專利名稱：：新的治療藥物傳遞系統(tǒng)的制作方法相關(guān)申請(qǐng)本申請(qǐng)是下列兩件與此有關(guān)的美國專利申請(qǐng)書的部分繼續(xù)，它們于1991年6月18日提出申請(qǐng)，申請(qǐng)?zhí)柛鳛?16,899和717,084。并且這兩件美國專利申請(qǐng)是1990年8月20日申請(qǐng)的申請(qǐng)?zhí)枮?69,828的美國專利申請(qǐng)的部分繼續(xù)，而申請(qǐng)?zhí)枮?69,828的美國專利申請(qǐng)則系1989年12月22日申請(qǐng)的申請(qǐng)?zhí)枮?55,707的美國專利申請(qǐng)的部分繼續(xù)。所有這些申請(qǐng)均可并入本文作為參考。
背景技術(shù)：
：發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及治療藥物傳遞領(lǐng)域，更準(zhǔn)確地講，是有關(guān)包含治療化合物的充氣微球體。本發(fā)明進(jìn)一步涉及使用這種微球體作為治療藥物傳遞系統(tǒng)的方法。發(fā)明背景由于藥物毒性的問題，靶定位藥物傳遞方式就顯得格外重要。特定的藥物傳遞方法能降低毒性副作用，降低所需要的劑量，并能降低病人治病所需的費(fèi)用。本發(fā)明的目的在于尋找這些和/或其它藥物釋放領(lǐng)域中的重要需要?，F(xiàn)有技術(shù)中向活細(xì)胞內(nèi)導(dǎo)入遺傳物質(zhì)的方法和材料是有限的并且效果不好。迄今已設(shè)計(jì)出幾種不同的將遺傳物質(zhì)傳送到活細(xì)胞內(nèi)的機(jī)制。這些機(jī)制包括方法如磷酸鈣沉淀和電微孔(electroporation)，以及載體如陽離子聚合物和注水脂質(zhì)體。這些方法在體內(nèi)均為相對(duì)無效且對(duì)細(xì)胞培養(yǎng)轉(zhuǎn)染僅有有限的用途。這些方法中無論哪一種均不能使遺傳物質(zhì)更有效地局部釋放，傳遞以及整合于靶細(xì)胞中。需要更好的傳遞治療用物質(zhì)如遺傳物質(zhì)的方式來治療人及動(dòng)物的各種疾病。在表征遺傳疾病和了解蛋白質(zhì)轉(zhuǎn)錄方面雖已取得較大進(jìn)展，但在向用于治療人和動(dòng)物疾病的細(xì)胞中傳遞遺傳材料方面只取得相對(duì)較小的進(jìn)展。主要困難是遺傳物質(zhì)從細(xì)胞外區(qū)向細(xì)胞內(nèi)區(qū)的傳遞或甚至在選定的細(xì)胞膜表面如何有效定位遺傳物質(zhì)。在體內(nèi)已嘗試了多種方法但均沒有取得較大進(jìn)展。例如，病毒如腺病毒和逆轉(zhuǎn)錄病毒曾被用作載體向細(xì)胞中傳遞遺傳物質(zhì)。全病毒曾被使用過，但遺傳物質(zhì)的數(shù)量則是有限的并可能存在著可能由活病毒引起的危險(xiǎn)性相互作用，其中所述遺傳物質(zhì)可以置于病毒膠囊內(nèi)。病毒膠囊的主要組分可以被分離并可用于向選擇細(xì)胞內(nèi)傳送遺傳物質(zhì)。然而，傳送賦形劑在體內(nèi)不僅必須識(shí)別某些細(xì)胞而且還必須被傳送到這些細(xì)胞。盡管對(duì)病毒載體已進(jìn)行了廣泛研究，但仍難以開發(fā)出成功的在體內(nèi)可傳送遺傳物質(zhì)的靶向病毒傳遞載體。常規(guī)包含液體的脂質(zhì)體在細(xì)胞培養(yǎng)中業(yè)已被用于向細(xì)胞傳送遺傳物質(zhì)，但在體內(nèi)一般不適合遺傳物質(zhì)的細(xì)胞傳送。例如，陽離子脂質(zhì)體轉(zhuǎn)變感染技術(shù)在體內(nèi)不能有效進(jìn)行。因而需要更有效的手段來改進(jìn)治療物質(zhì)如遺傳物質(zhì)的細(xì)胞傳送。本發(fā)明的概述本發(fā)明提供了利用充氣微球體特定位點(diǎn)傳遞治療藥物的治療藥物傳遞系統(tǒng)。一旦這種微球體被導(dǎo)入病人體內(nèi)，治療化合物則通過使用聲能被靶定位到特定組織上，該聲能指向靶區(qū)并使微球體破裂，釋放出治療化合物。更準(zhǔn)確地講，本發(fā)明提供了靶定位治療藥物傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)包含含有治療化合物的充氣微球體。本發(fā)明還提供了治療化合物受控傳遞到病人病灶區(qū)的方法，該方法包括(i)對(duì)病人給用包含治療化合物的充氣微球體給藥；(ii)使用超聲波監(jiān)控微球體以確定微球體在病灶區(qū)內(nèi)的存在；以及(iii)使用超聲波破裂微球體而使治療化合物在病灶區(qū)內(nèi)釋出。此外，本發(fā)明也提供了制備適于用作藥物傳遞劑的充氣脂質(zhì)體的方法和裝置。優(yōu)選的本發(fā)明方法在制備包含有治療化合物的充氣微球過程中提供了簡便以及可能的資金節(jié)約等優(yōu)點(diǎn)。充氣脂質(zhì)體特別適合用作藥物載體。不同于現(xiàn)有技術(shù)中具有僅適合包囊水溶性藥物的液態(tài)內(nèi)腔的脂質(zhì)體，根據(jù)本發(fā)明制得的充氣脂質(zhì)體特別適合于包囊親脂藥物。而且，藥物的親脂衍生物可迅速滲合到類脂層內(nèi)，如烷基化的金屬茂二鹵化物的衍生物，Kuo等，J.Am.Chem.Soc.，1991，113，9027—9045。據(jù)認(rèn)為本發(fā)明的優(yōu)點(diǎn)之一包括微球體內(nèi)的氣體吸收超聲波能量，微球體一旦破裂造成膜流動(dòng)性局部增加，因而可增加治療化合物的細(xì)胞攝取量。本發(fā)明的各種特點(diǎn)及優(yōu)點(diǎn)將在下列附圖和說明中更詳細(xì)地描述如下。附圖的簡要說明附圖1為包含有治療藥物的充氣脂質(zhì)體，該藥物嵌入在脂質(zhì)體微球體的壁之間，當(dāng)施加超聲波時(shí)治療藥物的接續(xù)釋放過程的圖形表示。附圖2為包含有治療藥物的充氣脂質(zhì)體，其中所述藥物嵌入在脂質(zhì)體微球體的壁的內(nèi)層之內(nèi)且曝露在充氣內(nèi)腔中，當(dāng)施加超聲波作用時(shí)治療藥物的接續(xù)釋放過程的圖形描繪。附圖3圖解說明了包含有治療藥物的充氣脂質(zhì)體，其中所述藥物嵌入在脂質(zhì)體微球體壁的外層之內(nèi)且曝露在充氣內(nèi)腔中，通過施加超聲波作用使治療藥物的接續(xù)釋放過程。附圖4圖解表示了包含治療藥物的充氣脂質(zhì)體微球體，其中所述藥物嵌入在脂質(zhì)體微球體壁的內(nèi)外層之間且既曝露在充氣內(nèi)腔之中又曝露在外部環(huán)境中，通過施加超聲波作用治療藥物接續(xù)釋放的過程。附圖5圖解說明了包含有連結(jié)在脂質(zhì)體內(nèi)部上的治療藥物的充氣脂質(zhì)體微球體通過施加超聲波而使治療藥物接續(xù)釋放的過程。附圖6圖解說明了包含有連結(jié)在脂質(zhì)體外壁上的治療藥物的充氣脂質(zhì)體微球體通過施加超聲波作用而使治療藥物接續(xù)釋放的過程。附圖7圖解說明了包含有治療藥物的充氣脂質(zhì)體微球體，通過施加超聲作用使治療藥物接續(xù)釋放的過程，其中所述治療藥物如負(fù)電荷藥物(A)或正電荷藥物(B)連結(jié)在脂質(zhì)體微球體的內(nèi)外壁上。附圖8圖解說明了包含有包囊在充氣內(nèi)腔之內(nèi)的治療化合物的充氣脂質(zhì)體微球體通過施加超聲波作用而使治療藥物接續(xù)釋放的過程。附圖9為制備本發(fā)明包含治療藥物的充氣脂質(zhì)體微球體的優(yōu)選設(shè)備的切面示意圖，部分為簡圖。附圖10示出了過濾和/或分配本發(fā)明包含治療藥物的充氣脂質(zhì)體微球體的優(yōu)選設(shè)備。附圖11畫出了過濾和/分散本發(fā)明包含治療物的充氣脂質(zhì)體微球體的優(yōu)選設(shè)備。附圖12為附圖11中設(shè)備的部分展示圖。附圖13示出了其內(nèi)部基本上無液體且其中未包囊有任何藥物的充氣脂質(zhì)體的dB反射曲線圖，其中所述脂質(zhì)體通過真空干燥氣體滴注法制備。數(shù)據(jù)是在TM5200型成象掃描器(AcousticImaging，Phoenix，Arizona)上利用7.5兆赫轉(zhuǎn)換器掃描得到并通過采用系統(tǒng)測試軟件測量反射比而形成。該系統(tǒng)在各試驗(yàn)之前用已知聲阻抗的模型校準(zhǔn)。附圖14示出了制備包含在真空干燥氣體滴注脂質(zhì)體內(nèi)的藥物的優(yōu)選設(shè)備，并且包含在其內(nèi)部基本上無液體的充氣脂質(zhì)體內(nèi)的藥物通過真空干燥氣體滴注法制備。附圖15為顯微攝影照片，該照片示出了本發(fā)明充氣脂質(zhì)體在過濾之前(A)和過濾之后(B)的粒度大小。附圖16圖解描繪了本發(fā)明充氣脂質(zhì)體在過濾之前(A)和過濾之后(B)的大小分布。附圖17為類脂懸浮液通過濾器壓出之前(A)和之后(B)的顯微攝影。附圖18為在過濾和壓熱壓出類脂質(zhì)懸浮液后形成的充氣脂質(zhì)體的顯微攝影，所述顯微攝影攝于過濾篩分充氣脂質(zhì)體之前(A)和之后(B)。發(fā)明的詳細(xì)描述本發(fā)明提供了靶定位藥物傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)包含含有治療化合物的充氣微球體。微球體被定義為具有內(nèi)腔且相對(duì)為球形的結(jié)構(gòu)。根據(jù)需要，治療化合物可被嵌入在微球體的壁內(nèi)，也可包囊在微球體內(nèi)和/或連接在微球體上。本申請(qǐng)中所用的與治療化合物的位置有關(guān)的術(shù)語“連接”或其變化是指治療化合物通過某些方式連接在微球體壁的內(nèi)部和/或外部上，如通過共價(jià)或離子鍵，或其它化學(xué)或電化學(xué)連接或相互作用的方式連接，例如如上所示的附圖5，6和7所述。本申請(qǐng)中所用的與治療化合物的位置有關(guān)的術(shù)語“包囊”或其變化是指治療化合物位于微球體的內(nèi)腔中，例如如上附圖8所示。所用的與治療化合物位置有關(guān)的術(shù)語“嵌入”或其變化表示治療化合物位于微球體壁之內(nèi)，例如如上附圖1，2，3和4所示。術(shù)語“含有治療藥物”表示在微球體中的所有不同類型的治療化合物。因此，治療化合物可以不定地被定位，例如包裹在充氣微球的內(nèi)腔內(nèi)，定位在充氣微球體的氣體和內(nèi)壁之間，結(jié)合在充氣微球體的外表面和/或嚙合在微球體結(jié)構(gòu)本身之內(nèi)。本專業(yè)人員一旦了解了本申請(qǐng)的公開內(nèi)容還應(yīng)理解當(dāng)微球體包含類脂時(shí)，其壁可以含有多于一個(gè)類脂雙層。本發(fā)明微球體可以在體外或體內(nèi)用于靶定位治療藥物傳遞。優(yōu)選的是有超聲波作用時(shí)每個(gè)單一微球體能傳遞出基本上所有治療化合物。術(shù)語“基本上所有”是指至少的80％，優(yōu)選至少90％，最優(yōu)選約100％。在某些方案中，所有治療化合物從全部微球體中的釋出是快速的；而在其它方案中，傳遞則是逐步的。本專業(yè)人員一理了解了本申請(qǐng)的內(nèi)容應(yīng)當(dāng)理解優(yōu)選的釋放速率將隨應(yīng)用的治療劑的類型而改變。在一些優(yōu)選的方案中，例如，治療化合物封裝在微球體內(nèi)，因此當(dāng)微球體破裂時(shí)幾乎所有治療化合物能從微球體內(nèi)快速釋出。進(jìn)一步，本專業(yè)人員掌握了本申請(qǐng)公開內(nèi)容之后還應(yīng)理解，通過改變施加的超聲波的頻率和作用時(shí)間可以得到需要的治療化合物的釋出速率。因此，如上所述，被傳遞的治療劑可以封裝包裹在充氣微球體之內(nèi)，這些化合物可以是各種治療劑；可以溶合在充氣微球體的表面，如用負(fù)電荷DNA涂層在陽離子類脂上或?qū)⒄姾伤幬锿吭陉庪x子類脂上，和/或嵌入在充氣微球體的壁內(nèi)，這種藥物如親脂治療劑。微球體可以以包含有治療劑的微球體形式制得，或者微球體以不包含治療劑的形式制得而治療劑在使用之前加到充氣微球體中。對(duì)于后一種情況，治療劑可通過例如加到含有充氣微球體的水溶性介質(zhì)中并振蕩以便治療劑涂布微球體。本文中所用的“充氣的”是指微球體含有內(nèi)腔，該內(nèi)腔內(nèi)至少有10％氣體，優(yōu)選至少有約25％氣體，較優(yōu)送有至少約50％氣體，更優(yōu)選至少有約75％氣體，最優(yōu)選至少有約90％氣體。本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員在掌握了本申請(qǐng)內(nèi)容之后應(yīng)當(dāng)理解也可以使用氣體前體，隨后活化形成氣體。各種生物可容性氣體均可用于本發(fā)明的充氣微球體內(nèi)。這類氣體包括空氣，氮?dú)?、二氧化碳、氧氣、氬氣、氟、氙氣、氖氣、氦氣或任何所有這些氣體的組合。其它適宜氣體對(duì)于掌握了本申請(qǐng)內(nèi)容的專業(yè)人員而言是顯而易見的。本發(fā)明的微球體優(yōu)選由不透性材料組成。不透性材料是指在典型的貯藏條件下或在超聲波誘導(dǎo)釋放發(fā)生之前的使用過程中不允許基本量微球體內(nèi)含物滲出的材料。典型的貯藏條件例如為在4℃維持48小時(shí)的未脫氣的0.9NaCl水溶性溶液。所用的與不透性有關(guān)的術(shù)語“基本量”被定義為大于約50％內(nèi)含物，內(nèi)含物既包括氣體也包括治療劑。貯藏期間優(yōu)選不超過約25％的氣體和治療藥物被釋放。貯藏溫度優(yōu)選為低于形成微球體的材料的相變溫度。至少已部分發(fā)現(xiàn)充氣脂質(zhì)體的氣體不透性與其凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度有關(guān)?！澳z態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度”是指類脂雙層從凝膠態(tài)轉(zhuǎn)變成液晶態(tài)溫度。例如可參見Chap-man等，J.Biol.Chem.1974，249，2512—2521。一般認(rèn)為凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度越高，在給定溫度下則脂質(zhì)體的氣體不透性越好。參見下表I和DerekMarsh，CRCHand-bookofLipidBilayers(CRCPress，BocaRaton，F(xiàn)L1990)，P139，給出了飽和二酰基—sn—甘油基—3—膽堿磷酸的主鏈熔點(diǎn)轉(zhuǎn)變。然而，還值得注意的是從由具有較低凝膠態(tài)至液晶態(tài)相變溫度的類脂組成的充氣脂質(zhì)體中釋出治療化合物一般只用較低能量。表I飽和二酰基—sn—甘油基—3—膽堿磷酸主鏈凝膠態(tài)至液晶態(tài)相變溫度各種類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度對(duì)本專業(yè)人員而言顯然是顯而易見的，并且這些溫度在如Gregoriadis編輯的LiposomeTechnology，VolI，1—18(CPCPress，1984)中被描述。在某些優(yōu)選方案中，形成微球體的材料的相變溫度大于欲給藥病人的體內(nèi)溫度。例如，相變溫度大于37℃的微球體優(yōu)選用于人類給用。在優(yōu)選的方案中，本發(fā)明微球體是穩(wěn)定的，穩(wěn)定性被定義為從微球體形成至施加超聲波作用的時(shí)間內(nèi)的抗破裂性。根據(jù)穩(wěn)定性可選擇如類脂類材料制造微球體。例如，由DSPC(二硬脂酰磷脂酰膽堿)組成的充氣脂質(zhì)體比由DPPC(二棕櫚酰磷脂酰膽堿)組成的充氣脂質(zhì)體更加穩(wěn)定，并且這兩種脂質(zhì)體也比卵磷脂酰膽堿(EPC)組成的充氣脂質(zhì)體更穩(wěn)定。優(yōu)選從形成至施加超聲波作用這段時(shí)間內(nèi)微球體的破裂不超過50％，較優(yōu)選微球體的破裂不超過約25％，更優(yōu)選微球體的破裂不超過10％，最優(yōu)選不超過1％微球體。此外，業(yè)已發(fā)現(xiàn)向任何脂質(zhì)體膜內(nèi)加入至少少量帶負(fù)電荷的類脂，盡管這是非必要的，但有助于得到無相互融合破裂傾向的脂質(zhì)體。“至少少量”是指總類脂量的百分之一摩爾。適宜的負(fù)電類脂對(duì)本領(lǐng)域技術(shù)人員是十分顯然的，包括例如磷醋酰絲氨酸和脂肪酸。具有最優(yōu)選的施加共振頻率超聲波作用時(shí)的破裂能力，echogencity和穩(wěn)定性的脂質(zhì)體是由二棕櫚酰磷脂酰膽堿制成的脂質(zhì)體。進(jìn)一步，本發(fā)明微球體最好在脈管系統(tǒng)內(nèi)要足夠穩(wěn)定以便它們經(jīng)受起再循環(huán)。充氣微球體可被涂層以使網(wǎng)狀內(nèi)皮系統(tǒng)的吸入降至最低程度。有用的涂漬物包括例如神經(jīng)節(jié)苷脂，葡糖醛酸酯，半乳糖酸酯，guluronate，聚乙二醇，聚丙二醇，聚乙烯吡咯烷酮，聚乙烯醇、葡聚糖、淀粉，磷酸化和磺酸化的單—，二—，三—，寡—和多—糖類以及清蛋白。出于如避免被免疫系統(tǒng)識(shí)別的目的，也可將微球體涂層。在優(yōu)選方案中，由于微球體的不透性，在它們到達(dá)需要治療病人的靶定位內(nèi)部病區(qū)和施加超聲波作用之前，至少約50％，優(yōu)選至少約75％，較優(yōu)選至少約90％且最優(yōu)選約100％微球體的治療劑和氣體內(nèi)含物仍保留在微球體內(nèi)。另外，用于構(gòu)成微球體的物質(zhì)應(yīng)當(dāng)是生物相容的，生物相容物質(zhì)被定義為在所給用的量下它們對(duì)病人是無毒的，優(yōu)選不會(huì)產(chǎn)生疾病，最優(yōu)選是無害的。用于構(gòu)成微球體的物質(zhì)還優(yōu)選為柔性的。在本申請(qǐng)中充氣微球體的柔性被定義為其結(jié)構(gòu)改變其形狀通過大小小于微球體的孔洞的能力。由于脂質(zhì)體非常適合用于截留氣體，因此它們構(gòu)成了本發(fā)明的優(yōu)選方案。另外，由于它們的生物相容性以及容易接納親脂性治療化合物的能力，故優(yōu)選充氣微球體，其中所述治療化合物在脂質(zhì)體破裂之后很容易穿過細(xì)胞膜。掌握了本申請(qǐng)內(nèi)容的專業(yè)技術(shù)人員將會(huì)認(rèn)識(shí)到根據(jù)預(yù)期用途可選擇特殊的脂質(zhì)。倘如微球體的循環(huán)半衰期足夠長，則當(dāng)微球體進(jìn)人體內(nèi)的一般會(huì)通過靶組織。通過使聲波誘導(dǎo)的破裂聚集在所選擇的欲處理的組織上，治療劑將在靶組織上局部釋放。作為靶定位的另一幫助也可將抗體，肽，糖肽，糖脂以及外源凝集素?fù)胶偷轿⑶蝮w的表面內(nèi)。當(dāng)類脂物質(zhì)用于制備微球體時(shí)，例如形成脂質(zhì)體，各種類脂均可在微球體的建造中應(yīng)用。可在脂質(zhì)體制備中應(yīng)用的物質(zhì)包括任何本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員已知的適合脂質(zhì)體制備的物質(zhì)或它們的組合。所用的類脂可以是天然的或合成的。選擇特定的類脂以便優(yōu)選適合血清最好穩(wěn)定性的理想性質(zhì)如短血漿半衰期與長血漿半衰期的比值。