccagaagagcta-,cagaagagcta-,agaagagcta-,gaagagcta-,aagagcta-,agagcta-,gagcta-,agcta-,gcta-,cta-,ta-,或a-；

n⁶表示:-tgtttagggagccgtcttcaggaa,-tgtttagggagccgtcttcagga,-tgtttagggagccgtcttcagg,-tgtttagggagccgtcttcag,-tgtttagggagccgtcttca,-tgtttagggagccgtcttc,-tgtttagggagccgtctt,-tgtttagggagccgtct,-tgtttagggagccgtc,-tgtttagggagccgt,-tgtttagggagccg,-tgtttagggagcc,-tgtttagggagc,-tgtttagggag,-tgtttaggga,-tgtttaggg,-tgtttagg,-tgtttag,-tgttta,-tgttt,-tgtt,-tgt,-tg,或–t；

n⁷表示:tgaatcttgaatatctcatg-,gaatcttgaatatctcatg-,aatcttgaatatctcatg-,atcttgaatatctcatg-,tcttgaatatctcatg-,cttgaatatctcatg-,ttgaatatctcatg-,tgaatatctcatg-,gaatatctcatg-,aatatctcatg-,atatctcatg-,tatctcatg-,atctcatg-,tctcatg-,ctcatg-,tcatg-,catg-,atg-,tg-,或g-；

n⁸表示:-agtattctagaaactcacca,-agtattctagaaactcacc,-agtattctagaaactcac,-agtattctagaaactca,-agtattctagaaactc,-agtattctagaaact,-agtattctagaaac,-agtattctagaaa,-agtattctagaa,-agtattctaga,-agtattctag,-agtattcta,-agtattct,-agtattc,-agtatt,-agtat,-agta,-agt,-ag,或-a；

n⁹表示:attcatatttatatacaggc-,

ttcatatttatatacaggc-,tcatatttatatacaggc-,catatttatatacaggc-,atatttatatacaggc-,tatttatatacaggc-,atttatatacaggc-,tttatatacaggc-,ttatatacaggc-,tatatacaggc-,atatacaggc-,tatacaggc-,atacaggc-,tacaggc-,acaggc-,caggc-,aggc-,ggc-,gc-,或c-；

n¹⁰表示:-agtgcaaatgttattggcta,-agtgcaaatgttattggct,-agtgcaaatgttattggc,-agtgcaaatgttattgg,-agtgcaaatgttattg,-agtgcaaatgttatt,-agtgcaaatgttat,-agtgcaaatgtta,-agtgcaaatgtt,-agtgcaaatgt,-agtgcaaatg,-agtgcaaat,-agtgcaaa,-agtgcaa,-agtgca,-agtgc,-agtg,-agt,-ag,或-a；

n¹¹表示:tgccccagaagagctatttggtag-,gccccagaagagctatttggtag-,ccccagaagagctatttggtag-,cccagaagagctatttggtag-,ccagaagagctatttggtag-,cagaagagctatttggtag-,agaagagctatttggtag-,gaagagctatttggtag-,aagagctatttggtag-,agagctatttggtag-,gagctatttggtag-,agctatttggtag-,gctatttggtag-,ctatttggtag-,tatttggtag-,atttggtag-,tttggtag-,ttggtag-,tggtag-,ggtag-,gtag-,tag-,ag-或g-,

n¹²表示:-gagccgtcttcaggaatcttctcc,-gagccgtcttcaggaatcttctc,-gagccgtcttcaggaatcttct,-gagccgtcttcaggaatcttc,-gagccgtcttcaggaatctt,-gagccgtcttcaggaatct,-gagccgtcttcaggaatc,-gagccgtcttcaggaat,-gagccgtcttcaggaa,-gagccgtcttcagga,-gagccgtcttcagg,-gagccgtcttcag,-gagccgtcttca,-gagccgtcttc,-gagccgtctt,-gagccgtct,-gagccgtc,-gagccgt,-gagccg,-gagcc,-gagc,-gag,-ga,或–g。

因此，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列表示5’-n¹-gtcataga-n²-3’(seq.idno.12)或5’-n³-acgcgtcc-n⁴-3’(seq.idno.98)或5’-n¹¹-tgtttagg-n¹²-3’(seq.idno.10)或5’-n⁵-tttggtag-n⁶-3’(seq.idno.11)或5’-n⁷-aatggacc-n⁸-3’(seq.idno.100)或5’-n⁹-attaataa-n¹⁰-3’(seq.idno.101)，其中殘基n¹至n¹²具有如本文所公開的特別限定的含義。

此外，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列5’-n¹-gtcataga-n²-3’(seq.idno.12)表示，其中

式s1(seq.idno.12)的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個或更多個更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選本發(fā)明的反義寡核苷酸被設(shè)計為含有2至10個lna單元的gapmer，并且特別地在反義寡核苷酸的5'末端含有1至5個lna單元，和在反義寡核苷酸的3'末端含有1至5個lna單元，并且在lna單元之間含有至少7個，更優(yōu)選至少8個dna單元。更優(yōu)選地，反義寡核苷酸在5'末端包含2至4個lna單元，在3'末端包含2至4個lna單元，還更優(yōu)選在5'末端包含3至4個lna單元和在3'末端包含3至4個lna單元，并且優(yōu)選含有至少7個非-lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。

此外，反義寡核苷酸可以含有常見的核堿基，例如腺嘌呤，鳥嘌呤，胞嘧啶，胸腺嘧啶和尿嘧啶，以及它們的常見衍生物，例如5-甲基胞嘧啶或2-氨基腺嘌呤。本發(fā)明的反義寡核苷酸還可以含有修飾的核苷酸間橋，例如硫代磷酸酯或二硫代磷酸酯來代替磷酸酯橋。這樣的修飾可以僅存在于反義寡核苷酸的lna區(qū)段中，或僅存在于反義寡核苷酸的非lna區(qū)段中。lna單元特別是本文公開的殘基b¹至b⁹是優(yōu)選的。

因此，優(yōu)選的是式(s1)的反義寡核苷酸：

5’-n¹-gtcataga-n²-3’(seq.idno.12)

其中

和

n²選自:-c,-cc,-ccg,-ccga,-ccgag,-ccgagc,-ccgagcc,-ccgagccc,-ccgagcccc,-ccgagccccc,-ccgagccccca,-ccgagcccccag,-ccgagcccccagc,-ccgagcccccagcg,-ccgagcccccagcgc,-ccgagcccccagcgca,-ccgagcccccagcgcag,-ccgagcccccagcgcagc,-ccgagcccccagcgcagcg,或-ccgagcccccagcgcagcgg。

優(yōu)選地，通式(s1)的反義寡核苷酸具有10至28個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s1)的反義寡核苷酸具有11-24個核苷酸，并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s1)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

還優(yōu)選的是式(s1)的反義寡核苷酸：

5’-n¹-gtcataga-n²-3’

其中

n¹表示:tggcagaccccgctgctc-,ggcagaccccgctgctc-,gcagaccccgctgctc-,cagaccccgctgctc-,agaccccgctgctc-,gaccccgctgctc-,accccgctgctc-,ccccgctgctc-,cccgctgctc-,ccgctgctc-,cgctgctc-,gctgctc-,ctgctc-,tgctc-,gctc-,ctc-,tc-,或c-；

和

還優(yōu)選的是式(s1)的反義寡核苷酸：

5’-n¹-gtcataga-n²-3’

其中

n¹表示:gaccccgctgctc-,accccgctgctc-,ccccgctgctc-,cccgctgctc-,ccgctgctc-,cgctgctc-,gctgctc-,ctgctc-,tgctc-,gctc-,ctc-,tc-,或c-；

和

n²選自:-c,-cc,-ccg,-ccga,-ccgag,-ccgagc,-ccgagcc,-ccgagccc,-ccgagcccc,-ccgagccccc,-ccgagccccca,-ccgagcccccag,或-ccgagcccccagc。

還優(yōu)選的是式(s1)的反義寡核苷酸：

5’-n¹-gtcataga-n²-3’

其中

n¹表示:cgctgctc-,gctgctc-,ctgctc-,tgctc-,gctc-,ctc-,tc-,或c-；

和

n²選自:-c,-cc,-ccg,-ccga,-ccgag,-ccgagc,-ccgagcc,或-ccgagccc。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且12至24個核苷酸中的至少3個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列5’-n^1a-cgtcatagac-n^2a-3’(seq.idno.69)表示，其中

n^1a表示:catggcagaccccgctgct-,atggcagaccccgctgct-,tggcagaccccgctgct-,ggcagaccccgctgct-,gcagaccccgctgct-,cagaccccgctgct-,agaccccgctgct-,gaccccgctgct-,accccgctgct-,ccccgctgct-,cccgctgct-,ccgctgct-,cgctgct-,gctgct-,ctgct-,tgct-,gct-,ct-,或t-；

n^2a表示:-c,-cg,-cga,-cgag,-cgagc,-cgagcc,-cgagccc,-cgagcccc,-cgagccccc,-cgagccccca,-cgagcccccag,-cgagcccccagc,-cgagcccccagcg,-cgagcccccagcgc,-cgagcccccagcgca,-cgagcccccagcgcag,-cgagcccccagcgcagc,-cgagcccccagcgcagcg,或–cgagcccccagcgcagcgg。

優(yōu)選n^1a表示:tggcagaccccgctgct-,ggcagaccccgctgct-,gcagaccccgctgct-,cagaccccgctgct-,agaccccgctgct-,gaccccgctgct-,accccgctgct-,ccccgctgct-,cccgctgct-,ccgctgct-,cgctgct-,gctgct-,ctgct-,tgct-,gct-,ct-,或t-；

和

更優(yōu)選n^1a表示:gaccccgctgct-,accccgctgct-,ccccgctgct-,cccgctgct-,ccgctgct-,cgctgct-,gctgct-,ctgct-,tgct-,gct-,ct-,或t-；和

n^2a表示:-c,-cg,-cga,-cgag,-cgagc,-cgagcc,-cgagccc,-cgagcccc,-cgagccccc,-cgagccccca,-cgagcccccag,或-cgagcccccagc。

