專(zhuān)利名稱(chēng)：用于炎癥性腸疾病的預(yù)防劑或治療劑的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及用于炎癥性腸疾病例如潰瘍性結(jié)腸炎和節(jié)段性回腸炎的預(yù)防劑或治 療劑。具體而言，本發(fā)明涉及用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病的藥物組合物，所述藥物組合 物包含7，8-二甲氧基-4(5!1)，10-二氧代-1!1-1，2，3-三唑并[4，5_c][l]苯并吖庚英、其 前體藥物或它們的可藥用鹽或者2-(1_異丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8_ 二甲氧 基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5_c][l]苯并吖庚英或其可藥用鹽。
背景技術(shù)：
炎癥性腸疾病(在下文中有時(shí)稱(chēng)為“IBD”)表示特發(fā)的慢性持續(xù)型非特異性腸 炎，即，包括潰瘍性結(jié)腸炎、節(jié)段性回腸炎(Koji Uraushibara, Mamoru Watanabe “炎癥 性腸疾病的概念、定義和流行病學(xué)”；炎癥性腸疾病，9-15頁(yè)，2005，Norihumi Hibi編輯； Saishin-Igaku (參考文獻(xiàn)1))的代表性疾病。認(rèn)為IBD是由于一些病因瓦解了腸粘膜的免 疫機(jī)制而引起的對(duì)與腸內(nèi)細(xì)菌群和細(xì)菌組分的過(guò)度反應(yīng)、引起腸炎進(jìn)展和持續(xù)化的疾病。 然而，還沒(méi)有特定該疾病的病因。已知在作為IBD中包含的主要疾病的潰瘍性結(jié)腸炎和節(jié) 段性回腸炎中，表現(xiàn)出如潰瘍形成和出血的癥狀的活躍期和癥狀緩解或減輕的緩解期反復(fù) 出現(xiàn)，且認(rèn)為這些疾病可以在10年至20年后復(fù)發(fā)。IBD的發(fā)病機(jī)制還沒(méi)有完全闡明。過(guò)去雖然提出了變態(tài)反應(yīng)和感染理論來(lái)解釋發(fā)病機(jī)制，但現(xiàn)在將IBD解釋為自 身免疫性疾病，通過(guò)抗嗜中性粒細(xì)胞IgG抗體的存在等支持自身免疫理論的報(bào)告在增 加(Hibi N.，Introduction Japanese J. Clin. Med. ,63(5) :741_743，2005(參考文獻(xiàn) 2) ；Keiichi Mitsuyama, Makoto Toyonaga 和 Michio Sata，“炎癥性腸疾病的病理學(xué)和 病理生理學(xué)”；Inf IammatoryBowel Diseases，2005 年，28-36 頁(yè)，Norihumi Hibi 編輯； Saishin-Igaku (參考文獻(xiàn)3))。另一方面，在1966年，Ishizaka等人已經(jīng)證實(shí)作為變態(tài)反 應(yīng)的原因的IgE抗體的存在，且證明了變態(tài)反應(yīng)是由抗原特異的IgE抗體介導(dǎo)的組胺釋放 反應(yīng)(身體和變態(tài)反應(yīng)的機(jī)制，1998 Shuichi Ueno, Nippon Jitsugyo出版(參考文獻(xiàn)4)； 和Ishizaka K.，Ishizaka T和Hornbrook MM.人反應(yīng)素抗體IV的物理化學(xué)性質(zhì)存在獨(dú)特 的免疫球蛋白作為反應(yīng)素活性的載體，Journal of Immunology, 97 (1) :75_85，1966 (參考 文獻(xiàn)5))。因此，在免疫學(xué)發(fā)病機(jī)制中，在還沒(méi)有觀(guān)察到抗原特異性IgE抗體產(chǎn)生的IBD中 變態(tài)反應(yīng)理論被否定。也已經(jīng)證實(shí)，在日本、美國(guó)和歐洲三個(gè)地區(qū)被共同地批準(zhǔn)為組胺釋放 抑制劑的色甘酸二鈉(DSCG ；Akihide Koda，“抗過(guò)敏劑的歷史和當(dāng)前情況”，32-39頁(yè)，1988，Terumasa Miyamoto, Hiroshi Baba 禾口 Minoru Okuda 編輯，Life Science 有限公司(參考 文獻(xiàn)6))對(duì)IBD是無(wú)效的(Crotty B和Jewell DP.潰瘍性結(jié)腸炎的藥物治療，Br. J. Clin. Pharmc. 34 (3) 189-198，1992 (參考文獻(xiàn) 7) ；Binder V, Elsborg L, Greibe J, Hendriksen C，Hoj L, JensenKB, Kristensen Ε, Madsen JR, Marner B, Riis P 禾口 Willumsen L，治療饋 瘍性結(jié)腸炎和節(jié)段性回腸炎中的色甘酸二鈉，22(1) :55-60，1981(參考文獻(xiàn)8)；和Buckell NA, Gould SR, Day Dff, Lennard-Jones JE和Edwards AM，在慢性持續(xù)型潰瘍性結(jié)腸炎中色 甘酸二鈉的受控試驗(yàn)，Gut, 19(12) :1140-1143，1978 (參考文獻(xiàn)9))。在這些情況下，現(xiàn)在一般認(rèn)為，變態(tài)反應(yīng)在臨床和基礎(chǔ)研究中均極少參與IBD的 發(fā)病機(jī)制。此外，最近已經(jīng)報(bào)道，在IL-2敲除小鼠和IL-IO敲除小鼠中自發(fā)地形成類(lèi)似于IBD 的炎癥性腸炎(Ma A,Datta M, Margosian E，Chen K和Horak I，T細(xì)胞而不是B細(xì)胞對(duì)在 白介素-2缺陷的小鼠中的腸炎是必需的，J. Exp. Med. 182(5) 1567-1572，1995 (參考文獻(xiàn) 10)；禾口 Kuhn R, Lohler J, Rennick D, Rajewsky K 和 Muller W，白介素-10 缺陷的小鼠發(fā) 展成慢性小腸結(jié)腸炎，Cell, 75 (2) :263_274，1993 (參考文獻(xiàn)11))。通過(guò)缺失具有T細(xì)胞 增殖活性的IL-2或作為抑制性細(xì)胞因子已知的IL-IO而引起IBD類(lèi)似的腸炎發(fā)病，該證據(jù) 表明了 T細(xì)胞介導(dǎo)的免疫反應(yīng)的異常在顯示疾病中的重要性。換言之，在正常腸中，通過(guò)增 殖和活化T細(xì)胞來(lái)預(yù)防腸炎的發(fā)病，其中所述T細(xì)胞對(duì)于盡管為非己物質(zhì)的包括源自食物 的蛋白質(zhì)和源自正常細(xì)菌群的異物，也抑制免疫應(yīng)答。