一種具有抗腫瘤作用的藥物的制備和應(yīng)用
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001] 本發(fā)明屬于醫(yī)藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種藥物的制備方法和在制備治療和（或） 預(yù)防腫瘤藥物中的應(yīng)用，該藥物為新疆阿魏種子和（或）種子的乙醇提取物或（和）從中 分離得到的 4 個(gè)化合物（umbelliprenin,lehmannolone,Iehmannolol和Sinkiangenorin C)中的1個(gè)或多個(gè)化合物。
【背景技術(shù)】
[0002] 新疆阿魏（Ferulasinkiangensis)為傘形科阿魏屬植物，該屬植物全世界約有 150多種，分布于歐洲南部地中海、非洲北部以及中亞及其鄰近地區(qū)。我國(guó)約有26種1變 種，其中包括新疆阿魏。新疆阿魏又名臭阿魏，主要分布于我國(guó)新疆干旱荒漠地區(qū)，中國(guó)藥 典收錄的阿魏為新疆阿魏和阜康阿魏的樹(shù)脂，其具有消積、散痞、殺蟲(chóng)的功效，在當(dāng)?shù)刂饕?用于治療胃腸道疾病和上呼吸道疾病。新疆阿魏應(yīng)用歷史悠久，療效確切，但其中的活性成 分并不清楚，因此在制藥領(lǐng)域需要了解其藥效物質(zhì)基礎(chǔ)，并探尋新的候選藥物。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003] 為解決上述問(wèn)題，通過(guò)研究，從新疆阿魏種子乙醇提取物中分離得到3個(gè)倍半萜 香豆素類(lèi)化合物（umbelliprenin、lehmannolone、Iehmannolol)以及1個(gè)新的有機(jī)酸糖苷 類(lèi)化合物，并命名為SinkiangenorinC。
[0004] 同時(shí)，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，所述化合物對(duì)AGS、Hela具有生長(zhǎng)抑制作用。
[0005] 此外，根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)方面，新疆阿魏種子的乙醇提取物具有抗腫瘤作用。
[0006] 迄今為止以上研究成果尚未有專(zhuān)利或文獻(xiàn)報(bào)道。
[0007] 本發(fā)明的有益效果和意義在于：充分利用新疆阿魏的植物資源，深入研究開(kāi)發(fā)，尋 找具有獨(dú)特化學(xué)結(jié)構(gòu)，活性較強(qiáng)的化合物，以期為臨床研究提供新型抗腫瘤的藥物。
【附圖說(shuō)明】
[0008] 圖1新疆阿魏中具有抗腫瘤作用的化合物的化學(xué)結(jié)構(gòu)
[0009] 圖2化合物4的核磁圖譜
[0010]圖3化合物不同濃度對(duì)AGS、Hela細(xì)胞生長(zhǎng)的抑制作用【具體實(shí)施方式】
[0011] 根據(jù)本發(fā)明所公開(kāi)的技術(shù)內(nèi)容，本領(lǐng)域技術(shù)人員很清楚本發(fā)明的其他實(shí)施方案， 下述實(shí)施方案僅作示例。在不違反本發(fā)明主旨及范圍的情況下，可對(duì)本發(fā)明進(jìn)行各種改變 和改進(jìn)。這些變化應(yīng)在本發(fā)明的保護(hù)范圍之內(nèi)。
[0012] 實(shí)施案例一本發(fā)明新疆阿魏種子乙醇提取物的制備
[0013] 新疆阿魏干燥種子與3-5倍量90% 7醇回流提取，提取液真空濃縮即得。
[0014] 實(shí)施案例二：本發(fā)明3個(gè)倍半萜香豆素化合物以及1個(gè)新的有機(jī)酸糖苷化合物的 制備
