上述己戟天提取物20份、桂枝提取物3份、白巧及甘草提取物1份，加入5%糊精、 1 %硬脂酸儀，混勻，干法制粒，制備成顆粒劑。
[0063] 實(shí)施例3
[0064] 取上述己戟天提取物6份、桂枝提取物0.5份、白巧及甘草提取物15份，加入3%淀 粉、2%糊精和0.5%硬脂酸儀，W適量的50%乙醇潤(rùn)濕、制軟材，制備成顆粒劑。
[00化]對(duì)比例1:
[0066] 取己戟天提取物6份、白巧提取物5份，加入4%淀粉、混勻，干法制粒，制備成顆粒 劑。
[0067] 對(duì)比例2:
[006引取己戟天提取物6份、桂枝提取物2份，加入2.5%淀粉、0.5滑石粉混勻，干法制粒， 制備成顆粒劑。
[0069] 對(duì)比例3:
[0070] 取桂枝提取物2份、白巧和甘草提取物5份，加入3 %淀粉、0.5滑石粉混勻，干法制 粒，制備成顆粒劑。
[0071] 對(duì)比例4:
[0072] 取己戟天提取物2份、桂枝提取物2份、白巧甘草提取物5份、貫葉連翅提取物4份， 加入2 %淀粉、1 %糊精、0.5滑石粉混勻，干法制粒，制備成顆粒劑。
[0073] 貫葉連翅提取物制備:藥材用甲醇7倍量，提取2次，每次1.化，過(guò)濾，濾液用HCl沉 淀，過(guò)濾得結(jié)晶，純化即得。
[0074] 實(shí)施例4
[0075] 本發(fā)明組合物對(duì)實(shí)驗(yàn)性行為絕望小鼠的抗抑郁作用
[0076] 本發(fā)明組合物對(duì)小鼠自主活動(dòng)的影響
[0077] 取昆明種小鼠160只，雌雄各半，體質(zhì)量18~22g，小鼠正常飲食，自然光照，光暗周 期為12h，室溫(23±1)°C，安靜環(huán)境下飼養(yǎng)3d，使之適應(yīng)環(huán)境。
[0078] 隨即在安靜房間內(nèi)進(jìn)行自主活動(dòng)試驗(yàn)(open field test)進(jìn)行行為學(xué)評(píng)分，從中 挑選得分水平接近者。隨機(jī)分為10組，每組16只，空白對(duì)照組；陽(yáng)性對(duì)照組;原方組（己戟天、 桂枝、龍骨、酸要仁、白巧和甘草，共六位中藥作為原料，按照化201010172280.6的方法進(jìn)行 提取）；提取物組方1(采用實(shí)施例1的配方）、提取物組2(采用實(shí)施例2的配方）、提取物組方3 (采用實(shí)施例3的配方）、對(duì)比例1組（采用對(duì)比例1的配方）、對(duì)比例2組（采用對(duì)比例2的配 方）、對(duì)比例3組(采用對(duì)比例3的配方）、對(duì)比例4組(采用對(duì)比例4的配方）。分別給予供試液， 每天1次，連續(xù)給藥13d，同時(shí)空白對(duì)照組給予等體積的生理鹽水。陽(yáng)性對(duì)照組首6d正常飲 食，不給予任何藥物，第7d開(kāi)始給予鹽酸阿米替林，給藥量為40mg/kg，每天1次。連續(xù)灌胃給 藥8天，每天1次，并于末次灌胃給藥化后，將小鼠放入化S~IA多功能小鼠自主活動(dòng)記錄儀 中，適應(yīng)2min后，觀察記錄小鼠5min內(nèi)的活動(dòng)次數(shù)。W確定藥物對(duì)小鼠神經(jīng)系統(tǒng)的影響。
[0079] 經(jīng)統(tǒng)計(jì)顯示，小鼠給藥組在第8天與空白組自主活動(dòng)次數(shù)無(wú)顯差異。小鼠懸尾應(yīng)激 實(shí)驗(yàn)各組均在第10天末次給藥1小時(shí)后，將小鼠尾部尖端2cm的部位穿入橡皮筋中固定與懸 尾裝置中（TS~200懸尾測(cè)試儀），使小鼠呈現(xiàn)倒掛狀態(tài)。小鼠為克服不正常的體位而掙扎活 動(dòng)，活動(dòng)一定時(shí)間后出現(xiàn)間斷性"不動(dòng)"，顯示"失望"狀態(tài)。先讓小鼠在懸尾裝置上適應(yīng) 2min，然后采集數(shù)據(jù)，累計(jì)4min內(nèi)小鼠的不動(dòng)時(shí)間(motionless time ,MT)。結(jié)果見(jiàn)表1。結(jié)果 表明，陽(yáng)性對(duì)照組、本發(fā)明提供的中藥提取物方均有藥效，其中提取物組1中藥效顯著性最 優(yōu)。
[0080] 小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)
[0081 ] 各組均在第13天末次給藥后1小時(shí)，將小鼠放入高20畑1、直徑14畑1、水深12畑1、水溫 25°C的圓柱形玻璃缸中。小鼠在水中掙扎一段時(shí)間后出現(xiàn)間斷性"不動(dòng)"，表現(xiàn)為在水中停 止掙扎、呈漂浮狀態(tài)，或僅有細(xì)小的肢體運(yùn)動(dòng)W保持頭部浮在水面，顯示"失望"。實(shí)驗(yàn)時(shí)小 鼠在缸中游泳2min適應(yīng)，然后累計(jì)4min內(nèi)小鼠的不動(dòng)時(shí)間(motionless time ,MT)。結(jié)果見(jiàn) 表2。結(jié)果表明各給藥組均可降低游泳不動(dòng)時(shí)間趨勢(shì)，陽(yáng)性對(duì)照組、提取物組方1、組方2和3， 具有顯著性差異;提取物組方1和2與空白組比較有顯著性差異(P<0.05)。
