專利名稱：用于治療炎癥性或過敏性病癥的吡嗪甲?；一衔锏闹谱鞣椒?br>
專利說明用于治療炎癥性或過敏性病癥的吡嗪甲?；一衔?/invention-title> 本發(fā)明涉及有機化合物、其制備方法和作為藥物的應用。
本發(fā)明一方面提供了式(I)的化合物
或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或溶劑化物或藥學上可接受的鹽， 其中 M、M1和M2獨立地是
R1、R2、R3和R4獨立地選自H、C1-C8-烷基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、4-到14-元雜環(huán)基團、被4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基，或 R1和R2與它們所連接的氮原子形成任選地被R14取代的C3-C14-元雜環(huán)基團，或 R3和R4與它們所連接的氮原子形成任選地被R14取代的C3-C14-元雜環(huán)基團； L、L1和L2獨立地選自
R6、R5、R5a、R5b和Rx獨立地選自H、C1-C8烷基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-烷基-烷氧基、C1-C8-鹵代烷基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、4-到14-元雜環(huán)基團、被4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基；或 當X1是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或 當X2是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5a及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或 當X是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5b及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團； W、W1和W2獨立地選自C0-C8-亞烷基； X、X1和X2獨立地選自C0-C8-亞烷基、O、S、-NR7-、-NR7(C＝O)-、-NR7(C＝O)NR8-、-NR8SO2-、-NR7(SO2)NR8-、-NR7(C＝O)O-、-O(C＝O)-、-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NR7-、-(C＝S)NR7-、-(C＝NR7)NR8-、-(C＝O)NR7-、-(C＝O)O-、-(SO2)(C0-C8-亞烷基)-、-(SO2)NR8-和-(SO2)NR7-Z-(SO2)NR8-； Y、Y1和Y2獨立地是-C0-C8-亞烷基-； Z是C1-C4-亞烷基； 其中W、W1、W2、Y、Y1、Y2和Z任選地被下述基團取代C1-C8-烷基、鹵素、C1-C8-烷氧基、羧基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基、包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團、被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基、以及被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基； A選自任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C3-C15-碳環(huán)基團；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的4-到14-元雜環(huán)基團；選自氮、氧和硫的雜原子，其中所述的氮可以被-Y-X-W-NR5b-L-M取代；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C1-C8-烷基；條件是當R5和R5a不與A形成4-到14-元雜環(huán)基團時，那么當X1、X2、Y1和Y2是C0-C8-亞烷基時，除非A被-Y-X-W-NR5b-L-M取代，A不是C6-C15-芳香族碳環(huán)基團、O、C＝O或C1-C8-烷基； R7、R8、R11和R12獨立地選自H、任選地被C7-C14-芳烷基取代的C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基和5-到14-元雜環(huán)基團；R7和R8獨立地，可以通過C1-C4-烷基基團與W、W1、W2、Y、Y2或Y2的碳原子成鍵，從而形成5-到14-元雜環(huán)基團； T選自H、鹵素、C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基； 其中，除非另有說明，每個C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團和每個4-到14-元雜環(huán)基團獨立地任選地被一個或多個選自下述的基團取代OH、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷基、鹵素、SO2NR11R12、任選地被羥基取代的羥基C1-C8-烷氧基、(C0-C4-亞烷基)CONR11R12、(C0-C4-亞烷基)N＝C(NR11R12)2、-O-(C1-C4-亞烷基)-N＝C(NR11R12)2、-O-(C1-C4-亞烷基)-CONR11R12、C6-C10-芳烷氧基、C7-C10-芳烷基、SH、S(C1-C8-亞烷基)、SO2(C1-C8-亞烷基)SO(C1-C8-亞烷基)、NR11R12、R15、被R15取代的C1-C8-烷基、R16、被R16取代的C1-C8-烷基、O(C1-C8-亞烷基)-NR11C(C＝O)O-(C0-C4-亞烷基)-R15、氰基、氧代、羧基、硝基、C1-C8-烷基羰基、羥基-C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基、氨基-C1-C8-烷基、氨基(羥基)C1-C8-烷基和任選地被氨基羰基取代的C1-C8-烷氧基，其中R15是C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團，其任選地被OH、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷基、鹵素和C1-C8-鹵代烷基取代，R16是3-到14-元雜環(huán)基團，其任選地被OH、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷基、鹵素和C1-C8-鹵代烷基取代； 并且其中，除非另有說明，每個亞烷基任選地被下述基團取代C1-C8-烷基、鹵素、C1-C8-烷氧基、羧基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、R15、被R15取代的C1-C8-烷基、R16或被R16取代的C1-C8-烷基；且 R14選自H、鹵素、C1-C8-烷基、OH、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、C7-C14-芳烷基和O-C7-C14-芳烷基。
本發(fā)明另一方面提供了式(I)的化合物，或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或藥學上可接受的鹽， 其中 M、M1和M2獨立地是
R1、R2、R3和R4獨立地選自H、C1-C8-烷基和C1-C8-烷基-羧基；L、L1和L2獨立地選自
R5、R5a和R5b獨立地選自H和C1-C8-烷基，或 當X1是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或 當X2是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5a及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或 當x是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5b及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團； R6選自H和C1-C8-烷基； W、W1和W2選自C0-C8-亞烷基； X、X1和X2選自C0-C8-亞烷基、O、S、-NR7-、-NR7(C＝O)-、-NR7(C＝O)NR8-、-NR8SO2-、-NR7(SO2)NR8-、-NR7(C＝O)O-、-O(C＝O)-、-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NR7-、-(C＝S)NR7-、-(C＝NR7)NR8-、-(C＝O)NR7-、-(C＝O)O-、-(SO2)(C0-C8-亞烷基)-、-(SO2)NR8-和-(SO2)NR7-Z-(SO2)NR8-； Y、Y1和Y2是-C0-C8-亞烷基-； Z是C1-C4-亞烷基； 其中W、W1、W2、Y、Y1、Y2和Z任選地被下述基團取代C1-C8-烷基、鹵素、C1-C8-烷氧基、羧基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基、包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團、被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基，以及被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基； A選自C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團；C3-C15-碳環(huán)基團；4-到14-元雜環(huán)基團；選自氮、氧和硫的雜原子，其中所述的氮可以被-Y-X-W-NR5b-L-M取代；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C1-C8-烷基；條件是當R5和R5a不與A形成4-到14-元雜環(huán)基團時，那么當X1、X2、Y1和Y2是C0-C8-亞烷基時，除非A被-Y-X-W-NR5b-L-M取代，A不是C6-C15-芳香族碳環(huán)基團、O、C＝O或C1-C8-烷基； R7、R8、R11和R12獨立地選自H、任選地被C7-C14-芳烷基取代的C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基和5-到14-元雜環(huán)基團；并且R7和R8獨立地，可以通過C1-C4-烷基基團與W或Y的碳原子成鍵，形成5-到14-元雜環(huán)基團；且 T選自H、鹵素、C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基； 在式(I)的化合物中，獨立地、集體地或以任何組合形式優(yōu)選下列含義 根據(jù)式(I)，L、L1和L2合適地為