更優(yōu)選n^1a表示:cgctgct-,gctgct-,ctgct-,tgct-,gct-,ct-,或t-；和

n^2a表示:-c,-cg,-cga,-cgag,-cgagc,-cgagcc,或-cgagccc。

優(yōu)選地，通式(s1a/seq.idno.69)的反義寡核苷酸具有12至24個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選lna”章節(jié)中所公開的lna核苷酸(lna單元)是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些)是合適的。

更優(yōu)選通式(s1a)的反義寡核苷酸具有12至22個核苷酸并且在3'末端具有至少2個lna核苷酸和在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s1a)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，以及在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

式s2(seq.idno.98)的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個，更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選的是式(s2)的反義寡核苷酸：

5’-n³-acgcgtcc-n⁴-3’(seq.idno.98)

其中

和

優(yōu)選地，通式(s2)的反義寡核苷酸具有10至28個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s2)的反義寡核苷酸具有11-24個核苷酸，并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s2)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

還優(yōu)選的是式(s2)的反義寡核苷酸：

5’-n³-acgcgtcc-n⁴-3’

其中

n³表示:tgggatcgtgctggcgat-,gggatcgtgctggcgat-,ggatcgtgctggcgat-,gatcgtgctggcgat-,atcgtgctggcgat-,tcgtgctggcgat-,cgtgctggcgat-,gtgctggcgat-,tgctggcgat-,gctggcgat-,ctggcgat-,tggcgat-,ggcgat-,gcgat-,cgat-,gat-,at-,或t-；

和

n⁴表示:-acaggacgatgtgcagcg,-acaggacgatgtgcagc,-acaggacgatgtgcag,-acaggacgatgtgca,-acaggacgatgtgc,-acaggacgatgtg,-acaggacgatgt,-acaggacgatg,-acaggacgat,-acaggacga,-acaggacg,-acaggac,-acagga,-acagg,-acag,-aca,-ac,或–a。

還優(yōu)選的是式(s2)的反義寡核苷酸：

5’-n³-acgcgtcc-n⁴-3’

其中

n³表示:tcgtgctggcgat-,cgtgctggcgat-,gtgctggcgat-,tgctggcgat-,gctggcgat-,ctggcgat-,tggcgat-,ggcgat-,gcgat-,cgat-,gat-,at-,或t-；

和

n⁴表示:-acaggacgatgtg,-acaggacgatgt,-acaggacgatg,-acaggacgat,-acaggacga,-acaggacg,-acaggac,-acagga,-acagg,-acag,-aca,-ac,或–a。

還優(yōu)選的是式(s2)的反義寡核苷酸：

5’-n³-acgcgtcc-n⁴-3’

其中

n³表示:ctggcgat-,tggcgat-,ggcgat-,gcgat-,cgat-,gat-,at-,或t-；

和

n⁴表示:-acaggacg,-acaggac,-acagga,-acagg,-acag,-aca,-ac,或–a。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且12至24個核苷酸中的至少3個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列5’-n^3a-tacgcgtcca-n^4a-3’(seq.idno.70)表示，其中

n^3a表示:ggtgggatcgtgctggcga-,gtgggatcgtgctggcga-,tgggatcgtgctggcga-,gggatcgtgctggcga-,ggatcgtgctggcga-,gatcgtgctggcga-,atcgtgctggcga-,tcgtgctggcga-,cgtgctggcga-,gtgctggcga-,tgctggcga-,gctggcga-,ctggcga-,tggcga-,ggcga-,gcga-,cga-,ga-,或a-；

n^4a表示:-caggacgatgtgcagcggc,-caggacgatgtgcagcgg,-caggacgatgtgcagcg,-caggacgatgtgcagc,-caggacgatgtgcag,-caggacgatgtgca,-caggacgatgtgc,-caggacgatgtg,-caggacgatgt,-caggacgatg,-caggacgat,-caggacga,-caggacg,-caggac,-cagga,-cagg,-cag,-ca,或-c。

優(yōu)選n^3a表示:tgggatcgtgctggcga-,gggatcgtgctggcga-,ggatcgtgctggcga-,gatcgtgctggcga-,atcgtgctggcga-,tcgtgctggcga-,cgtgctggcga-,gtgctggcga-,tgctggcga-,gctggcga-,ctggcga-,tggcga-,ggcga-,gcga-,cga-,ga-,或a-；

和

n^4a表示:-caggacgatgtgcagcg,-caggacgatgtgcagc,-caggacgatgtgcag,-caggacgatgtgca,-caggacgatgtgc,-caggacgatgtg,-caggacgatgt,-caggacgatg,-caggacgat,-caggacga,-caggacg,-caggac,-cagga,-cagg,-cag,-ca,或-c。

更優(yōu)選n^3a表示:tcgtgctggcga-,cgtgctggcga-,gtgctggcga-,tgctggcga-,gctggcga-,ctggcga-,tggcga-,ggcga-,gcga-,cga-,ga-,或a-；和

n^4a表示:-caggacgatgtg,-caggacgatgt,-caggacgatg,-caggacgat,-caggacga,-caggacg,-caggac,-cagga,-cagg,-cag,-ca,或-c。

更優(yōu)選n^3a表示:ctggcga-,tggcga-,ggcga-,gcga-,cga-,ga-,或a-；和

n^4a表示:-caggacg,-caggac,-cagga,-cagg,-cag,-ca,或-c。

優(yōu)選地，通式(s2a/seq.idno.70)的反義寡核苷酸具有2至4個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s2a)的反義寡核苷酸具有12至22個核苷酸并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s2a)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

n¹²表示:-gagccgtcttcaggaatcttctcc,

-gagccgtcttcaggaatcttctc,-gagccgtcttcaggaatcttct,-gagccgtcttcaggaatcttc,-gagccgtcttcaggaatctt,-gagccgtcttcaggaatct,-gagccgtcttcaggaatc,-gagccgtcttcaggaat,-gagccgtcttcaggaa,-gagccgtcttcagga,-gagccgtcttcagg,-gagccgtcttcag,-gagccgtcttca,-gagccgtcttc,-gagccgtctt,-gagccgtct,-gagccgtc,-gagccgt,-gagccg,-gagcc,-gagc,-gag,-ga,或–g。

式s3(seq.idno.10)的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個，更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選的是式(s3)的反義寡核苷酸：

5’-n¹¹-tgtttagg-n¹²-3’(seq.idno.10)

其中

和

n¹²表示:-gagccgtcttcaggaatcttctcc,

優(yōu)選地，通式(s3)的反義寡核苷酸具有10至28個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s3)的反義寡核苷酸具有11-24個核苷酸，并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s3)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

還優(yōu)選的是式(s3)的反義寡核苷酸：

5’-n¹¹-tgtttagg-n¹²-3’

其中

n¹¹表示:agaagagctatttggtag-,gaagagctatttggtag-,aagagctatttggtag-,agagctatttggtag-,gagctatttggtag-,agctatttggtag-,gctatttggtag-,ctatttggtag-,tatttggtag-,atttggtag-,tttggtag-,ttggtag-,tggtag-,ggtag-,gtag-,tag-,ag-或g-；

和

n¹²表示:-gagccgtcttcaggaatc,-gagccgtcttcaggaat,-gagccgtcttcaggaa,-gagccgtcttcagga,-gagccgtcttcagg,-gagccgtcttcag,-gagccgtcttca,-gagccgtcttc,-gagccgtctt,-gagccgtct,-gagccgtc,-gagccgt,-gagccg,-gagcc,-gagc,-gag,-ga,或–g。

還優(yōu)選的是式(s3)的反義寡核苷酸：

5’-n¹¹-tgtttagg-n¹²-3’

其中

n¹¹表示:agctatttggtag-,gctatttggtag-,ctatttggtag-,tatttggtag-,atttggtag-,tttggtag-,ttggtag-,tggtag-,ggtag-,gtag-,tag-,ag-或g-；

和

n¹²表示:-gagccgtcttcag,-gagccgtcttca,-gagccgtcttc,-gagccgtctt,-gagccgtct,-gagccgtc,-gagccgt,-gagccg,-gagcc,-gagc,-gag,-ga,或–g。

還優(yōu)選的是式(s3)的反義寡核苷酸：

5’-n¹¹-tgtttagg-n¹²-3’

其中

n¹¹表示:tttggtag-,ttggtag-,tggtag-,ggtag-,gtag-,tag-,ag-或g-；和

n¹²表示:-gagccgtc,-gagccgt,-gagccg,-gagcc,-gagc,-gag,-ga,或–g。

n^11a表示:tgccccagaagagctatttggta-,gccccagaagagctatttggta-,ccccagaagagctatttggta-,cccagaagagctatttggta-,ccagaagagctatttggta-,cagaagagctatttggta-,agaagagctatttggta-,gaagagctatttggta-,aagagctatttggta-,agagctatttggta-,gagctatttggta-,agctatttggta-,gctatttggta-,ctatttggta-,tatttggta-,atttggta-,tttggta-,ttggta-,tggta-,ggta-,gta-,ta-,或a-,

n^12a表示:-agccgtcttcaggaatcttctcc,-agccgtcttcaggaatcttctc,-agccgtcttcaggaatcttct,-agccgtcttcaggaatcttc,-agccgtcttcaggaatctt,-agccgtcttcaggaatct,-agccgtcttcaggaatc,-agccgtcttcaggaat,-agccgtcttcaggaa,-agccgtcttcagga,-agccgtcttcagg,-agccgtcttcag,-agccgtcttca,-agccgtcttc,-agccgtctt,-agccgtct,-agccgtc,-agccgt,-agccg,-agcc,-agc,-ag,或-a。

優(yōu)選n^11a表示:agaagagctatttggta-,gaagagctatttggta-,aagagctatttggta-,agagctatttggta-,gagctatttggta-,agctatttggta-,gctatttggta-,ctatttggta-,tatttggta-,atttggta-,tttggta-,ttggta-,tggta-,ggta-,gta-,ta-,或a-；和

n^12a表示:-agccgtcttcaggaatc,-agccgtcttcaggaat,-agccgtcttcaggaa,-agccgtcttcagga,-agccgtcttcagg,-agccgtcttcag,-agccgtcttca,-agccgtcttc,-agccgtctt,-agccgtct,-agccgtc,-agccgt,-agccg,-agcc,-agc,-ag,或-a。

