專利名稱：：原人參二醇低元醇衍生物及制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
：本發(fā)明涉及到具有達(dá)瑪烷為母核結(jié)構(gòu)的新的原人參二醇衍生物及其制備方法，以及該衍生物作為藥物的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
：原人參二醇苷元具有很強(qiáng)的抗腫瘤作用，其作用強(qiáng)度強(qiáng)于人參皂苷(人參化學(xué)成分及其抗癌抗心率失常構(gòu)效關(guān)系的研究，陳英杰，王紅燕等，《中國自然科學(xué)基金》1995，446~48)，且具有毒性小的優(yōu)點(diǎn)，但由于其水溶性差，限制了它的廣泛應(yīng)用。目前，國內(nèi)已有對原人參二醇次苷元—人參二醇結(jié)構(gòu)修飾的專利報(bào)導(dǎo)(公開號CN1097194)。在此基礎(chǔ)上，我們通過對原人參二醇組皂苷降解，分離得到原人參二醇苷元，對其進(jìn)行了結(jié)構(gòu)修飾，增加了其親水性，提高了其藥效，使其得到了廣泛應(yīng)用。
發(fā)明內(nèi)容本發(fā)明提供了具有達(dá)瑪烷為母核結(jié)構(gòu)的新的一系列原人參二醇衍生物。本發(fā)明提供了這些衍生物的制備方法。本發(fā)明還提供了這些衍生物作為藥物的應(yīng)用。本發(fā)明還提供了這些衍生物在制備治療腫瘤疾病的藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的原人參二醇衍生物具有式I的通式，式I為式I中R1＝H或CO-Alk1-COOM1；R2＝H或CO-Alk2-COOM2；這里Alk1和Alk2彼此獨(dú)立，分別代表含1-4個碳原子的亞烷基或含2-4個碳原子的亞烯基，M1和M2彼此獨(dú)立的代表H或堿金屬元素。當(dāng)R1＝CO-Alk1-COOM1且R2＝CO-Alk2-COOM2時，式I所示的化合物為原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽，其中首選的化合物為原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯及其堿金屬鹽，分子式為C38H58O9M(M代表前面所述的M1和M2之一)；當(dāng)R2＝H、R1＝CO-Alk1-COOM1時，式I所表示的化合物為原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽，其中首選的化合物為原人參二醇-3-琥珀酸酯及其堿金屬鹽，分子式為C34H55O6M1；當(dāng)R1＝H、R2＝CO-Alk2-COOM2時，式I所表示的化合物為原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽，其中首選的化合物為原人參二醇-12-琥珀酸酯及其堿金屬鹽，分子式為C34H55O6M2。原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a，取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1~2.5∶3~9∶10~30(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)4~30小時，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，過濾，干燥，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯。b，將原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽。原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a，取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1∶0.5~8∶10~25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)4~25小時，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，經(jīng)硅膠柱層析，乙酸乙酯/正己烷(15~30％)洗脫，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯。b，分別將原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽。原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽、原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽的組合物的制備方法為取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1~3∶0.5~8∶10~25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，減壓過濾，回收乙醇，干燥，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯、原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯的組合物。