一種將甲魚蛋進(jìn)行酶法水解制備抗氧化活性液的方法
【技術(shù)領(lǐng)域】
[0001]本發(fā)明涉及生物技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種將甲魚蛋進(jìn)行酶法水解制備抗氧化活性液的方法。
【背景技術(shù)】
[0002]甲魚養(yǎng)殖企業(yè)一般工作程序是這樣的:5-8月份，甲魚開始產(chǎn)卵，甲魚蛋產(chǎn)生后就進(jìn)行選擇，以區(qū)分受精卵與未受精卵。受精卵繼續(xù)孵化，直至孵化出甲魚苗，出售甲魚苗或繼續(xù)養(yǎng)殖長大出售成品。而目前，未受精的甲魚卵一般作為食品原料加工或丟棄，造成很大程度的浪費。抗氧化物質(zhì)是指低濃度存在時能有效抑制自由基的氧化反應(yīng)，而消除自由基對人體的毒害，是人們預(yù)防衰老的重要原因。目前還沒有利用甲魚蛋制備抗氧化物質(zhì)的有關(guān)報道。

【發(fā)明內(nèi)容】

[0003]本發(fā)明目的在于提供一種將甲魚蛋進(jìn)行酶法水解制備抗氧化活性液的方法。
[0004]本發(fā)明的目的是通過以下技術(shù)方案實現(xiàn):
一種將甲魚蛋進(jìn)行酶法水解制備抗氧化活性液的方法，其特征在于，包括如下步驟:
(1)反滲透水清洗:使用反滲透水對甲魚蛋進(jìn)行清洗，反滲透水由市場通用的反滲透水設(shè)備制得，要求電導(dǎo)率小于5 s/cm;
(2)攪拌:將甲魚蛋去殼后放入生物反應(yīng)器，加入甲魚蛋重量的15倍以上的去離子水，添加生物酶進(jìn)行酶促反應(yīng)，然后再攪拌，轉(zhuǎn)速500-4500rpm ；
(3)鈍化:提高生物反應(yīng)器內(nèi)的反應(yīng)溫度，升溫至75-98°C，時間30-50分鐘，達(dá)到生物酶活性休止的目的；
(4)過濾:將鈍化后的液體采用普通布袋過濾，除去固形物；
(5)離心:采用碟片式離心機(jī)分離液體中的少量油脂，轉(zhuǎn)速3000-6000rpm；
(6)濃縮:采用真空濃縮，真空度600mm汞柱以上，溫度50_75°C，濃縮至甲魚蛋重量的3-10 倍；
(7)膜過濾:對水解后濃縮的液體進(jìn)行分子膜過濾，分別進(jìn)行3kda、10kda、50kda分子過濾，得到了氨基酸、肽類和較大分子的蛋白混合液；
(8)灌裝密封:用玻璃瓶灌裝密封、殺菌，殺菌溫度65-95°C，時間30-45分鐘，用自來水冷卻至常溫。
[0005]所述步驟(2)中添加的生物酶分為四種:1、中性蛋白酶，是由枯草芽孢桿菌發(fā)酵后提取的蛋白水解酶，適宜溫度35-55 °C，PH6-7.5，活力10萬單位每克，添加量
0.05-0.25%，作用時間2-3小時，利用中性蛋白酶的酶促反應(yīng)，把甲魚蛋的大分子蛋白質(zhì)水解成小分子肽和氨基酸；2、蛋清蛋黃專用酶，適宜溫度50-55 °C，PH7-8，作用時間2_3小時，添加量0.1-0.3% ;3、堿性蛋白酶，是地衣芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)生的蛋白水解酶，將甲魚蛋的大分子蛋白水解為肽和氨基酸；適宜溫度25-70°C，PH7-10，作用時間2_3小時，添加量0.l-0.2% ;4、胰酶，由動物胰臟提取而來，適宜溫度50-55°C，PH7-8，時間2_3小時，添加量0.05-0.20% ;所述生物酶的添加量均以甲魚蛋的重量為基準(zhǔn)。
[0006]本發(fā)明的有益效果:本發(fā)明技術(shù)方案應(yīng)用現(xiàn)代生物酶工程技術(shù)，溫和水解甲魚卵蛋白，水解成分相對穩(wěn)定，對環(huán)境無污染，易操控。通過水解條件的控制，營養(yǎng)價值得到提升，容易吸收。并且這種混合液體具有一定的抗氧化能力，這種混合液體的抗氧化活性在PH4.0及85°C的熱水中加熱30分鐘(巴氏殺菌)活性不減少。通過本方法制得的氨基酸、肽類和較大分子的蛋白混合液由于具有抗氧化能力以及熱穩(wěn)定性，可應(yīng)用于化妝品、保健品、食品加工領(lǐng)域。
【具體實施方式】
[0007]下面的實施例可更詳細(xì)地說明本發(fā)明，但不以任何形式限制本發(fā)明。
[0008]實施例1:
(1)反滲透水清洗:使用反滲透水對甲魚蛋進(jìn)行清洗，反滲透水由市場通用的反滲透水設(shè)備制得，要求電導(dǎo)率小于5 s/cm;
(2)攪拌:將甲魚蛋去殼后放入生物反應(yīng)器，加入甲魚蛋重量的15倍以上的去離子水，添加生物酶進(jìn)行酶促反應(yīng)，添加生物酶分為四種:1、中性蛋白酶，是由枯草芽孢桿菌發(fā)酵后提取的蛋白水解酶，適宜溫度35-55°C，PH6-7.5，活力10萬單位每克，添加量0.05-0.25%，作用時間2-3小時，利用中性蛋白酶的酶促反應(yīng)，把甲魚蛋的大分子蛋白質(zhì)水解成小分子肽和氨基酸；2、蛋清蛋黃專用酶，適宜溫度50-55°C，PH7-8，作用時間2_3小時，添加量