充氣脂質(zhì)體中的類脂可以是單層雙層型或多層雙層型，優(yōu)選多層型。用于形成脂質(zhì)體微球體的類脂包括但不局限于類脂如脂肪酸，血溶類脂類(lysolipids)，具有飽和不飽和類脂的磷脂酰膽堿，它包括二油酰磷脂酰膽堿；二肉豆蔻酰磷脂酰膽堿；二(十五烷酰)磷脂酰膽堿；二月桂酰磷脂酰膽堿；二棕櫚酰磷脂酰膽堿；二硬脂酰磷脂酰膽堿；磷脂酰乙醇胺類如二油酰磷脂酰乙醇胺；磷脂酰絲氨酸；磷脂酰甘油；磷脂酰肌醇，神經(jīng)鞘脂類如神經(jīng)鞘磷脂；糖脂如神經(jīng)節(jié)苷脂GM1和GM2；糖脂；硫苷脂；糖神經(jīng)鞘脂類；磷脂酸；棕櫚酸；硬脂酸；花生四烯酸；油酸；載有聚合物的類脂，所述聚合物如聚乙二醇，幾丁質(zhì)，透明質(zhì)酸或聚乙烯吡咯烷酮；載有磺化的單—，二—，寡—或聚糖的類脂；膽甾醇，膽甾醇硫酸酯以及膽甾醇半琥珀酸酯；維生素E半琥珀酸酯，含有通過醚和酯連結(jié)的脂肪酸的類脂，聚合類脂，二乙酰基磷酸酯，硬脂酰胺，心磷脂，含有鏈長為6—8個(gè)碳原子的短鏈脂肪酸的磷脂，具有不對(duì)稱?；湹暮铣闪字?如一條為6個(gè)碳原子?；湺硪粭l為12碳原子酰基鏈的合成磷脂)，6—(5—膽甾烯—3β—基氧基)—1—硫代—β—D—吡喃半乳糖苷，二半糖二甘油酯，6—(5—膽甾烯—3β—基氧基)己基—6—氨基—6—脫氧—1—硫代—β—D—吡喃半乳糖苷，6—(5—膽甾烯—3β—基氧基)己基—6—氨基—6—脫氧—1—硫代—α—D—吡喃甘露糖苷，12—(((7′—二乙氨基香豆素—3—基)羰基)甲氨基)—十八烷酸；N—[12—(((7′—二乙基氨基香豆素—3—基)羰基)甲氨基)十八烷?；鵠—2—氨基棕櫚酸；4′—三甲銨基丁酸膽甾烯酯；N—琥珀酰二油酰磷脂酰乙醇胺；1，2—二油?！猻n—甘油；1，2—二棕櫚?！猻n—3—琥珀酰甘油；1，3—二棕櫚?！?—琥珀酰甘油；1—十六烷基—2—棕櫚酰甘油磷酰乙醇胺以及棕櫚酰高半胱氨酸，和/或它們的結(jié)合。如果需要，可使用各種陽離子脂質(zhì)如DOTMA，N—[1—(2，3—二油酰氧基)丙基]—N，N，N—三甲基氯化銨；DOTAP，1，2—二油酰氧基—3—(三甲銨基)丙烷；以及DOTB，1，2—二油?；?—(4′—三甲銨基)丁?；猻n—甘油。通常脂質(zhì)體中陽離子類脂與非陽離子類脂的摩爾比例如可以是1∶1000，1∶100，優(yōu)選在2∶1至1∶10之間，較優(yōu)選在1∶1至1∶2.5的范圍內(nèi)且最優(yōu)選1∶1(陽離子摩爾量與非陽離子摩爾量的比率，如DPPC)。當(dāng)陽離子類脂用于建造微球體時(shí)，各種各樣的類脂可以包含非陽離子類脂。這種非陽離子類脂優(yōu)選二棕櫚酰磷脂酰膽堿，二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺，或二油酰磷脂酰乙醇胺。代替上述陽離子類脂，載有陽離子聚合物如多熔素或聚精氨酸的類脂也可被用于構(gòu)成微球體并能提供負(fù)電荷治療劑如遺傳物質(zhì)與微球體表面的結(jié)合。其它在本發(fā)明精神之內(nèi)的且對(duì)本領(lǐng)域?qū)I(yè)人員是顯而易見的有用類脂或其組合物也包括本發(fā)明范圍之內(nèi)。例如，載有糖類的類脂也可用于體內(nèi)靶定位，如美國專利4,310,505所述，該專利的內(nèi)容本身可并入本申請(qǐng)中作為參考。最優(yōu)選的類脂類為磷脂類，其中優(yōu)選DPPC和DSPC，最優(yōu)選DPPC?？捎糜诋a(chǎn)生充氣微球體的飽和和不飽和脂肪酸包括但不限于具有12碳原子到22個(gè)碳原子之間的直鏈或支鏈形式分子。可使用的飽和脂肪酸實(shí)例包括但不限于月桂酸，肉豆蔻酸，棕櫚酸和硬脂酸?？墒褂玫牟伙柡椭舅岬膶?shí)例包括但不限于月桂烯酸，抹香鯨酸，肉豆蔻腦酸，棕櫚油酸，巖芹酸和油酸?？墒褂玫闹ф溨舅岬膶?shí)例包括但不限于異月桂酸，異肉豆蔻酸，異棕櫚酸以及異硬脂酸和類異戊二烯。類脂或充氣類脂體的溶液可通過例如加入各種粘度調(diào)節(jié)劑穩(wěn)定化，所述粘度調(diào)節(jié)劑包括但不限于糖類及其磷酸化和磺化的衍生物；聚醚類，優(yōu)選分子量為400至800的聚醚；二—和三羥基烷烴及其聚合物，優(yōu)選分子量為800至8000的聚合物。乳化劑和/或加溶劑也可與類脂或類脂體一同使用。這些試劑包括但不限于阿拉伯膠，膽甾醇，二乙醇胺，單硬脂酸甘油酯，羊毛脂醇，卵磷脂，單—和二—甘油酯，單乙醇胺，油酸，油醇，poloxamer，硬脂酸50聚氧乙烯基酯，蓖麻油36聚烴氧基酯，聚烴氧基10油基醚，聚烴氧基20鯨蠟硬脂酰醚，硬脂酸40聚烴氧基酯，聚山梨酸酯20，聚山梨酸酯40，聚山梨酸酯60，聚山梨酸酯80，丙二醇二乙酸酯，丙二醇一硬脂酸酯，十二烷基硫酸鈉，硬脂酸鈉，脫水山梨糖醇一月桂酸酯，脫水山梨糖醇一油酸酯，脫水山梨糖醇一棕櫚酸酯，脫水山梨糖醇一硬脂酸酯，硬脂酸，三乙醇胺，以及乳化蠟?？梢耘c類脂或脂質(zhì)體溶液一同使用的懸浮劑和/或增粘劑包括但不限于阿拉伯膠，瓊脂，藻酸，一硬脂酸鋁，膨潤土，糖糊，carbomer934P，羧甲基纖維素，鈣和鈉及鈉12，角叉膠(carrageenan)，纖維素，葡聚糖，明膠，瓜耳膠，羥乙基纖維素，羥丙基甲基纖維素，硅酸鋁鎂，甲基纖維素，果膠，聚環(huán)氧乙烷，聚乙烯醇，聚烯吡酮，丙二醇藻酸酯，二氧化硅，藻酸鈉，黃蓍膠，以及黃原膠。各種治療劑的任何一種均可密封在微球體內(nèi)。在文中所用的“治療劑”是指對(duì)病人具有有益作用的藥劑。本文中所用術(shù)語“治療劑”與術(shù)語“藥物”同義。適宜的治療劑包括但不限于抗腫瘤藥，如鉑化合物(如螺鉑，順氯氨鉑，以及carboplatin)，氨甲蝶呤，阿霉素，絲裂雷素，柄型菌素，博來霉素，阿糖胞苷，阿糖腺苷，巰基多溶素，長春新堿，馬利蘭，苯丁酸氮芥，苯丙氨酸氮芥(如PAM，L—PAM或左旋苯丙氨酸氮芥)，巰嘌呤，鄰氯苯對(duì)氯苯二氯乙烷，鹽酸甲芐肼更生霉素(放線菌素D)，鹽酸柔霉素，鹽酸阿霉素，紫杉酚，絲裂霉素，光輝霉素，氨基導(dǎo)眠能，雌二醇氮芥磷酸酯鈉，氟硝丁酰胺，leuprolideacetate，甲地孕酮，枸櫞酸三苯氧胺，睪內(nèi)酯，trilostane，胺苯吖啶(m—AMSA)，左旋天冬酰胺酶，Erwina左旋天冬酰胺酶，鬼臼乙叉甙(VP—16)，α—2a干擾素，鬼臼噻吩甙(VM—26)，硫酸長春堿(VLB)，硫酸長春新堿，博來霉素，硫酸博來霉素，甲氨蝶呤，阿霉素以及阿糖苷類(arabinosyl)；血制品如胃腸外鐵劑，氯化血紅素，血卟啉及其衍生物；生物應(yīng)簽調(diào)節(jié)劑如胞壁酰二肽，胞壁酰三肽，微生物細(xì)胞壁組分，淋巴細(xì)胞活素(如細(xì)菌內(nèi)毒素象脂多糖，巨噬細(xì)胞活化因子)，細(xì)菌的亞單位(如分子桿菌，棒狀桿菌)，合成二肽N—乙?；邗；狶—丙氨?！狣—異谷氨酰胺；殺真菌劑如酮康唑，制霉菌素，灰黃霉素，氟胞嘧啶(5—fc)，雙氯苯咪唑，兩性霉素B，蓖麻毒蛋白，以及β—內(nèi)酰胺抗生素(如Sulfazecin)；激素如生長激素，促黑激素，雌二醇，二丙酸氯地米松，倍他米松，醋酸倍他米松以及倍他米松磷酸醋鈉，維他粘松磷酸二鈉(Vetamethasonedisodiumphosphate)，維他米松磷酸鈉，醋酸可的松，地塞米松，醋酸地塞米松，地塞米松磷酸鈉，9—去氟膚清松，氫化可的松，醋酸氫化可的松，氫化可的松環(huán)戊丙酸酯，氫可松磷酯鈉，琥鈉氫可松，甲強(qiáng)龍，酯酸甲強(qiáng)龍，琥鈉甲強(qiáng)龍，醋酸，對(duì)氟米松，強(qiáng)的松龍，醋酸強(qiáng)的松龍，強(qiáng)的松龍磷酸鈉，強(qiáng)的松龍叔丁乙酯，強(qiáng)的松，去炎松，丙炎松，雙醋去炎松，已酸丙炎松以及醋酸氟氫可的松；維生素如維生素B12neinoicacid，視黃酸類極衍生物如棕櫚酸維生素A，以及α—生育酚；肽類如二氧化錳歧化酶；酶如堿性磷酸酶；抗變應(yīng)性藥物如amelexanox；抗凝血?jiǎng)┤绫奖愣顾睾透嗡?；促進(jìn)循環(huán)的藥物如萘心安；代謝增效劑如谷胱甘肽；抗結(jié)核藥如對(duì)氨水楊酸，異煙肼，硫酸卷曲霉素環(huán)絲氨酸，鹽酸乙胺丁醇乙硫異煙胺，吡嗪酰胺，利福平和硫酸鏈霉素；抗病毒藥如無環(huán)鳥苷，amantadineazidothymidine(AZT或zidovudine)，三唑核苷和阿糖腺苷一水合物(阿糖腺苷，ara—A)；抗心絞痛藥如硫氮草酮，利心平，異博定，四硝赤醇，硝異梨醇，硝酸甘油(三硝酸甘油酯)以及硝酸季戊四醇酯；抗凝血?jiǎng)┤绫奖愣顾兀嗡?，抗菌素如氨苯砜，氯霉素，新霉素，頭孢氯，頭孢羥氨芐，頭孢氨芐，頭孢環(huán)己烯紅霉素，氯潔霉素，潔霉素，羥氨芐青霉素，氨芐青霉素，氨芐青霉素碳酯，羧芐青霉素，雙氯青霉素，環(huán)青霉素，picloxalcillin，海池西林，甲氧苯青霉素，新青霉素III，苯唑青霉素，青霉素G，青霉素V，羧噻吩青霉素利福平和四環(huán)素；消炎藥如二氟苯水楊酸，布洛芬，消炎痛，撲濕痛，萘普生，羥基保泰松，炎痛喜康，蘇靈大，甲苯酰吡酸，阿斯匹靈和水楊酸酯；抗原生動(dòng)物劑如氯喹，羥氯喹，滅滴靈，奎寧，以及銻酸葡胺；抗風(fēng)濕藥如青霉胺；麻醉藥如復(fù)方樟腦酊；鴉片制劑如可待因，海洛因，非那酮，嗎啡和鴉片；強(qiáng)心苷如去乙酰毛花甙C，洋地黃毒甙，地高辛，洋地黃甙和洋地黃；神經(jīng)肌肉阻斷劑如a-tracuriummesylate，三碘季銨酚，溴化己芴銨，碘甲筒箭毒，巴夫龍，氯化琥珀膽堿，氯化筒箭毒堿和vecuroniumbro-mide；鎮(zhèn)靜藥(安眠藥)如異戊巴比妥，異戊巴比妥鈉，烯丙那里丙巴比妥，仲丁巴比妥鈉，水合氯醛，乙氯戊烯炔醇，瓦爾米，鹽酸氟胺安定，導(dǎo)眠能，鹽酸甲氧異丁嗪，甲乙哌啶酮，鹽酸咪唑二氮草，三聚乙醛，戊巴比妥，戊巴比妥鈉，苯巴比妥鈉，司可巴比妥鈉，另丁烯丙巴比妥，羥基安定和三唑苯二氮草；局部麻醉藥如鹽酸布比卡因，鹽酸氯普魯卡因，鹽酸衣鐵卡因，鹽酸利多卡因，鹽酸甲派可因，鹽酸普魯卡因和鹽酸丁卡因；全身麻醉劑如達(dá)哌啶醇，甲芐咪酯，含有達(dá)哌啶醇的棕檬酸芬太尼，鹽酸氯胺酮，甲己炔巴比妥鈉和硫噴妥鈉；以及放射性顆粒或離子如鍶，碘化錸和釔。在一些優(yōu)選方案中，治療劑為單克隆抗體，如能與黑瘤抗體結(jié)合的單克隆抗體。其它優(yōu)選的治療劑包括遺傳物質(zhì)如核酸，RNA和DNA，它們或是天然的或者是合成的，包括重組RNA和DNA以及反義RNA和DNA?？墒褂玫倪z傳物質(zhì)的類型包括如載在表達(dá)載體如質(zhì)粒，噬菌體質(zhì)粒嵌合體，粘粒，酵母人工染色體(YACs)以及缺損病毒或輔助病毒內(nèi)的基因，抗原核酸，單鏈和雙股RNA和DNA及它們的類似物，如硫代磷酸酯和二硫代磷酸寡脫氧核苷酸。另外，遺傳物質(zhì)可以與蛋白質(zhì)或其它聚合物結(jié)合。使用本發(fā)明微球體時(shí)可施用的遺傳治療劑的實(shí)例包括編碼有至少部分HLA基因的DNA，編碼有至少部分營養(yǎng)障礙的DNA，編碼有至少部分IL—2的DNA，編碼有至少部分TNF的DNA，能結(jié)合編碼有至少Ras的DNA的反義寡核苷酸。編碼有某些蛋白質(zhì)的DNA的可用于治療多種不同類型疾病。例如腺苷脫氨酶被用于治療ADA缺損；腫瘤壞死因子和/或白介素—2被用于治療肝病；胸苷激酶被用于治療卵巢癌，腦瘤，或HIV感染；HLA—B7被用于治療惡性黑瘤；白介素—2可被用于治療成神經(jīng)細(xì)胞瘤，惡性黑瘤，或腎癌；白介素—4可被用于治療癌癥；HIVenv被用于治療肺癌；以及VIII因子被用于治療血友病B。例如參見Science258，744…746。如果需要，使用微球體可施用多種治療劑。例如，單一微球體可包含有多于一種治療劑或者含有不同治療劑的微球體可以一同給用。例如能與黑瘤抗原結(jié)合的單克隆抗體和編碼有至少部分IL—2的低聚核苷酸可以同時(shí)給用。本申請(qǐng)中所用的術(shù)語“至少部分”是指整個(gè)基因不必用低聚核苷酸表示，只要部分所表示的基因能提供有效的基因表達(dá)阻斷即可。同樣地，前藥也可包裹密封在微球體內(nèi)，并且它們包括在本申請(qǐng)中所用的術(shù)語“治療劑”的范圍內(nèi)。所述前藥為本專業(yè)已知的并包括非活性藥物前體，這些非活性藥物前體當(dāng)在氧氣或其它氣體存在下受到高溫，代謝酶，氣蝕和/或加壓作用時(shí)或者當(dāng)從微球體內(nèi)釋出時(shí)將形成活性藥物。這類前藥在本發(fā)明的方法中通過向含有前藥的微球體施加超聲波作用完成氣蝕，加熱，加壓，和/或從微球體中釋出的步驟而被活化。合適的前藥對(duì)本專業(yè)人員而言是顯而易見的，例如見Sinkula等人的J.Pharm.Sci.，1975，64，181—210中的描述，該文獻(xiàn)本身可列入本文內(nèi)作為參考。前藥、例如，可包括活性藥物的非活性形式，其中在藥物前體上存在使藥物為非活性和/或賦予其溶解性或一些其它性質(zhì)的化學(xué)基團(tuán)。在此形式中，藥物前體通常是非活性的，但一旦化學(xué)基團(tuán)通過加熱，氣蝕，加壓，和/或被周圍環(huán)境作用等從藥物前體裂解，就產(chǎn)生活性藥物。這樣的藥物前體在本領(lǐng)域中被充分地描述過，并包括多種通過化學(xué)鍵連接于化學(xué)基團(tuán)的藥物如短，中或長鏈脂肪族碳酸酯類，有機(jī)磷酸，焦磷酸，硫酸的半酯，酰胺類，氨基酸，偶氮鍵，氨基甲酸酯，磷酰胺，葡糖苷酸酯，N—乙?；咸前焙挺隆咸擒?。藥物與母體分子和可逆變體或鍵的例子如下鈴蘭毒甙與縮酮，妥因與烷基酯，氨甲酸氯酚甘油醚酯與甘油或丙氨酸酯，撲熱息痛與咖啡因復(fù)合物，乙酰水楊酸與THAM鹽，乙酰水楊酸與乙酰氨基苯基酯，烯丙基嗎啡酮與硫酸酯，15—甲基前列腺素F2a與甲基酯，普魯卡因與聚乙二醇，紅霉素與烷基酯，氯林可霉素與烷基酯或磷酸酯，四環(huán)素與甜菜堿鹽，7—酰氨基頭孢菌素與環(huán)—取代的酰氧芐基酯，諾龍與苯基丙酸癸酸酯，雌二醇與烯醇醚乙縮醛，甲基強(qiáng)的松龍與乙酸乙酯，睪酮與n—乙?；被咸擒掌咸擒账狨?三甲基甲硅烷基)醚，氫化可的松或強(qiáng)的龍松或地塞米松與21磷酸酯。藥物前體也可設(shè)計(jì)為可逆藥物并用作改性劑以促進(jìn)藥物傳送到特定部位組織。影響傳送到特定部位組織并促進(jìn)治療效果的母體分子與可逆變體或鍵的例子包括異氰酸酯與鹵代烷基亞硝基脲，睪酮與丙酸酯，甲氨蝶呤(3，5′—二氯甲氨蝶呤)與二烷基酯，胞嘧啶阿糖苷與5′—?；?，氮芥(2，2′—二氯—N—甲基二乙基胺)，氮芥與氨基甲基四環(huán)素，氮芥與膽甾醇或雌二醇或去氫表雄酮酯和氮芥與偶氮苯。如本領(lǐng)域?qū)I(yè)技術(shù)人員承認(rèn)的，修飾給定藥物的特定化學(xué)基團(tuán)可被選擇以影響藥物部分進(jìn)入膜內(nèi)或微球的內(nèi)部空間。選作將化學(xué)基團(tuán)連到藥物上的化學(xué)鍵可選擇具有所需代謝速度的鍵，例如，在酯鍵的情況下，從充氣微球中釋放之后，在血清酯酶存在下水解。另外，特定的化學(xué)基團(tuán)可選擇影響用于實(shí)施微球發(fā)明的充氣藥物的藥物生物分布的基團(tuán)，例如，用于卵巢腺癌的N，N—二(2—氯乙基)—二氨基磷酸與環(huán)磷酰胺。另外，用于充氣微球中的藥物前體可被設(shè)計(jì)成含有可逆衍生物，它可用作活性持續(xù)的改進(jìn)劑以提供，延長或儲(chǔ)存作用效果。例如，煙酸可用葡聚糖和羧甲基葡聚糖酯修飾，鏈霉素用藻酸鹽，二氫鏈霉素用雙羥萘酸鹽，阿糖胞苷(ara—C)用5′—金剛烷酸酯，阿糖腺苷(ara—A)用5—棕櫚酸酯和5′—苯甲酸酯，兩性霉素B用甲基酯，睪酮用17—β—烷基酯，雌二醇用甲酸酯，前列腺素用2—(4—咪唑基)乙胺鹽，多巴胺用氨基酸酰胺，氯霉素用一和二(三甲基甲硅烷基)醚，和環(huán)氯胍用雙羥萘酸鹽。在此形式中，長期作用的藥物的倉庫或貯存器在體內(nèi)從帶有微球的充氣藥物前體釋放出來。另外，一般熱不穩(wěn)定的化合物可被用于產(chǎn)生毒性自由基。帶有在高溫分解的偶氮鍵，過氧和二硫鍵的化合物是優(yōu)選的。對(duì)于此形式的藥物前體，含偶氮，過氧，二硫鍵的化合物通過氣蝕和/或由高能聲波相互作用產(chǎn)生的加熱而活化，充氣的微球從這些由此被截留的藥物前體產(chǎn)生自由基串。許多藥物或化學(xué)品可組成這些藥物前體，如偶氮化合物，這類化合物的一般結(jié)構(gòu)是R—N＝N—R，其中R是烷鏈，其中兩個(gè)氮原子間的雙鍵可以反應(yīng)在體內(nèi)產(chǎn)生游離基產(chǎn)品。可被用于產(chǎn)生游離基產(chǎn)物的例子性藥物或化合物包括含偶氮的化合物如偶氮苯，2，2′—偶氮二異丁腈，偶氮二甲酰胺，石蕊精，氮霉素，氯唑噻磺胺，偶氮磺酰胺，氧化偶氮苯，aztreqnam，蘇丹III，偶氮磺胺，偶氮磺胺和柳氮磺胺吡啶，含二硫鍵的化合物如雙苯硫酮，硫胺二硫化物，硫藤黃菌素，二硫四甲秋蘭姆，含過氧的化合物如過氧化氫和苯甲?；^氧化物，2，2′—偶氮二異丁腈，2，2′—偶氮二(2—氨基丙烷)二鹽酸鹽，和2，2′—偶氮二(2，4—二甲基戊腈)。用氧氣填充的充氣微球用氣蝕將產(chǎn)生充足的自由基。而且，過渡系列的金屬離子，尤其是錳，鐵和銅可增加從氧形成反應(yīng)活性氧中間體的速度。通過將金屬離子包裹在微球內(nèi)，體內(nèi)自由基的形成可被增加。這些金屬離子可以游離的鹽，配合物，例如，與EDTA、DTPA、DOTA或去鐵胺的配合物，或以金屬離子的配合物連接到微球體上。另外，衍生的金屬離子的配合物可連接到類脂的主基團(tuán)上，或例如親脂的離子配合物可被摻入脂質(zhì)雙層中。當(dāng)暴露于熱刺激時(shí)，例如氣蝕，這些金屬離子將增加反應(yīng)活性氧中間體的形成速度。進(jìn)一步地，如甲硝噠唑和醚醇硝唑之類的放射致敏劑可被摻入充氣的微球內(nèi)由熱刺激產(chǎn)生自由基。通過藥物前體使用的例子，酰化的化學(xué)基團(tuán)可以通過在體內(nèi)由血清中酶作用容易斷裂的酯鍵連接到藥物上。?；乃幬锴绑w被摻入本發(fā)明的充氣微球內(nèi)。當(dāng)充氣微球被超聲波打擊時(shí)，被微球包裹的藥物前體將暴露給血清。然后酯鍵被血清中的酯酶斷裂，然后產(chǎn)生藥物。類似地，超聲波不僅被用于破裂充氣微球，而且也引起熱效應(yīng)，它增加化學(xué)斷裂速度和活性藥物從藥物前體中的釋放。微球也可被設(shè)計(jì)成藥物在微球的內(nèi)面和外面對(duì)稱或不對(duì)稱分布。治療劑的特定化學(xué)結(jié)構(gòu)可被選擇或修飾以達(dá)到所需的溶解性，這樣，治療劑既可包裹在充氣微球的內(nèi)部空間，附屬于微球，也可被網(wǎng)捕于微球內(nèi)。表面連接的治療劑可帶有一個(gè)或多個(gè)?；?，這樣的話，當(dāng)微球被打擊或加熱或通過氣蝕破裂時(shí)，?；闹委焺㈦x開表面和/或治療劑將從?；溁瘜W(xué)基團(tuán)斷裂。類似地，其它治療劑可與在結(jié)構(gòu)上為芳香性或甾醇的疏水基團(tuán)配制，摻入微球表面。除類脂外，其它可用于形成微球的物質(zhì)包括，例如，清蛋白之類的蛋白質(zhì)，聚谷氨酸之類的合成肽，半乳糖，葡糖和其它己糖的直鏈和支鏈低聚物和聚合物和從磷?；突酋；奈焯呛图禾呛吞谴佳苌木酆衔铩Ｌ妓衔锞酆衔锶缭逅幔暇厶?，淀粉和HETA淀粉也可被應(yīng)用。其它天然聚合物，如透明質(zhì)酸，可被應(yīng)用。合成聚合物如聚乙二醇，聚乙烯基吡咯烷酮，聚交酯，聚乙烯亞胺(直鏈和支鏈)，聚紫羅烯或聚亞氨基羧酸也可被應(yīng)用。