同樣合適的是L、L1和L2為
根據(jù)式(I)，R1優(yōu)選為H。
根據(jù)式(I)，R2優(yōu)選為H。
根據(jù)式(I)，R3優(yōu)選為H。
根據(jù)式(I)，R4優(yōu)選為H。
M、M1和M2優(yōu)選為
根據(jù)式(I)，R5、R5a和R5b優(yōu)選為H。
根據(jù)式(I)，R6優(yōu)選為H。
根據(jù)式(I)，在A為C3-C15-碳環(huán)基團時，其合適地為4到6元碳環(huán)基團，例如環(huán)丁烷和環(huán)己烷。
根據(jù)式(I)，A可以是被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的氮。
根據(jù)式(I)，W、W1和W2獨立地為亞甲基、亞乙基、亞丁基、亞戊基或亞己基，優(yōu)選W1和W2為亞甲基。
根據(jù)式(I)，X、X1和X2合適地為C0-C8-亞烷基、-NR7、-NR7(C＝O)-、-NR7(C＝O)NR7-、-NR8SO2-、-NR7(SO2)NR8-、-NR7(C＝O)O-、-O(C＝O)-、-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NR7-、-(C＝S)NR7-、-(C＝NR7)NR8-、-(C＝O)NR7-、-(C＝O)O-、-(SO2)(C0-C8-亞烷基)-、-(SO2)NR8-、-(SO2)NR8-Z-(SO2)NR8-，或者R7和R8獨立地，可以通過C1-C4-烷基基團與W1或W2或Y1或Y2基團的碳原子成鍵，形成5-到14-元雜環(huán)基團，例如
R7和R8獨立地優(yōu)選為H和C1-C8-烷基。
優(yōu)選X、X1和X2為C0-亞烷基，即鍵。
根據(jù)式(I)，Z合適地為-(C0-C2-亞烷基)-。優(yōu)選Z為亞甲基或亞乙基。
根據(jù)式(I)，Y、Y1和Y2合適地為-(C0-C2-亞烷基)-。優(yōu)選Y1和Y2為C0(即鍵)、亞甲基或亞乙基。
根據(jù)式(I)，T合適地為鹵素，優(yōu)選氯。
在更優(yōu)選的實施方案中，本發(fā)明提供了式(Ia)的化合物
或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或藥學上可接受的鹽， 其中 A2選自
在另一個實施方案中，本發(fā)明提供了上述任何實施方案中的游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物在制備治療炎癥性或過敏性病癥、特別是炎癥性或阻塞性氣道疾病的藥物中的應用。
本發(fā)明的優(yōu)選實施方案提供了上述任何實施方案中的游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物在制備治療炎癥性或過敏性病癥的藥物中的應用，所述的炎癥性或過敏性病癥選自囊性纖維化、原發(fā)性纖毛運動障礙、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺病、哮喘、呼吸道感染、肺癌、口腔干燥癥和男性角膜結(jié)膜炎(keratoconjunctivitis sire)。
應當理解，可以將本發(fā)明任何的和所有的實施方案與任何其它實施方案結(jié)合來描述本發(fā)明的額外實施方案。此外，將實施方案中的任何要素與來自任何實施方案的任何和所有的其它要素結(jié)合來描述額外的實施方案。本領(lǐng)域技術(shù)人員應當理解在不可能情況下的取代基組合并非本發(fā)明的方面。
定義 本說明書中使用的術(shù)語具有如下含義 “任選地取代的”是指可以在一個或多個位置上被下面所述的任何一種基團或其任何組合所取代的基團。
本文所用的“鹵代”或“鹵素”可以是氟、氯、溴或碘。
本文所用的“C1-C8-烷基”表示具有1-8個碳原子的直鏈或支鏈烷基。
本文所用的“C1-C8-烷氧基”表示具有1-8個碳原子的直鏈或支鏈的烷氧基。
術(shù)語“亞烷基”表示直鏈或支鏈的飽和烴鏈。
“氨基-C1-C8-烷基”和“氨基-C1-C8-烷氧基”表示通過氮原子與C1-C8-烷基連接的氨基，例如NH2-(C1-C8)-；或通過氮原子與C1-C8-烷氧基連接的氨基，例如NH2-(C1-C8)-O-。
“氨基-(羥基)-C1-C8-烷基”表示通過氮原子與C1-C8-烷基連接的氨基和通過氧原子與同一個C1-C8-烷基連接的羥基。
本文所用的“C1-C8-烷基羰基”和“C1-C8-烷氧基羰基”分別表示通過碳原子與羰基連接的如上文所定義的C1-C8-烷基或C1-C8-烷氧基。
本文所用的“C3-C8-環(huán)烷基羰基”表示通過碳原子與羰基連接的如上文所定義的C3-C8-環(huán)烷基。
本文所用的“C7-C14-芳烷基”表示被如本文所定義的C6-C10-芳香族碳環(huán)基團取代的如上文所定義的烷基例如C1-C4-烷基。
本文所用的“C3-C15-碳環(huán)基團”表示具有3-15個環(huán)碳原子的飽和或部分飽和的碳環(huán)基團，例如C3-C8-環(huán)烷基。C3-C15-碳環(huán)基團的實例包括但不限于環(huán)丙基、環(huán)丁基、環(huán)戊基、環(huán)己基、環(huán)庚基或環(huán)辛基，或二環(huán)基團，如二環(huán)辛基；二環(huán)壬基，包括茚滿基和茚基；和二環(huán)癸基。
本文所用的“C6-C15-芳香族碳環(huán)基團”表示具有6-15個環(huán)碳原子的芳香基團。C6-C15-芳香族碳環(huán)基團的實例包括但不限于苯基、亞苯基、次苯基(benzenetriyl)、萘基、亞萘基、次萘基(naphthalenetriyl)或亞蒽基。
“4-到14-元雜環(huán)基團”是指包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)，它可以是飽和的、部分飽和的或不飽和的(芳香的)。3-14元雜環(huán)基團的實例包括但不限于呋喃、吡咯、吡咯烷、吡唑、咪唑、三唑、異三唑、四唑、噻二唑、異噻唑、噁二唑、吡啶、哌啶、吡嗪、噁唑、異噁唑、吡嗪、噠嗪、嘧啶、哌嗪、吡咯烷、吡咯烷酮、嗎啉、三嗪、噁嗪、四氫呋喃、四氫噻吩、四氫噻喃、四氫吡喃、1，4-二噁烷、1，4-噁噻烷、吲唑、喹啉、吲唑、吲哚或噻唑。
除非上下文中另有要求，否則在本說明書和隨后的權(quán)利要求中出現(xiàn)的術(shù)語“包含”或其變化形式例如“包括”，應當理解為是指包括所述的總體或步驟、或總體或步驟的組，但不排除任何其它的總體或步驟、或總體或步驟的組。
特別優(yōu)選的式(I)的具體化合物是下文實施例中所述的那些化合物。
式(I)表示的化合物能夠形成酸加成鹽，特別是藥學上可接受的酸加成鹽。式(I)化合物的藥學上可接受的酸加成鹽包括無機酸或有機酸的鹽，所述的無機酸例如氫鹵酸，如氫氟酸、鹽酸、氫溴酸或氫碘酸；硝酸；硫酸；磷酸；所述的有機酸例如脂肪族一元羧酸，如甲酸、乙酸、三氟乙酸、丙酸和丁酸；脂肪族羥酸，如乳酸、檸檬酸、酒石酸或蘋果酸；二元羧酸，如馬來酸或琥珀酸；芳香族羧酸，如苯甲酸、對-氯苯甲酸、二苯基乙酸，對-聯(lián)苯苯甲酸或三苯基乙酸；芳香族羥酸，如鄰-羥基苯甲酸、對-羥基苯甲酸、1-羥基萘-2-甲酸或3-羥基萘-2-甲酸；肉桂酸類，如3-(2-萘基)丙烯酸、對-甲氧基肉桂酸或?qū)?甲基肉桂酸；以及磺酸，如甲磺酸或苯磺酸?？梢酝ㄟ^已知的成鹽方法從式(I)的化合物制備這些鹽。
可能包含酸性基團如羧基的式(I)化合物還能夠與堿，特別是藥學上可接受的堿，例如本領(lǐng)域眾所周知的那些堿成鹽；合適的這類鹽包括金屬鹽，特別是堿金屬或堿土金屬鹽，如鈉、鉀、鎂或鈣鹽；或者與氨或藥學上可接受的有機胺類或雜環(huán)堿類，如乙醇胺類、芐胺類或吡啶形成的鹽?？梢酝ㄟ^已知的成鹽方法從式(I)的化合物制備這些鹽。
存在不對稱碳原子的那些化合物具有立體異構(gòu)體。這些化合物以單一旋光活性的異構(gòu)體或其混合物的形式存在，例如以非對映異構(gòu)體混合物的形式存在。本發(fā)明包括單一旋光活性的R和S異構(gòu)體及其混合物。可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員眾所周知的方法，例如手性高效液相色譜法(HPLC)分離單個異構(gòu)體。
互變異構(gòu)體是平衡存在的兩種或多種結(jié)構(gòu)同分異構(gòu)體之一，并且它易于從一種異構(gòu)體形式轉(zhuǎn)化成另一種異構(gòu)體形式。
本發(fā)明的化合物可以以非溶劑化和溶劑化形式存在。本文所用的術(shù)語“溶劑化物”是描述包含本發(fā)明化合物與一種或多種藥學上可接受的溶劑分子如乙醇的分子絡合物。當所述的溶劑是水時，使用術(shù)語“水合物”。
合成 本發(fā)明的實施方案提供了制備式(I)化合物或其互變異構(gòu)體、立體異構(gòu)體或藥學上可接受的鹽的方法
其中M1、M2、L1、L2、NR5、NR5a、W1、W2、X1、X2、Y1、Y2和A如上文所定義， 該方法包括以下步驟 (i)將式(IV)的化合物
其中 M＊是M1或M2； L＊是L1或L2；且 M1、M2、L1、L2和T如上文所定義， 與式(V)的化合物反應
其中R5、R5a、W1、W2、X1、X2、Y1、Y2和A如上文所定義， 所述反應任選地在堿，例如有機堿存在下，在有機溶劑如非質(zhì)子偶極溶劑中進行；和 (ii)將所得游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物回收。
式(I)化合物可以使用例如下文和實施例中所述的反應和技術(shù)進行制備?？梢栽趯τ谒迷噭┖臀镔|(zhì)適宜的并且適于進行有效轉(zhuǎn)化的溶劑中完成所述反應。有機合成領(lǐng)域的技術(shù)人員應當理解，分子中存在的官能團應符合預期的轉(zhuǎn)化。有時這需要判斷改變合成步驟的順序或選擇某種特定的不同反應流程，以得到預期的本發(fā)明化合物。
在以下反應方案所示的合成中間體和終產(chǎn)物上的各種取代基，在本領(lǐng)域技術(shù)人員所理解的需要的情況下，可以使用保護基以其充分被加工的形式存在，或者以前體形式存在，所述前體可以隨后通過本領(lǐng)域技術(shù)人員熟悉的方法被加工成其最終形式。這些取代基也可以在合成過程的各種階段或在合成過程完成后加入。在很多情況下，通常使用的官能團操作可以用于將一種中間體轉(zhuǎn)化為另一種中間體，或者將一種式(I)化合物轉(zhuǎn)化為另一種式(I)化合物。這類操作的實例包括將酯或酮轉(zhuǎn)化為醇；將酯轉(zhuǎn)化為酮；酯、酸和酰胺的互相轉(zhuǎn)換；醇和胺的烷化、?；突酋；磻?；以及許多其他反應。也可以使用普通的反應，如烷化、?；Ⅺu化或氧化反應來加入取代基。這類操作在本領(lǐng)域內(nèi)是眾所周知的，許多參考著作概述了用于這類操作的流程和方法。一些參考著作給出了用于許多官能團操作和常用于有機合成領(lǐng)域其他轉(zhuǎn)化反應的有機合成原始文獻的實例和參考，例如March’s Organic Chemistry，第5版，Wiley和Chichester編輯，(2001)；Comprehensive Organic Transformations，Larock編輯，VCH(1989)；Comprehensive Organic Functional Group Transformations，Katritzky等人(系列編輯)，Pergamon(1995)；和Comprehensive Organic Synthesis，Trost和Fleming(系列編輯)，Pergamon(1991)。還應當了解，在該領(lǐng)域內(nèi)設(shè)計任何合成路線的另一項主要考慮是明智地選擇用于保護本發(fā)明所述化合物中存在的反應性官能團的保護基。在同一分子中可以選擇多種保護基，以便這些保護基各自可以在不脫去該分子中其它保護基的情況下脫去，或者根據(jù)所需要的結(jié)果使用同一反應步驟脫去多個保護基。Greene和Wuts的權(quán)威性著作Protective Groups in Organic Synthesis，Wiley和Sons(1999)為技術(shù)人員描述了多種可選擇的方法。