0.1-0.3% ;3、堿性蛋白酶，是地衣芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)生的蛋白水解酶，將甲魚蛋的大分子蛋白水解為肽和氨基酸；適宜溫度25-70°C，PH7-10，作用時間2_3小時，添加量0.1-0.2% ;4、胰酶，由動物胰臟提取而來，適宜溫度50-55°C，PH7-8，時間2_3小時，添加量0.05-0.20% ;所述四種生物酶的添加量百分?jǐn)?shù)均以甲魚蛋的重量為基準(zhǔn)；然后再攪拌，轉(zhuǎn)速500-4500rpm ;
(3)鈍化:提高生物反應(yīng)器內(nèi)的反應(yīng)溫度，升溫至75-98°C，時間30-50分鐘，達(dá)到生物酶活性休止的目的；
(4)過濾:將鈍化后的液體采用普通布袋過濾，除去固形物；
(5)離心:采用碟片式離心機(jī)分離液體中的少量油脂，轉(zhuǎn)速3000-6000rpm；
(6)濃縮:采用真空濃縮，真空度600mm汞柱以上，溫度50_75°C，濃縮至甲魚蛋重量的3-10 倍；
(7)膜過濾:對水解后濃縮的液體進(jìn)行分子膜過濾，分別進(jìn)行3kda、10kda、50kda分子過濾，得到了氨基酸、肽類和較大分子的蛋白混合液；
(8)灌裝密封:用玻璃瓶灌裝密封、殺菌，殺菌溫度65-95°C，時間30-45分鐘，用自來水冷卻至常溫。
【主權(quán)項】
1.一種將甲魚蛋進(jìn)行酶法水解制備抗氧化活性液的方法，其特征在于，包括如下步驟: (1)反滲透水清洗:使用反滲透水對甲魚蛋進(jìn)行清洗，反滲透水由市場通用的反滲透水設(shè)備制得，要求電導(dǎo)率小于5 s/cm; (2)攪拌:將甲魚蛋去殼后放入生物反應(yīng)器，加入甲魚蛋重量的15倍以上的去離子水，添加生物酶進(jìn)行酶促反應(yīng)，然后再攪拌，轉(zhuǎn)速500-4500rpm ； (3)鈍化:提高生物反應(yīng)器內(nèi)的反應(yīng)溫度，升溫至75-98°C，時間30-50分鐘，達(dá)到生物酶活性休止的目的； (4)過濾:將鈍化后的液體采用普通布袋過濾，除去固形物； (5)離心:采用碟片式離心機(jī)分離液體中的少量油脂，轉(zhuǎn)速3000-6000rpm； (6)濃縮:采用真空濃縮，真空度600mm汞柱以上，溫度50_75°C，濃縮至甲魚蛋重量的3-10 倍； (7)膜過濾:對水解后濃縮的液體進(jìn)行分子膜過濾，分別進(jìn)行3kda、10kda、50kda分子過濾，得到了氨基酸、肽類和較大分子的蛋白混合液； (8)灌裝密封:用玻璃瓶灌裝密封、殺菌，殺菌溫度65-95°C，時間30-45分鐘，用自來水冷卻至常溫。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述的一種將甲魚蛋進(jìn)行酶法水解制備抗氧化活性液的方法，其特征在于，所述步驟(2)中添加的生物酶分為四種:1、中性蛋白酶，是由枯草芽孢桿菌發(fā)酵后提取的蛋白水解酶，適宜溫度35-55°C，PH6-7.5，活力10萬單位每克，添加量0.05-0.25%，作用時間2-3小時，利用中性蛋白酶的酶促反應(yīng)，把甲魚蛋的大分子蛋白質(zhì)水解成小分子肽和氨基酸；2、蛋清蛋黃專用酶，適宜溫度50-55°C，PH7-8，作用時間2_3小時，添加量.0.1-0.3% ;3、堿性蛋白酶，是地衣芽孢桿菌發(fā)酵產(chǎn)生的蛋白水解酶，將甲魚蛋的大分子蛋白水解為肽和氨基酸；適宜溫度25-70°C，PH7-10，作用時間2_3小時，添加量0.1-0.2% ;4、胰酶，由動物胰臟提取而來，適宜溫度50-55°C，PH7-8，時間2_3小時，添加量0.05-0.20% ;所述生物酶的添加量均以甲魚蛋的重量為基準(zhǔn)。
【專利摘要】一種將甲魚蛋進(jìn)行酶法水解制備抗氧化活性液的方法，包括步驟：反滲透水清洗、攪拌、鈍化、過濾、離心、濃縮、膜過濾、灌裝密封。本發(fā)明技術(shù)方案應(yīng)用現(xiàn)代生物酶工程技術(shù)，溫和水解甲魚卵蛋白，水解成分相對穩(wěn)定，對環(huán)境無污染，易操控。通過水解條件的控制，營養(yǎng)價值得到提升，容易吸收。并且這種混合液體具有一定的抗氧化能力，這種混合液體的抗氧化活性在PH4.0及85℃的熱水中加熱30分鐘（巴氏殺菌）活性不減少。通過本方法制得的氨基酸、肽類和較大分子的蛋白混合液由于具有抗氧化能力以及熱穩(wěn)定性，可應(yīng)用于化妝品、保健品、食品加工領(lǐng)域。
【IPC分類】A61K38-01, A61Q19-08, A23L1-305, A61K8-98, A61K35-586, A61K8-64, A61P39-06
【公開號】CN104707128
【申請?zhí)枴緾N201510150779
【發(fā)明人】楊明毅, 高丹文
【申請人】楊明毅
【公開日】2015年6月17日
【申請日】2015年4月1日