當(dāng)被微球包裹的治療劑帶負(fù)電時(shí)，諸如基因物質(zhì)，陽離子型類脂類或帶陽離子型的全氟烷基化基可被用于連接帶負(fù)電的治療劑。例如，陽離子類兩親性全氟烷基化聯(lián)吡啶，如GarelliandVierling，Biochim.BiophysActa，1992，1127，41—48中所述，該文全文在此引作參考，可被使用。一般地，負(fù)電性治療劑如基因物質(zhì)可連接到混合膠束成分，例如，非陽離子型類脂與陽離子型類脂，例如，DOTMA或十八烷基胺或取代的烷基如三甲基十八烷基胺的親水性首基上。有用混合膠束化合物包括但不限于溴化(月桂基三甲基)銨(十二烷基)，溴化(鯨蠟基三甲基)銨(十六烷基)，溴化(肉豆蔻基三甲基)銨(十四烷基)，氯化(烷基二甲基芐基)銨(烷基＝C12，C14，C16，溴化/氯化(芐基二甲基十二烷基)銨，溴化/氯化(芐基二甲基十六烷基)銨，溴化/氯化(芐基二甲基十四烷基)銨，溴化/氯化(鯨蠟基二甲基乙基)銨，或溴化/氯化鯨蠟基吡啶鎓。含藥物脂質(zhì)體的大小如果需要可通過多種操作包括壓出，過濾，聲化，均化，應(yīng)用導(dǎo)入到液體不混溶鞘中的液體芯的層狀流，壓出經(jīng)過固定大小的孔，和類似方法而調(diào)節(jié)，以調(diào)節(jié)產(chǎn)生的脂質(zhì)體的生物分布和間隙。前述技術(shù)及其它，在下述文獻(xiàn)中討論，例如U.S.PatentNo.4,728,578；U.K.PatentApplicationGB2193095A；U.S.PatentNo.4,728,575；U.S.PatentNo.4,737,323；InternationalAp-plicationPCT/US85/01161；Mayeretal.，BiochimicaetBiophysicaActa，Vol.858，pp.161—168(1986)；Hopeetal.，BiochimicaetBiophysicaActa，Vol.812，pp.55—65(1985)；U.S.PatentNo.4,533,254；Mayhewetal.，MethodsinEnzymology，Vol.149，pp.64—77(1987)；Mayhewetal.，biochimicaetBiophysicaActa，vol755，pp.169—74(1984)；Chengetal，InvestigativeRadiolo-gy，Vol.22，pp.47—55(1987)；PCT/US89/05040，U.S.PatentNo.4,162,282；U.S.PatentNo.4,310,505；U.S.PatentVol.I，pp.29—31，51—67and79—108(CRCPressInc.，BocaRaton，F(xiàn)L1984)。上述專利，公開物和專利申請(qǐng)的全文在此引作參考。本發(fā)明微球的大小取決于其用途。由于微球大小影響生物分布，不同大小的微球可被選用于不同目的。對(duì)于較小微球，共振頻率超聲波一般比較大微球的高。例如，對(duì)血管內(nèi)應(yīng)用，優(yōu)選的大小范圍是平均外徑在約30納米至約10微米之間。優(yōu)選的平均外徑為約5微米。更特別地，對(duì)血管內(nèi)應(yīng)用，微球大小優(yōu)選地外徑約10μm或更小，優(yōu)選地小于約7μm，更優(yōu)選地于約5μm。優(yōu)選地，微球外徑不小于約30納米。對(duì)于將治療劑輸送到肝類器官和使正常組織變異為腫瘤，較小的微球，平均外徑在約30納米和約100納米之間，是優(yōu)選的。對(duì)于腎或肺類組織的栓塞，微球平均外徑優(yōu)選地小于200微米。對(duì)于鼻內(nèi)，直腸內(nèi)或局部給藥，微球平均外徑優(yōu)選地小于約100微米。大微球，例如，大小為1至10微米之間，一般將被限制在血管空間內(nèi)直到它們被管內(nèi)襯吞噬細(xì)胞元素，如巨噬細(xì)胞和Kuppfer細(xì)胞內(nèi)襯毛細(xì)竇狀隙，所清除。為了通過遠(yuǎn)離竇狀隙的細(xì)胞，較小微球，例如，直徑小于1微米，例如大小小于約300納米的，可被運(yùn)用。在優(yōu)選的方案中，微球獨(dú)立地給藥，而不是，例如，包埋于基質(zhì)中。一般地，本發(fā)明的治療劑傳遞系統(tǒng)以如在水或食鹽溶液(例如，磷酸緩沖鹽水)中的含水懸浮液形式給藥。優(yōu)選地，水是經(jīng)滅菌的。而且，優(yōu)選地，鹽水溶液是等滲鹽水溶液，盡管，如果需要，鹽水溶液可以是低滲的(例如，約0.3至約0.5％NaCl)。如果需要，溶液也可是緩沖的，以提供pH范圍約5至7.4。另外，葡萄糖可優(yōu)選地包含于介質(zhì)中。其它可用于充氣脂質(zhì)體給藥的溶液包括，但不限于，杏仁油，玉米油，棉籽油，油酸乙酯，肉豆蔻酸異丙酯，棕櫚酸異丙酯，礦物油，肉豆蔻醇，辛基—十二烷醇，橄欖油，花生油，桃仁油，芝麻油，黃豆油，和角鯊烯。對(duì)于使用前的儲(chǔ)存，本發(fā)明的微球可懸浮于水溶液，如鹽水溶液(例如，磷酸緩沖的鹽水溶液)，或簡單的水，并且優(yōu)選地在約2℃至10℃之間的溫度下，優(yōu)選地約4℃。優(yōu)選地，水是經(jīng)滅菌的。最優(yōu)選地，微球儲(chǔ)存在等滲鹽水溶液中，盡管，如果需要，鹽水認(rèn)可以是低滲鹽水溶液(例如，約0.3至0.5％NaCl)。如果需要，溶液也可是緩沖的，提供pH范圍約pH5至約pH7.4。合適的用于儲(chǔ)存介質(zhì)中的緩沖液包括，但不限于，乙酸鹽，檸檬酸鹽，磷酸鹽和碳酸氫鹽緩沖液。抑菌劑也可包括在微球內(nèi)以防止儲(chǔ)存時(shí)細(xì)菌降解。合適的抑菌劑包括但不限于殺藻銨，氯芐乙銨，苯甲酸，芐醇，尼泊金丁酯，氯化鯨蠟基吡啶鎓，氯丁醇，氯甲苯酚，尼泊金甲酯，苯酚，苯甲酸鉀，山梨酸鉀，苯甲酸鈉和山梨酸。一種或多種抗氧化劑也可包括在充氣脂質(zhì)體中以防止類脂氧化。合適的抗氧化劑包括生育酚，抗壞血酸和抗壞血酸基棕櫚酸酯。治療化合物被控制地輸送到患者的病區(qū)的方法包括如下步驟(I)對(duì)患者給藥含治療化合物的充氣微球；(II)用超聲波監(jiān)測微球以測定微球在病區(qū)的存在；和(III)用超聲波破裂微球在病區(qū)釋放化合物。用本發(fā)明的充氣微球，超聲波能量與氣體相互作用，爆裂微球，并使治療劑諸如，例如，基因物質(zhì)被釋放并傳送到細(xì)胞中。當(dāng)超聲波能遭遇到組織或流體介質(zhì)內(nèi)的氣體分界面時(shí)，超聲波能向熱和動(dòng)能的局部轉(zhuǎn)化被大大加強(qiáng)。治療物質(zhì)因而從微球中釋放并使人驚奇地輸送到細(xì)胞內(nèi)。盡管不受任何特定的操作理論的束縛，我們相信在細(xì)胞位置產(chǎn)生的熱能和動(dòng)能促進(jìn)治療劑的細(xì)胞吸收。微球的給藥途徑將取決于其應(yīng)用。如本專業(yè)技術(shù)人員認(rèn)識(shí)到的，本發(fā)明治療劑傳遞系統(tǒng)的給藥以多種方式進(jìn)行，如血管內(nèi)，淋巴內(nèi)，腸胃外，皮下，肌內(nèi)，鼻內(nèi)，直腸內(nèi)，腹膜內(nèi)，間質(zhì)的，經(jīng)噴霧器進(jìn)入氣道，高壓的，口服，表皮，或腫瘤內(nèi)，用多種劑型給藥。一種優(yōu)選的給藥途徑是血管內(nèi)。對(duì)于血管內(nèi)應(yīng)用，治療劑傳遞系統(tǒng)一般被靜脈注射，但也可動(dòng)脈內(nèi)注射。本發(fā)明的微球也可問質(zhì)注射或注入任何體腔。用超聲波的本發(fā)明微球治療劑輸送最好對(duì)具有良好的透過超聲波能量的透聲窗口的組織完成。這是對(duì)身體中大部分組織的情況，如肌肉，心臟，肝和大部分其它生命結(jié)構(gòu)。在腦中，為了使超聲波能量通過骨，一個(gè)外科窗口將是必需的。給藥的有用劑量和給藥模式將取決于將要治療動(dòng)物的年齡，體重，和類型，以及特定的治療應(yīng)用。典型地，劑量以低水平開始，并增加直到達(dá)到所需的治療效果。對(duì)于體外應(yīng)用，如細(xì)胞培養(yǎng)應(yīng)用，充氣微球可被加到培養(yǎng)基內(nèi)的細(xì)胞中然后培育。然后可將超聲波能施加到含細(xì)胞和微球的培養(yǎng)介質(zhì)中。本發(fā)明可被用于治療劑被控制地輸送到患者的區(qū)域，其中患者使用本發(fā)明含微球的治療劑，微球用超聲波監(jiān)測以確定微球在區(qū)域的存在，然后用超聲波破裂微球在區(qū)域中釋放治療劑?；颊呖梢允侨魏晤愋偷膭?dòng)物，但優(yōu)選地是脊椎動(dòng)物，更優(yōu)選地是哺乳動(dòng)物，而最優(yōu)選地是人類?；颊叩膮^(qū)域，意指整個(gè)患者，或患者的特定區(qū)域或部分。例如，通過用本發(fā)明的方法，治療劑輸送可在患者的心臟，和患者的血管內(nèi)(即靜脈或動(dòng)脈系統(tǒng))。本發(fā)明也對(duì)輸送治療劑到患者的左心室，一個(gè)此前由治療劑輸送不易達(dá)到的區(qū)域。治療劑用本方法也可容易地輸送到患者的肝臟，脾臟和腎臟，以及其它部位。另外，本發(fā)明對(duì)于輸送治療劑到患者的肺部特別有用。本發(fā)明的充氣微球輕于，例如，普通液體填充脂質(zhì)體，后者一般沉淀于中心鄰近氣道而不是達(dá)到肺部的外周。因而可以相信本發(fā)明的充氣微球可改進(jìn)治療化合物輸送到肺部外周，包括氣管末端和肺泡。應(yīng)用于肺部時(shí)，充氣微球可通過例如噴霧進(jìn)行。在應(yīng)用如肺目標(biāo)，它由類脂內(nèi)襯，治療劑可由于充氣類脂微球與在襯里的靶組織的聚集而釋放。另外，充氣類脂微球在給藥后不需用超聲波就破裂。因此，在上述給藥類型中，超聲波不需用于釋放藥物。而且，本發(fā)明的充氣微球?qū)τ诳稍诤橘|(zhì)中降解或暴露于氧氣和/或大氣的治療劑特別有用。例如，用于不穩(wěn)定治療化合物時(shí)，微球可用惰性氣體如氮?dú)饣驓鍤馓畛洹Ａ硗?，充氣微球可用惰性氣體填充并用于包裹用于患者的部位正常地使治療劑暴露于大氣的治療劑，如皮膚的和眼用。充氣微球也對(duì)皮下輸送，如局部(patch)傳遞系統(tǒng)特別有用。破裂超聲波的使用將增加治療化合物的皮下輸送。進(jìn)一步地，機(jī)械結(jié)構(gòu)可被用于監(jiān)測和調(diào)節(jié)藥物輸送。例如，診斷超聲波可被用于監(jiān)視充氣微球的破裂并調(diào)節(jié)藥物的輸送和/或水聽器可被有于檢測充氣微球的爆裂聲并調(diào)節(jié)藥物輸送。微球的回波和在峰共振頻率的破裂可能性用超聲波允許通過在對(duì)病人給藥后監(jiān)測微球以測定在所需部位微球的存在將治療劑受控制地輸送到患者的部倍，并用超聲波破裂微球在部位釋放治療劑。優(yōu)選地，本發(fā)明的微球具有大于2dB的反射(性)，優(yōu)選地在約4dB至約20dB之間。在此范圍內(nèi)，本發(fā)明微球的最高反射性由更大的微球，更高的微球濃度，和/或當(dāng)更高的超聲波頻率被使用時(shí)顯現(xiàn)。優(yōu)選地，本發(fā)明的微球具有在約0.5MHz至約10MHz之間的峰共振頻率。當(dāng)然，本發(fā)明充氣微球的峰共振頻率將隨微球的直徑，且在某種程度上，微球的彈性或柔韌性而變化，較大的和更有彈性或柔韌性的球比較小的和較小彈性或柔韌性的微球具有較低的共振頻率。微球給藥后或另外到達(dá)部分后，含治療劑的本發(fā)明微球破裂通過給患者需要治療的部位施以某些頻率的超聲波而出人意料地容易實(shí)現(xiàn)。特別地，意外地發(fā)現(xiàn)當(dāng)用相當(dāng)于含充氣微球的治療劑的峰共振頻率的超聲時(shí)，微球?qū)⒈巡⑨尫牌涑煞帧７骞舱耦l率即可體內(nèi)也可體外測定，但優(yōu)選體內(nèi)，通過將微球暴露于超聲波，接收反射共振頻率信號(hào)并分析接收的信號(hào)譜以確定峰(用普通手段)。這樣測定的峰對(duì)應(yīng)于峰共振頻率(或有時(shí)稱之為二次諧波)。充氣微球當(dāng)暴露于更高強(qiáng)度(瓦特)和時(shí)間(時(shí)間)的非峰共振頻率的超聲波時(shí)也破裂。然而，這一更高能量會(huì)產(chǎn)生不想要的大量增加熱量。通過調(diào)節(jié)能量峰以匹配峰共振頻率，破裂的效率和治療劑釋放被改善，可感覺到的組織發(fā)熱一般不發(fā)生(一般升溫不超過約2℃)，需要更少的總能量。因此，峰共振頻率超聲波的應(yīng)用，在不需要時(shí)，是最優(yōu)選的。任何類型的診斷性超聲波成象儀都可用于本發(fā)明的實(shí)施，特殊類型或型號(hào)的儀器對(duì)本發(fā)明的方法不是關(guān)鍵。同樣合適的是設(shè)計(jì)用于給藥的超聲波高溫治療儀，如在USP4620546，4658828和4586512中所述的儀器，這些文獻(xiàn)在此全部引作參考。優(yōu)選地，儀器應(yīng)用共振頻(RF)譜分析器。變頻探針可用于外部或植入。超聲波以較低的強(qiáng)度和時(shí)間開始，優(yōu)選地以峰共振頻率，然后強(qiáng)度，時(shí)間，和/或共振頻率增加直至微球破裂。由于各種原理的應(yīng)用對(duì)于專業(yè)人員已經(jīng)顯而易見，一旦用本公開武裝，通過一般引導(dǎo)，對(duì)于平均外徑約1.5至約10微米的充氣微球，共振頻率一般在約1至約10MHz的范圍內(nèi)。通過調(diào)節(jié)焦點(diǎn)區(qū)至靶組織(例如腫瘤)的中心，由于它們?cè)谀繕?biāo)組織內(nèi)的積累，充氣微球在實(shí)際時(shí)間超聲波下成為可見的。用7.5MHz曲陣(Curvedarray)變頻器作為例子，將送到變頻器的動(dòng)力調(diào)至最大并將焦點(diǎn)區(qū)調(diào)至靶組織中，立體峰瞬時(shí)平均(SPTA)動(dòng)力在水中將為最大約5.31mW/cm2。這一動(dòng)力將導(dǎo)致治療劑從充氣微球內(nèi)部分釋放，但更大的釋放可用更高動(dòng)力完成。通過將變頻器切換到多普勒狀態(tài)，可以得到更高的動(dòng)力輸出，從相同的變頻器達(dá)2.5W/cm2。機(jī)器在多普勒狀態(tài)操作，動(dòng)力可輸送到靶組織內(nèi)的選定焦點(diǎn)區(qū)而使充氣微球釋放其治療劑。選擇變頻器匹配充氣微球的共振頻率將使這一治療劑釋放法更有效。對(duì)于較大直徑的充氣微球，例如平均外徑大于3微米，較低頻率的變頻器在完成治療劑釋放方面更有效。例如，3.5MHz的較低頻率變頻器(20mm曲陣型)可被選用于對(duì)應(yīng)于充氣微球的共振頻率。用此變頻器，101.6mW/cm2可被輸送到焦點(diǎn)，切換到多普勒狀態(tài)將輸出動(dòng)力(SPTA)增加至1.02W/cm2。為了用氣蝕現(xiàn)象釋放和/或活化充氣微球內(nèi)的藥物/藥物前體，較低頻率的能量可被使用，因?yàn)闅馕g在較低頻率更為有效。用以更高電壓(高達(dá)300V)驅(qū)動(dòng)的0.757MHz變頻器，充氣微球溶液的氣蝕將在約5.2atm的臨界值發(fā)生。表II示出了從常用儀器如PiconicsInc.(Tyngshoro，MA)的診斷超聲波傳送到組織的能量范圍，Portascan一般目的掃描儀，接收器脈沖器1966型號(hào)661Picker(Cleve-land，OH)Echoview&LScanner包括80CSystem或Medisonics(MountainView，CA)ModelD—9VersatoneBidirectionalDoppler。一般地，這些用脈沖重復(fù)的能量范圍可用于監(jiān)測充氣微球但不足以破裂本發(fā)明的充氣微球。表II由診斷儀產(chǎn)生的動(dòng)力和強(qiáng)度**從Carsonetal.，UltrasoundinMed.&Biol.19783，341—350，得到的值，該文在此引作參考。較高能量的超聲波如常用于治療超聲波儀的對(duì)于充氣微球的活化是優(yōu)選的。一般地，治療超聲波機(jī)根據(jù)要被超聲波加熱的組織面積用多達(dá)50％至100％負(fù)載環(huán)。具有較大量肌肉塊(即，背部，股部)和高度血管化的組織如心臟區(qū)域需要較大的負(fù)載環(huán)，例如，100％。在用于監(jiān)測充氣微球的位置的診斷超聲波中，一種或幾種聲波脈沖被使用而機(jī)器在脈沖間暫停以接收反射的聲波信號(hào)。在診斷超聲波中所用有限值的脈沖限制被輸送到被成象的組織的有效能量。在治療超聲波中，連續(xù)波超聲波被用于輸送更高能量。在使用本發(fā)明的微球時(shí)，聲能可以是脈沖的，但連續(xù)波超聲波是優(yōu)選的。如果用脈沖，聲波將優(yōu)選地以一次至少約8而優(yōu)選地至少約20脈沖的回聲列長度脈沖。固定頻率或調(diào)節(jié)頻率超聲波都可使用。固定頻率被定義為在全部時(shí)間聲波的頻率是常數(shù)。調(diào)節(jié)頻率是在全部時(shí)間內(nèi)波頻變化的，例如，從高到低(PRICH)或從低到高(CHIRP)。例如，具有聲波能10MHz起始頻率的脈沖PRICH掃至1MHz，增加動(dòng)力從1至5W。聚焦的，頻率調(diào)節(jié)的，高能超聲波將增加微球內(nèi)局部氣體膨脹并破裂以提供治療劑的局部輸送。所用聲波頻率可從約0.025至約100MHz變化，頻率范圍在約0.75和3MHz之間是優(yōu)選的，而頻率在約1至約2之間是最優(yōu)選的。常用約0.75至約1.5MHz的治療頻率可以使用。常用約3至7.5MHz的診斷頻率也可使用。對(duì)于很小的微球，例如，低于0.5微米直徑，更高的聲波頻率是優(yōu)選的，因?yàn)檫@些較小微球?qū)⒃谳^高的聲頻更有效地吸收聲能。當(dāng)用很高頻率如高于10MHz時(shí)，聲能將一般有限深度地穿透到流體和組織。外部應(yīng)用對(duì)皮膚和其它表面組織是優(yōu)選的，但是對(duì)于深層結(jié)構(gòu)，通過間質(zhì)探針或血管內(nèi)超聲波導(dǎo)管的聲能應(yīng)用是優(yōu)選的。在最優(yōu)選的方案中，本發(fā)明提供新穎的脂質(zhì)體藥物傳遞系統(tǒng)。一旦用本公開武裝，各種含本發(fā)明微球的充氣治療劑的制備方法對(duì)于本專業(yè)熟練技術(shù)人員會(huì)顯而易見。優(yōu)選的制備微球的方法在下面聯(lián)系優(yōu)選的脂質(zhì)體藥物傳遞系統(tǒng)討論。具體地，在優(yōu)選的方案中，制備含本發(fā)明的充氣脂質(zhì)體的靶定位藥物傳遞系統(tǒng)的方法包括在氣體存在下在低于類脂的凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度下振蕩含類脂的水溶液以形成充氣脂質(zhì)體，并加入治療化合物。在其它優(yōu)選方案中，制備含本發(fā)明充氣脂質(zhì)體的靶定位藥物傳遞系統(tǒng)的方法包括在氣體存在下在低于類脂由凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度的溫度下振蕩含類脂和治療化合物水溶液的步驟。在其它方案中，制備含充氣脂質(zhì)體的靶治療藥物傳遞系統(tǒng)的方法包括在氣體存在下振蕩含類脂和治療化合物的水溶液，和分離所得充氣脂質(zhì)體的步驟。