專利名稱：：葡聚糖脂肪酸嫁接物及制備方法和應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明屬化合物合成，涉及葡聚糖脂肪酸嫁接物的合成方法，以及該葡聚糖脂肪酸嫁接物在制備抗腫瘤藥物組合物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：藥物主要通過(guò)口服、注射、粘膜三種途徑，以合適的藥物劑型給藥，達(dá)到全身或局部的治療效果。傳統(tǒng)的(藥物+輔料)制備普通制劑的給藥方式，受到體內(nèi)生物膜吸收與轉(zhuǎn)運(yùn)屏障，酶代謝，以及正常臟器分布的影響，形成因藥物無(wú)法大量進(jìn)入其分子耙標(biāo)而療效低、劑量大，以及藥物分布的非選擇性而導(dǎo)致嚴(yán)重的毒副作用。癌癥是當(dāng)今最為常見(jiàn)的影響人類健康并導(dǎo)致死亡的主要病因之一，全世界每年約有1000多萬(wàn)新增癌癥病例，有700多萬(wàn)人因癌癥而死亡。在我國(guó)，每年死于癌癥的人數(shù)超過(guò)160萬(wàn)，已位居各類死亡病因的首位。腫瘤化療仍然是當(dāng)今最經(jīng)典最常用的癌癥治療手段之一，傳統(tǒng)的細(xì)胞毒類化療藥物分子，并不具備人體內(nèi)藥物分布的選擇性，導(dǎo)致藥物應(yīng)有療效的嚴(yán)重缺失、毒副作用巨大，以及因產(chǎn)生耐藥性而放棄治療等重大藥物治療問(wèn)題。靶向制劑試圖通過(guò)載體技術(shù)，改變以藥物自身性質(zhì)為主導(dǎo)的藥物體內(nèi)分布模式，其最終目標(biāo)是要將外源性的藥物輸送到藥物作用的分子靶標(biāo)，以最大限度地提高藥物作用的療效，降低藥物的毒副作用。因此，采用高效安全的藥物靶向治療，已成為國(guó)內(nèi)外高度關(guān)注的熱點(diǎn)問(wèn)題。實(shí)現(xiàn)藥物的耙向治療目標(biāo)，關(guān)鍵是藥物載體的分子設(shè)計(jì)，需要在明確藥物分子作用靶點(diǎn)的基礎(chǔ)上，重點(diǎn)突破三大核心問(wèn)題的挑戰(zhàn)1)可包封足夠的有效藥物劑量；2)在血液或淋巴液中具有良好的生物穩(wěn)定性，能夠主動(dòng)識(shí)別靶組織或靶細(xì)胞；3)可突破生物膜屏障高效進(jìn)入藥物作用的分子靶區(qū)。自藥物靶向治療的概念提出以來(lái)，包括材料科學(xué)家、生物學(xué)科學(xué)家和醫(yī)藥科學(xué)家在內(nèi)的多學(xué)科研究者，進(jìn)行了長(zhǎng)期不懈的努力，部分
技術(shù)領(lǐng)域：
已經(jīng)獲得率先突破。大量的納米材料被相繼開發(fā)，并應(yīng)用于腫瘤的靶向治療，主要有樹狀高分子、脂質(zhì)體、聚合物納米粒、聚合物膠束、蛋白質(zhì)納米粒、無(wú)機(jī)材料納米粒、病毒納米粒、金屬納米粒和碳納米管等。研究表明聚乙二醇(PEG)等親水性的表面特性，可避免血清蛋白的吸附和內(nèi)皮網(wǎng)狀系統(tǒng)的清除效應(yīng)，從而延長(zhǎng)載體材料的體內(nèi)循環(huán)時(shí)間，達(dá)到腫瘤組織蓄積的目的。盡管抗腫瘤納米靶向給藥系統(tǒng)已廣為研究，到目前為止僅有少量的制劑被美國(guó)FDA認(rèn)可并上市。脂質(zhì)體技術(shù)是最早被應(yīng)用于臨床腫瘤耙向治療的產(chǎn)品，目前已經(jīng)上市的制劑主要包括阿霉素脂質(zhì)體和PEG化阿霉素脂質(zhì)體。脂質(zhì)體技術(shù)主要利用其載體結(jié)構(gòu)與生物膜的相似性，可通過(guò)血液或淋巴途徑，富集于網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)比較豐富的肝、脾、肺等臟器，而發(fā)揮抗腫瘤藥物的被動(dòng)靶向治療作用，但脂質(zhì)體在體內(nèi)轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中的藥物滲漏問(wèn)題，一直沒(méi)有得到妥善解決，因而并未體現(xiàn)出顯著的高效低毒治療效果。最近被美國(guó)FDA認(rèn)可上市的紫杉醇白蛋白納米粒有望實(shí)現(xiàn)腫瘤的靶向治療。聚合物膠束是近幾年發(fā)展起來(lái)的一類新型納米藥物載體，由兩親性聚合物在水性介質(zhì)中通過(guò)自聚集形成。其疏水性內(nèi)核可為難溶性藥物提供儲(chǔ)庫(kù)；親水性外殼可減少載體在體內(nèi)被巨噬細(xì)胞吞噬，延長(zhǎng)體內(nèi)循環(huán)時(shí)間，并可通過(guò)近一步的配體或抗體修飾，實(shí)現(xiàn)腫瘤組織的主動(dòng)靶向。然而聚合物膠束的親水性表面特性，不利于載體材料的靶細(xì)胞攝取。聚合物膠束可通過(guò)膠團(tuán)表面的配體修飾，經(jīng)受體介導(dǎo)進(jìn)入細(xì)胞；此外，選擇膠團(tuán)材料的陽(yáng)離子構(gòu)造或修飾，通過(guò)與細(xì)胞膜表面的離子相互作用，促進(jìn)細(xì)胞攝取。