用于癌癥治療的檢查點(diǎn)抑制劑和分枝桿菌全細(xì)胞的制作方法
【專利摘要】一種免疫調(diào)節(jié)劑，用于治療、減輕、抑制或控制腫瘤疾病，所述腫瘤疾病的患者將接受檢查點(diǎn)抑制治療和與之同時(shí)、分別或依次給予的該免疫調(diào)節(jié)劑。該免疫調(diào)節(jié)劑宜包含分枝桿菌全細(xì)胞，例如牝牛分枝桿菌或奧布分枝桿菌全細(xì)胞。
【專利說明】用于癌癥治療的檢查點(diǎn)抑制劑和分枝桿菌全細(xì)胞發(fā)明領(lǐng)域
[0001]本發(fā)明涉及癌癥治療領(lǐng)域。尤其，本發(fā)明涉及一種預(yù)防、治療或抑制腫瘤和/或轉(zhuǎn)移的方法。
[0002]發(fā)明背景
[0003]癌晚期人患者中，抗腫瘤免疫常因促炎、抗炎、免疫刺激、免疫抑制多種信號(hào)之間密切調(diào)控的相互作用而失效。例如，抗炎信號(hào)缺失導(dǎo)致慢性炎癥和持續(xù)的增殖信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)。有意思的是，腫瘤部位既有促進(jìn)腫瘤細(xì)胞增殖的細(xì)胞因子又有抑制腫瘤細(xì)胞增殖的細(xì)胞因子產(chǎn)生。正是這多種過程之間的失衡導(dǎo)致了腫瘤誘發(fā)。
[0004]目前，研發(fā)有效抗癌免疫療法的主要障礙之一是無法破除癌癥部位的免疫抑制并恢復(fù)正常的免疫反應(yīng)網(wǎng)絡(luò)。免疫療法的生理學(xué)手段是恢復(fù)正常的免疫反應(yīng)性從而，作為舉例，內(nèi)源性腫瘤抗原被識(shí)別并針對(duì)腫瘤細(xì)胞產(chǎn)生有效的溶胞反應(yīng)。雖然曾一度不清楚是否存在腫瘤免疫監(jiān)控，目前認(rèn)為免疫系統(tǒng)持續(xù)監(jiān)測(cè)并清除新轉(zhuǎn)化細(xì)胞。于是，癌細(xì)胞會(huì)改變其表型來應(yīng)對(duì)免疫壓力，從而逃避攻擊(免疫編輯)并上調(diào)抑制性信號(hào)的表達(dá)。原發(fā)腫瘤和轉(zhuǎn)移通過免疫編輯及其他破壞性程序維持其自身生存。
[0005]抗瘤免疫破壞的主要機(jī)制之一是‘T細(xì)胞耗竭’，其緣于長(zhǎng)期接觸抗原，其特征在于抑制性受體上調(diào)。這些抑制性受體起著避免非控免疫反應(yīng)的檢查點(diǎn)的作用。
[0006]PD-1和協(xié)同抑制受體，例如細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞抗原4(CTLA-4)，B淋巴細(xì)胞和T淋巴細(xì)胞衰減蛋白(811^，0)272)，1'細(xì)胞免疫球蛋白粘蛋白結(jié)構(gòu)域-3(1^111-3)，淋巴細(xì)胞激活基因-3(Lag-3，CD223)等等，常被稱作檢查點(diǎn)調(diào)控者。它們就像分子“收費(fèi)站”，讓胞外信息得以指示細(xì)胞周期進(jìn)程及其他胞內(nèi)信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)過程是否應(yīng)該進(jìn)行。
[0007]TCR的特異性抗原識(shí)別之外，T細(xì)胞激活還受控于協(xié)同刺激受體所發(fā)出正信號(hào)與負(fù)信號(hào)之間的平衡。這些表面蛋白通常是TNF受體或B7超家族的成員。針對(duì)激活性協(xié)同刺激分子的激動(dòng)性抗體和針對(duì)負(fù)協(xié)同刺激的阻抑性抗體會(huì)增強(qiáng)T細(xì)胞刺激，從而誘發(fā)腫瘤消解。
[0008]細(xì)胞程序性死亡蛋白I(H)-1或⑶279)，是一種55-kD的I型跨膜蛋白，是T細(xì)胞協(xié)同刺激受體CD28家族中的一員，該家族成員包括免疫球蛋白超家族成員CD28、CTLA-4、誘導(dǎo)性協(xié)同刺激因子(ICOS)和BTLA13PD-1在活化的T細(xì)胞和B細(xì)胞上高表達(dá)。各亞組記憶T細(xì)胞上也可檢到不同水平的ro-Ι表達(dá)。已鑒定了兩個(gè)PD-1的特異性配體:程序性死亡配體1(PD-L1，亦稱B7-H1或CD274)和H)-L2(亦稱B7-DC或CD273)。已知I3D-Ll和H)-L2結(jié)合I3D-1后下調(diào)T細(xì)胞激活，在小鼠和人系統(tǒng)中皆然(Okazaki等，Int Immunol.，2007; 19:813-824) JD-1與抗原呈遞細(xì)胞(APC)和樹突細(xì)胞(DC)表達(dá)的其配體I3D-Ll和PD-L2之間相互作用，傳遞各種負(fù)調(diào)節(jié)刺激，從而下調(diào)活化τ細(xì)胞免疫反應(yīng)。阻斷ro-1能抑制這一負(fù)信號(hào)從而增強(qiáng)T細(xì)胞反應(yīng)。
[0009]大量研究提示:癌癥微環(huán)境操控著PD-L1-/PD-1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑;PD-Ll表達(dá)的誘導(dǎo)與抗癌免疫反應(yīng)的抑制相關(guān)，并由此容許癌癥發(fā)展和轉(zhuǎn)移。PD-L1/PD-1信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)路徑是癌免疫逃逸的主要機(jī)制之一，理由有多項(xiàng)。首先且最重要的是，該路徑參與外周活化T效應(yīng)細(xì)胞免疫反應(yīng)的負(fù)調(diào)節(jié)。其次，癌癥微環(huán)境中PD-Ll上調(diào)，腫瘤浸潤(rùn)性活化T細(xì)胞上PD-1也上調(diào)，因此可能加強(qiáng)了抑制作用的惡性循環(huán)。其三，該路徑通過雙向信號(hào)轉(zhuǎn)導(dǎo)同時(shí)參與先天免疫和獲得性免疫，錯(cuò)綜復(fù)雜。這些因素使得ro-1/PD-Ll復(fù)合物成為一個(gè)中心點(diǎn)，癌癥通過該中心點(diǎn)操控免疫反應(yīng)并促其發(fā)展。
[00?0]第一個(gè)進(jìn)入臨床試驗(yàn)的免疫檢查點(diǎn)抑制劑是易普利姆瑪(ipi limumab) (Yervoy，百時(shí)美施貴寶藥廠(Bristol-Myers Squibb))，一種CTLA-4單抗(mAb) <XTLA-4屬于免疫球蛋白受體超家族，該家族還包括PD-1、BTLA、IlM-3和T細(xì)胞活化的免疫球蛋白抑制V型結(jié)構(gòu)域(VISTA)?？笴TLA-4單抗是高效檢查點(diǎn)抑制劑，既能去除原初細(xì)胞的又能從接觸過抗原的細(xì)胞的“故障”。治療增強(qiáng)CD8+T細(xì)胞的抗瘤功能，提高CD8+T細(xì)胞與Foxp3+調(diào)節(jié)性T細(xì)胞之比，抑制調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制功能。抗CTLA-4單抗療法的主要缺點(diǎn)是免疫系統(tǒng)喪失自我抑制能力而過度活躍時(shí)目標(biāo)打擊效應(yīng)所致的自身免疫毒性。據(jù)報(bào)道，接受易普利姆瑪治療的患者中發(fā)生嚴(yán)重的、3-4級(jí)不良反應(yīng)/自身免疫型副作用的達(dá)25%，包括皮炎、腸結(jié)腸炎、肝炎、內(nèi)分泌病(包括下垂體炎、甲狀腺炎和腎上腺炎)、關(guān)節(jié)炎、葡萄膜炎、腎炎和無菌性腦膜炎。相比抗CTLA-4，抗ro-1療法顯得耐受性好、自身免疫型副作用誘發(fā)率低。
[0011]??Μ-3被鑒定為另一種在耗竭⑶8+T細(xì)胞上表達(dá)的重要抑制性受體。小鼠癌癥模型中，大多數(shù)腫瘤浸潤(rùn)性功能異常⑶8+T細(xì)胞實(shí)際上同時(shí)表達(dá)ro-1和T IM-3。
[0012]LAG-3是新近發(fā)現(xiàn)的另一抑制性受體，它限制效應(yīng)T細(xì)胞功能并放大調(diào)節(jié)性T細(xì)胞的抑制活性。最近發(fā)現(xiàn)，小鼠腫瘤浸潤(rùn)性T細(xì)胞廣泛共表達(dá)ro-Ι和LAG-3，并且，ro-Ι和LAG-3的聯(lián)合抑制在小鼠癌癥模型中激發(fā)強(qiáng)協(xié)同抗瘤免疫反應(yīng)。