一般地，在本專利申請范圍內(nèi)描述的化合物可以通過方案1和方案2以及實施例所述的路線進行合成。
在方案1中，式(I)化合物可以根據(jù)Cragoe等人，J Med Chem，卷10，66-73頁(1967)；以及歐洲專利EP 0 017 152和美國專利號3,544,571所述的方法制備。例如，可以將中間體1與中間體2，其中A如上文所定義，在三乙胺存在下、于有機溶劑中反應得到游離堿形式的化合物3。接著將此游離堿用適宜的酸處理，轉(zhuǎn)化為鹽形式。這些中間體可以根據(jù)本領(lǐng)域技術(shù)人員已知的方法制備，或者可從商業(yè)上購得。
方案1
式(I)化合物也可以根據(jù)方案2，通過將中間體1與單保護的二胺(中間體2)在三乙胺存在下、于有機溶劑中反應，得到化合物3。隨后使用常規(guī)的脫保護方法將中間體3脫保護，得到中間體4。中間體4可以與M2-J反應得到化合物5，其中M2如上文所定義。P表示標準的氨基保護基，例如Boc、CBz、乙酸酯，并且通過標準的方法脫保護。J表示可以與胺反應的基團，例如鹵素、硫醚、羧酸、異氰酸酯、磺酰氯、醛類和酮類。
方案2
游離形式的式(I)化合物可以通過本領(lǐng)域技術(shù)人員所了解的常規(guī)方法轉(zhuǎn)化為鹽形式，并且反之亦然。游離形式或鹽形式的這類化合物可以以水合物或包含用于結(jié)晶的溶劑的溶劑化物形式得到?？梢詮姆磻旌衔镏谢厥帐?I)的化合物，并用常規(guī)方法純化?？捎贸Ｒ?guī)方法如分步結(jié)晶法或從相應的不對稱取代的(例如光學活性的)原料進行不對稱合成得到異構(gòu)體，例如立體異構(gòu)體。
藥理學活性 由于其對上皮的鈉通道(ENaC)的阻滯作用，游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物，或者在下文中稱作“本發(fā)明的活性劑”，用于治療對阻斷上皮鈉通道有響應的病癥、特別是受益于粘膜水化作用的病癥。
通過阻斷上皮鈉通道來調(diào)節(jié)的疾病包括與調(diào)節(jié)通過上皮膜的流體體積相關(guān)的疾病。例如，氣道表面液體的體積是粘膜纖毛清除和保持肺健康的關(guān)鍵調(diào)節(jié)因素。阻斷上皮鈉通道會促進氣道上皮粘膜一側(cè)的流體蓄積，由此促進粘液清除和防止粘液和痰在呼吸組織(包括肺氣道)中的蓄積。這類疾病包括呼吸疾病，如囊性纖維化、原發(fā)性纖毛運動障礙、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺病(COPD)、哮喘、呼吸道感染(急性和慢性；病毒性和細菌性)和肺癌。通過阻斷上皮鈉通道調(diào)節(jié)的疾病除了呼吸疾病，還包括與異常的通過上皮的流體調(diào)節(jié)相關(guān)的疾病，可能涉及其表面上的保護性表面液體的異常生理學，例如口腔干燥癥(口干燥)或男性角膜結(jié)膜炎(干眼)。此外，阻斷腎的上皮鈉通道可以用于促進利尿并由此誘導降血壓作用。
根據(jù)本發(fā)明的治療可以是對癥治療或預防性治療。
哮喘包括內(nèi)源性(非過敏性)哮喘和外源性(過敏性)哮喘、輕度哮喘、中度哮喘、重度哮喘、支氣管哮喘、運動誘發(fā)的哮喘、職業(yè)性哮喘和由細菌感染誘發(fā)的哮喘。哮喘的治療還應理解為包括對于例如不足4或5歲的、顯示出哮鳴癥狀和已診斷或可被診斷為“喘鳴嬰兒”、確立為主要醫(yī)療關(guān)注類型和現(xiàn)在經(jīng)常鑒定為初期或早期哮喘的患者的治療。(為了方便，將這種特定的哮喘病癥稱為“喘鳴嬰兒綜合征”。) 治療哮喘的預防性功效將通過降低例如急性哮喘或支氣管收縮的癥狀發(fā)作的頻率和嚴重度、改善肺功能或改善氣道高反應性來證實。還可以通過減少其它的對癥治療(即當癥狀發(fā)生時用于或試圖用來限制或中止癥狀發(fā)作的治療)例如抗炎(如皮質(zhì)類固醇)或支氣管擴張的需求來證明。哮喘的預防益處對于易發(fā)生“晨降”的患者特別明顯?！俺拷怠笔且呀?jīng)識別的哮喘綜合征，常見于很大比例的哮喘患者，其特征在于例如上午4-6點的時間內(nèi)哮喘發(fā)作，即在進行任何預先給藥的哮喘對癥療法通常必要間隔的某段時間內(nèi)發(fā)作。
慢性阻塞性肺病包括慢性支氣管炎或與之相關(guān)的呼吸困難、肺氣腫、和其它藥物療法特別是其它吸入性的藥物療法所導致的氣道高反應性加重。本發(fā)明還可應用于治療任何類型或起源的支氣管炎，包括例如急性支氣管炎、花生仁吸入性支氣管炎、卡他性支氣管炎、格魯布性支氣管炎、慢性或結(jié)核性支氣管炎。
使用Bridges等人，Am J Physiol Lung Cell Mol Physiol，Vol.281，No.1，L16-L23頁(2001)和Donaldson等人，J Biol Chem，Vol.277，No.10，8338-8345頁(2002)所述的方法，可以在適當?shù)姆蛛x細胞或匯合上皮中通過測定通道激活蛋白酶抑制劑對離子通道/離子轉(zhuǎn)運功能的抑制作用，來測試上皮鈉通道阻滯劑作為受益于粘膜水化的疾病的療法的適用性。
上皮鈉通道阻滯劑，包括式(I)的化合物在內(nèi)，特別是在治療囊性纖維化或阻塞性或炎癥性氣道疾病(例如上文所述的那些疾病)中，也用作與其它藥物如抗炎藥、支氣管舒張藥、抗組胺藥或鎮(zhèn)咳藥聯(lián)用的共同治療劑，例如作為所述藥物的治療活性增強劑，或作為減少所述藥物所需劑量或潛在副作用的手段。
可以將所述的上皮鈉通道阻滯劑與其它藥物混合成固定的藥物組合物，或者可以在另一種藥物給藥之前、同時或之后單獨給藥。
因此，本發(fā)明包括上皮鈉通道阻滯劑與抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥、鎮(zhèn)咳藥、抗生素或DNase藥物的組合產(chǎn)品，所述的上皮鈉通道阻滯劑和所述的藥物可以存在于同一種或不同的藥物組合物中。
合適的抗生素包括大環(huán)內(nèi)酯類抗生素，例如妥布霉素(TOBITM)。
合適的DNase藥物包括阿法鏈道酶(PulmozymeTM)，即選擇性裂解DNA的重組人脫氧核糖核酸酶I(rhDNase)的高度純化的溶液。阿法鏈道酶用于治療囊性纖維化。
其它有用的上皮鈉通道阻滯劑與抗炎藥的組合產(chǎn)品是那些與下述趨化因子受體拮抗劑組合的產(chǎn)品例如CCR-1、CCR-2、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR-6、CCR-7、CCR-8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5，特別是CCR-5拮抗劑，如先靈-葆雅公司(Schering-Plough)的拮抗劑SC-351125、SCH-55700和SCH-D；日本武田公司(Takeda)的拮抗劑，如N-[[4-[[[6，7-二氫-2-(4-甲基-苯基)-5H-苯并環(huán)庚烯-8-基]羰基]氨基]苯基]-甲基]四氫-N，N-二甲基-2H-吡喃-4-銨氯化物(TAK-770)；和USP 6,166,037(特別是權(quán)利要求18和19所述)、WO00/66558(特別是權(quán)利要求8所述)、WO 00/66559(特別是權(quán)利要求9所述)、WO 04/018425和WO 04/026873中所述的CCR-5拮抗劑。
合適的抗炎藥包括甾類，特別是糖皮質(zhì)激素，如布地奈德、丙酸倍氯米松、丙酸氟替卡松、環(huán)索奈德或糠酸莫米松；或描述于下列文獻中的甾類WO 02/88167、WO 02/12266、WO 02/100879、WO 02/00679(尤其是實施例3、11、14、17、19、26、34、37、39、51、60、67、72、73、90、99和101中的那些化合物)，WO 03/35668、WO 03/48181、WO03/62259、WO 03/64445、WO 03/72592、WO 04/39827和WO 04/66920；非甾類糖皮質(zhì)激素受體激動劑，如下列文獻所述的化合物DE 10261874、WO 00/00531、WO 02/10143、WO 03/82280、WO 03/82787、WO 03/86294、WO 03/104195、WO 03/101932、WO 04/05229、WO 04/18429、WO 04/19935和WO 04/26248；LTD4拮抗劑，如孟魯司特和扎魯司特；PDE4抑制劑，如西洛司特(
葛蘭素史克公司(GlaxoSmithKline))、羅氟司特(BykGulden)、V-11294A(Napp)、BAY19-8004(拜爾公司(Bayer))、SCH-351591(先靈-葆雅公司(Schering-Plough))、阿羅茶堿(Almirall Prodesfarma)、PD189659/PD168787(Parke-Davis)、AWD-12-281(Asta Medica)、CDC-801(Celgene)、SelCID(TM)CC-10004(Celgene)、VM554/UM565(Vernalis)、T-440(Tanabe)、KW-4490(Kyowa Hakko Kogyo)和下列文獻所述的那些化合物WO 92/19594、WO 93/19749、WO 93/19750、WO93/19751、WO 98/18796、WO 99/16766、WO 01/13953、WO 03/104204、WO 03/104205、WO 03/39544、WO 04/000814、WO 04/000839、WO04/005258、WO 04/018450、WO 04/018451、WO 04/018457、WO 04/018465、WO 04/018431、WO 04/018449、WO 04/018450、WO 04/018451、WO 04/018457、WO 04/018465、WO 04/019944、WO 04/019945、WO04/045607和WO 04/037805；腺苷A2B受體拮抗劑，如WO 02/42298中所述的那些；和β-2腎上腺素受體激動劑，如沙丁胺醇(舒喘靈)、奧西那林、特布他林、沙美特羅、非諾特羅、丙卡特羅，并且尤其是福莫特羅、卡莫特羅，及其藥學上可接受的鹽，和WO 0075114中的式(I)化合物(游離形式或鹽或溶劑化物形式)，該文獻引入本文作為參考，優(yōu)選其實施例中的化合物，尤其是對應于茚達特羅(indacaterol)的下式的化合物及其藥學可接受的鹽