更優(yōu)選n^11a表示:agctatttggta-,gctatttggta-,ctatttggta-,tatttggta-,atttggta-,tttggta-,ttggta-,tggta-,ggta-,gta-,ta-,或a-；和

n^12a表示:-agccgtcttcag,-agccgtcttca,-agccgtcttc,-agccgtctt,-agccgtct,-agccgtc,-agccgt,-agccg,-agcc,-agc,-ag,或-a。

更優(yōu)選n^11a表示:tttggta-,ttggta-,tggta-,ggta-,gta-,ta-,或a-；和

n^12a表示:-agccgtc,-agccgt,-agccg,-agcc,-agc,-ag,或-a。

優(yōu)選地，通式(s3a/seq.idno.71)的反義寡核苷酸具有12至24個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選lna”章節(jié)中所公開的lna核苷酸(lna單元)是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些)是合適的。

更優(yōu)選通式(s3a)的反義寡核苷酸具有12至22個核苷酸并且在3'末端具有至少2個lna核苷酸和在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s3a)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，以及在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

式s4(seq.idno.11)的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個，更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選的是式(s4)的反義寡核苷酸：

5’-n⁵-tttggtag-n⁶-3’(seq.idno.11)

其中

和

n⁶選自:-tgtttagggagccgtcttcaggaa,

-tgtttagggagccgtcttcagga,-tgtttagggagccgtcttcagg,-tgtttagggagccgtcttcag,-tgtttagggagccgtcttca,-tgtttagggagccgtcttc,-tgtttagggagccgtctt,-tgtttagggagccgtct,-tgtttagggagccgtc,-tgtttagggagccgt,-tgtttagggagccg,-tgtttagggagcc,-tgtttagggagc,-tgtttagggag,-tgtttaggga,-tgtttaggg,-tgtttagg,-tgtttag,-tgttta,-tgttt,-tgtt,-tgt,-tg,或-t。

優(yōu)選地，通式(s4)的反義寡核苷酸具有10至28個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s4)的反義寡核苷酸具有11-24個核苷酸，并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s4)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

還優(yōu)選的是式(s4)的反義寡核苷酸：

5’-n⁵-tttggtag-n⁶-3’

其中

n⁵表示:cctgccccagaagagcta-,ctgccccagaagagcta-,tgccccagaagagcta-,gccccagaagagcta-,ccccagaagagcta-,cccagaagagcta-,ccagaagagcta-,cagaagagcta-,agaagagcta-,gaagagcta-,aagagcta-,agagcta-,gagcta-,agcta-,gcta-,cta-,ta-,或a-；和

n⁶選自:-tgtttagggagccgtctt,-tgtttagggagccgtct,-tgtttagggagccgtc,-tgtttagggagccgt,-tgtttagggagccg,-tgtttagggagcc,-tgtttagggagc,-tgtttagggag,-tgtttaggga,-tgtttaggg,-tgtttagg,-tgtttag,-tgttta,-tgttt,-tgtt,-tgt,-tg,或-t。

還優(yōu)選的是式(s4)的反義寡核苷酸：

5’-n⁵-tttggtag-n⁶-3’

其中

n⁵表示:cccagaagagcta-,ccagaagagcta-,cagaagagcta-,agaagagcta-,gaagagcta-,aagagcta-,agagcta-,gagcta-,agcta-,gcta-,cta-,ta-,或a-；和

n⁶選自:-tgtttagggagcc,-tgtttagggagc,-tgtttagggag,-tgtttaggga,-tgtttaggg,-tgtttagg,-tgtttag,-tgttta,-tgttt,-tgtt,-tgt,-tg,或-t。

還優(yōu)選的是式(s4)的反義寡核苷酸：

5’-n⁵-tttggtag-n⁶-3’

其中

n⁵表示:aagagcta-,agagcta-,gagcta-,agcta-,gcta-,cta-,ta-,或a-；和

n⁶選自:-tgtttagg,-tgtttag,-tgttta,-tgttt,-tgtt,-tgt,-tg,或-t。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且12至24個核苷酸中的至少3個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列5’-n^5a-atttggtagt-n^6a-3’(seq.idno.72)表示，其中

n^5a表示:gcccagcctgccccagaagagct-,cccagcctgccccagaagagct-,ccagcctgccccagaagagct-,cagcctgccccagaagagct-,agcctgccccagaagagct-,gcctgccccagaagagct-,cctgccccagaagagct-,ctgccccagaagagct-,tgccccagaagagct-,gccccagaagagct-,ccccagaagagct-,cccagaagagct-,ccagaagagct-,cagaagagct-,agaagagct-,gaagagct-,aagagct-,agagct-,gagct-,agct-,gct-,ct-,或t-；和

n^6a表示:-gtttagggagccgtcttcaggaa,-gtttagggagccgtcttcagga,-gtttagggagccgtcttcagg,-gtttagggagccgtcttcag,-gtttagggagccgtcttca,-gtttagggagccgtcttc,-gtttagggagccgtctt,-gtttagggagccgtct,-gtttagggagccgtc,-gtttagggagccgt,-gtttagggagccg,-gtttagggagcc,-gtttagggagc,-gtttagggag,-gtttaggga,-gtttaggg,-gtttagg,-gtttag,-gttta,-gttt,-gtt,-gt,或-g。

優(yōu)選n^5a表示:cctgccccagaagagct-,ctgccccagaagagct-,tgccccagaagagct-,gccccagaagagct-,ccccagaagagct-,cccagaagagct-,ccagaagagct-,cagaagagct-,agaagagct-,gaagagct-,aagagct-,agagct-,gagct-,agct-,gct-,ct-,或t-；和

n^6a表示:-gtttagggagccgtctt,-gtttagggagccgtct,-gtttagggagccgtc,-gtttagggagccgt,-gtttagggagccg,-gtttagggagcc,-gtttagggagc,-gtttagggag,-gtttaggga,-gtttaggg,-gtttagg,-gtttag,-gttta,-gttt,-gtt,-gt,或-g。

更優(yōu)選n^5a表示:cccagaagagct-,ccagaagagct-,cagaagagct-,agaagagct-,gaagagct-,aagagct-,agagct-,gagct-,agct-,gct-,ct-,或t-；和

n^6a表示:-gtttagggagcc,-gtttagggagc,-gtttagggag,-gtttaggga,-gtttaggg,-gtttagg,-gtttag,-gttta,-gttt,-gtt,-gt,或-g。

更優(yōu)選n^5a表示:aagagct-,agagct-,gagct-,agct-,gct-,ct-,或t-；和

n^6a表示:-gtttagg,-gtttag,-gttta,-gttt,-gtt,-gt,或-g。

優(yōu)選地，通式(s4a/seq.idno.72)的反義寡核苷酸具有2至4個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s4a)的反義寡核苷酸具有12至22個核苷酸并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s4a)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

此外，本發(fā)明涉及由10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，10至28個核苷酸中的至少兩個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列5’-n⁷-aatggacc-n⁸-3’(seq.idno.100)表示，其中

式s6(seq.idno.100)的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個，更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選的是式(s6)的反義寡核苷酸：

5’-n⁷-aatggacc-n⁸-3’(seq.idno.100)

其中

和

n⁸選自:-agtattctagaaactcacca,-agtattctagaaactcacc,-agtattctagaaactcac,-agtattctagaaactca,-agtattctagaaactc,-agtattctagaaact,-agtattctagaaac,-agtattctagaaa,-agtattctagaa,-agtattctaga,-agtattctag,-agtattcta,-agtattct,-agtattc,-agtatt,-agtat,-agta,-agt,-ag,或-a。

優(yōu)選地，通式(s6)的反義寡核苷酸具有10至28個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s6)的反義寡核苷酸具有11-24個核苷酸，并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s6)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

還優(yōu)選的是式(s6)的反義寡核苷酸：

5’-n⁷-aatggacc-n⁸-3’

其中

n⁷表示:aatcttgaatatctcatg-,atcttgaatatctcatg-,tcttgaatatctcatg-,cttgaatatctcatg-,ttgaatatctcatg-,tgaatatctcatg-,gaatatctcatg-,aatatctcatg-,atatctcatg-,tatctcatg-,atctcatg-,tctcatg-,ctcatg-,tcatg-,catg-,atg-,tg-,或g-；和

n⁸選自:-agtattctagaaactcac,-agtattctagaaactca,-agtattctagaaactc,-agtattctagaaact,-agtattctagaaac,-agtattctagaaa,-agtattctagaa,-agtattctaga,-agtattctag,-agtattcta,-agtattct,-agtattc,-agtatt,-agtat,-agta,-agt,-ag,或-a。

還優(yōu)選的是式(s6)的反義寡核苷酸：

5’-n⁷-aatggacc-n⁸-3’

其中

n⁷表示:tgaatatctcatg-,gaatatctcatg-,aatatctcatg-,atatctcatg-,tatctcatg-,atctcatg-,tctcatg-,ctcatg-,tcatg-,catg-,atg-,tg-,或g-；和

n⁸選自:-agtattctagaaa,-agtattctagaa,-agtattctaga,-agtattctag,-agtattcta,-agtattct,-agtattc,-agtatt,-agtat,-agta,-agt,-ag,或-a。

還優(yōu)選的是式(s6)的反義寡核苷酸：

5’-n⁷-aatggacc-n⁸-3’

其中

n⁷表示:atctcatg-,tctcatg-,ctcatg-,tcatg-,catg-,atg-,tg-,或g-；和

n⁸選自:-agtattct,-agtattc,-agtatt,-agtat,-agta,-agt,-ag,或-a。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且12至24個核苷酸中的至少3個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列5’-n^7a-gaatggacca-n^8a-3’(seq.idno.73)表示，其中

n^7a表示:tgaatcttgaatatctcat-,gaatcttgaatatctcat-,aatcttgaatatctcat-,atcttgaatatctcat-,tcttgaatatctcat-,cttgaatatctcat-,ttgaatatctcat-,tgaatatctcat-,gaatatctcat-,aatatctcat-,atatctcat-,tatctcat-,atctcat-,tctcat-,ctcat-,tcat-,cat-,at-,或t-；

n^8a表示:-gtattctagaaactcacca,-gtattctagaaactcacc,-gtattctagaaactcac,-gtattctagaaactca,-gtattctagaaactc,-gtattctagaaact,-gtattctagaaac,-gtattctagaaa,-gtattctagaa,-gtattctaga,-gtattctag,-gtattcta,-gtattct,-gtattc,-gtatt,-gtat,-gta,-gt,或-g。

