專利名稱：制備用于測(cè)定由細(xì)菌引起的胃腸道疾病的可反應(yīng)性藥品的方法
對(duì)人胃腸系統(tǒng)有不利影響的因素在其性質(zhì)上是很不相同的。這類疾病會(huì)出現(xiàn)在胃腸道的上部或較低部位或者這兩個(gè)部位。胃腸道疾病的起因范圍較大，包括遺傳的、生理的環(huán)境的和精神性的因素。所以，對(duì)這些疾病的診斷和治療是異常困難的。
在上胃腸道的慢性疾病當(dāng)中是通常所指的胃炎和消化性潰瘍疾病的那些疾病。人們一般把胃腸道定義為包括食管、胃、十二指腸、空腸和回腸。消化性潰瘍是胃腸道襯里的損壞，特征是由于消化性酸和胃蛋白酶的作用引起組織的損傷。人們一般持有的觀點(diǎn)是消化性潰瘍是由胃分泌過多、胃襯里對(duì)消化性酸和胃蛋白酶的抵抗下降或者這兩種因素引起的。胃炎的定義是胃粘膜的炎癥。在實(shí)踐中，該疾病是用較差的定義以及到目前不足以治療的癥狀如消化不良、“心口灼熱”、消化不良和過多的噯氣這些較寬范圍來表示的。
盡管如此，在現(xiàn)有技術(shù)中所常用的診斷方法一般緩慢、繁雜、昂貴并且會(huì)得出含糊的或不準(zhǔn)確的結(jié)果。這類患者會(huì)簡(jiǎn)單地用常規(guī)療法如用抗酸劑或抑制胃酸分泌的藥治療。同時(shí)這種療法可能提供暫時(shí)的癥狀緩解，通常沒有達(dá)到治愈。特別是，人們已經(jīng)發(fā)現(xiàn)許多這類胃腸疾病是通過胃粘膜感染細(xì)菌引起的。這樣為了有效治療出現(xiàn)的胃腸疾病，會(huì)需要治療細(xì)菌感染的療法。
所以，胃腸疾病的簡(jiǎn)單診斷試驗(yàn)會(huì)給胃腸道疾病患者提供適當(dāng)而有效療法的實(shí)際益處。這種試驗(yàn)應(yīng)當(dāng)容易操作，有明確的解釋，并能得出有關(guān)存在或不存在胃腸疾病的高可信度的結(jié)果。
US 4,830,010中公開了使用包括給人或低等動(dòng)物對(duì)象服用尿素接著分析對(duì)象的呼出物來測(cè)定尿素水解產(chǎn)物的存在從而測(cè)定和診斷上胃腸道的胃腸疾病，該文獻(xiàn)中的內(nèi)容被本文引用為參考文獻(xiàn)。在US專利4,830,010中所公開的方法提供了一種快速、便宜、非侵入的診斷，盡管如此，也有幾種因素影響到結(jié)果的精確性。
把14C-尿素以液體形式給藥并引起口腔的污染且從口咽部產(chǎn)生有標(biāo)記的二氧化碳。當(dāng)14C-尿素的溶液與口咽部接觸時(shí)，由污染口腔的口腔細(xì)菌中的尿素酶引起尿素的水解產(chǎn)生了小量的14CO2。這種污染導(dǎo)致了14CO2的產(chǎn)生，在咽下溶液后大約1分鐘達(dá)到最高值并且一般在12分鐘可以測(cè)定。在一些情況中，過量的口腔水解導(dǎo)致了該最高值會(huì)持續(xù)20分鐘，產(chǎn)生一種可能的假陽(yáng)性結(jié)果。該液體也可能快速?gòu)奈竿ㄟ^幽門排空。這就妨礙了14C-尿素和胃粘膜之間的充分接觸，其中胃粘膜處有幽門螺桿菌的細(xì)菌尿素酶。所以，尿素水解趨向于變緩并且需要較大量的同位素或大于1.5升1加侖的呼吸體積收集瓶。該液體也額外增加了溢出的可能性并且使得同位素的安全運(yùn)送變得困難。
在溶液中同位素的儲(chǔ)存期限是短暫的，從而具有微生物污染該同位素導(dǎo)致尿素水解的可能性。為了防止污染，需要冷凍和/或加入防腐劑。