和WO 04/16601中的式(I)化合物(游離形式或鹽或溶劑合物形式)，以及下列文獻中的化合物EP 1440966，JP 05025045，WO 93/18007，WO99/64035，USP 2002/0055651，WO 01/42193，WO 01/83462，WO 02/66422，WO 02/70490，WO 02/76933，WO 03/24439，WO 03/42160，WO 03/42164，WO 03/72539，WO 03/91204，WO 03/99764，WO 04/16578，WO 04/22547，WO 04/32921，WO 04/33412，WO 04/37768，WO 04/37773，WO 04/37807，WO 04/39762，WO 04/39766，WO 04/45618，WO 04/46083，WO 04/80964，WO 04/108765和WO 04/108676。
合適的支氣管擴張藥包括抗膽堿能藥或抗毒蕈堿藥，特別是異丙托溴銨、氧托溴銨、噻托溴銨鹽和CHF 4226(凱西公司(Chiesi))和格隆溴銨，還有描述在下列文獻中的化合物EP 424021、USP 3,714,357、USP5,171,744、WO 01/04118、WO 02/00652、WO 02/51841、WO 02/53564、WO 03/00840、WO 03/33495、WO 03/53966、WO 03/87094、WO 04/018422和WO 04/05285。
合適的雙重抗炎和支氣管擴張藥包括雙重β-2腎上腺素受體激動劑/毒蕈堿拮抗劑，例如在USP 2004/0167167、WO 04/74246和WO 04/74812中公開的那些化合物。
合適的抗組胺藥物包括鹽酸西替利嗪、對乙酰氨基酚、富馬酸氯馬斯汀、異丙嗪、氯雷他定、地氯雷他定、苯海拉明和鹽酸非索非那定、阿伐斯汀(activastine)、阿司咪唑、氮卓斯汀、依巴斯汀、依匹斯汀、咪唑斯汀和特芬那定(tefenadine)，以及JP 2004107299、WO 03/099807和WO04/026841中公開的那些化合物。
本發(fā)明的活性劑與抗炎藥的其它有用組合產(chǎn)品是與下述趨化因子受體拮抗劑的那些組合產(chǎn)品例如CCR-1、CCR-2、CCR-3、CCR-4、CCR-5、CCR-6、CCR-7、CCR-8、CCR-9和CCR10、CXCR1、CXCR2、CXCR3、CXCR4、CXCR5的拮抗劑，特別是CCR-5拮抗劑，如先靈-葆雅公司的拮抗劑SC-351125、SCH-55700和SCH-D；日本武田公司的拮抗劑，諸如N-[[4-[[[6，7-二氫-2-(4-甲基苯基)-5H-苯并-環(huán)庚烯-8-基]羰基]氨基]苯基]-甲基]四氫-N，N-二甲基-2H-吡喃-4-銨氯化物(TAK-770)，和描述在下列文獻中的那些CCR-5拮抗劑USP 6,166,037(特別是權(quán)利要求18和19)、WO00/66558(特別是權(quán)利要求8)、WO 00/66559(特別是權(quán)利要求9)、WO04/018425和WO 04/026873。
按照上文所述，本發(fā)明還提供了治療對阻斷上皮鈉通道有響應的病癥的方法，所述的病癥例如與調(diào)節(jié)通過上皮膜的流體體積相關(guān)的疾病，特別是阻塞性氣道疾病，所述方法包括向需要它的個體、特別是人類個體施用游離形式或藥學上可接受的鹽的形式的式(I)化合物。本發(fā)明另一方面提供了用于制備治療對阻斷上皮鈉通道有響應的病癥的藥物的游離形式或藥學上可接受鹽形式的式(I)化合物，所述的對阻斷上皮鈉通道有響應的病癥特別是阻塞性氣道疾病，例如囊性纖維化和COPD。
可以通過任何適宜的途經(jīng)施用本發(fā)明的活性劑，例如，以片劑或膠囊的形式口服給藥；例如，通過例如靜脈內(nèi)，進行胃腸外給藥；通過吸入給藥，例如用于治療阻塞性氣道疾??；通過鼻內(nèi)給藥，例如用于治療過敏性鼻炎；皮膚局部給藥；或通過直腸給藥。本發(fā)明另一方面還提供了藥物組合物，其包含游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物與任選地藥學上可接受的稀釋劑或載體。該組合物可以包含共同治療劑，例如上文所述的抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥或鎮(zhèn)咳藥。可以使用常規(guī)稀釋劑或賦形劑以及制劑領(lǐng)域中已知的工藝制備這類組合物。因此，口服劑型可以包括片劑和膠囊劑。用于局部給藥的制劑可以采用霜劑、軟膏劑、凝膠劑或透皮遞送系統(tǒng)如貼劑的形式。用于吸入的組合物可以包括氣霧劑或其它可霧化的制劑或干粉制劑。
當組合物包括氣霧劑制劑時，它優(yōu)選包含例如氫-氟-烷(HFA)拋射劑，如HFA134a或HFA227或它們的混合物，并且可以包含一種或多種本領(lǐng)域內(nèi)已知的共溶劑，如乙醇(最多達20重量％)，和/或一種或多種表面活性劑，如油酸或三油酸山梨坦，和/或一種或多種濕脹劑，如乳糖。當組合物包括干粉制劑時，它優(yōu)選包含例如粒徑最多10微米的式(I)化合物與任選地所需粒徑分布的稀釋劑或載體如乳糖，和幫助防止因濕度而使產(chǎn)品性能變質(zhì)的化合物，例如硬脂酸鎂。當組合物包括噴霧制劑時，它優(yōu)選包含例如溶解于或懸浮于溶媒中的式(I)化合物，所述的溶媒包含水、共溶劑如乙醇或丙二醇和穩(wěn)定劑，所述穩(wěn)定劑可以是表面活性劑。
本發(fā)明包括 (a)可吸入形式的式(I)化合物，所述的可吸入形式是例如氣霧劑或其它可霧化的組合物或可吸入微粒，例如微粉化的形式； (b)包含可吸入形式的式(I)化合物的可吸入藥物； (c)包含可吸入形式的式(I)化合物與吸入裝置的藥物產(chǎn)品；和 (d)包含可吸入形式的式I化合物的吸入裝置。
當然，用于實施本發(fā)明的式(I)化合物的劑量根據(jù)例如所治療的特定病癥、所需效果和給藥方式不同而改變。一般而言，用于吸入給藥的合適的日劑量為0.005-10mg，而用于口服給藥的合適的日劑量為0.05-100mg。
藥物用途和試驗 式(I)化合物及其藥學上可接受的鹽(或者在下文稱作“本發(fā)明的活性劑”)可用作藥物。具體來說，這些化合物具有良好的ENaC阻斷劑的活性，并且可以在下述試驗中進行檢驗。
細胞培養(yǎng) 在氣-液界面條件下培養(yǎng)人支氣管上皮細胞(HBEC)(Cambrex公司)以提供分化良好的粘膜纖毛表型。
使用Gray和同仁(Gray等，1996)所述方法的改進方法培養(yǎng)HBEC。將細胞接種在塑料的T-162培養(yǎng)瓶中，并在支氣管上皮細胞生長培養(yǎng)基(BEGM；Cambrex)中培養(yǎng)，所述培養(yǎng)基添加了牛垂體提取物(52μg/mL)、氫化可的松(0.5μg/mL)、人重組表皮生長因子(0.5ng/mL)、腎上腺素(0.5μg/mL)、轉(zhuǎn)鐵蛋白(10μg/mL)、胰島素(5μg/mL)、視黃酸(0.1μg/mL)、三碘甲狀腺原氨酸(6.5μg/mL)、慶大霉素(50μg/mL)和兩性霉素B(50ng/mL)。每48小時更換一次培養(yǎng)基，直到細胞達到90％匯合。然后將細胞傳代并接種(8.25×105個細胞/插入物)在分化培養(yǎng)基中的聚碳酸酯Snapwell插入物(Costar公司)上，所述的分化培養(yǎng)基包含50％的溶在BEGM中的DMEM和如上所述的相同添加物，但不含三碘甲狀腺原氨酸，并且視黃酸最終濃度為50nM(全反式視黃酸)。將細胞最初7天在培養(yǎng)基中浸沒培養(yǎng)，此后在剩余的培養(yǎng)期中使其暴露于頂層氣體界面。此時，將培養(yǎng)基換成用于剩余培養(yǎng)期的包含2％(v/v)Ultroser G的DMEM:F12培養(yǎng)基。在用于尤斯灌流室(Ussing chamber)之前，從所有培養(yǎng)基的3種接種物中除去兩性霉素B。在建立頂層氣體界面后第7-21天內(nèi)使用細胞。在所有培養(yǎng)階段，將細胞維持在37℃、5％CO2的空氣培養(yǎng)箱內(nèi)。
短路電流(ISC)測定 將Snapwell插入物固定在立式擴散室(Costar公司)中，并浸泡在維持于37℃下的持續(xù)通氣的林格溶液(5％CO2，在O2中；pH 7.4)中，所述林格溶液包含(以mM計)120NaCl，25NaHCO3，3.3KH2PO4，0.8K2HPO4，1.2CaCl2，1.2MgCl2和10葡萄糖。該溶液的等滲濃度為用于所有生理鹽溶液的280到300mOsmol/kg H2O之間。將細胞電壓鉗調(diào)到0mV(EVC4000型；WPI)。通過以30秒的間隔施加1-或2-mV脈沖并通過歐姆定律計算RT來測定RT。使用PowerLab工作站(AD Instruments公司)記錄數(shù)據(jù)。
將測試化合物制備為在DMSO中的10mM儲備液(95％)。用合適的溶媒(蒸餾水或林格溶液)新鮮制備3-倍的系列稀釋液。將在5μL中的1000×濃縮液加入到頂室中作為初始濃度，得到尤斯灌流室的5mL體積的最終1×濃度。隨后加入3.3μL體積的1000×的系列稀釋儲備液。在完成濃度-效應實驗時，將阿米洛利(10μM)加入到頂室中以便能夠測定總的阿米洛利-敏感性電流。在每次實驗開始時建立阿米洛利對照的IC50。
將結(jié)果表示為抑制阿米洛利-敏感性ISC的平均百分比(％)。繪制濃度-效應曲線并且使用GraphPad Prism 3.02得到IC50值。通常按兩份重復來使用細胞插入物和根據(jù)平均抑制％的數(shù)據(jù)計算IC50。
下文實施例的化合物一般在上述數(shù)據(jù)測定中具有低于10μM的IC50值。例如，實施例2和5的化合物分別具有0.0057和0.0002μM的IC50值。
通過以下實施例來解釋本發(fā)明。
實施例 一般條件 使用具有Waters Xterra MS C184.6×1005μM柱的Agilent 1100LC系統(tǒng)記錄LCMS，在2.5分鐘內(nèi)使用5-95％的在乙腈中的10mM碳酸氫銨水溶液洗脫，并使用陰離子電噴霧離子化，或使用5-95％的水+0.1％在乙腈中的TFA洗脫，并使用陽離子電噴霧離子化。[M+H]+和[M-H]-是指單同位素的分子量。
DMF二甲基甲酰胺 DMSO 二甲亞砜 Et3N 三乙胺 EtOAc 乙酸乙酯 HPLC高效液相色譜 MeOH甲醇 RT 室溫 TFA 三氟乙酸 HATU O-(7-氮雜苯并三唑-1-基)-N，N，N’，N’-四甲基脲鎓六氟磷酸鹽使用本文所述的方法制備了以下實施例。
表1
實施例1 3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-甲酸({4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基甲基]-哌啶-1-基}-亞氨基-甲基)-酰胺 向溶于DMF(1mL)的1-(3，5-二氨基-6-氯吡嗪甲?；?-2-甲基-2-異硫脲(thioseudourea)(II)(100mg，0.26mmol)溶液中加入4-氨基甲基哌啶(14.8mg，0.13mmol)和Et3N(146μL，1.04mmol)。在RT下持續(xù)攪拌18小時。將產(chǎn)物用反相柱色譜(歷經(jīng)20分鐘的0-100％的乙腈梯度，水相和有機相中均含有0.05％TFA改性劑)純化，得到標題產(chǎn)物的三氟乙酸鹽。