然而，認(rèn)為由于一些原因瓦解了局 部腸粘膜中的某些免疫系統(tǒng)，這使對(duì)免疫應(yīng)答本來(lái)受到抑制的異物如腸細(xì)菌群所產(chǎn)生的免 疫應(yīng)答無(wú)法控制(Ohkusa T, Nomura T和Sato N.，細(xì)菌感染在炎癥性腸疾病的發(fā)病機(jī)理中 的作用，InternationalMedicine, 43 (7) :534_539，2004 (參考文獻(xiàn) 12)，因此導(dǎo)致了 IBD 的 形成。如上所述，一般認(rèn)為以T細(xì)胞為中心的免疫異常強(qiáng)烈地參與IBD的發(fā)病機(jī)制(Tadao Baba，炎癥性腸疾病，近期趨勢(shì)，Matsushita MedicalJournal 39(1) :1_14，2000 (參考文獻(xiàn) 13))。IBD的治療目標(biāo)在于誘導(dǎo)緩解(在活躍期緩和癥狀)和預(yù)防復(fù)發(fā)。然而在各個(gè)國(guó) 家中，治療的準(zhǔn)則還沒(méi)有達(dá)到完全的一致，在日本、美國(guó)和英國(guó)的準(zhǔn)則中，共同推薦的治療 法是以下內(nèi)容。即，取決于每一患者的疾病的類(lèi)型、部位和嚴(yán)重程度，將5-氨基水楊酸(5-ASA)或 柳氮磺胺吡啶作為標(biāo)準(zhǔn)的治療劑用于輕度到中度的患者的治療。5-ASA是柳氮磺胺吡啶的 分解產(chǎn)物并認(rèn)為是柳氮磺胺吡啶的活性物質(zhì)。對(duì)于中度或重癥患者，除了 5-ASA和柳氮磺 胺吡啶外，還施用類(lèi)固醇的口服劑或直腸劑。在重癥病例中，通過(guò)靜脈內(nèi)注射類(lèi)固醇或免疫 抑制劑環(huán)孢菌素來(lái)誘導(dǎo)緩解。近年，也已經(jīng)實(shí)施了用抗TNF-α抗體等的治療。在誘導(dǎo)緩 解后，建議將5-ASA和柳氮磺胺吡啶用于預(yù)防復(fù)發(fā)。同時(shí)，建議將免疫抑制劑如硫唑嘌呤 (AZA)或6-巰基嘌呤(6-MP)用于復(fù)發(fā)的預(yù)防。然而，在中度和重癥患者中，用于治療IBD廣泛使用的5-ASA和柳氮磺胺吡啶常常 顯示出不足的治療效果。在此類(lèi)病例中，通過(guò)在重癥患者中使用免疫抑制劑如類(lèi)固醇或環(huán) 孢菌素來(lái)誘導(dǎo)緩解以控制主要由T細(xì)胞引起的異常反應(yīng)，所述T細(xì)胞參與疾病的狀況和嚴(yán) 重程度。大腸的手術(shù)切除運(yùn)用于難治狀態(tài)的患者，在所述患者中使用這些藥劑誘導(dǎo)緩解是 困難的。已知如果用于預(yù)防復(fù)發(fā)的治療在誘導(dǎo)緩解后即在消化道的炎癥已經(jīng)改善后沒(méi)有進(jìn)行，那么IBD在70%的患者中復(fù)發(fā)或再發(fā)作。因此，在準(zhǔn)則中也建議通過(guò)繼續(xù)針對(duì)復(fù)發(fā)的預(yù) 防性治療來(lái)維持緩解狀態(tài)(緩解的維持)。盡管建議施用5-ASA和柳氮磺胺吡啶用于緩解 的維持(防止復(fù)發(fā))，但在用5-ASA和柳氮磺胺吡啶沒(méi)有獲得滿(mǎn)意的效果的情況下，將使用 AZA或6-MP。然而，AZA和6-MP需要幾個(gè)月才開(kāi)始有作用，因此，它們的效力是留下的待解 決的問(wèn)題。此外，治療劑如類(lèi)固醇、環(huán)孢菌素、AZA或6-MP顯示出強(qiáng)的全身副作用，并因此限 制了它們的用途。舉例來(lái)說(shuō)，除了與免疫缺陷相關(guān)的副作用外，類(lèi)固醇還抑制骨生成或生 長(zhǎng)，特別是在青春期的患者中；環(huán)孢菌素引起腎臟疾??；AZA和6-MP引起流感樣癥狀和嚴(yán)重 的副作用如骨髓抑制和肝病。此外，已經(jīng)在用類(lèi)固醇、環(huán)孢菌素、AZA和6-MP的動(dòng)物實(shí)驗(yàn)中 報(bào)道了致畸性，并因此還沒(méi)有建立在妊娠期和哺乳期中的安全性，這限制了向易于發(fā)生IBD 的10多歲后期到二十幾歲的女性患者的施用。在上述的情況下，在治療領(lǐng)域存在研發(fā)用于預(yù)防性治療炎癥性腸疾病的新的藥物 的需求，所述新的藥物能安全并強(qiáng)烈地誘導(dǎo)緩解并在維持療法中也能長(zhǎng)期使用。2-(1_異丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8_ 二甲氧基-4(5H)，10_ 二氧 代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][l]苯并吖庚英(在下文中有時(shí)稱(chēng)為“化合物A”)和7，8_ 二 甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5_c][l]苯并吖庚英(在下文中有時(shí)稱(chēng) 為“化合物B”)具有以下表示的結(jié)構(gòu)(化合物A)(化合物B)已知化合物A是化合物B的前體藥物，化合物A在身體中透過(guò)多種粘膜(包括消 化道)后快速地轉(zhuǎn)化成化合物B，由此表現(xiàn)出組胺釋放抑制作用(參見(jiàn)WO 95/18130 (JP 3，290, 664-B，USP 5，686，442))。也已經(jīng)揭示，經(jīng)口施用化合物A具有7倍于化合物B的改 善的吸收性(參見(jiàn) W099/16770 (JP 3，188，482-B，USP 6，372，735))。
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然而，與變態(tài)性疾病的治療劑和預(yù)防劑相關(guān)的這些文獻(xiàn)都沒(méi)有提供或教導(dǎo)與變態(tài) 性疾病沒(méi)有關(guān)聯(lián)的炎癥性腸疾病(IBD)或其預(yù)防性方法或者治療性方法。當(dāng)然，在所述文 獻(xiàn)的實(shí)施例中也沒(méi)有發(fā)現(xiàn)相關(guān)的公開(kāi)。發(fā)明概述本發(fā)明人現(xiàn)在意外地發(fā)現(xiàn)，化合物A和化合物B在預(yù)防和治療炎癥性腸疾病(IBD) 中是強(qiáng)烈有效的，且特別地，對(duì)于對(duì)常規(guī)治療具有抗性的重癥病例也顯示出強(qiáng)的預(yù)防性和 治療性效果。如上所述，在變態(tài)反應(yīng)極少涉及的IBD發(fā)病機(jī)制的此類(lèi)情況中，化合物A和化 合物B特別地顯示出積極的對(duì)IBD的預(yù)防性和治療性效果。