[0013]PD-1路徑的阻抑可與疫苗或其他免疫調(diào)節(jié)性抗體聯(lián)合用于改善治療效果(Hirano,F.等，Cancer Res.,65(3):1089-1096(2005);Li，B.等，Clin.Cancer Res ,15:1507-1509(2009);Curran，M.A.等，Proc.Natl.Acad.Set,107(9):4275-4280(2010))0
[0014]目前，針對(duì)PD-1及其配體PD-Ll的拮抗劑單抗用于癌癥治療的研發(fā)各自處于不同階段，近期的人體試驗(yàn)顯示在患有晚期、難治性疾病的癌癥患者中結(jié)果喜人。
[0015]第一個(gè)進(jìn)入I期臨床試驗(yàn)的Β7-Η1/Η)-1路徑阻抑劑是納武單抗(Nivolumab) (MDX-1 106/BMS-936558/0N0-4538)，百時(shí)美施貴寶(Bristol-Myers Squibb)研發(fā)的全人lgG4型抗PD-1單抗。另一正處于臨床評(píng)價(jià)期的PD-1單抗是CT-Ol I，治療技術(shù)有限公司(CureTechLtd)研發(fā)的I3D-1特異性人源化IgGl單抗。其他還包括LambroIizumab(MK-3475-Merck)，一種人源化單克隆lgG4型I3D-1抗體;BMS-936559，全人lgG4型I3D-Ll抗體和羅氏(Roche ’ s)的MPDL3280A，靶向I3D-Ll路徑的人單克隆抗體。
[0016]于是，本發(fā)明的目標(biāo)是治療癌癥的聯(lián)合療法，包括免疫調(diào)節(jié)劑和檢查點(diǎn)抑制劑阻抑，能夠激發(fā)強(qiáng)而持久的免疫反應(yīng)。
發(fā)明概要
[0017]本發(fā)明提供一種通過給予檢查點(diǎn)抑制劑與全細(xì)胞分枝桿菌(Mycobacterium)協(xié)同作用來治療和/或預(yù)防癌癥和/或轉(zhuǎn)移的方法。
[0018]本
【發(fā)明內(nèi)容】
之一，用于治療、減輕、抑制或控制患者的腫瘤疾病的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，腫瘤患者將接受檢查點(diǎn)抑制治療和與之同時(shí)、分別或依次給予的免疫調(diào)節(jié)劑。
[0019]本
【發(fā)明內(nèi)容】
之二，治療、減輕、抑制或控制對(duì)象中腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，所述方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)檢查點(diǎn)抑制劑和(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，該方法療效高于單獨(dú)給予所述檢查點(diǎn)抑制劑或免疫調(diào)節(jié)劑。
[0020]本
【發(fā)明內(nèi)容】
之三，治療、減輕、抑制或控制對(duì)象中腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，該方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)亞治療量和/或亞療程的檢查點(diǎn)抑制劑和(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，該方法療效高于單獨(dú)給予所述檢查點(diǎn)抑制劑或免疫調(diào)節(jié)劑。
[0021 ]所以，本發(fā)明提供一種檢查點(diǎn)抑制劑療法結(jié)合給予免疫調(diào)節(jié)劑的特定免疫療法的聯(lián)合療法。本發(fā)明的發(fā)明人發(fā)現(xiàn):這兩種療法聯(lián)合具有協(xié)同作用，超過各自單用效果的疊加。
【附圖說明】
[0022]本發(fā)明的說明將結(jié)合以下附圖，其中:
[0023]圖1:胰腺癌異種移植模型(皮下注射KPC細(xì)胞)中，熱滅活?yuàn)W布分枝桿菌(NCTC13365)制劑聯(lián)合或不聯(lián)合檢查點(diǎn)抑制劑(抗ro-Ll單抗)的效果。
[0024]詳細(xì)說明
[0025]本發(fā)明提供一種治療、減輕、抑制或控制對(duì)象中腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，包括給予免疫調(diào)節(jié)劑和檢查點(diǎn)抑制劑。該方法是基于以下發(fā)現(xiàn):免疫調(diào)節(jié)劑(全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌)聯(lián)合抗ro-Ll抗體(檢查點(diǎn)抑制劑)產(chǎn)生協(xié)同性抗瘤活性和/或優(yōu)于單用免疫調(diào)節(jié)劑或抗ro-Li抗體的抗瘤活性。
[0026]為便于理解本發(fā)明，首先給出某些術(shù)語的定義。其他定義可見于詳細(xì)說明各處。
[0027]“檢查點(diǎn)抑制劑”是這樣一種物質(zhì):它作用于類屬TNF受體或B7超家族成員的表面蛋白，包括結(jié)合負(fù)協(xié)同刺激分子(選自0'1^-4、？0-1、1'頂-3、81'1^、￥13了六、1^6-3)和/或它們各自的配體(包括F1D-Ll)的物質(zhì)。(MeI Iman等，同上)。
[0028]免疫調(diào)節(jié)劑，按照本發(fā)明中定義，是這樣一種組分:它刺激先天免疫和I型免疫，包括Thl和巨噬細(xì)胞激活及細(xì)胞毒細(xì)胞活性，并通過免疫調(diào)節(jié)機(jī)制獨(dú)立下調(diào)過度的抗Th2反應(yīng)。
[0029]“腫瘤”、“癌癥”和“腫瘤形成”同義，指這樣的細(xì)胞或細(xì)胞群:其生長(zhǎng)、增殖或生存超出了相應(yīng)正常細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖或生存，例如，細(xì)胞增殖紊亂或分化紊亂。典型地，此類生長(zhǎng)是失控的?！皭盒浴敝盖譂?rùn)?quán)徑M織?！稗D(zhuǎn)移”指腫瘤、癌癥或腫瘤擴(kuò)展或擴(kuò)散到患者非原發(fā)腫瘤或癌癥所在的其他部位、位置或區(qū)域。
[0030]“程序性死亡I”、“細(xì)胞程序性死亡I”、“蛋白PD-1”、“PD-1”和“PD1”同義，包括人ro-1的變體、異構(gòu)體、異種同源蛋白以及與ro-1至少有一個(gè)共同表位的類似物。PD-1全序列可見GenBank登錄號(hào)U64863。
[0031 ] “細(xì)胞毒T淋巴細(xì)胞-相關(guān)抗原-4”、“CTLA-4”、“CTLA4”和“CTLA-4抗原”(見，例如，Murata，Am.J.Pathol.(1999)155: 453-460)同義，包括人 CTLA-4 的變體、異構(gòu)體、異種同源蛋白以及與CTLA-4至少有一個(gè)共同表位的類似物。(見，例如Balzano (1992) Int.J.CancerSuppl.7: 28-32)。全長(zhǎng)CTLA-4核酸序列可見GenBank登錄號(hào)LI5006。
[0032]“亞治療量”在此表示治療用化合物(如抗體)的劑量低于其單獨(dú)用于治療癌癥時(shí)的常用或典型劑量或療程較短。例如，CTLA-4抗體的一個(gè)亞治療量是抗體一次給藥低于3mg/kg (此為抗CTLA-4抗體的已知?jiǎng)┝?。
[0033]“治療有效量”即與免疫調(diào)節(jié)劑聯(lián)用時(shí)優(yōu)選能產(chǎn)生以下效果的檢查點(diǎn)抑制劑的量:癥狀的嚴(yán)重程度減輕，無癥狀期延長(zhǎng)或頻率增加，或避免了疾病致傷或致殘?！坝行Я俊被颉八帉W(xué)有效量”指提供所需生物學(xué)效果或治療效果的量。所述效果可以是一項(xiàng)或多項(xiàng)疾病表征、癥狀或病因的減少、改善、緩和、減輕、推遲和/或緩解，或生物系統(tǒng)其他各種如人所愿的變化。就癌癥而言，有效量可包含足以引起以下效果的量:腫瘤收縮和/或腫瘤生長(zhǎng)減慢(如抑制腫瘤生長(zhǎng))或避免或推遲了其他人所不欲的細(xì)胞增殖。某些實(shí)施方式中，有效量是足以令癌癥或腫瘤進(jìn)展延遲、生存期延長(zhǎng)或病情穩(wěn)定的量。