細(xì)胞膜構(gòu)造及吸收通道理論認(rèn)為，以親脂性材料化學(xué)組成為主的載體，有利于細(xì)胞(膜)攝取。目前，已經(jīng)有包括脂質(zhì)體[、固體脂質(zhì)納米粒等在內(nèi)的藥物載體微粒，應(yīng)用于促進(jìn)藥物細(xì)胞攝取的研究。載體的細(xì)胞攝取，通常是一個(gè)細(xì)胞內(nèi)吞的過(guò)程，載體的粒徑是一個(gè)重要的限速因子，一般認(rèn)為，粒徑小于100nm的納米載體，具有細(xì)胞膜攝取的比較優(yōu)勢(shì)。因此，以脂質(zhì)構(gòu)造為主體的納米載體，是細(xì)胞高效攝取的基本要求?；谔烊欢嗑厶蔷哂休^高穩(wěn)定性、安全、低毒性、親水性、易于化學(xué)修飾和可生物降解等特性，以及作為生物膜表面重要受體之一的多聚糖在膜轉(zhuǎn)運(yùn)過(guò)程中重要作用，因此，以多聚糖為主要材料的藥物載體材料研究方興未衰。葡聚糖(dextrans)為葡萄糖通過(guò)1，6-糖苷鍵形成的多聚糖，由于其在生物體內(nèi)的惰性和非細(xì)胞毒性，已廣泛應(yīng)用于包括糖尿病制劑、抗生素、抗腫瘤藥物、多肽與酶制劑的給藥系統(tǒng)中。葡聚糖及其衍生物也已廣泛應(yīng)用于納米粒等靶向給藥系統(tǒng)。
發(fā)明內(nèi)容為了提高藥物活性組分在體內(nèi)的靶向吸收，本發(fā)明的目的是提供一種葡聚糖脂肪酸嫁接物，具有以下式(I)所表示的結(jié)構(gòu)單元:<formula>formulaseeoriginaldocumentpage5</formula>(I)其中，葡聚糖鏈上的部分自由羥基被具有8~22個(gè)碳原子的脂肪酸取代，R是具有721個(gè)碳原子的垸基。在本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物中，葡聚糖的重均分子量(Mw)為10000Da-4000Da;脂肪酸的接枝率為1~10%，。葡聚糖脂肪酸嫁接物是指葡聚糖鏈上的部分自由羥基被脂肪酸取代的高聚物。上述脂肪酸可以是具有8~22個(gè)碳原子的飽和或不飽和脂肪酸。另一方面，上述脂肪酸可以是具有8~22個(gè)碳原子的直鏈或支鏈脂肪酸。另外，脂肪酸優(yōu)選具有12~20個(gè)碳原子，或具有12~18個(gè)碳原子，或具有1422個(gè)碳原子，或具有1622個(gè)碳原子，或具有1420個(gè)碳原子，或具有1618個(gè)碳原子。優(yōu)選地，上述脂肪酸可以選自辛酸、月桂酸、豆蔻酸、軟脂酸、油酸、硬脂酸、山崳酸或其任意混合物。本發(fā)明的另一個(gè)目的是提供葡聚糖脂肪酸嫁接物的制備方法，通過(guò)以下方案實(shí)現(xiàn)精密稱取定量脂肪酸(脂肪酸分別按葡聚糖單體摩爾比的5-50%投料)，脂肪酸3倍摩爾量的N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺(N，N'-Dicyclohexylcarbodiimide，DCC)，DCCl/10摩爾量的4-二甲氨基吡啶(4-Dimethylaminopyridine，DMAP)和500mg葡聚糖(重均分子量^0000-40000)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水二甲基亞砜(DMSO)，加熱超聲使溶解，加入lg無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中60'C反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5KDa，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8|am水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的脂肪酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖脂肪酸嫁接物。本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物具有在水性介質(zhì)中通過(guò)自聚集形成膠團(tuán)的特性。例如，1.0mg/mL本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物可以在水中或pH值為1-14的溶液中形成膠團(tuán)。通過(guò)微粒粒度儀測(cè)定，上述膠團(tuán)的粒徑在250~450nm的范圍內(nèi)。通過(guò)芘熒光法測(cè)定，本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物在水溶液中的臨界膠團(tuán)濃度為15250pg/ml的范圍內(nèi)。本發(fā)明的再一個(gè)目的是提供葡聚糖脂肪酸嫁接物在制備抗腫瘤藥物組合物中的應(yīng)用。所述葡聚糖脂肪酸嫁接物作為載體與藥物組合。所述藥物可以是抗腫瘤藥物，例如，阿霉素、紫杉醇等。本發(fā)明采用具有良好生物相容性的葡聚糖為親水性材料，利用化學(xué)嫁接技術(shù)，可控合成兩親性的葡聚糖脂肪酸嫁接物，該嫁接物材料在水性介質(zhì)中具有自聚集形成聚合物膠團(tuán)，并具有較低的臨界膠團(tuán)濃度，可應(yīng)用于制備抗腫瘤藥物組合物。