已經(jīng)意外地表明，不考慮如在 后面描述的實(shí)施例中也證實(shí)的化合物A和化合物B的抗變態(tài)反應(yīng)活性，化合物A和化合物 B基于其它反應(yīng)機(jī)制顯示出積極的對(duì)IBD的預(yù)防性和治療性效果。也已經(jīng)證實(shí)，用于治療 IBD的每一種藥物至少具有一種以下活性對(duì)在大鼠中角叉菜膠誘發(fā)的炎癥模型的效力； 抑制來(lái)自源于脾臟的白細(xì)胞的細(xì)胞因子的產(chǎn)生。特別地，熟知的事實(shí)是柳氮磺胺吡啶和類(lèi) 固醇在角叉菜膠誘發(fā)的炎癥模型中是有效的(Cronstein BN, Montesinos MC和Weissman G，Salitylates和柳氮磺胺吡啶，但不是糖皮質(zhì)激素，通過(guò)不依賴(lài)于抑制前列腺素合成和 P105NF-kB的腺苷依賴(lài)機(jī)制來(lái)抑制白細(xì)胞積累，Proc. Natl. Acad. Sci.USA，5月25日， 1999，96 (11) 6377-6381 (參考文獻(xiàn)14))，且類(lèi)固醇和免疫抑制劑抑制來(lái)自免疫細(xì)胞如T細(xì) 胞的細(xì)胞因子的產(chǎn)生。另一方面，已經(jīng)證實(shí)了化合物A或化合物B在角叉菜膠誘發(fā)的炎癥 模型中是無(wú)效的，且對(duì)來(lái)自源于脾臟的T細(xì)胞的細(xì)胞因子的產(chǎn)生沒(méi)有活性。換言之，目前已 經(jīng)證實(shí)，通過(guò)化合物A和化合物B對(duì)IBD顯示的有效的預(yù)防性和治療性活性的機(jī)制與現(xiàn)有 的治療劑的機(jī)制不同。目前，這些事實(shí)也由本發(fā)明人發(fā)現(xiàn)。此外，化合物A和化合物B具 有很少在常規(guī)的預(yù)防劑和治療劑中觀(guān)察到的副作用，且認(rèn)為對(duì)預(yù)防和治療IBD是非常有用 的。本發(fā)明基于這些發(fā)現(xiàn)。因此，本發(fā)明的目的是提供用于炎癥性腸疾病的新的預(yù)防劑和治療劑，所述新的 預(yù)防劑和治療劑對(duì)預(yù)防和治療炎癥性腸疾病是有效的且具有少的副作用。根據(jù)本發(fā)明的用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病(IBD)的藥物組合物包含7，8_ 二甲 氧基-4 (5H)，10- 二氧代-IH-1,2,3-三唑并[4，5-c] [1]苯并吖庚英(化合物B)、其前體藥 物或它們的可藥用鹽。另外，根據(jù)本發(fā)明的用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病(IBD)的藥物組合物包含 2_ (1-異丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8- 二甲氧基-4 (5H)，10- 二氧代-2H-1，2，3-三 唑并[4，5-c] [1]苯并吖庚英(化合物A)或其可藥用鹽。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病(IBD)的藥物 組合物是經(jīng)口施用的。根據(jù)本發(fā)明的另一優(yōu)選的實(shí)施方案，藥物組合物進(jìn)一步包含可藥用載體。根據(jù)本發(fā)明的一個(gè)優(yōu)選的實(shí)施方案，在用于預(yù)防或治療IBD的藥物組合物中的術(shù) 語(yǔ)“預(yù)防”意為預(yù)防炎癥性腸疾病的復(fù)發(fā)。根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步優(yōu)選的實(shí)施方案，在藥物組合物中，炎癥性腸疾病是潰瘍性結(jié) 腸炎或節(jié)段性回腸炎。根據(jù)本發(fā)明的用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病(IBD)的方法包括向哺乳動(dòng)物施用 預(yù)防或治療有效量的7，8-二甲氧基-4 (5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5_c][l]苯并吖庚英、其前體藥物或它們的可藥用鹽。根據(jù)本發(fā)明的另一優(yōu)選的實(shí)施方案，方法包括向哺乳動(dòng)物施用預(yù)防或治療有效量 的2- (1-異丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8- 二甲氧基-4 (5H)，10- 二氧代-2H-1，2， 3-三唑并[4，5-c][l]苯并吖庚英或其可藥用鹽。此外，根據(jù)本發(fā)明，提供了 7，8- 二甲氧基-4 (5H)，10- 二氧代-1H-1，2，3_三唑并 [4，5-c][l]苯并吖庚英、其前體藥物或它們的可藥用鹽在制備用于炎癥性腸疾病(IBD)的 預(yù)防劑或治療劑中的用途。根據(jù)本發(fā)明進(jìn)一步另外優(yōu)選的實(shí)施方案，提供了 2-(1-異丙氧基羰基氧基-2-甲 基丙基)-7，8_ 二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4,5-c] [1]苯并吖庚英或 其可藥用鹽在制備用于炎癥性腸疾病(IBD)的預(yù)防劑或治療劑中的用途。此外，換而言之，能夠說(shuō)本發(fā)明提供了(1)用于炎癥性腸疾病的預(yù)防劑或治療劑，所述預(yù)防劑或治療劑包含2-(1_異丙 氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8- 二甲氧基-4 (5H)，10- 二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4， 5-c] [1]苯并吖庚英或其可藥用鹽；和(2)用于炎癥性腸疾病的預(yù)防劑或治療劑，所述預(yù)防劑或治療劑包含7，8_ 二甲氧 基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4,5-c] [1]苯并吖庚英或其可藥用鹽。根據(jù)本發(fā)明，可以獲得具有少的副作用且也對(duì)于對(duì)常規(guī)治療具有抗性的重癥病例 顯示出強(qiáng)的預(yù)防性和治療性效果的針對(duì)炎癥性腸疾病的預(yù)防性或治療性藥物組合物。另外，可以說(shuō)本發(fā)明的“產(chǎn)業(yè)上的可利用性”在于能提供有效的預(yù)防和治療炎癥性 腸疾病的且具有少的副作用的有用藥物。附圖簡(jiǎn)述