由前述方法制備的脂質(zhì)體此處指由膠態(tài)振蕩氣體裝入法制備的并含有治療化合物的充氣脂質(zhì)體，或指含凝膠態(tài)振蕩氣體注入脂質(zhì)體的治療劑。因此，本發(fā)明優(yōu)選的方法是在氣體存在下振蕩含類脂和治療化合物的水溶液。振蕩，如此處所用的，被定義為搖動(dòng)水溶液以使氣體從當(dāng)?shù)刂車h(huán)境進(jìn)入水溶液的運(yùn)動(dòng)。任何類型的搖動(dòng)水溶液并導(dǎo)致氣體的引入的運(yùn)動(dòng)都可用作振蕩。振蕩必需有足夠力度在一段時(shí)間后形成泡沫。優(yōu)選地，振蕩是足夠力度使短時(shí)間，如30分鐘內(nèi)，優(yōu)選20分鐘，最優(yōu)選10分鐘內(nèi)形成泡沫。振蕩可以是旋動(dòng)(如渦旋)，從一側(cè)到另一側(cè)，或上下運(yùn)動(dòng)。而且，不同類型的運(yùn)動(dòng)可以結(jié)合。而且，振蕩可通過振蕩裝有含水類脂溶液的容器，或通過振蕩容器內(nèi)的水溶液而不搖動(dòng)容器本身而進(jìn)行。而且，振蕩可以手動(dòng)或機(jī)動(dòng)。可用的機(jī)械振蕩器包括，例如，振蕩臺(tái)如VWRScientific(Cerritos，CA)振蕩臺(tái)和機(jī)械涂料混合器，及其它已知機(jī)器。產(chǎn)生振蕩的其它手段包括在高速和高壓下氣體散發(fā)作用。也應(yīng)該懂得，優(yōu)選地，對(duì)于較大體積的水溶液，總力量應(yīng)相應(yīng)增加。劇烈振蕩被定義為至少每分鐘約60次振蕩運(yùn)動(dòng)，并是優(yōu)選的。劇烈振蕩的一個(gè)例子，至少每分鐘1000轉(zhuǎn)的渦旋，是更優(yōu)選的。每分鐘1800轉(zhuǎn)的渦旋是最優(yōu)選的。基于振蕩的充氣脂質(zhì)體形成可通過水溶液頂端泡沫的存在檢測。它與由于泡沫形成而水溶液體積的減小相聯(lián)系。優(yōu)選地，泡沫的最終體積為含水類脂溶液的最初體積的至少兩倍；更優(yōu)選地，泡沫的最終體積是水溶液最初體積的至少約三倍；再更優(yōu)選地，泡沫的最終體積是水溶液最初體積的至少約4倍；最優(yōu)選地，所有含水類脂溶液都轉(zhuǎn)化為泡沫。所需的振蕩時(shí)間可通過檢測泡沫的形成而確定。例如，在50ml離心管內(nèi)的10ml類脂溶液被渦旋約15—20分鐘或直到充氣脂質(zhì)體的粘度變得足夠稠，它在旋動(dòng)時(shí)不再附于側(cè)壁上。此時(shí)，泡沫使含充氣脂質(zhì)體的溶液升至30至35ml水平。需要形成優(yōu)選的泡沫水平的類脂濃度隨所用類脂的類型而變化，一旦用本公開武裝，本專業(yè)熟練的技術(shù)人員很容易確定它。例如，在優(yōu)選的方案中，根據(jù)本發(fā)明的方法用于形成充氣脂質(zhì)體的1，2—二棕櫚酰基—磷脂酰膽堿(DPPC)的濃度是約20mg/ml至約30mg/m1鹽水溶液。用于優(yōu)選方案中的二硬脂?；字Ｄ憠A(DSPC)的濃度是約5mg/ml至約10mg/ml鹽水溶液。具體地，濃度為20mg/ml至30mg/ml的DPPC，經(jīng)振蕩，產(chǎn)生總懸浮液而捕獲的氣體體積比單獨(dú)的懸浮液體積大四倍。濃度為10mg/ml的DSPC，經(jīng)振蕩，產(chǎn)生完全不合任何液體懸浮體積的總體積并含全部泡沫。一旦用本公開武裝，本專業(yè)熟練的技術(shù)人員將懂得，類脂類或脂質(zhì)體可先處理并隨后用于本發(fā)明的方法。例如，類脂可水合然后凍干，通過冷凍和解凍循環(huán)，或簡單水合。在優(yōu)選的方案中，形成充氣脂質(zhì)體之前，類脂被水合然后凍干，或水化，然后進(jìn)行冷凍和解凍循環(huán)然后凍干。在最優(yōu)選的方案中，類脂被水合并振蕩，接著至少一次液氮中冷凍和解凍循環(huán)，然后接著凍干。在最終形成充氣脂質(zhì)體之前這些處理的優(yōu)點(diǎn)包括類脂轉(zhuǎn)化為具有更大表面積的固體，因而經(jīng)水合更好地溶解隨后更高產(chǎn)率地產(chǎn)生充氣脂質(zhì)體。根據(jù)本發(fā)明優(yōu)選的方案，氣體的存在由當(dāng)?shù)刂車髿馓峁?。?dāng)?shù)刂車髿饪梢允敲荛]容器內(nèi)的大氣，或在非密封容器內(nèi)，可以是外部環(huán)境。另外，例如，氣體可被注入或其它方式加入類脂水溶液的容器內(nèi)或類脂水溶液本身內(nèi)以提供非空氣的氣體。不比空氣重的氣體可被加入密封的容器內(nèi)而比空氣重的氣體可被加入密封或非密封容器中。前述本發(fā)明的優(yōu)選方法優(yōu)選地在低于所用類脂凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度的溫度下進(jìn)行?！澳z態(tài)向液晶態(tài)相變溫度”意指脂類雙層將從凝膠態(tài)向液晶態(tài)轉(zhuǎn)化的溫度。參見，例如，Chapmanetal.，J.Biol.Chem.1974，249，2512—2521.各種類脂的凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度對(duì)于熟悉本專業(yè)的人員將是容易知道的，并且描述在，例如，Gregoriadis，ed.，LiposomeTechnology，Vol.I，1—18(CRCPress，1984)和DerekMarsh，CRCHandbookofLipidBilayers(CRCPress，BocaRaton，F(xiàn)L1990)，P。139中。也參見前面的表I。當(dāng)所用類脂的凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度高于室溫時(shí)，容器的溫度可被，例如，通過用致冷機(jī)冷卻裝有類脂溶液的容器而調(diào)節(jié)。一般地，充水脂質(zhì)體在高于類脂的凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度的溫度下常規(guī)形成，因?yàn)樗鼈兏犴g因而以液晶態(tài)用于生物體系中。參見，例如，SzokaandPapahadjopoulos，Proc.Natl.Acad.Sci.1978，75，4194—4198。相比之下，根據(jù)本發(fā)明方法的優(yōu)選方案制造的脂質(zhì)體是充氣的，它產(chǎn)生更大的柔韌性因?yàn)闅怏w更可壓縮并比水溶液更順從。因此，充氣脂質(zhì)體當(dāng)在低于類脂相變溫度形成時(shí)可被用于生物體系，盡管凝膠相更具剛性。優(yōu)選的用于用凝膠態(tài)振蕩氣體裝入法生產(chǎn)含治療劑的充氣脂質(zhì)體的設(shè)備示于附圖9中。類脂和水溶性介質(zhì)的混合物在氣體裝入工序中被劇烈攪動(dòng)，無論是分批還是連續(xù)加料，以產(chǎn)生充氣脂質(zhì)體。對(duì)于附圖9，干燥的類脂51從類脂供應(yīng)管50通過導(dǎo)管59以連續(xù)流或間歇團(tuán)被加到混合器66中。如果用分批工藝，混合器66可包含相對(duì)較小的容器如注射器，試管，瓶子或圓底燒瓶，或大容器。如果用連續(xù)加料工藝，混合器優(yōu)選地是大容器，如大桶。治療化合物可被加入，例如，在氣體裝入工序之前。對(duì)于附圖9，治療化合物從治療化合物供應(yīng)器40通過導(dǎo)管42加到混合器66中。另外，治療化合物可在氣體裝入工序之后加入，如脂質(zhì)體的外層用治療化合物包涂。除了類脂51和治療化合物41外，還需通過管道61往容器66中加入來自水溶性介質(zhì)供應(yīng)器52的水溶性介質(zhì)53，如鹽溶液。類脂51和水溶介質(zhì)53聯(lián)合形成水溶性類脂溶液74，另外在干性類脂51引入混合容器66之前可水合以使類脂被導(dǎo)入水溶液。在制備脂質(zhì)體方法的較優(yōu)選實(shí)施方案中，起先裝入的溶液74應(yīng)使該溶液僅占混合容器66容積的一部分。而且，在下續(xù)步驟中，應(yīng)控制水溶性類脂溶液74加入的速率以及除去所產(chǎn)生充氣脂質(zhì)體的速率以確保類脂溶液74的體積不超過混合容器66容積的預(yù)定百分比。通過向水溶性類脂溶液74中直接導(dǎo)入高速噴射的加壓氣體可進(jìn)行振蕩，另外，或人工地或通過機(jī)器以機(jī)械振蕩水溶液也可進(jìn)行振蕩。這種機(jī)械振蕩通過振蕩混合容器66或直接振蕩水溶液74而無需振蕩混合容器自身來起作用。如圖9所示，在較優(yōu)選的實(shí)施方案中，機(jī)械振蕩器75與混合容器66相連接，振蕩的強(qiáng)度應(yīng)足夠強(qiáng)以使一段時(shí)間后含有充氣脂質(zhì)體的泡沫73可如圖9所示在水溶液74的表層形成。對(duì)泡沫73形成的觀察可用作控制振蕩持續(xù)時(shí)間的手段；也即，不是振蕩預(yù)定的一段時(shí)間，而應(yīng)持續(xù)振蕩直至已產(chǎn)生預(yù)定體積的泡沫。在所使用類脂的凝膠態(tài)向液晶態(tài)相變溫度低于室溫的制備充氣脂質(zhì)體設(shè)備的較優(yōu)選實(shí)施方案中，提供了冷卻水性脂溶液74的裝置。在如圖9所示的實(shí)施方案中，可通過在混合容器66周圍配置外套64以在容器四周形成環(huán)形管來進(jìn)行冷卻。如圖9所示，冷卻液體63分別通過外套入口和出口62和63被推動(dòng)流過此環(huán)形管。通過調(diào)節(jié)冷卻液體62的溫度和流速，可將類脂水溶液74的溫度維持在所需溫度。如圖9所示，可將氣體55與水溶液74一起導(dǎo)入混合容器66，此氣體55可為空氣或其它氣體，如氮?dú)饣驓鍤狻？赏ㄟ^使用一敞口混合容器以使水溶液持續(xù)暴露于大氣之中來引入空氣。在分批工序中，通過密封混合容器66可引入確定已充滿的當(dāng)?shù)刂車目諝?。如果使用的氣體比空氣重，容器則無需密封。然而，如引入的氣體比空氣輕，混合容器必需密封，如圖9所示使用蓋65。無論氣體55是空氣還是其它氣體，都可在混合容器66中被加壓，例如圖9所示，可通過管道57將混合容器與加壓氣體供應(yīng)罐54相連接。振蕩完畢后，從混合容器66中提取含充氣脂質(zhì)體的泡沫73。如圖10所示，將注射器100的針頭102插入泡沫73中經(jīng)上提柱塞106將預(yù)定量的泡沫抽進(jìn)針筒104中進(jìn)行泡沫提取。如下文進(jìn)一步要討論的，可利用針頭102的末端放入泡沫73中的位置來控制所提取充氣脂質(zhì)體的大小。另外，如圖9所示，也可通過將提取管67插入混合容器66中來進(jìn)行提取。如果混合容器66如前所述已經(jīng)被加壓，則可利用氣體55的壓力來推動(dòng)充氣脂質(zhì)體77通過管道70從混合容器66中流到提取容器76中。在混合容器66未被加壓的情況下，則如圖9所示，則可通過管道78將提取容器76與如真空泵的真空源58相連接以產(chǎn)生足夠的負(fù)壓將泡沫73吸入提取容器76中。從提取容器76中將充氣脂質(zhì)體77導(dǎo)入小瓶82中以運(yùn)送至最終的使用者。可在提取容器76上連接一加壓氣體源56作為輔助物以噴射出充氣脂質(zhì)體。由于負(fù)壓會(huì)導(dǎo)致充氣脂質(zhì)體變大，故優(yōu)選用正壓提取充氣脂質(zhì)體。優(yōu)選進(jìn)行過濾以得到大小基本均一的充氣脂質(zhì)體。在某些較優(yōu)選實(shí)施方案中，過濾裝配含有一個(gè)以上的濾器和優(yōu)選地如圖12所示，濾器互相之間并不緊密相鄰。過濾前，充氣脂質(zhì)體大小范圍在約1微米至大于60微米之間變化(圖15A和16A)。通過單一濾器過濾后，充氣脂質(zhì)體通常不小于10微米，但仍保留有大小為25微米的顆粒。通過兩個(gè)濾器(10微米濾器再接8微米濾器)過濾后，幾乎所有脂質(zhì)體都小于10微米，大多數(shù)為5至7微米(圖15B和16B)。如圖9所示，可將過濾元件72直接結(jié)合到提取管67的末端以使只有低于預(yù)定大小的充氣脂質(zhì)體可從混合容器66中提取出來，以此進(jìn)行過濾。另外，如圖9所示，除了提取管濾器72外，也可將濾器80與從提取容器76中將充氣脂質(zhì)體77引入小瓶82的管道79結(jié)合以進(jìn)行充氣脂質(zhì)體的大小篩分。如圖12所示，濾器80可含有串聯(lián)的濾器裝配124。如圖12所示的串聯(lián)過濾裝配124包含兩個(gè)連續(xù)的濾器116和120，濾器120裝配在濾器116的上方。在較優(yōu)選的實(shí)施方案中，上游方的濾器120是“NUCLEPORE”10μm濾器，下游方的濾器116是“NUCLEPORE”8μm濾器。優(yōu)選在濾器116的任一側(cè)裝配兩個(gè)0.15mm的金屬制篩盤115。在較優(yōu)選的實(shí)施方案中，濾器116和120通過TeflonTMO—環(huán)，118隔開的最小距離為150μm。除過濾以外，也可利用充氣脂質(zhì)體依據(jù)大小的浮力來進(jìn)行大小篩分。所幸的是充氣脂質(zhì)體的密度比水小，因此可浮在混合容器66的表層。由于最大的脂質(zhì)體其密度最小，它們會(huì)最快浮到表層，最小的脂質(zhì)體通常最后升至表層，非充氣性脂質(zhì)部分則會(huì)沉入底部。此現(xiàn)象可有利地用于通過差異浮選法從混合容器66中移去充氣脂質(zhì)體來將之篩分。因此，提取管67在混合容器66中垂直位置的放置可以控制所提取充氣脂質(zhì)體的大小。管越高所提取的充氣脂質(zhì)體越大。而且通過周期性地或持續(xù)地調(diào)節(jié)提取管67在混合容器66中的垂直位置，可在不斷進(jìn)行的基礎(chǔ)之上控制所提取充氣脂質(zhì)體的大小。結(jié)合裝置68可使提取更方便，此裝置為附著在提取管67上的與穿透筒72配合的穿透環(huán)71，它可使提取管67在提取容器66中的垂直位置準(zhǔn)確被調(diào)節(jié)。凝膠狀態(tài)振蕩氣體裝入方法本身也可用來改善以充氣脂質(zhì)為基礎(chǔ)的微球體的大小篩分。通常，振蕩能量的強(qiáng)度越大，所得充氣脂質(zhì)體越小。本發(fā)明也包括制備含藥物的充氣脂質(zhì)體以分發(fā)給最終使用者的新方法。一旦形成了充氣脂質(zhì)體，不能在可導(dǎo)致其破裂的溫度下加熱滅菌。因此必須用已滅菌成分形成充氣脂質(zhì)體并盡可能少地進(jìn)行隨后的操作以避免污染的危險(xiǎn)。根據(jù)本發(fā)明可達(dá)到此目的，例如如圖10所示，可通過在振蕩前將含有類脂和水溶液的混合容器滅菌，通過提取容器76從混合容器66中將充氣脂質(zhì)體77直接發(fā)送到滅菌注射器100的針筒104中，而不需進(jìn)一步加工或處理，也即無需接著滅菌。充滿充氣脂質(zhì)體77并被適當(dāng)包裝的注射器100可被分發(fā)給最終使用者。此后，此產(chǎn)品不需要進(jìn)一步的操作以將充氣脂質(zhì)體給患者施用，除了從其包裝中取出注射器，除去注射器針頭102上的保護(hù)套(未標(biāo)出)并將針頭插入患者體內(nèi)或插入導(dǎo)液管中。而且當(dāng)注射器柱塞106壓針筒104時(shí)產(chǎn)生的壓力會(huì)導(dǎo)致最大充氣脂質(zhì)體的破裂，因此不經(jīng)過濾即可得到一定程度的大小篩分。如圖10所示，接近使用時(shí)，需要過濾充氣脂質(zhì)體之處，如由于未經(jīng)過濾即從提取容器76中提取出來或由于仍需進(jìn)一步過濾，注射器100可裝配有其自身濾器108。當(dāng)注射充氣脂質(zhì)體時(shí)，通過柱塞106的作用使充氣脂質(zhì)體從濾器108中擠壓出來，借此可進(jìn)行充氣脂質(zhì)體按大小篩分。充氣脂質(zhì)體可一次性地被篩分并注射進(jìn)患者體內(nèi)。如圖11所示，可在注射器112上直接裝配串聯(lián)濾器套110，它可允許使用時(shí)的串聯(lián)過濾。如圖12所示，濾器套110包含先前討論過的串聯(lián)濾器裝配124，它結(jié)合于具有陽螺紋的較低環(huán)122和具有陰性螺紋的較高環(huán)114之間。較低環(huán)122裝配有Luer鎖以使之對(duì)注射器112很容易保險(xiǎn)，較高的環(huán)114裝配有針頭102。在優(yōu)選的實(shí)施方案中，類脂溶液通過濾器被壓出來，在振蕩前先將類脂溶液加熱滅菌。一旦形成了充氣脂質(zhì)體，可按上文所述過濾篩分。形成充氣脂質(zhì)體之前的這些步驟可提供優(yōu)點(diǎn)，例如，減少未水合類脂的量因此提供顯著高產(chǎn)量的充氣脂質(zhì)體，并可提供無菌充氣脂質(zhì)體以預(yù)備給患者施用。例如，如小瓶或注射器的混合容器可充滿經(jīng)過濾的類脂懸浮液，然后可在此混合容器中，通過例如高壓滅菌器來將此溶液滅菌。通過振蕩滅菌容器將氣體滴注到類脂懸浮液中以形成充氣脂質(zhì)體。優(yōu)選地，在滅菌容器的適當(dāng)位置裝配濾器以使充氣脂質(zhì)體在接觸患者之前先通過濾器。此優(yōu)選方法的第一步即通過濾器壓出類脂溶液，它可通過分散干性類脂并暴露更大的水合表面積來減少未水合類脂的量。優(yōu)選地，濾器孔徑約為0.1至5μm，更優(yōu)選地，約為0.1至4μm，甚至更優(yōu)選地約為0.1至2μm，最優(yōu)選地為1μm。如圖17所示，當(dāng)類脂懸浮液已經(jīng)過濾時(shí)(圖17B)，未水合類脂的量與未經(jīng)預(yù)過濾的類脂懸浮液(圖17A)相比有所降低。未水合的類脂表現(xiàn)為不均一大小的無定形團(tuán)塊，它是不需要的。第二步滅菌提供了可容易施用給患者的組合物，優(yōu)選地可通過加熱滅菌來進(jìn)行滅菌，優(yōu)選地，可通過在至少約為100℃的溫度之下高壓滅菌此溶液，更優(yōu)選地，可通過在約為100℃至約為130℃下，再優(yōu)選地，在約110℃到約130℃下，甚至更優(yōu)選地，在約為120℃至約130℃下，最優(yōu)選地在約為130℃的溫度下高壓滅菌。優(yōu)選地，加熱持續(xù)至少約1分鐘，更優(yōu)選地約為1至30分鐘，甚至更優(yōu)選地約為10至20分鐘，最優(yōu)選地約為15分鐘。當(dāng)用除了在可導(dǎo)致充氣脂質(zhì)體破裂的溫度之下熱滅菌以外的方法進(jìn)行滅菌時(shí)，可在充氣脂質(zhì)體形成之后進(jìn)行滅菌，此方法是優(yōu)選的。例如在充氣脂質(zhì)體形成之前和/或之后可使用了γ放射。圖18闡明了130℃下高壓滅菌15分鐘，再經(jīng)渦旋10分鐘后，成功地形成充氣脂質(zhì)體的能力。另外，在壓出和滅菌步驟后，振蕩步驟產(chǎn)生了具有很少至沒有殘留的無水類脂相的充氣脂質(zhì)體。圖18A所示為高壓滅菌后過濾前所產(chǎn)生的充氣脂質(zhì)體，因此產(chǎn)生大量充氣脂質(zhì)體大于10μm。圖18B所示為通過10μm“NUCLEPORE”濾器過濾后的充氣脂質(zhì)體，它產(chǎn)生了約為10μm的均一大小。本發(fā)明的某些實(shí)施方案針對(duì)的是藥物傳遞系統(tǒng)，它包括通過真空干燥氣體滴注法制備的充氣脂質(zhì)體并在其中包囊治療劑(即含有藥物)，這種脂質(zhì)體在本文中時(shí)是指含有藥物真空干燥氣體滴注的脂質(zhì)體。本發(fā)明進(jìn)一步針對(duì)的藥物傳遞系統(tǒng)包括含有藥物的充氣脂質(zhì)體，此脂質(zhì)體的內(nèi)部實(shí)際上不含液體。