圖1葡聚糖(A)、硬脂酸(B)和葡聚糖硬脂酸嫁接物(C)的氫譜核磁共振圖譜。圖2葡聚糖硬脂酸嫁接物載藥膠團(tuán)的體外釋放。具體實(shí)施例方式以下通過(guò)實(shí)施例的方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行詳述，但本發(fā)明并不局限于這些實(shí)施例。一、葡聚糖脂肪酸嫁接物的合成實(shí)施例l精密稱取175.5mg硬脂酸，381.8mgDCC，22.5mgDMAP和500mg葡聚糖(Mw^l0000)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水DMSO，加熱超聲使溶解，加入少量無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中6(TC反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5Kda，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8pm水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的硬脂酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖硬脂酸嫁接物實(shí)施例26精密稱取87.8mg硬脂酸，191.5mgDCC，11.2mgDMAP和500mg葡聚糖(Mw-20000)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水DMSO，加熱超聲使溶解，加入少量無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中6(TC反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5Kda，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8pm水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的硬脂酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖硬脂酸嫁接物實(shí)施例3精密稱取175.5mg硬脂酸，381.8mgDCC，22.5mgDMAP和500mg葡聚糖(Mw-20000)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水DMSO，加熱超聲使溶解，加入少量無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中6(TC反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5Kda，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8|im水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的硬脂酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖硬脂酸嫁接物實(shí)施例4精密稱取263.5mg硬脂酸，573.2mgDCC，33.8mgDMAP和500mg葡聚糖(M『20000)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水DMSO，加熱超聲使溶解，加入少量無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中6(TC反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5Kda，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8pm水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的硬脂酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖硬脂酸嫁接物實(shí)施例5精密稱取175.5mg硬脂酸，381.8mgDCC，22.5mgDMAP和500mg葡聚糖(M^40000)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水DMSO，加熱超聲使溶解，加入少量無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中6(TC反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5Kda，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8pm水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的硬脂酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖硬脂酸嫁接物實(shí)施例6精密稱取40mg辛酸，192mgDCC,11.2mgDMAP和500mg葡聚糖(Mw^OOOO)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水DMSO，加熱超聲使溶解，加入少量無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中60。