圖1顯示在實(shí)施例的試驗(yàn)例4中，通過(guò)DSS處置，各藥劑對(duì)大腸的縮短的治療效果 的實(shí)驗(yàn)結(jié)果(圖中，### 相對(duì)于未用DSS處置組P < 0. 005 (Student t檢驗(yàn))，* * 相對(duì) 于溶劑處理組P < 0. 01 (Dunnett的多重比較檢驗(yàn)))。圖2顯示在實(shí)施例的試驗(yàn)例4中，各藥劑對(duì)直腸重量增加的治療效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (圖中，### :相對(duì)于無(wú)處置組P < 0.005 (Student t檢驗(yàn))，* * * 相對(duì)于溶劑處理組P
<0. 05 (Dunnett的多重比較檢驗(yàn)))圖3顯示在實(shí)施例的試驗(yàn)例4中，各藥劑對(duì)糞便得分惡化的治療效果的實(shí)驗(yàn)結(jié)果 (圖中，### :相對(duì)于無(wú)處置組P < 0.005 (Student t檢驗(yàn))，* * * 相對(duì)于溶劑處理組P
<0. 005 (Steel的多重比較檢驗(yàn)))。圖4顯示在實(shí)施例的試驗(yàn)例4中，各藥劑對(duì)宏觀(guān)觀(guān)察得分惡化的治療效果的實(shí)驗(yàn) 結(jié)果(## 相對(duì)于無(wú)處置組P < 0. 01，* * 相對(duì)于溶劑處理組P < 0. 01 (Mann-Whitney的 U檢驗(yàn)))。發(fā)明詳述有效成分本發(fā)明中的有效成分7，8-二甲氧基-4 (5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4， 5-c] [1]苯并吖庚英(化合物B)是熟知的化合物，且可以根據(jù)W095/18130中與用于制備化 合物的方法相關(guān)的部分和實(shí)施例43中所描述的方法來(lái)獲得。本發(fā)明中的有效成分可以是化合物B的前體藥物或所述化合物或者其前體藥物的可藥用鹽。在本文中，化合物B的前體藥物是化合物B的1，2，3-三唑基經(jīng)修飾的類(lèi)型， 并且可以根據(jù)WO 99/16770中描述的方法來(lái)制備。本發(fā)明中的有效成分2-(1_異丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8_ 二甲氧 基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5_c][l]苯并吖庚英(化合物A)是熟知的化 合物，且可以例如根據(jù)WO 95/18130中與用于制備化合物的方法相關(guān)的部分和實(shí)施例20中 所描述的方法來(lái)獲得。在本發(fā)明中，作為有效成分的化合物A或化合物B可以轉(zhuǎn)化成它們的可藥用鹽，且 此類(lèi)鹽可以用作為有效成分?；衔顰和化合物B的可藥用鹽包括醫(yī)藥上可接受的無(wú)毒 鹽。此類(lèi)無(wú)毒鹽優(yōu)選地包括堿金屬鹽或堿土金屬鹽如鈉鹽、鉀鹽和鈣鹽；氫商酸鹽如氫氟酸 鹽、鹽酸鹽、氫溴酸鹽和氫碘酸鹽；無(wú)機(jī)酸鹽如硝酸鹽、高氯酸鹽、硫酸鹽和磷酸鹽；有機(jī)酸 鹽如甲磺酸鹽、富馬酸鹽、琥珀酸鹽、檸檬酸鹽、酒石酸鹽、草酸鹽和馬來(lái)酸鹽；和氨基酸鹽 如谷氨酸鹽和天冬氨酸鹽。藥物組合物已知在本發(fā)明中的作為有效成分的化合物A和化合物B具有如上所述的抗變態(tài)反
應(yīng)活性。然而，本文證實(shí)了(i)這些化合物對(duì)來(lái)自認(rèn)為是炎癥性腸疾病(IBD)成因的中心的T細(xì)胞的細(xì)胞因 子產(chǎn)生反應(yīng)不具有直接的抑制效果(試驗(yàn)例8)，和(ii)化合物A在能夠敏感地檢測(cè)到非類(lèi)固醇抗炎癥劑(如吲哚美辛 (indomethacin))、柳氮磺胺吡啶、類(lèi)固醇的有效性的角叉菜膠誘發(fā)的炎癥模型中是無(wú)效的 (試驗(yàn)例2)。此外，如上所述，代表性的抗變態(tài)反應(yīng)劑DSCG在IBD中是無(wú)效的。就本發(fā)明人已 知而言，還沒(méi)有批準(zhǔn)用具有DSCG類(lèi)似的組胺釋放抑制作用的抗變態(tài)反應(yīng)劑或用組胺受體 的拮抗劑來(lái)用于治療IBD的例子。這些事項(xiàng)可能表明，化合物A和化合物B與已知的IBD治療劑的反應(yīng)機(jī)制缺少聯(lián) 系，且即使這些化合物具有抗變態(tài)反應(yīng)活性，但這些化合物缺乏非特異性抗炎癥作用。如上 所述，也已知對(duì)IBD的預(yù)防性和治療性效果與變態(tài)反應(yīng)具有最少的聯(lián)系?？梢哉f(shuō)，在此類(lèi)情 況下，對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員而言，預(yù)期和期望化合物A和化合物B對(duì)IBD發(fā)揮有效的預(yù)防性或 治療性效果本質(zhì)上是非常困難的。因此，認(rèn)為在本發(fā)明中目前發(fā)現(xiàn)的化合物A和化合物B 對(duì)IBD的預(yù)防性和治療性效果是意外的，所述效果是化合物A和化合物B的特征性功能。如將在實(shí)施例中所述，已經(jīng)證實(shí)，當(dāng)將為本發(fā)明中的有效成分之一的化合物A預(yù) 防性經(jīng)口施用給作為IBD模型廣泛使用的用葡聚糖硫酸酯鈉(DSS)誘發(fā)的IBD模型大鼠 時(shí)，直腸中潰瘍的面積比用作為常規(guī)治療劑臨床配制的柳氮磺胺吡啶治療中的面積更大量 的減少?；衔顰也顯示出與類(lèi)固醇(氫化潑尼松)相同或更好的效果，且無(wú)任一副作用。 另一方面，在氫化潑尼松治療組中觀(guān)察到了作為副作用的顯著的體重增加抑制作用(試驗(yàn) 例3)。換而言之，已經(jīng)證實(shí)，化合物A具有針對(duì)IBD的實(shí)際上的預(yù)防效果。IBD模型是相當(dāng)于中度至重度疾病的動(dòng)物模型，且其中只有柳氮磺胺吡啶顯示出 非常輕微的抑制趨勢(shì)。這與臨床結(jié)果較好地一致。此外，當(dāng)制備了 DSS誘發(fā)的慢性IBD模型，并分別用化合物A或化合物B經(jīng)口施用