用管向收集瓶中呼氣來收集呼吸樣品?；颊咭圆煌乃俾屎舫?，由此引發(fā)了對(duì)試驗(yàn)結(jié)果不必要的變化。由于這種變化性，需要好幾個(gè)樣品并且收集瓶要相對(duì)大從而防止氣泡和溶液溢出。人們發(fā)現(xiàn)肺中的空氣通過口腔緩慢送出會(huì)引起由口咽部產(chǎn)生的標(biāo)記14CO2造成的嚴(yán)重呼吸污染。
Vaszquez和其他US 4,851,209描述了使用放射反應(yīng)性同位素臨床評(píng)估胃腸潰瘍疾病體內(nèi)診斷的體內(nèi)步驟。該步驟包括預(yù)先服用一種藥品，接著用cintigraphic圖像設(shè)備對(duì)要檢測(cè)胃腸區(qū)的cintigraphic成象。
甚至有人已經(jīng)把尿素酶或其他指示劑與pH指示劑結(jié)合使用，但除Vaszquez外，且全部都是在體外進(jìn)行的。
現(xiàn)已發(fā)現(xiàn)涉及診斷人或低等動(dòng)物對(duì)象的由細(xì)菌引起上胃腸道胃腸疾病的現(xiàn)有技術(shù)的問題，即導(dǎo)致宿主胃中物質(zhì)包括相對(duì)大量的尿素酶，可通過使用一種測(cè)定尿素酶的新方法克服，這種新方法是使用一種用于測(cè)定呼吸出的尿素酶的可反應(yīng)性膠囊包裹的產(chǎn)品和一種專門為快速試驗(yàn)所設(shè)計(jì)的裝置(試劑盒)。
所以，本發(fā)明的目的是提供一種制備用于測(cè)定由胃腸疾病引起的尿素酶的可反應(yīng)性藥用產(chǎn)品的方法。
本發(fā)明的其他目的是提供一種膠囊包裹的可反應(yīng)藥用產(chǎn)品，它含有安全量的同位素標(biāo)記的尿素，即可以口服給藥，并且能夠?qū)?duì)象的呼吸分析來測(cè)定尿素水解產(chǎn)物的存在。
本發(fā)明涉及一種獲得用于測(cè)定人或低等動(dòng)物上胃腸道胃腸疾病的藥物的方法以及該藥物。
所以，第一方面，本發(fā)明提供了一種制備用于測(cè)定由細(xì)菌引起的上胃腸道胃腸疾病的可反應(yīng)性藥品的方法，其特征在于制備直徑0.12到3.0mm并可溶于胃液的密稠粉狀載體或糖?；蛘逳u-pareil晶種的顆粒；把微量的14C-尿素分散在或包裹在該載體上；并且用能夠快速溶解的明膠物質(zhì)給所得到的混合物包衣或包裹成膠囊，由此得到膠囊，其中載體的密度是能夠使包含在膠囊中的同位素沉積到胃腸道粘膜上。
第二方面，本發(fā)明提供了用于測(cè)定胃腸疾病呼吸試驗(yàn)中的藥品，它含有14C-尿素，分散在或包裹在密稠粉狀或顆?；奶腔騈u-Pareil晶種載體，把所得到的混合物用能夠在胃液存在時(shí)快速溶解的明膠物質(zhì)包衣或包裹，其中載體的密度足以使得膠囊內(nèi)容物沉積在胃腸道粘膜上，并且其中顆粒直徑為0.12到3.0mm。
尿素具有H2NCONH2的通式，是一種能夠在蛋白質(zhì)代謝中自然出現(xiàn)的產(chǎn)物。如果細(xì)菌幽門螺桿菌存在于宿主胃的胃組織中，患有胃腸疾病的人或動(dòng)物的胃中物質(zhì)包括相對(duì)較大量的尿素酶(尿素氨基酸水解酶)，則這種尿素酶水解尿素為碳酸氫銨或氨和二氧化碳。尿素酶一般以最小量存在于體內(nèi)僅當(dāng)尿素分解導(dǎo)致幽門螺桿菌將尿素酶量增加到感染區(qū)域中正常水平以上時(shí)，尿素酶與尿素反應(yīng)產(chǎn)生了氨。