制備本發(fā)明脂質(zhì)體的方法包括(I)將包囊有藥物的脂質(zhì)體置于負(fù)壓下；(II)在負(fù)壓下將脂質(zhì)體溫育足夠一段時(shí)間以從脂質(zhì)體中除去幾乎所有液體；和(III)將經(jīng)選擇的氣體滴注到脂質(zhì)體中直至達(dá)到周圍的氣壓。使用上述步驟的方法本文指的是制備含藥物脂質(zhì)體的真空干燥氣體滴注法。還提供了使用真空干燥氣體滴注法制備本發(fā)明脂質(zhì)體的設(shè)備，所說設(shè)備包括(I)含有已包裹了藥物的脂質(zhì)體的容器；(II)給容器提供負(fù)壓以從脂質(zhì)體中除去所含液體的裝置；(III)連接負(fù)壓裝置與容器的管道，此管道引導(dǎo)所說液流；和(IV)將氣體引入容器中脂質(zhì)體的裝置。用以制備真空干燥氣體滴注法制備的本發(fā)明充氣脂質(zhì)體以及基本除去內(nèi)部液體的充氣脂質(zhì)體的真空干燥氣體滴注法有望具有下列步驟。首先，按照此方法，將含藥物的脂質(zhì)體置于負(fù)壓之下(即減壓或真空條件下)，接著在負(fù)壓下將脂質(zhì)體溫育足夠一段時(shí)間以從脂質(zhì)體中除去幾乎所有液體，因此形成實(shí)已干燥的脂質(zhì)體。本文所用的那些語句“上除去幾乎所有液體”和“基本上干燥的脂質(zhì)體”指的是至少約除去90％液體的脂質(zhì)體，優(yōu)選至少除去約95％液體，最優(yōu)選除去約100％液體。盡管液體被除去，但較高分子量的藥物被保留下來并被包裹于脂質(zhì)體中。最終通過向脂質(zhì)體中提供氣體直至達(dá)到周圍氣壓以用經(jīng)選擇的氣體滴注脂質(zhì)體，因此形成含有目的藥物的本發(fā)明真空干燥氣體滴注而得的脂質(zhì)體以及含有藥物且基本上已除去內(nèi)部液體的本發(fā)明充氣脂質(zhì)體。本文所用的實(shí)際上已除去內(nèi)部液體指的是內(nèi)部至少已除去約90％液體的脂質(zhì)體，優(yōu)選至少除去約95％的液體，最優(yōu)選除去約100％液體。意外地，根據(jù)本發(fā)明方法制備的含藥物脂質(zhì)體擁有大量令人驚奇但很有利的特征。本發(fā)明脂質(zhì)體對(duì)超聲顯示出強(qiáng)烈反應(yīng)，使用峰共振頻率的超聲(以及其它足夠強(qiáng)度和寬度的振蕩頻率)可使之破裂，它對(duì)壓力很穩(wěn)定，和/或通常干燥貯存時(shí)或懸浮于液體介質(zhì)中時(shí)貯藏壽命較長。充氣脂質(zhì)體還有如下優(yōu)點(diǎn)，例如穩(wěn)定的顆粒大小，低毒性和柔韌的膜。據(jù)信充氣脂質(zhì)體柔韌的膜可用來輔助這些脂質(zhì)體積累于或靶定位于如腫瘤的組織。另一個(gè)意外是脂質(zhì)體在真空干燥氣體滴注方法中可被氣體充滿并恢復(fù)其原始圓形而不是不可逆地崩潰成杯狀的能力。在峰共振頻率下使用超聲脂質(zhì)體作出的反應(yīng)以及使脂質(zhì)體破裂的能力使得藥物對(duì)患者某區(qū)域的輸送得到控制，這是通過允許施用于患者后可監(jiān)測脂質(zhì)體以確定脂質(zhì)體存在于所要區(qū)域，以及使用超聲使脂質(zhì)體破裂以將藥物在該區(qū)域釋放來實(shí)現(xiàn)的。優(yōu)選地，本發(fā)明脂質(zhì)體具有的反射性超過2dB，優(yōu)選為在約4dB和約20dB之間。在這些范圍內(nèi)，本發(fā)明脂質(zhì)體最高的反射性是較大脂質(zhì)體，較高濃度的脂質(zhì)體，和/或當(dāng)使用較高超聲頻率時(shí)顯示出的。圖13是通過真空干燥氣體滴注法制備的其中未包裹任何藥物，其內(nèi)部基本不含液體的充氣脂質(zhì)體dB反射性的圖示。優(yōu)選地，本發(fā)明脂質(zhì)體峰共振頻率約在0.5MHz和10MHz之間，當(dāng)然，本發(fā)明充氣脂質(zhì)體的峰共振頻率將依據(jù)脂質(zhì)體的直徑，在某些情況下隨彈性而改變，較大和彈性較高的脂質(zhì)體與較小和彈性較高的脂質(zhì)體相比，前者的共振頻率較低。本發(fā)明脂質(zhì)體的穩(wěn)定性在實(shí)踐中也很重要。本發(fā)明脂質(zhì)體比通過如加壓或其它技術(shù)的已知方法產(chǎn)生的其它充氣脂質(zhì)體具有更大的貯藏期穩(wěn)定性。例如形成72小時(shí)后，常規(guī)制備的含氣脂質(zhì)體通?；旧喜缓蠚怏w，氣體已從脂質(zhì)體中擴(kuò)散出來和/或脂質(zhì)體已經(jīng)破裂和/或熔化，隨之導(dǎo)致了反射性的損失。作為對(duì)比，本發(fā)明含藥物的充氣脂質(zhì)體通常具有的貨架壽命的穩(wěn)定性超過約3周，優(yōu)選地，貨架壽命的穩(wěn)定性超過約4周，更優(yōu)選地，貨架壽命的穩(wěn)定性超過約5周，甚至更優(yōu)選地貨架壽命的穩(wěn)定性超過約3個(gè)月，通常貨架壽命的穩(wěn)定性甚至更長，如超過6個(gè)月，12個(gè)月或甚至2年。同樣出乎意料地是在真空干燥氣體滴注方法中，脂質(zhì)體被氣體充滿可恢復(fù)其原有的形狀而不是崩破成杯狀結(jié)構(gòu)，而以前的技術(shù)則會(huì)導(dǎo)致后者。例見Croweetal.，ArchivesofBiochemistryandBiophysics，Vol.242，pp.240—247(1985)；Croweetal.，ArchivesofBiochemistryandBio-physics，Vol.220，pp.477—484(1983)；Fukudaetal.，J.Am.Chem，soc.，Vol.108，pp.2321—2327(1986)；Re-genetal.，J.Am.Chem.Sto.，Vol.102，pp.6638—6640(1980)。經(jīng)受本發(fā)明真空干燥氣體滴注法的含藥物脂質(zhì)體可使用對(duì)本領(lǐng)域熟練人員顯而易見的種種常規(guī)脂質(zhì)體制備技術(shù)中的任何一種來制備。盡管可使用大量不同技術(shù)中的任何一種，但優(yōu)選通過微乳化技術(shù)來制備含有藥物的脂質(zhì)體，通過不同常規(guī)方法制備的脂質(zhì)體可用于本發(fā)明的真空干燥氣體滴注法以產(chǎn)生本發(fā)明的含藥物脂質(zhì)體。用于制備本發(fā)明真空干燥氣體滴注法所使用的脂質(zhì)體的原料包括本領(lǐng)域熟練人員熟知的適于脂質(zhì)體構(gòu)建的任何原料或它們的給合。在氣體置入之前，可使用對(duì)本領(lǐng)域熟練人員顯而易見的多種常規(guī)脂質(zhì)體制備技術(shù)中的任何一種來制備脂質(zhì)體，這些技術(shù)包括冷凍解凍。以及超聲處理，螫合劑透析、勻漿、溶劑浸制、微乳化，自發(fā)形成，溶劑蒸發(fā)，F(xiàn)rench壓力細(xì)胞技術(shù)、受控的去污劑透析及其它技術(shù)，每種技術(shù)都包括在含有所需治療劑的溶液中制備不同的形式的脂質(zhì)體以使治療劑被包裹于，纏繞于或吸附于所得脂質(zhì)體中。另外，還可使用本領(lǐng)域熟練人員認(rèn)為對(duì)于在特殊PH下蛋白質(zhì)化或脫蛋白質(zhì)化的治療劑尤其適用的PH梯度技術(shù)將治療劑裝入脂質(zhì)體中，例見Maddenetal.，ChemistryandPhysicsofLipids，199053，37—46，此公開全部列入本文參考文獻(xiàn)。為了制備真空干燥氣體滴注所用的含藥物脂質(zhì)體，根據(jù)一般教導(dǎo)的方法，制備二棕櫚酰基卵磷脂脂質(zhì)體可通過將二棕櫚?；蚜字愔瑧腋∮诹姿猁}緩沖鹽水或含有欲包裹藥物的水中，并將類脂加熱后約50℃來實(shí)現(xiàn)，需要略高于41℃的溫度是為了將二棕櫚?；蚜字愔瑥哪z狀態(tài)轉(zhuǎn)變成液晶狀態(tài)從而形成含藥物的脂質(zhì)體。為了制備不均—大小分布于約2微米的多層載體，可將脂質(zhì)體溶液保持在約50℃的溫度之下，同時(shí)用手工緩慢混合，然后將溫度降低至室溫，脂質(zhì)體保持完整。如有必要可通過限定大小的聚碳酸酯濾器壓出二棕櫚?；蚜字|(zhì)體以使得脂質(zhì)體大小分布更均勻。用于此技術(shù)的裝置是配備有熱筒的壓出機(jī)裝置(ExtruderDeviceTM，LipexBiomem-branes，Vancouver，Canada)，熱筒可使在溫度高于類脂的凝膠狀態(tài)向液晶狀態(tài)相變溫度時(shí)，壓出可更方便地進(jìn)行。對(duì)于少量溶于水介質(zhì)的親脂性藥物，在形成脂質(zhì)體之前可將此藥物與類脂自身混合，例如，兩性霉素可與干性脂質(zhì)一起懸浮(例如于氯仿中的摩爾比為8∶2的蛋卵磷脂和膽固醇，與脂質(zhì)混合)，然后蒸發(fā)氯仿(需指出也可使用其它適當(dāng)?shù)挠袡C(jī)溶劑，如乙醇或乙醚)，再將含有親脂悸藥物混合物的干性脂質(zhì)懸浮于如無菌水或生理鹽水的水介質(zhì)中。此方法適用于如皮質(zhì)類固醇的多種親脂性藥物以將親脂性藥物結(jié)合到脂質(zhì)體膜內(nèi)，然后干燥所得脂質(zhì)體，再經(jīng)受如上所述的真空氣體滴注法。另外再通過一般指導(dǎo)的方法，可使用常規(guī)冷凍解凍步驟產(chǎn)生寡層或單層二棕櫚?；蚜字|(zhì)體，冷凍解凍步驟過后，可對(duì)脂質(zhì)體進(jìn)行上述的壓出步驟。然后使向由此制得的含藥物脂質(zhì)體經(jīng)受本發(fā)明的真空干燥氣體滴注過程以產(chǎn)生本發(fā)明的含藥物真空干燥氣體滴注脂質(zhì)體以及含藥物的其內(nèi)部實(shí)際不含液體的充氣脂質(zhì)體。根據(jù)本發(fā)明方法，將含藥物后脂質(zhì)體置于適于使脂質(zhì)體經(jīng)受負(fù)壓(即減壓或真空條件下)的容器中，然后將負(fù)壓供應(yīng)是夠長的一段時(shí)間以從脂質(zhì)體中除去幾乎所有液體，從而得到實(shí)已干燥的脂質(zhì)體，本領(lǐng)域熟練人員可認(rèn)為一旦裝備有本發(fā)明，即可使用不同的負(fù)壓，重要的參數(shù)是從脂質(zhì)體中除去幾乎所有的液體的參數(shù)。通常至少約為700mmHg，優(yōu)選為在約700mmHg和約760mmHg(標(biāo)準(zhǔn)氣壓)之間的負(fù)壓被提供約24至約72小時(shí)即足以從脂質(zhì)體中除去幾乎所有液體。根據(jù)本文的公開，共它適當(dāng)?shù)膲毫蜁r(shí)間長短對(duì)本領(lǐng)域熟練人員來說是顯而易見的。最后，對(duì)脂質(zhì)體提供經(jīng)選擇的氣體以用氣體滴注脂質(zhì)體直至達(dá)到周圍大氣壓力，因此可得到本發(fā)明含有藥物的真空干燥氣體滴注脂質(zhì)體以及其內(nèi)部實(shí)已不含液體的含藥物的充氣脂質(zhì)體。優(yōu)選地，氣體滴注應(yīng)緩慢進(jìn)行，即在超過至少約為4小時(shí)的期間內(nèi)，最優(yōu)選地在超過約為4到約為8小時(shí)的期間內(nèi)進(jìn)行?？墒褂貌煌纳锛嫒輾怏w，這些氣體包括空氣、氮?dú)?、二氧化碳、氧氣、氬氣、氙氣、氖氣、氦氣或它們中的任何幾種和所有的組合。其它適當(dāng)?shù)臍怏w對(duì)于本領(lǐng)域熟練人員是顯而易見的，所選擇的氣體僅受建議使用的脂質(zhì)體的限制。制備脂質(zhì)體的上述方法在下文中指的是真空干燥氣體滴注法。如有必要，在脂質(zhì)體經(jīng)受負(fù)壓之前應(yīng)先冷卻，這種冷卻是優(yōu)選的。優(yōu)選地，脂質(zhì)體經(jīng)受負(fù)壓之前先被冷卻后0℃以下，更優(yōu)選地約為-10℃和-20℃之間，最優(yōu)選冷卻后-10℃。在達(dá)到所需負(fù)壓時(shí)，可優(yōu)選地將脂質(zhì)體溫度升高至0℃以上，更優(yōu)選地約為10℃和20℃之間。最優(yōu)選升到10℃，直至實(shí)際上已從脂質(zhì)本中除去所有液體，此時(shí)不必再持續(xù)負(fù)壓，溫度也可回復(fù)至室溫。如果脂質(zhì)體被冷卻至0℃以下，則優(yōu)選對(duì)在冷凍保護(hù)劑存在下最初制備的脂質(zhì)體或者對(duì)在進(jìn)行本發(fā)明真空干燥氣體滴注法之前已加入冷凍保護(hù)劑的脂質(zhì)體進(jìn)行真空干燥氣體滴注法。這種冷凍保護(hù)劑不必強(qiáng)行加入，但它可幫助維持脂質(zhì)體膜在低溫下的完整性，也可增加膜的最終穩(wěn)定性，優(yōu)選地冷凍保護(hù)劑是海藻糖、甘油、聚乙二醇(尤其是分子量為400的聚乙二醇)、棉子糖、蔗糖和山梨醇，特別優(yōu)選地是海藻糖。令人驚奇的是發(fā)現(xiàn)了本發(fā)明脂質(zhì)體對(duì)壓力的變化非常穩(wěn)定，由于此特征，可使必要時(shí)能在真空干燥氣體滴注之后，將脂質(zhì)體穿過預(yù)定孔徑的濾器進(jìn)行擠壓以產(chǎn)生相對(duì)均勻并限定孔徑的脂質(zhì)體。本發(fā)明另一方面也提供了有用的設(shè)備，可用以制備本發(fā)明含有藥物的真空干燥氣體滴注脂質(zhì)體以及其內(nèi)部實(shí)已不含液體的含有藥物的脂質(zhì)體。特別是圖14是顯示了真空下干燥脂質(zhì)體并將氣體滴注進(jìn)干燥脂質(zhì)體的優(yōu)選設(shè)備，此設(shè)備內(nèi)包含含有藥物脂質(zhì)體19的容器8組成，如有必要，此設(shè)備可包括裝有干冰17、圍繞容器8的冰浴5。冰浴5和干冰17使脂質(zhì)體被冷至低于0℃。真空泵1通過導(dǎo)管15連接到容器8以施加持續(xù)的負(fù)壓。在優(yōu)選的方案中，泵1可施加至少約700mmHg的負(fù)壓，且優(yōu)選地負(fù)壓在約700mmHg到約760mmHg(標(biāo)準(zhǔn)壓力)。加力計(jì)6連接導(dǎo)管15監(jiān)測施加到容器8的負(fù)壓。為了防止從脂質(zhì)體除去的液體進(jìn)入泵1，一系列的阱被連到導(dǎo)管15以幫助收集從脂質(zhì)體吸出的液體(和液體蒸汽，統(tǒng)稱為液體)。作為優(yōu)選的方案，兩個(gè)阱被應(yīng)用。第一個(gè)阱優(yōu)選地包含配有帶干冰17的冰浴4的燒瓶7。第二個(gè)阱優(yōu)選地包含柱3，圍繞柱3管道16螺旋形環(huán)繞。柱3的頂端連接導(dǎo)管15而底端連接管道16。管道16的另一端連接導(dǎo)管15。如附圖14所示，帶干冰17的冰浴2包圍柱3和管道16。如果需要，干冰17可用液氮，液化空氣或其它低溫學(xué)物質(zhì)代替。冰浴2和4幫助收集任何液體并冷凝任何從脂質(zhì)體中吸出的液體蒸汽以收集在阱內(nèi)。在本發(fā)明優(yōu)選的方案中冰阱2和4各自保持在低于約-70℃的溫度。管塞14裝在容器8的上游導(dǎo)管15中以選擇氣從氣瓶18被導(dǎo)入容器8和進(jìn)入脂質(zhì)體19中。將含脂質(zhì)體19的藥物置于本發(fā)明設(shè)備的容器8中。優(yōu)選地，使用干冰17將冰浴5中的脂質(zhì)體的溫度降低至0℃以下，更優(yōu)選在約-10℃到-20℃之間，最優(yōu)選-10℃。關(guān)閉管塞14和9，啟動(dòng)真空泵1。隨后小心地打開管塞10，11，12和13，使真空泵1對(duì)容器8抽真空。利用壓力計(jì)6測量壓力，直到負(fù)壓達(dá)到約700mmHg以下，優(yōu)選范圍為約700mmHg和760mmHg(表壓)之間。在本發(fā)明容器7的優(yōu)選方案中，由使用干冰17的冰浴4冷卻的容器7以及使用干冰17的冰浴2冷卻的柱3和盤管16，共同或單獨(dú)地從脂質(zhì)體中冷凝液體蒸氣并收集液滴，以防止液體和液體蒸汽進(jìn)入真空泵1。在優(yōu)選的本發(fā)明方案中，阱2和4的溫度各保持在約-70℃以下。所需的負(fù)壓通常至少保持24小時(shí)，以便從容器8中的脂質(zhì)體19和在容器3和7中的冷凍除去液體及液體蒸氣。系統(tǒng)的壓力由壓力計(jì)6來測量，通常保持約24到72小時(shí)，在此時(shí)間內(nèi)，基本上所有的液體都已從脂質(zhì)體中除去。這時(shí)，慢慢關(guān)閉管塞10并關(guān)閉真空泵1。隨后，逐漸打開管塞14，使氣體從氣瓶18通過管塞14經(jīng)導(dǎo)管15慢慢地導(dǎo)入系統(tǒng)，使氣體滴入容器8中的含藥物脂質(zhì)體19中。優(yōu)選地，氣體進(jìn)入的時(shí)間至少為約4小時(shí)，更優(yōu)選約4到8小時(shí)，直到系統(tǒng)的壓力達(dá)到環(huán)境壓力。本發(fā)明含藥物的真空干燥氣體滴注的脂質(zhì)體和含藥物充氣的脂質(zhì)體實(shí)際上可避免液體進(jìn)入其內(nèi)部，具有作為藥物輸送載體的優(yōu)越特征。根據(jù)本發(fā)明的方法制備的充氣的脂質(zhì)體在某些方面，在物理性質(zhì)和功能方面，不同于現(xiàn)有技術(shù)中的脂質(zhì)體。例如，本發(fā)明的脂質(zhì)體實(shí)際上避免了液體進(jìn)入其內(nèi)部。確切地講，現(xiàn)有技術(shù)中的脂質(zhì)體存在水介質(zhì)。例如，Dorland′sillustratedMedicalDictionary，P.946，27thed.(W.B.SaundersCompany，Philadelphia1988)。進(jìn)一步，本發(fā)明脂質(zhì)體令人驚奇地對(duì)超聲波具有強(qiáng)列的回波發(fā)生特性，在該脂質(zhì)體峰值共振頻率易受超聲波影響而破裂，并且有長的保存期限，特別有利于使用該脂質(zhì)體作為藥物傳遞系統(tǒng)。因此，本發(fā)明設(shè)計(jì)的控制向患者區(qū)域輸送藥物的方法包括(i)對(duì)患者使用通過真空干燥氣體滴注法制備并在其中密封著藥物的充氣脂質(zhì)體，和/或?qū)嶋H上在其內(nèi)部避免液體存在的并在其中密封著藥物的充氣脂質(zhì)體；(ii)使用超聲波監(jiān)測脂質(zhì)體以測定該區(qū)域脂質(zhì)體的存在；以及(iii)使用超聲波裂破脂質(zhì)體，使藥物在該部位釋放。除這里詳述的用途外，本發(fā)明的脂質(zhì)體還有各種不同的用途。例如，包括作為超聲波熱增效劑和作超聲波反射照影劑的用途。這些另外的用途和其他有關(guān)的物質(zhì)在申請(qǐng)日均為1991年7月18日的本申請(qǐng)人的專利申請(qǐng)，U.S.SerialNo.716，793和U.S.SerialNo.717，084中被描述并作為權(quán)利要求而提出，這里將其所公開的內(nèi)容作為一個(gè)整體收編為參考文獻(xiàn)。在下列實(shí)施例中將進(jìn)一步描述本發(fā)明。實(shí)施例1為描述含治療劑的充氣微球體的制備，試驗(yàn)和使用的實(shí)施例。實(shí)施例2—10為描述含治療劑的充氣微球體的制備，試驗(yàn)和使用的預(yù)示的實(shí)施例。實(shí)施例11—20為描述含有藥物的，真空干燥氣體滴注的脂質(zhì)體，在其內(nèi)部實(shí)示上避免任何液體存在的充氣脂質(zhì)體的制備，試驗(yàn)和使用的預(yù)示實(shí)施例。