b，將上述組合物加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽、原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽的組合物。實(shí)施例1原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯及其鈉鹽的制備(A)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯的制備原人參二醇1g和3g琥珀酸酐溶于25ml吡啶中，在75~80℃油浴中攪拌反應(yīng)25小時，然后將反應(yīng)混合物傾入250ml冷水中攪拌靜置，過夜，過濾，干燥，得到1.35g灰白色固體，將此固體溶于30ml95％乙醇中，加適量活性炭脫色，過濾，真空干燥得白色固體1.21g，收率84.6％。(B)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽的制備將2.0g原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯溶于50ml丙酮中，在不斷攪拌下滴入7ml1NNaOH乙醇溶液，滴至沉淀完全，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，過濾，真空干燥得1.97g白色固體，收率92.5％。該化合物能溶于水，微溶于乙醇，難溶于丙酮，乙醚和氯仿。1H-NMR(600MHzC5D5N)0.71(s，3H)0.90(s，3H)0.93(s，3H)0.94(s，6H)1.39(s，3H)1.70(s，3H)1.71(s，3H)2.88(m，2H)2.91(m，2H)2.99(m，2H)3.01(m，2H)4.70(m，1H)5.30(m，1H)5.43(t，1H)13C-NMR(150MHzC5D5N)174.8174.7172.4172.3130.7126.380.775.173.556.053.152.550.145.839.938.338.137.437.134.731.430.730.330.030.028.928.027.026.925.723.823.118.317.717.616.716.115.7ESI-MS643.53(M-H2O+H)683.48(M+Na)2原人參二醇-3-琥珀酸酯及其鉀鹽，原人參二醇-12-琥珀酸酯及其鉀鹽的制備(A)原人參二醇-3-琥珀酸酯和原人參二醇-12-琥珀酸酯的制備原人參二醇2g和1.5g琥珀酸酐溶于45ml吡啶中，在70~75℃油浴中攪拌反應(yīng)20h，然后將反應(yīng)混合物傾入300ml水中，攪拌，靜置，過夜，干燥，得2.33g灰白色固體，經(jīng)200～300目硅膠柱層析，乙酸乙酯/正己烷(15～30％)梯度洗脫先后分別得到類白色固體原人參二醇-3-琥珀酸酯0.75g，收率37.5％；類白色固體原人參二醇-12-琥珀酸酯0.80g，收率40.0％。(B)原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽的制備原人參二醇-3-琥珀酸酯1.5g溶于80ml丙酮中，充分?jǐn)嚢?，緩慢滴?NKOH乙醇溶液共4ml，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，待沉淀完全，減壓過濾，沉淀物用丙酮洗滌數(shù)次，干燥，稱重得白色固體1.4g，得率89.7％(C)原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽的制備原人參二醇-12-琥珀酸酯1g溶于60ml丙酮中，充分?jǐn)嚢?，緩慢滴?NKOH乙醇溶液共3ml，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，待沉淀完全，減壓過濾，沉淀物用適量丙酮洗滌3次，沉淀物干燥，稱重得白色固體0.92g，得率88.5％。原人參二醇-3-琥珀酸酯1H-NMR(600MHzC5D5N)0.82(s，3H)0.93(s，6H)0.96(s，3H)0.98(s，3H)1.42(s，3H)1.63(s，3H)1.66(s，3H)2.88(m，2H)2.92(m，2H)4.73(m，1H)5.31(t，1H)13C(150MHz，C5D5N)174.7172.4130.7126.380.872.970.956.154.751.750.348.640.038.638.137.235.935.032.131.330.330.028.127.126.825.724.023.018.417.617.016.716.215.8ESI-MS525.50(M-2H2O+H)543.52(M-H2O+H)583.50(M+Na)原人參二醇-12-琥珀酸酯1H-NMR(600MHzC5D5N)0.82(s，3H)0.93(s，3H)0.98(s，3H)1.00(s，3H)1.19(s，3H)1.40(s，3H)1.71(s，3H)1.72(s，3H)2.99(m，2H)3.01(m，2H)3.38(m，1H)5.28(m，1H)5.42(t，1H)13C(150MHz，C5D5N)174.8172.4130.7126.377.975.373.556.353.252.550.445.839.939.539.137.537.334.931.530.730.028.928.628.127.026.925.823.118.717.717.616.2416.1615.7ESI-MS543.49(M-H2O+H)583.50(M+Na)3.