把同位素用明膠膠囊包裹成膠囊并隨著密稠粉狀食品的載體將其運(yùn)送到胃粘膜。能夠使用的物質(zhì)是用尿素包衣的糖、乳糖、Nu-pareil晶種(糖珠或糖球)和蔗糖顆粒。本文所用的術(shù)語“Nu-pareil晶種”指的是糖球或糖珠，尤其是含有糖如蔗糖和淀粉的那些。
用同位素標(biāo)記的尿素為14C-尿素。
按每千克載體大約1到20克把C-尿素加入可溶于胃液的密稠載體中，優(yōu)選的載體是如Nu-pareil的顆粒，盡管當(dāng)藥典所準(zhǔn)許的其他載體具有足以把該膠囊沉積到胃粘膜時(shí)，也能使用。由于載體必須遷移到胃粘膜上，所以它的密度是要求嚴(yán)格的。用同位素給載體包衣的一種方法是向顆粒上噴灑同位素?fù)]發(fā)性溶劑如乙醇的溶液。優(yōu)選攪拌顆粒確保均勻包衣。也可以向溶液中加入染料如熒光素作同位素溶液溢出物的指示劑。攪拌顆粒的常規(guī)方法是使用混合鼓。
用入口導(dǎo)管向一個(gè)不透氣的袋中呼氣來收集呼吸樣品。把不透氣的袋送到試驗(yàn)地并且通過使用低真空泵把呼吸樣品轉(zhuǎn)到分析溶液中。不透氣的袋可以是鋁箔或塑料。這種不透氣的袋有一個(gè)入口，該入口能夠密封來防止呼吸樣品跑掉。另一個(gè)實(shí)施方案有一個(gè)可密封的空氣出口用來排出呼吸樣品。一條壓力鎖帶能使該袋打開和密封來用于重復(fù)的樣品。
在本發(fā)明中顆粒在粘膜上的自然分散覆蓋了足以與至少一些細(xì)菌菌落反應(yīng)的一定區(qū)域。如果使用漂浮的顆粒，且與粘膜或顳部或分散基質(zhì)接觸的指示劑沒有較大機(jī)會(huì)直接與受感染區(qū)域接觸，并不能保證快速或精確的結(jié)果。
如上所述，如果藥物所準(zhǔn)許的其他類型的密稠載體能夠吸收所需的反應(yīng)性指示劑并且它們具有足夠的密度來確保該膠囊和/或其內(nèi)容物最終到達(dá)粘膜并在幾分鐘后溶解的話，也能夠使用它們。當(dāng)使用粉狀載體時(shí)，反應(yīng)劑與載體結(jié)合在一起。將其干燥并且如果必要的話研成更細(xì)的粉末。該顆粒具有的優(yōu)點(diǎn)是它們?nèi)菀妆簧a(chǎn)、與帶有反應(yīng)劑的粉末一樣覆蓋在相同區(qū)域并且得到良好的結(jié)果。
當(dāng)14C-尿素與口咽部接觸時(shí)，通過由于污染口腔的口腔細(xì)菌產(chǎn)生的尿素酶水解尿素而產(chǎn)生少量14CO2。該污染會(huì)產(chǎn)生14CO2，在咽下該溶液大約1分鐘后達(dá)到最高值并且可檢測(cè)12到20分鐘。
這種污染能夠使試驗(yàn)產(chǎn)生一種“假陽(yáng)性”結(jié)果?，F(xiàn)已發(fā)現(xiàn)當(dāng)直接把14C-尿素溶液給藥到食管時(shí)，不會(huì)出現(xiàn)口咽部同位素最高值。這是本發(fā)明用膠囊包裹的產(chǎn)品能提供更精確結(jié)果的另外一個(gè)原因，因?yàn)檫@些珠或顆粒(含有附加的指示劑)沒有與口咽部接觸。替代的是，當(dāng)膠囊在胃中溶解時(shí)，這些珠或顆粒才暴露于細(xì)菌。
制備用于測(cè)定胃腸疾病藥用載體方法的特征步驟是把惰性明膠膠囊中14C-尿素微量同位素與密稠可溶的顆粒狀或粉狀載體攙和，其中優(yōu)選由惰性、明膠物質(zhì)生產(chǎn)膠囊，其優(yōu)選在大約1到5分鐘后開裂。該密稠載體是有益的食品如糖或Nu-pareil晶種，其中優(yōu)選把14C-尿素分散從而形成能夠在胃液中以每升大約1到20克快速溶解的密稠載體。另外，也包括用尿素包衣的壓片的乳糖粉或蔗糖顆粒。