[0015] 新疆阿魏干燥種子用90%乙醇回流提取3次，每次2h，合并提取液，減壓濃縮得浸 膏，分別用石油醚、二氯甲烷、水飽和的正丁醇萃取總浸膏的水溶液，萃取液減壓濃縮至稠 膏狀。石油醚部位經(jīng)硅膠柱色譜分離，石油醚-乙酸乙酯（1〇〇 : 1 - 0 : 1)梯度洗脫，得 到10個(gè)組分（Fr. 1~10)。對(duì)Fr. 2進(jìn)行硅膠柱層析，以氯仿-甲醇（I: 0 - 0 : 1)梯度 洗脫得到15個(gè)亞組分（Fr. 2-1~15)，F(xiàn)r. 2-3經(jīng)S印hadexLH-20柱色譜分離純化得到化 合物1。Fr. 2-7流分經(jīng)反相高效液相色譜分離，得到化合物2和3。二氯甲烷部位先經(jīng)正 相硅膠色譜，二氯甲烷-甲醇（1 : : 1)梯度洗脫，得20個(gè)組分（Fr. 1~20)，F(xiàn)r. 3 經(jīng)SephadexLH-20柱色譜分離純化得到化合物4。
[0016] 實(shí)施案例三本發(fā)明3個(gè)倍半萜香豆素化合物和新的有機(jī)酸糖苷化合物的表征
[0017] 經(jīng)過(guò)測(cè)試化合物的理化性質(zhì)、波譜數(shù)據(jù)并通過(guò)查閱文獻(xiàn)確定了 3個(gè)已知倍半萜香 豆素化合物的結(jié)構(gòu)。
[0018] 化合物4為新化合物，其波譜數(shù)據(jù)見(jiàn)表1
[0019]表 1 化合物 4 的 13CATPNMr(CD3OD, 150MHz)和1H-NMR(CD3OD, 600MHz)數(shù)據(jù)
[0021] 實(shí)施案例四發(fā)明化合物umbelliprenin、Iehmannolol和SinkiangenorinC體外 對(duì)AGS細(xì)胞，以及Iehmannolone體外對(duì)Hela細(xì)胞的生長(zhǎng)抑制實(shí)驗(yàn)室。
[0022] (1)實(shí)驗(yàn)藥物：umbelliprenin、lehmannolol、lehmannolone,SinkiangenorinC 含量達(dá)98%以上。
[0023] (2)試劑：人胃癌AGS細(xì)胞、人宮頸癌Hela細(xì)胞（上海細(xì)胞庫(kù)）；胎牛血清、 RPMI1640培養(yǎng)基（美國(guó)Gibco公司）；二甲基亞砜（美國(guó)Sigma公司）；紫杉醇（山東魯抗 辰欣藥業(yè)有限公司）。
[0024] (3)方法：細(xì)胞接種在含質(zhì)量分?jǐn)?shù)為10%的胎牛血清、質(zhì)量分?jǐn)?shù)為2%的谷氨酰胺 的RPM11640培養(yǎng)液中，在37°C，體積分?jǐn)?shù)為5%的CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。每孔6XIO4個(gè)細(xì)胞 密度接種于96孔板中，每孔10iiL，培養(yǎng)過(guò)夜后加入5個(gè)不用濃度藥物（3. 125,6. 25,12. 5， 25, 50iig/ml)分別于48h用MTT法測(cè)定細(xì)胞死亡率。
[0025] (4)結(jié)果：結(jié)果表明，新疆阿魏種子乙醇提取物以及其它4個(gè)化合物對(duì)上述腫瘤細(xì) 胞均有不同程度的生長(zhǎng)抑制作用（圖3) :umbelliprenin，lehmannolol，SinkiangenorinC 對(duì)AGS細(xì)胞的IC50 分別為 4. 6ug/ml，10. 3ug/ml，12. 4ug/ml;lehmannolone對(duì)Hela細(xì) 胞的IC50 為 31.g/ml。
【主權(quán)項(xiàng)】