[0082]由小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)及小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知，本發(fā)明提供的提取物組效果明 顯，另外，從對(duì)比例1~3中可知，在缺少本發(fā)明限定的組分中任何一種，都會(huì)顯著降低藥效； 對(duì)比例4使用的是另外一種具備顯著抑郁效果的貫葉連翅提取物替代本發(fā)明部分己戟天提 取物的份數(shù)，從結(jié)果來(lái)看，其效果也顯著比本發(fā)明的差，W上均證明本發(fā)明所提供的中藥提 取物在劑量更低的條件下，具有更顯著抗抑郁作用。
[0083] 表1小鼠懸尾實(shí)驗(yàn)結(jié)果（；±s)
[0084] 組別 動(dòng)物數(shù)（只）劑量（g..ICg-I) 4miii內(nèi)懸雇不動(dòng)時(shí)賊;S) 空白組 m ^ 79.06.28± 19.44 陽(yáng)性對(duì)照姐 16; 0.04 38.1化32.59** 原方姐 16 14.2 58.5 化32.66* 提取物組方 I 16 2.43 44.94±22.40** 提取物沮方2 16 2.43 55.97±24.33? 提取物沮方3 化 2.43 60.93巧1.16 對(duì)比例1組 16 2 JO 巧.43±40名4 對(duì)比例 2 組 16; 2 80 65.8 化 38.49 對(duì)比例 3 組 16: 2.95 69.92巧 8.38 對(duì)比例 4 組 16 3.10 69.巧±31.71
[0085] 表2小鼠強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)結(jié)果（X ±s)
[0086] ~Ml 動(dòng)物數(shù) 剤量（g'Kg-1) 4min的鑛泳不動(dòng)財(cái)間 _____空白組 I 而巧 -妊-馬雨容 陽(yáng)性對(duì)照組 1 0.04 34.28±42.53 虜方組 1 14.2 58.5(仕 19.34? 提取物組方1 1 2.43 巧.45±16.38** 提取物組方 2 1 2.43 (、1.71甘2.；26** 提取物組方 3 1 2.43 65.73± 15.94* 對(duì)比例 1 組 1 2,溯 86.04-_t27.25 對(duì)比例2 組 1 2.80 72.63±20.96 對(duì)比例3 組 1 2.95 70.46+15.44
[0087] 對(duì)比例4組 I 3 JO 的斯±27.25
[008引與空白對(duì)照組比較，*p < 60.05，**p < 0.01
[0089]結(jié)論:本研究結(jié)果顯示，本發(fā)明提供的中藥提取物組合物可顯著縮短懸尾實(shí)驗(yàn)和 強(qiáng)迫游泳實(shí)驗(yàn)小鼠的不動(dòng)時(shí)間，表明在小鼠行為絕望模型實(shí)驗(yàn)中具有較好的抗抑郁作用。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 一種用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于，由以下按重量份數(shù)計(jì)的組 分組成： 巴戟天提取物1~20份 桂枝提取物0.5~7.2份 白芍及甘草提取物0.5~20份； 所述巴戟天提取物中低聚糖含量為55~60%; 所述桂枝提取物中桂皮醛、桂枝有機(jī)酸含量之和為50~55%; 所述白芍及甘草提取物中白芍總苷、甘草總黃酮和甘草三萜酸含量之和為60~68%。2. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于，由以下按 重量份數(shù)計(jì)的組分組成： 巴戟天提取物1~20份 桂枝提取物0.5~7.2份 白芍及甘草提取物0.5~20份； 所述巴戟天提取物中低聚糖含量為58%; 所述桂枝提取物中桂皮醛、桂枝有機(jī)酸含量的52%; 所述白芍及甘草提取物中白芍總苷、甘草總黃酮和甘草三萜酸含量之和為65%。3. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于， 由以下按重量份數(shù)計(jì)的組分組成： 巴戟天提取物6份、桂枝提取物2份、白芍及甘草提取物5份。4. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于， 所述巴戟天提取物采用以下方法制備得到： 稱取巴戟天，加入8~12倍量的30~70%的乙醇，浸泡0.5~lh，然后回流提取1~3次，濃縮； 再加入95%的乙醇進(jìn)行醇沉，調(diào)節(jié)醇沉濃度為70%~90%，靜置抽濾，減壓回收乙醇，超濾膜 濾過(guò)，濾液干燥后即得巴戟天提取物； 所述桂枝提取物采用以下方法制備得到： 稱取桂枝藥材，加入1~3倍量30%~70%的乙醇，悶潤(rùn)0.5~lh，裝入滲漉筒內(nèi)，浸漬24 ~48h，控制流速0.8~1.2ml/min，接收滲漉液，過(guò)濾、低溫減壓濃縮、冷凍干燥后即得所述桂 枝提取物； 所述白芍及甘草提取物采用以下方法制備得到： 稱取白芍、甘草藥材，粉碎，過(guò)80目篩，加1~2倍量藥材質(zhì)量90%乙醇潤(rùn)濕藥材，悶 30min，裝入超臨界設(shè)備萃取釜，控制提取壓力25~27MPa、提取溫度47.5°C~55°C，萃取時(shí)間 70min，同時(shí)緩慢栗入3~5倍藥材質(zhì)量的85%~95%乙醇，每隔lOmin收集提取液，合并，過(guò)濾， 濃縮至0.1~1.0g/mL，通過(guò)大孔吸附樹(shù)脂柱吸附，洗脫、濃縮后，即得所述白芍及甘草提 取物。5. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于，所述巴戟 天提取物采用以下方法制備得到： 稱取巴戟天，加入10倍量的50%的乙醇，浸泡0.5h，然后回流提取2次，濃縮至相對(duì)密度 1.20;再加入95%的乙醇進(jìn)行醇沉，調(diào)節(jié)醇沉濃度為70%，靜置抽濾，減壓回收乙醇，超濾膜 濾過(guò)后，其中濾膜截留分子量為3k，干燥即得巴戟天提取物。6. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于，所述桂枝 提取物采用以下方法制備得到： 稱取桂枝藥材，加入2倍量70%的乙醇，悶潤(rùn)0.5h，裝入滲漉筒內(nèi)，浸漬48h，控制流速 0.8ml/min接收滲漉液，過(guò)濾、低溫減壓濃縮、冷凍干燥后即得所述桂枝提取物。7. 根據(jù)權(quán)利要求6所述的用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于，所述冷凍 干燥條件為：所述冷凍條件為：_80°C中冷凍4h;凍干曲線：-60°C干燥8h，-50°C干燥4 h，-30°C干燥 4h，-10°C干燥 9h，0°C干燥 10h，20°C干燥 6h。8. 根據(jù)權(quán)利要求1所述的用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，其特征在于，所述白芍 及甘草提取物采用以下方法制備得到： 稱取白芍、甘草藥材，粉碎，過(guò)80目篩，加1倍量藥材質(zhì)量90%乙醇潤(rùn)濕藥材，悶30min， 裝入超臨界設(shè)備萃取釜，控制提取壓力27MPa、提取溫度47.5°C、萃取時(shí)間70min，同時(shí)緩慢 栗入3倍藥材質(zhì)量的90%乙醇，每隔lOmin收集提取液，合并，過(guò)濾，濃縮至0.5g/mL，通過(guò) XDA-1型大孔吸附樹(shù)脂，最大上樣液體積為3BV，洗脫溶劑用50%乙醇，用量為3BV洗 脫，洗脫液減壓回收并濃縮，干燥，粉碎即得所述白芍及甘草提取物。9. 一種權(quán)利要求1至8任意一項(xiàng)權(quán)利要求所述的中藥提取物組合物在制備治療抑郁癥 藥物中的應(yīng)用。10. 根據(jù)權(quán)利要求9所述的應(yīng)用，其特征在于，所述藥物包括藥學(xué)上可接受的片劑、丸 劑、顆粒劑或膠囊劑。
【專利摘要】本發(fā)明提供了一種用于治療抑郁癥的中藥提取物組合物，由以下按重量份數(shù)計(jì)的組分：巴戟天提取物？1～20份；桂枝提取物？0.5～7.2份；白芍及甘草提取物？0.5～20份。本發(fā)明進(jìn)一步提供了上述提取物組合物的制備方法和應(yīng)用，通過(guò)本發(fā)明提供的組合物，其有效成分較為明確，制備工藝及產(chǎn)品質(zhì)量可控，臨床療效穩(wěn)定。藥理實(shí)驗(yàn)研究表明，本發(fā)明所獲得的中藥提取物組合物具有顯著抗抑郁作用，且部分觀察指標(biāo)優(yōu)于原方。
【IPC分類】A61K36/746, A61P25/24
【公開(kāi)號(hào)】CN105477126
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201511029571
【發(fā)明人】李勇, 何偉
【申請(qǐng)人】廣東藥學(xué)院
【公開(kāi)日】2016年4月13日
【申請(qǐng)日】2015年12月30日