優(yōu)選n^7a表示:aatcttgaatatctcat-,atcttgaatatctcat-,tcttgaatatctcat-,cttgaatatctcat-,ttgaatatctcat-,tgaatatctcat-,gaatatctcat-,aatatctcat-,atatctcat-,tatctcat-,atctcat-,tctcat-,ctcat-,tcat-,cat-,at-,或t-；

和

n^8a表示:-gtattctagaaactcac,-gtattctagaaactca,-gtattctagaaactc,-gtattctagaaact,-gtattctagaaac,-gtattctagaaa,-gtattctagaa,-gtattctaga,-gtattctag,-gtattcta,-gtattct,-gtattc,-gtatt,-gtat,-gta,-gt,或-g。

更優(yōu)選n^7a表示:tgaatatctcat-,gaatatctcat-,aatatctcat-,atatctcat-,tatctcat-,atctcat-,tctcat-,ctcat-,tcat-,cat-,at-,或t-；和

n^8a表示:-gtattctagaaa,-gtattctagaa,-gtattctaga,-gtattctag,-gtattcta,-gtattct,-gtattc,-gtatt,-gtat,-gta,-gt,或-g。

更優(yōu)選n^7a表示:atctcat-,tctcat-,ctcat-,tcat-,cat-,at-,或t-；和

n^8a表示:-gtattct,-gtattc,-gtatt,-gtat,-gta,-gt,或-g。

優(yōu)選地，通式(s6a/seq.idno.73)的反義寡核苷酸具有12至24個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選lna”章節(jié)中所公開的lna核苷酸(lna單元)是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些)是合適的。

更優(yōu)選通式(s6a)的反義寡核苷酸具有12至22個核苷酸并且在3'末端具有至少2個lna核苷酸和在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s6a)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，以及在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

n⁹表示:attcatatttatatacaggc-,ttcatatttatatacaggc-,tcatatttatatacaggc-,catatttatatacaggc-,atatttatatacaggc-,tatttatatacaggc-,atttatatacaggc-,tttatatacaggc-,ttatatacaggc-,tatatacaggc-,atatacaggc-,tatacaggc-,atacaggc-,tacaggc-,acaggc-,caggc-,aggc-,ggc-,gc-,或c-；

式s7(seq.idno.101)的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個，更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選的是式(s7)的反義寡核苷酸：

5’-n⁹-attaataa-n¹⁰-3’(seq.idno.101)

其中

n⁹表示:attcatatttatatacaggc-,

和

n¹⁰選自:-agtgcaaatgttattggcta,-agtgcaaatgttattggct,-agtgcaaatgttattggc,-agtgcaaatgttattgg,-agtgcaaatgttattg,-agtgcaaatgttatt,-agtgcaaatgttat,-agtgcaaatgtta,-agtgcaaatgtt,-agtgcaaatgt,-agtgcaaatg,-agtgcaaat,-agtgcaaa,-agtgcaa,-agtgca,-agtgc,-agtg,-agt,-ag,或-a。

優(yōu)選地，通式(s7)的反義寡核苷酸具有10至28個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s7)的反義寡核苷酸具有11-24個核苷酸，并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選，通式(s7)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

還優(yōu)選的是式(s7)的反義寡核苷酸：

5’-n⁹-attaataa-n¹⁰-3’

其中

n⁹表示:tcatatttatatacaggc-,catatttatatacaggc-,atatttatatacaggc-,tatttatatacaggc-,atttatatacaggc-,tttatatacaggc-,ttatatacaggc-,tatatacaggc-,atatacaggc-,tatacaggc-,atacaggc-,tacaggc-,acaggc-,caggc-,aggc-,ggc-,gc-,或c-；和

n¹⁰選自:-agtgcaaatgttattggc,-agtgcaaatgttattgg,-agtgcaaatgttattg,-agtgcaaatgttatt,-agtgcaaatgttat,-agtgcaaatgtta,-agtgcaaatgtt,-agtgcaaatgt,-agtgcaaatg,-agtgcaaat,-agtgcaaa,-agtgcaa,-agtgca,-agtgc,-agtg,-agt,-ag,或-a。

還優(yōu)選的是式(s7)的反義寡核苷酸：

5’-n⁹-attaataa-n¹⁰-3’

其中

n⁹表示:tttatatacaggc-,ttatatacaggc-,tatatacaggc-,atatacaggc-,tatacaggc-,atacaggc-,tacaggc-,acaggc-,caggc-,aggc-,ggc-,gc-,或c-；和

n¹⁰選自:-agtgcaaatgtta,-agtgcaaatgtt,-agtgcaaatgt,-agtgcaaatg,-agtgcaaat,-agtgcaaa,-agtgcaa,-agtgca,-agtgc,-agtg,-agt,-ag,或-a。

還優(yōu)選的是式(s7)的反義寡核苷酸：

5’-n⁹-attaataa-n¹⁰-3’

其中

n⁹表示:atacaggc-,tacaggc-,acaggc-,caggc-,aggc-,ggc-,gc-,或c-；和

n¹⁰選自:-agtgcaaa,-agtgcaa,-agtgca,-agtgc,-agtg,-agt,-ag,或-a。

優(yōu)選地，本發(fā)明涉及由12至24個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且12至24個核苷酸中的至少3個是lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中所述反義寡核苷酸由以下序列5’-n^9a-cattaataaa-n^10a-3’(seq.idno.74)表示，其中

n^9a表示:attcatatttatatacagg-,ttcatatttatatacagg-,tcatatttatatacagg-,catatttatatacagg-,atatttatatacagg-,tatttatatacagg-,atttatatacagg-,tttatatacagg-,ttatatacagg-,tatatacagg-,atatacagg-,tatacagg-,atacagg-,tacagg-,acagg-,cagg-,agg-,gg-,或g-；

n^10a表示:-gtgcaaatgttattggcta,-gtgcaaatgttattggct,-gtgcaaatgttattggc,-gtgcaaatgttattgg,-gtgcaaatgttattg,-gtgcaaatgttatt,-gtgcaaatgttat,-gtgcaaatgtta,-gtgcaaatgtt,-gtgcaaatgt,-gtgcaaatg,-gtgcaaat,-gtgcaaa,-gtgcaa,-gtgca,-gtgc,-gtg,-gt,或-g。

優(yōu)選n^9a表示:tcatatttatatacagg-,catatttatatacagg-,atatttatatacagg-,tatttatatacagg-,atttatatacagg-,tttatatacagg-,ttatatacagg-,tatatacagg-,atatacagg-,tatacagg-,atacagg-,tacagg-,acagg-,cagg-,agg-,gg-,或g-；

和

n^10a表示:-gtgcaaatgttattggc,-gtgcaaatgttattgg,-gtgcaaatgttattg,-gtgcaaatgttatt,-gtgcaaatgttat,-gtgcaaatgtta,-gtgcaaatgtt,-gtgcaaatgt,-gtgcaaatg,-gtgcaaat,-gtgcaaa,-gtgcaa,-gtgca,-gtgc,-gtg,-gt,或-g。

更優(yōu)選n^9a表示:tttatatacagg-,ttatatacagg-,tatatacagg-,atatacagg-,tatacagg-,atacagg-,tacagg-,acagg-,cagg-,agg-,gg-,或g-；和

n^10a表示:-gtgcaaatgtta,-gtgcaaatgtt,-gtgcaaatgt,-gtgcaaatg,-gtgcaaat,-gtgcaaa,-gtgcaa,-gtgca,-gtgc,-gtg,-gt,或-g。

更優(yōu)選n^9a表示:atacagg-,tacagg-,acagg-,cagg-,agg-,gg-,或g-；和

n^10a表示:-gtgcaaa,-gtgcaa,-gtgca,-gtgc,-gtg,-gt,或-g。

優(yōu)選地，通式(s7a/seq.idno.74)的反義寡核苷酸具有2至4個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s7a)的反義寡核苷酸具有12至22個核苷酸并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s7a)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

此外，本發(fā)明涉及由8至18個，優(yōu)選10至28個核苷酸組成的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，并且8至28個，優(yōu)選10至28個核苷酸中的至少兩個為lna，并且反義寡核苷酸能夠與編碼tgf-rii的基因的區(qū)域或編碼tgf-rii的mrna的區(qū)域雜交，其中反義寡核苷酸由以下序列5’-(n¹³)m-gtagtgtt-(n¹⁴)n-3’(seq.idno.99)，其中

n¹³表示:cccagcctgccccagaagagctatttg-,ccagcctgccccagaagagctatttg-,cagcctgccccagaagagctatttg-,agcctgccccagaagagctatttg-,gcctgccccagaagagctatttg-,cctgccccagaagagctatttg-,ctgccccagaagagctatttg-,tgccccagaagagctatttg-,gccccagaagagctatttg-,ccccagaagagctatttg-,cccagaagagctatttg-,ccagaagagctatttg-,cagaagagctatttg-,agaagagctatttg-,gaagagctatttg-,aagagctatttg-,agagctatttg-,gagctatttg-,agctatttg-,gctatttg-,ctatttg-,tatttg-,atttg-,tttg-,ttg-,tg-,或g-；

和

n¹⁴選自:-tagggagccgtcttcaggaatcttctc,

-tagggagccgtcttcaggaatcttct,-tagggagccgtcttcaggaatcttc,-tagggagccgtcttcaggaatctt,-tagggagccgtcttcaggaatct,-tagggagccgtcttcaggaatc,-tagggagccgtcttcaggaat,-tagggagccgtcttcaggaa,-tagggagccgtcttcagga,-tagggagccgtcttcagg,-tagggagccgtcttcag,-tagggagccgtcttca,-tagggagccgtcttc,-tagggagccgtctt,-tagggagccgtct,-tagggagccgtc,-tagggagccgt,-tagggagccg,-tagggagcc,-tagggagc,-tagggag,-taggga,-taggg,-tagg,-tag,-ta,或-t；

m表示0或1；

n表示0或1；

和n+m＝1或2。

式s5(seq.idno99)的反義寡核苷酸優(yōu)選包含2至10個lna單元，更優(yōu)選3至9個lna單元，更優(yōu)選4至8個lna單元，并且還優(yōu)選包含至少6個非lna單元，更優(yōu)選至少7個非lna單元，最優(yōu)選至少8個非lna單元。非lna單元優(yōu)選為dna單元。lna單元優(yōu)選位于3'末端(也稱為3’末端)和5'末端(也稱為5’末端)。優(yōu)選地，在3'末端和/或5'末端存在至少一個，更優(yōu)選至少兩個lna單元。