[0034]某些實(shí)施方式中，治療有效量是足以避免或推遲復(fù)發(fā)的量。治療有效量可一次或分多次給予。藥物或聯(lián)合療法的治療有效量會(huì)獲得以下一項(xiàng)或多項(xiàng)效果:(i)癌細(xì)胞數(shù)量減少；(ii)腫瘤尺寸縮減；(iii)癌細(xì)胞向周圍器官的浸潤(rùn)被抑制、阻滯或減緩到一定程度，最好是停止；(iv)抑制(即減緩到一定程度，最好是停止)腫瘤轉(zhuǎn)移；(V)抑制腫瘤生長(zhǎng)；(Vi)避免或推遲腫瘤的發(fā)生和/或復(fù)發(fā);和/或(vii) —項(xiàng)或多項(xiàng)癌癥相關(guān)癥狀緩解到一定程度。
[0035]例如，就腫瘤治療而言，“治療有效劑量”可使得腫瘤相比基線測(cè)量值收縮至少約5%，如至少約10%、或約20%、或約60%或更多。所述基線測(cè)量值可采自無治療患者。
[0036]治療用化合物的治療有效量可減小腫瘤尺寸，或者緩解癥狀。本領(lǐng)域技術(shù)人員懂得如何根據(jù)多種因素一如患者身量、癥狀嚴(yán)重程度、選定配方或給藥途徑一來確定這樣的量。
[0037]“免疫反應(yīng)”指例如淋巴細(xì)胞、抗原呈遞細(xì)胞、吞噬細(xì)胞、粒細(xì)胞和這些細(xì)胞或肝臟所產(chǎn)生的可溶性大分子(包括抗體、細(xì)胞因子和補(bǔ)體)所起的導(dǎo)致以下結(jié)果的反應(yīng):癌細(xì)胞破壞、摧毀、或從人體清除。
[0038]“抗體”在此包括全抗體及其各種抗原結(jié)合片段(S卩“抗原結(jié)合部分”)或單鏈。
[0039]抗體的“抗原結(jié)合部分”(或簡(jiǎn)稱“抗體部分”)在此指一種或多種保留了特異性結(jié)合受體和其配體(如ro-Ι)的能力的抗體片段，包括:(i)Fab片段；(ii)F(ab’)2片段；(iii)VH和CHI結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的Fd片段；(iv)Fv片段，(V)VH結(jié)構(gòu)域構(gòu)成的dAb片段(Ward等，Nature，341: 544-546(1989))；和(vi)分離的互補(bǔ)性決定區(qū)(CDR)。單鏈抗體也涵蓋于抗體的“抗原結(jié)合部分”。這些抗體片段可用本領(lǐng)域技術(shù)人員所知的常規(guī)方法獲得，這些片段經(jīng)篩選其應(yīng)用與完整抗體相同。
[0040]“單克隆抗體”或“單克隆抗體組合物”在此指單一分子組成的抗體分子所構(gòu)成的制備物。單克隆抗體組合物表現(xiàn)出對(duì)特定表位單一的結(jié)合特異性和親和力。
[0041]“人抗體”在此包括可變區(qū)中框架區(qū)和CDR區(qū)都來自人免疫球蛋白序列的抗體。
[0042]“人源化抗體”指其他哺乳動(dòng)物物種系例如小鼠的CDR序列植入人框架區(qū)序列所得的抗體。人框架區(qū)序列內(nèi)還可作其他框架區(qū)修飾和改變。
[0043]抗體之外還有其他生物分子可作為檢查點(diǎn)抑制劑，包括具有定靶結(jié)合親合力的肽。
[0044]“處理(treatment)”或“治療”指為以下目的給予活性物質(zhì):治療、治愈、緩解、減輕、改變、修復(fù)、緩和、改善或影響某種狀態(tài)(如疾病)、該狀態(tài)的癥狀，或避免或推遲某疾病癥狀、并發(fā)癥、生化表征的發(fā)生或出現(xiàn)，或阻止或抑制疾病、狀態(tài)或紊亂的進(jìn)一步發(fā)展，以統(tǒng)計(jì)學(xué)顯著的程度。
[0045]“對(duì)象”在此包括人和非人動(dòng)物。優(yōu)選對(duì)象包括需要增強(qiáng)免疫反應(yīng)的人患者。此處所述方法特別適合其疾病能通過增強(qiáng)T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)來治療的人患者。實(shí)施方式之一中，所述方法特別適合體內(nèi)癌細(xì)胞處理。
[0046]“并行施用(給藥)”或“并行(地)”或“同時(shí)”在此表示同日施用或給藥?！耙来问┯?給藥)”或“依次”或“分別”表示給藥或施用不在同一天。
[0047]“同時(shí)”施用或給藥在此包括:2小時(shí)或更短時(shí)間內(nèi)、或I小時(shí)或更短時(shí)間內(nèi)施用免疫調(diào)節(jié)劑和包含檢查點(diǎn)抑制劑的物質(zhì)或程序、更好的是同時(shí)施用。
[0048]“分別”施用或給藥在此包括:免疫調(diào)節(jié)劑的施用與包含檢查點(diǎn)抑制劑的物質(zhì)或程序的施用間隔大于約12小時(shí)、或約8小時(shí)、或約6小時(shí)、或約4小時(shí)、或約2小時(shí)。
[0049]“依次”施用或給藥在此包括:多份和/或多劑次和/或非同一場(chǎng)合地各自給予免疫調(diào)節(jié)劑和化療藥。給予患者免疫調(diào)節(jié)劑可在給予檢查點(diǎn)抑制劑之前和/或之后?；蛘撸跈z查點(diǎn)抑制劑治療之后繼續(xù)對(duì)患者施用免疫調(diào)節(jié)劑。
[0050]或選性表示(如“或”)應(yīng)理解為選項(xiàng)之一、其二或選項(xiàng)間的任意組合。當(dāng)提到或列舉某些事項(xiàng)時(shí)的“一”、“一個(gè)”、“一種”等不定冠詞以及單數(shù)形式涵蓋單數(shù)和復(fù)數(shù)含義。
[0051]“約”在此表示就某特定數(shù)值而言本領(lǐng)域技術(shù)人員可以確定的可接受的誤差范圍，這部分地取決于該值的測(cè)量和確定方式，即，檢測(cè)系統(tǒng)的限度。例如，“約”可以表示本領(lǐng)域常規(guī)實(shí)踐中的I個(gè)單位或大于I個(gè)單位的標(biāo)準(zhǔn)偏差?；蛘撸凹s”表示的范圍可達(dá)20%。當(dāng)說明書和權(quán)利要求中給出特定數(shù)值，除非另作說明，應(yīng)推定其涵蓋圍繞該特定數(shù)值可接受誤差范圍內(nèi)“約”的意思。
[0052]本
【發(fā)明內(nèi)容】
之一中，所述免疫調(diào)節(jié)劑包含熱滅活的分枝桿菌，優(yōu)選全細(xì)胞分枝桿菌。本發(fā)明可用的分枝桿菌種類有例如:祀牛分枝桿菌(M.vaccae )、抗熱分枝桿菌(M.thermoresistibiIe)、微黃分枝桿菌(M.f Iavescens)、杜氏分支桿菌(M.duvalii)、草分枝桿菌(M.phlei)、奧布分枝桿菌(M.0buense)、副偶發(fā)分枝桿菌(M.parafortuitum)、泥炭蘚分枝桿菌(M.sphagni)、愛知分枝桿菌(M.aichiense)、羅氏分枝桿菌(M.rhodesiae)、新金色分枝桿菌(M.neoaurum)、楚布分枝桿菌(M.chubuense)、托凱分支桿菌(M.tokaiense)、科莫斯分枝桿菌(M.komossense)、金色分枝桿菌(M.aurum)、《^分枝桿菌(M.w)、結(jié)核分枝桿菌(M.tuberculosis)、田鼠分枝桿菌(M.microti )、非洲分枝桿菌(M.africanum)、堪薩斯分枝桿菌(M.kansasii)、海洋分枝桿菌(M.marinum)、猿分枝桿菌(M.simiae)、胃分枝桿菌(M.gastri)、無色分枝桿菌(M.nonchromogenicum)、土分枝桿菌(M.terrae)、次要分枝桿菌(M.triviale)、戈登分枝桿菌(M.gordonae)、瘰病分枝桿菌(M.scrofulaceum)、石錯(cuò)分枝桿菌(M.paraffinicum)、胞內(nèi)分枝桿菌(M.1ntrace I Iulare )、鳥分枝桿菌(M.avium)、蟾分枝桿菌(M.xenopi)、潰瘍分枝桿菌(M.ulcerans)、迪爾諾弗分枝桿菌(M.diernhof eri)、恥垢分支桿菌(M.smegmatis)、蛇分枝桿菌(M.thamnopheos)、微黃分枝桿菌(M.flavescens)、偶發(fā)分枝桿菌(M.fortuitum)、外來分枝桿菌(M.peregrinum)、龜分枝桿菌(M.chelonei)、副結(jié)核分枝桿菌(M.paratuberculosis)、麻風(fēng)分枝桿菌(M.leprae)、鼠麻風(fēng)分枝桿菌(M.1epraemurium)，及其各種組合。