原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯、原人參二醇-3-琥珀酸酯和原人參二醇-12-琥珀酸酯及其鈉鹽組合物的制備(A)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯、原人參二醇-3-琥珀酸酯和原人參二醇-12-琥珀酸酯的組合物的制備原人參二醇2g，琥珀酸酐4g，吡啶40ml，裝入100ml三頸瓶中，75～78℃油浴中，攪拌回流20h放冷，傾入500ml冷水中，析出沉淀，減壓抽濾，得白色沉淀物，將此溶于80ml95％乙醇中加熱溶解，加活性炭脫色，靜置，過濾，回收乙醇干燥即得2.62g產(chǎn)品。(B)原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯鈉鹽、原人參二醇-3-琥珀酸酯鈉鹽和原人參二醇-12-琥珀酸鈉鹽組合物的制備取上述(A)中衍生物的組合物2.5g，溶于150ml丙酮中，充分?jǐn)嚢?，邊攪拌邊滴?NNaOH乙醇溶液至沉淀完全后，繼續(xù)攪拌30分鐘，靜置，待沉淀完全，減壓過濾，沉淀物用適量丙酮洗滌3次，抽干，干燥，稱重得白色粉末2.28g。試驗(yàn)例1原人參二醇衍生物對體外培養(yǎng)人源腫瘤細(xì)胞增殖的抑制作用材料和試劑原人參二醇-3-琥珀酸鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽，由山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心植化室提供。RPMI1640培養(yǎng)基GIBCO公司生產(chǎn)；新生牛血清(超級)，杭州四季青生物工程材料有限公司，生產(chǎn)批號020523。胰蛋白酶，Sigma公司生產(chǎn)；磺基羅丹明B(sulforhadamineB，SRB)，Sigma公司；注射用鏈霉素，山東瑞陽制藥有限公司，1g(100萬單位)/支，批號200105101；注射用青霉素鈉，山東魯抗醫(yī)藥股份有限公司，80萬單位/支，批號L020318。其它常用化學(xué)試劑為國產(chǎn)分析純。細(xì)胞株人肺腺癌細(xì)胞株A549購自中國醫(yī)學(xué)科學(xué)院北京腫瘤研究所藥理室。儀器CO2培養(yǎng)箱，超凈工作臺，酶標(biāo)儀，倒置顯微鏡，細(xì)胞培養(yǎng)瓶(Costar，USA)，96孔細(xì)胞培養(yǎng)板(Costar，USA)。軟件MicrosoftExcel7.0統(tǒng)計(jì)分析軟件MicrocalOrigin6.0數(shù)據(jù)處理軟件。實(shí)驗(yàn)方法RPMI1640培養(yǎng)基一袋加水一升，補(bǔ)加2克碳酸氫鈉，10萬單位青霉素和100mg鏈霉素，調(diào)節(jié)pH值至7.4，用0.22μm除菌濾膜過濾除菌。90ml培養(yǎng)基加滅活新生牛血清10ml即為完全培養(yǎng)液。胰蛋白酶用D-hanks緩沖液配成0.25％溶液后過濾除菌。準(zhǔn)確稱取原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽各80.0mg于滅菌離心管中，加入DMSO1ml，配成80mg/ml原液。取10μl原液加到10ml的完全培養(yǎng)液中，即成為80μg/ml應(yīng)用液，再分別用完全培養(yǎng)液稀釋為40、20、10和5μg/ml的應(yīng)用液。細(xì)胞貼壁培養(yǎng)于含10ml完全培養(yǎng)液細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，于37℃、5％CO2、飽合濕度下培養(yǎng)。細(xì)胞長滿瓶底后用滅菌D-hanks液洗兩次，加0.25％胰蛋白酶消化細(xì)胞2分鐘，倒掉胰蛋白酶，待輕搖細(xì)胞能完全脫落后，加完全培養(yǎng)液30ml后，用移液管吹散細(xì)胞，分裝于3個新的細(xì)胞培養(yǎng)瓶中，繼續(xù)培養(yǎng)。取處于對數(shù)生長期的細(xì)胞一瓶，胰蛋白酶消化后用完全培養(yǎng)液調(diào)整細(xì)胞數(shù)目至1×105個細(xì)胞/毫升。于96孔板中每孔加入細(xì)胞懸100μl細(xì)胞懸液加到96孔板中，另用一培養(yǎng)板加同樣細(xì)胞懸液做本底對照。加完細(xì)胞的培養(yǎng)板于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)12小時后倒掉原培養(yǎng)液，96孔板中分別加入不同濃度的藥物及完全培養(yǎng)液作正常對照。加完藥后培養(yǎng)板置于CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。上述實(shí)驗(yàn)均在嚴(yán)格無菌條件下進(jìn)行。將對照用培養(yǎng)板取出于含細(xì)胞孔中輕輕加入25μl50％預(yù)冷的三氯醋酸溶液于培養(yǎng)液面上，靜置5分鐘后，在4℃冰箱放置1小時，棄去上層液體，用去離子水洗5遍，置空氣中干燥后留待與加藥培養(yǎng)板一并染色分析。加藥培養(yǎng)48小時后，取出培養(yǎng)板，于每孔加入50ul預(yù)冷的50％三氯醋酸，靜置5分鐘后移入4℃冰箱中靜置1小時，取出用去離子水洗5遍，空氣中干燥，待完全干燥后每孔加入1％的乙酸配制的0.4％的SRB100ul，染色20分鐘后倒掉染液，用1％乙酸洗5次，去除未結(jié)合的染料?？諝庵懈稍锖笥胮H10.5的10mmol/L的非緩沖Tris堿液150ul溶解，在平板振蕩器上振蕩5分鐘，在BioRad酶標(biāo)儀上測定各孔在490nm的光吸收。本底對照板的細(xì)胞同樣處理測定OD490。