實(shí)施例21—28為說明通過在氣體存區(qū)下?lián)u動(dòng)包會(huì)一種液體的水溶液而制備的充氣脂質(zhì)體的制備和使用的實(shí)際的實(shí)施例。實(shí)施例29—36是說明通過過濾和壓熱一種類脂懸浮液，接著振蕩該類脂溶液而制備的充氣脂質(zhì)體及篩分的實(shí)際實(shí)施例。下列實(shí)施例不應(yīng)被認(rèn)為是所附權(quán)利要求的范圍的限制。實(shí)施例實(shí)施例1下面描述的方法說明治療劑如DNA可被截留在充氣微球體中，以及超聲波可被用來從充氣微球體中釋放治療劑。如下所示，在接受相同能量的超聲波輻射后，截留有水和DNA的脂質(zhì)體不能釋放該遺傳物質(zhì)。在微球體中存在氣體有效地俘獲超聲波的能量，因而可被用來傳遞治療劑如遺傳物質(zhì)。充氣的微球體被下述合成將純的二棕櫚酰磷脂酰膽堿(DPPC)，AvantiPloarLipids，AlabasterAta.懸浮于普通的鹽水中，然后使用ExtruderDevice(lipexBiomem-branes，Voncourer，Canada)在800p.s.i.通過2微米聚碳酸酯濾器(Nuclepore，Costar，Pleasanton，CA)擠壓五次。然后按U.S.SerialNumber716，899，申請(qǐng)于6/18/91所述將所得脂質(zhì)體減壓干燥，該文獻(xiàn)作為一個(gè)整體在此收編為參考文獻(xiàn)。徹底干燥后將干燥的脂質(zhì)體按U.S.SerialNum-ber716，899所述慢慢地充進(jìn)氮?dú)狻Ｅc大氣壓平衡后，將所得脂質(zhì)體懸浮于鹽水中(0.9％NaCl)并劇烈搖動(dòng)。CoulterCounter(Bedfordshire，England)試驗(yàn)所得充氣脂質(zhì)體的大小。按該CoulterCounter提供的參考手冊(cè)所述的校準(zhǔn)程序校準(zhǔn)儀器。將充氣脂質(zhì)體溶液用同中素II(IsoterII)稀釋并放置在玻璃容器中，在CoulterSamplingStand3位攪拌。首先使用100μm孔徑管。用該孔徑管將500毫升溶液在各選擇的大小范圍試驗(yàn)一次，接著使用的是30μm孔徑管。用該管可將微球體由大到小地排列到1μm，充氣微球體的直徑可經(jīng)其中檢測。將50毫升溶液試驗(yàn)一次，將微球體在各選擇的大小范圍計(jì)數(shù)。于CoulterCounterModelZM和CoulterCounterChannelyzer256收集數(shù)據(jù)。準(zhǔn)彈性光散射(QEL)和光顯微術(shù)也被使用。預(yù)定大小的乳液小球被用來校準(zhǔn)目鏡的柵格。這些柵格以10X，40X，100X，400X和1000X的倍率被校準(zhǔn)。然后將充氣微球體置于玻璃載片并在不同倍率下觀察。該技術(shù)不僅可以得到充氣脂質(zhì)體的大小，也可以得到類脂微粒的大小。使用AcousticImagingModel5200臨床超聲波設(shè)備(AcoustinImayingTechnologiesCorp.，Phoenix，AZ)和定制的組合半敞開的聲波能掃描充氣的脂質(zhì)體。半敞開聲學(xué)實(shí)驗(yàn)室由LecroyCorporationCorporateHeadquarters，ChestnutRidge，NY)，Panametricsmodel5052PRPulser/Receiver(Panametrics，Inc.，Waltham，Mass)，具有2.25，3.5，5.0，7.5，和10.0MHz頻率的Panametrics浸沒式變送器(Panametrics，Inc.，Waltham，Mass)，和Testech，Inc.的校正系統(tǒng)(Testech，Inc.，Exton，PA)組成。一種參考標(biāo)準(zhǔn)，系列模擬模型(tissuemimickingphan-tom)被用于建立延時(shí)補(bǔ)償(time—gaincompensation)(TGC)并以此方式得到平均振幅。該系列摸擬模型由Radi-ationMeasurements，Inc.(Middleton，W])制造。如表III所示，在試驗(yàn)頻率范圍充氣脂質(zhì)體的反射率保持在這些實(shí)驗(yàn)使用的脈沖聲波的最高能量。特別地，盡管掃描持續(xù)60分鐘，充氣脂質(zhì)體的dB反射率保持在4.5—8.4mW范圍的經(jīng)受量以及3.25mW/cm2的聲波強(qiáng)度(AcousticImagingAI5200臨床超聲波機(jī)可產(chǎn)生的脈沖波的最高能量用Rich—MarTherepeuticultrasoundapparatusmod-elRM—25(Rich—MarCorp.，Inola，Ok)提供的超聲波能(表IV)持續(xù)照射充氣脂質(zhì)體溶液。表(IV)顯示了使用持續(xù)的超聲波產(chǎn)生的功率。結(jié)果發(fā)現(xiàn)持續(xù)的超聲波能導(dǎo)致充氣脂質(zhì)體內(nèi)部的氣體從脂質(zhì)體中逃逸，從而破裂了脂質(zhì)體。在5瓦特功率及1MHz時(shí)，完全破壞鹽水溶液中的充氣脂質(zhì)體需要大約20～30分鐘。在10瓦特及1MHz時(shí)，完全破壞充氣脂質(zhì)體大約需要5分鐘。在提供高能量前后通過光顯微術(shù)檢測充氣脂質(zhì)體，發(fā)現(xiàn)在照射后球形充氣脂質(zhì)體消失。功率輸出和持續(xù)超聲波強(qiáng)度以系列實(shí)驗(yàn)試驗(yàn)充氣微粒體輸送DNA的能力。按上述由DPPC制備脂質(zhì)體，只是在干燥DPPC再懸浮時(shí)加入1CC生理鹽水中的，在7000bp質(zhì)粒上的2μgDNA(pCH10PharmaciaLKBBiotechnology，Piscataway，NJ)。然后按上述制備充氣脂質(zhì)體。在充氣脂質(zhì)體再懸浮后，外面的未截留的DNA可通過親合色譜法除去。將充氣脂質(zhì)體和DNA的懸浮液上柱(DNAspecificSephadexp)用蠕動(dòng)泵(E-comopunp，Bio—RadLaboratories.Hercules，CA)洗脫。DNA親合基質(zhì)粘合并保留了未截留的DNA。充氣微球體洗脫出去。也可按上述截留DNA的方法制備充水的脂質(zhì)體，只是省略了干燥空氣滴注的步驟。未截留的DNA經(jīng)層析而除去。然后將充氣脂質(zhì)體按上述進(jìn)行超聲波掃描。含DNA的充氣脂質(zhì)體對(duì)上述脈沖超聲波具有相似的回波反應(yīng)。用上述持續(xù)的超聲波掃描后，微粒體失去了其回波反應(yīng)性。用持續(xù)的超聲波處理后，通過碘化(Propidium)二聚物法檢定游離DNA(例如，充氣脂質(zhì)體之外的DNA)并將其與含DNA的充氣脂質(zhì)體(例如，未用持續(xù)的超聲波處理)的對(duì)照組比較。首先，將2ml充氣微球體的等分試樣加入一支試管中。然后加入2mlPBS(磷酸鹽緩沖鹽水)，并將該試管用帕拉膠膜密封。使試管倒置數(shù)次并放置約5分鐘，接著分離微球體。然后用巴斯德吸移管從試管中除去底部水層。將此程序重復(fù)三次以洗滌微球體。接著，將2m10.05mg/mlDNA等分試樣加入微球體中，密封試管并倒置混合。放置約5分鐘后，用巴斯德吸移管抽提底部水層。然后加入2mlPBS等分試樣并重復(fù)洗滌未束敷的DNA。將此程序重復(fù)共五次，并將水層進(jìn)行掃描分析。然后用2mlPBS稀釋微球體，并使用超聲波，直到觀察不到充氣微球體的存在。在使用超聲波檢測釋放的DNA后，將14ml濃度為2×10-5M的DMSO中的碘化Propidium二聚物(POPO—3iodide，MolecularProbes，Inc.Eugene，OR)作為對(duì)照，將14ml碘化Propidium加入單一的PBS，以及0.025μg/ml的PBS中的DNA。在SpexFluorolog2Spectrophotometer中使用534nm的激發(fā)頻率測量樣品的熒光。記錄558nm的熒光發(fā)射，如下表V所示。通過基于對(duì)照的由PBS中的碘化Propidium二聚物組成的PBS樣品的推斷，而測定各樣品中的DNA量的百分比。表V</tables>洗滌過程可除去未束敷的DNA。如表V所示，在五次洗滌后，充氣微粒體仍含約21％的質(zhì)粒DNA。因?yàn)榈饣疨ropidium二聚物的熒光無明顯增強(qiáng)，未暴露在高能量超聲波下的含DNA的充氣微球體保持了大量的其內(nèi)部的DNA。但是，持續(xù)的超聲波照射后，Propidium碘化物的熒光顯著增強(qiáng)顯示持續(xù)的超聲波能導(dǎo)致了充氣微球體的DNA的大量釋放。因此，在使用超聲波前，DNA保留在微球體中。由于使用超聲波，截留的DAN被釋放。實(shí)施例2將一種陽離子脂質(zhì)類，如DOTMA按1∶3體積摩爾比與DPPC混合?；旌衔锶苡诼确虏⑼ㄟ^旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去氯仿。在此干燥的材料中加入水并使用ExtruderDevice(LipexBiomembranes，Inc.，Vancouuer，BC)將此混合物壓濾過2μm濾器。然后按照公開于6/18/91的U.S.SerialNo.717,084的方法制備帶正電荷的充氣脂質(zhì)體，該文獻(xiàn)作為整體在此收編為參考文獻(xiàn)。通過加PBS，鹽水或其他合適的緩沖溶液(如HEPES緩沖液)將所得的干燥的，帶正電荷的充氣脂質(zhì)體再水合；一種渦旋器可被用于保證混合的均勻。加入DNA并再次振蕩混合物。由于DNA結(jié)合在陽離子充氣脂質(zhì)體表面，所以通過過濾或選擇性層析可除去未結(jié)合的DNA。到陽離子脂質(zhì)類被飽和為止，所有DNA實(shí)際上都結(jié)合上去。選擇性地，DAN可于在前的壓濾步驟中被加入，接著進(jìn)行上述步驟。然后將所得的DAN涂漬的脂質(zhì)體干燥并注入氣體產(chǎn)生含DNA的充氣脂質(zhì)體。然后將所得脂質(zhì)體暴露于持續(xù)的超聲波，并通過對(duì)超聲波的反射系數(shù)和吸收度試驗(yàn)脂質(zhì)體的破裂。不論DNA被束敷在充氣脂質(zhì)體的里面還是外部，都可用聲波釋放遺傳物質(zhì)。在充氣微球體外部的DNA的結(jié)合可允許微球體內(nèi)部有更大的空間以填充氣體。由于有效地增大了直徑，通?？筛行У厥褂贸暡芰繌奈⑶蝮w中釋放遺傳物質(zhì)?？梢韵嘈牛Y(jié)合DNA的陽離子脂質(zhì)類具有優(yōu)越性，例如，當(dāng)聲能使脂質(zhì)體膜破裂時(shí)，疏水基幫助DNA并入細(xì)胞，有助于通過細(xì)胞膜和亞細(xì)胞層。上述陽離子脂質(zhì)類有具有中和DNA陰電荷及兩親性的優(yōu)點(diǎn)。當(dāng)這些陽離子脂質(zhì)類從脂質(zhì)體中釋放時(shí)，由于脂質(zhì)類為兩親的而細(xì)胞膜是可溶的，它們有助于促進(jìn)DNA進(jìn)入細(xì)胞以及亞細(xì)胞層。實(shí)施例3制備由1∶2摩爾比的DOTMA和DPPC的脂質(zhì)體并用編碼為HLA(主要的組織相容性復(fù)合體)基因，HLA—B7的DNA涂漬。將涂漬DNA的脂質(zhì)體靜脈注射給患軟組織遷移性黑素瘤的病人。將1.0兆赫的持續(xù)超聲波照射核軟組織，使LHA—B7DNA在腫瘤上累積。可以相信某些腫瘤細(xì)胞將被HLA—B7基因轉(zhuǎn)染，結(jié)果可刺激病人T細(xì)胞排斥腫瘤的免疫反應(yīng)。實(shí)施例4對(duì)碎片腫瘤基因的抗過敏低聚核苷酸被截留在由聚乙二醇二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺組成的脂質(zhì)體內(nèi)。將該脂質(zhì)體靜脈注射給轉(zhuǎn)移結(jié)腸癌患者。對(duì)轉(zhuǎn)移瘤提供1.0兆赫的持續(xù)超聲波能。實(shí)施例5按上述使用卵磷脂酸膽堿和DOTMA，氯化N—[1—(2，3—二油酰氧)丙基]—N，N，N—三乙基銨則備充氣脂質(zhì)體，結(jié)合載有營養(yǎng)不良基用的YAC表面媒介物。將鎂微球體靜脈注射給Duchoinne′sMuscularDystrophy(orBeck-er′sMD)患者。對(duì)患者肌肉組織提供1.0兆赫持續(xù)的超聲波能量，可使肌肉的力量和質(zhì)量增加。實(shí)施例6將YAC表面媒介物上的CFTR(囊纖維化轉(zhuǎn)移膜調(diào)節(jié)器)基團(tuán)截留在截留有氬氣的由1∶1摩爾比的陽離子脂質(zhì)類和DPPC組成的微球體的微膠粒制劑。給囊纖維化患者靜脈注射該微球體并提供超聲波能量影響組織(例如，肺、胰，等)?；颊叻握骋盒罘e減少，基他受影響的器官的功能也有提高。實(shí)施例7給轉(zhuǎn)移性腎癌患者注射含轉(zhuǎn)錄白細(xì)胞介素—2(IL—2)基因的DNA的陽離子微球體。用超聲波掃描病人腹部癌瘤。如微球體在腫瘤部位蓄積，來自腫瘤的反向散射及超聲波反射的頻譜諧波倍量將有增加。增強(qiáng)超聲波能量，脈沖持續(xù)時(shí)向及脈沖重復(fù)頻率直到充氣微球體頻譜超聲波倍量從腫瘤上消失。通過仔細(xì)控制能量，如用水聽器檢測，控制成腔。該處理的結(jié)果是IL—基因轉(zhuǎn)染了一些腫瘤細(xì)胞。隨后T細(xì)胞淋巴細(xì)胞可對(duì)胞質(zhì)和浸潤物反應(yīng)，推毀腫瘤。實(shí)施例8給轉(zhuǎn)移性腎癌者注射含轉(zhuǎn)錄腫瘤壞死因子(TNA)基因的DNA的陽離子微球體。用超聲波掃描病人腹部腫瘤。如微球體在在腫瘤部位蓄積，來自腫瘤的反向散射及超聲波反射的頻譜諧波信號(hào)將有增加。增強(qiáng)超聲波能量，脈沖持續(xù)時(shí)間及脈沖重復(fù)頻率直到充氣微球體頻譜超聲波信號(hào)從腫瘤上消失。通過仔細(xì)地控制能量，如用水聽器檢測，控制成腔。該處理的結(jié)果是TNF基因轉(zhuǎn)染了一些腫瘤細(xì)胞。隨后腫瘤開始固定地產(chǎn)生TNF，并可導(dǎo)致大量的凝固性壞死。實(shí)施例9用抗腫瘤的單克隆抗體制備由二棕櫚酰磷膽堿和結(jié)合DNA的陽離子脂質(zhì)類組成的微球體。給轉(zhuǎn)移性黑素瘤患者靜脈注射涂漬抗黑素瘤抗原的單克隆抗體和含白細(xì)胞介素—2的微球體。用診斷超聲波掃描患者。軟組織中的腫瘤沉積物被充氣微球體反射為強(qiáng)光。當(dāng)用診斷超聲波檢測這些結(jié)時(shí)，將超聲波能量增加到5瓦特并聚焦于含腫瘤的轉(zhuǎn)移性沉積物。當(dāng)釋放傳遞時(shí)，檢測腫瘤的超聲波圖譜。當(dāng)反射由微球體定位的腫瘤的所有高頻譜信號(hào)消失時(shí)，將超聲波能量聚焦于具有指標(biāo)微球體的聲譜信號(hào)的新的腫瘤區(qū)。實(shí)施例10按照上述合成具有三種類型的表面結(jié)合反義DNA的陽離子充氣脂質(zhì)體。反義DNA為轉(zhuǎn)錄c—myc，c—myb，平滑肌生長因子，和肉皮細(xì)胞生長因子的基因的靶。將充氣脂質(zhì)體以動(dòng)脈內(nèi)給藥的形式輸送到血管成形部位。可以相信由于微球體破裂而釋放反義DNA將改善內(nèi)皮功能，減少凝固傾向。實(shí)施例11將二棕櫚酰磷酰膽堿(1克)懸浮于10ml含阿霉素的磷酸鹽緩沖的鹽水中，將該混懸液加熱至50℃，然后用手在圓底燒瓶中回蕩約30分鐘。除去熱源，將混懸液再回蕩2小時(shí)，回蕩時(shí)使混懸液冷卻至室溫，以形成含藥物的脂質(zhì)體。將制得的脂質(zhì)體放入與圖14相似的設(shè)備的容器中，冷卻至約-10℃，然后對(duì)其抽真空。將脂質(zhì)體的溫度升至1約10℃。高真空被保持48小時(shí)。48小時(shí)后，在四小時(shí)內(nèi)將氧氣逐步注入該容器，4小時(shí)后，將壓力恢復(fù)到大氣壓。結(jié)果得到含藥物的真空干燥氣體滴注的脂質(zhì)體，該充氣脂質(zhì)體在其內(nèi)部基本上避免了液體的存在，然后將該脂質(zhì)體懸浮在100CC磷酸鹽緩沖的鹽水中，并渦旋10分鐘，然后在約4℃儲(chǔ)存約三個(gè)月。實(shí)施例12為試驗(yàn)實(shí)施例11的脂質(zhì)體的超聲波回聲，將250mg脂質(zhì)體樣品懸浮于300CC非脫氣的磷酸鹽緩沖的鹽水中。使用AcousticImagingModel5200掃描儀(AccousticImag-ing，Phoenix，AZ)并應(yīng)用測量dB反射率的系統(tǒng)試驗(yàn)程序用7.5mHz發(fā)射器，以各種時(shí)間間隔掃描玻璃器中的脂質(zhì)體。在試驗(yàn)脂質(zhì)體前已知聲阻抗模型校準(zhǔn)該系統(tǒng)。該脂質(zhì)體顯示良好的dB反射率。實(shí)施例13將二棕櫚酰磷脂酰膽堿(1克)和防凍海藻糖(Cryopro-tectanttrehalose)(1克)懸浮于10ml含兩性霉素—β藥物的磷酸鹽緩沖的鹽水，將此混懸液加熱至約50℃，然后用手在圓底燒瓶中回蕩約30分鐘。除去熱源，將混懸液再回蕩2小時(shí)，回蕩時(shí)使混懸液冷卻至室溫，以形成脂質(zhì)體。將制得的脂質(zhì)體真空干燥并注入氣體，大體上按實(shí)施例11所示的步驟進(jìn)行，得到含藥物的，真空干燥的，氣體滴注的脂質(zhì)體，該脂質(zhì)體在其內(nèi)部基本上避免了液體的存區(qū)。然后將該脂質(zhì)體懸浮在10CC磷酸鹽緩沖的鹽水中并渦旋，然后在4℃儲(chǔ)存約數(shù)星期。使用前，通過具有附加在中心軸上的濾器的濾管注射而將充氣脂質(zhì)體擠壓過10μm聚碳酸酯濾器(Nuclepore，Costar，Pleasanton，CA)。實(shí)施例14基本上按照實(shí)施例12的步驟試驗(yàn)實(shí)施例13脂質(zhì)體的超聲波回聲。該脂質(zhì)體顯示良好的dB反射率。實(shí)施例15將二棕櫚酰磷脂酰膽堿(1克)懸浮于10ml含阿糖胞苷藥物的磷酸鹽緩沖的鹽水中，將該混懸液加熱至50℃，然后用于在圓底燒瓶中回蕩約30分鐘。通過具有加熱套筒的擠壓設(shè)備(ExtruderDeviceTM，LipexBiomembranes，Vancou-ver，Canada)將混懸液擠壓五個(gè)周期，擠壓前可進(jìn)行或不進(jìn)行常規(guī)的凍熔處理，擠壓期間保持約50℃的溫度。除去熱源，將混懸液再回蕩2小時(shí)，回蕩時(shí)使混懸液冷卻至室溫，以形成脂質(zhì)體?；旧习凑諏?shí)施例11所示的步驟，將所制備的脂質(zhì)體真空干燥氣體滴注，得到含藥物的，真空干燥的，氣體滴注的脂質(zhì)體，該充氣脂質(zhì)體在其內(nèi)部基本上避免了液體的存在。然后將該脂質(zhì)體懸浮在10CC磷酸鹽緩沖的鹽水中，在約4℃儲(chǔ)存數(shù)周。實(shí)施例16基本上按照實(shí)施例12的步驟試驗(yàn)實(shí)施例15的超聲波回聲。該脂質(zhì)體顯示良好的dB反射率。實(shí)施例17為了試驗(yàn)本發(fā)明含藥物脂質(zhì)體的穩(wěn)定性，用手將實(shí)施例11的脂質(zhì)體混懸液通過如圖10所示的注射管中的10微米聚碳酸酯濾器。擠壓處理后，按實(shí)施例12所述研究脂質(zhì)體的超聲波回波。令人驚奇地，本發(fā)明脂質(zhì)體在擠壓后仍基本上保持其回波產(chǎn)生。實(shí)施例18使用振子頻率為3到7.5mHz的超聲波掃描實(shí)施例11的脂質(zhì)體。