8時(shí)，對(duì)IBD的治療效果和劑量依賴(lài)反應(yīng)得到了確切地證實(shí)(試驗(yàn)例4)。即，如在試驗(yàn)例4中 所示，在施用DSS 3天后施用化合物A或化合物B的情況下，在施用化合物A中，病理學(xué)條件 受到了顯著地和劑量依賴(lài)地抑制，且在施用化合物B中，病理學(xué)條件受到了等同于化合物A 的顯著地抑制(試驗(yàn)例5)。另外，在相同的條件下施用作為免疫抑制劑的環(huán)孢菌素時(shí)，強(qiáng)烈 抑制體重增加并導(dǎo)致了全部癥狀的惡化，但是在用5-ASA治療中沒(méi)有獲得治療效果。這些 結(jié)果強(qiáng)烈地表明化合物A和化合物B可以是針對(duì)IBD的安全和強(qiáng)效的經(jīng)口治療劑。除了 DSS誘發(fā)的模型外，作為IBD的病理學(xué)模型，也廣泛使用的是2，4，6_三硝基 苯磺酸(TNBS)誘發(fā)的模型。當(dāng)在TNBS誘發(fā)的IBD模型中檢查化合物A的治療效果和劑量 依賴(lài)反應(yīng)時(shí)，在TNBS處理兩天后施用化合物A，劑量依賴(lài)地改善了結(jié)腸潰瘍得分(試驗(yàn)例 6)。然而，在用作為陽(yáng)性對(duì)照化合物的氫化潑尼松的治療中觀(guān)察到了顯著的(P <0.01)體 重增加的抑制(副反應(yīng))，在化合物A施用組中沒(méi)有觀(guān)察到此種抑制。此外，已經(jīng)證實(shí)了在本發(fā)明中所用的化合物A和化合物B具有高的安全性，因?yàn)樵?連續(xù)26周反復(fù)地經(jīng)口施用化合物中沒(méi)有觀(guān)察到異常情況(試驗(yàn)例7)。因此，優(yōu)選地通過(guò)經(jīng)口施用，本發(fā)明中的有效成分對(duì)炎癥性腸疾病(IBD)發(fā)揮了 極好的預(yù)防性或治療性效果。所以，根據(jù)本發(fā)明，提供了針對(duì)IBD的預(yù)防性或治療性藥物組 合物，所述預(yù)防性或治療性藥物組合物包含化合物B、其前體藥物或它們的可藥用鹽或者化 合物A或其可藥用鹽。在此處的術(shù)語(yǔ)“炎癥性腸疾病(IBD) ”指特發(fā)的慢性持續(xù)型的非特異性腸炎，即，代 表性疾病例如潰瘍性結(jié)腸炎和節(jié)段性回腸炎。因此，根據(jù)臨床的一般分類(lèi)，術(shù)語(yǔ)IBD不包括 傳染性腸炎、由抗生素引起的偽膜性腸炎、缺血性腸炎或伴隨通常的變態(tài)反應(yīng)的腸炎或消 化性潰瘍。因此，根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的實(shí)施方案，炎癥性腸疾病是潰瘍性結(jié)腸炎或節(jié)段性回腸 炎。在此處的術(shù)語(yǔ)“預(yù)防”意為在哺乳動(dòng)物，特別是人類(lèi)中完全地或部分地防止炎癥性 腸疾病或其癥狀，并包括例如預(yù)防或抑制在以前已經(jīng)患有過(guò)和治療過(guò)的患者中的炎癥性腸 疾病的復(fù)發(fā)。此外，在此處的術(shù)語(yǔ)“治療”意為在哺乳動(dòng)物，特別是人類(lèi)中完全地或部分地治愈 炎癥性腸疾病或其癥狀或者還有由此引起的不利影響。舉例來(lái)說(shuō)，術(shù)語(yǔ)“治療”可以包括抑 制疾病癥狀，即，抑制或延遲發(fā)展、改善疾病癥狀，即，消退疾病或癥狀或者逆轉(zhuǎn)癥狀發(fā)展。根據(jù)本發(fā)明的預(yù)防或治療用藥物組合物可以經(jīng)口地或腸胃外地(例如，通過(guò)經(jīng)靜 脈內(nèi)地、經(jīng)肌內(nèi)地、經(jīng)直腸地和經(jīng)皮膚地)施用，并可以以適合于在人類(lèi)和除了人類(lèi)的哺乳 動(dòng)物中經(jīng)口地或腸胃外地地施用的多種劑量形式使用。舉例來(lái)說(shuō)，本發(fā)明的組合物可以根據(jù)其應(yīng)用以任意一種制劑形式包括經(jīng)口劑如片 齊U、膠囊劑、顆粒劑、粉劑、丸劑、細(xì)粒劑、錠劑、糖漿劑和乳劑；注射劑如靜脈內(nèi)的和肌內(nèi)的 注射劑；直腸施用劑、油脂性栓劑、水溶性栓劑、涂布劑如軟膏等來(lái)制備。這些制劑可以通過(guò) 用通常使用的可藥用載體如賦形劑、充填劑、粘合劑、潤(rùn)濕劑、崩解劑、表面活性劑、潤(rùn)滑劑、 分散劑、緩沖劑、PH調(diào)節(jié)劑、保存劑、螯合劑、溶解助劑、防腐劑、矯味矯臭劑、無(wú)痛化劑、穩(wěn)定 劑等的常規(guī)方法來(lái)制備。可用的無(wú)毒添加劑包括，例如乳糖、果糖、葡萄糖、淀粉、明膠、碳 酸鎂、合成硅酸鎂、滑石粉、硬脂酸鎂、甲基纖維素、羧甲基纖維素或其鹽、羥丙基甲基纖維 素、聚乙烯醇、聚乙烯吡咯烷酮、聚丙烯酸或其鹽、阿拉伯樹(shù)膠、橄欖油、丙二醇、聚乙二醇、糖漿、礦脂、甘油、乙醇、檸檬酸、氯化鈉、亞硫酸鈉、磷酸鹽緩沖劑、檸檬酸鹽緩沖劑、酒石酸 鹽緩沖劑、乙酸鹽緩沖劑、磷酸鈉、氫氧化鈉、氫氧化銨、鹽酸、乙酸、磷酸、苯扎氯銨、芐索氯 銨、對(duì)羥基苯甲酸酯如對(duì)羥基苯甲酸甲酯或?qū)αu基苯甲酸乙酯等。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物的劑量可以基于其中所含有的有效成分來(lái)合適地改變， 并將有效成分的預(yù)防性或治療性有效量施用給患者以預(yù)防或治療作為目標(biāo)的炎癥性腸疾 病。在本文中，術(shù)語(yǔ)“預(yù)防性或治療性有效量”指用于對(duì)患者中的目標(biāo)炎癥性腸疾病發(fā) 揮預(yù)防性或治療性效果所需的量，且通?？梢澡b于患者的年齡、體重和性別、疾病、癥狀的 水平等來(lái)個(gè)別地確定。當(dāng)在本發(fā)明中使用化合物A時(shí)，化合物A在藥物組合物中的含量可以根據(jù)其劑量 形式進(jìn)行變化，并且一般地為全組合物中占重量1 %至70 %的濃度，優(yōu)選地是占重量5 %至 30%的濃度。用于制備藥物組合物的特定的方法顯示于隨后的制造例中。用于預(yù)防和治療 IBD的施用劑量鑒于用法、患者的年齡、性別、癥狀的程度等來(lái)合適地確定，并且一般地對(duì)于 成年人，以每天大約0. Img至2000mg的范圍，優(yōu)選地是大約IOmg至lOOOmg，更優(yōu)選地是大 約25mg至500mg，其可以每天一次或幾次地施用。當(dāng)使用化合物B的時(shí)候，化合物B在藥物組合物中的含量可以根據(jù)其劑量形式進(jìn) 行變化，并且一般地為全組合物中占重量1 %至70 %的濃度，優(yōu)選地是占重量5 %至30 % 的濃度。用于制備藥物組合物的特定的方法顯示于隨后的制造例中。用于預(yù)防和治療IBD 的施用劑量鑒于用法、患者的年齡、性別、癥狀的程度等來(lái)合適地確定，并且一般地對(duì)于成 年人，以每天大約0. Img至2000mg的范圍，優(yōu)選地是大約IOmg至lOOOmg，更優(yōu)選地是大約 25mg至500mg，其可以每天一次或幾次地施用。