所得到的用于呼吸試驗(yàn)的藥品含有一種微量14C-尿素的同位素，該同位素分散于密稠粉末載體如糖或Nu-pareil核或者濃縮的乳糖粉或蔗糖顆粒中，并用惰性明膠物質(zhì)包衣，從而在胃液中以精確密度快速溶解，使膠囊可沉積到胃腸道粘膜上，并且珠徑在直徑0.012到3.0mm之間，這樣使得14C-尿素能更好地分散放置在胃粘膜上。
濃縮的乳糖具有適當(dāng)?shù)娜芙舛炔⑶倚纬擅艹砣芤海溆靡Π袰-尿素放置到胃粘膜上。該載體的密度牽拉14C-尿素到胃液池底，由此防止14C-尿素在整個(gè)胃內(nèi)容物中稀釋并使得同位素和胃粘膜之間接觸最佳。
這與使用液體相反，液體可通過幽門快速?gòu)奈钢信趴?，阻止尿素和胃粘膜之間的足夠接觸。另外，液體載體將同位素整個(gè)體積分散而不是專一地緊鄰分散到到胃壁上。因?yàn)樗釙?huì)使尿素酶失活，在胃液體積中的尿素不可能反應(yīng)，這樣導(dǎo)致標(biāo)記的CO2的悄悄或緩沖釋放。
為了進(jìn)一步確保膠囊的溶解，在給予膠囊后吞咽少量水大約20ml以避免膠囊存放在口咽部并在那里溶解。
在氫離子和甚至在pH中性水存在下，14C-尿素能夠更快速地分解。這樣，在干燥程度的載體中存放尿素能夠保持穩(wěn)定形式的14C-尿素。
當(dāng)放射性同位素在整個(gè)粘膜中快速崩解時(shí)，膠囊隨試驗(yàn)進(jìn)行的時(shí)間降低，這表明有幽門桿菌的存在。一旦膠囊溶解并釋放其密致顆粒(或載體)的內(nèi)容物，就把大量尿素快速運(yùn)送到相鄰粘膜和細(xì)菌處。這使得14CO2能快速出現(xiàn)在呼吸中，把試驗(yàn)時(shí)間縮短到20分鐘以內(nèi)，一般在10到15分鐘。對(duì)初期診斷樣品，用液體溶液的相似試驗(yàn)要花費(fèi)至少20分鐘，并且一般至少是本發(fā)明方法所需時(shí)間的雙倍?？s短時(shí)間也是因?yàn)橄四蛩孛傅募倩钚院蜕鲜鲇懻撍岬降淖兓浴?br> 在宿主胃組織中沒有發(fā)現(xiàn)幽門桿菌的情況中，14C-尿素不被水解且14C-尿素會(huì)排泄在宿主尿中。
現(xiàn)在參考實(shí)施例將詳細(xì)描述本發(fā)明，其中實(shí)施例詳細(xì)描述了本發(fā)明的優(yōu)選方面。但是應(yīng)當(dāng)理解為本發(fā)明的下列描述不是來替代前面所述的本發(fā)明的一般性。實(shí)施例1按照下列說明生產(chǎn)本發(fā)明的膠囊37kBq(1μCi)14C-尿素(±20％)0.2g糖球，NF(±20％)7.05×10-5g熒光素鈉10％(±20％)1個(gè)3號(hào)明膠膠囊，重量為0.0452g(±20％)1個(gè)容器(透明泡，單一劑量單位)1個(gè)包裝(背面為箔襯里的紙)通過將14C-尿素和熒光素鈉的乙醇溶液向糖球噴灑來給糖球包衣同時(shí)在旋轉(zhuǎn)混合鼓中將它們攪拌。乙醇揮發(fā)使得包衣的14C-尿素留在糖球上。包衣后，用常規(guī)設(shè)備把該顆粒包裹在3號(hào)明膠膠囊中。