根據(jù)各孔OD490計(jì)算藥物對細(xì)胞增殖的抑制率根據(jù)藥物濃度對數(shù)與抑制率，用MicrocalOrigin軟件作直線回歸，得到直線方程，計(jì)算抑制率在50％時對應(yīng)的藥物濃度即為原人參二醇衍生物對腫瘤細(xì)胞的半抑制濃度(IC50)。實(shí)驗(yàn)結(jié)果表1.不同濃度藥物對A549細(xì)胞的增殖抑制率和半抑制濃度(IC50，μg/ml)<tablesid="table1"num="001"><tablewidth="688">藥物藥物濃度(μg/ml)IC50(μg/ml)804020105原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽91.880.055.737.223.614.9原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽91.370.041.230.512.820.6原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽83.051.130.527.811.629.4</table></tables>實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明，原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽均可濃度依賴性地抑制體外培養(yǎng)的人肺腺癌A549的體外增殖，半抑制濃度IC50分別為14.9、20.6和29.4μg/ml，說明這三個化合物具有較強(qiáng)的細(xì)胞毒活性。試驗(yàn)例2原人參二醇衍生物對小鼠體內(nèi)移植瘤增殖的抑制作用材料和試劑原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽，由山東省天然藥物工程技術(shù)研究中心植化室提供。C57BL/6小鼠，70只，體重18-22g，購自上海西普爾-畢凱實(shí)驗(yàn)動物有限公司。Lewis肺癌瘤株，購自醫(yī)科院北京藥物所。實(shí)驗(yàn)方法取已接種10天的Lewis肺癌、生長狀態(tài)良好的小鼠，脫頸處死，用酒精消毒皮膚后，剝?nèi)∧[瘤組織，加入五倍重量的生理鹽水后用組織勻漿器研磨成勻漿，100目滅菌不銹鋼網(wǎng)過濾。消毒每只小鼠左側(cè)腋皮膚，接種瘤液0.2ml。接瘤后第二天隨機(jī)分為5組，分別為模型組、順鉑對照組(10mg/kg×1d)、原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽(50mg/kg)、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽(50mg/kg)、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽(50mg/kg)組。順鉑用生理鹽水配成0.5mg/ml，給藥量0.2ml/10g體重，接種第二天腹腔給藥一次。原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽分別用注射用生理鹽水配成2.5mg/ml，接種第二天起每日腹腔給藥，連續(xù)10天，給藥量0.2ml/10g體重。末次給藥后第二天處死小鼠，剝?nèi)×鼋M織稱重。計(jì)算抑瘤率。實(shí)驗(yàn)結(jié)果實(shí)驗(yàn)結(jié)果見表2。結(jié)果表明，原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽注射給藥對小鼠Lewis腫瘤均具有明顯的抑制作用，抑瘤率分別達(dá)61.9％、63.7％和65.5％，與順鉑組(69.0％)比較未見明顯差異。給藥組各組小鼠一般狀態(tài)觀察表明，順鉑組小鼠毛色暗淡，活動減少，精神狀態(tài)較差，順鉑組體重明顯低于模型組及其他各給藥組。而原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽三組小鼠一般狀態(tài)明顯優(yōu)于順鉑組，體重與模型組比較沒有明顯降低。表明原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽具有明顯的抗腫瘤作用，且毒副作用較順鉑小。表2.原人參二醇-3-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-12-琥珀酸酯鉀鹽、原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯二鈉鹽對Lewis肺癌體內(nèi)增殖的抑制作用與模型組比較**，P＜0.01；與順鉑組比較##，P＜0.01。權(quán)利要求1.式I所示的新的原人參二醇低元醇衍生物式I其中R1＝H或CO-Alk1-COOM1；R2＝H或CO-Alk2-COOM2；Alk1、Alk2選自1-4個碳原子的亞烷基或含2-4個碳原子的亞烯基，M1和M2選自H或堿金屬元素。2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的衍生物，其優(yōu)選為R1＝H或CO-Alk1-COOM1；R2＝H或CO-Alk2-COOM2；Alk1、Alk2選自含兩個碳原子的亞烷基，M1和M2選自堿金屬元素。3.