實(shí)施例本發(fā)明將通過(guò)以下并不意為限制本發(fā)明的實(shí)施例來(lái)進(jìn)一步說(shuō)明。試驗(yàn)例1 用于轉(zhuǎn)化化合物A成化合物B的測(cè)試在禁食條件下，將8周齡的雄性Wistar大鼠(購(gòu)自日本SLC有限公司)用14C標(biāo) 記的化合物A以lmg/kg的劑量經(jīng)口施用，并用Radio-HPLC法分析血漿、尿液和膽汁中化合 物B的量。結(jié)果，在經(jīng)口施用化合物A后15分鐘，在血漿中沒(méi)有檢測(cè)到化合物A，但是檢測(cè)到 了作為主要代謝物的化合物B。另外，在施用化合物A后24小時(shí)收集的尿液中沒(méi)有檢測(cè)到 化合物A，但是檢測(cè)到了作為主要代謝物的化合物B。此外，在施用化合物A后8小時(shí)收集 的膽汁中沒(méi)有檢測(cè)到化合物A，但是檢測(cè)到了作為主要代謝物的化合物B。由上述的結(jié)果證實(shí)，當(dāng)將化合物A吸收入身體時(shí)，幾乎所有的化合物A都代謝成了 化合物B。i式驗(yàn)例2 化合4勿A禾P引卩朵(寸通丄寸角叉菜膠在大薩,足祉樹(shù)秀發(fā)乍用對(duì)7周齡的雄性Wistar大鼠(購(gòu)自日本SLC有限公司)的右后肢足趾皮下地注 射0. Iml的λ -角叉菜膠以引起足趾浮腫反應(yīng)(η = 5)。在施用角叉菜膠前15分鐘和 60分鐘，分別將化合物A以lmg/kg至25mg/kg的劑量和吲哚美辛以5mg/kg的劑量經(jīng)口施用。
在施用角叉菜膠后3小時(shí)，當(dāng)足趾浮腫反應(yīng)達(dá)到最大時(shí)，由右后肢足趾浮腫體積 來(lái)評(píng)價(jià)有效性。獲得的結(jié)果如表1中所示。從結(jié)果中發(fā)現(xiàn)，任一劑量的化合物A沒(méi)有顯示出抑制效果，但是吲哚美辛顯示出 了顯著的(P <0.01)抑制效果。表 1化合物A和吲哚美辛對(duì)角叉菜膠誘發(fā)的大鼠中足趾浮腫的作用 平均值士 SE * * 相對(duì)于對(duì)照組P < 0. 01試駘例3 在3%葡聚糖硫酸酯鈉(DSS)誘發(fā)的大鼠IBD急件樽型中的有效件的評(píng) 價(jià)(預(yù)防效果)3%葡聚糖硫酸酯鈉(DSS)誘發(fā)的IBD模型是最有用的IBD模型之一。允許7周齡的雄性Wistar大鼠(購(gòu)自日本SLC有限公司)自由飲用3% DSS溶 液來(lái)誘發(fā)IBD(n = 8)。在開(kāi)始DSS施用后7天期間，根據(jù)以下基準(zhǔn)觀(guān)察軟便得分和血便得 分，并且將軟便得分和血便得分的總和獲得為單個(gè)動(dòng)物的糞便得分。判斷基準(zhǔn)■軟便得分(0至3)
■血便得分(0至3)
在DSS暴露后8天，每只大鼠靜脈內(nèi)注射Iml量的1 %伊文思藍(lán)生理鹽水，30分鐘 后將動(dòng)物安樂(lè)死，摘出大腸。在用4%福爾馬林緩沖液固定從肛門(mén)起7cm至8cm長(zhǎng)度的大腸20分鐘后，將腸從腸系膜側(cè)縱切開(kāi)用于為直腸部分拍照。通過(guò)圖像分析來(lái)計(jì)算潰瘍面積。將化合物A (10mg/kg/天)或者作為對(duì)照化合物的柳氮磺胺吡啶(100mg/kg/天) 或氫化潑尼松(lmg/kg/天)在瑪瑙研缽中制成懸浮液，從施用DSS前一天開(kāi)始到解剖前一 天，將它們以1日2次，每次5ml/kg的劑量經(jīng)口施用給每一只大鼠。在本文中，將羥丙 基甲基纖維素溶液(HPMC)用作溶劑，將其以5ml/kg的劑量施用給溶劑處理組。獲得的結(jié)果如表2和表3所示。特別地，表2顯示了在每一處理組的IBD模型中，對(duì)糞便得分(平均值士標(biāo)準(zhǔn)誤 差)的有效性(抑制率)的結(jié)果，并且表3顯示了在每一處理組的IBD模型中，潰瘍面積的 結(jié)果(平均值士標(biāo)準(zhǔn)誤差)和其縮小效果(抑制率)。^t 2在DSS誘發(fā)的IBD模型中的潰瘍面積縮小效果(抑制率) 女相對(duì)于溶劑處理組P < 0. 05在DSS誘發(fā)的IBD模型中對(duì)糞便得分的有效性(抑制率) Umn 4 化合物A ^h DSS i秀發(fā)的大鼠IBD ‘障t牛1草型中的有效件的評(píng)價(jià)(治療效
在DSS誘發(fā)的模型中檢查后施用化合物A的治療效果。允許7周齡的雄性Wistar大鼠(購(gòu)自日本SLC有限公司)自由飲用3%DSS溶 液3天來(lái)誘發(fā)結(jié)腸炎，并隨后從測(cè)試的第四天開(kāi)始，允許自由飲用1 % DSS溶液來(lái)誘發(fā)慢性 IBD。從測(cè)試的第四天開(kāi)始直到解剖當(dāng)天，將化合物A(2mg/kg/天，20mg/kg/天)、作為 對(duì)照的5-氨基水楊酸(5-ASA :200mg/kg/天)和環(huán)孢菌素A(CyA :25mg/kg/天)施用給動(dòng) 物(η = 8 至 20)。觀(guān)察單個(gè)動(dòng)物中糞便的特性直到解剖前一日，并根據(jù)顯示于試驗(yàn)例3中的相同基 準(zhǔn)來(lái)確定軟便得分和血便得分，以獲得軟便得分和血便得分的總和作為糞便得分。另外，在解剖當(dāng)天，每只大鼠靜脈內(nèi)注射Iml量的伊文思藍(lán)生理鹽水，30分鐘 后將動(dòng)物安樂(lè)死，摘出大腸。測(cè)定從肛門(mén)至盲腸的大腸長(zhǎng)度后，用4%福爾馬林緩沖液固定 20分鐘后，將腸從腸系膜側(cè)縱切開(kāi)用于為直腸部分拍照并測(cè)量直腸重量。根據(jù)以下用于宏 觀(guān)觀(guān)察得分的基準(zhǔn)對(duì)直腸部分的糜爛狀態(tài)和擴(kuò)大進(jìn)行評(píng)分。判斷基準(zhǔn)宏觀(guān)觀(guān)察得分(0-5)
獲得的結(jié)果如圖1、2、3和4中所示。特別地，圖1顯示了分別的藥物對(duì)由于用DSS處置的大腸的縮短的治療效果的測(cè) 試結(jié)果，圖2顯示了分別的藥物對(duì)直腸重量增加的治療效果的測(cè)試結(jié)果，圖3顯示了分別的 藥物對(duì)在解剖前一日糞便得分的惡化的治療效果的測(cè)試結(jié)果，和圖4以平均值士標(biāo)準(zhǔn)誤 差，分別顯示了分別的藥物對(duì)宏觀(guān)觀(guān)察得分的增加的治療效果的測(cè)試結(jié)果。從這些結(jié)果中已經(jīng)證實(shí)，通過(guò)施用化合物 (20mg/kg/天)顯示出了對(duì)在溶劑處理 組中觀(guān)察到的大腸的縮短的顯著(P < 0.01)改善效果(圖1)，且通過(guò)施用化合物A(2mg/ kg/天，20mg/kg/天)顯示出了對(duì)在溶劑處理組中觀(guān)察到的直腸重量的顯著增加具有顯著 (P < 0. 005，P < 0. 