因此，優(yōu)選的是式(s5)的反義寡核苷酸：

5’-(n¹³)m-gtagtgtt-(n¹⁴)n-3’

其中

n¹³表示:gcctgccccagaagagctatttg-,cctgccccagaagagctatttg-,ctgccccagaagagctatttg-,tgccccagaagagctatttg-,gccccagaagagctatttg-,ccccagaagagctatttg-,cccagaagagctatttg-,ccagaagagctatttg-,cagaagagctatttg-,agaagagctatttg-,gaagagctatttg-,aagagctatttg-,agagctatttg-,gagctatttg-,agctatttg-,gctatttg-,ctatttg-,tatttg-,atttg-,tttg-,ttg-,tg-,或g-；和

n¹⁴選自:-tagggagccgtcttc,-tagggagccgtctt,-tagggagccgtct,-tagggagccgtc,-tagggagccgt,-tagggagccg,-tagggagcc,-tagggagc,-tagggag,-taggga,-taggg,-tagg,-tag,-ta,或-t；和

m表示0或1；n表示0或1；和n+m＝1或2。

優(yōu)選地，通式(s5)的反義寡核苷酸具有10至28個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選的lna”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些是合適的。

更優(yōu)選通式(s5的反義寡核苷酸具有11-24個核苷酸，并且在3'末端具有至少兩個lna核苷酸，在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s5)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，并且在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna區(qū)段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

還優(yōu)選的是式(s5)的反義寡核苷酸：

5’-(n¹³)m-gtagtgtt-(n¹⁴)n-3’

其中

n¹³表示:ccccagaagagctatttg-,cccagaagagctatttg-,ccagaagagctatttg-,cagaagagctatttg-,agaagagctatttg-,gaagagctatttg-,aagagctatttg-,agagctatttg-,gagctatttg-,agctatttg-,gctatttg-,ctatttg-,tatttg-,atttg-,tttg-,ttg-,tg-,或g-；和

n¹⁴選自:-tagggagccg,-tagggagcc,-tagggagc,-tagggag,-taggga,-taggg,-tagg,-tag,-ta,或-t；和

m表示0或1；n表示0或1；和n+m＝1或2。

還優(yōu)選的是式(s5)的反義寡核苷酸：

5’-(n¹³)m-gtagtgtt-(n¹⁴)n-3’

其中

n¹³表示:gaagagctatttg-,aagagctatttg-,agagctatttg-,gagctatttg-,agctatttg-,gctatttg-,ctatttg-,tatttg-,atttg-,tttg-,ttg-,tg-,或g-；和

n¹⁴選自:-taggg,-tagg,-tag,-ta,或-t；和

m表示0或1；n表示0或1；和n+m＝1或2。

還優(yōu)選的是式(s5)的反義寡核苷酸：

5’-(n¹³)m-gtagtgtt-(n¹⁴)n-3’

其中

n¹³表示:cagaagagctatttg-,agaagagctatttg-,gaagagctatttg-,aagagctatttg-,agagctatttg-,gagctatttg-,agctatttg-,gctatttg-,ctatttg-,tatttg-,atttg-,tttg-,ttg-,tg-,或g-；和

n¹⁴選自:-tagggagccgtcttcaggaatct,-tagggagccgtcttcaggaatc,-tagggagccgtcttcaggaat,-tagggagccgtcttcaggaa,-tagggagccgtcttcagga,-tagggagccgtcttcagg,-tagggagccgtcttcag,-tagggagccgtcttca,-tagggagccgtcttc,-tagggagccgtctt,-tagggagccgtct,-tagggagccgtc,-tagggagccgt,-tagggagccg,-tagggagcc,-tagggagc,-tagggag,-taggga,-taggg,-tagg,-tag,-ta,或-t；和

m表示0或1；n表示0或1；和n+m＝1或2。

還優(yōu)選的是式(s5)的反義寡核苷酸：

5’-(n¹³)m-gtagtgtt-(n¹⁴)n-3’

其中

n¹³表示:gagctatttg-,agctatttg-,gctatttg-,ctatttg-,tatttg-,atttg-,tttg-,ttg-,tg-,或g-；和

n¹⁴選自:-tagggagccgtcttcagg,-tagggagccgtcttcag,-tagggagccgtcttca,-tagggagccgtcttc,-tagggagccgtctt,-tagggagccgtct,-tagggagccgtc,-tagggagccgt,-tagggagccg,-tagggagcc,-tagggagc,-tagggag,-taggga,-taggg,-tagg,-tag,-ta,或-t；和

m表示0或1；n表示0或1；和n+m＝1或2。

還優(yōu)選的是式(s5)的反義寡核苷酸：

5’-(n¹³)m-gtagtgtt-(n¹⁴)n-3’

其中

n¹³表示:atttg-,tttg-,ttg-,tg-,或g-；和

n¹⁴選自:-tagggagccgtct,-tagggagccgtc,-tagggagccgt,-tagggagccg,-tagggagcc,-tagggagc,-tagggag,-taggga,-taggg,-tagg,-tag,-ta,或-t；和

m表示0或1；n表示0或1；和n+m＝1或2。

優(yōu)選地，通式(s5/seq.idno.99)的反義寡核苷酸具有12至24個核苷酸并且在3'末端具有至少1個lna核苷酸和在5'末端具有至少1個lna核苷酸。lna核苷酸(lna單元)，特別是“鎖核酸”和“優(yōu)選lna”章節(jié)中所公開的lna核苷酸(lna單元)是合適的，并且核苷酸橋，尤其是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中所公開的那些)是合適的。

更優(yōu)選通式(s5)的反義寡核苷酸具有12至22個核苷酸并且在3'末端具有至少2個lna核苷酸和在5'末端具有至少兩個lna核苷酸。

還更優(yōu)選地，通式(s5)的反義寡核苷酸具有12至20個，更優(yōu)選13至19個，更優(yōu)選14至18個核苷酸，以及在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元和在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3個和5個，更優(yōu)選3至4個lna單元。優(yōu)選地，反義寡核苷酸是lna區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer。優(yōu)選地，反義寡核苷酸含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如在兩個lna段之間的dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。

本發(fā)明的另一方面涉及長度為10至28個核苷酸，優(yōu)選10至24個核苷酸，更優(yōu)選11至22個核苷酸或12至20個核苷酸，更優(yōu)選13至19個核苷酸以及最優(yōu)選14至18個核苷酸的反義寡核苷酸以及所述反義寡核苷酸的鹽和光學(xué)異構(gòu)體，其中至少兩個核苷酸，優(yōu)選至少三個核苷酸，更優(yōu)選至少四個核苷酸是lna，10至28個核苷酸，優(yōu)選10至24個核苷酸，更優(yōu)選11至22個核苷酸或12至20個核苷酸，更優(yōu)選13至19個核苷酸以及最優(yōu)選14至18個核苷酸的反義寡核苷酸序列選自包含在選自以下的序列中的10至28個核苷酸，優(yōu)選10至24個核苷酸的序列組，更優(yōu)選11至22個核苷酸或12至20個核苷酸，更優(yōu)選13至19個核苷酸以及最優(yōu)選14至18個核苷酸：

gaatcttgaatatctcatgaatggaccagtattctagaaac(seq.idno.75:383-423ofseq.idno.1),

ttcatatttatatacaggcattaataaagtgcaaatgttat(seq.idno.77:2245-2285ofseq.idno.1),

tgaggaagtgctaacacagcttatcctatgacaatgtcaaag(seq.idno.78:2315-2356ofseq.idno.1),

gcctgccccagaagagctatttggtagtgtttagggagccgtcttcagg(seq.idno.79:2528-2576ofseq.idno.1),

cgcaggtcctcccagctgatgacatgccgcgtcaggtactcctgtaggt(seq.idno.81:3205-3253ofseq.idno.1),

atgtcgttattaaccgacttctgaacgtgcggtgggatcgtgctggcgatacgcgtccacaggacgatgtgcagcggc(seq.idno.83:4141-4218ofseq.idno.1),

ggccacaggcccctgagcagcccccgacccatggcagaccccgctgctcgtcatagaccgagcccccagcgcag(seq.idno.84:4216-4289ofseq.idno.1),

atgtcgttattaaccgacttctgaacgtgcggtgggatcgtgctggcgatacgcgtccacaggacgatgtgcagcggccacaggcccctgagcagcccccgacccatggcagaccccgctgctcgtcatagaccgagcccccagcgcag(seq.idno.86:4141-4289ofseq.idno.1),

ttgaatatctcatgaatggaccagtattcta(seq.idno.87:388-418ofseq.idno.1),

caagtggaatttctaggcgcctctatgctactg(seq.idno.88:483-515ofseq.idno.1),

atttatatacaggcattaataaagtgcaaat(seq.idno.89:2250-2280ofseq.idno.1),

aagtgctaacacagcttatcctatgacaatgt(seq.idno.90:2320-2351ofseq.idno.1),

ccccagaagagctatttggtagtgtttagggagccgtct(seq.idno.91:2533-2571ofseq.idno.1),

ctggtcgccctcgatctctcaacacgttgtccttcatgctttcgacacaggggtgctcccgcaccttggaaccaaatg(seq.idno.92:2753-2830ofseq.idno.1),

gtcctcccagctgatgacatgccgcgtcaggtactcctg

(seq.idno.93:3210-3248ofseq.idno.1),

ctcagcttctgctgccggttaacgcggtagcagtagaaga(seq.idno.94:3655-3694ofseq.idno.1),

gttattaaccgacttctgaacgtgcggtgggatcgtgctggcgatacgcgtccacaggacgatgtgca(seq.idno.95:4146-4213ofseq.idno.1),

caggcccctgagcagcccccgacccatggcagaccccgctgctcgtcatagaccgagcccccag(seq.idno.96:4221-4284ofseq.idno.1),

cacgcgcgggggtgtcgtcgctccgtgcgcgcgagtgactcactcaacttca(seq.idno.97:4495-4546ofseq.idno.1),