[0053]較好的是，熱滅活的分枝桿菌無病原性。非病原性熱滅活分枝桿菌優(yōu)選牝牛分枝桿菌、奧布分枝桿菌、副偶發(fā)分枝桿菌、金色分枝桿菌、潘氏印度分枝桿菌(M.1ndicuspranii)、草分枝桿菌以及它們的各種組合。更好的是，非病原性熱滅活分枝桿菌是粗糙型變體。給予患者的分枝桿菌的量足以激發(fā)患者體內(nèi)保護(hù)性免疫反應(yīng)，從而使患者免疫系統(tǒng)能夠產(chǎn)生有效的抗癌癥或抗腫瘤免疫反應(yīng)。本發(fā)明某些實(shí)施方式中有一容納機(jī)構(gòu)(containment means)，其中包含用于本發(fā)明有效量的熱滅活分枝桿菌，一般可以是13至111個(gè)微生物，優(yōu)選14至101()，更優(yōu)選16至101()，更優(yōu)選16至19個(gè)微生物。用于本發(fā)明的熱滅活分枝桿菌有效量可以是13至111個(gè)微生物，優(yōu)選14至101()，更優(yōu)選16至101()，更優(yōu)選16至19個(gè)微生物。用于本發(fā)明的熱滅活分枝桿菌最佳量是17至19個(gè)細(xì)胞或微生物。典型地，本發(fā)明組合物的人用或動(dòng)物用給藥量可以是18至19個(gè)細(xì)胞。或者，劑量為0.0lmg至Img或0.1mg至Img懸浮劑或干制劑形式的微生物。
[0054 ]特別優(yōu)選祀牛分枝桿菌和奧布分枝桿菌。
[0055]牝牛分枝桿菌和奧布分枝桿菌在宿主中誘導(dǎo)復(fù)雜的免疫反應(yīng)。用此類制劑處理將激發(fā)先天免疫和I型免疫，包括Thl和巨噬細(xì)胞激活和細(xì)胞毒細(xì)胞活性。它們還獨(dú)立地通過免疫調(diào)節(jié)機(jī)制下調(diào)過度Th2反應(yīng)。這恢復(fù)了免疫系統(tǒng)的健康平衡。
[0056]本發(fā)明可用來治療腫瘤疾病，例如實(shí)體或非實(shí)體癌癥?！疤幚怼被颉爸委煛痹诖税A(yù)防、減少/輕、控制和/或抑制腫瘤疾病。此類疾病包括:肉瘤、癌、腺癌、黑素瘤、骨髓瘤、胚細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤、淋巴瘤或白血病。癌癥的例子包括(例如):癌瘤、肉瘤、腺癌、黑素瘤、神經(jīng)系統(tǒng)癌癥(胚細(xì)胞瘤、神經(jīng)膠質(zhì)瘤)、間皮瘤和網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)、淋巴系統(tǒng)或造血系統(tǒng)瘤腫瘤性疾病(如骨髓瘤、淋巴瘤或白血病)。尤其，腫瘤體(neoplasm)、腫瘤或癌癥包括:肺腺癌、肺癌、彌漫型胃癌或間質(zhì)性胃癌、結(jié)腸腺癌、前列腺腺癌、食管癌、乳腺癌、胰腺腺癌、卵巢腺癌、腎上腺腺癌、子宮內(nèi)膜腺癌或子宮腺癌。
[0057]腫瘤形成、腫瘤和癌癥包括它們的良性、惡性、轉(zhuǎn)移和非轉(zhuǎn)移型，以及各階段(1、I1、II1、IV或V)或各等級(jí)(G1、G2、G3等)，或者，發(fā)展中、惡化中、已穩(wěn)定或緩解(remiss1n)狀態(tài)的腫瘤形成、腫瘤、癌癥或轉(zhuǎn)移?？捎帽景l(fā)明治療的癌癥包括但不限于:膀胱、血液、骨、骨髓、腦、乳房、結(jié)腸、食道、胃腸、膠、頭、腎、肝、肺、鼻咽、頸、卵巢、前列腺、皮膚、胃、睪丸、舌或子宮的細(xì)胞或腫瘤體。此外，還可以是以下組織學(xué)分型的癌癥，包括但不限于:腫瘤體，惡性;癌;癌，未分化的；巨細(xì)胞和梭形細(xì)胞癌；小細(xì)胞癌;乳頭狀癌;鱗狀細(xì)胞癌;淋巴上皮癌；基底細(xì)胞癌；毛基質(zhì)癌(pilomatrix carcinoma);移行細(xì)胞癌；乳頭狀移行細(xì)胞癌；腺癌；胃泌素瘤，惡性;膽管癌;肝細(xì)胞癌;合并肝細(xì)胞癌和膽管癌;小梁腺癌;腺樣囊性癌;腺瘤性息肉的腺癌;腺癌，家族性結(jié)腸息肉病;實(shí)體癌;類癌腫瘤，惡性;細(xì)支氣管肺泡癌;乳頭狀腺癌;嫌色細(xì)胞癌;嗜酸細(xì)胞癌;嗜酸性腺癌;嗜堿粒細(xì)胞癌;透明細(xì)胞腺癌;顆粒細(xì)胞癌；濾泡狀腺癌;乳頭和濾泡狀腺癌;無包膜形成的硬化性癌;腎上腺皮質(zhì)癌;子宮內(nèi)膜樣癌;皮膚附屬器癌;大汗腺腺癌;皮脂腺腺癌;訂貯腺癌(ceruminous adenocarcinoma)；粘液表皮樣癌;囊腺癌;乳頭狀囊腺癌;乳頭狀漿液性囊腺癌;粘液性囊腺癌;粘液腺癌；印戒細(xì)胞癌；浸潤(rùn)性導(dǎo)管癌;髓樣癌;小葉癌;炎性癌;佩吉特病(Paget ’ s disease)，乳腺;腺泡細(xì)胞癌；腺鱗癌;腺癌伴鱗狀上皮化生;胸腺瘤，惡性;卵巢間質(zhì)腫瘤，惡性;卵泡膜細(xì)胞瘤，惡性;顆粒細(xì)胞腫瘤，惡性；男性母細(xì)胞瘤(androblastoma)，惡性；支持細(xì)胞癌(Sertol i cellcarcinoma)；間質(zhì)細(xì)胞腫瘤(Leydig cell tumour)，惡性；脂質(zhì)細(xì)胞腫瘤，惡性；副神經(jīng)節(jié)瘤，惡性;乳房外副神經(jīng)節(jié)瘤，惡性;嗜鉻細(xì)胞瘤;血管球肉瘤;惡性黑色素瘤;非黑色素性黑色素瘤；淺表擴(kuò)散性黑色素瘤；巨大色素痣內(nèi)惡性黑素瘤；上皮樣細(xì)胞黑色素瘤；藍(lán)痣，惡性；肉瘤;纖維肉瘤;纖維組織細(xì)胞瘤，惡性;粘液肉瘤;脂肪肉瘤;平滑肌肉瘤;橫紋肌肉瘤；胚胎性橫紋肌肉瘤;肺泡橫紋肌肉瘤；間質(zhì)肉瘤;混合瘤;苗勒氏混合瘤(Mullerian mixedtumor);腎母細(xì)胞瘤;肝母細(xì)胞瘤;癌肉瘤;間葉瘤，惡性;布倫納瘤(Brenner tumor)，惡性；葉狀瘤，惡性;滑膜肉瘤；間皮瘤，惡性;無性細(xì)胞瘤;胚胎癌;畸胎瘤，惡性;卵巢甲狀腺腫樣瘤，惡性;絨膜癌；中腎瘤，惡性;血管肉瘤;血管內(nèi)皮細(xì)胞瘤，惡性;卡波濟(jì)氏肉瘤(Kaposi’ssarcoma);血管外皮細(xì)胞瘤，惡性;淋巴管肉瘤;骨肉瘤;近皮層骨肉瘤;軟骨肉瘤;軟骨母細(xì)胞瘤，惡性；間質(zhì)軟骨肉瘤;骨頭巨細(xì)胞腫瘤;尤文氏肉瘤(Ewing’ s sarcoma)；牙源性腫瘤，惡性;成釉細(xì)胞牙肉瘤;成釉細(xì)胞瘤，惡性;成釉細(xì)胞纖維肉瘤;松果體瘤，惡性;脊索瘤;神經(jīng)膠質(zhì)瘤，惡性;室管膜瘤;星形細(xì)胞瘤;原漿星形細(xì)胞瘤;纖維星形細(xì)胞瘤;星形母細(xì)胞瘤；膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;少突膠質(zhì)細(xì)胞瘤;少突神經(jīng)膠質(zhì)母細(xì)胞瘤;原始神經(jīng)外胚層腫瘤;小腦肉瘤；神經(jīng)節(jié)母細(xì)胞瘤;神經(jīng)母細(xì)胞瘤;視網(wǎng)膜母細(xì)胞瘤;嗅神經(jīng)源性腫瘤;腦脊膜瘤，惡性;神經(jīng)纖維肉瘤；神經(jīng)鞘瘤，惡性；顆粒細(xì)胞腫瘤，惡性；惡性淋巴瘤；霍奇金病(Hodgkin ’ sdisease);霍奇金氏(Hodgkin’ s);類肉芽腫;惡性小淋巴細(xì)胞淋巴瘤;惡性彌散性大淋巴細(xì)胞淋巴瘤;濾泡性惡性淋巴瘤;蕈樣真菌病;其他指定非霍奇金淋巴瘤;惡性組織細(xì)胞增生癥；多發(fā)性骨髓瘤;肥大細(xì)胞肉瘤;免疫增殖性小腸??；白血病;淋巴樣白血病;漿細(xì)胞白血病;紅白血病;淋巴肉瘤細(xì)胞白血??；髓性白血?。皇葔A性白血?。皇人嵝粤＜?xì)胞白血?。粏魏思?xì)胞白血病;肥大細(xì)胞白血??；巨核細(xì)胞白血病;髓樣肉瘤和毛細(xì)胞白血病。較好的，腫瘤疾病是以下癌癥相關(guān)腫瘤:前列腺癌、肝癌、腎癌、肺癌、乳癌、結(jié)直腸癌、胰腺癌、腦癌、肝細(xì)胞癌、淋巴瘤、白血病、胃癌、子宮頸癌、卵巢癌、甲狀腺癌、黑色素瘤、頭頸部癌、皮膚癌和軟組織肉瘤和/或其他形式癌癥。腫瘤可以是轉(zhuǎn)移性或惡性腫瘤。
[0058]更好的是，待治療的腫瘤疾病是膜腺癌、乳癌、肺癌、前列腺癌和皮膚癌癥，最好是胰腺癌。
[0059]本發(fā)明實(shí)施方式之一中，檢查點(diǎn)抑制劑治療在與免疫調(diào)節(jié)劑(最好是全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌)的聯(lián)合療法中用于降低或抑制原發(fā)腫瘤或癌癥向其他部位轉(zhuǎn)移、或在離開原發(fā)腫瘤或癌癥的其他部位形成或建立起轉(zhuǎn)移性腫瘤或癌癥，由此抑制或降低腫瘤或癌癥復(fù)發(fā)或腫瘤或癌癥惡化。
[0060]本發(fā)明另一實(shí)施方式中，提供的是一種治療癌癥的聯(lián)合療法，包括檢查點(diǎn)抑制劑阻抑和免疫調(diào)節(jié)劑，能夠激發(fā)強(qiáng)而持久的免疫反應(yīng)，增強(qiáng)的治療效果和更為可控的毒性。