實施例2-5 按照類似于實施例1的方法，使用適宜的起始化合物進行制備。
實施例6 N-[2-(二-{2-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)胍基]-乙基}-氨基)-乙基]-N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍 向溶于DMF(5mL)的1-(3，5-二氨基-6-氯吡嗪甲?；?-2-甲基-2-異硫脲(II)(1g，2.58mmol)中加入三(2-氨基乙基)胺(125.8mg，0.86mmol)和Et3N(386μL，1.04mmol)。在RT下持續(xù)攪拌18小時。將反應物真空抽濾并濃縮濾液，將產(chǎn)物通過反相柱色譜(0-100％的乙腈梯度，歷經(jīng)20分鐘)純化，得到游離堿形式的標題化合物。
下表2中顯示了進一步優(yōu)選的式(Ia)化合物。制備方法描述在下文中。
表2
實施例7 3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-甲酸1-氨基-1-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-哌啶-1-基}-亞甲-(E)-基酰胺三氟乙酸鹽 步驟1
將哌啶-4-基胺(5.0mg，0.05mmol)與中間體A(0.06g，0.16mmol)在DMF(1.0mL)中的溶液在Et3N(25.3mg，0.25mmol)存在下反應，并將反應混合物在RT下攪拌過夜。加入氨基甲基聚苯乙烯和大孔異氰酸酯(清除樹脂)，并將混合物在室溫下振蕩過夜。過濾混合物并真空濃縮，得到產(chǎn)物。
步驟23，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-甲酸1-氨基-1-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-哌啶-1-基}-亞甲-(E)-基酰胺三氟乙酸鹽 將實施例7的步驟1的化合物(0.05mmol)用10％TFA在DCM(0.9mL)中的溶液處理，并將其置于RT下1小時。真空除去溶劑，將粗產(chǎn)物用制備型HPLC純化，以10-100％MeCN在水中的溶液(含0.1％TFA)洗脫，得到標題化合物。
實施例8-15 這些實施例是 N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-{3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基甲基]-環(huán)己基甲基}-胍三氟乙酸鹽(實施例8)， N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-{(2R，5S)-5-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基甲基]-[1，4]二噁烷-2-基甲基}-胍三氟乙酸鹽(實施例9)， N，N′-二-{2-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-乙基}-2，3-二羥基-對苯二甲酸酰胺三氟乙酸鹽(實施例10)， N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-[3-(4-{3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丙氧基}-苯氧基)-丙基]-胍三氟乙酸鹽(實施例11)， N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-[3-(4-{3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丙基}-哌嗪-1-基)-丙基]-胍三氟乙酸鹽(實施例12)， N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-[5-(5-{5-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-戊基}-吡嗪-2-基)-戊基]-胍三氟乙酸鹽(實施例13)， N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-[3-(9-{3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丙基}-2，4，8，10-四氧雜-螺[5.5]十一烷-3-基)-丙基]-胍三氟乙酸鹽(實施例14)和 N-(3-{芐基-[3-(芐基-{3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丙基}-氨基)-丙基]-氨基}-丙基)-N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍三氟乙酸鹽(實施例15)， 按照類似于實施例7的方法，使用適宜的二胺進行制備。
實施例16-19 這些實施例是 3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-甲酸1-氨基-1-{(R)-3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-吡咯烷-1-基}-亞甲-(E)-基酰胺三氟乙酸鹽(實施例16)， 3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-甲酸1-氨基-1-{(S)-3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-吡咯烷-1-基}-亞甲-(E)-基酰胺三氟乙酸鹽(實施例17)， N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-環(huán)己基}-胍三氟乙酸鹽(實施例18)和 N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基甲基]-環(huán)己基}-胍三氟乙酸鹽(實施例19)， 按照類似于實施例7的方法，另外向反應混合物中加入二氯化汞(2當量)在DMF中的溶液，使用適宜的二胺進行制備。在純化過程中通過加入清除樹脂，如氨基甲基聚苯乙烯、大孔異氰酸酯和固體載體的硅膠1-丙硫醇，來除去反應副產(chǎn)物。
實施例20 N-[3-(二-{3-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丙基}-氨基)-丙基]-N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍三氟乙酸鹽 按照類似于實施例7的方法，以二(2-氨基乙基)胺替換哌啶-4-基胺，從中間體A(3當量)制備該化合物。
實施例21 N，N′-二-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丁基}-對苯二甲酸酰胺溴化物 以中間體A替換1-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-2-甲基-異硫脲氫碘化物，按照類似于實施例1的方法制備該化合物。將所形成的Boc-保護的中間體用33％HBr在乙酸中的溶液進行脫保護。在純化過程中通過加入清除樹脂如氨基甲基聚苯乙烯和大孔異氰酸酯來除去反應副產(chǎn)物。
實施例22 N-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丁基}-2-[4-({4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丁基氨基甲酰基}-甲基)-苯基]-乙酰胺三氟乙酸鹽 步驟1制備下面的化合物
將1，4-苯二乙酸(24mg，0.125mmol)在DMF(0.75mL)和Et3N(0.2mL)中的溶液用HATU(95mg，0.25mmol)處理，并在RT下攪拌30分鐘。向該混合物中加入中間體B(0.1g，0.25mmol)并繼續(xù)攪拌30分鐘。將反應混合物通過1g AL-B固相萃取柱，用DMF(1.5mL)洗脫。真空除去溶劑，將粗的殘余物用MeOH重結(jié)晶，得到產(chǎn)物。[M+H]+959.74。
步驟2 N-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丁基}-2-[4-({4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丁基氨基甲酰基}-甲基)-苯基]-乙酰胺三氟乙酸鹽 將實施例22的步驟1的化合物(20mg，0.021mmol)用10％TFA在DCM(2mL)中的溶液處理，并將其置于RT下過夜。真空除去溶劑，將粗產(chǎn)物通過制備型HPLC純化，以10-100％MeCN在水中的溶液(含0.1％TFA)洗脫，得到標題化合物。
實施例23 1-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丁基}-3-[4-(3-{4-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-丁基}-脲基)-丁基]-脲 將中間體B(0.1g，0.25mmol)在DMF(1mL)中的溶液用1，4-二異氰酸基丁烷(17.5mg，0.125mmol)處理，并在RT下攪拌過夜。將反應混合物用0.1g氨基甲基聚苯乙烯和(0.1g)大孔異氰酸酯(清除樹脂)處理，并在RT下攪拌3天。過濾混合物并用制備型HPLC純化，得到標題化合物。[M+H]+741.34。
實施例24 N-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-N′-[5-(4-{5-[N′-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-胍基]-戊基}-哌嗪-1-基)-戊基]-胍 將5-[4-(5-氨基-戊基)-哌嗪-1-基]-戊基胺三氟乙酸鹽(中間體P)(172mg，0.24mmol)加入攪拌下的1-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-2-甲基-異硫脲氫碘化物(93mg，0.48mmol)在DMF(1mL)的溶液中。將所得混合物加熱至50℃持續(xù)8小時，接著將其冷卻到室溫。將反應混合物用5％的檸檬酸溶液猝滅并加入DCM，導致形成樹膠狀物。分離該樹膠狀物并將其溶于MeOH(2mL)。將溶液通過SCX-2柱“捕獲釋放(capture release)”，依次以1N的氨在MeOH中的溶液和1∶1的MeOH:氨溶液洗脫，得到標題化合物。
本發(fā)明更優(yōu)選的化合物還包括式(Ib)的化合物，其在下表3中顯示。在下文中描述了其制備方法。
表3
本發(fā)明更進一步優(yōu)選的化合物在下表4中顯示。在下文中描述了其制備方法。
表4
本發(fā)明更優(yōu)選的化合物還包括式(Ic)的化合物，其顯示于下表5中。在下文中描述了制備方法。
表5
按照下面所示的方案，制備表3-5中所示的實施例 方案3
圖中所示的中間體的制備描述于中間體部分。