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的衍生物，其特征在于當(dāng)R1＝CO-Alk1-COOM1，R2＝CO-Alk2-COOM2時，式I所示的化合物為原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽；當(dāng)R2＝H，R1＝CO-Alk1-COOM1時，式I所表示的化合物為原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽；當(dāng)R1＝H，R2＝CO-Alk2-COOM2時，式I所表示的化合物為原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽。4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的衍生物，其特征在于原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽優(yōu)選為原人參二醇-3，12-雙琥珀酸酯及其堿金屬鹽；原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽優(yōu)選為原人參二醇-3-琥珀酸酯及其堿金屬鹽；原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽優(yōu)選為原人參二醇-12-琥珀酸酯及其堿金屬鹽。5.根據(jù)權(quán)利要求1或2所述的衍生物，其特征在于堿金屬元素優(yōu)選為鈉或鉀。6.權(quán)利要求3所述的衍生物的制備方法，其特征在于原人參二醇-3，12--雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a.取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1～2.5∶3～9∶10～20的比例(重量比)混合，加熱攪拌反應(yīng)4～30小時，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，過濾，干燥，得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯；b.將原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯加入丙酮中攪拌溶解，滴加堿金屬的氫氧化物的無水乙醇或甲醇溶液，攪拌至沉淀完全，靜置，過濾，沉淀物用少量丙酮潤洗，減壓過濾，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽；其中二元羧酸酐具有如下通式ALK選自Alk1或Alk2。7.權(quán)利要求3所述的衍生物的制備方法，其特征在于原人參二醇-3-脂肪酸酯及其堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯及其堿金屬鹽的制備方法為a.取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1∶0.5～8∶10～25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)4～25小時，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，經(jīng)硅膠柱層析，乙酸乙酯/正己烷(15～30％)洗脫，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯；b分別將原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯按權(quán)利要求6中b所述方法處理，分別得到原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽。8.含有權(quán)利要求3所述的衍生物的組合物的制備方法，取原人參二醇，二元羧酸酐，吡啶，按1～3∶0.5～8∶10～25(重量比)的比例混合，加熱攪拌反應(yīng)，稍冷，傾入冷水中，析出沉淀，過濾得到灰白色沉淀物，將沉淀物溶于乙醇中，加熱溶解，加活性炭脫色，減壓過濾，回收乙醇，干燥，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯、原人參二醇-3-脂肪酸酯和原人參二醇-12-脂肪酸酯的組合物；b.將上述組合物按權(quán)利要求6中b所述方法處理，即得原人參二醇-3，12-雙脂肪酸酯堿金屬鹽、原人參二醇-3-脂肪酸酯堿金屬鹽和原人參二醇-12-脂肪酸酯堿金屬鹽的組合物。9.權(quán)利要求1-5任一所述的衍生物在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用。10.根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于所述的衍生物以10～30mg/ml制成醫(yī)藥上可接受的制劑。全文摘要本發(fā)明提供了新的原人參二醇衍生物及其制備方法，及其在制備治療腫瘤的藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明提供的原人參二醇衍生物為原人參二醇－3，12－雙脂肪酸酯及其堿金屬鹽、原人參二醇－3－脂肪酸酯及其堿金屬鹽或原人參二醇－12－脂肪酸酯及其堿金屬鹽。文檔編號C07J9/00GK1704427SQ200310105709公開日2005年12月7日申請日期2003年11月24日優(yōu)先權(quán)日2003年11月24日發(fā)明者馬雙剛,姚建文,王振華,劉珂申請人:山東綠葉天然藥物研究開發(fā)有限公司,煙臺大學(xué)藥學(xué)院