結(jié)果顯示，在超聲波的高頻，回波產(chǎn)生更迅速地減弱，反映了相對(duì)高的共振頻率以及與較高頻率有關(guān)的較高能量。實(shí)施例19給癌癥患者靜脈注射包含于真空干燥的充氣脂質(zhì)體的藥物，該脂質(zhì)體基本上避免了其內(nèi)部的液體。含于脂質(zhì)體的藥物是阿霉素。靜脈注射時(shí)，通過自動(dòng)程序?qū)δ[瘤進(jìn)行超聲波掃描，并測定脂質(zhì)體的共振頻率。然后在脂質(zhì)體峰共振頻率將超聲波能量聚焦于腫瘤。超聲波能量不足以導(dǎo)致明顯的組織熱(即，無大于2℃的溫度變化)，但該超聲波能量是以導(dǎo)致腫瘤部位的脂質(zhì)體破裂并釋放阿霉素。這樣，使用脂質(zhì)體與超聲波完成了局部藥物輸送。實(shí)施例20給嚴(yán)重的局部真菌感染的病人靜脈注射包含藥物的真空干燥的氣體滴注的脂質(zhì)體，該充氣脂質(zhì)體基本上避免了其內(nèi)部的液體，以基本上與實(shí)施例19所述相似的方式使用超聲波完成局部藥物輸送。含于脂質(zhì)體的藥物兩性霉素—B被有效地輸送到感染部位。實(shí)施例21為了制備充氣脂質(zhì)體，將50mg1，2—棕櫚?！猄n—甘油基—3—膽堿磷酸(MW734.05，粉末LotNo.160pc—183)(Avanti—PolarLipids，Alabaster，AL)稱重并用5.0ml鹽水(0.9％NaCl)或磷酸鹽緩沖的鹽水(0.8％氯化鈉，0.02％氯化鉀，0.115％磷酸二鈉和0.02％磷酸一鉀，PH調(diào)節(jié)到7.4)在離心管中水合。然后，將水合混懸液置于渦旋機(jī)(ScientificIndustries，Bohemia，NY)中，在儀器6.5檔搖動(dòng)10分鐘。然后記下12ml的總體積。鹽水溶液由5.0ml減少到約4ml。然后通過光學(xué)顯微鏡測量經(jīng)這種新方法制備的充氣微球體的大小。發(fā)現(xiàn)最大的脂質(zhì)體約50到約60μm，而最小的約8μm。平均大小范圍為約15到約20μm。然后通過10或12μm“NUCLEPORE”膜，使用Swin—LokFilterHolder，(“NUCLEPORE”FiltrationProducts，CostarCorp.，Cambridge，MA)和20CC注射管(BectonDickinsin&Co.，Rutherford，NJ)過濾該充氣脂質(zhì)體。濾膜為10或12μm“NUCLEPORE”膜(NucleporeFiltrationProducts，CostarCorp.，Cambrige，MA)。將10.0μm濾膜安裝在Swin—LokFilterHolder，并安且地將蓋上緊。將脂質(zhì)體溶液搖動(dòng)并經(jīng)18號(hào)針(gaugeneedle)移入20CC注射管。大約12ml脂質(zhì)體溶液被置于注射管中，并將注射管按到Swin—LokFilterHolder上。顛倒注射管和濾器支持物，以使較大的充氣脂質(zhì)體囊升至頂部。慢慢地推上注射管，以這種方式過濾充氣脂質(zhì)體。通過10.0μm濾器擠壓后充氣脂質(zhì)體的殘存率(擠壓過程后保存的充氣脂質(zhì)體的量)約為83—92％。擠壓前，泡沫狀物的體積的約為12ml而水溶液的體積約4ml。擠壓后，泡沫狀物的體積為10—11ml而水溶液的體積約為4ml。再用光學(xué)顯微鏡檢測擠壓后充氣脂質(zhì)體大小的分配。檢測范圍為為約25到約30μm的最大脂質(zhì)體和約5μm的最小脂質(zhì)體。平均大小的范圍為約8到約15μm。已發(fā)現(xiàn)過濾后，90％以上的充氣脂質(zhì)體小于15μm。實(shí)施倒22將50mg1，2—二棕櫚酰—sn—甘油基—3—膽堿磷酸(MW734.05，粉末)(Avanti—PolarLipids，Alabaster，AL)稱重并放入離心管中。然后用5.0ml鹽水溶液(9％NaCl)水合該脂質(zhì)。將該脂質(zhì)在儀器6.5擋渦旋10分鐘。渦旋后，將全部溶液在液氮中冷卻。然后將樣品放在冷凍干燥器中冷凍干燥。樣品在冷凍干燥中放置18小時(shí)。以冷凍干燥器中取出干燥的脂質(zhì)并在5ml鹽水溶液中再水合，在6.5檔渦旋十分鐘。將該溶液的少量樣品移在載玻片上并在顯微鏡下觀察該溶液。然后測量充氣脂質(zhì)體的大小。檢測到最大的脂質(zhì)體約60μm而最小的約20μm。平均大小范圍約30到約40μm。實(shí)施例23將50mg1，2—二棕櫚?！猄n—甘油基—3—膽堿磷酸(MW734.05，粉末)(Avanti—PolarLipids，Alabastar，AL)稱重并放入離心管中。以盤卷的方式將大約兩英尺的膠管(0.25in內(nèi)徑)繞在圓錐形離心管上。然后用絕緣膠布將膠管固定在離心管上。將膠管與恒溫循環(huán)浴(VWRScientif-icModel1131)連接。該浴的溫度固定于60℃，循環(huán)水在管內(nèi)高速循環(huán)。在脂質(zhì)溶液中放入溫度計(jì)，測得溫度在42°和50℃之間，這是脂質(zhì)的相轉(zhuǎn)變溫度。將該脂質(zhì)溶液在渦旋儀6.5檔渦旋10分鐘。顯然，很少脂質(zhì)(相轉(zhuǎn)變溫度＝40℃)的泡沫未明顯地形成充氣脂質(zhì)體。光學(xué)顯微鏡中可明顯地看到溶液中的大量脂質(zhì)微粒。在此溫度下形成的充氣脂質(zhì)體的數(shù)量比在低于相轉(zhuǎn)變溫度的溫度下形成的數(shù)量少3％。將該溶液放置15分鐘直到溶液溫度與室溫(12℃)平衡。然后將溶液渦旋10分鐘。10分鐘后，充氣脂質(zhì)體明顯地形成。實(shí)施例24將50mg1，2—二棕櫚?！猄n—甘油基—3—膽堿磷酸(MW734.05，粉末)(Avanti—PolarLipids，Alabaster，AL)稱重并放入離心管中。然后用5.0ml的9％NaCl水合該類脂。將脂質(zhì)水溶液在渦旋器6.5擋渦旋10分鐘。渦旋后，將全部溶液在液氮中冷卻。然后將其在室溫(25℃)的水浴熔化。將冷凍熔化步驟重復(fù)八次。將水合的混懸液在渦旋儀6.5擋渦旋10分鐘。然后按實(shí)施例21所述方法檢測充氣脂質(zhì)體。實(shí)施例25準(zhǔn)備兩只離心管，各裝有50mgDPPC。將1mol％(～0.2mgofDuponolClotNo.2832)十二烷基硫酸鈉，一種乳化劑，加入一只離心管中，在另一只離心管中加入10mol％(2.0mgofDuponolClotNo.2832)。在兩只離心管中各加入5ml9％NaCl。將兩只離心管都在液氮中冷卻并冷凍干燥大約16小時(shí)。從冷凍干燥器中取出兩個(gè)樣品并各加5ml鹽水。在6.5擋將兩只離心管渦旋10分鐘。經(jīng)測定，加1mol％十二烷基硫酸鈉形成的最大的充氣脂質(zhì)體約為75μm，而最小的約為6μm。平均大小范圍為約15至約40μm。加10mol％十二烷基硫酸鈉形成的最大充氣脂質(zhì)體約為90μm，而最小的約為6μm。平均大小的范圍為約15到約35μm。含加入1mol％十二烷基硫酸鈉形成的充氣脂質(zhì)體的溶液的泡沫體積約為15ml，而水溶液體積約為3—4ml。含加入10mol％十二烷基硫酸鈉形成的充氣脂質(zhì)體的溶液的泡沫的體積也約為15ml，而水溶液的體積也約為3—4ml。實(shí)施例26這個(gè)實(shí)施例測定是否可用聲能來制備充氣脂質(zhì)體。將50mg脂質(zhì)，1，2—二棕櫚?！猄n—甘油基—3—膽堿磷酸(Avanti—PolarLipids，Alabasten，AL)稱重并用5ml9％NaCl水合。使用HeatSystemsSonicatorUltrasonicPro-cessorXL(HeatSystems，Inc.Farmingdale，NY)ModelXL2020向該水溶液發(fā)射聲能以代替渦旋。調(diào)節(jié)鈕位于4檔的聲波發(fā)生器發(fā)射出頻率為20KHz的連續(xù)聲波。使用一個(gè)微型末端(microtip)進(jìn)行聲波掃描10分鐘。聲波掃描后，在光學(xué)顯微鏡下觀察該溶液。未見充氣脂質(zhì)體已被制備。接著除去聲波發(fā)生器的微型末端放回聲波發(fā)生器的端套中。制備另一種溶液(每5ml鹽水50mg脂質(zhì))并用該末端進(jìn)行聲波掃描。10分鐘后，在顯微鏡下觀察溶液。也未發(fā)現(xiàn)充氣脂質(zhì)體。實(shí)施例27這個(gè)實(shí)施例測定是否有中止充氣脂質(zhì)體產(chǎn)生的脂質(zhì)的低濃度限度。將10mg1，2—二棕櫚—Sn—甘油基—3—膽堿磷酸(Avanti—PolarLipids，Alabaster，AL)加入10ml鹽水溶液(0.9％W∶VNaCl)中。在6.5檔將脂質(zhì)/鹽水溶液渦旋10分鐘。在按大小分類的光學(xué)顯微鏡下觀察溶液。測定的最大脂質(zhì)體的大小的范圍為約30到約45μm而最小脂質(zhì)體的大小為約7μm。平均大小范圍為約30到約45μm。顯然，由于該充氣脂質(zhì)體更易破裂，因此它們比前述的脂質(zhì)體更易碎。因此，脂質(zhì)的濃度顯然是充氣脂質(zhì)體產(chǎn)生和穩(wěn)定性的一個(gè)同類。實(shí)施例28將未過濾的充氣脂質(zhì)體倒入50ml注射管中并通過串聯(lián)的，間距最小的150μm的如圖11和12所示的“NUCLE-PORE”10μm濾器和8μm濾器。兩者挑一地，例如，樣品也可通過相互緊密重迭的10μm和8μm濾器過濾。充氣脂質(zhì)體在使流速為2.0mlmin-1的壓力下通過濾器。然后測量隨后過濾的充氣脂質(zhì)體的產(chǎn)量，結(jié)果已過濾的充氣類微球體的體積為未過濾的體積的80—90％。以四種不同的方法篩分所得充氣脂質(zhì)體以測量其大小和分布。篩分是在ParticleSizingSystemsModel770光學(xué)篩分儀，與UniversalImaging制造的圖形處理軟件聯(lián)接的ZeissAxiplan光學(xué)顯微鏡，和CoulterCounter(CoulterElectvonilsLimited，Luton，Beds.，England)上完成的。如圖15和16所示，該充氣脂質(zhì)體的大小比未過濾的脂質(zhì)體更一致地分布在8—10μm。因此，經(jīng)過濾的充氣脂質(zhì)體具有更一致的大小。實(shí)施例29將250mgDPPC(二棕櫚酰磷脂酰膽堿)和10ml0.9％NaCl加入一只50mlFalcon離心管(Becton—Dickinson，Lincolnpark，NJ)中并保持室溫(大約20℃)。然后在氮?dú)鈮毫ο聦⒒鞈乙簲D壓通過1μm“NUCLEPORE”(Costar，Pleasonton，CA)聚碳酸酯膜。將所得混懸液用ParticleSiz-ingSystems(SantaBarbara，CA)Model37。激光散射篩分儀篩分。所有脂質(zhì)微粒的外徑為1μm或小于1μm。另外在18,000P.s.i.的壓力下將相同的量的DPPC混懸液通過MicrofluidicsTM(MicrofluidicsCorporation，Nem-ton，MA)微流化器五次。將變得明亮的混懸液用ParticleSizingSystems(SantaBarbara，CA)SubPartideSizerMod-el370激發(fā)散射篩分儀篩分，發(fā)現(xiàn)其大小均小于1μm。已知流化的混懸液的微粒大小可保持穩(wěn)定達(dá)六個(gè)月。實(shí)施例30將100mgDSPC(二硬脂酰磷脂酰膽堿)和10ml0.9％NaCl加入50mlFalcon離心管(Becton—Dickinson，Lin-colnPark，NJ)中。在300—800p.s.i的氮?dú)鈮合聦⒒鞈乙簲D壓通過1μm“NUCLEPORE”(Costar，Pleasanton，CA)聚碳酸酯膜。將所得混懸液用ParticleSizingSystems(SantaBarbara，CA)SubMicronParticleSizerModel370激光散射篩分儀篩分。發(fā)現(xiàn)所有微粒均小于1μm。另外，在18,000p.s.i.的壓力下將相同量的DPPC混懸液通過MicrofluidicsTM(MicrofluidicsCorporation，New-ton，MA)微流化器(Microfluidizer)五次。將變得明亮的混懸液用SubMicronParticleSizerSystemModlel370激光散射篩分儀篩分，發(fā)現(xiàn)其大小均小于1μm。實(shí)施例31將實(shí)施例29和30的先篩分的混懸液在BarnsteadModel(57835)壓熱器(Barnstead/Thernoyen，Dubuque，IA)中壓熱。與室溫平衡后，無菌的混懸液用于氣體的注入。實(shí)施體32將預(yù)先被擠壓通過1μm濾器并壓熱二十分鐘的10ml25mg/ml的1，2—二棕櫚磷脂酰膽堿在0.9％NaCl中的溶液加入FalconSoml離心管(Becton—Dickinson，LincolnPark，NewJersey)中。脂質(zhì)混懸液與室溫(大約20℃)平衡后，將此液體在VWRGenie—2(120V，o.Samp，60Hz.)(ScientificIndustries，Inc.，BohemiaNY)渦旋10分鐘，直到充氣脂質(zhì)體的總體積至少為原來脂質(zhì)水溶體積的二或三倍。管底的溶液幾乎完全沒有無水脂質(zhì)微粒，得到大量含充氣脂質(zhì)體的泡沫。因此，預(yù)先壓熱不影響脂質(zhì)混懸液形成充氣脂質(zhì)體的能力。壓熱不改變脂質(zhì)體的大小，不降低脂質(zhì)混懸液形成充分脂質(zhì)體的能力。實(shí)施例33將預(yù)先被擠壓通過1μm濾器并壓熱二十分鐘的10ml25mg/ml的1，2—十棕櫚酰磷脂酰膽堿在0.5％NaCl中的溶液加入Falcon50ml離心管中(Becton—Dickinson，LincolnPark，MJ)。脂質(zhì)混懸液與室溫(大約20℃)平衡后，將離心管垂直放入VWRScientificOrbital搖動(dòng)器(VWRScientific，Cerritos，CA)中以300r.p.m檔搖動(dòng)30分鐘。在搖動(dòng)器臺(tái)上攪拌得到充氣脂質(zhì)體。實(shí)施例34將預(yù)先被擠壓通過1μm濾器并壓熱二十分鐘的10ml25mg/ml的1，2—二棕櫚酰磷酰膽堿在0.9％NaCl中的溶液加入Falcon50ml離心管(Becton—Dickinson，Lincolnpark，NJ)中。脂質(zhì)混懸液與室溫(大約20℃)平衡后，將離心管固定在1加侖空的家用噴涂器中，隨后放在手工噴涂混合器中做15分鐘的旋轉(zhuǎn)。渦旋混合后，取出離心管，顯然，充氣脂質(zhì)體已形成。實(shí)施例35將預(yù)先被擠壓通過1μm濾器并壓熱二十分鐘的10ml25mg/ml的1，2—二棕櫚酰磷脂酰膽堿在0.9％NaCl中的溶液加入Falcon離心管(Becton—Dickinson，LincolnPark，NJ)中。脂質(zhì)類混懸液與室溫(大約20℃)平衡后，用手將離心管用力搖動(dòng)十分鐘。搖動(dòng)停止后，充氣脂質(zhì)體形成。實(shí)施例36按實(shí)施例32所述制備充氣脂質(zhì)體。將所得未過濾的脂質(zhì)體倒入50ml注射器并壓過由“NUCLEPORE”(Costar，PleasantonCA)10μm濾器以150μm的間隔聯(lián)著8μm濾器的串聯(lián)過濾系統(tǒng)。另外，對(duì)分離的樣品使用相互重選10μm和8μm濾器。充氣脂質(zhì)體在使其過濾速度為2.0ml/min的壓力下通過濾器。過濾過的充氣脂質(zhì)體的體積為未過濾的體積的80—90％。以四種不同的方法篩分所得充氣脂質(zhì)體以測量其大小分布。篩分是在ParticleSizingSystems(SantaBarbara，CA)Model770光學(xué)篩分儀，與UniversalImaging(Vniver-salImaging，WestChester，PA)制造的圖形處理軟件聯(lián)接的ZeissAxiplan光學(xué)顯微鏡和CoulterCounter(CoulterElectronicsLimited，Luton，Beds.，England)上完成的。如圖18所示，該充氣脂質(zhì)體的大小比未過濾的脂質(zhì)體更一致地分布在8—10μm。除這里顯示和描述的以外的本發(fā)明的各種修改，對(duì)于本領(lǐng)域熟練的技術(shù)人員來說，可由上述顯而易見。這樣的修改也落入附加的權(quán)利要求的范圍。權(quán)利要求1.一種靶定位治療劑傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)包含充氣微球體，其中所述氣微球體包含有治療化合物。2.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體含有相變溫度大于20℃的材料。3.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體的外直徑小于100μm。4.權(quán)利要求3所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體的外直徑小于10μm。5.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體含有類脂物質(zhì)。6.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述治療化合物包括遺傳物質(zhì)。7.權(quán)利要求6所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述遺傳物質(zhì)為脫氧核糖核酸。8.權(quán)利要求6所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述遺傳物質(zhì)為核糖核酸。9.權(quán)利要求6所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，該系統(tǒng)包含反義核糖核酸或反義脫氧核糖核酸。10.權(quán)利要求6所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體包含陽離子類脂物質(zhì)。11.權(quán)利要求10所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述陽離子類脂包括N-[1-(2，3-二油酰氧基)丙基]-N，N，N-三甲基氯化銨。12.權(quán)利要求5所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述類脂選自二硬脂酰磷脂酰膽堿，二棕櫚酰磷脂酰膽堿和卵磷脂酰膽堿。13.權(quán)利要求7所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述治療化合物包括編碼有至少部分選自下述基因的脫氧核糖核酸人主要組織相容性基因，營養(yǎng)障礙，cysticFibrosis跨膜傳導(dǎo)調(diào)節(jié)因子，白介素-2和腫瘤壞死因子。14.權(quán)利要求9所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述治療化合物包括能結(jié)合至少部分編碼有Ras的脫氧核苷酸的反義寡核苷酸。15.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述治療劑包括單克隆抗體。