1. 本發(fā)明涉及一種具有抗腫瘤作用的藥物，其特征在于：該藥物為新疆阿魏種子和 (或）種子乙醇提取物或（和）3個(gè)倍半萜香豆素類(lèi)化合物中的1個(gè)或多個(gè)化合物和（或） 一個(gè)新的有機(jī)酸糖苷類(lèi)化合物。2. 按照權(quán)利要求1所述的3個(gè)倍半萜香豆素以及1個(gè)新的有機(jī)酸糖苷類(lèi)成分，其特 征在于：這些化合物為新疆阿魏種子的醇提取物中分離得到，分別為umbelliprenind)，lehmannolone(2)，lehmannolol(3),SinkiangenorinC(4);化合物 4 為白色無(wú)定型粉末， HR-ESI-MSm/z355. 1160(calcdforC14H2701〇 [M+H20] ,355.1160) ； 7.0(c0.2,MeOH); UV(MeOH)Anax(l〇ge) 202 (2. 01)nm；IR(film)vnax1739cm3. 根據(jù)權(quán)利1所述的一種具有抗腫瘤作用的藥物，其特征在于：所述藥物可以為新疆 阿魏種子以及新疆阿魏種子提取物加工成的膠囊（軟膠囊）、顆粒劑（干懸混劑）、片劑（分 散片、泡騰片、咀嚼片、口崩片）、溶液劑（糖漿）、丸劑（濃縮丸、滴丸、微丸），或者為注射劑 型。4. 權(quán)利要求1~2所述的是新疆阿魏種子乙醇提取物和（或）umbel1iprenin、 ehmanno1one、1ehmanno1〇1，Sinkiangenorin(^4個(gè)化合物中的一個(gè)或多個(gè)化合物的抗腫瘤 活性。5. 權(quán)利要求1~2所述的是新疆阿魏種子乙醇提取物和（或）umbel1iprenin， lehmannolone，lehmannolol和Sinkiangenorin(^4個(gè)化合物中的一個(gè)或多個(gè)化合物在制 備臨床抗腫瘤藥物中的應(yīng)用。6. 權(quán)利要求1~2所述的是新疆阿魏種子乙醇提取物和（或）umbel1iprenin， lehmannolone，lehmannolol和Sinkiangenorin(^4個(gè)化合物中的一個(gè)或多個(gè)化合物在制 備輔助治療臨床抗腫瘤的保健品中的應(yīng)用。
【專(zhuān)利摘要】本發(fā)明涉及的是中具有抗腫瘤作用的藥物的制備和應(yīng)用。該藥物為中藥新疆阿魏種子乙醇提取物和(或)從新疆阿魏種子中分離得到的3個(gè)倍半萜香豆素類(lèi)化合物以及一個(gè)新的有機(jī)酸糖苷類(lèi)化合物。利用各種色譜分離技術(shù)，從新疆阿魏種子的乙醇提取物中分離得到4個(gè)單體化合物，并運(yùn)用現(xiàn)代波譜技術(shù)(IR，UV，MS，1D，2D-NMR)鑒定其化學(xué)結(jié)構(gòu)，最終確定其為umbelliprenin(1)，lehmannolone(2)，lehmannolol(3)以及一個(gè)新化合物Sinkiangenorin？C(4)。實(shí)驗(yàn)研究發(fā)現(xiàn)該乙醇提取物以及從中分離得到的化合物都具有較好的抗腫瘤作用。
【IPC分類(lèi)】C07D311/16, A61P35/00, A61K31/7028, A61K31/366, C07H1/08, C07H15/04, A23L1/30
【公開(kāi)號(hào)】CN105079011
【申請(qǐng)?zhí)枴緾N201410220592
【發(fā)明人】斯建勇, 李曉瑾, 李廣志, 朱軍, 曹麗, 凱撒·蘇來(lái)曼, 賈曉光
【申請(qǐng)人】中國(guó)醫(yī)學(xué)科學(xué)院藥用植物研究所, 新疆維吾爾自治區(qū)中藥民族藥研究所
【公開(kāi)日】2015年11月25日
【申請(qǐng)日】2014年5月21日