Y1AY2可以利用單保護的二胺和中間體2而變化。在上面的圖中對其進行了說明。其中，P1和P2代表不同的標準的胺保護基如Boc、CBz、乙酸酯，并且通過標準方法脫保護。其中J表示能夠與胺反應的基團，例如鹵素、羧酸、異氰酸酯、磺酰氯、醛類和酮類、甲磺酸酯。X代表鹵素、OH、酯或由于使用偶合劑如EDCI而衍生的活化的酯類。當這些試劑無法從商業(yè)上購買時，可以通過本領(lǐng)域已知的通用方法來合成它們。
方案4
Y1AY2可以利用單胺和中間體2而變化。J表示能夠與胺反應的基團，例如鹵素、羧酸。
按照方案3和4，采用表中所指定的、在下文中描述的路線，利用適宜的中間體G、H或K制備表3-5中所示的實施例。
路線1 將二酰氯或三酰氯(1當量)加入攪拌下的中間體H(2當量)和Et3N(3當量)在DMF(10體積)的溶液中。反應完成后用水猝滅該溶液，通過過濾分離產(chǎn)物(中間體I)。
路線2 將EDCI(1當量)加入攪拌下的二酸或三酸(1當量)在DMF(10體積)的溶液中。將N-乙基-嗎啉(3當量)和中間體G(2當量)加入，并加熱反應物。反應完成后，用NaHCO3溶液猝滅反應，通過過濾分離產(chǎn)物(中間體I)。
路線3 將二異氰酸酯(1當量)加入攪拌下的中間體H(2當量)和Et3N(2.5當量)在DCM(40體積)的溶液中。將反應加熱回流8小時，并通過過濾分離產(chǎn)物(中間體I)。
路線4 將二苯基磷?；B氮化物(1當量)加入攪拌下的二酸或三酸(1當量)、Et3N(2當量)和中間體H在DCM(40體積)的溶液中。將反應加熱回流8小時。通過過濾從冷卻的反應混合物中分離產(chǎn)物(中間體I)。
路線5 將二胺(1當量)加入二-4-硝基苯基碳酸酯(2當量)在DMF的溶液中。將反應放置攪拌1-2小時，加入中間體H并加熱反應物。反應完成后，用水猝滅反應，通過過濾分離粗產(chǎn)物(中間體I)，并通過快速柱色譜純化。
路線6 將中間體K(2當量)加入攪拌下的二胺(1當量)和三乙胺(2當量)在DMF的溶液中。反應完成后，用水猝滅反應，通過過濾或DCM萃取分離產(chǎn)物(中間體L)。
路線7 將二磺酰氯(1當量)加入攪拌下的中間體H(2當量)在DMF的溶液中。反應完成后，用水猝滅反應，通過過濾分離產(chǎn)物(中間體I)。
注可以按照文獻例如Org Synth，coll Vol 1，84頁(1941)所述的方法，通過將磺酸與氯化劑如SOCl2、PCl5、POCl3反應獲得磺酰氯。
在方法1和2中描述了將中間體I和中間體L脫保護以得到表3-5所示實施例的一般方法的例子 方法1 將中間體I或中間體L(1當量)溶于33％的HBr/乙酸(50體積)，并在50℃下加熱8小時。產(chǎn)物冷卻后，通過過濾或用THF研磨進行分離。
方法2 將中間體I或中間體L懸浮于DCM(20體積)中，并加入TMSI(1.5當量)。將反應加熱至40℃持續(xù)2-4小時，隨后在室溫下用MeOH猝滅。將溶液置于室溫攪拌2-3小時，過濾所得沉淀，真空干燥，得到產(chǎn)物。
路線8 或者，可以按照類似于實施例1的方法，使用適宜的二胺合成表3-5中所示的化合物。所述二胺(中間體O)從中間體N制備，后者可以使用文獻中所述的標準方法從單保護的胺經(jīng)步驟1a-e合成，所述步驟描述于下文的中間體部分。按照標準方法脫保護，同時與1-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-2-甲基-異硫脲氫碘化物反應，得到化合物P。
從中間體M制備的化合物制備如下 將中間體O(1當量)加入攪拌下的1-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-2-甲基-異硫脲氫碘化物(2當量)在DMF(10體積)的溶液中。將所得混合物加熱到50℃持續(xù)8小時，接著將其冷卻到室溫。反應混合物用5％檸檬酸溶液猝滅，并在加入DCM后分離粗產(chǎn)物(P)。通過將其溶于MeOH并利用SCX-2柱“捕獲釋放”，經(jīng)1N的氨在MeOH中的溶液洗脫得到標題化合物。
從單保護的胺制備的化合物制備如下 將中間體O(1當量)加入攪拌下的1-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-2-甲基-異硫脲氫碘化物(2當量)在DMF(10體積)的溶液中。將所得混合物加熱到50℃。反應完成后用水猝滅，通過過濾分離產(chǎn)物(P)。
本發(fā)明進一步優(yōu)選的化合物包括式(X)的化合物，其如下表6所示。這些化合物按照下面方案X所述的多個平行的反應順序進行制備。在下文中描述了制備這些化合物的方法。
表6
方案X
步驟1 使用標準的肽偶合劑，將中間體H與Boc-保護的氨基酸(商業(yè)上可購買或從商業(yè)上可購買的氨基酸制備)反應，得到中間體X1。
步驟2 使用TFA將中間體X1脫保護，得到中間體X2。
步驟3 使用形成脲的試劑(例如CDI、二(對-硝基苯基)碳酸酯)，將中間體X2與中間體H反應，得到中間體X3。
步驟4 使用HBr/乙酸將中間體X3脫保護，得到式(X)的化合物。
本發(fā)明進一步優(yōu)選的化合物包括式(Y)的化合物，其顯示于下表7。這些化合物按照下面方案Y所述的多個平行的反應順序進行制備
表7
方案Y
步驟1 將中間體F2與氨基烷基甲酸叔丁酯(商業(yè)上可購買或從商業(yè)上可購買的氨基酸制備)反應，得到中間體Y1。
步驟2 使用TFA將中間體Y1脫保護，得到中間體Y2。
步驟3 使用肽偶合劑將中間體X2與中間體Y2反應，得到中間體Y3。
步驟4 使用HBr/乙酸將中間體Y3脫保護，得到最終化合物Y。
本發(fā)明進一步優(yōu)選的化合物包括式Z的化合物，其顯示于下表8。這些化合物按照下面方案Z所述的多個平行的反應順序進行制備。在下文中描述了制備這些化合物的方法。
表8
方案Z
步驟1 將中間體H與適宜的異氰酸酯[按照JOC，Vol.68，No.19，7274頁(2003)制備]反應，得到中間體Z1。
步驟2 使用哌啶從中間體Z1脫去保護基，得到中間體Z2。
步驟3 使用形成脲的試劑(例如CDI、二(對-硝基苯基)碳酸酯)，將中間體Z2與中間體H反應，得到中間體Z3。
步驟4 使用HBr/乙酸將中間體Z3脫保護，得到最終化合物Z。
本發(fā)明進一步優(yōu)選的化合物還包括式(T)的化合物，其顯示于下表9。在下文中描述了制備這些化合物的方法。
表9
實施例857 將中間體R(15mg，16μmol)溶解于(0.75mL)溴化氫(33％(w/w)，在乙酸中的溶液)并在室溫下攪拌過夜。通過反相柱色譜(IsoluteTM C18，0-30％乙腈/水，含0.1％TFA)純化后，得到標題化合物。(MH+678.28)。
實施例857-897 這些實施例制備如下 將中間體A和相應的中間體S在無水DMF中的混懸液用TEA處理，并加熱到65℃持續(xù)96小時。將反應混合物冷卻到室溫，并通過反相柱色譜(IsoluteTM C18，0-100％乙腈/水，含0.1％TFA)純化產(chǎn)物。包含產(chǎn)物的流份在真空下濃縮。將所得固體溶于4M的HCl(在二噁烷中)，攪拌過夜。將反應混合物真空濃縮，得到標題化合物。
本發(fā)明進一步優(yōu)選的化合物還顯示于下表10。在下文中描述了制備方法。
表10
中間體的制備 中間體A
將包含1-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-2-甲基-異硫脲氫碘化物(11.4g，29mmol)、4-二甲基氨基吡啶(0.87g，7mmol)、Et3N(20mL)在THF(400mL)中的混懸液在攪拌下用二碳酸二叔丁酯(12g，55mmol)在THF(100mL)中的溶液一次性地處理。所得混合物在RT下攪拌過夜，真空濃縮。將粗產(chǎn)物分配在EtOAc(50mL)和水(50mL)中，并在RT下攪拌10分鐘。過濾該混懸液，用水(5mL)、EtOAc(20mL)洗滌，在40℃下真空干燥，得到標題化合物。[M+H]+361.05。
中間體B
步驟1 將包含中間體A(6.55g，18.2mmol)、N-Z-1，4-二氨基丁烷鹽酸化物(4.7g，18.2mmol)和Et3N(20mL)在DMF(300mL)中的溶液在RT下攪拌過夜。真空除去溶劑并將粗的殘余物溶于EtOAc(700mL)，用水(2×200mL)、鹽水(100mL)洗滌，干燥(MgSO4)并真空濃縮。通過將產(chǎn)物從EtOAc(400mL)中重結(jié)晶純化，得到黃色固體狀的產(chǎn)物。
步驟2 將在甲醇(500mL)中的懸浮液(6.7g，12.5mmol)加熱到40℃以形成混濁液。將此溶液置于氬氣氛下并用10％的鈀/碳處理。接著將此混合物置于氫氣氛下過夜，繼而過濾。真空濃縮濾液并將所得固體懸浮于EtOAc(20mL)，過濾得到綠色固體狀的標題化合物。[M+H]+401.34。
中間體C N，N′-二-(4-氨基-丁基)-對苯二甲酸酰胺 步驟1 {4-[4-(4-叔丁氧基羰基氨基-丁基氨基甲?；?-苯甲?；被鵠-丁基}-氨基甲酸叔丁酯 將對苯二酰氯(5.0g，0.0246mol)在無水DMF(100mL)中的溶液用N-Boc-1，4-二氨基丁烷(9.418mL，0.0493mol)處理并在RT下攪拌30分鐘。加入Et3N(10.298mL，0.0739mol)并持續(xù)攪拌過夜。將所得混合物用去離子水(100mL)稀釋，隨后在RT下攪拌30分鐘，過濾該混合物。將濾餅用水稀釋并真空干燥(40℃)，得到標題化合物。
步驟2 N，N′-二-(4-氨基-丁基)-對苯二甲酸酰胺 將{4-[4-(4-叔丁氧基羰基氨基-丁基氨基甲?；?-苯甲酰基氨基]-丁基}-氨基甲酸叔丁酯(0.49g)用純TFA(5mL)處理，并將其置于RT下過夜。真空下除去所述的酸，得到黃色固體狀的標題化合物?；蛘?，可以使用33％的HBr/乙酸進行脫保護。[M+H]+307.22。
中間體D N1-{3-[(3-氨基-丙基)-芐基-氨基]-丙基}-N1-芐基-丙烷-1，3-二胺二鹽酸化物 步驟1 3-(芐基-{3-[芐基-(2-氰基-乙基)-氨基]-丙基}-氨基)-丙腈 將包含N，N′-二芐基-丙烷-1，3-二胺二鹽酸化物(31g，95mmol)和乙酸鈉(15.6g，190mmol)在MeOH(315mL)中的混懸液用乙酸(5.7mL)處理，隨后歷經(jīng)20分鐘滴加丙烯腈。將所得混懸液在70℃下攪拌10小時，接著在RT下攪拌10小時。通過過濾除去懸浮物，用很小體積的甲醇洗滌，濾液真空濃縮并將粗的殘余物溶于乙醚，用碳酸鈉溶液洗滌。將有機部分干燥(MgSO4)并真空濃縮。粗產(chǎn)物通過硅膠色譜純化，以1∶1的己烷:EtOAc洗脫，得到黃色油狀的標題化合物。
步驟2 N1-{3-[(3-氨基-丙基)-芐基-氨基]-丙基}-N1-芐基-丙烷-1，3-二胺二鹽酸化物 將3-(芐基-{3-[芐基-(2-氰基-乙基)-氨基]-丙基}-氨基)-丙腈(26.6g，73.8mmol)在EtOH(500mL)中的溶液用拉尼鎳(10g)處理，并在室溫下置于氫氣氛下20小時。過濾反應混合物并將濾液真空濃縮。將粗的殘余物溶于EtOH(100mL)，用1.8M HCl的乙醇溶液處理。所得混懸液冷卻到0℃，并通過過濾收集。將固體用冷的EtOH/乙醚洗滌，真空干燥，得到標題化合物。