16.權(quán)利要求15所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述單克隆抗體能結(jié)合黑瘤抗原。17.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體包括其內(nèi)部其本上無液體但其中封裝有治療化合物的充氣脂質(zhì)體。18.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體包括通過真空干燥氣體滴注法制備的且其中封裝有治療化合物的充氣脂質(zhì)體。19.權(quán)利要求1所述的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體包括通過凝膠態(tài)振蕩氣體滴注法制備的充氣脂質(zhì)體。20.控制釋放治療化合物到患者病灶區(qū)的方法，該方法包括(i)對(duì)患者給用包含治療化合物的充氣微球體；(ii)利用超聲波監(jiān)控微球體以確定微球體在病灶區(qū)內(nèi)的存在；和(iii)使用超聲波破裂微球體使治療化合物在病灶區(qū)釋出。21.權(quán)利要求20所述的方法，其中微球體經(jīng)靜脈內(nèi)給藥。22.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述微球體由二棕櫚酰磷酯酰膽堿組成。23.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述微球體填充有選自空氣、氮?dú)舛趸?、氧氣、氬氣、氙氣、氦氣以及氖氣的氣體。24.權(quán)利要求23所述的方法，其中所述微球體填充有氮?dú)狻?5.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述類脂體懸浮在水介質(zhì)中貯存。26.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述微球體的反射系數(shù)在2dB和20dB之間。27.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述微球體包括其內(nèi)部基本上無液體但其中封裝有治療化合物的充氣脂質(zhì)體。28.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述微球體包括通過真空干燥氣體滴注法制備的且其中封裝有治療化合物的充氣脂質(zhì)體。29.權(quán)利要求20所述的方法，其中所述微球體包括通過凝膠振蕩氣體滴注法制備的充氣脂質(zhì)體。30.制備包含充氣脂質(zhì)體的靶定位治療劑傳遞系統(tǒng)的方法，所述方法包括在氣體存在下，于低于類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度下振蕩包含有類脂和治療化合物的水溶液的步驟。31.如權(quán)利要求30所述的方法，其中所述振蕩步驟包括渦旋。32.如權(quán)利要求30所述的方法，該方法進(jìn)一步包括過濾和加熱滅菌所述類脂水溶液的步驟。33.如權(quán)利要求30所述的方法，該方法進(jìn)一步包括將所述充氣脂質(zhì)體通過至少一個(gè)選定孔徑大小的濾器壓出。34.如權(quán)利要求33所述的方法，其中所述孔徑大小約為10μm或更小。35.如權(quán)利要求30所述的方法，進(jìn)一步包括水合干燥類脂形成包含類脂的水溶液。36.制備包含充氣脂質(zhì)體的靶定位治療劑傳遞系統(tǒng)的方法，所述方法包括下列步驟在氣體存在下，于低于類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度下振蕩包含類脂的水溶液形成充氣脂質(zhì)體；以及向所述類脂體中加入治療化合物。37.如權(quán)利要求36所述的方法，其中所述振蕩步驟包括渦旋。38.如權(quán)利要求36所述的方法，該方法進(jìn)一步包括過濾和加熱滅菌所述脂質(zhì)水溶液步驟。39.如權(quán)利要求36所述的方法，該方法進(jìn)一步包括通過至少一個(gè)選定孔徑大小的濾器壓出所述脂質(zhì)體。40.如權(quán)利要求39所述的方法，其中所述孔徑大小約為10μm或更小。41.如權(quán)利要求36所述的方法，該方法進(jìn)一步包括水合干燥類脂形成包含類脂的水溶液。42.制備包含充氣脂質(zhì)體的靶定位治療劑傳遞系統(tǒng)的方法，所述方法包括下列步驟在氣體存在下振蕩包含類脂和治療化合物的水溶液；以及分離所形成的充氣脂質(zhì)體供治療使用。43.制備包含充氣脂質(zhì)體的靶定位治療劑傳遞系統(tǒng)的方法，所述方法包括下列步驟在氣體存在下，于低于類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度下振蕩包含類脂的水溶液形成充氣脂質(zhì)體；加入治療化合物；以及分離所形成的充氣脂質(zhì)體供治療使用。44.制備包含治療劑的充氣脂質(zhì)體微球體的方法，該方法包括下列步驟a)將包含類脂和治療化合物的水溶液引入容器內(nèi)；b)將氣體引入所述容器內(nèi)；c)在所述氣體存在下，充分劇烈振蕩所述類脂水溶液以便滴注至少部分所述氣體到所述水溶液內(nèi)，在所述水溶液的上面產(chǎn)生包含充氣脂質(zhì)體的泡沫；以及d)從所述容器內(nèi)分離至少部分所述包含充氣脂質(zhì)體的泡沫。45.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，該方法進(jìn)一步包括冷卻所述水溶液的步驟。46.根據(jù)權(quán)利要求45的方法，其中所述冷卻所述水溶液的步驟包括在低于所述水溶液內(nèi)的類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度下冷卻所述水溶液。47.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，該方法進(jìn)一步包括對(duì)所述容器加壓。48.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，進(jìn)一步包括篩分所述充氣脂質(zhì)體的步驟。49.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中篩分所述充氣脂質(zhì)體的步驟包括控制從所述容器中提取的所述充氣脂質(zhì)體的大小。50.根據(jù)權(quán)利要求49的方法，其中從所述容器中提取的所述充氣脂質(zhì)體的大小是通過濾器提取所述充脂質(zhì)體進(jìn)行控制。51.根據(jù)權(quán)利要求49的方法，其中從所述容器中提取的所述充氣脂質(zhì)體的大小是通過在所述容器內(nèi)部調(diào)整充氣脂質(zhì)體的位置進(jìn)行控制，其中所述容器是指提取充氣脂質(zhì)體的容器。52.根據(jù)權(quán)利要求49的方法，其中從所述容器中提取的所述充氣脂質(zhì)體的大小是在從所述容器中提取所述充氣脂質(zhì)體在所述容器內(nèi)的位置進(jìn)行控制，其中所述容器是提取充氣脂質(zhì)體的容器。53.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中篩分所述充氣脂質(zhì)體的步驟包括通過濾器壓出所述提取的充氣脂質(zhì)體。54.根據(jù)權(quán)利要求48的方法，其中所述篩分所述充氣脂質(zhì)體的步驟包括控制所述振蕩的強(qiáng)度。55.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，該方法進(jìn)一步包括將從所述容器中提取的所述充氣脂質(zhì)體不需進(jìn)一步處理直接注入到注射器內(nèi)的步驟。56.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述振蕩所述水溶液的步驟包括以每分鐘至少60次振蕩頻率振蕩的步驟。57.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述的振蕩所述水溶液的步驟包括渦旋所述水溶液的步驟。58.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述的振蕩所述水溶液的步驟包括振蕩所述容器的步驟。59.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述的振蕩所述水溶液的步驟包括在少于30分鐘內(nèi)充分劇烈振蕩所述水溶液產(chǎn)生所述包含充氣脂質(zhì)體的泡沫。60.根據(jù)權(quán)利要求44的方法，其中所述的振蕩所述水溶液的步驟包括根據(jù)對(duì)所述包含充氣脂質(zhì)體的泡沫的檢測，控制所述振蕩時(shí)間的步驟。61.根據(jù)權(quán)利要求60的方法，其中基于對(duì)包含充氣脂質(zhì)體的泡沫的檢測控制所述振蕩時(shí)間的步驟包括振蕩至檢測到預(yù)定體積量所述泡沫為止。62.制備包含治療劑的充氣脂質(zhì)體的設(shè)備，包括a)容器b)將包含脂質(zhì)和治療化合物的水溶液導(dǎo)入到所述容器內(nèi)的裝置；c)將氣體導(dǎo)入到所述容器內(nèi)的裝置；和d)將所述氣體滴注到處于所述容器內(nèi)的所述水溶液中，由此在所述容器內(nèi)產(chǎn)生包含充氣脂質(zhì)體的泡沫所用的裝置。63.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，其中所述的導(dǎo)入類脂水溶液所用的裝置包括導(dǎo)入干燥類脂的裝置，導(dǎo)入治療化合物的裝置，以及導(dǎo)入水介質(zhì)到所述容器內(nèi)所用的裝置。64.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，其中所述的滴注所述氣體到所述水溶液內(nèi)所用的裝置包括振蕩所述水溶液的裝置。65.根據(jù)權(quán)利要求64的設(shè)備，其中所述的振蕩所述水溶液的裝置包括振蕩所述容器的裝置。66.根據(jù)權(quán)利要求64的設(shè)備，其中所述的振蕩所述水溶液的裝置包括渦旋所述水溶液的裝置。67.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，進(jìn)一步包括冷卻所述水溶液的裝置。68.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，進(jìn)一步包括從所述容器提取所述泡沫的裝置。69.根據(jù)權(quán)利要求68的設(shè)備，其中所述的從所述容器內(nèi)提取所述泡沫的裝置包括調(diào)整從所述容器中提取所述泡沫的垂直位置的裝置。70.根據(jù)權(quán)利要求68的設(shè)備，進(jìn)一步包括通過濾器裝配流出所述所提取的充氣脂質(zhì)體的裝置。71.根據(jù)權(quán)利要求70的設(shè)備，其中所述的濾器裝配包括間隔為預(yù)定距離的第一和第二濾器。72.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，進(jìn)一步包括篩分所述充氣脂質(zhì)體的裝置。73.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，進(jìn)一步包括與所述容器流體相連的濾器。74.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，進(jìn)一步包括對(duì)所述容器進(jìn)行加壓的裝置。75.根據(jù)權(quán)利要求62的設(shè)備，進(jìn)一步包括將從所述容器中產(chǎn)生的所述充氣脂質(zhì)體基本上不經(jīng)進(jìn)一步處理直接注入到注射器內(nèi)的裝置。76.根據(jù)權(quán)利要求46的方法，該方法進(jìn)一步包括對(duì)所述容器施加壓力的步驟。77.根據(jù)權(quán)利要求67的設(shè)備，其中所述的冷卻所述水溶液的裝置包括在低于所述水溶液內(nèi)的類脂的凝膠態(tài)至液晶態(tài)的相變溫度下冷卻所述水溶液的裝置。78.根據(jù)權(quán)利要求77的設(shè)備，進(jìn)一步包括對(duì)所述容器加壓的裝置。79.權(quán)利要求5的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述類脂材料包括至少一種選自如下的類脂二棕櫚酰磷脂酰膽堿，二棕櫚酰磷脂酰乙醇胺，和磷脂酸，并且所述脂質(zhì)體進(jìn)一步包括聚乙二醇。80.權(quán)利要求5的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述類脂材料包括至少一種二棕櫚酰類脂。81.權(quán)利要求1的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述治療劑選自碳水化合物類、肽類、糖肽、糖脂和外源凝集素，所述的治療劑滲合在所述微球體的表面。82.權(quán)利要求44的方法，其中所述容器為注射器的套管，所述注射器還包含至少一個(gè)濾器和針頭；所述提取步驟包括通過從所述套管內(nèi)，壓出所述脂質(zhì)體通過所述濾器篩分所述充氣脂質(zhì)體。83.權(quán)利要求44的方法，其中所述注射器包括注射器的套管。84.權(quán)利要求83的方法，其中所述注射器還包含至少一個(gè)濾器和針頭；所述提取步驟包括通過從所述套管內(nèi)壓出所述脂質(zhì)體通過所述濾器篩分所述充氣脂質(zhì)體。85.權(quán)利要求53的方法，包括將所述脂質(zhì)體吸入到注射器內(nèi)，所述注射器包括套管，至少一個(gè)濾器和針頭；由此，當(dāng)吸入所述脂質(zhì)體到管內(nèi)時(shí)，濾器篩分所述脂質(zhì)體。86.權(quán)利要求44的方法，包括壓出所述脂質(zhì)體到注射器的套管內(nèi)，所述注射器還包括至少一個(gè)濾器和針頭，由此當(dāng)從所述套管內(nèi)壓出所述脂質(zhì)體時(shí)，濾器篩分所述脂質(zhì)體。87.權(quán)利要求44的方法，其中所述提取步驟包括將所述含充氣脂質(zhì)體的泡沫吸入到注射器內(nèi)，所述注射器包含管子，至少一個(gè)濾器和針頭；由此篩分所述脂質(zhì)體。88.權(quán)利要求68的設(shè)備，其中所述容器為注射器的套管，所述注射器還包括至少一個(gè)濾器和針頭；所述提取裝置包括通過從所述套管內(nèi)壓出所述脂質(zhì)體通過所述濾器篩分所述充氣脂質(zhì)體的裝置。89.權(quán)利要求68的設(shè)備，其中所述容器包括注射器的套管。90.權(quán)利要求89的設(shè)備，其中所述注射器還包括至少一個(gè)濾器和針頭；所述提取裝置包括通過從所述套管內(nèi)壓出所述脂質(zhì)體通過所述濾器篩分所述充氣脂質(zhì)體的裝置。91.權(quán)利要求62的設(shè)備，其中所述容器為注射器的套管，所述注射器還包括至少一個(gè)濾器和針頭；當(dāng)所述脂質(zhì)體吸入到套管內(nèi)時(shí)所述濾器為篩分所述脂質(zhì)體的裝置。92.權(quán)利要求62的設(shè)備，其中所述容器注射器的套管，所述注射器還包括至少一個(gè)濾器和針頭；當(dāng)從所述套管內(nèi)壓出所述脂體時(shí)所述濾器為篩分所述脂質(zhì)體的裝置。93.權(quán)利要求68的設(shè)備，其中所述提取裝置包括吸入所述包含充氣脂質(zhì)體的泡沫到注射器內(nèi)所用的裝置，所述注射器包括套管，至少一個(gè)濾器，以及針頭；由此篩分所述脂質(zhì)體。94.靶定位治療劑傳遞設(shè)備，該設(shè)備包括具有套管，濾器裝配，和針頭的注射器，所述濾器裝配安裝在所述套管和針頭之間且包括至少一個(gè)濾器，所述套管內(nèi)包含有包含充氣微球體的靶定位治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述充氣微球體包含有治療化合物。95.權(quán)利要求94的設(shè)備，其中所述濾器裝置為階式濾器裝置，該裝置包括具有正對(duì)針頭的面和正對(duì)套管的面的第一濾器，以及第二濾器，在所述第一濾器的正對(duì)針頭和正對(duì)管子的面上依次有第一和第二金屬網(wǎng)隔膜，在第二金屬網(wǎng)隔膜和第二濾器之間有O形環(huán)，并且其中所述第二濾器與第一濾器的正對(duì)管子的面的間隔約為150μm。96.權(quán)利要求95的設(shè)備，所述第一濾器和第二濾器都具有微孔，所述第二濾器的微孔大小約為10μm并且第一濾器的微孔大小約為8μm。97.權(quán)利要求94的設(shè)備，其中所述濾器具有微孔，所述微孔的大小約30nm至20微米之間。98.權(quán)利要求94的設(shè)備，其中所述濾器具有微孔，所述微孔的大小約為8μm。99.權(quán)利要求91的設(shè)備，該設(shè)備裝有第一濾器和第二濾器，所述第一個(gè)濾器和第二濾器具有微孔，所述第一濾器的微孔大小約為10μm并且第二濾器的微孔大小約為8μm。100.權(quán)利要求91的設(shè)備，其中所述濾器具有微孔，所述微孔的大小約在30nm至20微米之間。101.權(quán)利要求91的設(shè)備，其中所述濾器具有微孔，所述微孔的大小約為8μm。102.權(quán)利要求92的設(shè)備，該設(shè)備裝有第一個(gè)濾器和第二濾器，所述第一濾器和第二濾器均具有微孔，所述第一濾器的微孔大小約為10μm且第二濾器的微孔大小約為8μm。103.權(quán)利要求92的設(shè)備，其中所述濾器具有微孔，所述微孔的大小在30nm至20微米之間。104.權(quán)利要求92的設(shè)備，其中所述濾器具有微孔，所述微孔的大小為8μm。105.權(quán)利要求20的方法，其中所述微球體通過噴霧器給藥。106.權(quán)利要求105的方法，其中所述微球體靶定位給藥到肺部。107.權(quán)利要求106的方法，其中所述治療劑為反義ras/p53。108.權(quán)利要求30的方法在高于環(huán)境壓力的壓力下進(jìn)行。109.權(quán)利要求36的方法在高于環(huán)境壓力的壓力下進(jìn)行。110.權(quán)利要求42的方法在高于環(huán)境壓力的壓力下進(jìn)行。111.權(quán)利要求46的方法在高于環(huán)境壓力的壓力下進(jìn)行。全文摘要本發(fā)明描述了包含充氣微球體的治療劑傳遞系統(tǒng)，其中所述微球體中包含有治療劑。還提供了這類微球體在治療藥物傳遞應(yīng)用中的使用方法。優(yōu)選包含其中封裝有藥物的充氣脂質(zhì)體的藥物傳遞系統(tǒng)。還公開了制備這類脂質(zhì)體的方法和設(shè)備以及在藥物傳遞應(yīng)用中使用這類脂質(zhì)體的方法。文檔編號(hào)A61K49/22GK1125394SQ94192404公開日1996年6月26日申請(qǐng)日期1994年5月1日優(yōu)先權(quán)日1993年6月11日發(fā)明者艾文C·安格爾,托馬斯A·弗里茲,特里·馬斯安納格,瓦瑞德瑞簡·拉馬斯瓦米,大衛(wèi)·耶柔赫爾,吳冠禮申請(qǐng)人:ImaRx藥物公司