[0061]本發(fā)明另一實(shí)施方式中，提供的是一種治療癌癥的聯(lián)合療法，包括檢查點(diǎn)抑制劑阻抑和免疫調(diào)節(jié)劑，所述免疫調(diào)節(jié)劑(i)激發(fā)先天免疫和I型免疫，包括Thl和巨噬細(xì)胞激活和細(xì)胞毒細(xì)胞活性，并且(i i)通過免疫調(diào)節(jié)機(jī)制獨(dú)立下調(diào)過度的抗Th2反應(yīng);所述免疫調(diào)節(jié)劑可以是全細(xì)胞分枝桿菌，可選祀牛分枝桿菌或奧布分枝桿菌。
[0062]本發(fā)明實(shí)施方式之一中，提供的是一種治療癌癥和/或避免轉(zhuǎn)移確立的方法，該方法采用檢查點(diǎn)抑制劑與全細(xì)胞分枝桿菌發(fā)生協(xié)同作用。
[0063]其他實(shí)施方式中，本發(fā)明方法包括以下一項(xiàng)或多項(xiàng):I)降低或抑制可能或的確發(fā)生轉(zhuǎn)移的腫瘤或癌細(xì)胞的生長(zhǎng)、增殖、可動(dòng)性(mobility)或侵潤(rùn)性，2)減少或抑制原發(fā)腫瘤或癌癥向一個(gè)或多個(gè)其他部位、位置或區(qū)域轉(zhuǎn)移的形成或確立，3)降低或抑制原發(fā)腫瘤或癌癥之外一個(gè)或多個(gè)其他部位、位置或區(qū)域已形成或已確立的轉(zhuǎn)移腫瘤或癌癥的生長(zhǎng)或增殖，4)減少或抑制轉(zhuǎn)移形成或確立后的進(jìn)一步轉(zhuǎn)移，5)延長(zhǎng)總體生存期，6)延長(zhǎng)無惡化生存期，或7)穩(wěn)定病情。
[0064]本發(fā)明實(shí)施方式之一中，給予檢查點(diǎn)抑制劑治療在與免疫調(diào)節(jié)劑(最好是全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌)的聯(lián)合療法中令對(duì)象的病情產(chǎn)生可測(cè)或可量的改善，例如減輕或緩解一項(xiàng)或多項(xiàng)與存在細(xì)胞增殖或細(xì)胞增生性病癥、腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移相關(guān)的不良(身體)癥狀或結(jié)果，即有療效或良效。
[0065]療效或良效是各種客觀或主觀、瞬時(shí)、短期或長(zhǎng)期的狀態(tài)或病情改善，或是細(xì)胞增殖或細(xì)胞增生性病癥如腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移相關(guān)或所致不良癥狀發(fā)生、程度、持續(xù)時(shí)間或頻次的降低。這可使生存得到改善。例如以下情形時(shí)認(rèn)為本發(fā)明方法獲得了令人滿意的臨床終點(diǎn):一種或多種相關(guān)異常、不良癥狀或并發(fā)癥的嚴(yán)重程度、持續(xù)時(shí)間或頻率越來越低或部分降低;細(xì)胞增殖或細(xì)胞增生性病癥如腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移的一種或多種生理學(xué)、生物化學(xué)或細(xì)胞性表現(xiàn)或特征被抑制或逆轉(zhuǎn)。所以，療效或改善可以是但不限于:目標(biāo)增殖性細(xì)胞(如腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移)被摧毀，或細(xì)胞增殖或細(xì)胞增生性病癥如腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移相關(guān)或所致一種、多種、大部分或全部異常、不良癥狀或并發(fā)癥消減。然而，療效或改善不必是痊愈或所有目標(biāo)增殖性細(xì)胞(如腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移)的完全消滅，也不必是細(xì)胞增殖或細(xì)胞增生性病癥如腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移相關(guān)或所致的所有異常、不良癥狀或并發(fā)癥的完全消除。例如，抑制腫瘤或癌癥發(fā)展或惡化所致腫瘤或癌細(xì)胞團(tuán)塊的部分消滅，或腫瘤或癌癥質(zhì)量、尺寸或細(xì)胞數(shù)量的穩(wěn)定就能夠降低死亡率，延長(zhǎng)生存期，哪怕是數(shù)天、數(shù)周或數(shù)月，即便腫瘤或癌癥的質(zhì)量、尺寸或細(xì)胞數(shù)量仍有部分或大部分留存。
[0066]療效的具體非限制性例子有:腫瘤形成、腫瘤或癌癥或轉(zhuǎn)移的量(尺寸或細(xì)胞質(zhì)量)或細(xì)胞數(shù)量減少，抑制或避免腫瘤形成、腫瘤或癌癥的量的增加(如實(shí)現(xiàn)穩(wěn)定)，減緩或抑制腫瘤形成、腫瘤或癌癥發(fā)展、惡化或轉(zhuǎn)移，或抑制腫瘤形成、腫瘤或癌癥的增殖、生長(zhǎng)或轉(zhuǎn)移。
[0067]本發(fā)明實(shí)施方式之一中，檢查點(diǎn)抑制劑治療在與免疫調(diào)節(jié)劑(最好是全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌)的聯(lián)合療法中，根據(jù)irRC(由不同時(shí)間的效果評(píng)價(jià)和腫瘤負(fù)荷得出)，產(chǎn)生可測(cè)或可量的改善或整體效果，這包括以下之一或多項(xiàng):(i)irCR_所有病灶完全消失，不論可測(cè)或非可測(cè)，且無新的病灶(以有記錄首日起至少4周的重復(fù)、連續(xù)評(píng)價(jià)來確認(rèn))，(ii)irPR-月中瘤負(fù)荷相比基線降低>50% (以有記錄首日起至少4周的連續(xù)評(píng)價(jià)來確認(rèn))。
[0068]本發(fā)明方法可能不是即時(shí)起效。例如，治療開始后可能出現(xiàn)腫瘤形成、腫瘤或癌細(xì)胞數(shù)量或質(zhì)量上升，但經(jīng)一段時(shí)間后最終會(huì)令對(duì)象的腫瘤細(xì)胞質(zhì)量、尺寸或數(shù)量被穩(wěn)定或減少。
[0069]能得到抑制、減輕、減少、推遲或避免的其他腫瘤形成、腫瘤、癌癥和轉(zhuǎn)移相關(guān)不良癥狀或并發(fā)癥包括例如:惡心，食欲不振、嗜睡、疼痛和不適。所以，細(xì)胞增殖性疾病相關(guān)或所致不良癥狀或并發(fā)癥程度、持續(xù)時(shí)間或頻率的部分或完全消減，對(duì)象生活質(zhì)量和/或幸福感的改善，例如體能、食欲、精神狀態(tài)的改善，這些都是療效的具體非限定性例子。
[0070]所以，療效或改善包括接受治療的對(duì)象生活質(zhì)量的主觀改善。其他實(shí)施方式中，本發(fā)明方法延長(zhǎng)對(duì)象的生存期(存活)。另一實(shí)施方式中，本發(fā)明方法改善對(duì)象的生活質(zhì)量。
[0071]最佳實(shí)施方式中，給予檢查點(diǎn)抑制劑治療在與免疫調(diào)節(jié)劑(最好是全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌)的聯(lián)合療法中在以下一項(xiàng)或多項(xiàng)疾病狀態(tài)和發(fā)展標(biāo)志上獲得臨床相關(guān)性改善:
(i):總生存期，(ii):無惡化生存期，(iii):總響應(yīng)率，(iv):轉(zhuǎn)移性疾病下降，(V):腫瘤抗原循環(huán)水平，所述腫瘤抗原例如糖抗原19.9(CA19.9)和癌胚抗原(CEA)或基于腫瘤的其他抗原，(vii):營(yíng)養(yǎng)狀況(體重、食欲、血清白蛋白)，(viii):疼痛的控制或鎮(zhèn)痛藥的使用，(ix):CRP/白蛋白比例。
[0072]熱滅活全細(xì)胞牝牛分枝桿菌和奧布分枝桿菌治療引發(fā)較為復(fù)雜的免疫，不僅包括先天免疫和I型免疫還包括免疫調(diào)節(jié)，后者更有效地恢復(fù)正常免疫功能。
[0073]按照本發(fā)明，免疫調(diào)節(jié)劑與檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)用。