把熒光素鈉加入14C-尿素的乙醇備用溶液中。該物質(zhì)起黃色染料的作用，使得容易發(fā)現(xiàn)溢出物。因?yàn)?4C-尿素是一個(gè)弱小的β-發(fā)射體，用傳統(tǒng)檢測(cè)儀器不容易測(cè)定。加入黃色熒光染料作為容易測(cè)定14C-尿素的一種方法。所加量(7.05×10-5)是無關(guān)緊要的并且不期望提供任何治療作用，尤其是當(dāng)與一般給患者診斷使用的劑量相比(5g熒光素鈉10％注射用溶液)。給予37kBq(1μCi)的選擇是按照ALARA(盡可能達(dá)到合理性的低)方針從早期工作使用的10μCi和5μCi(分別為370kBq和185kBq)中減少劑量的10倍。泡狀包裝提供了一個(gè)安全的單一劑量單位的包裝來保持該膠囊的完整性。另外，透明的同聚物膜會(huì)使得膠囊檢查容易進(jìn)行。
初步試驗(yàn)可以顯示出使用這些包裹14C-尿素顆粒膠囊的優(yōu)點(diǎn)。主要是，該同位素不會(huì)與口咽部接觸從而在HP-陰性人中沒有較早的14CO2分泌的最高值。第二個(gè)優(yōu)點(diǎn)是患者和檢測(cè)人員不需要處理放射性液體，盡管放射性液體是不危險(xiǎn)的，但是如果溢出和容易在運(yùn)送中泄漏再進(jìn)行清除是煩雜的。第三，以固體載體把14C-尿素提供給胃粘膜，使它以極其濃縮的形式到達(dá)胃粘膜。這證實(shí)了一個(gè)較大的優(yōu)點(diǎn)，因?yàn)槟蛩乇豢焖偎獠⒃?至20分鐘于呼吸中產(chǎn)生大量脈沖的14CO2。因?yàn)檫@種快速峰值是相對(duì)高的，所以同位素的劑量相對(duì)于現(xiàn)有技術(shù)方法可減少到1μCi(37kBq)。
在整個(gè)說明書和權(quán)利要求書中，除非內(nèi)容需要，否則下列詞語“包括”和各種變化如“包括”和“包括”將被理解為暗示包括所述的整數(shù)或步驟或者整數(shù)或步驟組但不排除任何其他整數(shù)或步驟或者整數(shù)或步驟組。
權(quán)利要求
1.制備用于檢測(cè)由上胃腸道細(xì)菌引起的胃腸疾病的反應(yīng)性藥品的方法，其特征在于制備特定直徑在0.12到3.0mm之間、可溶于胃液的致密粉狀載體或糖?；騈u-pareil核的顆粒；把微量的14C-尿素分散或包衣在載體上；并把所得到的混合物用可快速溶解的惰性明膠物質(zhì)包衣或包成膠囊，由此得到膠囊，其中載體的密度為能使含在膠囊中的同位素沉積到胃腸道粘膜上的程度。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的方法，其特征在于致密的載體含有粉末狀或濃縮過的乳糖、Nu-pareil核、蔗糖顆粒和/或其混合物，該載體用14C-尿素包衣。
3.用于測(cè)定胃腸道疾病呼吸試驗(yàn)的藥品，它含有分散在或包裹在致密粉狀或顆粒狀糖或Nu-pareil核的載體中的14C-尿素的同位素，所得到的混合物用惰性明膠物質(zhì)包衣或包裹，這種惰性明膠物質(zhì)在胃液存在下可快速溶解，其中的載體具有足以使膠囊內(nèi)容物沉積到胃腸道粘膜的密度，并且其中顆粒具有0.12到3.0mm的直徑。
全文摘要
本發(fā)明涉及通過呼吸試驗(yàn)對(duì)人或低等動(dòng)物對(duì)象的由細(xì)菌引起的上胃腸道胃腸疾病的診斷。一方面,本發(fā)明提供了制備用于測(cè)定由上胃腸道細(xì)菌引起的胃腸道疾病的可反應(yīng)性藥品的方法,該方法的特征在于制備特定直徑在0.12到3.0mm之間、可溶于胃液的致密粉狀載體或糖?；騈u－pareil核的顆粒;把微量的
文檔編號(hào)A61K49/00GK1262619SQ98806744
公開日2000年8月9日 申請(qǐng)日期1998年5月28日 優(yōu)先權(quán)日1997年5月28日
發(fā)明者巴瑞·J·馬歇爾 申請(qǐng)人:巴瑞·J·馬歇爾