C反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5Kda，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8pm水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的辛酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖辛酸嫁接物實(shí)施例7精密稱取500mg山崳酸，300mgDCC，40.2mgDMAP和500mg葡聚糖(Mw^l0000)置于250ml干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水DMSO，加熱超聲使溶解，加入少量無(wú)水硫酸鈉。在恒溫加熱磁力攪拌器中6(TC反應(yīng)8h，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)。反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋(MWCO3.5Kda，美國(guó)光譜實(shí)驗(yàn)室公司)透析48h，持續(xù)換水以除去DMSO和水溶性副產(chǎn)物。透析后反應(yīng)產(chǎn)物用0.8pm水膜過(guò)濾以除去DCC等不溶性物質(zhì)后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，以除去未反應(yīng)的山崳酸。最后，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖山崳酸嫁接物二、葡聚糖脂肪酸嫁接物的特性實(shí)施例1所得葡聚糖硬脂酸嫁接物的氫譜核磁共振光譜見(jiàn)圖1，由圖可知，通過(guò)硬脂酸的羧基與葡聚糖的羥基的化學(xué)反應(yīng)，實(shí)現(xiàn)了葡聚糖與硬脂酸的化學(xué)嫁接。分別稱取上述實(shí)施例l-7得到的葡聚糖脂肪酸嫁接物10mg，加適量雙蒸水水浴超聲10min分散，并定容至100mL，得到相應(yīng)的膠團(tuán)溶液。使用Zetasizer3000HS分析儀，測(cè)定溶液中膠團(tuán)的平均粒徑(D)。通過(guò)公知的芘熒光法，分別測(cè)定葡聚糖脂肪酸嫁接物膠團(tuán)在水中的臨界膠團(tuán)濃度(CMC)。通過(guò)公知?dú)渥V核磁共振光譜，測(cè)定脂肪酸接枝率，實(shí)施例1-7的上述特性均列于下表1。表lD(nm)CMC(ng/mL)脂肪酸接枝率(％)實(shí)施例1258.0±2.472.781.45實(shí)施例2312.8±0.9190.661.93實(shí)施例3308.8±12.976.363.86實(shí)施例4260.8±6.118.46.60實(shí)施例5367.1±6.116.767.65實(shí)施例6447.9±8.9249.72.39實(shí)施例7251.6±2.315.0810.87可見(jiàn)，本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物具有在水性介質(zhì)中通過(guò)自聚集形成膠團(tuán)的特性。而且，本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物的臨界膠團(tuán)濃度明顯低于一般表面活性劑的臨界膠團(tuán)濃度。本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物形成的膠團(tuán)作為一種藥物傳輸系統(tǒng)，具有許多優(yōu)勢(shì)通過(guò)調(diào)整材料的葡聚糖的分子量和脂肪酸的接枝率可以控制藥物活性組分在生物體內(nèi)的釋放；由于膠團(tuán)粒徑很小，故可穿過(guò)血腦屏障、網(wǎng)狀內(nèi)皮組織系統(tǒng)，也可促進(jìn)腸胃黏膜等的良好吸收，到達(dá)大尺寸粒子無(wú)法通過(guò)的部位，達(dá)到被動(dòng)靶向的目的；聚合物膠團(tuán)骨架對(duì)藥物的保護(hù)和屏蔽作用，可在一定程度上避免藥物的分解，保持藥物的穩(wěn)定性，降低藥物的毒性；因此，本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物可以作為載體用于許多種藥物組合物的制備。三、葡聚糖脂肪酸嫁接物膠團(tuán)抗腫瘤藥物組合物中的應(yīng)用1.