其中所述反義寡核苷酸能夠在全人轉(zhuǎn)錄組上僅與編碼tgf-rii的基因或編碼tgf-rii的mrna選擇性雜交。

具有序列號75、77、78、79、81、83、84、86-97中所含序列的所述反義寡核苷酸在3'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元，并且在5'末端具有2至5個，優(yōu)選3至5個，更優(yōu)選3至4個lna單元，并且優(yōu)選具有l(wèi)na區(qū)段a-dna區(qū)段-lna區(qū)段b形式的gapmer的結(jié)構(gòu)。lna核苷酸(lna單元)特別是在“鎖核酸(lna)”章節(jié)中所公開的那些是合適的，并且核苷酸間橋特別是“核苷酸間鍵聯(lián)(il)”章節(jié)中公開的那些是合適的。優(yōu)選地，所述反義寡核苷酸在兩個lna片段之間含有至少6個，更優(yōu)選至少7個，最優(yōu)選至少8個非lna單元，例如dna單元。適用于非lna單元和lna單元的核堿基在“核堿基”章節(jié)中公開。所述反義寡核苷酸的合適實例由式(s1)至(s7)，(s1a)至(s4a)，(s6a)和(s7a)表示。

seq.idno.1表示智人轉(zhuǎn)化生長因子β受體ii(tgf-rii)轉(zhuǎn)錄變體2的cdna的反義鏈(cdna)(5'-3'反義序列)。

seq.idno.2表示智人轉(zhuǎn)化生長因子β受體ii(70/80kda)(tgf-rii)轉(zhuǎn)錄變體2的cdna的有義鏈(5'-3'有義序列)?；蛘?，也可以認(rèn)為seq.idno.2的序列表示智人轉(zhuǎn)化生長因子β受體ii(tgf-rii)轉(zhuǎn)錄物變體2的mrna的序列(seq.idno.3)，但是寫在dna代碼中，即以g、c、a、t代碼而不是rna代碼表示。

seq.idno.3表示智人轉(zhuǎn)化生長因子β受體ii(tgf-rii)轉(zhuǎn)錄變體2的mrna(5'-3'有義序列)。顯然，在seq.idno.3中顯示的mrna以rna代碼書寫，即用g、c、a、u代碼表示。

應(yīng)當(dāng)理解，本文所用的“編碼dna鏈”是指與mrna相同的dna鏈(除了寫在dna代碼中)，并且其包含用于蛋白翻譯的密碼子。它不被用作轉(zhuǎn)錄成mrna的模板。因此，術(shù)語“編碼dna鏈”，“有義dna鏈”和“非模板dna鏈”可以互換使用。此外，本文所用的“非編碼dna鏈”是指與“編碼dna鏈”互補的dna鏈，并且用作mrna轉(zhuǎn)錄的模板。因此，術(shù)語“非編碼dna鏈”，“反義dna鏈”和“模板dna鏈”可以互換使用

術(shù)語“反義寡核苷酸”是指核糖核酸(rna)或脫氧核糖核酸(dna)的寡聚物或聚合物或其模擬物或其變體，例如具有修飾的核苷酸間鍵聯(lián)例如硫代磷酸酯鍵和/或一個或多個修飾的核堿基例如5-甲基胞嘧啶和/或一個或多個修飾的核苷酸單元，例如lna，如β-d-氧-lna的反義寡核苷酸。術(shù)語“反義寡核苷酸”包括由天然存在的核堿基、糖和共價核苷酸(主鏈)鍵聯(lián)組成的寡核苷酸，以及具有類似功能的非天然存在部分的寡核苷酸。這種修飾或取代的寡核苷酸由于所需的性質(zhì)例如增強(qiáng)的細(xì)胞攝取、對核酸靶的增強(qiáng)的親和力以及在核酸酶存在下增加的穩(wěn)定性而通常優(yōu)于天然形式。反義寡核苷酸是與靶核酸雜交并抑制其表達(dá)的短的催化rna或催化寡核苷酸。

術(shù)語“核苷”是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，并且是指戊糖部分諸如核糖，脫氧核糖或修飾或鎖定的核糖，或如下面詳細(xì)公開的修飾或鎖定的脫氧核糖如lna。核堿基連接到糖苷碳原子(戊糖的1'位)，并且在核苷的3'氧或硫原子優(yōu)選3'氧原子與相鄰核苷的5'氧或硫原子優(yōu)選5'氧原子之間形成核苷酸間鍵聯(lián)，而核苷酸間鍵聯(lián)不屬于核苷(見圖2)。

術(shù)語“核苷酸”是本領(lǐng)域技術(shù)人員公知的，并且是指戊糖部分，諸如核糖，脫氧核糖或修飾或鎖定的核糖或修飾或鎖定的脫氧核糖，如下文詳細(xì)公開的lna。核堿基連接到糖苷碳原子(戊糖的1'位)，并且在核苷酸的3'氧或硫原子優(yōu)選3'氧原子與相鄰核苷酸的5'氧或硫原子優(yōu)選5'氧原子之間形成核苷酸間鍵聯(lián)，而核苷酸間鍵聯(lián)是核苷酸的一部分(參見圖2)。

核堿基

術(shù)語“核堿基”在本文中縮寫為“b”，并且是指五個標(biāo)準(zhǔn)核苷酸堿基腺嘌呤(a)，胸腺嘧啶(t)，鳥嘌呤(g)，胞嘧啶(c)和尿嘧啶(u)以及其修飾物或類似物或具有在互補鏈中與堿基形成沃森-克里克堿基對的能力的類似物。修飾的核堿基包括其它合成和天然核堿基，例如5-甲基胞嘧啶(c*)，5-羥甲基胞嘧啶，n⁴-甲基胞嘧啶，黃嘌呤，次黃嘌呤，7-脫氮黃嘌呤，2-氨基腺嘌呤，6-甲基腺嘌呤，6-甲基鳥嘌呤，6-乙基腺嘌呤，6-乙基鳥嘌呤，2-丙基腺嘌呤，2-丙基鳥嘌呤，6-羧基尿嘧啶，5-鹵尿嘧啶，5,6-二氫尿嘧啶，5-胞嘧啶，5-丙炔基尿嘧啶，5-丙炔基胞嘧啶，6-氮雜尿嘧啶，6-氮雜胞嘧啶，6-氮雜胸腺嘧啶，5-尿嘧啶(假尿嘧啶)，4-硫尿嘧啶，8-氟腺嘌呤，8-氯腺嘌呤，8-溴腺嘌呤，8-碘腺嘌呤，8-氨基腺嘌呤，8-硫代腺嘌呤，8-硫烷基腺嘌呤，8-羥基腺嘌呤，8-氟鳥嘌呤，8-氯鳥嘌呤，8-溴鳥嘌呤，8-碘鳥嘌呤，8-氨基鳥嘌呤，8-硫代鳥嘌呤，8-硫代烷基鳥嘌呤，8-羥基鳥嘌呤，5-氟尿嘧啶，5-溴尿嘧啶，5-氯尿嘧啶，5-碘尿嘧啶，5-三氟甲基尿嘧啶，5-氟胞嘧啶，5-溴胞嘧啶，5-氯胞嘧啶，5-碘胞嘧啶，5-三氟甲基胞嘧啶，7-甲基鳥嘌呤，7-甲基腺嘌呤，8-氮雜鳥嘌呤，8-氮雜腺嘌呤，7-脫氮鳥嘌呤，7-脫氮腺嘌呤，7-脫氮-8-氮雜腺嘌呤，3-脫氮鳥嘌呤，3-脫氮腺嘌呤，2-硫尿嘧啶，2-硫代胸腺嘧啶和2-硫代胞嘧啶等，5-甲基胞嘧啶和/或2-氨基腺嘌呤取代是優(yōu)選的，因為這些修飾具有已顯示增加核酸雙鏈穩(wěn)定性。

本發(fā)明優(yōu)選的反義寡核苷酸可以包含核堿基的類似物。反義寡核苷酸的僅一個核苷酸單元的核堿基可以被核堿基的類似物替代，或者反義寡核苷酸中的兩個，三個，四個，五個或甚至所有核堿基可以被核堿基的類似物(例如5-甲基胞嘧啶，或n⁶-甲基腺嘌呤或2-氨基腺嘌呤)替代。優(yōu)選地，lna單元可以連接到諸如5-甲基胞嘧啶的核堿基的類似物。

應(yīng)當(dāng)認(rèn)識到，當(dāng)提及核苷酸或單體的序列時，所指的是堿基(例如a，t，g，c或u)的序列。然而，除了表3至8中公開的具體實例以外，反義寡核苷酸通過字母代碼a、t、g、c和u的表示需要被理解為所述反義寡核苷酸可以含有本文公開的任何核堿基，本文公開的任何3'末端基團(tuán)，本文公開的任何的5'末端基團(tuán)，以及本文公開的任何核苷酸間鍵聯(lián)(也稱為核苷酸間橋)。核苷酸a、t、g、c和u還應(yīng)被理解為是lna核苷酸或非lna核苷酸，例如優(yōu)選dna核苷酸。

只有在表4至9所公開的具體實例中，核堿基、lna單元、非lna單元、核苷酸間鍵聯(lián)和末端基團(tuán)被進(jìn)一步規(guī)定為如表2前的“文字說明”章節(jié)所述的。

已證明本文公開的反義寡核苷酸以及反義寡核苷酸的鹽與靶(編碼tgf-rii的基因或編碼tgf-rii的mrna)互補，即充分良好地雜交并具有足夠的特異性和特別是選擇性以產(chǎn)生所需的抑制作用。