[0074]優(yōu)選實(shí)施方式之一中，檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)(:1'1^-4、？0-1、1^-1^1、1'頂-3、81'1^、￥13了厶和/或1^6-3的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，及其各種組合。
[0075]另一優(yōu)選實(shí)施方式之一中，檢查點(diǎn)抑制治療包括給予亞治療量和/或亞療程的選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)0'1^-4、？0-1、^)-1^、1'頂-3、81'1^、￥13了4和/或1^6-3的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，及其各種組合。
[0076]另一優(yōu)選實(shí)施方式之一中，檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)ro-1和/或ro-Ll的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞。
[0077]另一優(yōu)選實(shí)施方式之一中，檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)ro-1和/或ro-Ll的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，同時(shí)、分別或依次給予針對(duì)CTLA-4的阻抑性抗體或其抗原結(jié)合片段。
[0078]“聯(lián)合”或“聯(lián)用”在此表示包括與分枝桿菌同時(shí)、分別或依次給予檢查點(diǎn)抑制劑。因此，檢查點(diǎn)抑制劑與分枝桿菌可以共存于同一藥物制劑或分處不同藥物制劑，同時(shí)或在不同時(shí)刻給予。
[0079]這樣，分枝桿菌和檢查點(diǎn)抑制劑可以是彼此分開、用來同時(shí)或者不同時(shí)刻給藥的藥物。
[0080]較好的是，分枝桿菌和檢查點(diǎn)抑制劑是用來不同時(shí)刻給藥的彼此分開的藥物。分別且在不同時(shí)刻給藥時(shí)，可以先給分枝桿菌也可先給檢查點(diǎn)抑制劑;然而，先給檢查點(diǎn)抑制劑然后給分枝桿菌為宜。此外，這兩者可以同日也可以非同日給予，并且，治療周期內(nèi)，它們的給藥計(jì)劃可以相同也可以不同。
[0081]本發(fā)明實(shí)施方式之一中，治療周期的構(gòu)成為:每日、每周、隔周或每月給予分枝桿菌，同時(shí)每周給予檢查點(diǎn)抑制劑?；蛘撸瑱z查點(diǎn)抑制劑給藥之前和/或之后給予分枝桿菌。
[0082]本發(fā)明另一實(shí)施方式中，檢查點(diǎn)抑制劑給藥之前和之后都給患者施用分枝桿菌。即，實(shí)施方式之一中，檢查點(diǎn)抑制劑給藥之前和之后都給患者施用該免疫調(diào)節(jié)劑。
[0083]根據(jù)患者個(gè)體對(duì)治療的耐受性，可進(jìn)行推遲給藥和/或減量和調(diào)整給藥計(jì)劃。
[0084]或者，可在給予有效量分枝桿菌的同時(shí)給予檢查點(diǎn)抑制劑。
[0085]免疫調(diào)節(jié)劑(優(yōu)選全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌)可經(jīng)以下途徑給予患者:腸胃外、經(jīng)口、舌下、經(jīng)鼻或經(jīng)肺途徑。優(yōu)選實(shí)施方式之一中，免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)選自以下所述的腸胃外途徑給予:皮下、皮內(nèi)、真皮下(subdermal)、腹膜內(nèi)、靜脈和囊內(nèi)注射。更好的是，腸胃外途徑給藥不包括瘤內(nèi)注射分枝桿菌胞壁提取物。
[0086]按本發(fā)明接受檢查點(diǎn)抑制治療的對(duì)象可同時(shí)、分別或依次接受免疫調(diào)節(jié)劑(優(yōu)選全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌)給藥。
[0087]本
【發(fā)明內(nèi)容】
之一中，有效量的免疫調(diào)節(jié)劑可單劑給出，或者分多個(gè)(重復(fù))劑次，例如兩次或更多次、三次或更多次、四次或更多次、五次或更多次、十次或更多次、或二十次或更多次。免疫調(diào)節(jié)劑給藥可比檢查點(diǎn)抑制治療早約4周至I日，如約4周至I周、或約3周至I周、或約3周至2周。給藥可以是單劑次或是多劑次。
[0088]本發(fā)明優(yōu)選實(shí)施方式之一中，提供了用于與檢查點(diǎn)抑制劑聯(lián)合治療腫瘤疾病的分枝桿菌，其在給予檢查點(diǎn)抑制劑之前、并行和/或之后給予對(duì)象。
[0089]本發(fā)明另一優(yōu)選實(shí)施方式之一是治療、減輕、抑制或控制對(duì)象體內(nèi)腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，該方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)檢查點(diǎn)抑制劑和(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌，所述方法的療效高于單用該檢查點(diǎn)抑制劑或免疫調(diào)節(jié)劑。
[0090]本發(fā)明另一優(yōu)選實(shí)施方式之一是治療、減輕、抑制或控制對(duì)象體內(nèi)腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，該方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)檢查點(diǎn)抑制劑和(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌;其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑齊IJ:針對(duì)(:1'1^-4、？0-1、^)-1^、1'頂-3、81'1^、￥13了4和/或1^6-3的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，及其各種組合。
[0091]本發(fā)明另一優(yōu)選實(shí)施方式之一是治療、減輕、抑制或控制對(duì)象體內(nèi)腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，該方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)檢查點(diǎn)抑制劑和(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌;其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)ro-1和/或ro-Li的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞。
[0092]本發(fā)明另一優(yōu)選實(shí)施方式之一是治療、減輕、抑制或控制對(duì)象體內(nèi)腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，該方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)檢查點(diǎn)抑制劑和(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌;其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑齊IJ:針對(duì)(:1'1^-4、？0-1、^)-1^、1'頂-3、81'1^、￥13了4和/或1^6-3的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，及其各種組合;其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予亞治療量和/或亞療程的所述阻抑性抗體或其抗原結(jié)合片段。