05)改善效果(圖 2)此外，通過(guò)施用化合物A(2mg/kg/天，20mg/kg/天)已經(jīng)證實(shí)了對(duì)在解剖前一日的 糞便得分的顯著(P < 0. 005)改善效果(圖3)。此外，在用類(lèi)別檢驗(yàn)(category test) (U檢驗(yàn))和二值化檢驗(yàn)(Fisher檢驗(yàn))評(píng) 價(jià)宏觀(guān)觀(guān)察得分的結(jié)果，認(rèn)為在化合物A(20mg/kg/天)處理組中觀(guān)察到了顯著的改善效果 (P = 0. 0006 類(lèi)別檢驗(yàn)，P = 0. 0003 二值化檢驗(yàn))，且在2mg/kg處理組中觀(guān)察到了抑制趨 勢(shì)(P = 0. 0509 類(lèi)別檢驗(yàn)，P = O. 1161 二值化檢驗(yàn))(圖4)。由上述的結(jié)果已經(jīng)證實(shí)，化合物A在慢性IBD模型中具有劑量依賴(lài)的治療效果。另 一方面，在使用免疫抑制劑CyA和抗炎劑5-ASA的任一評(píng)價(jià)項(xiàng)目中沒(méi)有觀(guān)察到顯著的抑制 效果。
itmm 5 :i平價(jià)化合物B ^h DSS i秀發(fā)的大鼠IBD ‘障t牛1草型中的有效件(治療效果 的判斷)除將化合物A用化合物B(20mg/kg/天)替代外，以與試驗(yàn)例4中相同的方式研究 經(jīng)口施用化合物B的治療效果(η = 12)。結(jié)果，溶劑處理組中，盡管在解剖前一日的糞便得分顯著地(P < 0. 01)增加到了 1. 9士0. 25，但在化合物B處理組中觀(guān)察到了為0. 9士0. 24的顯著的(P < 0. 05)抑制且在 宏觀(guān)觀(guān)察得分中也觀(guān)察到了抑制效果。i式I· 6 石肖;Sag石黃· (TNBS) iH^t^^lf, IBD Φ 白句*豸十牛^li利介 效果)TNBS誘發(fā)的模型作為IBD的動(dòng)物模型廣泛地使用為節(jié)段性回腸炎的模型。因此， 將TNBS誘發(fā)的模型大鼠用于檢查化合物A的治療效果。將8周齡的雄性SD大鼠(購(gòu)自Charles River Laboratories日本，有限公司) 用TNBS經(jīng)直腸地施用以誘發(fā)腸炎，并在用TNBS處理2天后分組以開(kāi)始藥物的施用。將溶 劑、化合物A(2mg/kg/天，20mg/kg/天，50mg/kg/天)或氫化潑尼松(6mg/kg/天)一天兩 次經(jīng)口施用，并在施用后8天，將大鼠進(jìn)行尸體解剖以確定宏觀(guān)觀(guān)察得分。得分的評(píng)價(jià)通過(guò) 描述于表 4 中的基于 JOHN L.WALLACE 等人(Gastroenterology 1989 ；96 :29_36)的判斷方 法的方法來(lái)實(shí)行。此外，將大腸切成IOcm的長(zhǎng)度用于測(cè)量腸管的濕重。得分評(píng)價(jià)的結(jié)果顯示于表5 中，且測(cè)量的濕重的結(jié)果顯示于表6中。由這些結(jié)果，在溶劑處理組中觀(guān)察到了宏觀(guān)觀(guān)察得分的顯著增加和大腸濕重的增 加。相反，在化合物A(50mg/kg)處理組中觀(guān)察到了顯著的(P < 0. 05)得分改善和大腸濕重 改善的趨勢(shì)。另外，在低劑量(2mg/kg，10mg/kg)組中，觀(guān)察到了改善的得分的趨勢(shì)。另一 方面，在作為陽(yáng)性對(duì)照的氫化潑尼松處理組中觀(guān)察到了體重增加的顯著抑制(P < 0. 01)。 另外，在化合物A處理組中沒(méi)有觀(guān)察到體重增加的顯著抑制。表 4
得分判斷基準(zhǔn)0無(wú)局部充血、無(wú)出血、無(wú)潰瘍1局部充血、出血、無(wú)潰瘍2不伴隨充血的潰瘍或腸壁的肥厚3伴隨炎癥的潰瘍(1個(gè)部位)42個(gè)或多個(gè)部位的潰瘍、炎癥或地圖狀潰瘍(潰瘍寬度小于 Icm)52個(gè)或多個(gè)部位的潰瘍、炎癥或地圖狀潰瘍(潰瘍寬度1cm或更寬)6對(duì)于腸管，對(duì)縱向上超過(guò)2cm的潰瘍每Icm加1分對(duì)橫向上每超過(guò)Icm的潰瘍加1分
在TNBS誘發(fā)的IBD模型中對(duì)結(jié)腸的潰瘍得分的影響 ## =P < 0. 01 ；通過(guò)Mann-Whitney檢驗(yàn)，未處理組相對(duì)于溶劑處理組=P < 0. 05 ；通過(guò)Steel檢驗(yàn)，溶劑處理組相對(duì)于化合物A處理組b =P < 0. 05 ；通過(guò)Marm-Whitney檢驗(yàn)，溶劑處理組相對(duì)于氫化潑尼松處理組戲在TNBS誘發(fā)的IBD模型中對(duì)大腸濕重的效果 ## =P < 0. 01 ；通過(guò)Mann-Whitney檢驗(yàn)，未處理組相對(duì)于溶劑處理組bb =P < 0. 01 ；通過(guò)Student t檢驗(yàn)，溶劑處理組相對(duì)于氫化潑尼松處理組試驗(yàn)例7 在大鼠中化合物A的26周反復(fù)地經(jīng)口施用研究(安全性測(cè)試)
向6周齡雄性和雌性SD大鼠(購(gòu)自Charles River Laboratories日本，有限公 司)經(jīng)口地并反復(fù)地施用溶劑(羥甲基纖維素)或化合物A(100mg/kg/天，300mg/kg/天， 1000mg/kg/ 天)連續(xù) 26 周(η = 15)。結(jié)果，在任一劑量組中沒(méi)有觀(guān)察到動(dòng)物在一般狀態(tài)、體重改變、食品消耗和組織病 理學(xué)上的異常。已經(jīng)從這些結(jié)果中判斷，化合物A的無(wú)毒性量是1000mg/kg/天或以上。試驗(yàn)例8 對(duì)用化合物B活化T細(xì)胞的盲接作用的研究在第1天和第14天，將7周齡雄性Balb/c小鼠(購(gòu)自日本SLC有限公司)用氫氧 化鋁膠化卵清蛋白懸浮液腹腔地或皮下地施用于兩腹股溝區(qū)域來(lái)進(jìn)行敏化，并在第21天 將脾臟摘出用于制備脾臟細(xì)胞懸浮液。在去除紅細(xì)胞后，向在培養(yǎng)基中懸浮的脾臟細(xì)胞加 入化合物B (10 μ Μ)和卵清蛋白，并將混合物在5% CO2的條件下，37°C進(jìn)行培養(yǎng)。將培養(yǎng)6小時(shí)后上清液中的IL-4和培養(yǎng)24小時(shí)后上清液中的IL_2、IL-5和IFN γ 通過(guò)ELISA(由END0GEN生產(chǎn)的ELISA試劑盒)進(jìn)行定量地確定。結(jié)果，雖然IL-4、IL-2、IL-5和IFN γ在對(duì)照組中都增加了，但是化合物B沒(méi)有抑 制這些因子的產(chǎn)生。