術(shù)語“鹽”是指本發(fā)明的反義寡核苷酸的生理學(xué)和/或藥學(xué)上可接受的鹽。反義寡核苷酸含有核堿基如腺嘌呤，鳥嘌呤，胸腺嘧啶，胞嘧啶或其衍生物，其是堿性的并且形成鹽如氯化物或甲磺酸鹽。核苷酸間鍵聯(lián)優(yōu)選含有形成鹽如鈉、鋰或鉀鹽的帶負(fù)電荷的氧或硫原子。因此，藥學(xué)上可接受的堿加成鹽用無機(jī)堿或有機(jī)堿形成。合適的有機(jī)和無機(jī)堿的實例是衍生自金屬離子的堿，例如鋁、堿金屬離子如鈉或鉀，堿土金屬離子如鈣或鎂，或胺鹽離子或堿金屬或堿土氫氧化物，-碳酸鹽或-碳酸氫鹽。實例包括水性lioh，naoh，koh，nh4oh，碳酸鉀，氨和碳酸氫鈉，銨鹽，伯、仲和叔胺，例如氫氧化四烷基銨，低級烷基胺如甲胺，叔丁胺，普魯卡因，乙醇胺，芳基烷基胺如二芐胺和n,n-二芐基乙二胺，低級烷基哌啶如n-乙基哌啶，環(huán)烷基胺如環(huán)己胺或二環(huán)己基胺，嗎啉，葡糖胺，n-甲基-和n,n-二甲基葡糖胺，1-金剛烷胺，芐星青霉素或衍生自氨基酸如精氨酸、賴氨酸、鳥氨酸或原始中性或酸性氨基酸的酰胺的鹽，氯普魯卡因，膽堿，普魯卡因等。

由于反義寡核苷酸是堿性的，它們與有機(jī)和無機(jī)酸形成藥學(xué)上可接受的鹽。用于這種酸加成鹽形成的合適的酸的實例是鹽酸，氫溴酸，硫酸，磷酸，乙酸，檸檬酸，草酸，丙二酸，水楊酸，對氨基水楊酸，蘋果酸，富馬酸，琥珀酸酸，抗壞血酸，馬來酸，磺酸，膦酸，高氯酸，硝酸，甲酸，丙酸，葡萄糖酸，乳酸，酒石酸，羥基馬來酸，丙酮酸，苯乙酸，苯甲酸，對氨基苯甲酸酸，對羥基苯甲酸，甲磺酸，乙磺酸，亞硝酸，羥基乙磺酸，乙磺酸，對甲苯磺酸，萘磺酸，磺胺酸，樟腦磺酸，瓷酸，扁桃酸，鄰甲基扁桃酸，氫-苯磺酸，苦味酸，己二酸，d-o-甲苯基酒石酸，丙醇二酸，-甲苯酸，(o，m，p)-甲苯酸，萘胺磺酸和本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的其它礦物酸或羧酸。通過使游離堿形式與足量的所需酸接觸以用常規(guī)方式產(chǎn)生鹽來制備鹽。

在本發(fā)明的上下文中，“雜交”是指核酸雜交，其中單鏈核酸(dna或rna)與具有非常相似或甚至互補序列的另一單鏈核酸相互作用。因此，相互作用通過特定核堿基之間的氫鍵(堿基配對)發(fā)生。

如本文所用，術(shù)語“互補性”(dna和rna堿基對互補性)是指兩種核酸之間精確配對的能力。當(dāng)它們的形狀允許它們通過氫鍵鍵合在一起時，堿基對中的核苷酸是互補的。由此一對腺嘌呤和胸苷(或尿嘧啶)形成兩個氫鍵和胞嘧啶-鳥嘌呤對形成三個氫鍵。本文所用的“互補序列”是指dna或rna序列，使得當(dāng)它們彼此反平行對齊時，序列中每個位置處的核苷酸堿基將是互補的，非常像在鏡子中觀看且看到相反的事物。

本文所用的術(shù)語“可特異性雜交”表示反義寡核苷酸與靶序列的互補性或精確的堿基配對的足夠程度，以使得反義寡核苷酸和dna或rna靶標(biāo)之間發(fā)生穩(wěn)定和特異性結(jié)合。盡管優(yōu)選100％的互補性，但根據(jù)本發(fā)明的寡核苷酸的序列不需要與其可特異性雜交的靶核酸的序列具有100％的互補性。因此，“100％互補性”是指反義寡核苷酸與靶標(biāo)在其完全或整個長度上雜交而無錯配。換句話說，在本發(fā)明中，當(dāng)化合物與靶dna或rna分子在生理或病理條件下結(jié)合但反義寡核苷酸與非-靶序列的非特異性結(jié)合是極不可能或甚至不可能的時，定義反義化合物是可特異性雜交的。

因此，本發(fā)明優(yōu)選涉及反義寡核苷酸，其中反義寡核苷酸與編碼tgfrii的mrna以100％的互補性結(jié)合，并且不與完整的人轉(zhuǎn)錄組中的任何其它區(qū)域結(jié)合。進(jìn)一步優(yōu)選的是本發(fā)明涉及反義寡核苷酸，其中反義寡核苷酸在其完整長度上與編碼tgfrii的mrna具有100％的互補性，并且不具有脫靶效應(yīng)?；蛘撸景l(fā)明優(yōu)選涉及與編碼tgfrii的mrna具有100％互補性但與人轉(zhuǎn)錄組的另一mrna沒有互補性的反義寡核苷酸。因此，術(shù)語“人轉(zhuǎn)錄組”是指人類生物體中轉(zhuǎn)錄物的總集合，這意味著所有細(xì)胞類型和環(huán)境條件(在任何給定的時間)的轉(zhuǎn)錄物。

特異性

本發(fā)明的反義寡核苷酸共同的是它們對于它們所結(jié)合的編碼tgf-rii的基因或mrna的區(qū)域具有特異性。根據(jù)本發(fā)明，優(yōu)選的是，在人轉(zhuǎn)錄組中，反義寡核苷酸在其全長上僅與編碼tgf-rii的mrna具有100％的互補性。此外，本發(fā)明的一個目的是在除猴之外的哺乳動物的轉(zhuǎn)錄組內(nèi)找到?jīng)]有交叉反應(yīng)性的反義寡核苷酸；特別地，反義寡核苷酸僅與大猿的轉(zhuǎn)錄組具有交叉反應(yīng)性。這應(yīng)該避免失效。因此，本發(fā)明的反義寡核苷酸在與編碼tgf-rii的基因或mrna的雜交上具有高度的特異性。本發(fā)明的反義寡核苷酸優(yōu)選在其完整長度上以100％互補性特異性結(jié)合編碼tgf-rii的基因或編碼tgf-rii的mrna，并且不與完整人轉(zhuǎn)錄組中的任何其它區(qū)域結(jié)合。這意味著，本發(fā)明的反義寡核苷酸與靶標(biāo)(tgf-riimrna)雜交而沒有錯配。

如本文所用，術(shù)語“mrna”可以包含含有內(nèi)含子的mrna(也稱為前體mrna)以及不含任何內(nèi)含子的mrna。

本發(fā)明的反義寡核苷酸能夠與前體mrna和/或mrna結(jié)合或雜交。這意味著反義寡核苷酸可以在前體mrna的內(nèi)含子區(qū)域處或內(nèi)含子區(qū)域內(nèi)結(jié)合或雜交，或者可以在前體mrna的重疊的內(nèi)含子-外顯子區(qū)域處結(jié)合或雜交，或者可以在前體mrna的外顯子區(qū)域處或外顯子區(qū)域內(nèi)和mrna的外顯子區(qū)域處或外顯子區(qū)域內(nèi)結(jié)合或雜交(參見圖1)。優(yōu)選的是能夠與前體mrna和mrna結(jié)合或雜交的反義寡核苷酸。反義寡核苷酸(aso)與前體mrna的結(jié)合或雜交抑制5'帽形成，抑制前體mrna的剪接以獲得mrna并激活切割前體mrna的rna酶h。反義寡核苷酸(aso)與mrna的結(jié)合或雜交激活rna酶h，其切割mrna并抑制核糖體亞基的結(jié)合。

本發(fā)明的反義寡核苷酸由至少10個且不多于28個，優(yōu)選不多于24個，更優(yōu)選不多于20個核苷酸組成，因此由10,11,12,13,14,15,16,17,18,19,或20個核苷酸組成，優(yōu)選由11至20個，或11至19個，或12至19個，或13至19個，或13至18個核苷酸組成，和更優(yōu)選由14至18個核苷酸組成，其中這些核苷酸中的至少兩個，優(yōu)選三個是鎖核酸(lna)。較短的反義寡核苷酸，即具有少于10個核苷酸的反義寡核苷酸也是可能的，但是反義寡核苷酸越短，雜交不再不夠強(qiáng)的風(fēng)險就越高，并且選擇性將減少或?qū)适?。非選擇性反義寡核苷酸具有結(jié)合人轉(zhuǎn)錄組中不期望的區(qū)域和編碼非tgf-rii的其它蛋白的不期望的mrna的風(fēng)險，從而引起不期望的副作用。具有超過20個核苷酸的更長的反義寡核苷酸也是可能的，但是進(jìn)一步增加長度使得這種反義寡核苷酸的合成更加復(fù)雜和昂貴，而沒有增加雜交的選擇性或強(qiáng)度或關(guān)于降解的更好穩(wěn)定性的任何進(jìn)一步的益處。

因此，本發(fā)明涉及由10至20個核苷酸組成的反義寡核苷酸，其中至少兩個核苷酸和優(yōu)選3'和5'末端核苷酸是lna。因此，優(yōu)選至少末端3'核苷酸是lna，并且至少5'末端核苷酸是lna。在存在多于2個lna的情況下，優(yōu)選的是，另外的lna連接到3'或5'末端lna，就像本文所公開的gapmer一樣。