中間體E N，N′-二-(2-氨基-乙基)-2，3-二羥基-對苯二甲酸酰胺二鹽酸化物 將2，3-二羥基-對苯二甲酸二甲酯(2.26g，10mmol)在乙二胺(50mL)中的溶液加熱回流過夜。在冷卻到RT后，真空除去溶劑并將粗的殘余物溶于MeOH(50mL)。將溶液用冰浴冷卻，通入HCl氣體，直到pH被調(diào)節(jié)到pH7。將所得混懸液過濾并用冷的MeOH洗滌，得到標題化合物。
中間體F 向攪拌下的1-(3，5-二氨基-6-氯-吡嗪-2-羰基)-2-甲基-異硫脲氫碘化物(50g，0.129mol)在無水THF(1L)的溶液中加入Et3N(18mL，0.129mol)，隨后加入N-(芐氧基羰基氧基)-琥珀酰亞胺(32.1g，0.129mol)。接著將反應混合物加熱回流(66℃)6小時。將反應物冷卻到室溫，繼而真空濃縮得到黃色固體。將粗產(chǎn)物懸浮于EtOAc(500mL)和水(500mL)中，劇烈地研磨30分鐘。將所得混懸液過濾并在真空干燥箱(40℃)通過P2O5干燥，得到淺黃色固體狀的產(chǎn)物。將EtOAc層歷經(jīng)48小時的時間進行冷卻(4℃)，從中獲得第二批產(chǎn)物(10g)。(MH+；394.77和396.79)。
中間體G
將中間體F(1當量)加入到在攪拌下的適宜的單-Boc保護的胺(例如丙二胺、丁二胺或戊二胺)(1當量)在THF(20體積)的溶液中。將反應加熱到60℃持續(xù)8小時。通過過濾從冷卻的反應混合物中分離粗產(chǎn)物，并通過快速柱色譜純化，以(9∶1 DCM∶MeOH)洗脫。
中間體H
使用1∶1的TFA和DCM的溶液(20體積)，將中間體G脫保護。用NaHCO3溶液中和并用DCM萃取，經(jīng)真空干燥得到預期的產(chǎn)物。
中間體J 將氨基丙醇或氨基丁醇或氨基戊醇(1當量)加入攪拌下的中間體F(1當量)在THF(10體積)的溶液中。反應完成后，將反應混合物用EtOAc稀釋，并用5％的檸檬酸溶液、鹽水和水洗滌。真空濃縮有機相，并將所得物質(zhì)以粗產(chǎn)物的形式使用或利用快速柱色譜純化。
中間體K 將甲磺酰氯(1當量)加入攪拌下的中間體J(1當量)和Et3N(3當量)在DCM的溶液中。反應完成后，用NaHCO3溶液猝滅反應。將DCM層通過硫酸鎂干燥并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，其通過快速柱色譜進行純化。
中間體M 將甲磺酰氯(1當量)加入攪拌下的N-Boc丙-1-醇、N-Boc丁-1-醇或N-Boc戊-1-醇(1當量)和Et3N(3當量)在DCM的溶液中。反應完成后，用NaHCO3溶液猝滅反應。將DCM層通過硫酸鎂干燥并真空濃縮，得到粗產(chǎn)物，其以粗產(chǎn)物的形式使用或通過快速柱色譜進行純化。
中間體N 步驟1a 將二酰氯或三酰氯(1當量)加入到攪拌下的N-Boc丙二胺、N-Boc丁二胺或N-Boc戊二胺(2當量)和Et3N(3當量)在DMF(10體積)的溶液中。反應完成后，用NaHCO3水溶液猝滅反應并將產(chǎn)物(中間體Na)用DCM萃取和真空濃縮。
步驟1b 將EDCI(1當量)加入到攪拌下的二酸或三酸(1當量)在DMF(10體積)的溶液中。加入N-乙基-嗎啉(3當量)和N-Boc丙二胺、N-Boc丁二胺或N-Boc戊二胺(2當量)并加熱反應物。反應完成后，用NaHCO3溶液猝滅反應并將產(chǎn)物(中間體Nb)用DCM萃取和真空濃縮。
步驟1c 將二異氰酸酯(1當量)加入到攪拌下的N-Boc丙二胺、N-Boc丁二胺或N-Boc戊二胺(1當量)和Et3N(2.5當量)在DMF(40體積)的溶液中。將反應物加熱回流8小時，并通過過濾分離產(chǎn)物(中間體Nc)。
步驟1d 將二苯基磷?；B氮化物(1當量)加入攪拌下的二酸或三酸(1當量)、Et3N(2當量)和N-Boc丙二胺、N-Boc丁二胺或N-Boc戊二胺在DCM(40體積)的溶液中。將反應物加熱回流8小時。通過過濾從冷卻的反應混合物中分離產(chǎn)物(中間體Nd)或通過快速柱色譜純化產(chǎn)物。
步驟1e 將二胺(1當量)加入二-4-硝基苯基碳酸酯(2當量)在DMF的溶液中。將反應置于攪拌下1-2小時，加入N-Boc丙二胺、N-Boc丁二胺或N-Boc戊二胺并加熱反應物。反應完成后，用水猝滅反應，過濾分離粗產(chǎn)物(中間體Ne)并通過快速柱色譜純化。
步驟1f 將N-Boc丙胺甲磺酸鹽、N-Boc丁胺甲磺酸鹽或N-Boc戊胺甲磺酸鹽基(2當量)加入攪拌下的二胺(1當量)和三乙胺(2當量)在DMF的溶液中。反應完成后，用水猝滅反應，通過過濾或用DCM萃取或通過快速柱色譜分離產(chǎn)物(中間體Ng)。
中間體N(從中間體M制備) 將二磺酰氯(1當量)加入攪拌下的中間體M(2當量)在DMF的溶液中。反應完成后，用水猝滅反應，通過過濾或通過快速柱色譜分離產(chǎn)物(中間體N)。
中間體O 將中間體N溶于DCM(5體積)，并將TFA(2-5體積)加入。反應完成后，通過濃縮和甲苯共沸法分離產(chǎn)物(中間體O)。
中間體P 5-[4-(5-氨基-戊基)-哌嗪-1-基]-戊基胺 步驟1 (5-甲磺酰基氨基-戊基)-氨基甲酸叔丁酯 將甲磺酰氯(0.4mL，5.3mmol)加入攪拌下的Boc-氨基戊醇(1.0g，4.9mmol)和Et3N(1.68mL，15mmol)在DCM(10mL)的溶液中。將反應物在室溫下攪拌1小時，接著用碳酸氫鈉溶液猝滅，有機相用5％檸檬酸溶液洗滌。所得有機相用硫酸鎂干燥并真空濃縮，得到粘稠的黃色油狀的標題化合物。
步驟2 {5-[4-(5-叔丁氧基羰基氨基-戊基)-哌嗪-1-基]-戊基}-氨基甲酸叔丁酯 將(5-甲磺?；被?戊基)-氨基甲酸叔丁酯(500mg，1.7mmol)溶于DMF(10mL)中并加入Et3N(0.286mL，2.6mmol)和哌嗪(73mg，0.85mmol)。將反應物在100℃加熱4小時，接著在冷卻后用水猝滅。將反應混合物用DCM萃取，并將有機部分真空濃縮和在真空下干燥，得到固體的標題化合物。
步驟3 5-[4-(5-氨基-戊基)-哌嗪-1-基]-戊基胺三氟乙酸鹽 將{5-[4-(5-叔丁氧基羰基氨基-戊基)-哌嗪-1-基]-戊基}-氨基甲酸叔丁酯(329mg，0.72mmol)在DCM(10mL)中的溶液用三氟乙酸(1mL)處理。將反應物在室溫下攪拌4天，接著真空除去溶劑。該物質(zhì)以粗產(chǎn)物形式使用，并假設(shè)該轉(zhuǎn)化定量產(chǎn)生5-[4-(5-氨基-戊基)-哌嗪-1-基]-戊基胺。
中間體Q
將2，4-二氯-1，3，5-三嗪(15.5mg，010mmol)溶于N-甲基-2-吡咯酮(2mL)中并冷卻到0℃。將中間體H(90mg，0.21mmol)在N-甲基-2-吡咯酮(1mL)中的溶液加入反應混合物，并在室溫下攪拌過夜。將反應混合物通過反相柱色譜(IsoluteTM C18，0-100％乙腈的水溶液，含0.1％TFA)純化。接著從純流分中真空除去乙腈，并將所得水溶液分配在二氯甲烷和NaHCO3(水溶液)中。濾去兩層間所形成的固體，真空干燥，得到標題化合物。(MH+946.4)。
中間體R
其中，
使用Rankovic，Zoran；Cai，Jiaqiang；Cumming，Iain用于治療骨質(zhì)疏松癥和動脈粥樣硬化的2-氰基-1，3，5-三嗪-4，6-二胺衍生物的制備(WO2005/011703A1，第6頁)中所述的方法，制備中間體R。
中間體S
其中，
通過將中間體R與2當量的(4-氨基-丁基)-氨基甲酸叔丁酯在60℃下、于N-甲基-2-吡咯酮中反應1小時，隨后加入4M的HCl(在二噁烷中)并攪拌過夜來制備這些中間體。經(jīng)常規(guī)方法純化，得到所需的三嗪二胺產(chǎn)物。
權(quán)利要求
1.式(I)的化合物
或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或溶劑化物或藥學上可接受的鹽，
其中
M、M1和M2獨立地是
R1、R2、R3和R4獨立地選自H、C1-C8-烷基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、4-到14-元雜環(huán)基團、被4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基，或
R1和R2與它們所連接的氮原子形成任選地被R14取代的C3-C14-元雜環(huán)基團，或
R3和R4與它們所連接的氮原子形成任選地被R14取代的C3-C14-元雜環(huán)基團；
L、L1和L2獨立地選自
R6、R5、R5a、R5b和Rx獨立地選自H、C1-C8烷基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-烷基-烷氧基、C1-C8-鹵代烷基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、4-到14-元雜環(huán)基團、被4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基；或
當X1是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或
當X2是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5a及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或
當X是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5b及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團；
W、W1和W2獨立地選自C0-C8-亞烷基；
X、X1和X2獨立地選自C0-C8-亞烷基、O、S、-NR7-、-NR7(C＝O)-、-NR7(C＝O)NR8-、-NR8SO2-、-NR7(SO2)NR8-、-NR7(C＝O)O-、-O(C＝O)-、-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NR7-、-(C＝S)NR7-、-(C＝NR7)NR8-、-(C＝O)NR7-、-(C＝O)O-、-(SO2)(C0-C8-亞烷基)-、-(SO2)NR8-和-(SO2)NR7-Z-(SO2)NR8-；
Y、Y1和Y2獨立地是-C0-C8-亞烷基-；
Z是C1-C4-亞烷基；
其中W、W1、W2、Y、Y1、Y2和Z任選地被下述基團取代C1-C8-烷基、鹵素、C1-C8-烷氧基、羧基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基、包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團、被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基、以及被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基；
A選自任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C3-C15-碳環(huán)基團；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的4-到14-元雜環(huán)基團；選自氮、氧和硫的雜原子，其中所述的氮可以被-Y-X-W-NR5b-L-M取代；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C1-C8-烷基；條件是當R5和R5a不與A形成4-到14-元雜環(huán)基團時，那么當X1、X2、Y1和Y2是C0-C8-亞烷基時，除非A被-Y-X-W-NR5b-L-M取代，A不是C6-C15-芳香族碳環(huán)基團、O、C＝O或C1-C8-烷基；