此時(shí)，氫化潑尼松幾乎完全抑制了 IL-2、IL-5和IFN Y，但沒(méi)有抑制 IL-4。由以上的結(jié)果認(rèn)為，含有作為有效成分的化合物A和化合物B的藥物組合物對(duì)IBD 比柳氮磺胺吡啶或5-ASA實(shí)際上更有效，并具有與氫化潑尼松相等或更高的效力。此外，認(rèn) 為包含作為有效成分的化合物A和化合物B的經(jīng)口藥物不僅具有預(yù)防效果，還能期望地具 有治療效果。也認(rèn)為，由于體重增加在氫化潑尼松處理組和環(huán)孢菌素處理組中明顯地受到 抑制，并且在化合物A和化合物B處理組中沒(méi)有觀(guān)察到副作用如體重增加的抑制，所以包含 作為有效成分的化合物A和化合物B的經(jīng)口藥物具有高的安全性。泡丨造仿1丨針)(寸炎癥+牛腸疾病的預(yù)KT丨?；蛑委?牛組合4勿的泡丨齊I丨例本發(fā)明的用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病的藥物組合物的制劑的制造例和用于制 備組合物的配方顯示如下。制造例1 片劑
表7
化合物A2. 5g
羥丙甲纖維素0. 5g
乳糖11. 5g
6% HPC乳糖8g
馬鈴薯淀粉2g
硬脂酸錯(cuò)0. 5r
總^^25g
制造例2 膠囊劑
表8
化合物A2. 5g
羥丙甲纖維素0. 5g
乳糖17. 5g
馬鈴薯淀粉4g
硬脂酸鎂0. 5g
總^^25g
制誥例3 灌腸劑
表9
化合物B1. Omg/ml
三(羥甲基)氨基甲烷1. 2mg/ml
羥甲基纖維素鈉15mg/ml
鹽酸縣
PH7. O
權(quán)利要求
用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病(IBD)的藥物組合物，所述藥物組合物包含7，8 二甲氧基 4(5H)，10 二氧代 1H 1，2，3 三唑并[4，5 c][1]苯并吖庚英、其前體藥物或它們的可藥用鹽。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的藥物組合物，所述藥物組合物包含作為前體藥物的2-(1_異丙氧 基羰基氧基-2-甲基丙基)_7，8- 二甲氧基-4 (5H)，10- 二氧代-2H-1,2,3-三唑并[4，5-c] [1]苯并吖庚英或其可藥用鹽。
3.根據(jù)權(quán)利要求1或2的藥物組合物，所述藥物組合物是經(jīng)口施用的。
4.根據(jù)權(quán)利要求1至3任一項(xiàng)所述的藥物組合物，所述藥物組合物進(jìn)一步包含可藥用 載體。
5.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述預(yù)防意指抑制炎癥性腸疾 病的復(fù)發(fā)。
6.根據(jù)權(quán)利要求1至4任一項(xiàng)所述的藥物組合物，其中所述炎癥性腸疾病是潰瘍性結(jié) 腸炎或節(jié)段性回腸炎。
7.用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病(IBD)的方法，所述方法包括向哺乳動(dòng)物施用預(yù)防或 治療有效量的7，8-二甲氧基-4 (5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4, 5-c] [1]苯并吖庚 英、其前體藥物或它們的可藥用鹽。
8.根據(jù)權(quán)利要求7的方法，其中施用的所述化合物是2-(1-異丙氧基羰基氧基-2-甲 基丙基)-7，8_ 二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4, 5-c] [1]苯并吖庚英或 其可藥用鹽。
9.根據(jù)權(quán)利要求7或8的方法，其中所述施用是經(jīng)口施用。
10.根據(jù)權(quán)利要求7至9任一項(xiàng)所述的方法，所述方法包括施用有效量的化合物和可藥 用載體。
11.根據(jù)權(quán)利要求7至10任一項(xiàng)所述的方法，其中所述預(yù)防意指抑制炎癥性腸疾病的復(fù)發(fā)。
12.根據(jù)權(quán)利要求7至11任一項(xiàng)所述的方法，其中所述炎癥性腸疾病是潰瘍性結(jié)腸炎 或節(jié)段性回腸炎。
13.7,8- 二甲氧基4 (5H)，10- 二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c] [1]苯并吖庚英、其前 體藥物或它們的可藥用鹽在制備用于炎癥性腸疾病(IBD)的預(yù)防劑或治療劑中的用途。
14.根據(jù)權(quán)利要求13的用途，其中所述化合物是2-(1_異丙氧基羰基氧基-2-甲基丙 基)-7，8_ 二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5_c][l]苯并吖庚英或其可 藥用鹽。
15.根據(jù)權(quán)利要求13或14的用途，其中所述預(yù)防劑或治療劑用于經(jīng)口施用。
16.根據(jù)權(quán)利要求13至15任一項(xiàng)所述的用途，其中預(yù)防劑或治療劑進(jìn)一步包含可藥用 載體。
17.根據(jù)權(quán)利要求13至16任一項(xiàng)所述的用途，其中所述預(yù)防意指抑制炎癥性腸疾病的復(fù)發(fā)。
18.根據(jù)權(quán)利要求13至17任一項(xiàng)所述的用途，其中所述炎癥性腸疾病是潰瘍性結(jié)腸炎 或節(jié)段性回腸炎。
全文摘要
本發(fā)明涉及用于預(yù)防或治療炎癥性腸疾病的藥物組合物，所述藥物組合物包含7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-1H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并吖庚英、其前體藥物、優(yōu)選地包含作為前體藥物的2-(1-異丙氧基羰基氧基-2-甲基丙基)-7，8-二甲氧基-4(5H)，10-二氧代-2H-1，2，3-三唑并[4，5-c][1]苯并吖庚英、或者它們的可藥用鹽。根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物在炎癥性腸疾病的預(yù)防和治療中是有效的，且具有少的副作用。特別地，根據(jù)本發(fā)明的藥物組合物可以對(duì)于對(duì)常規(guī)治療藥具有抗性的重癥病例顯示出強(qiáng)的預(yù)防效果和治療效果。
文檔編號(hào)A61K31/55GK101903027SQ20088012159
公開(kāi)日2010年12月1日 申請(qǐng)日期2008年12月17日 優(yōu)先權(quán)日2007年12月18日
發(fā)明者二宮智尚, 宍倉(cāng)孝, 打田光宏, 星名由佳利, 河野賢一, 高畑祥 申請(qǐng)人:明治制果株式會(huì)社