阿霉素分別精密秤取50mg實(shí)施例1、2、4、5中制備的葡聚糖硬脂酸嫁接物(置50mL燒杯中，分別加入40mL蒸餾水(pH為5.7)，探頭超聲20次(500w，工作2s停3s)，轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用蒸餾水分別定容至50mL，得1mg/mL的膠團(tuán)溶液。分別移取該葡聚糖硬脂酸嫁接物膠團(tuán)溶液20mL，加入2mL濃度為lmg/mL的阿霉素二甲亞砜溶液，室溫條件下攪拌3h后，置于分子量為3500的透析袋中，蒸餾水透析24h后，透析原液5000rpm離心5分鐘，去除析出的阿霉素。上清液過(guò)0.22pm的微孔濾膜，即得負(fù)載阿霉素的葡聚糖硬脂酸嫁接物載藥膠團(tuán)。使用Zetasizer3000HS分析儀，測(cè)定載藥膠團(tuán)的粒徑；高效液相色譜法測(cè)定阿霉素含量并計(jì)算藥物包封率，其結(jié)果參見(jiàn)表2:表2:負(fù)載阿霉素的葡聚糖硬脂酸嫁接物理化性質(zhì)9<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>四種載藥膠團(tuán)的體外釋放參見(jiàn)圖2，由圖可知，通過(guò)嫁接物中葡聚糖的分子量和硬脂酸接枝率的調(diào)控可有效實(shí)現(xiàn)對(duì)藥物的控釋。2.紫杉醇分別精密秤取50mg實(shí)施例1、2、4、5中制備的葡聚糖硬脂酸嫁接物(置50mL燒杯中，分別加入40mL蒸餾水(pH為5.7)，探頭超聲20次(500w，工作2s停3s)，轉(zhuǎn)移至容量瓶中，用蒸餾水分別定容至50mL,得1mg/mL的膠團(tuán)溶液。分別移取該葡聚糖硬脂酸嫁接物膠團(tuán)溶液20mL，加入2mL濃度為lmg/mL的紫杉醇甲醇溶液，室溫條件下攪拌3h后，置于分子量為3500的透析袋中，蒸餾水透析24h后，透析原液5000rpm離心5分鐘，去除析出的紫杉醇。上清液過(guò)0.45pm的微孔濾膜，即得負(fù)載紫杉醇的葡聚糖硬脂酸嫁接物載藥膠團(tuán)。使用Zetasizer3000HS分析儀，測(cè)定載藥膠團(tuán)的粒徑；高效液相色譜法測(cè)定紫杉醇含量并計(jì)算藥物包封率，其結(jié)果參見(jiàn)表3:表3:負(fù)載紫杉醇的葡聚糖硬脂酸嫁接物理化性質(zhì)<table>tableseeoriginaldocumentpage10</column></row><table>權(quán)利要求1.一種葡聚糖脂肪酸嫁接物，具有下式所表示的結(jié)構(gòu)單元其中，R是具有7～21個(gè)碳原子的烷基，葡聚糖鏈上的部分自由羥基被具有8～22個(gè)碳原子的脂肪酸取代，葡聚糖的重均分子量為10000Da-4000Da，脂肪酸的接枝率為1～10％，葡聚糖脂肪酸嫁接物在水溶液中的臨界膠團(tuán)濃度為15～250μg/ml。2.權(quán)利要求1所述的葡聚糖脂肪酸嫁接物的制備方法，其特征在于，通過(guò)以下步驟實(shí)現(xiàn)稱取脂肪酸，并按葡聚糖單體摩爾比的5-50%投料，將脂肪酸3倍摩爾量的N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺、N,N'-二環(huán)己基碳二亞胺1/10摩爾量的4-二甲氨基吡啶和500mg葡聚糖置于干燥圓底燒瓶中，然后加入45ml脫水二甲基亞砜，加熱超聲使溶解，加入無(wú)水硫酸鈉，在恒溫加熱磁力攪拌器中6(TC反應(yīng)8小時(shí)，并且用氮?dú)獗Ｗo(hù)，反應(yīng)結(jié)束后，將反應(yīng)產(chǎn)物用透析袋透析48小時(shí)，持續(xù)換水以除去二甲基亞砜和水溶性副產(chǎn)物，透析后反應(yīng)產(chǎn)物用水膜過(guò)濾后凍干，凍干產(chǎn)物用乙醇洗滌三次，將反應(yīng)產(chǎn)物用去離子水溶解，凍干，即得葡聚糖脂肪酸嫁接物。3.根據(jù)權(quán)利要求2所述的葡聚糖脂肪酸嫁接物的制備方法，其特征在于，葡聚糖的重均分子量為10000-40000。4.根據(jù)權(quán)利要求1所述的葡聚糖脂肪酸嫁接物在制備抗腫瘤藥物組合物中的應(yīng)用，所述葡聚糖脂肪酸嫁接物在組合物中作為載體與藥物組合。全文摘要本發(fā)明提供一種葡聚糖脂肪酸嫁接物，葡聚糖的重均分子量為10000Da-4000Da，脂肪酸的接枝率為1～10％。本發(fā)明采用具有良好生物相容性的葡聚糖為親水性材料，利用化學(xué)嫁接技術(shù)，可控合成兩親性的葡聚糖脂肪酸嫁接物，該嫁接物材料在水性介質(zhì)中具有自聚集形成聚合物膠團(tuán)，并具有較低的臨界膠團(tuán)濃度，該葡聚糖脂肪酸嫁接物可以作為藥物載體，與抗腫瘤藥物組合，應(yīng)用于抗腫瘤藥物組合物的制備，達(dá)到控制藥物活性組分在生物體內(nèi)的釋放，實(shí)現(xiàn)藥物的被動(dòng)靶向，降低藥物的毒副作用。本發(fā)明的葡聚糖脂肪酸嫁接物的結(jié)構(gòu)式。文檔編號(hào)C08B37/02GK101585888SQ20091010045公開日2009年11月25日申請(qǐng)日期2009年7月6日優(yōu)先權(quán)日2009年7月6日發(fā)明者杜永忠,胡富強(qiáng),弘袁申請(qǐng)人:浙江大學(xué)