R7、R8、R11和R12獨立地選自H、任選地被C7-C14-芳烷基取代的C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基和5-到14-元雜環(huán)基團；R7和R8獨立地，可以通過C1-C4-烷基基團與W、W1、W2、Y、Y2或Y2的碳原子成鍵，從而形成5-到14-元雜環(huán)基團；
T選自H、鹵素、C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基；
其中，除非另有說明，每個C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團和每個4-到14-元雜環(huán)基團獨立地任選地被一個或多個選自下述的基團取代OH、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷基、鹵素、SO2NR11R12、任選地被羥基取代的羥基C1-C8-烷氧基、(C0-C4-亞烷基)CONR11R12、(C0-C4-亞烷基)N＝C(NR11R12)2、-O-(C1-C4-亞烷基)-N＝C(NR11R12)2、-O-(C1-C4-亞烷基)-CONR11R12、C6-C10-芳烷氧基、C7-C10-芳烷基、SH、S(C1-C8-亞烷基)、SO2(C1-C8-亞烷基)SO(C1-C8-亞烷基)、NR11R12、R15、被R15取代的C1-C8-烷基、R16、被R16取代的C1-C8-烷基、O(C1-C8-亞烷基)-NR11C(C＝O)O-(C0-C4-亞烷基)-R15、氰基、氧代、羧基、硝基、C1-C8-烷基羰基、羥基-C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基、氨基-C1-C8-烷基、氨基(羥基)C1-C8-烷基和任選地被氨基羰基取代的C1-C8-烷氧基，其中R15是C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團，其任選地被OH、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷基、鹵素和C1-C8-鹵代烷基取代，R16是3-到14-元雜環(huán)基團，其任選地被OH、C1-C8-烷氧基、C1-C8-烷基、鹵素和C1-C8-鹵代烷基取代；
并且其中，除非另有說明，每個亞烷基任選地被下述基團取代C1-C8-烷基、鹵素、C1-C8-烷氧基、羧基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、R15、被R15取代的C1-C8-烷基、R16或被R16取代的C1-C8-烷基；且
R14選自H、鹵素、C1-C8-烷基、OH、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、C7-C14-芳烷基和O-C7-C14-芳烷基。
2.如權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或藥學上可接受的鹽，
其中
M、M1和M2獨立地是
R1、R2、R3和R4獨立地選自H、C1-C8-烷基和C1-C8-烷基-羧基；
L、L1和L2獨立地選自
R5、R5a和R5b獨立地選自H和C1-C8-烷基，或
當X1是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或
當X2是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5a及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團，或
當X是C0-C8-亞烷基、O、-NR7-或S時，R5b及其所連接的氮原子與A一起形成4-到14-元雜環(huán)基團；
R6選自H和C1-C8-烷基；
W、W1和W2選自C0-C8-亞烷基；
X、X1和X2選自C0-C8-亞烷基、O、S、-NR7-、-NR7(C＝O)-、-NR7(C＝O)NR8-、-NR8SO2-、-NR7(SO2)NR8-、-NR7(C＝O)O-、-O(C＝O)-、-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NR7-、-(C＝S)NR7-、-(C＝NR7)NR8-、-(C＝O)NR7-、-(C＝O)O-、-(SO2)(C0-C8-亞烷基)-、-(SO2)NR8-和-(SO2)NR7-Z-(SO2)NR8-；
Y、Y1和Y2是-C0-C8-亞烷基-；
Z是C1-C4-亞烷基；
其中W、W1、W2、Y、Y1、Y2和Z任選地被下述基團取代C1-C8-烷基、鹵素、C1-C8-烷氧基、羧基、C1-C8-烷基-羧基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、C1-C8-烷基羰基、C1-C8-烷氧基羰基、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團、被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基、包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團、被包含至少一個選自氮、氧和硫的環(huán)雜原子的4-到14-元雜環(huán)基團取代的C1-C8-烷基、以及被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基；
A選自C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團；C3-C15-碳環(huán)基團；4-到14-元雜環(huán)基團；選自氮、氧和硫的雜原子，其中所述的氮可以被-Y-X-W-NR5b-L-M取代；任選地被-Y-X-W-NR5b-L-M取代的C1-C8-烷基；條件是當R5和R5a不與A形成4-到14-元雜環(huán)基團時，那么當X1、X2、Y1和Y2是C0-C8-亞烷基時，除非A被-Y-X-W-NR5b-L-M取代，A不是C6-C15-芳香族碳環(huán)基團、O、C＝O或C1-C8-烷基；
R7、R8、R11和R12獨立地選自H、任選地被C7-C14-芳烷基取代的C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基和5-到14-元雜環(huán)基團；并且R7和R8獨立地，可以通過C1-C4-烷基基團與W或Y的碳原子成鍵，從而形成5-到14-元雜環(huán)基團；且
T選自H、鹵素、C1-C8-烷基、C1-C8-鹵代烷基、C1-C8-鹵代烷氧基、C3-C15-碳環(huán)基團、硝基、氰基、C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團和被C6-C15-元芳香族碳環(huán)基團取代的C1-C8-烷基。
3.如權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或藥學上可接受的鹽，
其中
M、M1和M2是
R1、R2、R3、R4、R5、R5a、R5b和R6是H；
L、L1和L2獨立地選自
A為C3-C15-碳環(huán)基團，或A是選自氮、氧和硫的雜原子，其中所述的氮被-Y-X-W-NR5b-L-M取代；
W、W1和W2獨立地選自C0-C8-亞烷基；
X、X1和X2獨立地是C0-C8-亞烷基、-NR7、-NR7(C＝O)-、-NR7(C＝O)NR7-、-NR8SO2-、-NR8(SO2)NR8-、-NR7(C＝O)O-、-O(C＝O)-、-O(C＝O)O-、-O(C＝O)NR7-、-(C＝S)NR7-、-(C＝NR7)NR7-、-(C＝O)NR7-、-(C＝O)O-、-(SO2)(C0-C8-亞烷基)-、-(SO2)NR8-、-(SO2)NR8-Z-(SO2)NR8-，或者R7和R8獨立地，可以通過C1-C4-烷基基團與W或Y的碳原子成鍵，從而得到5-至14-元的雜環(huán)基團；
R7和R8獨立地選自H和C1-C8-烷基；
Y、Y1和Y2獨立地選自-(C0-C8-亞烷基)-；
Z是C1-C2-亞烷基；且
T是鹵素。
4.如權(quán)利要求1所述的式(I)化合物，其中所述化合物是式(Ia)的化合物
或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或藥學上可接受的鹽，
其中
A2選自
5.基本上如本文所描述、參考任何一個實施例的如權(quán)利要求1所述的化合物。
6.用作藥物的如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物。
7.包含如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物的藥物組合物。
8.如權(quán)利要求1-5中任意一項所述的化合物在制備治療通過阻塞上皮鈉通道來調(diào)節(jié)的疾病的藥物中的用途。
9.如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的化合物在制備治療炎癥性或過敏性病癥、特別是炎癥性或阻塞性氣道疾病的藥物中的用途。
10.如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的化合物在制備治療炎癥性或過敏性病癥的藥物中的用途，所述病癥選自囊性纖維化、原發(fā)性纖毛運動障礙、慢性支氣管炎、慢性阻塞性肺病、哮喘、呼吸道感染、肺癌、口腔干燥癥和男性角膜結(jié)膜炎。
11.如權(quán)利要求1-4中任意一項所述的化合物與抗炎藥、支氣管擴張藥、抗組胺藥或鎮(zhèn)咳藥的組合產(chǎn)品。
12.制備式(I)化合物的方法
其中
M1、M2、L1、L2、NR5、NR5a、W1、W2、X1、X2、Y1、Y2和A如上文所定義，該方法包括下述步驟
(i)將式(IV)的化合物
其中
M＊是M1或M2；
L＊是L1或L2；且
M1、M2、L1、L2和T如上文所定義，
與式(V)的化合物反應
其中R5、R5a、W1、W2、X1、X2、Y1、Y2和A如上文所定義，
所述反應任選地在堿，例如有機堿存在下；和在有機溶劑如非質(zhì)子偶極溶劑中進行；和
(ii)將所得游離形式或藥學上可接受的鹽形式的式(I)化合物回收。
全文摘要
用于治療通過阻斷上皮鈉通道來調(diào)節(jié)的病癥、特別是炎癥性或過敏性病癥的式(I)化合物，或其互變異構(gòu)體或立體異構(gòu)體或溶劑化物或藥學上可接受的鹽，其中M1、M2、L1、L2、W1、W2、X1、X2、Y1、Y2、A、R5和R5a如本文所定義。
文檔編號C07D409/14GK101346369SQ200680048510
公開日2009年1月14日 申請日期2006年12月20日 優(yōu)先權(quán)日2005年12月22日
發(fā)明者S·P·科林伍德, N·史密斯 申請人:諾瓦提斯公司