[0093]本發(fā)明另一優(yōu)選實(shí)施方式之一是治療、減輕、抑制或控制對(duì)象體內(nèi)腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，該方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)兩種或更多種檢查點(diǎn)抑制劑和
(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，優(yōu)選全細(xì)胞熱滅活分枝桿菌;其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)0'1^-4、？0-1、^)-1^、1'頂-3、81'1^、￥13了4和/或1^6-3的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，及其各種組合;所述檢查點(diǎn)抑制治療可選性地包括給予亞治療量和/或亞療程的選自細(xì)胞、蛋白質(zhì)、肽、抗體或其抗原結(jié)合片段的所述阻抑劑。
[0094]本發(fā)明實(shí)施方式之一中，分枝桿菌可以是以一定劑型給予患者的藥物的形式。
[0095]本發(fā)明某些情形中的容器可以是小瓶、安瓿、注射器、膠囊、片劑或管。某些情形中，分枝桿菌被凍干并配制成供臨用前重懸。而其他一些情形中，分枝桿菌懸溶于一定體積的藥學(xué)上可接受的液體中。某些最佳實(shí)施方式中，有一容器，其中包含單個(gè)劑量單位的懸溶于藥學(xué)上可接受載體中的分枝桿菌，所述單位劑量含約IxlO6至約IxlO1t3個(gè)微生物。一些非常特定的實(shí)施方式中，分枝桿菌懸溶液的體積是約0.1ml至10ml、或約0.3ml至2ml、或約
0.5ml至2ml。上述組合物能提供對(duì)本文所述免疫治療應(yīng)用來說理想的單位劑量。
[0096]就本發(fā)明方法和/或組合物而言的實(shí)施方式也可用于本文所述的其他方法或組合物。因此，就一種方法或組合物而言的實(shí)施方式也可用于本發(fā)明的其他方法和組合物。
[0097]某些情形中，將非病原性熱滅活分枝桿菌給到對(duì)象的特定部位上或特定部位中。例如，可將本發(fā)明分枝桿菌組合物例如包含奧布分枝桿菌的組合物給到腫瘤附近或淋巴結(jié)附近，例如腫瘤周圍的排出組織(drain tissue)。這樣，某些情形中，分枝桿菌組合物定點(diǎn)給藥可以是靠近頸后、扁桃體、腋窩、腹股溝、頸前、下頌下、頦下或鎖骨上路(superclavicular)淋巴結(jié)。
[0098]免疫調(diào)節(jié)劑給藥的持續(xù)時(shí)間可以是患者體內(nèi)有癌癥或腫瘤存在期間，或直至癌癥消減或穩(wěn)定。也可以在患者癌癥或腫瘤消減或穩(wěn)定之后繼續(xù)使用免疫調(diào)節(jié)劑。
[0099]本發(fā)明分枝桿菌組合物包含有效量的分枝桿菌，通常是分散于藥學(xué)上可接受載體中的分枝桿菌?！八帉W(xué)上可接受的或藥理學(xué)上可接受的”指適當(dāng)給予動(dòng)物(例如人)不會(huì)產(chǎn)生不良、過敏或其他不期望的反應(yīng)的分子或組合物。結(jié)合本文所揭示的內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員知道如何制備含分枝桿菌的藥物組合物，例如可參考Remington ’ s PharmaceuticalSciences(《雷明頓藥物科學(xué)》)，第18版，Mack Printing Company(麥克印刷公司),1990。并且，就動(dòng)物(如人)給藥而言，制劑應(yīng)符合無菌、無熱源、常規(guī)安全和純度標(biāo)準(zhǔn)。藥理學(xué)上可接受的載體的例子之一在此是硼酸鹽緩沖液或無菌鹽水溶液(0.9%NaCl)。
[0100]“藥學(xué)上可接受的載體”在此包括各種即所有溶劑、分散介質(zhì)、包衣、表面活性劑、抗氧化劑、防腐劑(如抗細(xì)菌劑、抗真菌劑)、等滲劑、吸收延遲劑、鹽、防腐劑、藥物、藥物穩(wěn)定劑、凝膠、粘合劑、賦形劑、崩解劑、潤(rùn)滑劑、甜味劑、調(diào)味劑、染料之類物質(zhì)，及它們的各種組合，正如本領(lǐng)域技術(shù)人員可知(見，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences(《雷明頓藥物科學(xué)》)，第18版，Mack Printing Company(麥克印刷公司)，1990，第1289-1329頁)。[0101 ]優(yōu)選實(shí)施方式之一中，免疫調(diào)節(jié)劑經(jīng)選自以下所述的腸胃外途徑給予:皮下、皮內(nèi)、真皮下、腹膜內(nèi)、靜脈和囊內(nèi)注射。皮內(nèi)注射能夠?qū)⒄莘种U菌組合物遞送到真皮層，真皮層受到免疫監(jiān)控因而能夠激發(fā)抗癌癥免疫反應(yīng)并促進(jìn)局部淋巴結(jié)處的免疫細(xì)胞增殖。
[0102]雖然本發(fā)明分枝桿菌組合物在非常優(yōu)選的實(shí)施方式中為直接皮內(nèi)注射，某些情況中也可用其他給藥方法。因此，某些情境中，本發(fā)明熱滅活分枝桿菌可以以下所述方式給予:注射、輸液、連續(xù)輸液、靜脈注射、皮內(nèi)、動(dòng)脈內(nèi)、腹腔內(nèi)、病灶內(nèi)、玻璃體內(nèi)、陰道內(nèi)、直腸內(nèi)、局部、瘤內(nèi)、肌肉內(nèi)、腹腔內(nèi)、皮下、結(jié)膜下、囊內(nèi)、粘膜、心包內(nèi)、臍內(nèi)、眼內(nèi)、口服、顱內(nèi)、關(guān)節(jié)內(nèi)、前列腺內(nèi)、胸膜內(nèi)、氣管內(nèi)、鼻內(nèi)、局部(topicalIy)、區(qū)域(localIy)、吸入(例如氣霧劑吸入)、通過導(dǎo)管、通過灌洗或用其他方法，或以上所述的各種組合，正如本領(lǐng)域技術(shù)人員可知(見，例如Remington’s Pharmaceutical Sciences(《雷明頓藥物科學(xué)》)，第18版，Mack Printing Company(麥克印刷公司)，1990)。更好的是，腸胃外途徑給藥不包括瘤內(nèi)注射分枝桿菌胞壁提取物。
[0103]以上提到的出版物均通過引用納入本文。以上所述本發(fā)明方法和系統(tǒng)的各種修改和變化形式對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員來說是顯而易見的，且顯然屬于本發(fā)明構(gòu)思和范圍之內(nèi)。盡管以上結(jié)合優(yōu)選實(shí)施方式對(duì)本發(fā)明進(jìn)行了說明，應(yīng)當(dāng)認(rèn)為，權(quán)利要求要求保護(hù)的本發(fā)明不限于這些具體的實(shí)施方式。事實(shí)上，對(duì)于生物化學(xué)、免疫學(xué)及相關(guān)領(lǐng)域的技術(shù)人員而言，本發(fā)明實(shí)施方式除以上所述之外的各種改變和變化形式是顯而易見的，應(yīng)納入權(quán)利要求保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0104]進(jìn)一步通過以下非限定性實(shí)施例來說明本發(fā)明。
[0105]實(shí)施例1
[0106]成年C5 7 B L / 6小鼠側(cè)腹皮下注射15個(gè)源自K P C小鼠胰腺癌細(xì)胞系的細(xì)胞(Hingorani等，Cancer Cell ,2005,7:469-48)。這些鼠膜腺癌細(xì)胞帶有Kras、p53和Pdx-Cre內(nèi)突變(Hingorani等，Cancer Cell, 2005,7:469-48)。
[0107]當(dāng)注射的腫瘤細(xì)胞長(zhǎng)成可觸及腫瘤(第O日)，小鼠接受無治療或以下治療:
[0108]1)0.1mg奧布分枝桿菌NTCT 13365八氧，整個(gè)研究過程中，按日輪換地在頸后和尾根皮下注射，5日注射、2日暫歇；
[0109]2)1 Omg/kg抗TOL-1單抗，腹膜內(nèi)注射，每周一次；
[0110]3)抗TOL-1聯(lián)合奧布分枝桿菌NTCT 13365，劑量和計(jì)劃與以上單用相同。
[0111]全程監(jiān)測(cè)腫瘤生長(zhǎng)以確定所施的治療對(duì)于縮小腫瘤和改善生存是否有效。