存在于本發(fā)明的反義寡核苷酸中的一個核苷酸結(jié)構(gòu)單元可以由以下通式(b1)和(b2)表示：

其中

b表示核堿基；

il’表示-x”-p(＝x’)(x^-)-；

r表示-h,-f,-oh,-nh2,-och3,-och2ch2och3和r^#表示-h；

或r和r^#一起形成橋-r^#-r-，其選自-ch2-o-,-ch2-s-,-ch2-nh-,-ch2-n(ch3)-,-ch2-n(c2h5)-,-ch2-ch2-o-,-ch2-ch2-s-,-ch2-ch2-nh-,-ch2-ch2-n(ch3)-,或-ch2-ch2-n(c2h5)-；

x’表示＝o或＝s；

x^-表示-o^-,-oh,-or^h,-nhr^h,-n(r^h)2,-och2ch2or^h,-och2ch2sr^h,-bh3^-,-r^h,-sh,-sr^h,或-s^-；

x”表示-o-,-nh-,-nr^h-,-ch2-,或-s-；

y是-o-,-nh-,-nr^h-,-ch2-或-s-；

r^h選自氫和c1-4-烷基和優(yōu)選-ch3或-c2h5和最優(yōu)選-ch3。

優(yōu)選x^-表示-o^-,-oh,-och3,-nh(ch3),-n(ch3)2,-och2ch2och3,-och2ch2sch3,-bh3^-,-ch3,-sh,-sch3,或-s^-；和更優(yōu)選-o^-,-oh,-och3,-n(ch3)2,-och2ch2och3,-bh3^-,-sh,-sch3,或-s^-。

il’表示優(yōu)選-o-p(o)(o^-)-,-o-p(o)(s^-)-,-o-p(s)(s^-)-,-s-p(o)(o^-)-,-s-p(o)(s^-)-,-s-p(s)(s^-)-,-o-p(o)(o^-)-,-o-p(o)(s^-)-,-s-p(o)(o^-)-,-o-p(o)(r^h)-,-o-p(o)(or^h)-,-o-p(o)(nhr^h)-,-o-p(o)[n(r^h)2]-,-o-p(o)(bh3^-)-,-o-p(o)(och2ch2or^h)-,-o-p(o)(och2ch2sr^h)-,-o-p(o)(o^-)-,-nr^h-p(o)(o^-)-,其中r^h選自氫和c1-4-烷基。

基團(tuán)-o-p(o)(r^h)-o-優(yōu)選為-o-p(o)(ch3)-o-或-o-p(o)(c2h5)-o-和最優(yōu)選-o-p(o)(ch3)-o-。

基團(tuán)-o-p(o)(or^h)-o-優(yōu)選為-o-p(o)(och3)-o-或-o-p(o)(oc2h5)-o-和最優(yōu)選-o-p(o)(och3)-o-。

基團(tuán)-o-p(o)(nhr^h)-o-優(yōu)選為-o-p(o)(nhch3)-o-或-o-p(o)(nhc2h5)-o-和最優(yōu)選-o-p(o)(nhch3)-o-。

基團(tuán)-o-p(o)[n(r^h)2]-o-優(yōu)選為-o-p(o)[n(ch3)2]-o-或-o-p(o)[n(c2h5)2]-o-和最優(yōu)選-o-p(o)[n(ch3)2]-o-。

基團(tuán)-o-p(o)(och2ch2or^h)-o-優(yōu)選為-o-p(o)(och2ch2och3)-o-或-o-p(o)(och2ch2oc2h5)-o-和最優(yōu)選-o-p(o)(och2ch2och3)-o-。

基團(tuán)-o-p(o)(och2ch2sr^h)-o-優(yōu)選為-o-p(o)(och2ch2sch3)-o-或-o-p(o)(och2ch2sc2h5)-o-和最優(yōu)選-o-p(o)(och2ch2sch3)-o-。

基團(tuán)-o-p(o)(o^-)-nr^h-優(yōu)選為-o-p(o)(o^-)-nh-或-o-p(o)(o^-)-n(ch3)-和最優(yōu)選-o-p(o)(o^-)-nh-。

基團(tuán)-nr^h-p(o)(o^-)-o-優(yōu)選為-nh-p(o)(o^-)-o-或-n(ch3)-p(o)(o^-)-o-和最優(yōu)選-nh-p(o)(o^-)-o-。

更優(yōu)選il’表示-o-p(o)(o^-)-,-o-p(o)(s^-)-,-o-p(s)(s^-)-,-o-p(o)(nhr^h)-,或-o-p(o)[n(r^h)2]-,和更優(yōu)選il’表示-o-p(o)(o^-)-,-o-p(o)(s^-)-,或-o-p(s)(s^-)-,和最優(yōu)選il’表示-o-p(o)(s^-)-,或-o-p(s)(s^-)-。

優(yōu)選y表示-o-。

優(yōu)選b表示選自a,t,g,c,u的鏈核堿基。

優(yōu)選il表示-o-p(＝o)(s^-)-或-o-p(＝s)(s^-)-。

b，y和il'的上述定義也適用于式b¹至b⁹。

因此，以下通式(b3)至(b6)是優(yōu)選的：

其中

b表示核堿基和優(yōu)選a,t,g,c,u；

r表示-h,-f,-oh,-nh2,-n(ch3)2,-och3,-och2ch2och3,-och2ch2ch2oh,-och2ch2ch2nh2和優(yōu)選-h；

r^*表示如下定義的部分-r^#-r-并且例如優(yōu)選選自-c(r^ar^b)-o-,-c(r^ar^b)-nr^c-,-c(r^ar^b)-s-,和-c(r^ar^b)-c(r^ar^b)-o-,其中取代基r^a、r^b和r^c具有如本文所定義的含義。更優(yōu)選r^*選自-ch2-o-,-ch2-s-,-ch2-nh-,-ch2-n(ch3)-,-ch2-ch2-o-,或-ch2-ch2-s-,和更優(yōu)選-ch2-o-,-ch2-s-,-ch2-ch2-o-,或-ch2-ch2-s-,和更優(yōu)選-ch2-o-,-ch2-s-,或-ch2-ch2-o-,和更優(yōu)選-ch2-o-或-ch2-s-,和最優(yōu)選-ch2-o-。

非lna單元的優(yōu)選核苷酸的實例如下：

核苷酸間鍵聯(lián)(il)

本文所述的反義寡核苷酸的單體通過核苷酸間鍵聯(lián)偶聯(lián)在一起。適當(dāng)?shù)兀總€單體通過核苷酸間鍵聯(lián)連接到3'相鄰的單體上。本領(lǐng)域普通技術(shù)人員將理解，在本發(fā)明的上下文中，寡聚體末端的5'單體不包含5'核苷酸間鍵聯(lián)，盡管它可以包含或可以不包含5'末端基團(tuán)。術(shù)語“核苷酸間鍵聯(lián)”旨在表示能夠?qū)蓚€核苷酸、兩個核苷酸類似物如兩個lna以及核苷酸與核苷酸類似物如lna共價偶聯(lián)的基團(tuán)。具體和優(yōu)選的實例包括磷酸基團(tuán)和硫代磷酸酯基團(tuán)。

本發(fā)明的反義寡核苷酸的核苷酸或其連續(xù)核苷酸序列通過核苷酸間鍵聯(lián)偶聯(lián)接在一起。每個核苷酸適當(dāng)?shù)赝ㄟ^核苷酸間鍵聯(lián)通過5'位與3'相鄰的核苷酸連接。

反義寡核苷酸可以通過幾種不同的方式進(jìn)行修飾。主鏈內(nèi)的修飾是可能的，并且是指反義寡核苷酸，其中其核苷酸間主鏈中的磷酸基團(tuán)(也稱為磷酸二酯基團(tuán))被其它基團(tuán)部分或完全替代。優(yōu)選的修飾的反義寡核苷酸主鏈包括具有正常3'-5'鍵聯(lián)的例如硫代磷酸酯，手性硫代磷酸酯，二硫代磷酸酯，磷酸三酯，氨基烷基磷酸酯，甲基、乙基和c3-c10烷基膦酸酯，包括3'-亞烷基膦酸酯和手性膦酸酯，次膦酸酯，氨基磷酸酯，包括3'-氨基氨基磷酸酯和氨基烷基磷酰胺化物，硫代磷酰胺酸酯，硫代烷基磷酸酯，硫代烷基磷酸三酯和硼烷磷酸酯，這些的2'-5'連接的類似物，以及具有相反極性的那些，其中相鄰的核苷酸單元對在3'-5'連接至5'-3'或在2'-5'連接至5'-2'。本文還進(jìn)一步詳細(xì)包括并公開了其各種鹽、混合鹽和游離酸形式。

合適的核苷酸間鍵聯(lián)連接包括在wo2007/031091中列出的那些，例如wo2007/031091的第34頁第一段所列的核苷酸間鍵聯(lián)(通過引用并入本文)。在一些實施方案中，優(yōu)選將核苷酸間鍵聯(lián)從其正常的磷酸二酯修飾為對核酸酶攻擊更具抗性的核苷酸間鍵聯(lián)，例如修飾為硫代磷酸酯或硼磷酸酯，這兩個耐受rna酶h介導(dǎo)的切割，并且還允許在減少靶基因的表達(dá)中的反義抑制途徑。

核苷酸間鍵聯(lián)由與核糖部分的3'碳原子結(jié)合的基團(tuán)il'和與連續(xù)核糖部分的5'碳原子結(jié)合的基團(tuán)y組成，如下式(il’y)所示的。

核苷酸間鍵聯(lián)il由-il'-y-表示。il'表示-x”-p(＝x’)(x^-)-，以使得使得il由-x”-p(＝x’)(x^-)-y-表示，其中取代基x^-,x’,x”和y具有如本文所公開的含義。

核苷酸間鍵聯(lián)il＝-x”-p(＝x’)(x^-)-y-優(yōu)選選自：

-o-p(o)(o^-)-o-,-o-p(o)(s^-)-o-,-o-p(s)(s^-)-o-,-s-p(o)(o^-)-o-,-s-p(o)(s^-)-o-,-s-p(s)(s^-)-o-,-o-p(o)(o^-)-s-,-o-p(o)(s^-)-s-,-s-p(o)(o^-)-s-,-o-p(o)(r^h)-o-,-o-p(o)(or^h)-o-,-o-p(o)(nhr^h)-o-,-o-p(o)[n(r^h)2]-o-,-o-p(o)(bh3^-)-o-,-o-p(o)(och2ch2or^h)-o-,-o-p(o)(och2ch2sr^h)-o-,-o-p(o)(o^-)-nr^h-,-nr^h-p(o)(o^-)-o-，其中r^h選自氫和c1-4-烷基。