[0112]圖1數(shù)據(jù)顯示:接受抗I3DL-1與奧布分枝桿菌NTCT13365聯(lián)合治療的小鼠其腫瘤持續(xù)縮小，看起來控制住了腫瘤。與分別接受兩種治療單用的小鼠相比，腫瘤縮小更明顯。無治療小鼠腫瘤非控生長(zhǎng)，很快病亡。
【主權(quán)項(xiàng)】
1.一種用于治療、減輕、抑制或控制患者腫瘤疾病的免疫調(diào)節(jié)劑，所述腫瘤疾病的患者將接受檢查點(diǎn)抑制治療和與之同時(shí)、分別或依次給予的所述免疫調(diào)節(jié)劑。2.如權(quán)利要求1所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)CTLA-4、PD-l、PD-Ll、HM-3、BTLA、VISTA、LAG-3的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，及其各種組合。3.如權(quán)利要求1或2所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予亞治療量和/或亞療程的所述選自細(xì)胞、蛋白質(zhì)、肽、抗體或其抗原結(jié)合片段的阻抑劑。4.如權(quán)利要求1至3中任一項(xiàng)所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述腫瘤疾病與選自以下所述的癌癥相關(guān):前列腺癌，肝癌，腎臟癌，肺癌，乳房癌，結(jié)直腸癌，乳房癌，胰腺癌，腦癌，肝細(xì)胞癌，淋巴瘤，白血病，胃癌，宮頸癌，卵巢癌，甲狀腺癌，黑色素瘤，癌瘤，頭頸部癌，皮膚癌，軟組織肉瘤。5.如權(quán)利要求4所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述腫瘤疾病與胰腺癌相關(guān)。6.如權(quán)利要求1至5中任一項(xiàng)所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述腫瘤疾病是轉(zhuǎn)移性的。7.如權(quán)利要求1至6中任一項(xiàng)所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述免疫調(diào)節(jié)劑包含全細(xì)胞分枝桿菌。8.如權(quán)利要求7所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述分枝桿菌是非病原性熱滅活分枝桿菌。9.如權(quán)利要求8所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述非病原性熱滅活分枝桿菌選自:牝牛分枝桿菌(M.vaccae)、奧布分枝桿菌(M.0buense)、副偶發(fā)分枝桿菌(M.parafortuitum)、金色分枝桿菌(M.aurum)、潘氏印度分枝桿菌(Μ.indicus pranii)以及它們的各種組合。10.如權(quán)利要求8或9所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述非病原性熱滅活分枝桿菌優(yōu)選粗糙型變體。11.如權(quán)利要求8至10中任一項(xiàng)所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述非病原性熱滅活分枝桿菌用于經(jīng)腸胃外、經(jīng)口、舌下、經(jīng)鼻或經(jīng)肺途徑給藥。12.如權(quán)利要求11所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述腸胃外途徑選自:皮下、皮內(nèi)、真皮下、腹膜內(nèi)或靜脈。13.如權(quán)利要求12所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述腸胃外途徑不包括瘤內(nèi)注射。14.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)ro-ι或ro-Li的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞。15.如前述權(quán)利要求中任一項(xiàng)所述的免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述免疫調(diào)節(jié)劑的給藥在檢查點(diǎn)抑制治療之前和/或之后。16.治療、減輕、抑制或控制對(duì)象的腫瘤形成、腫瘤或癌癥的方法，所述方法包括同時(shí)、分別或依次給予對(duì)象(i)檢查點(diǎn)抑制劑和(ii)免疫調(diào)節(jié)劑，其中，所述方法的療效高于檢查點(diǎn)抑制劑或免疫調(diào)節(jié)劑各自單用。17.如權(quán)利要求16所述的方法，其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)0'1^-4、？0-1、^)-1^、1'頂-3、81'1^、￥1314和/或1^6-3的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞，及其各種組合。18.如權(quán)利要求16或17所述的方法，其中，所述檢查點(diǎn)抑制劑是選自以下所述的阻抑劑:針對(duì)ro-1或ro-Li的抗體或其抗原結(jié)合片段、肽、蛋白質(zhì)、細(xì)胞。19.如權(quán)利要求16至18中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述檢查點(diǎn)抑制治療包括給予亞治療量的所述選自細(xì)胞、蛋白質(zhì)、肽、抗體或其抗原結(jié)合片段的阻抑劑。20.如權(quán)利要求16至19中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述腫瘤形成、腫瘤或癌癥與選自以下所述的癌癥相關(guān):前列腺癌，肝癌，腎臟癌，肺癌，乳房癌，結(jié)直腸癌，乳房癌，胰腺癌，腦癌，肝細(xì)胞癌，淋巴瘤，白血病，胃癌，宮頸癌，卵巢癌，甲狀腺癌，黑色素瘤，癌瘤，頭頸部癌，皮膚癌，軟組織肉瘤。21.如權(quán)利要求20所述的方法，其中，所述腫瘤形成、腫瘤或癌癥與胰腺癌相關(guān)。22.如權(quán)利要求16至21中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述腫瘤形成、腫瘤或癌癥是轉(zhuǎn)移性的。23.如權(quán)利要求16至22中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述免疫調(diào)節(jié)劑包含全細(xì)胞分枝桿菌。24.如權(quán)利要求23所述的方法，其中，所述分枝桿菌是非病原性熱滅活分枝桿菌。25.如權(quán)利要求24所述的方法，其中，所述非病原性熱滅活分枝桿菌選自:牝牛分枝桿菌、奧布分枝桿菌、副偶發(fā)分枝桿菌、金色分枝桿菌、潘氏印度分枝桿菌以及它們的各種組入口 ο26.如權(quán)利要求24或25所述的方法，其中，所述非病原性熱滅活分枝桿菌是粗糙型變體。27.如權(quán)利要求25所述的方法，其中，所述非病原性熱滅活分枝桿菌經(jīng)腸胃外、經(jīng)口、舌下、經(jīng)鼻或經(jīng)肺途徑給藥。28.如權(quán)利要求27所述的方法，其中，所述腸胃外途徑選自:皮下、皮內(nèi)、真皮下、腹膜內(nèi)或靜脈。29.如權(quán)利要求27或28所述的方法，其中，所述腸胃外途徑不包括瘤內(nèi)注射。30.如權(quán)利要求24至29中任一項(xiàng)所述的方法，其中，所述非病原性熱滅活分枝桿菌的給藥量是17至19個(gè)細(xì)胞。31.如權(quán)利要求16所述的方法，其中，根據(jù)總生存期延長(zhǎng)確定療效增強(qiáng)。32.如權(quán)利要求16所述的方法，其中，根據(jù)無惡化生存期增加確定療效增強(qiáng)。33.如權(quán)利要求16所述的方法，其中，根據(jù)腫瘤尺寸縮小或穩(wěn)定確定療效增強(qiáng)。34.如權(quán)利要求16所述的方法，其中，根據(jù)生活質(zhì)量改善確定療效增強(qiáng)。
【文檔編號(hào)】A61K39/04GK105979964SQ201480067986
【公開日】2016年9月28日
【申請(qǐng)日】2014年12月16日
【發(fā)明人】C·阿科爾, J·格蘭奇, K·比亞德
【申請(qǐng)人】英摩杜倫治療學(xué)公司